对心肌肌钙蛋白自身抗体的抗原表位特异性和IgG子类分布

对心肌肌钙蛋白自身抗体的抗原表位特异性和IgG子类分布

摘要

背景:心肌肌钙蛋白(cTnAAbs)的自身抗体可以干扰心肌肌钙蛋白I(cTnI)的测量，这是对心肌梗死的免疫测定。因此，我们确定了cTnI结合位点和循环cTnAAbs的IgG子类。

方法:通过对健康志愿者的10个ctnaab -阴性和10个ctnaab阳性血清的复合物的检测，研究了夹层免疫测定的表位特异性。为了研究IgG的子类，我们分析了胸痛患者的入院和3个月的随访情况，参照assay测量总IgG(14 cTnAAb阴性和14 cTnAAb阳性3个月)，以及4个子类特异性的assay测量，只测量IgG子类1 - 4。

结果:cTnI -阳性样本中肌钙蛋白复合物的平均回收率从37%到211%不等，为cTnI中段的最低(aa - 30 - 110)。然而，最低的采样恢复率，4% - 92%，显示没有一个研究的表位完全逃脱了ctnaab相关的干扰。cTnAAb阳性组的8例胸痛患者在采样点之间呈阳性，根据所有5个cTnAAb分析，在随访中，特异性信号普遍较高。在ctnaab阳性组中，有68%的样本检测到IgG4的患病率最高。

结论:IgG亚类研究证实，cTnAAb的形成可能是急性心脏事件的触发/增强。关于cTnAAbs 的表位特异性的新信息，应该用于重新评价关于在cTnI分析中使用中期表位表的现有建议。为了避免高度不均匀的cTnAAbs的负面干扰，应该考虑使用3个或更多的非常规选择的表位。

三元肌钙蛋白复合物，由我、T和C组成，是肌原纤维收缩器械在横纹肌细胞中的一部分。由于这些细胞内蛋白I和T存在于骨骼肌和心肌的不同亚型，在血液中测量心脏特异性等型(心肌肌钙蛋白)是证明最近或持续性心肌损伤的最敏感手段。这使心肌肌钙蛋白成为诊断急性冠脉综合征(ACS)3(1)的推荐生物标志物。

然而，心肌肌钙特异性自身抗体(cTnAAbs)可以通过心肌肌钙蛋白I(cTnI)检测这些临床上重要的生物标志物来干预临床实践(2 - 4)中所使用的ifcc推荐的中间片段方法。cTnAAbs已被发现高比例(5% - 20%)或无心脏疾病(5 - 10)，而导致自身抗体形成的心脏肌钙特异性自身免疫反应可由心肌损伤后的心肌蛋白释放引起，例如在炎症、缺血或心脏毒性治疗后。然而，他们的外观和维护的机制却鲜为人知。

cTnAAbs除了能够干扰心脏肌钙蛋白检测，还具有临床意义。最近的研究使用小鼠模型，有相关的循环ctni特异性cTnAAbs与心脏肌肉炎症和出现的症状表示心脏疾病。这些研究表明，cTnI特异性单克隆抗体(MAbs)的管理诱导野生型小鼠自体免疫扩张型心肌病(11)，对cTnI自身免疫反应的刺激，而不是cTnT，导致心肌炎症和心脏功能障碍的增加(12,13)。

此外，在实验性柯萨奇病毒b3型心肌炎急性期的心脏损伤和cTnI释放相对温和，导致cTnAAb形成(14)。

在人类身上也研究了循环cTnAAbs的可能的临床后果。最近的一项研究(10)表明，cTnAAbs的存在可能会导致ACS患者的cTnI的更高、更长的释放。另一项关于ACS患者(15)的研究表明，ctni特异性cTnAAbs可能对左心室功能的恢复有负面影响。然而，一些团体报告说，ctnaab阳性患者的结果并不低，甚至比ctnaab阴性的患者有缺血性心肌病、扩张型心肌病、心力衰竭和/或ACS(6,16 - 19)的结果要好。

cTnAAbs在心脏疾病的病因学上的作用，以及在明显健康的个体中出现的原因尚不清楚。实际上，心脏肌钙特异性自身免疫似乎只出现在某些个体中，而绝大多数的心性病人并没有发展它(18,19)。此外，cTnAAbs作为诊断和/或预后生物标志物的可能用途尚不清楚，因为缺乏足够的长期随访研究。由于缺乏关于人体cTnAAbs分子特性的详细数据，我们本研究的目的是更准确地探索cTnI结合位点的位置和cTnAAbs的IgG子类分布。

材料和方法

试剂

除了8I7(国际保健点，https://www.wendangku.net/doc/df2826392.html,)，所有的MAbs都是由HyTest(www.hytest.fi)提供的。表1给出了MAbs的总结和抗原。这些信息是从制造商的包中获取的。我们从Kaivogen Oy(https://www.wendangku.net/doc/df2826392.html,)和人类心脏肌钙蛋白(ITC)上购买了一种从HyTest来的心脏肌钙蛋白。ITC稀释成Tris-buffered盐水与叠氮化(TSA)(50更易/ L Tris-HCl,pH值7.75,150更易与L氯化钠,0.5 g / L NaN3)包含75 g / L BSA(微孔/集,https://www.wendangku.net/doc/df2826392.html,),和股票是储存在?20°C到使用。

如果制造商指定了绑定站点或表位。aa,氨基酸。骨胳肌钙蛋白I的交叉反应> 50%。

用生物素和镧系螯合物标记抗体

抗体是用生物素标记或内在荧光铕(欧盟)螯合如前所述(5),捕获抗体生物素化的生物素10 - 30倍摩尔过剩的异硫氰酸酯(礼物Jaana罗森博格,生物技术学系图尔库大学芬兰),和检测抗体被贴上一个25 - 35-fold Eu-chelate摩尔过剩,{ 2,2′,2′′,2′′′- {[2 -(4-isothiocyanatophenyl)ethylimino]bis(二)bis { 4 - {[4 -(α-galactopyranoxy)苯基]乙炔基} pyridine-6,2-diyl } bis(methylenenitrilo)} tetrakis(acetato)}铕

(ⅲ)(20)(辐射计/ Innotrac诊断Oy,www.innotrac.fi)。生物素化的或欧盟(III)标记马伯稳定了BSA(1 g / L)和储存在4°C。

免疫测定法测定ITC复合物的分析恢复

通过比较ctnaab阳性样品的分析回收率和ctnaab -阴性样品的回收率，确定cTnAAbs 在cTnI分子上的结合位点。我们通过使用各种ctni特异性的MAbs进行捕获，并使用相同的troponin c -specific MAb作为示踪剂，测量了每个未加刺的和itc的血清样品中的荧光信号。首先,300 ng生物素化的捕获是固定化SA-coated微量滴定井25μL Kaivogen缓冲溶液与大约1小时孵化环境室温。同时,ITC是加入血清整除的最终浓度30μg / L cTnI 和孵化1 h在4°C。洗后,20μL血清整除(ITC-spiked和未加料的每个血清样本)和100 ng Eu-labeled 7 b9马伯20μL第二绝缘层(ILII,辐射计/ Innotrac诊断Oy)被添加到威尔斯一式三份。1 h井被孵化的36°C,900 rpm板振动器(iem孵化器/瓶,热电子/ Labsystems,https://www.wendangku.net/doc/df2826392.html,)。洗井被干,我们测量了时间分辨荧光直接从表面与维克多×4 Multilable计数器(优秀/ Wallac,https://www.wendangku.net/doc/df2826392.html,)。最后，我们通过将每个样本的itc特异性信号与ctnaab -阴性样品的平均信号进行比较，计算出不同捕获表位的特定回收率。

免疫测定法检测人体cTnAABs

与ILII血清样本稀释5倍,从每个prediluted荧光信号测量样品有无ITC(30μg / L cTnI)。绑定后可能cTnAAbs ITC复杂(1 h,4°C),30μL样本和200年μL Kaivogen缓冲溶液补充10 mg / L本机和 5 mg / L变性老鼠免疫球蛋白(子午线国际生命科学/生物设计,https://www.wendangku.net/doc/df2826392.html,)被添加到一式三份SA井preimmobilized 100 ng的每个生物素化的捕获抗体(MF4 4 c2,7 b9)。1 h井被孵化的36°C,900 rpm,然后清洗。随后,Eu-labeled检测抗体(50 - 150 ng)添加到井200年μL Kaivogen缓冲溶液与小鼠免疫球蛋白补充。我们使用MAb 3D3作为一个示踪剂，在总IgG检测中检测所有IgG子类和MAbs 2C11,3C7,5G12,5C7 4个子类特异性检测，分别检测IgG子类1 - 4。另一个1 h井被孵化的36°C,最后荧光测定。具体信号≥100项被视为积极的如果学生学习任务给一个P值< 0.05时,信号来自相同的样本有和没有添加ITC比较。

