液相色谱质谱质谱仪LCMSMSSYSTEM

项目需求书

液相色谱/三重四极杆串联质谱联用仪（畜牧兽医局）

一、名称：液相色谱/三重四极杆串联质谱联用仪

二、用途：药代动力学、生物利用度、生物等效性、痕量化合物定量分析等

三、一般规格和要求：

3.1 仪器由计算机控制、配有API离子源。软件包括仪器调节、数据采集、数

据处理、定量分析和报告。

3.2 前后四极杆分析器均必须带有预过滤器和后过滤器。

3.3 根据数据自动进行MS 和MS/MS切换。

四、主要技术和性能规格要求

4.1*离子源和进样系统

4.1.1 大气压离子源是双正交设计，而且离子源和质谱间有隔断阀。

4.1.2 *大气压离子源包括电喷雾源(ESI)和大气压化学源(ApCI)

4.1.3*电喷雾源(ESI)和大气压化学源(ApCI)复合电离源ESCI源可选

4.2 真空系统

带有Edwards分子泵的差动抽气真空系统和前级机械泵，并有停电故障自动保护。

4.3 *光电倍增检测器

使用寿命十年，光电倍增器密封在真空玻璃内，满足长期大量脏样品定量分析的数据可靠性和重复性

4.4注射泵：可做直接质谱进样方式

4.5一年零备件

4.6电脑用于控制LC-MS/MS系统，包括LC-MS/MS仪器调节、数据采集、

数据处理、分析和报告。

4.7* 四极杆串联质谱仪性能指标

4.7.1 *质量范围: MS1及MS2：≥3,000amu

4.7.2 *分辨率：≥2.5M

4.7.3 质量数稳定性： PEG1000，1004.622±0.05Da

平均标准偏差≤0.05Da /24Hr

4.7.4 电喷雾灵敏度指标(相同绝对量，不同浓度下的灵敏度)：

*a) 绝对量5pg利血平，m/z609-195，信噪比≥2500:1(p/p)

*b)绝对量5pg 利血平，m/z609-195，信噪比≥1500:1(p/p)

*c)绝对量5pg利血平，m/z609-195，信噪比≥2500:1(p/p)

4.7.5 *正、负离子采集切换速率 <20 ms

4.7.6 *MRM扫描时间 <10 ms

4.7.8 *扫描速率5000 amu/s

4.7.9 质谱进样方式：自动，手动，注射泵三种

4.7.10 质谱采集方式：质心图，轮廓图，MCA（MS累加）图

4.8 超高效二元高压梯度系统

4.8.1 流速范围：10 μL/min to 2 mL/min， 0.001ml/min 为增量4.8.2 *流量精度：＜0.075%RSD

4.8.3 *最高操作压力：15000psi

4.8.4 *延迟体积：<120μL，不随反压变化

4.8.5 *六通道在线脱气机

4.8.6 混合方式：高压混合

4.8.7 流速准确度：±1.0%

4.8.9 梯度准确度：± 0.5%，不随反压变化

4.8.10 梯度精度：±0.15%，不随反压变化

4.8.11 温箱系统

4.8.12 控温范围：室温+5～65℃

4.8.13 控温精度：0.1℃

4.8.14柱容量： 3根

4.8.15 自动进样器：样品数量：48x2ml瓶、384孔板

4.8.16 *样品污染度：<0.005%

4.8.17 进样范围：0.1～50 μL

4.8.18 “针内针”样品探针

4.8.19 进样次数：每个样品1～99次进样

4.8.20 进样精度：≤0.3%RSD

4.8.21 进样线性度：>0.999

4.8.22 控温范围：4～40℃

4.9 软件：

4.9.1整套仪器全自动设置、优化、采集、处理、报告分析软件4.9.2定量分析软件

4.9.3整体控制液相色谱软件和相应接口

五、仪器工作条件

电源： 220V, 50Hz

环境温度：25 to 35oC

相对湿度：30% to 70%

六、数量：壹（套）台

高效液相色谱三级四极杆串联质谱联用仪（水产局）

一、仪器配置：

1.三级四极杆质谱仪(独立ESI和APCI源)

2.四元梯度液相色谱泵（在线真空脱气机）

3.自动进样器（具有样品冷却功能）

4.柱温箱

5.二极管阵列检测器

6.仪器全自动控制和数据处理软件

7.消耗品及零件

二、主要技术和性能规格要求

1.工作环境条件

1.1 工作电压：230V±10%

1.2 温度：15-27℃

1.3 适度：40-80%

2. 性能指标

2.1 质谱部分

2.1.1质量范围：30~3000m/z

2.1.2分辨率：优于0.4amu(FWHM)

2.1.3质量稳定性：≤±0.050D/24小时

2.1.4动态范围：>106

2.1.5 SRM离子对数：>300

2.1.6 MS/MS转换时间：<2ms

2.1.7扫描速度：5000amu/s

2.1.8灵敏度：

2.1.8.1 ESI：5pg利血平，分辨率<0.7Da，选择离子m/z 609/195，信噪比>500：1（峰峰值）。

2.1.8.1 APCI：5pg利血平，分辨率<0.7Da，选择离子m/z 609/195，信噪比>500：1（峰峰值）。

2.1.9大气压电离源：

2.1.9.1 独立的ESI和APCI源，即插即用。

2.1.9.2 增强电离源干燥设计，防止积液，降低背景噪音。

2.1.9.3 所有离子化探针的X、Y、Z三个方向位置可调，保证获得最优的灵敏度和耐用性。

2.1.9.4 具有真空锁定装置，便于清洗离子源，不需要破坏真空。

2.1.9.5 加热的离子毛细传输设计，N2消耗量最小，可使用氮气钢瓶。

2.1.9.6 ESI源：流程1ul~1ml/min，不需分流。

2.1.9.7 ACPI源：流程50ul~2ml/min，不需分流。

2.1.10三级四极杆质量分析器：

2.1.10.1三级双曲面四极杆系统，提高分辨率时，保证不影响离子的传输速率和灵敏度。

2.1.10.2 90度方形四极杆碰撞池，反转回零电压设计，保证零交叉污染，消除假阳性。

2.1.10.3 可编程控制碰撞能量和气体压力，保证全自动方法优化。

2.1.11 真空系统：四级差分真空系统，一个分子涡轮泵和机械泵

2.1.12 检测系统：后加速离轴转换打拿极电子检测器，±15kv电压快速切换

2.1.13 集成面板功能：蠕动进样系统和自动切换阀（脱盐阀）

2.1.14 数据处理方式：

2.1.14.1. 扫描功能：

2.1.14.1.1 一级谱全扫描（MS Full Scan）

2.1.14.1.2 选择反应监测（MS SRM Scan）

2.1.14.1.3 母离子扫描（Precursor Ion Scan）

2.1.14.1.4 子离子扫描（Product Ion Scan）

2.1.14.1.5 多道选择反应监测（MRM）

2.1.14.1.6 中性丢失扫描（Neutral Loss Scan）

2.1.14.1.7 高选择性反应监测（H-SRM）

2.1.14.1.8 数据定量定性相关扫描（QED-MS/MS）

2.1.14.1.9 碰撞能量归一化扫描（RER）

2.1.14.2. 软件功能

2.1.14.2.1 自动识别色谱流出物质的质谱图，并按照用户要求，进行离子化方式的自动和快速切换自动对某离子做MS/MS，以获得该离子的结构信息。

2.1.14.2.2.在共流物分析时，可自动分别获得共流物的二级质谱图，提供结构信息，提高选择性。

2.1.14.2.

