细胞生物学实验考试卷

细胞生物学实验考试卷

1.活体染色：活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。

2.凝集素：凝集素是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

3.schiff反应：细胞中的醛基可使schiff试剂中的无色品红变为红色。这种反应通常用于显示糖和脱氧核糖核酸。

4.细胞骨架：由微管，微丝和中间丝组成的蛋白网络结构，具有为细胞提供支架，维持细胞形态，负责细胞内物质和细胞器转运及细胞运动等功能。

5.细胞化学染色：是利用染色剂可同细胞的某种成分发生反应而着色的原理，对某种成分进行定性或定位研究的技术。

6.细胞融合：在自然条件下或用人工方法（生物的，物理的，化学的），使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。

二.填空题。

1.显微镜的分辨力与物镜的数值孔径成比。

2.显微镜从显微镜柜或镜箱内拿出时，要用手托住镜座，平稳地将其搬运到实验桌上。

3.詹纳斯绿b是

是液泡系特殊的活体染色剂，只将液泡系染成红色。

5.

6.对光镜下细胞骨架的形态学观察，多用处理细胞，使95%以上的可溶性蛋白质及全部脂质被抽提。

7.理学或临床上常用的生理盐水，其浓度用于两栖类时是。

8.

三.简答题。

1.镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？答：因为低倍镜下视野较大，易于发现目标和确定检查的位置，而如果直接用高倍镜观察，因其视野较小，不易找到观察的目

标，浪费时间。

2.简述线粒体詹纳斯绿b活体染色原理？答：线粒体是细胞内一种重要细胞器，是细胞进行呼吸作用的场所。细胞的各项活动所需要的能量，主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿b是线粒体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。

3.简述液泡系活体染色原理？答：动物软骨细胞内含有较多的粗面内质网和发达的高尔基复合体，能合成与分泌软骨粘蛋白及胶原纤维等，因而液泡系发达。中性红是液泡系特殊的活体染色剂，只将液泡系染成红色，在细胞处于生活状态时，细胞质及核不被染色，中性红染色可能与液泡中的蛋白有关。

4.微丝观察实验中，1%tritonx-100处理细胞的作用是什么？此实验能否看到微管和中间纤维？作出理由。答：（1）1%tritonx-100

作用是为了抽提细胞骨架以外的蛋白质，从而使骨架图像更加清晰。（2）不能看到微管和中间纤维。因为微管、微丝和中间纤维是由不同的的蛋白质组成的，微管、中间纤维的组装蛋白都被1%的

tritonx-100抽提出去，且没有加入促进微管、中间纤维组装的试剂，所以看不到它们。

6.简述feulgen反应的原理及作好本实验的关键？答：（1）dna 经酸水解，其上的嘌呤碱和

脱氧核糖之间的键打开，使脱氧核糖的一端形成游离的醛基，这些醛基在原位与schiff试剂（无色品红亚硫酸溶液）反应，形成紫红色的化合物，使细胞内含有dna的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生，是由于反应产物的分子内含有醌基，醌基是一个发色团，所以具有颜色。该反应对dna具有专一性。（2）feulgen反应成功的关键在于schiff试剂的质量。schiff试剂只能选用注明“dna染色反应用”的碱性品红才行。

7.简述细胞凝集反应的原理？答：凝集素是一类含糖的（少数例

外）并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

8.分析在小鼠肝细胞分离实验中，edta对实验的影响？答：edta 是一种金属螯合剂，它可以和钙镁离子相结合，而钙镁离子是细胞之间连结的重要的金属离子，除去钙镁离子将影响到细胞之间的结合，因此可用edta来破坏细胞之间的连结，从而达到分离细胞的目的。

一.名词解释

1.细胞：能进行独立繁殖的有膜包围的生物体的基本结构和功能单位。

2.数值孔径：光线投射到物镜上的最大角度的一半正弦，乘上玻片与物镜间介质的折射率所得的乘积，公式为：na=n·sina

3.暗视场：显微镜照明的一种方式，通过物镜的外周斜射照明样品，样品起散射或反射作用，这些光进入物镜成像，显微镜视场区呈显暗背景。

4.活体染色：是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。

5.液泡系:在动物细胞内，凡是由膜所包围的小炮和液泡除线粒体外都属于液泡系。

6.细胞骨架：是指细胞质中纵横交错的纤维网络结构，按组分成分和形态结构的不同可分为微管、微丝、中间丝。

7.细胞化学染色：是利用染色剂可同细胞的某种成分发生反应而着色的原理，对某种成分进行定性/news/8d5182c012c46e67.html 或定位研究的技术。

8.凝集素：是一类含糖的并能以糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

9.显微镜的分辨力：是指显微镜能够辨别两点之间最小距离的能力。

10.细胞融合：在自然条件下或人工方法是两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。

二.填空题

1.

2.

3.是线粒体的专一性活体染色剂。

4.线粒体中细胞色素使染料保持氧化状态呈蓝绿色，而周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。

5.质及核不被染色。

6.8.

9.集。

10.

三.问答题

1.镜检标本时，为什么要先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？为什么使用油

镜时，为什么必须用香柏油？答：因为低倍镜视野较大，易于发现目标和确定检查的位置。而高倍镜和油镜的视野范围小，用高倍镜

或油镜直接观察，则难以找到目标。因香柏油的折射率与玻璃相同，当光线通过载玻片后，可直接通过香柏油进入物镜而不发上折射。

2.小鼠肝细胞分离实验中，edta对实验的影响是什么？答：edta 是一种金属螯合剂，它可以和钙镁离子相结合，而钙镁离子是细胞之间连结的重要金属离子，除去钙镁离子将影响到细胞之间的结合，因此可用ＥＤＴＡ来破坏细胞之间的连结，从而达到分离细胞的目的。

3.微丝观察试验中，1%tritonx-100处理细胞的作用是什么？此实验是否能看到微管、中间纤维？为什么？答：（１）其作用是抽提细胞骨架以外的蛋白质，同时不会损害装配细胞骨架蛋白质，从而使骨架图像更加清晰。（２）不能，因为此实验中没有促进细胞内微管、中间纤维蛋白质进行装配的药物，所以就看不到装配好的微管和中间纤维。

4.feulgen的反应原理是什么？答:dna经酸水解，其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开，使脱氧核糖的一端形成游离的醛基，这些醛基在原位与schiff试剂反应，使细胞内含有dna的部分呈紫红色阳

性反应，从而显示出dna的分布。

5.牛蛙胸骨剑突软骨细胞液泡系的活体染色实验步骤是什么？答：1)将牛蛙处死，剪取胸骨剑突最薄的部分一小块，放入载玻片上1/3000中性红染液滴中，染色5—10分钟。2）用吸管吸去染液，滴加ringer液，盖上盖玻片。3）先用低倍镜再转换到高倍镜下观察。