样品

该研究方案得到了当地伦理委员会的批准。所有参与者均获得知情同意书，并按照1975年赫尔辛基宣言的规定进行了研究，并于2006年修订。

在2010年至2011年期间，我们在图尔库大学生物技术学院(University of Turku)收集了明显健康的志愿者(n = 20)的血清样本，进行了表位特异性研究。其中10例为cTnAAb 阴性和10 cTnAAb阳性，根据此前发表的cTnAAb assay(10,21)。简单地说，血清样本的cTnAAbs首先被绑定到ITC，而形成的ITC - ctnaab复合物随后被用150 ng biotinylated MAbs 4C2和MF4进行预固定化。最后，我们发现捕获的cTnAAbs有40ng标签3D3 MAb。一个样本被定义为阴性或阳性，如上所述。

我们分析了入院3个月患者的总IgG和IgG子类，以及来自81名非st -抬高ACS患者的28例胸痛患者的血清样本。从1998年到2000年，在芬兰的9家不同的中央医院采集了样本，用于对ACS患者克拉霉素治疗的安慰剂对照研究，如前所述(22)。样本储存在?已解冻70°C和前几次cTnAAb测量。我们使用总IgG分析将患者分为2个研究组:第一个组包括14个ctnaab阴性患者，第二组14个ctnaab阳性患者3个月随访。

统计分析

我们分析了IgG-specific信号采样点之间的差异与PASW统计18软件(SPSS,www - 01. - https://www.wendangku.net/doc/df2826392.html,/software/analytics/spss)通过魏克森讯号等级测试。所有ctnaab阴性样本值均为50计数(最低正信号除以2)，P值< 0.05为有统计学意义。

结果

为了对cTnI分子的cTnAAb结合位点进行评估，我们用19种不同的cTnI特异性捕获抗体对ITC恢复进行了测量，并使用相同的troponin c特异性抗体作为示踪剂。尽管在ctnaab 阳性样本中，所有19个表位样本中ITC的平均恢复率为89%，但单个cTnI抗原表位的平均恢复值为37%至211%(图1A)。最低的平均回收率是在c终点站的中段和n端部的表位上获得的。此外，我们发现在ctnaab阳性样本的个体回收率中有相当大的变化:单个表位的最小和最大回收率分别从4%到92%和78%到309%不等。图1B中3个ctnaab -阳性学科的位点特异性回收率的比较表明，个体间的干扰差异是不同的。

图1所示。

ITC对不同的cTnI站点的分析恢复。

(A)10个ctnaab阳性样品的分析回收率。须表示最小和最大的信号;盒子代表第25百分位、中位数和第75百分位;和广场代表的意思。(B)在3个ctnaab阳性样本中，ITC的特异性回收率的一个例子。

为了研究cTnAAbs的IgG子类，我们分析了cTnAAbs的总IgG和4个子类特异性的assays。在两个采样点上，cTnAAb阴性组的全部14例胸痛患者均为cTnAAb阴性。在14例ctnaab阳性组患者中，6例为阳性，8例为随访阳性。这些igg阳性样本的具体信号为105到69 502计数(中值2 111计数)。如表2所示，ctnaab -阴性组的样本均未为IgG1或IgG2阳性，但4例入院和5个随访样本对IgG3和/或IgG4(特异性信号125 - 794计数，中值242)弱阳性。虽然在ctnaab阳性组中观察到所有IgG亚类1 - 4(特异性信号101 - 115 579，

中位数620)，IgG4的患病率最高，在8例入院和11次随访中检测到。此外,入学3和10后续cTnAAb-positive组阳性样本同时为2 - 4子类(表3)。根据所有5免疫球蛋白测定研究,具体的信号在随访相比高出一般入学水平,表明cTnAAb高滴度和/或改进的亲和力(图2)。采样点之间的差异具有统计学意义(P < 0.05),与所有化验除了IgG3-specific试验(P = 0.249)。

图2所示。

cTnAAb信号(Adm)和3个月随访(3m)血清来自14个cTnAAb -阴性(A)和14个cTnAAb 阳性(B)胸痛患者。

ctnaab阴性样本得到了一个特定的50数的信号。须表示最小和最大的信号;盒子代表第25百分位、中位数和第75百分位;和广场代表的意思。

讨论

目前，cTnAAbs起爆的原因和机制尚不清楚，其临床和诊断意义尚不明确。虽然cTnAAbs 已经成为cTnI分析的重要分析机构，但其分子特性的详细数据却很少。因此，本研究的目的在于描述这些自身抗体的表位特异性和IgG亚类分布。

我们的表位特异性研究证实了先前发表的观察(23)，cTnI分子的稳定的中间片段经常是cTnAAbs的目标，但也证明了cTnAAb的干扰超出了中间片段，特别是对c端。虽然一些

表位可能不太倾向于ctnaab相关的干扰，但我们的ITC恢复数据为10个ctnaab阳性的样本显示，没有一个被研究的表位完全逃脱了。此外，由于不同个体之间的最大干扰区域不同，在未来的cTnI分析中应该考虑使用3个或更仔细选择的结合位点。

除了能够阻止抗体的结合，观察到的恢复明显> 100%意味着cTnAAbs也可以稳定一些表位或增强抗体对其结合位点的亲和力。然而,这项研究的结果证实我们最近发表的结论基于抗体配置不同于小说cTnI化验派生的IFCC-recommended midfragment方法改善cTnAAb-positive cTnI检测样品,也证明我们的初步假设cTnI-specific干扰甚至比最初报道更多的异构(4)。

在取样点之间，ctnaab阳性组的8例胸痛患者呈阳性。此外，所有5个cTnAAb assays 的特定信号通常在指数事件后3个月。这些数据证实心肌肌钙蛋白在原发性缺血性损伤时心肌细胞渗漏可能引起自身免疫反应导致cTnAAb形成(6,10)。另外，泄漏可以作为先前免疫的助推器，既可以增加血液中的cTnAAb滴度，又能提高自身抗体的亲和力。

在ctnaab阳性组中，所有IgG子类被检测到，46%的个体血清对多个子类呈阳性。由于ctnaab阳性样本的频率与特定的子类特异性assay有关，与assay敏感性有关，因此不可能直接比较这些频率。然而，值得注意的是，IgG4是在本研究中最常见的cTnAAb(在cTnAAb 阳性组中68%的样本中发现)。IgG4通常是4个IgG子类中最不常见的。因为重复的抗原刺激被认为会促进igg4型抗体的形成，igg4型cTnAAbs的出现表明在急性事件发生之前，心脏病人的长期心肌肌钙渗漏可能已经发生。同样有趣的是，IgG4通常被认为是一种良性和非致病性抗体，在某些过敏反应中甚至有积极作用(24)。这两种观点都可能与观察结果有关，这是由于半抗体交换反应(fab- arm exchange)的结果，大多数igg4型抗体都是两种不同抗原结合位点的双特异性抗体，使得分子对给定抗原(25)的功能是一价的。因此，igg4型cTnAAbs的高流行也解释了为什么我们尝试开发桥型免疫系统，即使用与捕获相同的抗原，而cTnAAb检测的示踪剂也没有成功(结果没有显示)。igg4型抗体的另一个特点是，他们可能对各种动物IgG有很高的亲和力，比如老鼠IgG，通过它们的恒定区域而不是抗原结合位点(26,27)。如果心脏肌钙蛋白特异性IgG4s与动物igg结合，作为免疫测定试剂，那么除了阻断特定的心肌肌钙蛋白表位外，它们还可能干扰心肌肌钙蛋白免疫测定。

本研究仅局限于研究igg型抗体;虽然IgM型抗体在主要免疫反应中占主导地位，但IgM 反应没有被研究。总IgG和子类特异性检测结果之间的差异说明了自身抗体分析的挑战。首先，不同的示踪抗体的亲和力会导致不同的检测灵敏度，这是由于缺乏明确的标准而无法确定的。其次，正如我们的表位特异性研究所证明的，cTnAAbs构成了异质人群，其中精确的