3.当检测到使用者定义的同位素比例时，仪器自动执行MS/MS串联质谱分析

2.1.15数据系统：

2.1.15.1.MicrosoftXP操作系统

2.1.15.2. 数据处理和仪器控制软件，全模块控制各其他品牌LC系统

2.1.15.3 高通量一起调谐和优化直观用户界面所有仪器参数，包括碰撞气压力及碰撞能量全自动优化，最优化参数自动建立分析方法

2.1.15.4. 定量软件，支持法规21CFR Part 11

2.1.15.5 内置农药，兽药残留物谱库，并可以进行NIST Library谱库检索

2.2.液相色谱部分

2.2.1 溶剂输送泵

2.2.1.1 类型：四元梯度MS泵

2.2.1.2 保留时间精度：<0.1％（200ul/min时）

2.2.1.3 流速范围：0.01～1ml/min

2.2.1.4最高耐压：15000PSI

2.2.1.5溶剂数：4

2.2.1.6延迟体积：<80ul

2.2.1.7真空脱气机：四气路在线脱气机

2.2.2自动进样器

2.2.2.1 200位自动进样器

2.2.2.2 样品盘温度范围：0-60℃±0.5℃

2.2.2.3 柱温箱温度范围：5-95℃±0.5℃

2.2.3二极管阵列检测器

2.2.

3.1 波长范围：190~800nm

2.2.

3.2 检测池光程：5cm

2.2.

3.3 检测池体积：2uL

2.2.

3.4 噪音：±0.3╳10-5AU/cm(254nm)

液相色谱/三重四极杆串联质谱联用仪（农业局）

一、名称：液相色谱/三重四极杆串联质谱联用仪

二、用途：药代动力学、生物利用度、生物等效性、痕量化合物定量分析等

三、一般规格和要求：

3.1 仪器由计算机控制、配有API离子源。软件包括仪器调节、数据采集、数

据处理、定量分析和报告。

3.2 前后四极杆分析器均必须带有预过滤器和后过滤器。

3.3 根据数据自动进行MS 和MS/MS切换。

四、主要技术和性能规格要求

4.1 * 离子源和进样系统

4.1.1 大气压离子源是双正交设计，而且离子源和质谱间有隔断阀。

4.1.2 *大气压离子源包括电喷雾源(ESI)和大气压化学源(ApCI)

4.1.3*电喷雾源(ESI)和大气压化学源(ApCI)复合电离源ESCI源可选

4.2 真空系统

带有Edwards分子泵的差动抽气真空系统和前级机械泵，并有停电故障自动保护。

4.3 *光电倍增检测器

使用寿命十年，光电倍增器密封在真空玻璃内，满足长期大量脏样品定量分析的数据可靠性和重复性

4.4 注射泵：可做直接质谱进样方式

4.5 一年零备件

4.6 电脑用于控制LC-MS/MS系统，包括LC-MS/MS仪器调节、数据采集、

数据处理、分析和报告。

4.7 * 四极杆串联质谱仪性能指标

4.7.1 *质量范围: MS1及MS2：≥3,000amu

4.7.2 *分辨率：≥2.5M

4.7.3 质量数稳定性： PEG1000，1004.622±0.05Da

平均标准偏差≤0.05Da /24Hr

4.7.4 电喷雾灵敏度指标：5pg利血平，m/z609-195，信噪比

≥2500:1(p/p)

4.7.5 *正、负离子采集切换速率 <20 ms

4.7.6 *MRM扫描时间 <10 ms

4.7.8 *扫描速率5000 amu/s

4.7.9 质谱进样方式：自动，手动，注射泵三种

4.7.10 质谱采集方式：质心图，轮廓图，MCA（MS累加）图

4.8 超高效二元高压梯度系统

4.8.1流速范围：10 μL/min to 2 mL/min， 0.001ml/min 为增量

4.8.2 *流量精度：＜0.075%RSD

4.8.3 *最高操作压力：15000psi

4.8.4 *延迟体积：<120μL，不随反压变化

4.8.5 *六通道在线脱气机

4.8.6混合方式：高压混合

4.8.7流速准确度：±1.0%

4.8.9梯度准确度：± 0.5%，不随反压变化

4.8.10梯度精度：±0.15%，不随反压变化

4.8.11温箱系统

4.8.12控温范围：室温+5～65℃

4.8.13控温精度：0.1℃

4.8.14 柱容量： 3根

4.8.15自动进样器：样品数量：48x2ml瓶、384孔板

4.8.16 *样品污染度：<0.005%

4.8.17进样范围：0.1～50 L

4.8.18“针内针”样品探针

4.8.19进样次数：每个样品1～99次进样

4.8.20进样精度：≤0.3%RSD

4.8.21进样线性度：>0.999

4.8.22 控温范围：4～40℃

4.9 软件:

4.9.1 整套仪器全自动设置、优化、采集、处理、报告分析软件4.9.2 定量分析软件

4.9.3 整体控制液相色谱软件和相应接口

五、仪器工作条件

电源： 220V, 50Hz

环境温度：25 to 35oC

相对湿度：30% to 70%

六、技术服务

6.1 资料操作手册及维修手册

6.2 免费现场安装及提供操作培训及维护人员培训

6.3 免费提供技术咨询、软件升级

6.4 保修期1年，修期内上门维修

超高压液相色谱/三重四极杆串联质谱联用仪（农业科学院）

一、名称：超高压液相色谱/三重四极杆串联质谱联用仪

二、用途：兴奋剂、农兽药痕量化合物定量分析分析等

三、一般规格和要求：

3.1 仪器由计算机控制、配有API离子源。软件包括仪器调节、数据采集、数据处理、定量分析和报告。

3.2 前后四极杆分析器均必须带有预过滤器和后过滤器。

3.3 根据数据自动进行MS 和MS/MS切换。

四、主要技术和性能规格要求

4.1 * 离子源和进样系统

4.1.1 大气压离子源是双正交设计，而且离子源和质谱间有隔断阀。

4.1.2 *大气压离子源包括电喷雾源(ESI)和大气压化学源(ApCI)

4.1.3*电喷雾源(ESI)和大气压化学源(ApCI)复合电离源ESCI源可选

4.2 真空系统

带有Edwards分子泵的差动抽气真空系统和前级机械泵，并有停电故障自动保护。

4.3 *光电倍增检测器

使用寿命十年，光电倍增器密封在真空玻璃内，满足长期大量脏样品定量分析的数据可靠性和重复性

4.4 注射泵：可做直接质谱进样方式

4.5 一年零备件

4.6 电脑用于控制LC-MS/MS系统，包括LC-MS/MS仪器调节、数据采集、

数据处理、分析和报告。

4.7 *四极杆串联质谱仪性能指标

4.7.1 *质量范围: MS1及MS2： 3,000amu

4.7.2 *分辨率：≥2.5M

4.7.3 质量数稳定性： PEG1000，1004.622±0.05Da

平均标准偏差≤0.05Da /24Hr

4.7.4 电喷雾灵敏度指标(相同绝对量，不同浓度下的灵敏度)：*a) 绝对量5pg利血平，m/z609-195，信噪比≥3000:1(p/p) *b)绝对量5pg 利血平，m/z609-195，信噪比≥1500:1(p/p)

*c)绝对量5pg利血平，m/z609-195，信噪比≥2500:1(p/p) 4.7.5 *正、负离子采集切换速率 <20 ms

4.7.6 *MRM扫描时间 <10 ms

4.7.8 *扫描速率5000 amu/s

4.7.9 质谱进样方式：自动，手动，注射泵三种

4.7.10 质谱采集方式：质心图，轮廓图，MCA（MS累加）图

4.8 超高效二元高压梯度系统

4.8.1流速范围：10 μL/min to 2 mL/min， 0.001ml/min 为增量4.8.2 *流量精度：＜0.075%RSD

4.8.3 *最高操作压力：15000psi

4.8.4 *延迟体积：<120μL，不随反压变化

4.8.5 *六通道在线脱气机

4.8.6混合方式：高压混合

4.8.7流速准确度：±1.0%

4.8.9梯度准确度：± 0.5%，不随反压变化

4.8.10梯度精度：±0.15%，不随反压变化

4.8.11温箱系统

4.8.12控温范围：室温+5～65℃

4.8.13控温精度：0.1℃

4.8.14 柱容量： 3根

4.8.15自动进样器：样品数量：48x2ml瓶、384孔板

4.8.16 *样品污染度：<0.005%

4.8.17进样范围：0.1～50 L

4.8.18“针内针”样品探针

4.8.19进样次数：每个样品1～99次进样

4.8.20进样精度：≤0.3%RSD

4.8.21进样线性度：>0.999

4.8.22 控温范围：4～40℃

4.9 软件:

