检定菌管理规程

检定菌管理规程

1目的：

规范药品微生物学检定用菌的管理，确保检定菌正确发放、使用，销毁。

2范围：

适用于检验用菌种的管理，包括菌种的申购、保存、传代、使用及销毁。

3职责：

检定菌保管、使用人员及各有关部门对本规程的实施负责。

4参考文献：

4.1《药品生产质量管理规范》（2010年修订）

4.2《中国药典》（2015年版四部）

5定义：

5.1检定菌：是指微生物测定和其它检查用的标准菌种。

5.2标准菌株：来自认可的国内或国外菌种保藏机构。

5.3标准贮备菌株：标准菌株经过复活并在适宜的培养基中生长后，分装于

菌种冻存管，采用低温冷冻干燥、液态贮存、超低温冷冻（低于-30℃）

等方法保存。

5.4工作菌株：采用标准贮备菌株制备转种或实验用的菌株。

6规程

6.1检定菌的申购：检定菌由质量管理部根据使用情况（包括临时检验需要），

列出计划，相关领导审批。

6.2由采购部向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌（标准菌

种），或直接向省（市）药检所购买传代用菌种，购买时，需询问与确定

菌种的代数，以便传代时控制代数。

6.3标准菌株的接收

6.3.1对新购进的标准菌株应仔细核对菌种标签、包装完整性及随菌种附有

的说明书。

6.3.2包装破损的应彻底进行消毒、灭菌处理，使其不得污染其它物品。

6.3.3符合要求的，应点清数量，同时将检定菌的所有信息，填写《检定菌

接收、使用、销毁记录》。

6.4检定菌的保存

6.4.1购买的标准菌株直接存放于2-8℃冰箱保存。

6.4.2工作菌种的保存：工作用菌种采用斜面低温保存法。将菌种接种在适

宜的固体斜面培养基上，待菌生长充分以后，转移至2～8℃冰箱中

保存。此法仅用于工作用菌种的短期保存，菌种保存人员应定期检查

其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，应经灭活处理后销毁。

6.4.3标准贮备菌株的保存：采用甘油冷冻管保藏法。

6.4.4菌种保存应贴菌种标签。

6.5标准贮备菌株的制备（复苏、保藏）

6.5.1菌珠的复苏

6.5.1.1将标准菌株冻干管从冰箱中取出，放至室温后使用。

6.5.1.2菌珠在打开前仔细核对标签上的内容，注意一株菌株使用一套

用具，严防交叉污染。

6.5.1.3应参照标准菌株复苏说明书进行菌种复苏。用适宜的方法打开

标准菌株的安瓿瓶。

6.5.1.4取少量适宜的液体培养基加至菌种管内，轻轻振摇使冻干菌块

溶解。

6.5.1.5随即吸出管内菌液，接种划线到琼脂培养基上或接种到液体培

养基中，在规定的温度和时间下培养，使菌种得以复苏。

6.5.2标准贮备菌株的保藏

6.5.2.1将复苏后的培养物转种至液体培养基内，在适宜的温度和时间

下进行培养。

6.5.2.2取培养好的菌悬液与甘油1:1比例进行混合，振摇均匀，用冻

存管进行分装，按工作需要每种菌种分装成若干支。

6.5.2.3置冰箱超低温冷冻（低于-30℃）保存，作为标准贮备菌株。

6.5.2.4在冷冻管外贴上《检定菌标签》并及时在《检定菌接收、使用、

销毁记录》上登记。

6.6工作菌株的制备

6.6.1甘油冻存管标准贮备菌株制备工作菌株

从冰箱取出冻存管标准贮备菌株移入生物安全柜内，在室温放置20

分钟后，将冻存管内的菌液接入适宜的液体培养基或琼脂培养基上，

在规定的温度和时间下进行培养，作为工作菌株。

6.6.2工作菌株的传代

从冰箱中取出传代用斜面工作菌株，用无菌接种环挑取适量培养物接

种至适宜的液体培养基或琼脂培养基上，在规定的温度和时间下进行

培养，作为下一代工作菌株。

6.6.3所有新制备的菌种管外均应贴上标签，并及时填写《检定菌传代记录

书》。

6.7检定菌的编号

6.7.1从中国食品药品检定研究院购买的CMCC系列冻干粉标准菌株为0

代菌株，其菌种编号为标准菌株标签上编号，如0代金黄色葡萄球菌

标准菌种编号为“26003-4a”。

6.7.2将上述0代标准菌株转种至适宜的培养基上为复苏，复苏得到的菌种

为第1代菌种。其编号为：0代标准菌株编号+复苏日期，如

“26003-4a-170520”表示由第0代编号为“26003-4a”的金黄色葡

萄球菌标准菌株，于2017.05.20复苏得到的第1代菌种。

6.7.3第1代复苏后的菌种转种至液体培养基制成第2代菌种为标准贮备菌

株，用甘油冻存管保存。其编号为：第1代复苏后的菌株编号+G流

水号（分装支数）。如“26003-4a-170520-G1”表示由编号为

“26003-4a-170520”的第1代菌种传代分装的第1只金黄色葡萄球

菌甘油冻存管标准贮备菌株。

6.7.4从第2代标准贮备菌株转种至琼脂培养基上制成第3代工作菌株，其

编号为：标准贮备菌株+A流水号（传代支数）；从第2代标准贮备

菌株转种至液体培养基上制成第3代工作菌株，其编号为：标准贮备

菌株+B流水号（传代支数）。

6.7.5可挑选斜面工作菌种长势较好的一只，在其菌种编号前特殊标记，作

为传代用斜面工作菌种制备下一代工作菌种；第4代；第5代工作菌

种的编号规则均遵循6.7.4编号规则。

6.8检定菌的传代、使用

6.8.1每株菌种应建立检定菌使用及传代记录，斜面菌种应根据其特性决定

传代时间间隔。

6.8.2传代时（使用时）须核对编号，传代次数，传代日期，所用培养基。

6.8.3控制传代次数，根据菌种特性和实际保存情况规定最多传代次数，所

用菌株传代次数不得超过5代。

6.9检定菌的销毁

6.9.1检定菌使用后或超过贮存期的应进行销毁。

6.9.2需销毁的检定菌应放入灭菌锅中121℃灭菌30分钟灭菌处理后，再

进行清洗和其他处理。

菌种管理规程

1. 目的 规范微生物学检定用菌种的管理，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。 2. 适用范围 适用于微生物实验用菌种管理，包括菌种的申购、传代、使用及销毁等。 3. 引用/参考文件 ChP2015 实用药品微生物检验检测技术指南 4. 职责 质量控制实验室负责菌种的申购、传代、使用、销毁等工作，QA负责监控和参与OOS调查。 5. 程序 5.1术语和定义 5.1.1 标准菌株 由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心或者其他经认可的机构提供的冷冻干燥菌。 5.1.2 传代菌株 用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种，3代后的传代菌株在需要时可以作为工作菌株使用。 5.1.3 工作菌株 用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工作使用的菌种。 5.1.4 菌种的代 将菌种接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0 代。 5.2 菌种来源 5.2.1 标准菌株由中国药品生物制品检定所医学菌种保藏中心（CMCC）或者其他经认可的机构提供的冷冻干燥菌种。 5.2.2质量控制实验室涉及到的菌种种类、代码、保存方法及保存条件如下。