表位特异性和与心肌肌钙蛋白结合的亲和力可能有很大的差异。此外，使用不同的分析格式使得不同报告之间的直接比较不可能。虽然许多已发表的cTnAAb分析使用了直接涂敷的cTnI或cTnT表面，但我们的分析方法的一个优点是，我们可以通过测量特定样本的背景来校正其他抗体的非特异性结合的结果，这些背景似乎在个体之间(21)之间有很大的波动。另一方面，因为我们在cTnAAb中使用ITC作为靶分子，我们不能区分cTnI和ctnt特异性的自体抗体阳性。

综上所述，由于cTnAAb在明显健康的个体中很常见，而cTnAAb的形成可能在急性心脏事件中被触发或增强，因此在未来的cTnI分析设计中应承认其分析干预效果。cTnI分子的中段通常是商业cTnI检测的唯一检测地点，但也是cTnAAbs最经常瞄准的部位。此外，我们的详细的表位筛选清楚地表明，整个cTnI分子会受到ctnaab相关性干扰的影响，在受影响的位点和干扰程度上有显著的个体差异。因此，应该考虑使用3个或更仔细选择的表位来规避高度不均匀的cTnAAbs的负面干扰。

心肌肌钙蛋白I检测试剂盒(胶体金法)

心肌肌钙蛋白I检测试剂盒（胶体金法） 【产品名称】 通用名称：心肌肌钙蛋白I检测试剂盒（胶体金法） 英文名称：Cardiac Troponin I Fast Test Kit 【心肌肌钙蛋白I检测试剂盒包装规格】 包装规格：10人份/盒，25人份/盒 【心肌肌钙蛋白I检测试剂盒预期用途】 心肌肌钙蛋白I检测试剂盒-用于临床体外定量或半定量检测人血中心肌肌钙蛋白I（cTnI，下文中“心肌肌钙蛋白I”均使用其英文缩写“cTnI”）的含量。 【心肌肌钙蛋白I检测试剂盒检验原理】 心肌肌钙蛋白I检测试剂盒-含有预先包被在聚酯膜上的金标记人cTnI单克隆抗体以及固定于膜上测试区（T）的人cTnI单克隆抗体，结合链亲和素-生物素放大系统，采用高度特异性的抗原抗体反应及免疫层析技术，检测人血中cTnI的含量。 肌钙蛋白由I、T、C三亚基构成，它们和原肌球蛋白一起通过调节Ca2+对横纹肌动蛋白ATP酶的活性来调节肌动蛋白和肌球蛋白相互作用。当心肌损伤后，心肌肌钙蛋白复合物释放到血液中，4~6小时后，开始在血液中升高，升高的cTnI能在血液中保持很长时间（6~10天），这样就提供了较长的检测期。 【心肌肌钙蛋白I检测试剂盒主要组成成份】 1.心肌肌钙蛋白I检测试剂盒：内含10条单人份或25条单人份检测卡，

检测卡由试纸条外壳与试纸条构成，试纸条由样品垫、胶体金垫（喷有由胶体金标记并结合了链亲和素－生物素放大系统的cTnI单克隆抗体）、层析膜（T线包被有cTnI捕获单克隆抗体，C线包被有兔抗鼠IgG抗体）、吸水纸、衬垫构成； 2.说明书一份； 3.标准比色卡一张。 注：不同批的心肌肌钙蛋白I检测试剂盒（胶体金法）各组分不可以互换。 【心肌肌钙蛋白I检测试剂盒适用仪器】 南京普朗医用设备有限公司FIA8000系列免疫定量分析仪 【心肌肌钙蛋白I检测试剂盒储存条件及有效期】 试剂盒于4~30℃，铝箔袋密封状态下存放，有效期为12个月；铝箔袋拆封后，有效期为1小时。 【心肌肌钙蛋白I检测试剂盒样本要求】 1.应在无菌情况下采集静脉血。检测时，未经肝素抗凝的血样须析出血清，经肝素抗凝的血样，可选用血清或血浆。建议优先选用人血清或血浆进行检测，在患者病情紧急或特殊情况下，可使用全血样本进行快速检测。其他体液和样本可能得不到准确的结果。 2.若血清或血浆样本收集后7天内检测，样本须放在2~8℃保存；如果7天后检测则须将样本放置于－20℃环境，可保存6个月；全血样本建议在3天内检测，样本于2~8℃保存，不得冻存。避免加热灭活样本，溶血样本应弃用。 3.检测前样本必须恢复至室温。冷冻保存的样本需完全融化、复温、混

心肌肌钙蛋白I(医学参照)

心肌肌钙蛋白I（cTnI） 参考范围： ＜0.1nm/mL 排除心肌损伤 0.1~0.5ng/mL 心肌损伤低风险，需结合多种诊断结果及临床症状综合判定 0.5~25ng/mL 心肌损伤高风险 ＞25ng/mL 严重心肌损伤 临床意义： CTnI是心肌损伤的特异指标。心肌梗死发生后4~8h血清中cTnI水平即可升高，12~14h达到峰值，升高持续时间较长，可达6~10天。CTnI的诊断特异性优于Mb和CK-MB，可用于评价不稳定心绞痛，cTnI水平升高预示有较高的短期死亡危险性，连续监测cTnI有助于判断血栓溶解和心肌再灌注。 在AMI时，所有生化标志物的敏感度都与时间有关。对于胸痛发作4h以内的患者，首先应测定Mb水平；3h后得到的血液标本，应同时评价Mb和人cTnI。所有阳性结果，都可确认为AMI；所有阴性结果都可以排除心肌损伤，当结果不一致时，需要进一步联合检查胸痛发作后9h，此时所有的生化标志物都达到最大的敏感度。 D-二聚体（D-Dimer） 参考范围 ＜500ng/ml 可以排除 ＞500ng/ml 提示出现高凝状态，并结合临床 临床意义 1.是交联蛋白降解中的一个特异性产物，在深静脉恤衫、肺栓塞、弥漫性血管内凝血、严重肝炎、 肺栓塞等疾病中升高。 2.也可作为溶栓治疗的观察指标 3.陈旧性血栓患者D-二聚体并不升高 4.凡有血块形成的出血，本试验均可呈阳性，故其特异性较低。 氨基末端脑钠肽前体（BNP） 参考范围 检测结果＜300pg/ml可排除心衰

50岁以下＞450pg/ml提示心衰的可能性较大 50岁-75岁＞900pg/ml提示病人心衰的可能性较大 75岁以上＞1800pg/ml提示病人心衰的可能性较大 临床意义 ①、BNP 诊断症状性心衰: 心力衰竭时,心脏容量负荷或压力负荷增加,心肌受到牵张或室壁压力增大,引起血中BNP 浓度增高,可诊断心力衰竭。 ②、BNP 诊断无症状性心衰和舒张性心衰: 在无症状性左室收缩功能低下的患者中,NT2ANP 和BNP均会增高。这有助于心衰的早期诊断。 ③、BNP 鉴别诊断呼吸困难病因: 在急诊,BNP 还有助于判断急性呼吸困难患者的病因。最近对321例急性呼吸困难的患者进行了BNP 测定(由于肺心病导致的右心衰归属心衰组) ,结果心力衰竭患者(134 例) 的平均BNP 水平[ (758. 5 ±798) pg/ ml ]明显高于肺部疾患导致呼吸困难的患者[85 例, (61 ±10) pg/ ml ] 。既往有肺部疾患史,此次诊为心衰患者(54 例) 的BNP[ (731 ±764) pg/ ml ]又显著高于既往有心衰病史,此次诊为阻塞性肺病的患者[ 11例, (47 ±23) pg/ ml ] 。肺癌及肺栓塞也可以导致BNP 水平增高,但它与急性左心衰导致的BNP 增高的水平不同。即使同时患有慢性阻塞性肺病及慢性心力衰竭的患者,此次导致呼吸困难的原因不同,BNP 水平也大不一样。 另外,BNP 同样可以帮助诊断右室功能异常。伴有肺动脉高压的右室功能异常的患者中BNP 值高于一般水平,也与慢性肺栓塞导致的肺动脉高压程度相关,且在血栓动脉内膜切除术后,BNP 水平也随肺动脉阻力下降而下降。 降钙素原（PCT） 参考范围： ＜0.05ng/ml 正常人 0.05≤PCT≤0.5 轻度局部细菌感染或细菌感染早期 0.5＜PCT≤2 很大可能为全身细菌感染，或继发于细菌之上的真菌感染，但应排除48h 内 的新生儿、严重外伤、烧伤、较大外科手术、重度心源性休克等临床状 态 2＜PCT＜10 全身感染 PCT≥10 严重脓毒症或脓毒性休克

