饲料中常见益生菌生物学特性分析
饲料中常见益生菌生物学特性分析
益生菌作为有效替代抗生素的产品已被广泛使用，本文通过对几种常见益生菌生物学特性及在生产应用中的影响作用作一综述，旨在为广大用户选择使用益生菌时作一参考。
1.常用几种益生菌
1.1乳酸菌
1.1乳酸杆菌
最早应用于动物生产，最适生长pH值为5.5～5.8，培养温度是15～45℃（最适37℃）。耐酸不耐热，一般情况65℃～80℃下致死。但崔国艳等（2009）分离出可耐受70℃高温的德氏乳杆菌，黄沧海等（2005）报道嗜酸乳酸杆菌经过75℃15min之后存活率能达到62.5%，在pH2.0处理6h存活率达69.5%。龙淼等（2009）试验表明犊牛黏膜乳杆菌在pH3.24条件下存活且能繁殖生长，具有很强的耐酸性。易力等（2008）表明鸽源嗜酸乳酸菌在0.8%～1.0%的牛胆盐中存活率在55%～95%，丁轲等（2004）从鸡回肠分离的乳酸杆菌对pH2和胆盐浓度0.1～0.6%条件有较难强的耐受性。季云峰等（2009）从鸡盲肠分离出短乳杆菌对致病菌鸡大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌和金黄色葡萄球菌均产生明显的抑菌圈，与徐海燕等（2006）报道一致。李平兰等（2004）研究了显示，乳酸杆菌对大环内酯类、四环素类及氯霉素敏感，对氨基糖苷类多数表现出耐药，对头孢素类、青霉素类、糖肽类等表现出不同的药敏性。孙宪文（2008）以浓度为0.15%的猪源乳酸杆菌用于15～45日龄左右的仔猪，显著提高仔猪肠道内乳酸杆菌数量，减少大肠杆菌数量。粘膜乳杆菌代谢产物对致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌能产生明显的抑菌圈，直径在11.0～18.0mm之间。
1.1.2双歧杆菌
王建业等（2000）从乳猪肠道分离出的双歧杆菌在6.0～8.5培养18h之间均生长良好，最适pH为6.5～8.0，在低于25℃或高于46℃条件下培养24h，均不能生长，最适生长温度为38～42℃。光线对双歧杆菌有一定的影响，以避光保存最好，但即使在室外光线条件下放置7d，其活菌数仍能达到6.3×108cfu/ml，对光线有较强的抵抗力。王建业等（2000）另一试验表明，胆盐对双歧杆菌生长有抑制作用，部分菌株在含0.2%牛胆盐中已不能生长或生长很弱。经筛选的个别菌株能耐受0.8%～1.0%的牛胆盐。双歧杆菌对红霉素、万古霉素、四环素、青霉素高度敏感，而对磺胺嘧啶、新霉素、卡那霉素、链霉素有耐药性。动物肠道生物屏障99%由厌氧和兼性厌氧菌组成，双歧杆菌是肠道中比例最大的厌氧菌，在维护肠道生物屏障方面居主导地位，通过竞争性占位，分泌醋酸和乳酸降低肠道pH，抑制G-兼性厌氧菌等的过度增殖，刺激肠道分泌型IgA（SIgA）的合成和分泌增加，SIgA同黏液层蛋白通过包被、黏附等方式阻止潜在致病菌侵入。研究证实，增加双歧杆菌数量间接保护了黏膜的黏液层，为受损的肠黏膜提供增殖微环境。
1.1.3肠球菌
目前，对肠球菌的应用主要集中于粪肠球菌和屎肠球菌。最早利用粪肠球菌的是由日本开发的乳酶生，用于治疗肠道疾病。内源性肠球菌作为人体内正常菌群之一，定植于回肠和结肠部。罗珍兰等（1996）和杨霞等（2009）分离出的乳酸粪肠球菌可在10℃、45℃、60℃，30min处理下可以生长，最适pH值7～9，在40%牛胆盐的环境中也可生长。宋拓等（2009）发现微囊包埋的粪肠球菌在人工胃酸环境(pH2.1)下2h，存活率达96%，100℃5min存活率为86.91%，120℃2min