5.3.1菌种的申购 5.3.1.1 微生物室QC依据菌种的库存及菌种的使用情况，提出采购申请，申请需明确菌种的名称，标准编号以及申购数量等信息。 5.3.1.2 质量部经理对申购计划进行审批，审批后由公司的商务部按要求进行采购，采购过程执行《采购控制程序》。 5.3.1.3 菌种的采购需向法定的业务部门或者认可的机构采购。 5.3.1.4 购买菌种的同时应保留相关证明资料，说明菌种的名称、代数、数量等。 5.3.2 菌种的验收 5.3.2.1 微生物室QC负责对采购回的菌种以及相关的证明资料进行验收； 5.3.2.2 验收应包括菌种外包装的完好性、具体验收的依据为批准后的申购计划。 5.3.2.3 验收符合后签字确认并领回菌种，及时填写《菌种验收、入库记录》，并将菌种的相关证明资料贴在菌种接收登记表当页背面留存。如验收不符合则拒绝签字领用，商务部负责退货处理。 5.3.3 菌种的保存 5.3.3.1验收合格的冷冻干燥菌种，应保存在温度设定为-20℃冰箱中保存，有效期可至1年。 5.3.3.2 验收后的菌种需在验收合格接收后14天内完成转种。

标准菌种管理规程

标准菌种管理规程 目的：规范药品微生物学检定用菌的管理，最大限度降低变异率，确 保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。 职责： QC 主管负责菌种的申购、接受、保存、分发，微生物检验员 负责菌种的确认、传代、使用及销毁。 范围：本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的申购、保存、传 代、使用及销毁等。 内容： 1术语 标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理 中心提供的冷冻干燥菌。 传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存 的菌种，用于传代及制备工作用菌种。 工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养 后，作为日常工作使用的菌种。 菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即 称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0 代。 2.标准： 2.1 检定菌的申购 QC主管每年根据检定菌种的使用情况（包括临时检验需要），提出购 买计划，交由质量管理部部长审批后，向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种（标准菌种）；也可以直接向省（市）药检所购

买传代用菌种，购买时，需询问与确定菌种的代数，以便传代时控制 代数。 2.2 检定菌的接收 菌种到达实验室后，由QC主管接收菌种，检查其名称和数量，以及 每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《检定菌接收记录》（附表 1）上，内容包括：名称、数量、编号（无编号者按检定菌种 的编号原则编号）、代数、来源、接收日期、接收人等，贴好标签并 储存于 2-8?C直到需要使用时。储存期最长不超过 5 年。 2.3 检定菌的保存 2.3.1 工作用菌种的保存 工作用菌种采用斜面低温保存法。将菌种接种在适宜的固体斜面培养 基上，待菌生长充分以后，转移至2～8℃冰箱中保存。此法仅用于 工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，经应灭活处理后销毁。保存时间根据菌种种类而不同， 细菌： 1 个月；酵母菌： 2 个月；霉菌及芽胞： 3 个月。 2.3.2 传代用菌种的保存 采用甘油冷冻管保藏法或液体石蜡保存法。 2.3.2.1．甘油冷冻管保存法 用无菌接种环轻轻刮取经冷冻复溶增菌后并接种至平板或琼脂斜面 的菌苔，并通过接种环与试管壁之间的轻轻摩擦而使细菌充分扩散到 预先装入试管中的无菌纯化水中，调整菌液浓度，使其等同于10 号比浊管，向已制备好的菌悬液中加入等体积的无菌甘油（浓度 20%），

检定菌管理程序

检定菌管理程序 1.范围：本企业检验用菌种的管理。 2.责任 QC室卫生学检验员：负责编制检定菌计划和保管检定菌种。 质量部经理、QC主管：对检定菌的保管进行监督。 3.内容 3.1.检定菌的申购 3.1.1.QC室卫生学检验员按药品微生物检验操作规程检测，需要购买检定菌， 首先提出购买检定菌的申请，并写明购买菌种名称、标准编号、数量，注明要求购回时间，并交QC主管、质量部经理批准。 3.1.2.申请批准后，按《物资采购管理程序》规定进行购买，物控部按要求到当 地药检所购买。 3.2.检定菌的接收及使用 3.2.1.物控部按时购买回检定菌种后，立即交送QC室，由卫生学检验员验收。 3.2.2.卫生学检验员应详细核对购买回菌种与申购单名称标准编号及数量的一 致性后，方可签字接收。 3.2.3.发放填写《检定菌、菌液发放记录》。 3.2. 4.检验员按标准操作规程，对采购回菌种正确使用。 3.2.5.卫生学检验员对未使用完的菌种进行保藏处理，可在原包装封口外，加封 灭菌布，存入4—6℃专用冰箱中贮存，并每月定期对菌种传代纯化，检查菌种的存活率，种株纯度及其有关特性，并作好《检定菌传代纯化记录》。 一般情况传三代。 3.3.检定菌的销毁 3.3.1.贮存菌种经传代纯化，若发现菌种生物学特性发生衰退、变种或死亡，依 据菌种生物活性对其进行灭活销毁。并重新提出购买检定菌申请。 3.3.2.若操作使用过程中一旦发生偏差或差错，造成菌种污染，立即进行灭活销 毁。 3.3.3.销毁填写《检定菌、菌液销毁记录》，并有人监销。

3.4.卫生学检验员负责填写《检定菌、菌液使用记录》。 4.相关文件 《检定菌传代纯化记录》2202·015 《检定菌、菌液发放记录》2102·024 《检定菌、菌液使用记录》2102·025 《检定菌、菌液销毁记录》2102·026