心肌肌钙蛋白的正常值及其临床意义

心肌肌钙蛋白的正常值及其临床意义 发表者:薛一涛(访问人次:10７2７) 肌钙蛋白就是肌肉收缩的调节蛋白。心肌肌钙蛋白(cTｎ)就是由三种不同基因的亚基组成:心肌肌钙蛋白Ｔ(cＴnＴ)、心肌肌钙蛋白I(cTn I)与肌钙蛋白C(TｎC)。目前,用于ACS实验室诊断的就是cTｎT与cTnI。 肌钙蛋白T(ＴnT)分子量为 37KD,就是原肌球蛋白结合亚基。有三种亚型:骨骼肌肌钙蛋白T(sTnT)包括快骨骼肌型与慢骨骼肌型,此外还有心肌型。心肌肌钙蛋白T(cTnT)的大部分就是以C-T-Ｉ的复合物形式存在于细丝上,６%—8％以游离的形式存在于心肌细胞浆中。因cTnT与骨骼肌TnＴ的基因编码不同,骨骼肌中无cTnＴ的表达。ｃTnＴ相对于两种骨骼肌亚型有４0%的不同源性。c ＴnT分子稳定、亲水、特异性抗原决定簇的反应性好。目前所用的单克隆抗体 为对心肌特异的捕捉抗体与标记抗体。 TnI(肌钙蛋白I)存在三种亚型:骨骼肌肌钙蛋白I(sＴｎI)中存在快骨骼肌型与慢骨骼肌型,它们具有相似的分子量(20KD),但二者之间的氨基酸序列约存在4０%的差异;第三种为心肌型。心肌肌钙蛋白I(cTnI)与骨骼肌型的氨基酸序列也存在40%的差异。但人的ｅＴnI氨基末端比ｓTnI多31个amino aci d,使其moｌecｕlar ｗeｉght达到22ＫＤ,这种独特的顺序使之具有较高的心肌特异性,有助于制备相应的单克隆。cTn就是以cTｎI-C-T复合物与游离ｃTｎI形式存在于心肌细胞中,心肌损伤时释放到血循环中后,ｃTｎI-C－T可进一步分解为cＴnI-C复合物与游离cＴnＩ。故血循环中除cTnI C-Ｔ、游离cＴnI 外还有cTnＩ-C,而且cTnI－C就是其在血液中的主要形式。其代谢产物由肾脏 排出体外。 ＴnＣ分子量为1８KD,就是Ｃa2+结合亚基,每个分子结合2个Cａ2+。心肌 与骨骼肌的TnC结构相同。 由于cTnＴ与cTnＩ与骨骼肌中的异质体分别由不同基因编码,具有不同的氨基酸顺序,有独特的抗原性,故它们的特异性要明显优于CK—ＭＢ同工酶。 心肌以外的肌肉组织出现损伤或疾病时,ＣＫ与CK-MB可能会升高,而c ＴnT与ｃＴｎI则不会超过其临界值。由于它们在正常血清中含量极微,在ＡMI 时明显增高,且增高倍数一般都超过总CK与ＣK-ＭB的变化。 ｃＴｎT与ｃTnＩ由于分子量小,发病后游离的cＴn从心肌细胞浆内迅速释放人血,血中浓度迅速升高,其时间与CK—MＢ相当或稍早。虽然肌钙蛋白半寿期很短(ｃTｎT 2小时,游离cＴｎI的半寿期据报道为2h~５d不等),但其从肌原纤维上降解的过程持续时间很长,可在血中保持较长时间的升高,故它兼有CＫ－MB升高较早与LD1诊断时间窗长的优点。故目前cTn已有逐渐取代酶学指 标的趋势。 参考值: cＴnT0、1ng/ml

心肌肌钙蛋白i是什么

如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 生活常识分享心肌肌钙蛋白i是什么 导语：我们都知道蛋白质对于人体而言是很重要的，人的每一个部分要生长发育都离不开蛋白质，但是一般人却不知道蛋白质的学历分类和其相应的作用， 我们都知道蛋白质对于人体而言是很重要的，人的每一个部分要生长发育都离不开蛋白质，但是一般人却不知道蛋白质的学历分类和其相应的作用，和人们日常生活相距甚远的心肌肌钙蛋白i就更是如此了，那么你想了解一下它吗？下面就让我们一起来听听医生的介绍吧。 一：心肌肌钙蛋白i简介 肌钙蛋白T（TnT）分子量为37KD，是原肌球蛋白结合亚基。有三种亚型：骨骼肌肌钙蛋白T（sTnT）包括快骨骼肌型和慢骨骼肌型，此外还有心肌型。心肌肌钙蛋白T（cTnT）的大部分是以C-T-I的复合物形式存在于细丝上，6%—8%以游离的形式存在于心肌细胞浆中。因cTnT与骨骼肌TnT的基因编码不同，骨骼肌中无cTnT的表达。cTnT相对于两种骨骼肌亚型有40%的不同源性。cTnT分子稳定、亲水、特异性抗原决定簇的反应性好。目前所用的单克隆抗体为对心肌特异的捕捉抗体和标记抗体。 二：心肌肌钙蛋白i正常参考值 cTn对急性胸痛病人(无论有无骨骼肌损伤)的诊断均优于CK-MB。研究表明：在对AMI的诊断方面cTnI和cTnT无显著差异，都能鉴别出CK-MB所不能检测出的心肌损伤。相对cTnT而言，cTnI显示出较低的初始灵敏性和较高的特异性。就上升的相对值来说，cTnT比cTnI高；在不稳定心绞痛病人中cTnT上升的频度比cTnI高。在AMI后30天死亡率的预报方面，cTnT优于cTnI。 看了上文的简介，您对心肌肌钙蛋白i有没有了一定的了解呢？心

心肌肌钙蛋白I临床应用进展解读

心肌肌钙蛋白I 临床应用进展 张再勤 心肌肌钙蛋白I(Cardiac Troponin I,cTnI作为心肌损伤标志物,在临床上已应用了多年。由于其高度的心肌特异性,对于心肌损伤的高度敏感性及较长的窗口 期,cTnI已被临床医生及检验人员广泛接受,已取代CK-MB,不仅成为判断心肌损伤,特别是诊断急性心梗的“金标准”[1]。而且已成为判断冠脉综合征病人处于心肌损伤风险的最合适的标志物。肌钙蛋白的升高还作为有力的证据可支持临床医生及早做出抗血栓、抗血小板凝集及介入性治疗的决定。本文将叙述cTnI的临床应用的最新进展。 一.cTnI作为疾病的检测指标 1.急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction, AMI的首选指标。 心肌梗死是冠状动脉闭塞,血流中断,部分心肌因严重的持续性缺血而发生局部坏死。临床上典型的症状是剧烈而持久的胸骨后疼痛,伴有发热,心肌损伤性蛋白升高及进行性心电图变化。可发生心律失常、休克及心律衰竭而导致死亡。 心梗常见的原因是由于供应心肌的冠状动脉内长有粥样化硬块,硬块的破裂、脱落导致血管狭窄,以致闭塞,使之供血的那部分心肌组织细胞缺血而坏死。但在血管的完全闭塞到心肌组织的不可逆坏死有一段时间间隔,如可争取时间,重新开通闭塞的血管,就可使心肌不坏死,或将梗死的心肌面积限制在最小范围内。从而有效地降低死亡率。由于cTnI的心脏特异性,及其在心脏受损后的快速及长时期升高,可作为一种诊断心肌损伤性疾病,特别是诊断心肌梗死的首选标志物[2]。 2. 不稳定性心绞痛最佳血液指标 不稳定性心绞痛(Unstable angina, UA是一组介于稳定性心绞痛和急性心肌梗死之间的急性冠状动脉缺血综合征。粥样化硬块破裂诱发非闭塞性血栓形成是其主要的发病机制,而病变血管的痉挛性收缩也起着重要的作用。这些病理机制若引起病