为89.18%，稳定性较高。杨桂梅等（2001）报道猪源屎肠球菌在pH7时生长良好，pH3~4时活菌数减少，pH2时不能很好存活。经80℃10min活菌数保持在106~107，90℃5min活菌数在105以上。粪肠球菌对青霉素、万古霉素、氨苄西林、呋喃妥因等药物敏感，对红霉素、四环素、利福平、克林霉素等耐药；屎肠球菌对替考拉宁、万古霉素等敏感，对青霉素、红霉素、利福平、环丙沙星、庆大霉素、亚胺硫霉素耐药，抗药性较强。
1.2 芽孢杆菌类
常用的是需氧芽孢杆菌中的非致病性菌，以内生孢子形式存在，耐酸、耐盐、耐高温。pH在2～10之间均可存活（最适pH7.2～7.5），可耐受90～110℃的高温，适于饲料生产加工过程。此类菌在动物肠道中少量存在，孢子进入动物肠道后，可迅速复活并分泌活性很强的消化酶，还可平衡稳定乳酸菌。杜冰等（2008）研究枯草芽孢杆菌在100℃60min的湿热和120℃60min的干热处理后活菌数只下降一个数量级，在pH2.1下处理1天活率达69.8%，说明有很强的耐热耐酸性。董尚智等（2009）研究表明地衣芽孢杆菌培养液在经37～90℃，10min处理后，菌液的OD值还有上升趋势，人工胃液处理30min内，地衣芽孢杆菌仍可生长，此后随处理时间的延长存活率呈线性下降。地衣芽孢杆菌对氟哌酸、环丙沙星、金霉素敏感，对磺胺二甲基嘧啶、土霉素、丙酸钠等不敏感，高浓度铜盐也会影响芽孢杆菌的活性。王焕等（2008）发现鸡源短小芽孢杆菌在胆盐浓度为0.03%～0.30%范围内有一定的耐受力（雏鸡小肠内胆盐浓度在0.03%～0.30%），对人工胃液、人工肠液的耐受力很强，明显抑制大肠杆菌，对土霉素、盐霉素、喹乙醇、泰洛菌素、呋喃唑酮等抗生素有一定的耐受性。戴青等（2008）证实凝结芽孢杆菌经模拟胃液处理30min后存活率91%，耐猪胆盐浓度3.0%，大肠杆菌、伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等均有较强的抑制作用。Guo等（2006）饲喂枯草芽孢杆菌后，仔猪粪中乳酸杆菌增加，大肠杆菌减少。枯草芽孢杆菌可延缓仔猪断奶前抗体水平下降的速度，显著降低腹泻指数。目前，芽孢杆菌的抑菌作用主要是生物夺氧与生物颉颃，芽孢杆菌在生长代谢过程中能产生蛋白多肽类物质和大量的溶菌酶，直接抑制和杀伤病原菌。
1.3 酵母菌类
酵母菌是单细胞真核微生物，分布广泛，容易获得，可广泛的应用于动物生产。对于酵母菌的研究往往聚焦于它的营养价值，酵母菌的菌体蛋白约占菌体DM的32%～75%。据报道，每100kg干酵母所含的蛋白质，相当于500kg大米、217kg大豆或250kg猪肉的蛋白质含量，且Lys、Met含量高。酵母细胞含有4.5%～8.5%的核糖核酸，约2%的VB和多种矿物质。矿物质约占酵母细胞干重的3%～10%，磷含量最高，其次为K、Ca、S、Na等。某些酵母菌还有富集微量元素的作用，已列入我国饲料添加剂目录中的有酵母铜、酵母铁、酵母锰及酵母硒等。酵母菌本身还含有丰富的酶类，如单胃蛋白酶淀粉酶、纤维素酶及植酸酶。酵母菌细胞壁具有多种活性物质，主要有内壁的β-葡聚糖、外壁的甘露寡糖、糖蛋白、几丁质、蛋白质脂类和灰分等。酵母菌产物甘露糖和β-葡聚糖具有激发机体免疫功能，甘露寡糖还可作为营养物质促进双歧杆菌和乳酸杆菌的增殖。
2 影响益生菌活性的因素
2.1 饲料加工工艺对益生菌的影响
饲料的制粒调质温度为70～90℃之间，饲料在调质器和制粒机内总的时间25～30秒。耐高温之后存活率降低是益生菌作为饲料添加剂的主要限制性因素之一。上述列举各菌种特性表明，几种益生菌（或经筛选后得到的益生菌）可以
耐受一定程序在高温，其中芽孢杆菌耐高温能力最强，相对于对制粒机的短时间高温应该可以承受，拓宽了作为饲料添加剂的前途。
2.2 胃肠环境对益生菌的影响