4.9.1 整套仪器全自动设置、优化、采集、处理、报告分析软件

4.9.2 定量分析软件

4.9.3 整体控制液相色谱软件和相应接口

4.9.4 复杂混合物分析筛查软件

4.9.5 目标化合物筛选软件

五、仪器工作条件

电源： 220V, 50Hz

环境温度：25 to 35oC

相对湿度：30% to 70%

六、技术服务

6.1 资料操作手册及维修手册

6.2 免费现场安装及提供操作培训及维护人员培训

6.3 免费提供技术咨询、软件升级

6.4 保修期1年，修期内上门维修

6.5 奥运会及其残奥会期间24小时技术支持。

6.6 免费提供奥运会指定37种兴奋剂等检测项目的测定方法，仪器安装调试后一周内将方法在仪器上实现。

6.7 仪器必须在两周内到货。

七、附属设备

1.标准品

LC/MS/MS配套应用，电阻率：18.2MΩ.cm25℃；总有机碳：5～10 PPb；热源含量：0.001Eu/ml；颗粒物：＜0.22um,＜1/ml；微生物：＜

1cfu/ml；产水量：1.5 L/min。

3.液氮罐 1台，氩气钢瓶 2台

液氮罐容量： 170升；氩气钢瓶：普通。

4.多头磁力搅拌器 1台

磁力加热搅拌器，可在密闭的容器中进行调混工作，并且搅拌子耐高温、耐磨、耐化学腐蚀、磁性强。五头以上，可控温。加热功率不小于800W，搅拌容量：20-2000ml*10；转速：0-2000rpm；无极调速，可单独搅拌；

5.匀浆仪 1台

转速0－22000rpm,定时0－60min，电机功率185－200W。不锈钢杯式（不带把手）。

6.计算机液晶显示器打印机

处理器：Intel Core2 Quad Q6600 2.4G以上，酷睿2四核，2400MHz；硬盘500G；显示器：液晶宽屏，24英寸；显卡1G， DDR2；双光驱,16X DVD光驱,DVD±RW；彩色激光打印机，1200*600dpidpi。

7.旋转蒸发仪 2台

立式冷凝系统，旋钮调节转速：20--270rpm；温度数显调控水/油两用加热浴：+20~180℃；蒸发速率：1200mlH2O/h；控温精度：±1℃。

二级隔膜泵：抽气率1.7-2.0m3/h，真空度9mbar；无油,防腐蚀,耐有机物，无废水产生，低噪音；制冷循环水浴，液晶数显，-20度--+40度，温控精度: 0.5度，泵速输出率：10l/min。

8.固相萃取仪 2套

24个样品同时处理；一体化透明玻璃收集器；独立活塞开关，真空阀、表可方便调节流速，使萃取高效重现；内置导流管及废液槽，便于收集废液，免除清洗玻璃槽繁杂；真空泵。

9.分液漏斗振荡仪 1台

振荡方式：垂直或倾斜振荡；垂直振荡：200rpm ；倾斜振荡，0～20o可调；振荡速度： 20～300次/分钟；振幅：40mm ；分液漏斗夹具适用范围：标准型夹具：50～1000mL 大型夹具：50～3000mL。

10.超低温冰箱 1台

-60℃ 728L 立式。

11.冷冻离心机 1台

适用于微量样品快速分离合成。最高转速16000r/min 离心力17000g 容量1.5mlХ12 定时0-60min 噪声小于70db 功率大于250w。

气相色谱-串联质谱仪操作规程

气相色谱-串联质谱仪操作规程

气相色谱-串联质谱仪(TSQ 8000 EVO)操作规程 1、开机 1.1 打开钢瓶氦气气源，使输出压力约为0.5Mpa；打开钢瓶氩气气源，使输出压力约为0.1-0.2 Mpa。 1.2 打开GC的总电源开关，设定载气流速，保证有载气通过色谱柱。 1.3 打开TSQ 8000总电源，观察前面板上的指示灯显示，此时Power 为绿色，Vacuum 和heaters为橙色，Busy为蓝色。 1.4 打开TSQ 8000 DashBoard，在Instrument Control中设置离子源温度和传输线温度。 5. 观察指示灯的颜色，待真空指示灯和加热指示灯由橙色变为绿色时，仪器即可以开始使用。 2、质谱调谐 仪器的真空度正常，离子源、进样口和质谱传输线温度稳定后，做质谱调谐： 2.1 打开TSQ 8000 Dashboard，选择Auto Tune。 2.2 选择调谐方式，点击Start。 3、AutoSRM 建立方法 3.1 打开TSQ 8000 Dashboard，选择AutoSRM。 3.2 选择新建AutoSRM，模式中选择优化母离子模式，输入化合物的名称及样品瓶的位置，保存并命名此AutoSRM。之后点击运行AutoSRM 的优化母离子模式。 3.3 数据采集结束后，在采集的数据中提取目标化合物的特征离子，找到合适的目标峰后，在右边的对话框中选择强度高的母离子，将母离子添加到做母离子全扫的列表中。

3.4所有化合物的母离子选择好之后，进入到子离子优化步骤。在模式中选择子离子优化模式，保存后点击运行样品。 3.5 数据采集结束后，选择强度高的子离子添加到列表中，点击，进入到SRM优化步骤。选择Full Range以步长为5V来优化碰撞能量；或者选择Targeted以步长为2V来优化碰撞能量。保存后点击运行样品。 3.6 数据采集结束后，选择强度最高的碰撞能量，点击加入到右边的列表中，所有SRM离子对优化完成后，将SRM列表导出成csv格式的表格，直接导入方法中使用。 4、TraceFinder 数据处理 4.1 打开现有的仪器方法，在TSQ8000子目录下，选择Create compound data store export file。 4.2 点击Create Export File，将方法中的SRM列表保存成xml的格式。 4.3 打开Trace Finder，在Configuration目录中点击import compound，导入上一步保存的xml表格。导入后在File的下拉菜单中选择Save Compound Datastore，完成自建CDS数据库过程。 4.4 打开TraceFinder，选择 Method Development这个目录，选择Create method建立进样方法及数据处理方法。 4.5 在Analysis 目录下，点击new batch 建立batch，选择相应的Master Method，选择要做数据处理或者进样的文件，输入样品瓶的位置，保存这个batch，然后Sumbit，运行单个样品或多个样品。可以选择进样，做数据处理或者出报告。 4.6在Analysis 中选择Data Review，可以查看数据结果。 4.7在Analysis 中选择Report Review，可以查看报告结果。 5、关机

液相色谱-串联质谱法

消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星测定?液相色谱-串联质谱法 Determination of clobetasol propionate and levofloxacin hydrochloride in disinfection product - LC-MS-MS method 1 范围 本方法规定了膏霜类消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星残留量液相色谱-串联质谱测定方法。 本方法适用于膏霜类消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星残留量的测定。 取样量为0.1g时，本方法对丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星的检出限见表1。 表1 丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星的检出限、保留时间和特征离子 中文名称英文名称 检出限 （μg/g） 保留时 间（min） 特征离子(m/z) 丙酸氯倍他索Clobetasol propionate 0.009 7.83 467.0/355.2/373.4 盐酸左氧氟沙星Levofloxacin hydrochloride 0.06 1.11 362.0/260.9/318.2 2 规范性引用文件 3 原理 试样中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星用甲醇提取，提取液经0.45μm滤膜过滤，用C18柱分离后，用液相色谱-串联质谱仪测定，正离子扫描，离子对定性，峰面积定量。 4 试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为不含有机物的纯水，纯水中干扰物的浓度需低于方法中待测物的检出限。 4.1甲醇：农药残留级。 4.2乙腈：农药残留级。 4.3甲酸：分析纯。