心肌肌钙蛋白的临床应用解读

心肌肌钙蛋白的临床应用 段宇宏 2005-12-13 13:26:17 中华现代中西医杂志 2003年9月第1卷第6期 急性心肌梗死（AMI）是发病率和死亡率较高的疾病之一。心肌酶谱（CK、CK-MB、LDH、GOT、HBD）的测定对于急性心肌梗死的诊断有一定的意义，但是随着对心肌损伤标志物的不断深入研究，逐渐发现许多灵敏性、特异性较高的标志物［1］。其中，心肌肌钙蛋白（TnT）以其很高的灵敏性和特异性正逐步取代心肌酶谱，成为判断心肌损伤新的确定性标志物。 1 心肌肌钙蛋白的一些生化特点 肌钙蛋白（TnT）是肌钙蛋白的复合体的一种多肽亚单位。此复合体存在于横纹肌和心肌的细胞丝中，在钙离子诱导的肌肉收缩中起重要作用。肌纤维是由平行的粗丝和细丝组成的网状组织。粗丝是肌球蛋白聚合体;细丝由肌动蛋白、原肌球蛋白和肌钙蛋白等3种主要成分 组成。肌钙蛋白是参与肌肉收缩的重要调节蛋白，分别由源于不同基因的3个亚基组成:肌钙蛋白C（TnC），肌钙蛋白T（TnT）和肌钙蛋白I（TnI）。TnT 是与原肌球蛋白结合的亚单位，分子量为39KD。TnI是肌原纤维ATP酶的抑制性亚单位，分子量为26.5KD。TnC是钙离子结合亚单位，分子量18KD。3种亚单位组成与原肌球蛋白一起构成肌钙蛋白复合体，调节肌细胞的收缩力和速度。TnT在心肌细胞内可分为两部分，94%与细肌丝结合，6%游离在细胞浆中。正常人血液中TnT含量低于0.1μg/L。半衰期为120min，在心肌受到可逆性伤害时，游离的TnT较早释放，形成第1个峰，接着结合于肌纤维中的TnT逐渐释放而出现第2个峰。肌钙蛋白一般在心肌损伤后5～8h出现增高，最高值在12～24h，增高可持续7～10天（TnI）或10～14天（TnT）。 2 心肌TnT与不稳定型心绞痛 不稳定型心绞痛是缺血性心脏病的重要时期，准确的良性预后判断极为重要。心肌酶谱实际上不能很好地反映临床实际情况。经组织学检查证实的微小心肌细胞坏死，经常不能由CK活性检查反应出来。 在不稳定型心绞痛病人中，TnT检测微小心肌细胞损伤的敏感性高于CK-MB 活动检测。休息时有持续性心绞痛的病人中，TnT升高者占39%，而CK-MB活性升高者只有3%。我院10例住院过程中发生AMI的病人，8例TnT呈阴性，但只有2例CK-MB活性升高。而30例住院病人，其血清TnT呈阴性，都平安。表明在急性期，TnT阴性病人危险度很低，预后很好。因此TnT检测可做为对病人观察治疗及预后的指标。 3 心肌TnT与AMI 具有典型AMI症状，心电图特征性Q波改变的病人血清TnT均升高。TnT升高

心肌肌钙蛋白I在诊断急性心肌梗塞中的应用

心肌肌钙蛋白I在诊断急性心肌梗塞中的应用 急性心肌梗塞（AMI）是临床常见的急性多发病，正确诊断及时救治对挽救濒死心肌，改善预后降低急性期病死率和死亡率具有重要意义。在AMI的生化诊断方面，肌酸激酶（CK）及其同工酶（CK-MB）是目前常用的指标，但是CK-MB并非心脏所特有，在正常人骨骼中也有少量存在。非心脏手术或骨骼肌损伤患者常有CK-MB增高，且CK-MB 在AMI发病后4-8小时才开始升高，持续时间又短（48-72小时），因而临床应用受到限制。1987年英国Cummins 等首先报告用测定周围血中心肌钙蛋白(CTn)浓度来诊断AMI。近年来研究表明心肌肌钙蛋白（Cardiac Troponin）是心肌特异的调节蛋白，其肌钙蛋白I（cTNI）在AMI时释放入血是心肌损伤的特异性标志物，并具有灵敏度高，在血中出现时间早，诊断窗口时间长等优点。此外CTNT在预测梗塞面积，评价溶栓疗效，AMI预后心功能判定，不稳定心绞痛预后评估等方面也具有重要的临床价值。本文就CTNI在这方面的价值综述如下：一．CTNI的基本特性 心肌肌钙蛋白（Cardiac Troponin CTn）是心肌收缩的调节蛋白，存在于心肌收缩蛋白的细肌丝上。肌钙蛋白的作用之一是把原肌凝蛋白（Tropomyosin.Tm）附着于肌动蛋白（Action.A）上，三者共同组成细肌丝。肌钙蛋白含三个亚单位：肌钙蛋白I（Inhibitory componet,TnI）,肌钙蛋白T（Tropomyosin binding componet,TnT）,肌钙蛋白C（Calcium binding componet,TnC）。当运动神经冲动到达末梢肌浆内Ca2+释放，TnC与Ca2+结合，使肌钙蛋白分子构型改变，TnI与肌动蛋白和原肌凝蛋白（A-Tm）之间的结合被解除，TNI的抑制作用被取消，原肌凝蛋白（Tm）与TNT结合，Tm的位置随之改变，原来被掩盖的肌动蛋白（A）位点暴露，迅即与构成粗丝的肌球蛋白（myosin）接触，粗细肌丝相对滑动，肌肉收缩。当肌浆中的Ca2+浓度降低时，Ca2+与TnC分离，TnI与肌动蛋白及原肌凝蛋白上的位点结合，将Tm锁于阻断位置，从而阻止肌动蛋白与肌球蛋白结合，于是肌肉舒张。 肌钙蛋白I（Troponin I TNI）为ATP酶的抑制性亚单位,分别定位于骨骼肌快肌，慢肌和心肌中,其中心肌TnI在基因上有着独特的氨基酸序列，分子量24KD，以两种形式存在于心肌，少量以游离形式存在于细胞胞浆，大部分以结合形式存在于肌原纤维上。心脏损伤早期，心肌细胞未坏死，但细胞膜破坏，游离形式的TnI进入组织间隙，经淋巴回流入血。血清CTnI于6小时升高，其后肌原纤维不断崩解破坏，固定形式的CTnI不断释放，血清水平于18-24小时达高峰，10天后降至正常。 二．TNI诊断AMI的敏感性 1987年Cummins等首先用放射免疫分析（RIA）检查心电图有Q波伴血清酶增高的32例AMI病人，血清CTNI 都增高，相当于正常上限的10–20倍，而71例健康对照血清CTNI均低于正常上限，1992年Bodor等多次抽血连续观察显示，AMI病人开始增高在胸痛开始后平均6.8小时，峰值195.9microg/l，平均高峰11.2小时,恢复正常平均为99小时。1997年张济南等对61例AMI患者中的未溶栓组CTNI和CKMB动态测定其变化发现：AMI病人发病后3-6时，血清CTNI上升，高峰在18-24h，上升时间及高峰出现与CK-MB相似，峰值为165.6µg/l为参考值(0-7μg/l)上限的24倍，胸痛后第五天仍高达44.1µg/l，第七天恢复到参考值范围。由此可见，CTNI 诊断AMI的敏感性和时间与CKMB接近，但CK-MB在胸痛后3天迅速降至正常，即CTNI在到达高峰后曲线下降不如CB-MB那样陡直，有些病人在梗塞后10天CTNI仍增高，这就为AMI48-72小时后才入院的病人在诊断上提供了有力的依据。 三．CTNI诊断AMI的特异性 心肌肌钙蛋白I（CTNI）仅存在于心房肌和心室肌、其多肽N端较骨骼肌TNI多26个氨基酸，两者氨基酸序列的差异达40%。因而抗原性不同。Adams报道215例无AMI的病人，其中骨骼肌损伤病人，慢性心肌病病人，和马拉松运动员中分别有59%，90%，78%出现CK-MB升高。159例须透析的肾衰病人中3.8%CB-MB增高。全组中仅有

