尼氏染色液(甲苯胺蓝法)

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仅供科研 版本号：180917

尼氏染色液(甲苯胺蓝法)

【产品组成】

【保存条件】

室温,避光,12个月

【产品概述】

神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒，即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH 和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏物质，也可以显示神经元的细胞核和神经胶质。尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质，能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。各种神经细胞内都含有尼氏体，但其形状、数量、分布位置常常不同。尼氏体也存在于树突中，但不在于轴突和包体的轴丘。尼氏体会因为生理状态的变化而变化，尼氏体是神经元内合成蛋白质合成的重要部位，当神经元受到刺激后，包体内的尼氏体会明显减少。

尼氏染色液(Nissl Stain ，甲苯胺蓝法)采用甲苯胺蓝(Toluidine blue)作为核心染料，可以用于石蜡组织切片的尼氏体染色，尼氏体的存在和消失是神经细胞是否受损的重要指标，当发生脑炎、脑缺血、轴突反应等情况时，尼氏体会发生溶解甚至消失。

【使用方法】

1、新鲜组织固定于乙醇、Carnoy 固定液或10%中性福尔马林溶液后，常规脱水包埋。

2、切片厚6-8μm ，常规脱蜡至水。

3、蒸馏水冲洗。

4、切片入Toluidine blue Stain ，将染色缸置于恒温箱50-60℃浸染25-50min 。

5、蒸馏水稍冲洗。

6、入

70%乙醇冲洗。

7、95%乙醇迅速分化。分化不易控制，如果分化失败，可重复步骤4。

8、无水乙醇迅速脱水。二甲苯透明，中性树胶封固。

【染色结果】

【注意事项】

1、尼氏体离体后容易溶解，所以组织取出后应立即固定，否则难以着色。

2、组织固定起着非常重要的作用，固定可采用乙醇、Carnoy 固定液或中性福尔马林溶液。

3、本染色液对石蜡组织切片的尼氏染色效果较好。

4、染色后的标本务必避光保存，否则容易褪色。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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尼氏Nissl染色

尼氏(Nissl)染色液 产品简介： 碧云天生产的尼氏(Nissl)染色液(Nissl Staining Solution)是神经生物学家广泛使用的一种Nissl染色液，用于石蜡或冰冻切片神经元细胞浆中的尼氏小体(Nissl body)染色。 Nissl染色是以德国的精神病学家和神经病理学家Franz Nissl的名字命名的。 Nissl染色液染色后呈蓝紫色，常用于显示脑或脊髓的基本神经结构。Nissl小体大而数量多，说明神经细胞合成蛋白质的功能较强；相反在神经细胞受到损伤时，Nissl小体的数量会减少甚至消失。 本Nissl染色液染色的有效成分是Cresyl violet。Cresyl violet可以和RNA或DNA结合，可以染色粗面型内质网上的核糖体，也可以染色细胞核。染色后使细胞体呈现斑驳的(mottled)蓝紫色染色。 一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。 保存条件： 室温避光保存，至少一年有效。 注意事项： 特别注意：Nissl染色液的染色能力很强，并且染色后很难去除，请注意勿使染色液沾染皮肤和衣物等。 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片，需自备90％乙醇，无水乙醇以及二甲苯。 样品数量较多时，可以使用碧云天生产的染色架和染色缸，便于操作。 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 1. 样品处理 a) 对于石蜡切片： 二甲苯中脱蜡5-10分钟，共三次。注：脱蜡不充分会导致染色不均匀。 无水乙醇5分钟。 90%乙醇2分钟。 70%乙醇2分钟。 蒸馏水2分钟。 b) 对于冰冻切片： 蒸馏水2分钟。 c) 对于培养细胞： 用4%多聚甲醛固定10分钟以上。 蒸馏水洗涤2分钟。 换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。 2. 尼氏(Nissl)染色 对于上述处理好的样品： 尼氏(Nissl)染色液染色染色3-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间，染色时温度提高到37-50℃对于25-50微米等较厚的切片可以使染色更均匀）。 蒸馏水洗涤2次(每次数秒钟即可)。 95%乙醇约5秒。 此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照

HE染色和尼氏染色

HE染色 .HE染色简介: 苏木精一伊红染色法（hematoxylin-eosin staining ），简称HE染色法，石 蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝, 如处理适宜，可使细胞核着清楚的深蓝色，胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆，使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。 .实验步骤: 1.脱蜡: 将石蜡切片在65C烘箱中烘烤40-60分钟，后用二甲苯（I）、（n）浸泡，各 15min ；2.水化： 无水酒精（100%乙醇）2min,下行至90%、80%、70%酒精各2min,蒸馏水（I）、 (U)各2min； 3.染色: 石蜡画圈，用滴管滴加苏木素在脑片上，放湿盒40s；（苏木素需要回收） 4.流水浸洗: 把玻片装入玻片铁架子里，在1L烧杯里用自来水对玻片进行流水浸洗；（脑片 不要对着水流直接冲） 5.1%盐酸酒精分化: 快速提拉2-3下，用时3-5s左右; 6.流水浸洗: 自来水洗3次，每次20min ； 7.伊红染色: 时间15min ； 8.流水浸洗; 9.脱水:

先在通风橱外的70%酒精浸没，时长2-3S,以颜色适宜为准，再放入通风橱中脱水，70%、80%、90%2-3s, 100%酉精I、n 1min，二甲苯I、n 2min； 10.封片: 上述处理好的玻片，取中性树胶滴入载玻片的组织上，取盖玻片从一端逐步盖下去，避免发生气泡 三.结果的判断: 3.1实验结果: 细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。 着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。例 如，细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。 3.2 HE染色评定标准: (1)切片完整，厚度4-6微米，厚薄均匀，无皱褶无刀痕; (2)染色核浆分明，红蓝适度，透明洁净，封裱美观。 四?注意事项: 1?染色之前一定要了解清楚所用的染色液的配制方法，不同的染色液染色后的 处理是不一样的。 2?染色过程中所用的时间以及酒精梯度脱水的选择要根据染色时的室内温度、染液的新鲜程度及实验室的实际情况等灵活掌握。在室温高、切片、染色液又是新配制的，染色时间就要短，反之时间就长。

软骨染色液(甲苯胺蓝法)染色步骤及注意事项

软骨染色液(甲苯胺蓝法)染色步骤及注意事项 货号：G2543 规格：100ml 保存：室温，避光，12个月。 产品说明： 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料,属于醌亚胺染料类。这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团，还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色；肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色。甲苯胺蓝染色液(甲苯胺蓝法)呈强碱性，更利于组织细胞的着色。操作说明：（仅供参考） 1、常规脱钙，包埋，固定。 2、石蜡切片入二甲苯2次。 3、系列乙醇各1min。自来水洗2min。 4、入Toluidine Blue O Stain浸染30min。根据不同组织，染色时间不完全相同。 5、自来水洗2min，滤纸吸干水分。 6、丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。 7、逐级乙醇脱水。 8、二甲苯透明，中性树胶封固。 染色结果： 软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。

注意事项： 1、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。 2、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。 3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 相关试剂： G3661甲苯胺蓝染色液(1%,磷酸盐法) G3662甲苯胺蓝染色液(0.5%,磷酸盐法) G3665甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)

尼氏染色步骤

小鼠脑冰冻切片后，想做尼氏染色，用焦油紫，具体步骤是什么？焦油紫的溶液该如何配制？ 焦油紫染液的配制： 焦油紫/0.1g 蒸馏水/99ml 1%冰醋酸1ml 冰冻切片氯仿中1分钟； 无水酒精中1分钟； 95%酒精、70%酒精各1分钟，蒸馏水洗片刻； 进入焦油紫染液染色30分钟（37度温箱中染色10分钟），蒸馏水洗涤； 95%酒精分色； 常规脱水、透明、封片。 尼氏体呈紫色，细胞核呈淡紫色，胶质细胞呈淡紫色。 mickeyzq wrote: 焦油紫染液的配制： 焦油紫/0.1g 蒸馏水/99ml 1%冰醋酸1ml 冰冻切片氯仿中1分钟； 无水酒精中1分钟； 95%酒精、70%酒精各1分钟，蒸馏水洗片刻； 进入焦油紫染液染色30分钟（37度温箱中染色10分钟），蒸馏水洗涤； 95%酒精分色； 常规脱水、透明、封片。

尼氏体呈紫色，细胞核呈淡紫色，胶质细胞呈淡紫色。 你的没有经过复染，对比也可以这么鲜明啊 我用的是1％的甲苯胺蓝，具体步骤是： 常规石蜡切片，二甲苯透明，酒精梯度复水，入1％甲苯胺蓝室温下染3min，自来水冲洗，95％酒精分化，0.5％伊红复染1s，水洗，透明封片，但是结果不好，伊红复染后颜色很深，原来的蓝色被覆盖的很严重，不知道该怎么改进 换焦油紫看看,焦油紫着色比较深. （二）神经细胞尼氏体染色 正常的神经细胞都含有一定数量的尼氏化，它们主要分布于神经细胞的浆中，形状有大有小，如三角形，有的为椭圆形。这些物质能被大部分的蓝色染料所染色，这些染料如焦油坚牢紫（Cresyl fast violet）亚甲蓝（methylene blue）甲苯胺蓝（toluidine blue）硫董（thionin）等钭其染为蓝色。但是，当神经细胞受伤后，胞质内的尼氏体更可发生变化，严重的可消失。 焦油坚牢紫显示尼氏体 焦油坚牢紫1g 蒸馏水100ml *作方法： 1、切片脱蜡至水 2、用焦油坚牢紫水溶液浸染20-30分钟 3、水洗 4、用95%酒精分化 5、无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶 结果：神经细胞单位：紫-蓝色 细胞核：紫-蓝色 尼氏体：紫-深蓝色 注意：1、应用酒精分化切片，要迅速，防止过度分化，将切片上的颜色全部脱掉。 神经纤维染色 使用说明： 1. 样品处理 a) 对于石蜡切片： 二甲苯中脱蜡5-10分钟，共三次。注：脱蜡不充分会导致染色不均匀。 无水乙醇5分钟。 90%乙醇2分钟。 70%乙醇2分钟。 蒸馏水2分钟 2. 尼氏(Nissl)染色 对于上述处理好的样品：