4.4标准品：丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星均购自中国药品生物制品检定所，纯度≥99.8%。 4.5标准溶液：准确称取丙酸氯倍他索适量，用乙腈－水（1：1）配制成100μg/mL 的标准贮备液。准确称取盐酸左氧氟沙星适量，用纯水配制成100μg/mL的标准贮备液。准确量取上述标准贮备溶液适量，用乙腈稀释配制成浓度为10.0μg/mL 的混合标准中间溶液，将标准中间溶液转移到安瓿瓶中于4 C保存。临用前，再根据需要用甲醇配制成不同浓度的标准使用溶液。 4.6甲酸溶液(0.2%，v/v)：量取2mL甲酸，用纯水定容至1000mL。 4.7 0.45μm滤膜。 5 仪器 5.1 液相色谱-串联质谱联用仪：HP1100高效液相色谱仪(Agilent) - API 4000质谱仪(Applied Biosystems) ，电喷雾离子化源(ESIMS，NI/PI模式)。 5.2 分析天平：感量0.1mg和0.001g。 5.3实验室纯水机：Barnstead纯水机。 5.4涡旋振荡器：Scientific Industries 涡旋振荡器。 5.5 具塞试管：10mL。 6 试样的制备与保存 6.1 试样的制备 取有代表性样品5g，搅拌均匀，制成实验室样品。 6.2 试样保存 制备好的试样置于室温保存。 7 测定步骤 7.1样品前处理 称取0.1g~0.2g样品(精确到0.001 g) ，置于10mL试管中，加入3.00mL甲醇溶液，涡旋振摇使样品分散后，超声振荡10min。静置，吸取上清液经滤膜（4.7）过滤后，供液相色谱-串联质谱测定。

气相色谱-质谱(GC-MS)

气相色谱-质谱（GC-MS）分离分析空气清新剂 一、实验目的 在日常生活中，许多形形色色的生活用品其实都添加了不少化学药品。 这其中不乏有毒的物质，不知实情的我们还天天接触着这些东西。这学 期的现代仪器分析实验中正好有机会能让我们自选仪器来进行开放实验，鉴于我们小组组长贺大威寝室有用空气清新剂的习惯，为了他们寝室所 有人的健康，就打算测一下它们常用几种品牌的空气清新剂的组成分析。 并且选定用气相色谱-质谱联用仪来进行测定分析。虽然上学期我们用同 样的仪器分离分析过苯系物的组成，但大家还是对这台仪器的工作原理 似懂非懂，并且在操作上同学们根本没锻炼过，基本是不知道怎么使用 这台仪器。与此同时我们又能深入了解气相色谱-质谱联用仪的基本构造，熟悉工作软件的使用，熟悉运用GC-MS仪分析简单样品的基本过程。 二、实验原理 气相色谱法是利用不同物质在固定相和流动相中的分配系数不同，使不同化合物从色谱柱流出的时间不同，达到分离化合物的目的。质谱法是利用带电粒子在磁场或电场中的运动规律，按其质荷比（m/z）实现分离分析，测定离子质量及强度分布。它可以给出化合物的分子量、元素组成、分子式和分子结构信息，具有定性专属性、灵敏度高、检测快速等特点。 气相色谱-质谱联用仪兼备了色谱的高分离能力和质谱的强定性能力，可以把气相色谱理解为质谱的进样系统，把质谱理解为气相色谱的检测器。气相色谱-质谱联用仪的基本构成为： 样品

本实验中待分析样品为超市里新买的两种气味的空气清新剂和一盒放置已久的空气清新剂，每种样品经GC 分离成一个一个单一组份，并进入离子源，在离子源样品分子被电离成离子，离子经过质量分析器之后即按m/z 顺序排列成谱。经检测器检测后得到质谱，计算机采集并储存质谱，经过适当处理可得到样品的色谱图、质谱图等。 三、仪器和试剂： （1）Agilent 6890-5973N GC-MS 仪（安捷伦科技有限公司）； （2）HP-5 MS 色谱柱； （3）0-5mL 移液器 (Transferpette, 德国BRAND 公司)； （4）0.45μm 的有机相微孔膜过滤器； （5）新买的和放置已久的茉莉香味空气清新剂各一盒；以及新买的金秋丹桂味空气清新剂一盒，甲醇（色谱纯）； （6）装样瓶 四、实验内容与步骤： 1）将每种样品切一小块后分别装入样品瓶里； 2）在进样之前，用加热器预加热样品； 3）设定好GC-MS 操作参数后，可进样分析： 4）设置样品信息及数据文件保存路径后，按下“Start run ”键，待“Pre-run ”结束，系统提示可以进样时，使用10μl 进样针准确吸取5μl 样品气体（不能有气泡）。将进样针插入进样口底部，快速推出样品气体并迅速拔出进样针，然后按下色谱仪操作面板上的“start ”按钮，分析开始。 五、色谱条件 进样口温度：250℃； 质谱离子源温度：230℃； 色质传输线温度：250℃； 质谱四极杆温度：150℃； 柱温： 20C/min 5C/min 60C(2min)100C 120C(3min)???????→????→? 载气流速： 0.5ml ·min -1； 进样量：1μl ； 分流比：20:1。 溶剂延迟：2分钟 六、数据处理 1） 对得到的总离子流色谱图（TIC ），在不同保留时间处双击鼠标右

2015年版药典高效液相色谱法、质谱法.doc

2015 年版药典高效液相色谱法、质谱法

2015 版药典 --- 高效液相色谱法、质谱法 0512 高效液相色谱法 高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。 注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处 理色谱信号。 1.对仪器的一般要求和色谱条件 高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。色谱柱内径一般为 3.9 ～ 4.6mm，填充剂粒径为 3～lOμm。超高效液相色谱仪是适应小粒径（约 2μm）填充剂的耐超高压、小进样量、低死体积、高灵敏度检测的高效液相色谱仪。 （1）色谱柱 反相色谱柱：以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物 等；常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。 正相色谱柱：用硅胶填充剂，或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱。常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰 基键合硅胶等。氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可用作反相色谱。 离子交换色谱柱：用离子交换填充剂填充而成的色谱柱。有阳离子交换色谱柱和阴离子交换色谱柱。 手性分离色谱柱：用手性填充剂填充而成的色谱柱。 色谱柱的内径与长度，填充剂的形状、粒径与粒径分布、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、载体表面基团残 留量，填充的致密与均匀程度等均影响色谱柱的性能，应根据被分离物质的性质来选择合适的色谱柱。 温度会影响分离效果，品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温，应注意室温变化的影响。为改善分离效果可适当 提高色谱柱的温度，但一般不宜超过 60℃。 残余硅羟基未封闭的硅胶色谱柱，流动相 pH 值一般应在 2～8 之间。残余硅羟基已封闭的硅胶、聚合物复合硅胶或聚 合物色谱柱可耐受更广泛 pH值的流动相，适合于 pH 值小于 2 或大于 8 的流动相。 （2）检测器最常用的检测器为紫外 - 可见分光检测器，包括二极管阵列检测器，其他常见的检测器有荧光检测器、 蒸发光散射检测器、示差折光检测器、电化学检测器和质谱检测器等。 紫外- 可见分光检测器、荧光检测器、电化学检测器为选择性检测器，其响应值不仅与被测物质的量有关，还与 其结构有关；蒸发光散射检测器和示差折光检测器为通用检测器，对所有物质均有响应，结构相似的物质在蒸发光散射 检测器的响应值几乎仅与被测物质的量有关。 紫外 - 可见分光检测器、荧光检测器、电化学检测器和示差折光检测器的响应值与被测物质的量在一定范围内呈 线性关系，但蒸发光散射检测器的响应值与被测物质的量通常呈指数关系，一般需经对数转换。 不同的检测器，对流动相的要求不同。紫外 - 可见分光检测器所用流动相应符合紫外 - 可见分光光度法（通则 0401）项下对溶剂的要求；采用低波长检测时，还应考虑有机溶剂的截止使用波长，并选用色谱级有机溶剂。蒸发光散射检测 器和质谱检测器不得使用含不挥发性盐的流动相。 （3）流动相反相色谱系统的流动相常用甲醇 - 水系统和乙腈 - 水系统，用紫外末端波长检测时，宜选用乙腈 - 水系统。流动相中应尽可能不用缓冲盐，如需用时，应尽可能使用低浓度缓冲盐。用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱时，流动 相中有机溶剂一般不低于 5%，否则易导致柱效下降、色谱系统不稳定。