心肌肌钙蛋白的正常值及其临床意义

心肌肌钙蛋白的正常值及其临床意义 发表者：薛一涛(访问人次：10727) 肌钙蛋白是肌肉收缩的调节蛋白。心肌肌钙蛋白（cTn）是由三种不同基因的亚基组成：心肌肌钙蛋白T（cTnT）、心肌肌钙蛋白I（cTn I）和肌钙蛋白C（TnC）。目前，用于ACS实验室诊断的是cTnT和cTnI。 肌钙蛋白T（TnT）分子量为 37KD，是原肌球蛋白结合亚基。有三种亚型：骨骼肌肌钙蛋白T（sTnT）包括快骨骼肌型和慢骨骼肌型，此外还有心肌型。心肌肌钙蛋白T（cTnT）的大部分是以C-T-I的复合物形式存在于细丝上，6%—8%以游离的形式存在于心肌细胞浆中。因cTnT与骨骼肌TnT的基因编码不同，骨骼肌中无cTnT的表达。cTnT相对于两种骨骼肌亚型有40%的不同源性。cTnT 分子稳定、亲水、特异性抗原决定簇的反应性好。目前所用的单克隆抗体为对心 肌特异的捕捉抗体和标记抗体。 TnI（肌钙蛋白I）存在三种亚型：骨骼肌肌钙蛋白I（sTnI）中存在快骨骼肌型和慢骨骼肌型，它们具有相似的分子量（20KD），但二者之间的氨基酸序列约存在40%的差异；第三种为心肌型。心肌肌钙蛋白I（cTnI）与骨骼肌型的氨基酸序列也存在40%的差异。但人的eTnI氨基末端比sTnI多31个amino acid，使其molecular weight达到22KD，这种独特的顺序使之具有较高的心肌特异性，有助于制备相应的单克隆。cTn是以cTnI-C-T复合物和游离cTnI形式存在于心肌细胞中，心肌损伤时释放到血循环中后，cTnI-C-T可进一步分解为c TnI-C复合物和游离cTnI。故血循环中除cTnI C-T、游离cTnI外还有cTnI-C，而且cTnI-C是其在血液中的主要形式。其代谢产物由肾脏排出体外。 TnC分子量为18KD，是Ca2+结合亚基，每个分子结合2个Ca2+。心肌和骨 骼肌的TnC结构相同。 由于cTnT和cTnI与骨骼肌中的异质体分别由不同基因编码，具有不同的氨基酸顺序，有独特的抗原性，故它们的特异性要明显优于CK—MB同工酶。 心肌以外的肌肉组织出现损伤或疾病时，CK和CK-MB可能会升高，而c TnT和cTnI则不会超过其临界值。由于它们在正常血清中含量极微，在AMI时明显增高，且增高倍数一般都超过总CK和CK-MB的变化。 cTnT和cTnI由于分子量小，发病后游离的cTn从心肌细胞浆内迅速释放人血，血中浓度迅速升高，其时间和CK—MB相当或稍早。虽然肌钙蛋白半寿期很短（cTnT 2小时，游离cTnI的半寿期据报道为2h～5d不等），但其从肌原纤维上降解的过程持续时间很长，可在血中保持较长时间的升高，故它兼有C K-MB升高较早和LD1诊断时间窗长的优点。故目前cTn已有逐渐取代酶学指标 的趋势。 参考值： cTnT0.1ng／ml 以下均为贝克曼Access化学发光分析系统的数据，不同厂家的试剂其诊断 界值不同。

肌钙蛋白I的生化特点及其影响测定的因素

肌钙蛋白I的生化特点及其影响测定的因素 上海医科大学中山医院潘柏申 关键词肌钙蛋白（cTn）心肌损伤测定标准化 随着研究和应用的发展，心肌肌钙蛋白（cTn）[包括心肌肌钙蛋白I（cTnI）和心肌肌钙蛋白T（cTnT）]已成为临床诊断心肌损伤的确定标志物[1,2]。由于仅一家生产厂商拥有cTnT 生产专利，因此人们对cTnI的生产应用兴趣大增。目前FDA至少已批准8家生产厂商的共16种cTnI检测试剂[3]。在临床应用中发现，这些cTnI检测试剂的测定值之间存在着差异，不同的cTnI 分析方法对同一份标本的检测值最大可相差30余倍[4]，这使得各种方法的参考范围、分析干扰、分析变异、诊断窗口期以及诊断和预后的临界值等出现不同程度的差别，给临床应用和评价带来一定困扰。了解cTn特别是cTnI的系列化特别和各种分析测定试剂的特性，将有助于临床上正确使用这些方法检测和评价心肌缺血损伤。 1 心肌肌钙蛋白细胞内结构和分布 心肌肌钙蛋白结构结构cTn由三种亚基组成，参与调节肌肉收缩活动。其中的肌钙蛋白C（TnC）是Ca2+结合亚基，分子量18kDa，等电点；cTnI为抑制亚基，分子量23kDa，等电点；cTnT为原肌球蛋白结合亚基，分子量34kDa，等电点[5]。 在Ca2+存在的情况下，TnC与Ca2+结合后构型发生变化，与cTnI的结合增强（Ka约为×10-8 M-1）[5]；TnT与TnC – cTnI结合，但较TnC – cTnI之间的结合弱。反之，Ca2+浓度低或TnC未与Ca2+结合时，TnC和cTnI之间的结合比较松散。cTnI-cTnT的结合相对较弱( Ka约为×10-5 M-1) [5]。 心肌肌钙蛋白的组织含量在心肌内cTnI的含量大约为5mg/g湿重组织，cTnT的含量大致为g湿重组织（相比之下，CK-MB仅g湿重组织[6]；cTn主要结合于心肌肌纤维中，少量（cTnI的% ～%；cTnT的6% ～8%）在细胞浆中以游离形式存在[7]。这与心肌细胞缺血损伤后的释放方式密切有关。 释放形式心肌细胞损伤后，游离cTnT较早释放形成第一个峰，随后结合于肌纤维中的cTnT逐渐释放而出现第二个峰；由于细胞液中的含量较少，cTnI释放通常只有一个峰[8]。cTn一般在心肌损伤后5 ～8h外周血中出现增高，最高值在12 ～24h,增高可持续7 ～10天（cTnI）或10 ～14天（cTnT）[8]。 外周血中存在形式外周血中的cTn究竟是以复合物还是游离形式存在，曾有过许多结果不同的研究报道。现在多认为，cTn释放主要是以TnC﹣cTnI﹣cTnT复合物形式，随后降解[9]。外周血中的cTnI既有游离形式，又有不同复合物的形式（cTnI﹣TnC、cTnI﹣cTnT以及cTnT﹣cTnI﹣TnC）[10]。在AMI病人中以cTnI﹣TnC复合物形式居多数（90%以上）[4﹑10]，cTnI﹣cTnT复合物仅在不到50%病人的血中被发现，而且其中的cTnI仅占部cTnI的5%以下[11]，因此检测重要性远不如cTnI﹣TnC复合物；其他形式的cTnI较少[10]；cTnT游离形式较多见[9]。

心肌肌钙蛋白I

心肌肌钙蛋白 心肌肌钙蛋白（cardiac troponin，cTn）是心脏横纹肌的收缩性调节蛋白复合体，在肌原纤维的细肌丝上周期性出现，并与原肌球蛋白结合，调节肌球蛋白和肌动蛋白之间钙离子依赖的ATP 酶的活性，在肌肉的收缩中发挥关键的作用。cTn是由三种不同基因的亚基组成：心肌肌钙蛋白T（cTnT）、心肌肌钙蛋白I（cTn I）和肌钙蛋白C（TnC）。目前，用于急性心肌梗塞（acute myocardial infarction，AMI）及急性冠状动脉综合征（acute coronary syndrome, ACS）实验室诊断的是cTnT和cTnI。 cTnI被美国临床生化学院（National Academy of Clinical Biochemistry，NACB）列为诊断心肌损伤时优先考虑的标志物，当心肌细胞通透性增加或者发生自我更新、凋亡甚至坏死时，游离于心肌细胞胞浆内的cTnI快速释放入外周血循环。血液中的cTnI在AMI 发病后3～6小时升高，14～29小时达峰值，5～7日恢复正常。 由于其相对分子量较肌酸激酶同工酶（CK-MB）小，心肌损伤后更早释放入血，利于早期诊断；cTnI只存在于心肌组织中，与其他组织中的TnI有明显的抗原性差异，骨骼肌损伤不影响结果的判断，所以其检测灵敏度、特异性均较高；cTnI在心肌损伤后升高持续时间长，为临床提供较宽的诊断窗口。研究表明，cTnI浓度的峰值与梗死范围有良好的相关性，对于预后判断和危险分层评估有重要的应用价值。