检定菌、培养基管理规程

XXXXX有限公司 1目的 1.1建立微生物限度（初始污染菌）、无菌中所使用的检定菌、培养基的管理规程，确 保其得到有效管理。 2范围 2.1适用于检验用菌种、培养基的管理。 3参考资料 3.1《中华人民共和国药典》（2015版） 4责任人 4.1品管部负责本规程的实施。 5内容 5.1检定菌的管理 5.1.1菌种的接收 5.1.1.1检定菌由专人保管，此人须受过专业培训，有足够的菌种保存经验。 5.1.1.2根据检验品种的需要，由检定菌保管员制定购买计划，报品管部经理审 核。 5.1.1.3检定菌保管员在接收标准菌种时，须填写《检定菌接收记录》，并在保 存菌种的容器外加贴标签（内容为名称、编号、接收日期），妥善保管。 5.1.2菌种的移植传代 5.1.2.1长久保存的菌种在启用时，要经过移种至适宜的培养基上进行培养，待 生长后再进行移种，如此连续2-3次，直至出现典型的形态和生长特征 为止。 5.1.2.2保存的菌种须按规定时间进行传代。 5.1.2.3在检查或保存菌种过程中，遇到形态构造上有变异或污染菌等情况，需

进行菌种移种分离培养已得到纯菌。 5.1.2.4移植传代时须核对编号、传代次数、传代日期、所用培养基等并记录。 每次移植传代后，要与原种的编号、名称核对，检查培养特征无误时方 可再继续保存。 5.1.2.5传代次数必须控制，传代次数越多，突变的机率越大，因此要尽量少传 代，必须根据菌种保存情况规定最多传代次数。 5.1.2.6传代方法依据《菌种传代标准操作规程》的规定，每次传代需填写《检 验用菌种传代接种记录》。 5.1.3菌种原种须按标签或所附说明妥善保存，移植传代后的菌种于普通冰箱内 2-8℃保存，每周检查一次冰箱温度、湿度，菌种管的棉塞是否松动生霉，有 无异常。 5.1.4菌种的使用和销毁 5.1.4.1每次使用的菌种必须是培养后健康、生命力强、无变异的菌种。每次使 用菌种均须填写《检验用菌种使用记录》。 5.1.4.2超过传代限度或经鉴定检查不合格的菌种，报主管人员审核批准后销毁 灭活（加热灭活），销毁灭活由两人共同执行，并填写《检验用菌种销 毁记录》。 5.2培养基的管理 5.2.1培养基的购买 5.2.1.1根据培养基使用情况及剩余量及时向采购提出申购。应当从标准培养基 提供者，或可靠的供应商处采购，生产厂家应尽量稳定，必要时应当对 供应商进行评估。一次性购买量不宜过多。 5.2.2培养基的接收 5.2.2.1培养基购进后，由保管员负责接收，并及时登记检验试剂台账，如培养 基标签未标注有效期，则应当在培养基的容器上标注接收日期。 5.2.3培养基的保管 5.2.3.1购进培养基应核对品名、数量等，并按标签的要求于规定条件下贮存， 干粉式培养基应置于阴凉干燥处贮存，防止光照，潮湿。 5.2.4培养基的使用 5.2.4.1培养基使用前均应检查灵敏度，用于无菌试验及菌种保藏用的培养基， 每次使用前均须做相应的无菌检查，证明培养基灭菌程度彻底者方可使 用。 5.2.4.2在配制培养基时应先检查干燥培养基的外观形状。凡结块、霉变者均不 能使用。 5.2.4.3培养基的配制方法、消毒温度、消毒时间均应按培养基的标签要求进行。 每配制一批培养基都应填写《培养基配制记录》。 5.2.4.4微生物限度检查用培养基应尽量现用现配，否则应置2-10℃冰箱保存，

02微生物实验室菌种管理规程

1、目的：规范微生物试验用菌种的管理，确保菌种的有效使用。 2、适用范围：微生物试验用菌种的管理。 3、责任者：质检科负责人、微生物试验人员、菌种管理人员 4、正文： 概念 a、标准菌株：由国内或国际菌种保藏机构保藏的，遗传学特性得到确认和保证并可追溯的菌株。 b、标准储备菌株：由标准菌株经一次传代得到的培养物。 c、商业派生菌株：由供应商提供的所有特性与标准菌株等效的菌株。 d、工作菌株：由标准储备菌株经传代得到的培养物。

e、代：将活的微生物接种到新鲜培养基中进行培养，并希望获取新的微生物培养物。这种操作方式，新培养物对接种培养物而言就称为一代。 菌种的采购和接收 菌种的采购 从药检所或菌种保藏中心等外单位购入菌种斜面或冻干菌种。 根据工作需要对购买国内保藏中心提供的菌种斜面提前1个月填写采购申请单，冻干菌种提前2个月申请购买，国外保藏中心提供的菌种应提前3个月申请购买。 菌种的接收 检定菌应设专人保管，管理人员应接受过专业培训，有足够的菌种保存经验。 接收菌种时，应核实菌种的名称、编号、传代代数、数量、有效期等，并调查清楚菌种的保存条件和注意事项。 接收时应填写菌种接收登记表。内容包括：菌种名称、菌种保藏中心编号、传代次数、接收日期、菌种来源等。 对新购入的冻干菌种在使用前应按要求对其进行生物形态确证试验和纯度鉴定，由于新购买的菌种斜面已由菌种提供单位做过生物形态确证试验和纯度鉴定，所以传代5代以内的菌种斜面不需要进行纯度鉴定。 对新购入的斜面菌种应在2～8℃保存，并应在1周内转接。 菌种的复苏 使用人员根据需要应向菌种管理人员领取菌种，仔细核对标签上菌名、编号，并在《菌种接收及领用登记表》上记录菌名、数量、领用人、领用日期等信息。 菌株解冻后不得重新冷冻和再次使用。 菌种复苏应在生物安全柜内操作。 常用菌种接种用培养基和培养条件表 菌种的传代 每株菌种应建立菌种使用及传代记录，斜面菌种应根据其特性决定传代时间间隔。

标准菌种管理规程

标准菌种管理规程目的：规范药品微生物学检定用菌的管理，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。职责：QC主管负责菌种的申购、接受、保存、分发，微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。 范围：本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的申购、保存、传代、使用及销毁等。 内容： 1 术语 标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。 传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种。 工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工作使用的菌种。 菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0 代。 2.标准： 2.1 检定菌的申购 QC主管每年根据检定菌种的使用情况（包括临时检验需要），提出购买计划，交由质量管理部部长审批后，向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种（标准菌种）；也可以直接向省（市）药检所购