益生菌作为微生态添加剂能够有效产生各种生物学效应时（提高生产性能、预防腹泻及拮抗肠道病原微生物等），最重要的是必须保证外源添加的菌种能够以较多的活菌数到达消化道后段，具有一定的活力在肠道里生长繁殖、粘附，从而发挥作用。所以当各菌种经口进入消化道的过程中，必须耐受低pH值和较高浓度的胆盐。在pH2.0或pH2.5处理下益生菌的具有一定的存活率或还具有生物活性是较为理想的。成年猪的胃pH值一般为1～2，断奶仔猪胃的pH值变异较大，一般为2.60～5.83，鸡胃液中的pH值通常为3.0左右，空腹或饲料中添加酸化剂时可达2.0或更低，食用碱性饲料可达4～5左右，而且食物通过胃的时间相对较短，一般为1h左右。胃是动物消除进入体内病原微生物的第一道屏障，当然正是这种胃酸环境对进入体内的有益菌活力产生不利影响。各种益生菌在肠道内的定植和存活，除对胃酸度抵抗力强之外，在通过肠道时还要抑制胆汁酸的杀伤。胆汁酸可以分解细菌细胞壁中脂肪而使细菌失活。它抗胆盐能力越强，在肠道内的存活几率越大。某些乳酸菌（如干酪乳杆菌）可降解胆盐，具有较强的粘附能力，乳链球菌SB900在40%胆汁的作用下，其生长速度反而明显增加。另外，用于某种动物的益生菌制剂最好选用来自本种动物的菌株组成，因为很多细菌有宿主特异性，来自本动物肠道内菌株更有利于其在宿主肠道的定植。
2.3 抗生素的合理使用
上述几种益生菌对常见的抗生素有一定的耐药性和敏感性。在使用益生菌时避免与其敏感的抗生素同时使用，这是保证益生菌发挥作用最后一步。若长期滥用大剂量广谱抗生素以及在严重外伤、大手术等应激情况下，机体肠道健全的生物屏障会遭到破坏，并表现出胃肠道不适、腹泻等菌群紊乱症状，甚至发展为伪膜性肠炎、二重感染、肠道细菌或内毒素移位，进一步加重病情。
思科福技术部张冬梅
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高通量测序生物信息学分析(内部极品资料,初学者必看)
基因组测序基础知识 ㈠De Novo测序也叫从头测序，是首次对一个物种的基因组进行测序，用生物信息学的分析方法对测序所得序列进行组装，从而获得该物种的基因组序列图谱。 目前国际上通用的基因组De Novo测序方法有三种： 1. 用Illumina Solexa GA IIx 测序仪直接测序； 2. 用Roche GS FLX Titanium直接完成全基因组测序； 3. 用ABI 3730 或Roche GS FLX Titanium测序，搭建骨架，再用Illumina Solexa GA IIx 进行深度测序，完成基因组拼接。 采用De Novo测序有助于研究者了解未知物种的个体全基因组序列、鉴定新基因组中全部的结构和功能元件，并且将这些信息在基因组水平上进行集成和展示、可以预测新的功能基因及进行比较基因组学研究，为后续的相关研究奠定基础。 实验流程： 公司服务内容 1.基本服务：DNA样品检测；测序文库构建；高通量测序；数据基本分析（Base calling，去接头， 去污染）；序列组装达到精细图标准 2.定制服务：基因组注释及功能注释；比较基因组及分子进化分析，数据库搭建；基因组信息展 示平台搭建 1.基因组De Novo测序对DNA样品有什么要求？
(1) 对于细菌真菌，样品来源一定要单一菌落无污染，否则会严重影响测序结果的质量。基因组完整无降解(23 kb以上)， OD值在1.8～2.0 之间；样品浓度大于30 ng/μl；每次样品制备需要10 μg样品，如果需要多次制备样品，则需要样品总量=制备样品次数*10 μg。 (2) 对于植物，样品来源要求是黑暗无菌条件下培养的黄化苗或组培样品，最好为纯合或单倍体。基因组完整无降解(23 kb以上)，OD值在1.8～2.0 之间；样品浓度大于30 ng/μl；样品总量不小于500 μg，详细要求参见项目合同附件。 (3) 对于动物，样品来源应选用肌肉，血等脂肪含量少的部位，同一个体取样，最好为纯合。基因组完整无降解(23 kb以上)，OD值在1.8～2.0 之间；样品浓度大于30 ng/μl；样品总量不小于500 μg，详细要求参见项目合同附件。 (4) 基因组De Novo组装完毕后需要构建BAC或Fosmid文库进行测序验证，用于BAC 或Fosmid文库构建的样品需要保证跟De Novo测序样本同一来源。 2. De Novo有几种测序方式 目前3种测序技术 Roche 454，Solexa和ABI SOLID均有单端测序和双端测序两种方式。在基因组De Novo测序过程中，Roche 454的单端测序读长可以达到400 bp，经常用于基因组骨架的组装，而Solexa和ABI SOLID双端测序可以用于组装scaffolds和填补gap。下面以solexa 为例，对单端测序(Single-read)和双端测序(Paired-end和Mate-pair)进行介绍。Single-read、Paired-end和Mate-pair主要区别在测序文库的构建方法上。 单端测序(Single-read)首先将DNA样本进行片段化处理形成200-500bp的片段，引物序列连接到DNA片段的一端，然后末端加上接头，将片段固定在flow cell上生成DNA簇，上机测序单端读取序列(图1)。 Paired-end方法是指在构建待测DNA文库时在两端的接头上都加上测序引物结合位点，在第一轮测序完成后，去除第一轮测序的模板链，用对读测序模块(Paired-End Module)引导互补链在原位置再生和扩增，以达到第二轮测序所用的模板量，进行第二轮互补链的合成测序(图2)。 图1 Single-read文库构建方法图2 Paired-end文库构建方法
浅谈在饲料中合理应用益生菌
浅谈在饲料中合理应用益生菌 摘要:近年来,随着生物技术和微生物工业的发展,一些微生态调节剂作为饲料中抗生素的替代品应运而生,如活菌制剂(益生菌)和低聚糖(益生元)等,它们通过维持动物肠道内微生态平衡而促进动物生长,提高动物机体免疫力和生产性能。所以发展绿色无公害饲料添加剂是21 世纪养殖业的重要研究方向,饲用益生菌研发的是实现这一目的的主要途径。 关键词:合理应用益生菌 近年来,随着生物技术和微生物工业的发展,一些微生态调节剂作为饲料中抗生素的替代品应运而生,如活菌制剂(益生菌)和低聚糖(益生元)等,它们通过维持动物肠道内微生态平衡而促进动物生长,提高动物机体免疫力和生产性能。所以发展绿色无公害饲料添加剂是21 世纪养殖业的重要研究方向,饲用益生菌研发的是实现这一目的的主要途径。 1、常用的益生菌种类 根据菌株的组成可分为单一菌株和复合菌株。现生产上常用的多为复合菌株。目前最常用的菌种为乳酸杆菌属、粪链球菌属、芽孢杆菌属和酵母菌属。其中乳酸杆菌属、粪链球菌属为正常存在的微生物,而芽孢杆菌属和酵母菌属仅零星存在于肠道中。芽孢杆菌具有较高的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活性,可明显提高畜禽生长速度和饲料利用率。芽孢杆菌在饲料加工过程及酸性环境中有较高的稳定性,在肠道环境中不增殖。目前以被国家批准使用的益生菌有以下几种:芽孢杆菌、乳酸杆菌、粪链球菌、酵母菌、黑曲菌、米曲菌。 2 、益生菌的合理使用 2.1 选购应有针对性 细菌对肠道的粘附具有种属特异性,从某种动物分离的细菌只对该动物消化道上皮有较强的吸附性,如猪用的益生菌用于其他动物不能发挥最大的疗效。因此,在选择益生菌时,要根据微生物的宿主特异性,选择相对应的益生菌。动物的日龄不同,其肠道正常菌群不同,对新生动物使用益生菌,效果较明显,因为新生动物肠道的正常菌群还处于连续变化的阶段,更易受到益生菌的影响。 2.2 保存方法要科学 益生菌含有有益的微生物,影响其稳定性的因素主要有温度、湿度、酸度、机械、营养等。因此未启用的益生菌应保存在干燥、阴凉的地方,适宜的保存温度为5℃～15℃;此外,未用完的益生菌特别要注意密封,因为氧气可使其中的厌氧菌失活。益生菌保存中的活菌率较不稳定,随着时间推移,活菌数量会不断减少,其减少速度因微生物种类不同而异,以芽孢杆菌最为稳定,其次是肠球菌群中的粪