病理学技术—特殊染色最最全总结

结缔组织染色法 Mallory三色染色法 蓝色：胶原和网状纤维 淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质 红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒 橘红色：髓鞘、红细胞 图表 A 染色，显示胶原纤维，A组排列规则 . Masson三色染色法 绿色：胶原纤维 红色：肌纤维 橘红色：红细胞 图表 B Mssson三色法 图表 C 三色染色胃癌组织中血管平滑肌 . 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法 红色：胶原纤维 黑色：网状纤维 绿色：弹性纤维 淡黄色：肌肉、红细胞

二、胶原纤维染色法 . Van Gieson（）苦味酸-酸性品红法 鲜红色：胶原纤维 黄色：肌纤维、细胞质、红细胞 蓝褐色：胞核 图表 E 2.胶原纤维，Van Gieson.)苦味酸-酸性品红法 图心肌梗塞 myocardial infarction：心肌梗塞后2个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。 天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法(参照上图)

黄色：其他 三、网状纤维染色 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）

黄棕色：胶原纤维 淡红色：细胞质（红液复染） 图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法 Gomori氏银氨液配制法 图表 G Gomori氏银氨液配制法 四、弹性纤维染色 Gomori醛复红染色法 *甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳 图表 H 醛复红染色法 五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法 蓝绿色：弹性纤维 红色：胶原纤维 黄色：背景

六、肌肉组织染色 △横纹肌组织染色 Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH） 蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨 微紫色：粗弹性纤维（有时） 紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌 图表 J .磷钨酸苏木素法 图表 K .磷钨酸苏木素染色液 △早期心肌病变组织染色 染色法（1974年）

甲苯胺蓝染色液(0.5%,磷酸盐法)使用说明

甲苯胺蓝染色液(0.5%,磷酸盐法)使用说明 货号：G3662 规格：100ml 保存：室温，避光，12个月。 产品说明： 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料,属于醌亚胺染料类。这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团，还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色。 操作说明：（仅供参考） (一)肥大细胞染色 1、脱蜡至蒸馏水。 2、浸染于甲苯胺蓝染色液10-15min，具体的染色时间根据切片厚度和组织的不同而定。 3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。 4、(可选)0.5%冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。 5、快速95%和无水乙醇脱水。 6、二甲苯透明，封固。 染色结果：肥大细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。 (二)软骨染色 1、石蜡切片入二甲苯2次每次15min。

2、系列乙醇各1min。 3、自来水洗2min。 4、入Toluidine Blue O Stain浸染30min。 5、自来水洗2min，滤纸吸干水分。 6、丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。 7、逐级乙醇脱水。 8、二甲苯透明，中性树胶封固。 染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。 (三)细胞涂片染色 1、用20%的乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液,一般要求稀释到0.1%即可。 2、细胞涂片后，立即放入95%的乙醇中固定，取出放在纸巾上。 3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。 4、将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。 5、无需干燥，直接镜检。 染色结果：细胞核、淋巴细胞呈深蓝色；核仁呈紫红色；红细胞呈橘红；细胞质、单核细胞呈淡蓝色。 (四)原位杂交染色 1、用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度，凭经验一般稀释比例大于1:100。 2、玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。 3、在蒸馏水或去离子水浸泡数次。 4、按需求进行压片固定。 注意事项：

尼氏染色液(亚甲蓝法)操作步骤及注意事项

尼氏染色液(亚甲蓝法)操作步骤及注意事项 货号：G1434 规格：3×50ml 保存：室温，避光，6个月。 产品内容： 规格 3×50ml Storage 名称 试剂(A):Methylene Blue Stain50ml RT避光 试剂(B):Nissl Differentiation50ml RT 试剂(C):Ammonium Molybdate Solution50ml RT 产品简介： 尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质，能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。 尼氏染色液(Nissl Stain，亚甲蓝法)主要优点是操作简便、染色稳定、适用范围广，可以用于石蜡组织切片的尼氏物质、神经元等的染色，尼氏体的存在和消失是神经细胞是否受损的重要指标，当发生脑炎、脑缺血、轴突反应等情况时，尼氏体会发生溶解甚至消失。 操作步骤(仅供参考)： 1、新鲜组织固定于20%甲醛液中，常规脱水包埋。 2、切片厚5μm，常规脱蜡至水。 3、Methylene Blue Stain滴染10min。 4、入Nissl Differentiation分化，在显微镜下观察至尼氏体清晰为止。