液相色谱串联质谱的小知识

一、开机 water 2695/micromass zq4000: 开机步骤 1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源，此时质谱主机内置的CPU会通过网线与计算机主机建立通讯联系，这个时间大约需要1至2分钟。 2. 等液相色谱通过自检后，进入Idle状态，依照液相色谱操作程序，依次进行操作。（具体根据液相色谱不同型号来执行，下面以2695为例）。 a.打开脱气机 (Degasser On)。 b.湿灌注(Wet Prime)。 c.Purge Injector。 d.平衡色谱柱。 3.双击桌面上的 MassLynx 4.0图标进入质谱软件。 4.检查机械泵的油的状态（每星期），如果发现浑浊、缺油等状况，或者已经累积运行超过3000小时，请及时更换机械泵油。 5.点击质谱调谐图标（MS Tune）进入质谱调谐窗口。 6.选择菜单“Options –Pump”，这时机械泵将开始工作，同时分子涡轮泵会开始抽真空。几分钟后，ZQ就会达到真空要求，ZQ前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。 7.点击真空状态图标，检查真空规的状态，以确认真空达到要求。 8. 确认氮气气源输出已经打开，气体输出压力为90 psi。 9.设置源温度（Source Temp）到目标温度。 关机 1．点击质谱调谐图标进入调谐窗口。 2.点击Standby 让MS 进入待机状态时，这时状态灯会由绿变红，这一过程是关质谱高电压的过程。 3．停止液相色谱流速，如果还需要冲洗色谱柱，可以将液相色谱管路从质谱移开到废液瓶。4．等脱溶剂气温度（ESI）或APCI探头温度降到常温，点击气体图标关闭氮气。 5．逆时针方向拧开机械泵上的Gas Ballast 阀，运行20分钟后关闭（镇气）。 a) 对于ESI源，至少每星期做一次。 b) 对于APCI源，每天做一次。 6．再次确认机械泵的Ballast阀是否已经关闭。 7．选择Option / Vent，这时质谱开始泄真空，ZQ 前面板的状态灯“Vacuum”开始闪烁，几分钟后机械泵会停止运行，这时可以关闭质谱电源。 FINNIGEN DECA 开关机及校正流程—— 1开机前准备事项 （1）确保质谱总电源开关（白色开关）及主板电源开关（黑色开关）处于关闭状态（O）； （2）检查真空泵油液面，确保泵内油页面处于标定的上下两线之间； （3）查看离子源洁净程度，ESI源查看喷口是否有固体析出，毛细管口是否完好；APCI喷口是否有积液； （4）气体压力，打开高纯氮气钢瓶总阀，调节出口压力调至0.65MPa，打开高纯氦气钢瓶总阀,调节出口压力调至0.25Mpa; （5）检查壳气及辅助气接口连接紧固，松开液相管路与离子源的接口； （6）开启动力电源，电压稳定，正常；

气相色谱质谱联用仪技术指标(新)

气相色谱/质谱联用仪技术指标 1.2温度：操作环境15?C～35?C 1.3 湿度：操作状态25～50%，非操作状态5～95% 2.性能指标 2.1质谱检测器 2.1.1具有网络通讯功能，可实现远程操作。结构紧凑，无需冷却水及压缩空气冷却。 2.1.2*侧开式面板，无须取下质谱仪机盖即可进行维护。玻璃窗口可显示离子源类 型，灯丝运行情况和离子源连接状态。需提供彩页证明文件。 2.1.3质量数范围：2-1000amu，以0.1amu递增

2.1.4分辨率：单位质量数分辨 2.1.5质量轴稳定性: 优于0.10amu/48小时 2.1.6灵敏度： EI：全扫描灵敏度（电子轰击源EI）：1pg八氟萘（OFN）,信/噪比≥ 1400：1 (扫描范围: 50-300amu) 2.1.7*仪器检出限IDL：10fg八氟萘。并提供三份以上现场安装验收报告。 2.1.8最大扫描速率：大于19,000amu/秒 2.1.9动态范围：全动态范围为106 2.1.10选择离子模式检测（SIM）最多可有100组，每组最多可选择60个离子 2.1.11质谱工作站可根据全扫描得到的数据，自动选择目标化合物的特征离子并对其进 行分组，最后保存到分析方法当中，无须手动输入。（AutoSIM） 2.1.12具有全扫描/选择离子检测同时采集功能 2.1.13两根长效灯丝的高效电子轰击源，采用完全惰性的材料制成 2.1.14*离子化能量：5～241.5eV 2.1.15离子化电流：0～315uA 2.1.16离子源温度：独立控温，150～350?C可调 2.1.17*分析器：整体石英镀金双曲面四极杆，独立温控, 106?C ～200?C。非预四极杆 加热。需提供彩页等证明文件。 2.1.18质量分析器前有T-K保护透镜。 2.1.19检测器：三维离轴，检测器。长效高能量电子倍增器 2.1.20真空系统：250升/秒以上分子涡轮泵 2.1.21气质接口温度: 独立控温，100～350℃ 2.1.22TID 痕量离子检测技术，在数据采集的过程中优化信号。 2.1.23自动归一化调谐。 2.1.24EI源可以采用氢气做为载气，CI源可以采用氨气替代甲烷气。 2.1.25具备早期维护预报功能（EMF） 2.1.26可提供质量认证功能（OQ/PV） 2.2 气相色谱仪 2.2.1 主机 2.2.1.1 电子流量控制（EPC）：所有流量、压力均可以电子控制，以提高重现性，配有13路电子流量控制； 2.2.1.2 压力调节：0.001psi。 2.2.1.3 大气压力传感器补偿高度或环境变化； 2.2.1.4 程序升压/升流：3阶；

高效液相色谱质谱联用HPLC

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 高效液相色谱质谱联用HPLC .液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）的各种模式探索一、实验目的1、了解 LC-MS 的主要构造和基本原理； 2、学习 LC-MS 的基本操作方法； 3、掌握 LC-MS 的六种操作模式的特点及应用。 二、实验原理 1、液质基本原理及模式介绍液相色谱 - 质谱法（ Liquid Chromatography/Mass Spectrometry ， LCMS）将应用范围极广的分离方法——液相色谱法与灵敏、专属、能提供分子量和结构信息的质谱法结合起来，必然成为一种重要的现代分离分析技术。 但是，LC 是液相分离技术，而 MS 是在真空条件下工作的方法，因而难以相互匹配。 LC-MS 经过了约 30 年的发展，直至采用了大气压离子化技术（Atmospheric pressure ionization，API）之后，才发展成为可常规应用的重要分离分析方法。 现在，在生物、医药、化工、农业和环境等各个领域中均得到了广泛的应用，在组合化学、蛋白质组学和代谢组学的研究工作中，LC-MS 已经成为最重要研究方法之一。 质谱仪作为整套仪器中最重要的部分，其常规分析模式有全扫描模式（Scan）、选择离子监测模式（SIM）。 （一）全扫描模式方式（Scan）：最常用的扫描方式之一，扫描的质量范围覆盖被测化合物的分子离子和碎片离子的质量，得到的是 1/ 13

高效液相色谱-串联质谱法

附件 面膜类化妆品中氟轻松检测方法 （高效液相色谱-串联质谱法） 1范围 本方法规定了面膜类化妆品中氟轻松的高效液相色谱-串联质谱测定方法。 本方法适用于面膜类化妆品中氟轻松的定性定量测定。 2方法提要 面膜类化妆品用饱和氯化钠溶液分散，用乙腈从分散液中提取氟轻松，用亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀提取液中大分子基质，经固相萃取小柱净化，用高效液相色谱仪分离，质谱检测器检测，采用保留时间和特征离子对丰度比定性，以待测物质相对应离子峰面积定量，以标准曲线法计算含量。 本方法的检出限为0.03 μg/g，定量限为0.05 μg/g。 3试剂和材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为纯化水。 3.1甲醇：色谱纯。 3.2乙腈：色谱纯。 3.3冰醋酸：优级纯。 3.4饱和氯化钠溶液。 3.5 10%亚铁氰化钾溶液：称取115 g亚铁氰化钾K4Fe(CN)6·3H2O固体，