生物信息学分析实践
水稻瘤矮病毒(RGDV)外层衣壳蛋白 P8的同源模建 高芳銮(Raindy) 同源模建(homology modeling) ，也叫比较模建(Compatative modeling)，其前提是一个或多个同源蛋白质的结构已知，当两个蛋白质的序列同源性高于35%，一般情况下认为它们的三维结构基本相同；序列同源性低于30%的蛋白质难以得到理想的结构模型。同源模建是目前最为成功且实用的蛋白质结构预测方法， SWISS-MODEL 是由SwissProt 提供的目前最著名的蛋白质三级结构预测服务器，创建于1993年，面向全世界的生物化学与分子生物学研究工作者提供免费的自动模建服务。SWISS-MODEL 服务器提供的同源模建有两种工作模式：首选模式(First Approach mode)和 项目模式(Project mode)。 本实例以RGDV P8蛋白为研究对象采用首选模式进行同源模建。 图1 SWISS-MODEL 的主界面 操作流程如下： 1.选择模式 单击左侧的“MENU ”菜单下方的“First Approach mode ”，右侧窗口自动SWISS-MODEL 工作窗口，在相应文本框中分别输入的E-mail 、项目标题、待模建的蛋白质序列，SWISS-MODEL 支持以FASTA 格式直接输入或提交UniProt 的登录号，如图2所示。 《生物信息学分析实践》样 稿
图2 SWISS-MODEL 的序列提交页面 2.参数设置 当前版本只有一个选项可设置，如果用户需要使用指定的模板，可在“Use a specific template ”后的输入框填入ExPDB 晶体图像数据库中的模板代码，其格式为“PDBCODE+ChainID ”，如“1uf2P ”。本例不使用指定模板，默认留空。完毕，点击“Submit Modeling Request ”提交模建请求，服务器返回提交成功的提示，如图3所示： 图3 成功提交 SWISS-MODEL WORKSPACEW 页面会自动刷新，直至模建完成，如图4所示，同时模建结果也会发送到指定的邮箱。 3结果解读 点击下图右上方的“Print/Save this page as ”后的图标，可以将整个结果以PDF 文档格式保存到本地计算机中。模建结果给出了五个部分的信息：模建详情(Model Details)、比对信息(Alignment)、模建评价 (Anolea/Gromos/Verify3D)、模建日志(Modelling log)、模板选择日志(Template Selection Log)。 《生物信息学分析实践》样稿
饲料常规化验
第一章化验的基本要求 1、严格执行化验标准。 2、了解有关原理，熟悉操作的主要步骤及注意事项。并预先写好化验报告中的部分内容，以便化验时及时、准确地进行记录。 3.使用不熟悉其性能的仪器和试剂之前，应查阅有关书籍或请教他人。 4.保持化验室清洁、安静，使实验台整洁，仪器安置有序，注意节约和安全。 5.化验完毕后，实事求是地填写化验结果和数据。 6.积极开发新的检测项目和方法。 7.开发新的检测指标进行回收率的验证（样品和标准品对检）。 8.定期开展误差较正（送检、互检、自检）。 9.使用国际制单位。 一、制样 1、样品的缩分：用四分法分样 将样品倒在清洁、光滑、平坦的光面硬纸上，充分混匀后将样品摊成平面正方形，然后以两条对角线为界分成四个三角形，取出其中两个对角三角形的样品，剩下的样品再按上述方法反复缩分，直到最后剩下的两个对顶三角形的样品接近200g为止。 2、样品的处理 将粒状样品用样品粉碎机粉碎，装入样品袋等待检验。 3、样品标示 标示样品名称、日期、批号、采样人等。