1999年，NACB首先提出急诊检验cTn的报告时限应在60min 以内，若无法达到此要求，应考虑采用床旁检验（point of care test, POCT）方式。此后，各相关cTn临床建议/指南均沿用此要求。目前，诸多大型医院纷纷开展cTn的POCT，其应用优势首先体现在缩短临床诊断时间，提高了临床诊断效率和急救成功率，降低患者的总体医疗费用；其次，cTn POCT的应用不需要专用的空间、大型的检验设备及专业的检验人员，建设成本相对低廉。

肌钙蛋白(TnT)的测定及临床意义

肌钙蛋白(TnT)的测定及临床意义 【正常参考值】阴性 【临床意义】 肌钙蛋白测定主要用于急性心肌梗塞的实验室诊断、不稳定心绞痛的预后判断、用于AMI后溶栓药物的治疗监测；同时它对于其它心肌细胞损害的疾病有一定的诊断价值。 1．对心肌损伤的诊断在诸多诊断急性心肌梗死(AMI)的临床生化指标中，CK-MB 曾一度被认为是诊断AMI的“金标准”，已广泛应用多年。随着对心肌肌钙蛋白(cTn)深入研究，无论是对心肌的特异性还是诊断敏感性，CK-MB的地位都受到了严重挑战。cTn 被认为是目前最好的确定标志物，正逐步取代CK-MB成为AMI的诊断“金标准”。 患有各种冠状动脉疾患的病人必然会发生心肌细胞损伤。有些病人的临床表现可能不完全符合WHO关于AMI诊断标准(不稳定心绞痛就是其中之一)，但却伴有某些心肌损伤标志物(如cTnT等)升高，从而导致细胞内的组成成分渗漏入外周血循环。这使得心肌细胞损伤标志物的检测成为可能。cTnT和cTnI在AMI后(3～6 小时)血中浓度很快升高，和CK-MB(3～8 小时)相当或稍早，它们测定的特异性和灵敏度明显高于CK-MB。cTn 具有相当长的诊断窗口期(cTnI 7～9天，cTnT更长)。cTn对急性胸痛病人(无论有无骨骼肌损伤)的诊断均优于CK-MB。研究表明：在对AMI的诊断方面cTnI和cTnT无显著差异，都能鉴别出CK-MB所不能检测出的心肌损伤。相对cTnT而言，cTnI显示出较低的初始灵敏性和较高的特异性。就上升的相对值来说，cTnT比cTnI高；在不稳定心绞痛病人中cTnT上升的频度比cTnI高。在AMI后30天死亡率的预报方面，cTnT优于cTnI。 无论是不稳定心绞痛还是无Q波的心肌梗死，最初24小时的cTnT最具预后价值。对不稳定冠状动脉疾患病人的随访发现，cTnT和运动试验两项都正常者，死亡或AMI

心肌肌钙蛋白检测的临床意义

心肌肌钙蛋白检测的临床意义 cTn被认为是目前用于ACS诊断最特异的生化指标，它们出现早，最早可在症状发作后2h出现；具有较宽的诊断窗：cTnT（5～14天），cTnI（4～10天）。在它们的诊断窗中，cTn增高的幅度要比CK-MB高5～10倍。由于在无心肌损伤时cTn在血液中含量很低，因此也可用于微小心肌损伤的诊断，这是以前酶学指标所难以做到的。cTn还具有判断预后的价值，对任何冠状动脉疾患病人，即便ECG或其他检查（如运动试验）阴性，只要cTn增高，应视为医学教育网整理具有高危险性。 1.是早期诊断AMI最好的标志物 AMI病人于发病后3～6小时升高，发病10～120小时内检测敏感性达100%，峰值时间于发病后l0～48小时左右出现，呈单相曲线，可达参考值范围的30～40倍。出现峰值较晚或峰值较高的病人增高可持续2～3周。对于非Q波MI、亚急性MI或用CK—MB无法判断预后的病人更有意义。 2.对UAP预后的判断 UAP患者常有MMD发生，但又达不到AMI的诊断标准。这种缺血性心肌损伤可通过cTn升高得以发现。UAP患者cTn升高幅度小，经治疗后约2／3以上转阴，说明心肌细胞为一过性损伤或微小坏死，与AMI有本质不同。cTn升高者是发展为AMI或猝死的高危人群，动态观察cTn水平变化对其诊断与判断UAP预后具有重要意义。有研究表明UAP患者中cTn升高组30天内AMI、心脏猝死和顽固性心绞痛的发生率为43.8%，明显高于cTnT 正常组（7.1%）。这说明如UAP患者cTn正常，则预后良好，如cTn阳性则应严密监视，可进行冠脉造影，观察冠脉病变严重程度，并给予药物治疗。如可能，应进行经皮腔内冠状动脉成形术（PTCA）或冠状动脉搭桥术（CABG）。cTn对UAP诊断的时间窗为胸痛发作后数小时至数天，也可达数周，与心肌缺血损伤时间的长短有关。应在cTn和CK-MB质量各自诊断的时间窗内适当地多次测定此二指标才能推断。 3.对于ST段抬高的AMI病人，迅速地再血管化已成为临床标准的治疗方案。溶栓治疗和／或PTCA可再通冠脉和减少死亡率。目前较为理想的非入侵性的溶栓疗效的判断组合为：生化标志物加典型的临床表现或ECG变化。冠脉再灌的早期指标有CK-MB、Mb。CTn 对于再灌的评估不够理想。 4.估计梗塞面积和心功能 cTn后期峰值与梗塞面积呈正相关，可反映心肌细胞坏死的数量；但利用cTn的峰值浓度来估计梗塞的面积不一定可靠。但cTn累积释放量与心功能受损程度呈正比。 5.其他MMD，如钝性心肌外伤、心肌挫伤、甲状腺机能减退病人的心肌损伤、药物的心肌毒性、严重脓毒血症和脓毒血症导致的左心衰时cTn也可升高。有研究表明：心肌酶谱测定在心肌炎诊断中敏感性很低（15%），但cTn有相对较高的检出值和较长的上升时间。多篇研究表明急性心肌炎的病人cTnI的阳性率较高（88%），但多为低医学教育网整理水平增高。 6.由于其他心肌标志物的心肌特异性不如cTn，故cTn被推荐用来评估围手术期心脏受损程度，确定有无围手术期AMI或了解心脏及瓣膜手术时心脏保护措施是否得当，特别是冠状动脉搭桥术后MI和MMD的鉴别。一般有围手术期MI者cTn会持续释放，血中浓度可达5.5～23ng／ml，术后第四天达高峰；无MI者cTn释放取决于心脏停搏时间的长短，动脉被夹注时间短暂者术后第一天cTn有轻度增高，动脉被夹注时间较长者血中cTn增高可延续至术后第五天。 7.cTnT用于血透病人心血管事件预测，其临床价值有待于进一步研究。有文献报告cTnT

心肌肌钙蛋白I(建议收藏)

心肌肌钙蛋白I(cTnI) 参考范围： ＜0.1nm/mL 排除心肌损伤 0。1~0。5ng/mL 心肌损伤低风险，需结合多种诊断结果及临床症状综合判定 0。5～25ng/mL 心肌损伤高风险 ＞25ng/mL 严重心肌损伤 临床意义： CTnI是心肌损伤的特异指标.心肌梗死发生后4~8h血清中cTnI 水平即可升高，12～14h达到峰值，升高持续时间较长，可达6~10天。CTnI的诊断特异性优于Mb和CK—MB,可用于评价不稳定心绞痛，cTnI水平升高预示有较高的短期死亡危险性，连续监测cTnI有助于判断血栓溶解和心肌再灌注。..。.。.文档交流 在AMI时，所有生化标志物的敏感度都与时间有关。对于胸痛发作4h以内的患者，首先应测定Mb水平；3h后得到的血液标本，应同时评价Mb和人cTnI。所有阳性结果,都可确认为AMI；所有阴性结果都可以排除心肌损伤，当结果不一致时，需要进一步联合检查胸痛发作后9h,此时所有的生化标志物都达到最大的敏感度。.。。。。。文档交流 D-二聚体（D—Dimer） 参考范围 ＜500ng/ml 可以排除 ＞500ng/ml 提示出现高凝状态，并结合临床