用水溶解定容至1000 mL。 3.6 20%乙酸锌溶液：称取239 g乙酸锌C4H6O4Zn·2H2O固体，用水溶解定容至1000 mL。 3.7Oasis HLB固相萃取小柱或相当者：60 mg，3 mL。 3.8 标准物质：氟轻松，纯度不小于99.0%；标准物质的分子式、相对分子质量、CAS登录号、化学结构图参见附录A。 3.9 标准储备液（ρ=1g/L）：准确称取氟轻松标准物质（3.8）10mg，精确到0.01 mg，置于10 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，于－18℃下冷冻保存。 3.10 标准工作溶液：临用时，取标准储备液（3.9）适量，用乙腈稀释成0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.40μg/mL、0.80μg/mL系列浓度的标准工作溶液。 4仪器和设备 4.1 高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪（ESI源）。 4.2 分析天平：感量0.0001g；0.00001g。 4.3 涡旋混合器。 4.4离心机：转速5000r/min，容量10mL；50mL。 4.5 固相萃取装置。 5分析步骤 5.1样品处理 5.1.1提取 称取样品（带有载体的面膜，去除载体后取样）0.2 g，精确至0.0001 g，置15 mL具塞离心管中，加入3 mL饱和氯化钠溶液（3.4），于涡旋混合器上混合使样品分散，准确加入2 mL乙腈，充分涡旋提取2 min，以

AgilentBC气相色谱质谱联用仪操作规程

1. 开机 1）打开载气钢瓶控制阀，设置分压阀压力至 0.5Mpa 。 2 ) 打开计算机，登录进入 Windows 7 系统。 3）打开 7000C（若 MSD真空腔内已无负压则应在打开 MSD电源的同时用手向右侧推真空腔的侧板直至侧面板被紧固地吸牢），等待仪器自检完毕。 4）桌面双击 GC-MS 图标，进入 MSD 化学工作站 5）在上图仪器控制界面下，单击视图菜单，选择调谐及真空控制进入调谐与真空控制界面 , 在真空菜单中选择真空状态，观察真空泵运行状态，此仪器真空泵配置为分子涡轮泵，状态显示涡轮泵转速涡轮泵转速应很快达到 100 % ，否则，说明系统有漏气，应检查侧板是否压正、放空阀是否拧紧、柱子是否接好。 2. 调谐 调谐应在仪器至少开机 2 个小时后方可进行，若仪器长时间未开机为得到好的调谐结果将时间延长至 4 小时。 1）首先确认打印机已连好并处于联机状态。 2 ) 在操作系统桌面双击 7000C 图标进入工作站系统。 3）在上图仪器控制界面下，单击仪器菜单，选择MS调谐进入调谐与真空控制界面。 4 ) 进行自动调谐 , 调谐结果自动打印。 5 ) 如果要手动保存或另存调谐参数，将调谐文件保存到 atune.u 中。 6 ) 然后点击视图然后选择仪器控制返回到仪器控制界面。注意 : 自动调谐文件名为 ATUNE.U 标准谱图调谐文件名为 STUNE.U 其余调谐方式有各自的文件名 . 3. 样品测定 3.1 方法建立 1 ） 7890B配置编辑 点击仪器菜单 , 选择编辑 GC 配置进入画面。在连接画面下，单击【仪器】【GC 参数】，设置ALS，进样口，色谱柱，柱温箱参数。 2）分流不分流进样口参数设定,点击【仪器】【GC参数】在空白框内输入进样口的温度为250℃，选择隔垫吹扫流量模式标准，输入隔垫吹扫流量为 3ml/min 。对于特

高效液相色谱 质谱联用技术的应用

高效液相色谱质谱联用技术的应用 高效液相色谱(HPLC或LC)是以液体溶剂作为流动相的色谱技术，一般在室温下操作，可以直接分析不挥发性化合物、极性化合物和大分子化合物（包括蛋白、多肽、多糖、多聚物等)，分析范围广，而且不需衍生化步骤。质谱是强有力的结构解析工具，能为结构定性提供较多的信息，是理想的色谱检测器，不仅特异，而且具有极高的检测灵敏度。串联质谱（MS/MS）是将一个质量选择的操作接到另一个质量选择的后面，在单极质谱给出化合物相对分子量的信息后，对准分子离子进行多极裂解，进而获得丰富的化合物碎片信息，确认目标化合物，对目标化合物定量等。［1］ 高效液相色谱一质谱(HPLC—MS)联用技术是近几年来发展起来的一项新的分离分析技术，将HPLC 对复杂样品的高分离能力，与MS具有高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的优点结合起来，在药物分析、环境分析等许多领域得到了广泛的应用。［2］ 本文着重讲述液相色谱质谱联用仪在药物分析、环境分析上的应用。 1液相色谱质谱联用在药学分析上的应用 1.1LC/MS在药物代谢中的应用 Lee等［3］总结了利用LC／MS鉴定药物代谢产物的方法，主要包括以下几个步骤：测定原形药物的质谱；选择准分子离子、加合离子和主要的碎片离子进行多级质谱分析；选择原形药物的主要中性丢失，测定生物样品的中性丢失谱，图谱中的离子即为原形药物和可能的代谢物的分子离子；选择主要的子离子测定生物样品的母离子谱，所得母离子即为各个代谢物；测定生物样品中所有可能代谢物的子离子谱，解谱得到代谢物的结构。 王宁生等［4］以LC／MS联用技术及标准品对照法，分离检测健康志愿者口服复方丹参滴丸后，血清中水溶性成分及代谢产物，从一级质谱的分子离子峰推测，丹参素及原儿茶醛在体内分别与硫酸及葡萄糖醛酸结合，产生丹参素硫酸结合物及原儿茶醛的葡糖醛酸结合物。 Hsiu SL等［5］研究芍药苷在小鼠体内药代动力学，用LC／MS方法检测体内药物浓度，未检测到芍药苷原形药物；但在血浆及各种排泄物中，均可检测其代谢物，经液相色谱一质谱分析，结合核磁共振(NMR)，确定其为芍药苷的脱糖基代谢物，提示芍药苷给药后，在肠道经细菌转化为PG后，被吸收进入血液循环中发挥作用。 Chen SJ等［6］用LC／DAD／MS／MS联用技术，对山豆根碱在小鼠体内的代谢进行了研究，用ESI ／MSn技术检测山豆根碱的代谢物，并鉴定其主要代谢物为N一去甲基山豆根碱。 1.2LC/MS在药学浓度上的应用 M．Brolis等［7］采用I-IPLC—DAD—MS法从贯叶金丝桃Hyoericum performm中分离鉴定出槲皮素、异槲皮素、金丝桃苷等成分。 Gerthard Brillgma等［8］采用HPLC—NMR和HPLC—ESI—MS—MS法对Habropetalum dawei进行分析，分离鉴定出dioneopeltine、N-methyldioncophylline、N-methyl-7-epi-dioncophylline、tetralone、(1R，3R)和(1S，3R)-N-formyl-8-hydroxy-6-methoxy-l,3-dimthyltetra-hydroisoquinoline等7个已知化合物，以及5’-O-methydioncopeltine、isoquinoline phylline 2个新化合物。 徐智秀等［9］以反相高效液相色谱法分离了9种人参皂苷（I）, 利用三级四级杆质谱研究了9种I的一级质谱（主要给出相对分子质量信息）和二级质谱（提供碎片结构信息），通过它们的质谱图差异对其进行了鉴别, 并将方法用于实际样品中的9种I的定性。 郭继芬等［10］选用Discovery C18柱，以甲醇-水-甲酸(40:60:0.025)为流动相，经紫外检测后，在ESI- 扫描方式下，对HPLC—UV图谱中各色谱峰进行一级和二级质谱分析，与对照品比较鉴定了提取物中4个已知的黄酮类化合物，推断出3个未知黄酮苷类化合物可能的结构。 2液相色谱质谱联用在环境分析上的应用 1