买传代用菌种，购买时，需询问与确定菌种的代数，以便传代时控制代数。 2.2 检定菌的接收 菌种到达实验室后，由QC主管接收菌种，检查其名称和数量，以及每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《检定菌接收记录》（附表1）上，内容包括：名称、数量、编号（无编号者按检定菌种的编号原则编号）、代数、来源、接收日期、接收人等，贴好标签并储存于2-8?C直到需要使用时。储存期最长不超过5年。 2.3 检定菌的保存 2.3.1 工作用菌种的保存 工作用菌种采用斜面低温保存法。将菌种接种在适宜的固体斜面培养 基上，待菌生长充分以后，转移至2~ 8C冰箱中保存。此法仅用于工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，经应灭活处理后销毁。保存时间根据菌种种类而不同，细菌：1个月；酵母菌：2个月；霉菌及芽胞：3个月。 2.3.2 传代用菌种的保存 采用甘油冷冻管保藏法或液体石蜡保存法。 2.3.2.1．甘油冷冻管保存法用无菌接种环轻轻刮取经冷冻复溶增菌后并接种至平板或琼脂斜面的菌苔，并通过接种环与试管壁之间的轻轻摩擦而使细菌充分扩散到预先装入试管中的无菌纯化水中，调整菌液浓度，使其等同于10 号比浊管，向已制备好的菌悬液中加入等体积的无菌甘油（浓度

食品公司检定菌管理规程

食品公司检定菌管理规程 检定菌管理规程颁发部门质量部新订□ 修订■ 复审□ 页码 第1 页共2 页文件性质技术文件□ 管理文件■ 操作文件□ 文件编码 ZL-SMP-058-01 起草年月日审查年月日批准年月日执行日期年月日依据《保健食品良好生产规范》GB17405-1998 分发部门质量部 一、目的：规定了微生物限度度用检定菌管理工作的基本要求。 二、适用范围：适用于微生物限度用检定菌。 三、职责者：由微生物限度操作QC严格执行。 四、内容：1 检定菌的购买 1、1 根据检验品种的需要，由微生物限度检查员填写购买申请。内容包括：菌种名称、购买数量、用途等。报QC室主任审核批准。 1、2购买地点：当地药检所。 2 检定菌保藏 2、1 保藏方法:定期移植保藏法：将菌种每隔1-3个月（大肠埃希菌为1个月）接种在三支新鲜的琼脂斜面上，按规定的温度和时间培养，待充分生长后，选出两支生长旺盛的，存放在2-8℃左右的冰箱中保藏，一支用于传代；另一支用于阳性对照。

2、2 保藏注意事项 2、2、1 保藏的菌种均应是生命力旺盛的新鲜培养物，至少应是第三代的培养物。传至第五代，申请购置新菌种。第五代使用3个月后，灭活销毁。 2、2、2 每天检查一次保存菌种的冰箱温度，菌种管的棉塞是否松动或生霉。如有异常及时处理，并记录。 2、2、3 移植时须核对传代次数、传代日期、所用培养基并记录。 2、2、4 每次移植培养后，要与原种名称逐一核对，确证培养特征和纯度无误后再继续保藏。 3 检定菌定期检查 3、1 每月检查保藏菌种管的外观及干燥状态，并将菌种培养复活，检查保藏菌种的存活率和形态，同时进行菌种检定。检定的项目一般包括菌落性状、革兰染色、显微镜下菌体形态等，并与保藏菌种的原始鉴定项目进行对照比较，并作好详细记录。 3、2 经鉴定不合格的，应销毁灭活。 4 检定菌的管理:检定菌由专人负责管理，并有管理记录。 5检定菌的销毁处理:检定菌必须经高压蒸汽121℃灭菌20分钟灭活处理后方可清洗、排放或弃置，并填写文件名称检定菌管理规程 第2 页共2 页文件编码 ZL-SMP-058-01 灭菌记录。 6菌种的传代和使用：

标准菌种管理规程

标准菌种管理规程 目的：规药品微生物学检定用菌的管理，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。职责：QC主管负责菌种的申购、接受、保存、分发，微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。 围：本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的申购、保存、传代、使用及销毁等。 容： 1 术语 标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。 传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种。 工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工作使用的菌种。 菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基，每萌发一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。 2.标准： 2.1检定菌的申购 QC主管每年根据检定菌种的使用情况（包括临时检验需要），提出购买计划，交由质量管理部部长审批后，向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种（标准菌种）；也可以直接向省（市）药

检所购买传代用菌种，购买时，需询问与确定菌种的代数，以便传代时控制代数。 2.2检定菌的接收 菌种到达实验室后，由QC主管接收菌种，检查其名称和数量，以及每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《检定菌接收记录》（附表1）上，容包括：名称、数量、编号（无编号者按检定菌种的编号原则编号）、代数、来源、接收日期、接收人等，贴好标签并储存于2-8?C直到需要使用时。储存期最长不超过5年。 2.3 检定菌的保存 2.3.1 工作用菌种的保存 工作用菌种采用斜面低温保存法。将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌生长充分以后，转移至2～8℃冰箱中保存。此法仅用于工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，经应灭活处理后销毁。保存时间根据菌种种类而不同，细菌：1个月；酵母菌：2个月；霉菌及芽胞：3个月。 2.3.2传代用菌种的保存 采用甘油冷冻管保藏法或液体石蜡保存法。 2.3.2.1．甘油冷冻管保存法 用无菌接种环轻轻刮取经冷冻复溶增菌后并接种至平板或琼脂斜面的菌苔，并通过接种环与试管壁之间的轻轻摩擦而使细菌充分扩散到预先装入试管中的无菌纯化水中，调整菌液浓度，使其等同于10号比浊管，向已制备好的菌悬液中加入等体积的无菌甘油（浓度20%），

检定菌管理规定

XX公司检定菌管理规定 制定部门质监中心 制定人： 年 月 日 审核人副总经理： 年 月 日 1 主题内容与适用范围 本文件规定了公司化验室检定菌的购入、保藏、复活、传代、使用方面管理要求。 本文件适用于公司化验室抗生素微生物检定、无菌检查、微生物限度检查及微青测定用检定菌的管理。 2 引用标准 ICH Q7a 2000年11月 《药品生产质量管理规范》 2010年修订 《兽药生产质量管理规范》 2002年6月 3 术语 检定菌：指生物测定中使用的各种菌种。 4 职责 4.1 质监中心在满足检测要求的情况下负责向各化验室提供检定菌斜面。 4.2 各化验室负责所用检定菌的贮存、传代与使用。 4.3 质量保证部负责各化验室检定菌的使用过程的监督管理。 5 管理规定 5.1 质监中心根据使用需要，做出检定菌采购计划以书面形式报领导同意后，安排购买。 .2 购进的检定菌主要来自中检所医学菌种保藏中心(China Medical Culture Collection，CMCC)的系列，或美国菌种