5、入Ammonium Molybdate Solution处理切片数分钟。 6、蒸馏水冲洗。 7、常规脱水透明，中性树胶封固。 染色结果： 尼氏小体蓝色 背景红色或粉红色 注意事项： 1、尼氏体离体后容易溶解，所以组织取出后应立即固定，否则难以着色。 2、组织固定起着非常重要的作用，固定可采用乙醇、Carnoy固定液或中性福尔马林 溶液。 3、本染色试剂盒对石蜡组织切片的尼氏染色效果较好。 4、石蜡切片厚度7～10μm或25μm(皮质神经元密度的评估要用25μm厚的切片)。

Cole氏苏木素染色液(常规染色)使用介绍

Cole氏苏木素染色液(常规染色) 产品说明： 苏木素是组织化学和免疫组织化学中最常用的染料之一，可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色等配合使用。可以在苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。染色步骤简单，操作时间短。苏木素染色后细胞核呈现蓝色。 使?说明: 1、样品处理 a)对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5-10 分钟。换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10 分钟。无水乙醇5 分钟。90% 乙醇2 分钟。70%乙醇 2 分钟，蒸馏水2 分钟， b)对于冰冻切片：蒸馏水2 分钟， c)对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10 分钟以上，蒸馏水洗涤2 分钟，换用新鲜的蒸馏水，再洗涤 2 分钟。 2、苏木素（HE）染色对于上述处理好的样品，用苏木素染色5-10 分钟（可以根据染色结果和要求调整时间），用自来水洗去残留的染色液，约10 分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。 3、脱水、透明、封片或进行其它染色 a)脱水、透明、封片：95%乙醇脱水2 分钟，换用新鲜的95%乙醇再脱水2 分钟；二甲苯透明 5 分钟，换用新鲜的二甲苯，再透明 5 分钟，用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞核呈蓝色。 b)进行其它染色：如果进行免疫荧光染色或荧光染料染色，在苏木素染色后，70％乙醇洗涤2 次，每次 2 分钟。再用PBS 或生理盐水或TBS 或TBST 等用

于荧光染色的溶液浸泡 5 分钟。然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。 注意事项： 1、第一次使用本试剂时建议先取1-2 个样品做预实验。样品数量很多时，可使用染色架和染色缸，以便于操作。 2、本产品亦可反复使用多次，但染色效果会逐渐降低。 3、染色过程推荐浅染，通常只需能够分辨细胞核即可，颜色过深有可能影响细胞质颜色。 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 产地：国产 提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。 保存：室温避光储存，有效期至少12 个月。 关键词：Mayer'苏木素染液(免疫组化) Mayer'苏木素染液(免疫组化)相关染色产品:

甲苯胺蓝染色液(1%,磷酸盐法)

甲苯胺蓝染色液(1%,磷酸盐法) 简介： 甲苯胺蓝(T oluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。 组成： 操作步骤(仅供参考)： (一)肥大细胞染色 1、脱蜡至蒸馏水。 2、根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液。 3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。 4、(可选)0.5%冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。 5、快速95%和无水乙醇脱水。 6、 二甲苯透明，封固。 染色结果：肥大细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。 (二)软骨染色 1、 石蜡切片入二甲苯2次每次。 2、 系列乙醇各1min 。 3、 自来水洗2min 。 4、 入Toluidine Blue O Stain 浸染。 5、 自来水洗2min ，滤纸吸干水分。 6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。 7、 逐级乙醇脱水。 8、 二甲苯透明，中性树胶封固。 染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。 (三)细胞涂片染色 编号 名称 DA0055 Storage Toluidine Blue O Stain(1%,磷酸盐法) 100ml RT 避光 使用说明书 1份

1、用20%的乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释到0.1%即可。 2、细胞涂片后，立即放入95%的乙醇中固定，取出放在纸巾上。 3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。 4、将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。 5、无需干燥，直接镜检。 染色结果：细胞核、淋巴细胞呈深蓝色；核仁呈紫红色；红细胞呈橘红；细胞质、单核细胞呈淡蓝色。 (四)原位杂交染色 1、用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度，凭经验一般稀释比例大于1:100。 2、玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。 3、在蒸馏水或去离子水浸泡数次。 4、按需求进行压片固定。 注意事项： 1、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应 相应延长。 2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)

甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法) 简介： 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。另外，肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，临床上经常用于肥大细胞染色。 Leagene 甲苯胺蓝染色液(Toluidine Blue,1%,硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性，更利于组织细胞的着色。 组成： 操作步骤(仅供参考)： (一)肥大细胞染色 1、脱蜡至蒸馏水。 2、根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液。 3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。 4、冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。 5、快速和无水乙醇脱水。 6、 二甲苯透明，封固。 染色结果：肥大细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。 (二)软骨染色 1、 石蜡切片入二甲苯。 2、 系列乙醇各。 3、 自来水洗。 4、 入Toluidine Blue O Stain ，浸染。 5、 自来水洗，滤纸吸干水分。 6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。 7、 逐级乙醇脱水。 编号 名称 DA0059 Storage Toluidine Blue O stain (0.5%,硼酸盐法) 100ml RT 避光 使用说明书 1份

