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卵黄

无菌分离蛋黄,无菌捣碎,按1:1:4加入无菌生理盐水和氯仿,混合液震荡混匀,室温静止1小时,5000rp4度离心30min,上清液为粗提卵黄抗体
水稀释法 先将卵黄液用蒸馏水稀释10倍,调整pH值至50~52,4℃静置6h以上,上清液即为水溶性组分。水稀释法工艺简单,若采用适当的方法进行纯化,可获得较高的回收率和纯度。
有机物沉淀法 聚乙二醇(PEG)法是较常用的方法。Bizanov和Normantiene〔4〕用仙台病毒免疫产蛋母鸡,收获高免鸡蛋。以TBS作为缓冲液,将卵黄液稀释4倍后,加入35%的聚乙二醇6000,沉淀脂类,卵黄囊抗体保留在上清液中。应用这种方法从每毫升卵黄液中获得约45mg的特异性卵黄囊抗体,纯度达95%。
水稀释法 先将卵黄液用蒸馏水稀释10倍,调整pH值至50~52,4℃静置6h以上,上清液即为水溶性组分。水稀释法工艺简单,若采用适当的方法进行纯化,可获得较高的回收率和纯度。
收集经抗原强化免疫的产蛋鸡所产的鸡蛋;(2)分离出鸡蛋中的卵黄;(3)用含聚乙二醇的生理盐水与卵黄混合并搅拌均匀,离心去除沉淀,取上清液;(4)再用含甘油的葡萄糖水与上清液混合离心去除沉淀,取上清液,该上清液即为所得卵黄抗体。本发明可以彻底吸收卵黄中的油脂,这样就大大减少了卵黄抗体的体积,提高了卵黄抗体的纯度,成品纯度质量比高达95%以上,本发明制出的卵黄抗体其温度适应范围广为0-30℃。
.高免蛋的处理 高免蛋用0.1%新洁尔灭溶液浸泡5min,洗涤干净,放入无菌室晾干备用。 b.分离卵黄 无菌操作,打破蛋壳,分离蛋黄。 c.卵黄匀浆 收集的蛋黄置无菌的组织匀浆器中,加等量灭菌生理盐水,并按每毫升加入青霉素、链霉素各1000单位,硫柳汞1.0/万,匀浆、过滤,分装消毒瓶内,4℃冷藏备用。

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