保藏中心(American Type Culture Collection，ATCC)系列等国际法定菌种保藏机构。此外还有来自其他保藏单位或同行相互转让的有关菌种。 .3 购进检定菌首先进行验收，应检查菌种的来源，菌种的菌株名称及编号、菌种的包装及外观，凡包装破损或其它不符合要求的应予拒收，验收合格后要在菌种传代记录上进行登记，购进发票应复印保留，各单位领用要有发放记 录。 5.4 各化验室领入检定菌应指定专人管理建立台帐，用于传代的冷冻干燥管及检定菌斜面登入菌种传代记录；用于检验的检定菌斜面登入菌种发放与使用记录。检定菌置冰箱内上锁保存，且与其它物品分开放置，保存温度按瓶签上的规定，没有规定保存温度的检定菌冷冻干燥管、菌种斜面置2～8℃冰箱中保藏。 5.5 购进的冷冻干燥菌种管使用时，首先需复活，按菌种保藏中心提供的相关资料的要求进行复溶、培养和保存。 5.6 菌株的传代次数不得超过5代(从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第0代)。质监中心为各单位提供检定菌斜面，各使用单位要根据各菌种的要求，制订贮存期限与传代期限，各化验室指定专人定期进行传代，贴上检定菌标签，格式见附件，做好菌种传代记录。 5.7 菌种应按检验操作规程的规定进行接种、培养、稀释、对照使用。使用菌种不得污染下水道，操作室等。撒落或掉在地面或操作台上的菌液，应立即用5%石炭酸溶液或3%来苏尔溶液倒在被污染处30分钟以上然后再做处理。菌种使用后或超过贮存期的应进行销毁。 5.8 需销毁的菌种及接触菌种的吸管、试管、三角瓶等用具，连同剩余的菌液置121℃灭菌30分钟后，才能进行清洗和处理,并做好记录。 5.9 菌种发放与使用记录、菌种传代记录，永久保存。

标准菌种管理规程(新修订)

标准菌种管理规程 生效日期：年月日第1页共17页 目的：规范药品微生物学检定用菌的管理，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。 职责：QC主管负责菌种的申购、接受、保存、分发，微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。 范围：本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的申购、保存、传代、使用及销毁等。 内容： 1 术语 标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。 传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种。 工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工作使用的菌种。

菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。 2.标准： 2.1检定菌的申购 QC主管每年根据检定菌种的使用情况（包括临时检验需要），提出购买计划，交由质量管理部部长审批后，向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种（标准菌种）；也可以直接向省（市）药检所购买传代用菌种，购买时，需询问与确定菌种的代数，以便传代时控制代数。 2.2检定菌的接收 菌种到达实验室后，由QC主管接收菌种，检查其名称和数量，以及每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《检定菌接收记录》（附表1）上，内容包括：名称、数量、编号（无编号者按检定菌种的编号原则编号）、代数、来源、接收日期、接收人等，贴好标签并储存于2-8?C直到需要使用时。储存期最长不超过5年。 2.3 检定菌的保存 2.3.1 工作用菌种的保存 工作用菌种采用斜面低温保存法。将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌生长充分以后，转移至2～8℃冰箱中保存。此法仅用于工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，经应灭活处理后销毁。保存时间根据菌种种类而不同，细菌：1个月；酵母菌：2个月；霉菌及芽胞：3个月。 2.3.2传代用菌种的保存

微生物菌种、毒株管理规定与流程 Word 文档

微生物菌种、毒株管理规定与流程 1．目的：对本实验室菌种、毒种的申购、保存、保管、领用、处理等各个环节实行有效的监督控制，防止意外事故发生，确保疾病预防与控制检验业务及科研教学工作。2．适用范围及菌种、毒种专职管理人员 适用于本科微生物实验室菌种、毒株的管理； 菌种、毒种专职管理人员： 3．职责 ①微生物实验室负责菌、毒种的出入库保管、保存及处理等日常管理。 ②科室指定2名菌种、毒种库管理人员承担菌、毒种日常管理。 ③科室负责人负责一、二类菌、毒种的出入库和向上级索取及对下级发送的审核。 ④技术管理层批准本实验室一、二类菌、毒种的出入库和向上级索取及对下级发送的审批。 4．工作程序 ⑴报送及入库 ①当微生物实验室检出菌、毒株应及时报送市疾病预防控制中心。 ②新发现的菌、毒种，要做好原始记录，逐级报送进行复核确认，报送时须王红卫、2人参加。 ③一、二类菌、毒种入库前，科室审核，技术管理层批准后入库 ④个人不得擅自保留菌、毒种，必须由科室进行统一编号、登记入库管理 ⑤菌、毒种入库时， 2名菌、毒种保管人员须认真做好菌毒种的编号、登记工作。 ⑵日常管理 ①保管人员由王红卫、赵灵葵2名检验人员组成。 ②菌、毒种入库时，保管人员应及时验收，统一编号，填写《菌、毒种登记表》

③严禁随意将菌、毒种置于非菌、毒种专用保存场所，应做到三专（专室、专柜、专锁）。 ④菌、毒种库由2名保管人员双锁管理，铁门与锁必须牢固有效，发现损坏须及时报修。未经各科室负责人同意，不得擅自将钥匙委托他人代管。 ⑤菌、毒种保管人员应定期对库内温度、湿度、通风及冰箱、冰柜等菌、毒种保藏设备运转情况进行检查，并做好记录。 ⑥菌、毒种保管人员根据菌、毒种的保存期限，及时通知分管病种的检验人员进行传代，定期鉴定，并详细记录在《菌、毒种登记表》 ⑦菌、毒种保管人员发现菌、毒种发生变异和死亡，应及时向科室负责人报告，并填写《菌、毒种登记表》。科室须将变异及死亡的一、二类菌、毒种通报技术管理层。 ⑶索取、领用和发放 ①因工作需要索取、领用和发放一、二类菌、毒种时，须严格按国家有关的规定，填写《菌、毒种领取申请表》（HJK／JL-21），科室负责人审核，技术管理层批准后方可索取、领用和发放。 ②三类菌、毒种的领用和发放时，应由2人参加。 ③一类菌、毒种，须报卫生部批准，二类菌、毒种须经省级卫生行政部门审批。未经上级批准，不得进行国际间各类菌、毒种交流。 ④进行菌、毒种索取、领用和分发时，须做好记录，填写《菌、毒种使用及销毁记录》（HJK／JL-22）。 ⑤一、二类菌、毒种不得邮寄，三类菌、毒种在邮寄时，应执行有关规定。 ⑷销毁 ①菌、毒种使用过程中须接受保管人员的监督，工作结束后，立即做好善 后处理，销毁时应有2人或以上人员参加，并做好销毁记录。因工作需要暂时保留的菌、毒株也应该按规定的时间销毁。