8、二甲苯透明，中性树胶封固。 染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。 (三)细胞涂片染色 1、用乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释即可。 2、细胞涂片后，立即放入乙醇中固定，取出放在纸巾上。 3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。 4、将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。 5、无需干燥，直接镜检。 染色结果：细胞核、淋巴细胞呈深蓝色；核仁呈紫红色；红细胞呈橘红；细胞质、单核细胞呈淡蓝色。 (四)原位杂交染色 1、用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度，凭经验一般稀释比例大于1:100。 2、玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。 3、在蒸馏水或去离子水浸泡数次。 4、按需求进行压片固定。 注意事项： 1、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应 相应延长。 2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期：12个月有效。 相关： 编号名称 DA0056甲苯胺蓝染色液(0.5%,磷酸盐法) DC0032Masson三色染色液 DG0005糖原PAS染色液 DH0006苏木素伊红(HE)染色液 TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)

甲苯胺蓝染色液(软骨专用)使用说明书

甲苯胺蓝染色液(软骨专用)使用说明书 货号：G2493 规格：100ml 保存：室温，避光，12个月。 产品说明： 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料,属于醌亚胺染料类。这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团，还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色；肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色。甲苯胺蓝染色液(Toluidine Blue，1%，硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性，更利于组织细胞的着色。 操作说明：（仅供参考） 1、常规脱钙，包埋，固定。 2、石蜡切片入二甲苯2次，每次15min。 3、系列乙醇各1min。自来水洗2min。 4、入Toluidine Blue O Stain浸染15-20min。根据不同组织，染色时间不完全相同。 5、自来水洗2min，滤纸吸干水分。 6、丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。 7、逐级乙醇脱水。 8、二甲苯透明，中性树胶封固。 染色结果： 软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。 注意事项： 1、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。

2、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。 3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 相关产品： G3661甲苯胺蓝染色液(1%,磷酸盐法) G3662甲苯胺蓝染色液(0.5%,磷酸盐法) G3665甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)

病理技术卫生考试常考固定液与特殊染色总结

单纯固定液 甲醛：能固定类脂和脂类，但必须冷冻切。也可固定高尔基体、线粒。是糖的保护剂。体除去甲醛色素的方法：Verocay法，乙醇配氨水；Schride法。 重铬酸钾Zenker，Helly，Maximov，Regaud。 苦味酸：易燃易爆，强酸，糖类；可以软化皮肤，易于切片。不宜用火棉胶包埋。70%乙醇中加浓氨水去除固定产生的黄色。 三氯醋酸：SUSa液的主要成分，使蛋白沉淀，良好的脱钙剂。 升汞：针状结晶，组织收缩明显。不能固定类脂和糖类。可固定蛋白，固定后需用碘液脱汞 乙醇：固定兼有脱水作用，糖原的固定，纤维蛋白和弹性纤维固定。浓度80-95%。 醋酸：固定染色体，清楚的显示细胞核，但组织膨胀明显，尤其对于胶原纤维和纤维蛋白。 铬酸避光保存。不能固定脂肪。固定后流水冲洗大于24h。 饿酸 延长固定时间，脆性增加，对染色不力。1%高锰酸钾脱碘，固定后流水冲洗12-24h。 丙酮：酶组织化学。丙酮对组织块的收缩作用强于乙醇，对糖原无固定作用。 异丙醇：是乙醇良好的替代品，组织收缩小，硬化作用较弱；不能再用于火棉胶的包埋。 叔丁醇：脱水后可不经透明，直接浸蜡。电镜标本中常用作中间脱水剂。 环氧己烷：不引起组织收缩和硬化，常用于植物标本制作，价格贵。 四氢呋喃：既是脱水剂，又可以作为封片溶媒。 环己酮：代替乙醇作脱水剂和随后的浸蜡和包埋。 混合固定液 B-5固定液：固定淋巴组织，配方无水醋酸钠-升汞-甲醛，染色前脱汞处理； Muller液：媒染和硬化神经组织，需常更换液体，固定作用缓慢。 Bouin液：结缔组织 比较差。不适宜长期固定（12-24h）。固定后组织被染成黄色需用70%-80%乙醇洗涤。

甲苯胺蓝水溶液(0.1%)

甲苯胺蓝水溶液(0.1%) 简介： 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。另外，肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，临床上经常用于肥大细胞染色。 Leagene 甲苯胺蓝水溶液(0.1%)由甲苯胺蓝、去离子水组成，一般用于特殊细胞的染色，不推荐用于软骨、胃粘膜等难染组织的染色。 组成： 操作步骤(仅供参考)： (一)肥大细胞染色 1、脱蜡至蒸馏水。 2、根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液。 3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。 4、冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。 5、快速和无水乙醇脱水。 6、 二甲苯透明，封固。 染色结果：肥大细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。 (二)细胞涂片染色 1、细胞涂片后，立即放入乙醇中固定，取出放在纸巾上。 2、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。 3、将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。 4、无需干燥，直接镜检。 染色结果：细胞核、淋巴细胞呈深蓝色；核仁呈紫红色；红细胞呈橘红；细胞质、单核细胞呈淡蓝色。 (三)原位杂交染色 编号 名称 DA0051 Storage 甲苯胺蓝水溶液(0.1%) 100ml RT 避光 使用说明书 1份