临床意义 1.是交联蛋白降解中的一个特异性产物,在深静脉恤衫、肺栓塞、弥漫 性血管内凝血、严重肝炎、肺栓塞等疾病中升高。。.。。..文档交流 2.也可作为溶栓治疗的观察指标 3.陈旧性血栓患者D—二聚体并不升高 4.凡有血块形成的出血，本试验均可呈阳性，故其特异性较低。 氨基末端脑钠肽前体（BNP) 参考范围 检测结果＜300pg/ml可排除心衰 50岁以下＞450pg/ml提示心衰的可能性较大 50岁—75岁＞900pg/ml提示病人心衰的可能性较大75岁以上＞1800pg/ml提示病人心衰的可能性较大临床意义 ①、BNP 诊断症状性心衰: 心力衰竭时,心脏容量负荷或压力负荷增加，心肌受到牵张或室壁压力增大，引起血中BNP 浓度增高，可诊断心力衰竭。。.。。..文档交流 ②、BNP 诊断无症状性心衰和舒张性心衰: 在无症状性左室收缩功能低下的患者中,NT2ANP 和BNP均会增高。这有助于心衰的早期诊断。..。..。文档交流 ③、BNP 鉴别诊断呼吸困难病因: 在急诊，BNP 还有助于判断急性呼吸困难患者的病因.最近对321例急性呼吸困难的患者进行了BNP 测定(由于肺心病导致的右心衰归

心肌肌钙蛋白I

心肌肌钙蛋白 I

HYTEST | 心肌肌钙蛋白I 目录 skTnT skeletal troponin T Tn Troponin TnC Troponin C

www.hytest.?介绍 肌钙蛋白复合物是一种结合于细肌丝的异聚蛋白，肌钙蛋白I是其中一个亚基。在心肌和骨骼肌的收缩过程中，肌钙蛋白扮演了重要的角色。肌钙蛋白复合物由三个亚基所组成，分别是肌钙蛋白T（TnT）、肌钙蛋白I（TnI）和肌钙蛋白C（TnC），三个亚基通过非共价相互作用结合在一起。其中，肌钙蛋白T作为原肌球蛋白的铆钉亚基，参与调节肌钙蛋白复合物与细肌丝的相互组用。在低钙离子浓度条件下，肌钙蛋白I负责抑制肌动蛋白的形成。肌钙蛋白C作为钙离子结合亚基，参与肌肉刺激并改变肌钙蛋白复合物的形成，因此可以使肌动蛋白复合物形成进而参与肌肉收缩（1）。 在人体中，TnI和TnT均存在三种亚型。其中，骨骼肌肌钙蛋白（skTnI和skTnT）分别包含快型骨骼肌肌钙蛋白I和T及慢型骨骼肌肌钙蛋白I 和T；第三种则是心肌肌钙蛋白I（cTnI）和心肌肌钙蛋白T（cTnT）。cTnI仅在心肌组织中表达（2），而cTnT特异性略低，会在某些病变的骨骼肌中瞬时表达（3）。 在20世纪80年代末期，cTnI和cTnT相继被建议作为心肌细胞死亡的标志物（4,5）。如今，这两种标志物均作为指南推荐的标志物用于辅助诊断急性心肌梗死（AMI）（6-9）、术后心肌创伤和化疗心脏毒性等临床病理学心肌损伤，以及其他疾病相关的心肌损伤。

特异性识别不同位点的心肌肌钙蛋白I 抗体 HyTest 的科学家对cTnI 抗体的研究已经超过了20年，期间开发分析了数千株cTnI 特异性抗体，仅选取最好的抗体上市销售。我们提供的cTnI 单抗位点分布信息请参考图1。 可提供不同形式的抗体 目前，我们所有cTnI 抗体均可提供腹水生产的形式。有部分抗体可同时提供体内和体外两种生产方式的抗体。此外，一小部分抗体可提供嵌合重组抗体，这类抗体由鼠源可变区片段和人源恒定区片段组合而成。嵌合抗体可有效避免检测体系中人抗鼠抗体（HAMA ）造成的假阳性和假阴性。 图1. HyTest cTnI 单克隆抗体位点分布图 我们精选的30余株抗体覆盖了cTnI 分子的不同表位。抗体位点由SPOT 技术或其他不同肽段库方法进行了精确测定。 HyTest 抗体广泛应用于各种平台的cTnI 商业试剂盒，如ELISA 、免疫比浊、侧向层析和化学发光等，在科研领域中也应用于Western Blotting 、免疫组化等。 HYTEST | 心肌肌钙蛋白I

肌钙蛋白

肌钙蛋白(Troponin，Tn)是横纹肌收缩的重要调节蛋白，由三个亚基组成：肌钙蛋白C(TnC)，肌钙蛋白T(TnT)和肌钙蛋白I(TnI)。 TnC，分子量为18000，呈晶体结构，是肌钙蛋白的Ca2＋结合亚基。骨骼肌和心肌中的TnC是相同的。 TnI，分子量为21000，是肌动蛋白抑制亚基。它有三种亚型：快骨骼肌亚型、慢骨骼肌亚型和心肌亚型。这三种TnI亚型分别源于三种不同的基因。心肌亚型(cTnI)相对两种骨骼肌亚型约有40%的不同源性。AMI后cTnI的释放形式(游离形式还是与其他肌钙蛋白结合成复合物，氧化形式还是还原形式)迄今为止还不完全清楚。 TnT，分子量为37000，可能为不对称蛋白结构，是原肌球蛋白结合亚基。TnT也有三种亚型：快骨骼肌亚型、慢骨骼肌亚型和心肌亚型。它们在骨骼肌或心肌中的表达分别受不同的基因调控。 肌钙蛋白在循环血中的半衰期为大约数小时，由肾脏排出体外。游离cTnI在循环血中的半衰期大约为67 min。 二、心肌肌钙蛋白在临床诊断中的应用 1.对心肌损伤的诊断在诸多诊断急性心肌梗死(AMI)的临床生化指标中，CK-MB曾一度被认为是诊断AMI的“金标准”，已广泛应用多年。随着对心肌肌钙蛋白(cTn)深入研究，无论是对心肌的特异性还是诊断敏感性，CK-MB的地位都受到了严重挑战。cTn被认为是目前最好的确定标志物，正逐步取代CK-MB成为AMI的诊断“金标准”。 患有各种冠状动脉疾患的病人必然会发生心肌细胞损伤。有些病人的临床表现可能不完全符合WHO关于AMI诊断标准(不稳定心绞痛就是其中之一)，但却伴有某些心肌损伤标志物(如cTnT等)升高，从而导致细胞内的组成成分渗漏入外周血循环。这使得心肌细胞损伤标志物的检测成为可能。cTnT和cTnI在AMI后(3～6 h)血中浓度很快升高，和CK-MB(3～8 h)相当或稍早，它们测定的特异性和灵敏度明显高于CK-MB。cTn具有相当长的诊断窗口期(cTnI 7～9天，cTnT更长)。cTn对急性胸痛病人(无论有无骨骼肌损伤)的诊断均优于CK-MB。研究表明：在对AMI的诊断方面cTnI和cTnT无显著差异，都能鉴别出CK-MB 所不能检测出的心肌损伤。相对cTnT而言，cTnI显示出较低的初始灵敏性和较高的特异性。就上升的相对值来说，cTnT比cTnI高；在不稳定心绞痛病人中cTnT上升的频度比cTnI 高。在AMI后30天死亡率的预报方面，cTnT优于cTnI。 无论是不稳定心绞痛还是无Q波的心肌梗死，最初24小时的cTnT最具预后价值。对不稳定冠状动脉疾患病人的随访发现，cTnT和运动试验两项都正常者，死亡或AMI的仅1%；若异常，死亡或AMI可达50%。对急性冠状动脉疾患(包括心肌梗死)病人的随访研究发现，cTnT小于0.1 μg/L的病人的死亡率仅4%，相比而言，大于0.1 μg/L的病人的死亡率则大3倍，发生休克的百分率大3倍，发生充血性心功能衰竭的百分率也增加1倍。对cTnI的观察研究得到了类似的结果。不稳定冠状动脉疾患病人中，cTnI大于0.1 μg/L的病人死亡