试剂、试液、培养基和检定菌管理规程

页次：共4 页第1 页 文件名称：试剂、试液、培养基和检定菌管理规程编码：03SMP02700 起草审核批准颁发部门质量保证部 日期日期日期实施日期 分发部门及份数：质量管理部1份、采购部1份 目的：为使购进的试剂、试药、培养基、检定菌能妥善保存，有计划合理地使用，制订本规程。 范围：检验使用的标准品、菌种、试剂与试液。 职责： 1.采购部：采购员负责试剂、试药、培养基和检定菌的采购。 2.检验人员对本制度实施负责，检验室主任对本制度有效执行承担监督检查责任。内容： 1.试剂、试药（含基准物质）、培养基和检定菌的购进 1.1 有计划购进试剂、试药（含基准物质）、培养基和检定菌。由QC填写需求计划单，由供应部统一从可靠的供应商购进，并对供应商进行评估。 1.2 药品微生物检验用的试验菌应来至认可的国内或国外菌种保藏机构的标准菌株，或是用于标准菌株所有相关特性等效的商业派生菌株，例如美国菌种收集中心（ATCC)和中国药品生物制品检定所医学菌种保藏中心（CMCC)。 1.3 微生物检定用的标准菌种，规定用中国药品生物制品检定所或当地药检所提供的冷冻干燥品。 2.试剂、试药（含基准物质）、培养基和检定菌的接收 2.1 试剂、试药（含基准物质）、培养基领取后，需有专人记录，接收应有接收记录，必要时应在每个试剂瓶或包装箱上贴上标签，标签上应注明接收日期和有效期；试剂的首次开启者应将试剂的开启日期同时标注于试剂标签上并签名。 2.2 检定菌应设专人接收保管，此人应受过专业培训，有足够的菌种保存经验。接收菌种时，应核实菌种的名称、编号、形态特征等，并调查清楚菌种的保存条件和注意事项。 2.3 填写菌种接收登记表。内容有：菌种名称、菌种编号、菌种批号、购买日期、菌种来源等。

检定菌管理规程

一、目的： 建立检定菌管理规程，规范检定菌的管理，为微生物实验的有效性提供前提保证。 二、范围： 适用于检验用菌种购买、接收、传代、保存、使用、销毁等的管理。 三、职责： 1、品质部：微生物检验员负责菌种的申购、接收、保存、分发、确认、传代、使用、销毁等相关工作。微生物负责监督与核查。 2、供应部：从负责从省药检所购入。 四、内容： 1、定义 标准菌株：中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏中心提供的冷冻干燥菌。 传代用菌种：是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种。 工作用菌种：是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工作使用菌种 代：将活的培养物接种到微生物生长的新鲜培养基中培养，任何形式的转种均被认为是传代1次。 2、申购及接收： 1.2 根据检验品种的需要，由检定菌保管员填写请购单。内容：菌种名称、编号、购买数量、用途等。报主管负责人审核批准。 1.3 检定菌保管员收到购得的菌种后，核对无误后方可登记入库，并填写菌种接收记录。内容：菌种名称、编号、来源、购买日期等。 3、保存： 3.1工作用菌种的保存 3.1.1工作用菌种采用低温斜面保存法。将菌种接到适宜的固体斜面培养基上，待菌种生长充分后，转至0-4℃冰箱保存。保存时间根据菌种种类不同：细菌一个月；芽孢及霉菌3个月 3.2传代用菌种的保存 3.2.1传代用菌种采用液体石蜡保存法 3.2.1.1无菌液体石蜡的制备：采用化学纯液体石蜡，将液体石蜡分装加塞，用牛皮纸包好，121℃灭菌30分钟，置40℃电热鼓风干燥箱中蒸发水分，备用。 3.2.1.2无菌液体石蜡管的制备：将菌种接种于适宜的斜面培养基中，在适宜的条件培养结束后，在生物安全柜内用无菌吸管吸取上述无菌液体石蜡至培养好的菌种管内，并使石蜡高出菌层表面1㎝使菌与空气隔绝，并将试管加上试管塞，用牛皮纸包好，置于0-4℃冰箱中保存。此保存法保存时间为一年

检定菌保存

检定菌保存、传代、使用、销毁标准操作规程 1．目的： 规范药品微生物学检定用菌的管理，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。 2．依据：ChP2010版（一部）、《中国药品检验标准操作规范》（2010年版）。3．范围： 本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的申购、保存、传代、使用及销毁等。 4．责任： 4.1.QC主管负责菌种的申购、接受、保存、分发。 4.2.微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。 5.相关文件及术语： 5.1．术语 标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。 传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种。 工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工作使用的菌种。 菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。 6.标准：

6.1．检定菌的申购 QC主管每年根据检定菌种的使用情况（包括临时检验需要），提出购买计划，交由质量管理部部长审批后，向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种（标准菌种）；也可以直接向省（市）药检所购买传代用菌种，购买时，需询问与确定菌种的代数，以便传代时控制代数。 6.2．检定菌的接收 菌种到达实验室后，由QC主管接收菌种，检查其名称和数量，以及每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《检定菌接收记录》（附表1）上，内容包括：名称、数量、编号（无编号者按检定菌种的编号原则编号）、代数、来源、接收日期、接收人等，并将其暂贮存于4～8℃冰箱中，在一周内必须完成转种。 6.3．检定菌的保存 6.3.1．工作用菌种的保存 工作用菌种采用斜面低温保存法。 将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌生长充分以后，转移至4～8℃冰箱中保存。此法仅用于工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，经应灭活处理后销毁。 保存时间根据菌种种类而不同，细菌：1个月；酵母菌：2个月；霉菌及芽胞：3个月。 6.3.2．传代用菌种的保存 采用甘油冷冻管保藏法或液体石蜡保存法。 6.3.2.1．甘油冷冻管保存法