HE染色和尼氏染色

HE染色 一．HE染色简介： 苏木精—伊红染色法( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法，石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝，如处理适宜，可使细胞核着清楚的深蓝色，胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆，使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。 二．实验步骤： 1.脱蜡： 将石蜡切片在65℃烘箱中烘烤40-60分钟，后用二甲苯（Ⅰ）、（Ⅱ）浸泡，各15min；2.水化： 无水酒精（100%乙醇）2min，下行至90%、80%、70%酒精各2min，蒸馏水（Ⅰ）、（Ⅱ）各2min； 3．染色： 石蜡画圈，用滴管滴加苏木素在脑片上，放湿盒40s；（苏木素需要回收） 4.流水浸洗： 把玻片装入玻片铁架子里，在1L烧杯里用自来水对玻片进行流水浸洗；（脑片不要对着水流直接冲） 5.1%盐酸酒精分化： 快速提拉2-3下，用时3-5s左右； 6.流水浸洗： 自来水洗3次，每次20min； 7.伊红染色： 时间15min；

8.流水浸洗； 9.脱水： 先在通风橱外的70%酒精浸没，时长2-3s，以颜色适宜为准，再放入通风橱中脱水，70%、80%、90%2-3s，100%酒精Ⅰ、Ⅱ1min，二甲苯Ⅰ、Ⅱ2min；10．封片： 上述处理好的玻片，取中性树胶滴入载玻片的组织上，取盖玻片从一端逐步盖下去，避免发生气泡 三．结果的判断： 3.1实验结果： 细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。 着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。例如，细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。 3.2 HE染色评定标准： （1）切片完整，厚度4-6微米，厚薄均匀，无皱褶无刀痕； （2）染色核浆分明，红蓝适度，透明洁净，封裱美观。 四．注意事项： 1．染色之前一定要了解清楚所用的染色液的配制方法，不同的染色液染色后的处理是不一样的。 2．染色过程中所用的时间以及酒精梯度脱水的选择要根据染色时的室内温度、染液的新鲜程度及实验室的实际情况等灵活掌握。在室温高、切片、染色液又是新配制的，染色时间就要短，反之时间就长。

病理技术卫生考试常考固定液与特殊染色总结电子教案

病理技术卫生考试常考固定液与特殊染色 总结

单纯固定液 甲醛：能固定类脂和脂类，但必须冷冻切。也可固定高尔基体、线粒。是糖的保护剂。体除去甲醛色素的方法：Verocay法，乙醇配氨水；Schride法。 重铬酸钾 Zenker，Helly，Maximov，Regaud。 苦味酸：易燃易爆，强酸，糖类；可以软化皮肤，易于切片。不宜用火棉胶包埋。 70%乙醇中加浓氨水去除固定产生的黄色。 三氯醋酸：SUSa液的主要成分，使蛋白沉淀，良好的脱钙剂。 升汞：针状结晶，组织收缩明显。不能固定类脂和糖类。可固定蛋白，固定后需用碘液脱汞 乙醇：固定兼有脱水作用，糖原的固定，纤维蛋白和弹性纤维固定。浓度80-95%。 醋酸：固定染色体，清楚的显示细胞核，但组织膨胀明显，尤其对于胶原纤维和纤维蛋白。 铬酸避光保存。不能固定脂肪。固定后流水冲洗大于24h。 饿酸 几天配制。延长固定时间，脆性增加，对染色不力。1%高锰酸钾脱碘，固定后流水冲洗12-24h。 丙酮：酶组织化学。丙酮对组织块的收缩作用强于乙醇，对糖原无固定作用。异丙醇：是乙醇良好的替代品，组织收缩小，硬化作用较弱；不能再用于火棉胶的包埋。

叔丁醇：脱水后可不经透明，直接浸蜡。电镜标本中常用作中间脱水剂。 环氧己烷：不引起组织收缩和硬化，常用于植物标本制作，价格贵。 四氢呋喃：既是脱水剂，又可以作为封片溶媒。 环己酮：代替乙醇作脱水剂和随后的浸蜡和包埋。 混合固定液 B-5固定液：固定淋巴组织，配方无水醋酸钠-升汞-甲醛，染色前脱汞处理；Muller液：媒染和硬化神经组织，需常更换液体，固定作用缓慢。 Bouin液：结缔组织 鲜明，细胞质比较差。不适宜长期固定（12-24h）。固定后组织被染成黄色需用70%-80%乙醇洗涤。 Orth：胚胎，神经，脂肪均可。需在暗处固定24h。 Carnoy液：胞质和胞核，染色体，糖原保存，尼氏体；不能保存脂类。Helly固定液：含有氧化剂和还原剂，临时配制，久置失效。 PFG：肽类抗原固定，用于免疫电镜研究。 PLP和PLPD（含有过碘酸钠） Rossman： Zenker固定液：形态学研究常用固定液。不适宜固定含血量较多的标本，脾肾；对免疫球蛋白效果最好，对病毒包涵体固定也较好。不能用金属容易盛放，也不能用金属镊子夹取组织块。固定后流水冲洗12H，在70%乙醇脱水时加入碘脱汞。PATH染色用该液固定。嗜铬细胞染色；三色染色。 中性缓冲甲醛液：为免疫组化最常用。24h内为宜 中性甲醛液：为最常用的固定液。