液相色谱串联质谱联用技术-实验指导(许煊炜)

液相色谱串联质谱联用仪检测技术 实验指导 （2014、2015级） 课程内容（一个实验8学时）： （1）AB Sciex Qtrap 4500 三重四级杆/离子阱液相色谱串联质谱联用仪的结构原理、操作及定性定量应用。 （2）利用液相色谱串联质谱联用仪快速测定水果中7种农药的残留量。 吉林农业大学农业部参茸质检中心 2017.03

实验一AB Sciex Qtrap 4500 三重四级杆/离子阱液相色谱串联质谱联用仪的结构原理、操作及定性定量应用 一.实验目的和意义 通过学习液质联用仪的构成和使用方法，及其在定性、定量分析中的应用，培养学生使用液质联用仪进行仪器分析的能力，并培养学生严谨的科学态度、细致的工作作风、实事求是的数据报告和良好的实验习惯（准备充分、操作规范，记录简明，台面整洁、实验有序，良好的环保和公德意识）。培养培养学生的动手能力、理论联系实际的能力、统筹思维能力、创新能力、独立分析解决实际问题的能力、查阅手册资料并运用其数据资料的能力以及归纳总结的能力等。 （一）检测仪器 1、仪器名称高效液相色谱串联质谱联用仪（简称LC-MS-MS）。型号：4500 QTRAP（美国Applied Biosystems公司）。 2、仪器组成液相色谱部分：岛津LC-30A，配有在线脱气机、超高压二元泵、自动进样器；串联质谱部分：QTRAP4500，配有ESI离子源、串联四级杆/线性离子阱。 3、主要性能指标离子化方式：ESI电离质量范围：（5 ~ 1700）amu 分辨率：> 6900 质量稳定性：0.1 amu/12h 灵敏度：1pg reserpine, ESI+, MRM扫描（m/z : 609/195），信噪比S/N > 120:1 扫描速度：4000 amu/sec 质量准确度：< 0.01%（全质量数范围） 4、方法原理高效液相色谱二元泵将流动相泵人系统并混合，自动进样器将待测样品注入流动相中，随流动相进入色谱柱，由于样品不同组分在色谱柱中保留时间不同，各组分被分开，依次进入离子源。在离子源中，各组分以ESI或APCI方式电离，被加速后进入质量分析器。4500QTRAP 的质量分析器主要由Q1、Q2、Q3三组四级杆串联组成。Q1可将分子离子按质荷比（m/z）大小分开；Q2是碰撞室，可将母离子进一步破碎为碎片离子；Q3具有四级杆和线性离子阱两种功能，作为四级杆时可将分子离子或碎片离子按质荷比大小分开，作为离子阱还可富集离子从而提高检测灵敏度。各组分的不同离子在质量分析器中被破碎、分离，并按质荷比大小依次抵达监测器，经记录即得到按不同质荷比排列的离子质谱图。4500QTRAP通过串联四级杆/线性离子阱两种不同质谱技术的结合，可以在单次分析中对复杂样本中的单个成分同时进行定性和定量，也可以对多个化合物进行定量分析。整台仪器的控制、数据采集、数据处理、结果输出均由PC计算机Windows操作系统支持下的Analyst软件控制完成。

气相色谱-串联质谱仪操作规程

气相色谱-串联质谱仪(TSQ 8000 EVO)操作规程 1、开机 1.1 打开钢瓶氦气气源，使输出压力约为0.5Mpa；打开钢瓶氩气气源，使输出压力约为0.1-0.2 Mpa。 1.2 打开GC的总电源开关，设定载气流速，保证有载气通过色谱柱。 1.3 打开TSQ 8000总电源，观察前面板上的指示灯显示，此时Power 为绿色，Vacuum 和heaters为橙色，Busy为蓝色。 1.4 打开TSQ 8000 DashBoard，在Instrument Control中设置离子源温度和传输线温度。 5. 观察指示灯的颜色，待真空指示灯和加热指示灯由橙色变为绿色时，仪器即可以开始使用。 2、质谱调谐 仪器的真空度正常，离子源、进样口和质谱传输线温度稳定后，做质谱调谐： 2.1 打开TSQ 8000 Dashboard，选择Auto Tune。 2.2 选择调谐方式，点击Start。 3、AutoSRM 建立方法 3.1 打开TSQ 8000 Dashboard，选择AutoSRM。 3.2 选择新建AutoSRM，模式中选择优化母离子模式，输入化合物的名称及样品瓶的位置，保存并命名此AutoSRM。之后点击运行AutoSRM 的优化母离子模式。 3.3 数据采集结束后，在采集的数据中提取目标化合物的特征离子，找到合适的目标峰后，在右边的对话框中选择强度高的母离子，将母离子添加到做母离子全扫的列表中。

3.4所有化合物的母离子选择好之后，进入到子离子优化步骤。在模式中选择子离子优化模式，保存后点击运行样品。 3.5 数据采集结束后，选择强度高的子离子添加到列表中，点击，进入到SRM优化步骤。选择Full Range以步长为5V来优化碰撞能量；或者选择Targeted以步长为2V来优化碰撞能量。保存后点击运行样品。 3.6 数据采集结束后，选择强度最高的碰撞能量，点击加入到右边的列表中，所有SRM离子对优化完成后，将SRM列表导出成csv格式的表格，直接导入方法中使用。 4、TraceFinder 数据处理 4.1 打开现有的仪器方法，在TSQ8000子目录下，选择Create compound data store export file。 4.2 点击Create Export File，将方法中的SRM列表保存成xml的格式。 4.3 打开Trace Finder，在Configuration目录中点击import compound，导入上一步保存的xml表格。导入后在File的下拉菜单中选择Save Compound Datastore，完成自建CDS数据库过程。 4.4 打开TraceFinder，选择 Method Development这个目录，选择Create method建立进样方法及数据处理方法。 4.5 在Analysis 目录下，点击new batch 建立batch，选择相应的Master Method，选择要做数据处理或者进样的文件，输入样品瓶的位置，保存这个batch，然后Sumbit，运行单个样品或多个样品。可以选择进样，做数据处理或者出报告。 4.6在Analysis 中选择Data Review，可以查看数据结果。

高效液相色谱质谱联用-HPLC-MS-实验-含思考题

液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）的各种模式探索 一、实验目的 1、了解LC-MS的主要构造和基本原理； 2、学习LC-MS的基本操作方法； 3、掌握LC-MS的六种操作模式的特点及应用。 二、实验原理 1、液质基本原理及模式介绍 液相色谱-质谱法（Liquid Chromatography/Mass Spectrometry，LC-MS）将应用范围极广的分离方法——液相色谱法与灵敏、专属、能提供分子量和结构信息的质谱法结合起来，必然成为一种重要的现代分离分析技术。 但是，LC是液相分离技术，而MS是在真空条件下工作的方法，因而难以相互匹配。LC-MS经过了约30年的发展，直至采用了大气压离子化技术（Atmospheric pressure ionization，API）之后，才发展成为可常规应用的重要分离分析方法。现在，在生物、医药、化工、农业和环境等各个领域中均得到了广泛的应用，在组合化学、蛋白质组学和代谢组学的研究工作中，LC-MS 已经成为最重要研究方法之一。 质谱仪作为整套仪器中最重要的部分，其常规分析模式有全扫描模式（Scan）、选择离子监测模式（SIM）。 （一）全扫描模式方式（Scan）：最常用的扫描方式之一，扫描的质量范围覆盖被测化合物的分子离子和碎片离子的质量，得到的是化合物的全谱，可以用来进行谱库检索，一般用于未知化合物的定性分析。实例：（Q1 = 100-259m/z） （二）选择离子监测模式（Selective Ion Monitoring，SIM）：不是连续扫描某一质量范围，而是跳跃式地扫描某几个选定的质量，得到的不是化合物的全谱。主要用于目标化合物检测和复杂混合物中杂质的定量分析。实例：（Q1 = 259m/z） 本实验采用三重四极杆质谱仪（Q1：质量分析器；Q2：碰撞活化室；Q3：