检定菌的管理规程

检定菌的管理规程 一、目的：建立检定菌的管理规程，规范使用检定菌。 二、适用范围：本标准适用于质保部QC室的检验过程中 三、责任人：QC人员。 四、监督执行人：QC主任。 五、内容： 1、检定菌的验收 1.1从药检所购买回检定菌种后，立即由QC检验员验收。 1.2 检定菌种购买回后，保管人员应仔细检查，检定菌种名称和代码应与购买计划单相符，检定菌种的容器应完好、无破损及裂纹，符合要求时方能入库领用。 1.3填写检定菌种领用保存管理记录。记录内容应包括：检定菌种名称、数量、检定菌种编号、购买单位、贮存条件、领用时间等。 2、检定菌种的保存 保存的检定菌种必须具备相关细的历史及有关资料。这些资料应包括：名称及编号、购入日期、形态特征、最适宜培养条件、保存方法、贮存条件和保存地点等。 2.1常用保存法：将检定菌种按规定间隔时间接种在规定的培养基中，按规定的培养条件（温度和时间）培养后，再于普通冰箱中继续保存。 检定菌种保存条件与转种间隔时间 2.2转种并培养好的检定菌种，应在容器外加贴标签，注明检定菌种名称、检定菌种编码（或代码）、转种日期、传代次数等。我公司购进的检定菌种，传代次数，最多五代。 2.3检定菌种转种时须核对编码、传代次数、传代日期、所用培养基；培养好后应再与原种的编码、名称核对，检查培养特征无误后时方可继续保存并记录。每次转种传代一般7支，选第1支做传下代用，其余6支供试验用，试验前分别将6支供试验用菌种稀释到所需浓度（50～100cfu/ml），连续使用10～11天后销毁。 2.4每日检查保存菌种的冰箱温度，检查菌种管（瓶）的瓶塞是否松动、生霉，如有异常应及时处理，并记录。

菌种保存传代使用销毁管理规程操作规程

菌种保存传代使用销毁管理规程操作 规程

菌种管理制度 1、目的建立菌种保存、传代、使用、销毁标准操作规程，规范微生物学检定用菌种的管理，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。 2、适用范围本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的购买、保存、传代、使用及销毁等。 3、定义 ?标准菌株是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。 ?传代用菌种是指用标准菌株制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种。 ?工作用菌种是指用标准菌株或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工作使用的菌种。 ?菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。 4、职责 4.1部门主管负责菌种的申购、接收、保存分发。 4.2微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。 5、规程 5.1菌种的申购 部门主管根据菌种的使用情况，提出年度购买计划（包括临时检验需

要），填写申购流程，经审批后，向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种（标准菌株）或传代用菌种，购买时，需确定菌种的代数，以便控制传代代数。 5.2菌种的接收 菌种到达实验室后，由部门主管接收菌种，检查其名称和数量，以及每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《标准菌株库存记录》上，内容包括：名称、数量、编号（无编号者按检定菌种的编号原则编号）、代数、来源、接收日期、接收人等，并将其暂贮存于4～8℃冰箱中，在一周内必须完成转种。 5.3菌种的保存 5.3.1工作用菌种的保存 工作用菌种采用斜面低温保存法。将菌种接种在适宜的琼脂斜面培养基上，待菌生长充分以后，转移至4～8℃冰箱中保存。此法仅用于工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，经应灭活处理后销毁。保存时间根据菌种种类而不同，细菌：每个月转种一次；酵母菌及芽胞：3~6个月转种一次；丝状真菌每年转种一次。 5.3.2传代用菌种的保存 采用甘油冷冻管保藏法或液体石蜡保存法。 5.3.2.1甘油冷冻管保存法 用无菌接种环轻轻刮取经冷冻复溶增菌后并接种至平板或琼脂斜面的菌苔，并经过接种环与试管壁之间的轻轻摩擦而使细菌充分扩散到预先装入试管中的无菌纯化水中，调整菌液浓度，使其等同于10号比浊管，向

检定菌的管理制度

检定菌的管理制度 1目的 规范检定菌的管理制度，保证菌种的正常。 2范围 化验室使用的菌种。 3责任 化验室主管、化验员。 4制度 4.1菌种的购买和接收 4.1.1 检定菌应到中国药品生物制品检定所或当地药检所购买。 4.1.2检定菌应设专人保管，此人应受过专业培训，有足够的菌种保存经验。 4.1.3接收菌种时，应核实菌种的名称、编号、形态特征等，并调查清楚菌种的保存条件和注意事项。 4.1.4填写菌种接收登记表。内容有：菌种名称、菌种编号、菌种批号、购买日期、菌种来源等。 4.2菌种保存 4.2.1 菌种上应贴上明显的标签，标明名称、编号、购买日期等。 4.2.2 菌种保藏分四个阶段：①挑选特征典型的纯菌菌落；②确定保藏的合适菌体形态，孢子和芽胞代谢作用较弱，同时对恶劣环境有很强的抵抗力，因此对凡是能产生孢子或芽胞的微生物都用孢子和芽胞进行保藏；③选择最适宜的保藏法进行保藏；④定期对保藏菌种进行检查，观察是否发生变化，若有变化，需改变保藏方法，保藏期满应及时进行移种。 4.2.3菌种复苏参考方法：干菌种（0代）用100ml液体培养基复苏（1代），加入100ml40%无菌甘油，混匀，小量分装，于-20℃冷冻保存。每次使用取一支自然（室温）解冻，取0.1ml接种至10ml液体培养基，按规定培养、稀释（2代）。解冻后的菌种不能重复冷冻，传代后应进行灭活。 4.2.4一般采用琼脂斜面低温保藏法：将经常使用的菌种的典型菌落接种在新鲜的琼脂斜面、液体或半固体培养基中，按规定的温度和时间培养，待充分生长后，把培养好的新鲜菌种管用牛皮纸包好，为减缓培养基的水分蒸发，延长保藏时间，可将菌种保藏管的棉花塞换成无菌橡胶塞，放在4℃左右的冰箱内保藏。本法适用于经常使用的细菌、酵母菌、放线菌和霉菌保藏，各类菌种保藏条件及时间见附表1：各类细菌保藏条件与时限 4.2.5 每天检查一次保存菌种的冰箱温度，并作记录，每周检查菌种管的棉塞是否松动，菌种外观及干燥状态，如有异常应及时处理，并填写菌种检查记录。 4.2.6每次移植培养后，要与原种的编号、名称逐一核对，确认培养特征和温度无误后，再继续保存。