SD大鼠甲苯胺蓝染色步骤

SD大鼠甲苯胺蓝染色步骤 1、甲苯胺蓝染色法鉴定软骨细胞表型 Ⅱ代软骨细胞以2x105／ml的密度接种到铺有多聚赖氨酸盖玻片的24孔细胞培养板中，与原代培养条件相同，制作细胞爬片，常规培养48h后行甲苯胺蓝染色。 具体操作步骤如下： (1)倾去培养液，PBS充分漂洗3次，加入10％的中性甲醛常温下固定30min。 (2)倾去10％的中性甲醛，PBS充分漂洗3次，加入70％的乙醇固定30min除去四价铵离子，以免影响染色。 (3)倾去70％的乙醇溶液，PBS充分漂洗3次，晾干，加入甲苯胺蓝乙醇液(甲苯胺蓝0.2g 溶于30％乙醇100m1)染色_20min。 (4)PBS充分漂洗3次，迅速用无水乙醇再漂洗1次。 (5)取出爬片，干燥后中性树脂封片，电子显微镜下观察、摄片。 2、型胶原免疫细胞化染色法鉴定软骨细胞表型 Ⅱ代软骨细胞以2×105／ml的密度接种到铺有多聚赖氨酸盖玻片的24孔细胞培养板中，与原代培养条件相同，制作细胞爬片，常规培养48h后行免疫细胞化学法染色。实验过程严格遵照免疫细胞化学染色试剂盒说明书进行操作，PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照组。 具体操作步骤如下： (1)倾去培养液，冰冷的PBS漂洗3x3min，加入4%多聚甲醛1ml室温固定15min。 (2)PBS清洗标本3x3min，每张标本滴加1滴新鲜配制的3％H202，室温下孵育10min。 (3)PBS清洗标本3x3min，每张标本滴加穿膜液0.5m](0.1％timton+o.1M Glycine)冰上孵育 30min。 (4)PBS清洗标本3x3min，每张标本滴加5mg／ml的动物非免疫封闭血清(BSA)0.5ml，室温 下封闭1h。 (5)滴加1：150稀释的兔抗大鼠II型胶原多克隆抗体50ul于封口膜上，使标本与一抗充分 接触，置于湿盒中4℃过夜。PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照组。 (6)PBS清洗标本3x3min，加入二抗工作液，37℃孵育20min。 (7)PBS清洗标本3x3min，每张标本滴加1滴SABC试剂，37℃孵育20min后PBS(pH7．2~7．6) 清洗标本4x5min。 (8)DAB显色：取蒸馏水1ml，加入试剂盒中A、B、C试剂各一滴，混匀后滴加至标本。 室温下显色，显微镜下观察并控制反应时间(约5-30min)。 (9)蒸馏水漂洗，苏木素轻度复染，脱水。 (10)干燥后中性树脂封片，电子显微镜下观察、拍照。 豚鼠关节软骨细胞甲苯胺蓝染色鉴定 将F1代豚鼠关节软骨细胞以1×104／ml的浓度传代至孔底铺有圆形盖玻片的24孔板 中；正常培养，制作细胞爬片，镜下观察细胞状态，取细胞状态及数量适宜(2天左右) 的爬片染色。染色步骤如下： 1取出细胞爬片，用PBS缓冲液漂洗3次，每次3min，吸弃PBS，每张爬片滴加4％多聚甲醛100 ul，铺满爬片，室温固定3h。 2 PBS漂洗3次，每次3min后吸弃PBS，每张爬片滴加70％的乙醇100 ul室温固定20min。 3 PBS漂洗3次，每次3min后吸弃PBS，晾干后每张爬片滴加0．04％的甲苯胺蓝溶液50 ul，室温下处理20min，无水乙醇迅速漂洗1次，晾干封片，观察拍照记录。

病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)

结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法 蓝色：胶原和网状纤维 淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质 红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒 橘红色：髓鞘、红细胞 图表A 1.1.Mallory染色，显示胶原纤维，A组排列规则

1.2. Masson三色染色法 绿色：胶原纤维 红色：肌纤维 橘红色：红细胞 图表B 1.2 Mssson三色法 图表C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌

1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色：胶原纤维 黑色：网状纤维 绿色：弹性纤维 淡黄色：肌肉、红细胞 图表D 4.Weigert间苯二酚法