气相色谱-质谱联用技术..-共15页

气相色谱-质谱联用技术 气相色谱-质谱联用技术，简称质谱联用，即将气相色谱仪与质谱仪通过接口组件进行连接，以气相色谱作为试样分离、制备的手段，将质谱作为气相色谱的在线检测手段进行定性、定量分析，辅以相应的数据收集与控制系统构建而成的一种色谱-质谱联用技术，在化工、石油、环境、农业、法医、生物医药等方面，已经成为一种获得广泛应用的成熟的常规分析技术。 1、产生背景 色谱法是一种很好的分离手段，可以将复杂混合物中的各种组分分离开，但它的定性、鉴定结构的能力较差，并且气相色谱需要多种检测器来解决不同化合物响应值的差别问题；质谱对未知化合物的结构有很强的鉴别能力，定性专属性高，可提供准确的结构信息，灵敏度高，检测快速，但质谱法的不同离子化方式和质量分析技术有其局限性，且对未知化合物进行鉴定，需要高纯度的样本，否则杂质形成的本底对样品的质谱图产生干扰，不利于质谱图的解析。气相色谱法对组分复杂的样品能进行有效的分离，可提供纯度高的样品，正好满足了质谱鉴定的要求。 气相色谱-质谱联用（gas chromatography-mass sepetrometry , GC-MS）技术综合了气相色谱和质谱的优点，具有GC的高分辨率和质谱的高灵敏度、强鉴别能力。GC-MS可同时完成待测组分的分离、鉴定和定量，被广泛应用于复杂组分的分离与鉴定。 2、技术原理与特点 气相色谱技术是利用一定温度下不同化合物在流动相（载气）和固定相中分配系数的差异，使不同化合物按时间先后在色谱柱中流出，从而达到分离分析的目的。保留时间是气象色谱进行定性的依据，而色谱峰高或峰面积是定量的手段，所以气相色谱对复杂的混合物可以进行有效地定性定量分析。其特点在于高效的分离能力和良好的灵敏度。由于一根色谱柱不能完全分离所有化合物，以保留时间作为定性指标的方法往往存在明显的局限性，特别是对于同分异构化合物或者同位素化合物的分离效果较差。 质谱技术是将汽化的样品分子在高真空的离子源内转化为带电离子，经电离、引出和聚焦后进入质量分析器，在磁场或电场作用下，按时间先后或空间位置进行质荷比（质量和电荷的比，m/z）分离，最后被离子检测器检测。其主要特点是迁建的结构鉴定能力，能给出化合物的分子量、分子式及结构信息。在一定条件下所得的MS碎片图及相应强度，犹如指纹图，易与辨识，方法专属灵敏。但质谱拘束最大的不足之处在与要求样品是单一组分，无法满足复杂物质的分析。

Agilent7890A5975C气相色谱质谱联用仪操作规程

Agilent 7890 A/ 5975C气相色谱质谱联用仪操作规程 1.开机 1）打开载气钢瓶控制阀，设置分压阀压力至0.5Mpa。 2打开计算机，登录进入Windows XP系统，初次开机时使用5975C的小键盘LCP 输入IP地址和子网掩码,并使用新地址重起,否则安装并运行Bootp Service。 3）依次打开7890AGC、5975MSD电源（若MSD真空腔内已无负压则应在打开MSD电源的同时用手向右侧推真空腔的侧板直至侧面板被紧固地吸牢），等待仪器自检完毕。 4）桌面双击GC-MS图标，进入MSD化学工作站 5）在上图仪器控制界面下，单击视图菜单，选择调谐及真空控制进入调谐与真空控制界面,在真空菜单中选择真空状态，观察真空泵运行状态，此仪器真空泵配置为分子涡轮泵，状态显示涡轮泵转速涡轮泵转速应很快达到100%，否则，说明系统有漏气，应检查侧板是否压正、放空阀是否拧紧、柱子是否接好。 2.调谐 调谐应在仪器至少开机2个小时后方可进行，若仪器长时间未开机为得到好的调

谐结果将时间延长至4小时。 1）首先确认打印机已连好并处于联机状态。 2在操作系统桌面双击GC-MS图标进入工作站系统。 3）在上图仪器控制界面下，单击视图菜单，选择调谐及真空控制进入调谐与真空控制界面。 4单击调谐菜单,选择自动调谐调谐MSD,进行自动调谐,调谐结果自动打印。 5如果要手动保存或另存调谐参数，将调谐文件保存到atune.u中。 6然后点击视图然后选择仪器控制返回到仪器控制界面。 注意: 自动调谐文件名为ATUNE.U 标准谱图调谐文件名为STUNE.U 其余调谐方式有各自的文件名. 3.样品测定 3.1方法建立 1）7890A配置编辑 点击仪器菜单,选择编辑GC配置进入画面。在连接画面下，输入GC Name:GC 7890A；可在Notes处输入7890A的配置，写7890A GC with 5975C MSD。点击获得GC配置按钮获取7890A的配置。 2）柱模式设定 点击图标，进入柱模式设定画面，在画面中，点击鼠标右键，选择从GC下载方法，再用同样的方法选择从GC上传方法；点击1处进行柱1设定，然后选中On左边方框；选择控制模式，流速或压力。 3）分流不分流进样口参数设定 ?点击图标，进入进样口设定画面。点击SSL-后按钮进入毛细柱进样口设定画

液相色谱串联质谱的小知识知识讲解

液相色谱串联质谱的 小知识

一、开机 water 2695/micromass zq4000: 开机步骤 1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源，此时质谱主机内置的CPU会通过网线与计算机主机建立通讯联系，这个时间大约需要1至2分钟。 2. 等液相色谱通过自检后，进入Idle状态，依照液相色谱操作程序，依次进行操作。（具体根据液相色谱不同型号来执行，下面以2695为例）。 a.打开脱气机 (Degasser On)。 b.湿灌注(Wet Prime)。 c.Purge Injector。 d.平衡色谱柱。 3.双击桌面上的 MassLynx 4.0图标进入质谱软件。 4.检查机械泵的油的状态（每星期），如果发现浑浊、缺油等状况，或者已经累积运行超过3000小时，请及时更换机械泵油。 5.点击质谱调谐图标（MS Tune）进入质谱调谐窗口。 6.选择菜单“Options –Pump”，这时机械泵将开始工作，同时分子涡轮泵会开始抽真空。几分钟后，ZQ就会达到真空要求，ZQ前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。 7.点击真空状态图标，检查真空规的状态，以确认真空达到要求。 8. 确认氮气气源输出已经打开，气体输出压力为90 psi。 9.设置源温度（Source Temp）到目标温度。 关机 1．点击质谱调谐图标进入调谐窗口。 2.点击Standby 让MS 进入待机状态时，这时状态灯会由绿变红，这一过程是关质谱高电压的过程。 3．停止液相色谱流速，如果还需要冲洗色谱柱，可以将液相色谱管路从质谱移开到废液瓶。 4．等脱溶剂气温度（ESI）或APCI探头温度降到常温，点击气体图标关闭氮气。 5．逆时针方向拧开机械泵上的Gas Ballast 阀，运行20分钟后关闭（镇气）。 a) 对于ESI源，至少每星期做一次。 b) 对于APCI源，每天做一次。 6．再次确认机械泵的Ballast阀是否已经关闭。 7．选择Option / Vent，这时质谱开始泄真空，ZQ 前面板的状态灯“Vacuum”开始闪烁，几分钟后机械泵会停止运行，这时可以关闭质谱电源。 FINNIGEN DECA 开关机及校正流程—— 1开机前准备事项 （1）确保质谱总电源开关（白色开关）及主板电源开关（黑色开关）处于关闭状态（O）； （2）检查真空泵油液面，确保泵内油页面处于标定的上下两线之间； （3）查看离子源洁净程度，ESI源查看喷口是否有固体析出，毛细管口是否完好；APCI喷口是否有积液； （4）气体压力，打开高纯氮气钢瓶总阀，调节出口压力调至0.65MPa，打开高纯氦气钢瓶总阀,调节出口压力调至0.25Mpa;