菌种管理规程

菌种管理规程 目的 规范药品微生物学检定用菌种的管理，最大限度降低变异率，确保菌种 的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。 范围 本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的申购、验收、保存、传代、使用及销毁等。 责任 ●质量控制处主管：负责菌种的申购。 ●微生物检验人员：负责菌种的验收、保存、传代、使用及销毁等。 ●质量控制处经理：负责菌种申购计划的审核及日常督促检查。 ●质量管理负责人：菌种申购计划的审核。 ●制造中心总监：菌种申购计划的批准。 相关术语 ●标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理 中心提供的冷冻干燥菌。 ●传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存 的菌种，用于传代及制备工作用菌种。 ●工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养 后，作为日常工作使用的菌种。 ●菌种的代是指将其接种至新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即称 为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。 相关文件 无 程序 1菌种的申购 质量控制处主管根据菌种的使用情况（包括临时检验需要），提出申购计划，由质量控制处经理、质量管理部负责人审核，制造中心总监批准后，向中国药品生物制品检定所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种（标准菌种）；也可

以直接向省（市）药检所购买传代用菌种。购买时，需询问和确定菌种的代数，以便传代时控制代数。同时在运输过程中注意严格按照保存条件要求进行。 2菌种的验收 菌种到达实验室后，由质量控制处微生物检验人员验收，检查其名称和数量，以及每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《菌种接收记录》上，内容包括：名称、数量、编号、代数、来源、接收日期、接收人等，新购入的0代原始菌种储存于－20℃，有效期为三年。从上级药检部门购买的已接种好的菌种斜面（3代）应检查菌种管是否完好。储存于2～8 ℃，有效期为3个月。新购进的菌种斜面应在一周内完成传代。 3 菌种的传代：菌种的传代因冻干菌（标准菌种）与传代用菌种而不完全相同。 3.1标准菌种的复苏、确认、传代 3.1.1 标准菌种的复苏步骤如下： 把冻干菌种管、灭菌毛细滴管（1ml）、双碟、镊子、营养肉汤培养基（或其它适宜培养基）数支，移入接种室或超净工作台。 将冻干菌种管外壁用碘酒擦洗消毒，稍干，用75%乙醇棉擦净，放在灭菌双碟内，待干。点燃酒精灯，将标准菌种管的封口一端在火焰上， 烧灼红热，用灭菌毛细滴管吸取营养肉汤培养基（或其它适宜的培养 基），滴在灼热的菌种管封口一端，使骤冷而炸裂。 取灭菌镊子，在火焰旁，将炸裂的管口打开，放入灭菌双碟内，另取1支灭菌毛细滴管，在火焰旁吸取营养肉汤培养基（或其它适宜的培 养基）少许，加至菌种管底部，将冻干菌块搅动促使溶解，随即吸出 管内菌液，接种至营养肉汤培养基（或其它适宜的培养基）内，并根 据不同菌种类型而将其培养于相宜的温度下24～72h（细菌需要 24～ 48h的培养物，酵母菌需要72h的培养物，形成孢子的微生物则宜保 藏孢子）。最后将毛细滴管及菌种管经高温灭菌（121℃，30分钟）。 黑曲霉的菌悬液先室温待菌悬液融化后用无菌吸管吸取管内液体1～2 滴滴在改良马丁琼脂斜面上，用吸管涂布均匀，置23～28℃培养5～7

实验室菌种管理规程

实验室菌种管理规程 目的：保证菌种合理、有效地使用和保存，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，保证实验室和社会的生物安全。 职责：主管负责菌种的出入库保管、保存、分发，组员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。 范围：本规程适用于实验室菌种的管理，包括菌种的保存、传代、使用及销毁等。 1菌种的保存 工作用菌种的保存 工作用菌种采用平板低温保存法。将菌种接种在适宜的固体培养基上，待菌生长充分以后，转移至2?8C冰箱中保存。此法仅用于工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，经应灭活处理后销毁。保存时间为 1 周，超过该期限前挑取单菌落重新于琼脂平板划线活化，若菌落活力下降则从-80 C冰箱中取用甘油冷冻管。 传代用菌种的保存 采用甘油冷冻管保藏法。 甘油冷冻管保存法 用无菌接种环轻轻刮平板上的单菌落并接种至适宜的液体培养内，置 于适宜的培养条件下培养，菌液充分振荡后取适宜体积加入到已灭菌的冷冻管内，再加入等体积的无菌甘油（浓度40%），即为20%甘油菌悬液，轻轻振摇，使内容物充分混合，在-80 C冷冻条件下保存，保存期限为3年。 每个菌株保存至少30 个无菌冷冻管。使用时，取出一支放至室温，接种增菌

培养或接种至琼脂平板复苏，挑取纯菌落传代或工作用。 2菌种的传代 工作用菌种的传代 当工作用菌种代数小于 5 时，在规定保存期限内，可直接用上一代工 作用菌种转接下一代工作用菌种。取在冰箱2?8 C保存的工作用菌种用普通琼脂平板传代，并将新传代的培养物替代原有的菌种，作为工作用菌种。 也可取用“甘油冷冻管保藏法”保存的菌种，进行复苏，直接作为工作用菌种。菌种每 1 周传代一次，当超过 5 代，须用“甘油冷冻管保藏法”保存的原始菌种传代。 传代用菌种的传代 首先划线接种确认，根据日常检验工作的需要量，挑取纯菌落转接平 板，作为工作用菌种；同时，结合菌种的代数和最长保存期限，挑取纯菌落制成菌悬液，按“”的方法制备甘油冷冻管数支，作为传代用菌种。 传代时注意事项 无菌操作，使菌株不死亡，不污染、不丢失。同时实验人员也要采取有效的预防措施进行自我保护，如工作时必须穿工作服，佩带无菌手套，实验完成以后消毒实验进行的区域、实验仪器和器具。如发生意外，如菌种泄漏或人员受伤，应立即向主管报告以便及时进行处理。 3菌种的保管 实验室全部菌种都应由菌种负责人记录在册，并输入电脑以电子版形式存 档，以便查找。菌种上应贴上明显的标签，标明名称、培养基、保种人、日期、编号等。菌种设专人加锁保管，并对所保存的菌种建立《菌种保存、领用登记台账》（附表3）。 菌种的定期检查 在菌种的保存期间，应每天检查保存菌种冰箱的温度、菌种管的塞子是否松动或生霉，如有异常应及时处理。