二、胶原纤维染色法 2.2. Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法 鲜红色：胶原纤维 黄色：肌纤维、细胞质、红细胞 蓝褐色：胞核 图表E 2.胶原纤维，Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法 图心肌梗塞myocardial infarction：心肌梗塞后2个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。

2.1 天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法(参照上图)红色：胶原纤维 绿色：细胞核 黄色：其他

3.1 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）黑色：网状纤维 红色：胞核（核固红复染） 黄棕色：胶原纤维 淡红色：细胞质（红液复染） 图表F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法 3.2 Gomori氏银氨液配制法 图表G Gomori氏银氨液配制法

髓鞘染色液(固绿法)

髓鞘染色液(固绿法) 简介： 髓鞘(Myelin Sheath)是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜，即髓鞘由髓鞘细胞和细胞膜组成，是神经膜细胞的质膜沿着轴索的轴心螺旋缠绕形成的多层脂双层结构,髓鞘上有郎飞氏结，可使神经冲动跳跃传递。髓鞘染色在病理诊断中有一定意义，髓鞘的病理变化分为早期、中期和晚期。在早期着色较深；病变中期阶段的髓鞘变性形成脂滴，可用脂质染色加以显示，后期彻底溃变并被吞噬细胞清除，故不再有髓鞘的阳性结果。 很多疾病都可以引起髓鞘的变化，Leagene 髓鞘染色液(固绿法可以显示病理情况下髓鞘是否完整、变性、坏死程度及修复情况，对神经组织的病理诊断和研究均有意义,髓鞘呈深蓝色，脱髓鞘纤维不着色。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、固定：采用甲醛钙固定液固定样本。 2、石蜡切片脱蜡至蒸馏水。 3、切片入95%乙醇稍洗。 4、入固绿染色液，37℃恒温箱染色。 5、直接用95%乙醇洗涤。 6、蒸馏水冲洗。 7、入MS 分化液分色。 8、蒸馏水冲洗(如果分色不足，可重复6步骤)。9、常规梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。 染色结果： 髓鞘 深绿色，横截面呈环状，纵截面呈条索状或鱼骨刺状 脱髓鞘纤维 不着色，横截面呈半环状或不着 编号 名称 DK00063×50ml Storage 试剂(A):甲醛钙固定液250ml RT 避光试剂(B):固绿染色液50ml RT 避光试剂(C):MS 分化液100ml RT 使用说明书 1份

色，呈空白区。 注意事项： 1、分化这一步很关键，应严格控制分化时间，可在镜下观察分化程度。 2、固定液以10%的甲醛钙固定液为佳。 3、切片不宜太厚，应控制在5～7μm以内，否则易出现脱片或过染等现象。 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期：12个月有效。 相关： 编号名称 DC0032Masson三色染色液 DF0111中性福尔马林固定液(10%) DG0005糖原PAS染色液 DH0001改良Lillie-Mayer苏木素染色液 DJ0001普鲁士蓝染色液(核固红法) DK0022尼氏染色液(焦油紫法) NH0043SSC缓冲液(20×,pH7.0) TC0713葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)

甲苯胺蓝染液使用说明

甲苯胺蓝染液使用说明 货号：G3668 规格：100mL/500mL 保存：室温避光储存，有效期至少12个月。 产品说明： 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料，属于醌亚胺染料类，是碱性染料，甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用，组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色，可染细胞核使之呈蓝色；肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，可用于尖锐湿疣的初筛及肥大细胞的检测。 染色方法:（仅供参考） (一)肥大细胞染色： （1）组织切片脱蜡至水： ①二甲苯（I）中脱蜡5-10min。 ②换用新鲜的二甲苯（Ⅱ），再脱蜡5-10min。 ③无水乙醇5min。 ④95%乙醇2min。 ⑤80％乙醇2min ⑥70%乙醇2min。 （2）蒸馏水浸洗2-3次。 （3）甲苯胺蓝染液染色(具体时间根据染色结果和实验要求调整)。 （4）稍水洗，洗去多余染色液。 （5）95%酒精分色，在镜下控制分色效果。

（6）用100%酒精脱水。 （7）二甲苯透明，中性树胶封片： ①二甲苯（I）1min。 ②二甲苯（Ⅱ）1min。 ③中性树胶封固，镜下观察。 染色结果：肥大细胞颗粒呈紫红色，胞核呈蓝色。 (二)细胞涂片染色 （1）用20%的乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液，一般要求稀释到0.1%即可。 （2）细胞涂片后，立即放入95%的乙醇中固定，取出放在纸巾上。 （3）滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。 （4）将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。 （5）无需干燥，直接镜检。 染色结果：细胞核、淋巴细胞呈深蓝色；核仁呈紫红色；细胞质、单核细胞呈淡蓝色。 注意事项： 1、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。样品数量很多时，可使用染色架和染色缸，以便于操作。 2、本产品为1%浓度水溶液，具体使用浓度可自行稀释。 3、由于温度对染料的溶解度与着色力有很大的影响，若快速染色，当室温较低时，可以适当加温。 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。