二、留样：制备好样品需留样，以备复验。 留样时间 一般原料30-60天，半成品或成品30天，化验指标有疑问留样60天。 饲料水分的测定 1、适用范围标准适用于测定配合饲料和单一饲料中水分 含量，但用作饲料的奶制品、动物和植物油脂、矿物质除外。 2、原理试样在105±2℃烘箱内，在大气压下烘干，直至恒 重、散失的重量为水分。 4、测定步骤 洁净称样皿，在105±2℃烘箱中烘1h取出，在干燥器中冷却 30min，称准至0.0002g，再烘干30min，同样冷却，称重，直 至两次重量之差小于0.0005g为恒重（W1)。 用已恒重称样皿称取样品2-5g（W），在105±2℃烘箱中烘3h （以温度到达105℃开始计时），取出，盖好称样皿盖，在干燥 器中冷却30min称重。 再同样烘干1h，冷却，称重，直至两次称重之重量差小于 0.002g(W2）。 5、测定结果的计算 5.1计算公式 (W1+W)-W2 (水分)%= ────×100 W
EM益生菌在养殖业的具体用法
EM益生菌在养殖业的具体用法 一、机理与作用 益生菌掺入饲料和饮水进入动物肠道后，与肠道内有益菌一起形成强有力的优势种群，抑制和消灭致病菌群，同时分泌与合成大量氨基酸、蛋白质、维生素、各种生化酶、抗生素、促生长因子等营养与激素类物质，以调整和提高畜禽机体各器官功能，提高饲料转化率，对畜禽产生免疫、营养、生长刺激等多种作用，达到防病治病、提高成活率、促进生长和繁殖、降低成本、消除粪尿臭味、净化环境、增产增收等明显效果。其具体作用表现为： 1．提高饲料转化率，降低成本。 经益生菌多液发酵或处理过的饲料大分子有机物被分解为小分子有机物，更有利于动物体的吸收利用，加之菌体本身及其合成分泌的活性酶等物质均大大提高了饲料的营养价值。经测定，益生菌发酵饲料中所含18 种氨基酸总量明显增加，且适口性好，畜禽喜食。饲喂益生菌液饲料一般可使料肉比、料蛋比下降10-20％。 2．对各种常见病有奇特的防治效果。 益生菌能提高畜禽的免疫力和抗病性，降低发病率。在临床上可有效预防和治疗一般常见病。 3．促进生长，提高日增重，缩短饲养时间。 乳猪较常规饲养日增重增加40％以上，育肥猪一般可提前10天上市；僵猪能改善生长性能，逐步恢复到正常猪的生长速度。肉鸡（鸭）可提前3-7天上市。 4．明显提高繁殖率。 交配前20天开始喂益生菌饲料，母猪产仔率可提高30-50％，母羊受胎率100％，双胞胎、三胞胎逐渐增多；且小畜健壮，生长快。不孕母猪饲喂EM益生菌多效活性液饲料半个月后会发情受孕。蛋鸡可提前10 天左右产蛋，延长产蛋高峰期两个月以上，产蛋率提高15％以上。 5．除臭、驱蚊蝇，改善饲养环境。 6．全面改善肉、蛋、奶品质，生产鲜嫩无腥的纯正天然绿色食品。据国家卫生部食品卫生监督检验所检测饲喂EM益生菌多效活性液的鸡蛋，蛋白质提高5.56％，脂肪和胆固醇分别下降 73.6％和82.2％。且蛋黄颜色较深，蛋白粘稠，没有检测出任何化学激素类残留。 二、益生菌在养殖业的具体用法 1．将饲料经益生菌发酵后饲喂畜禽。 2．饲喂益生菌发酵饲料后，还应每周喂饮两次500倍益生菌稀释液，不喂益生菌发酵饲料的畜禽，应在水槽中加入500倍益生菌稀释液，让畜禽每天自由饮用。 3．将地面原先的铺垫材料去除清扫后，用250倍益生菌稀释液直接喷洒畜禽栏舍（上下左右均喷到），待干燥后，铺上新的铺垫材料，并喷施益生菌，3 天喷一次，臭气减轻后逐渐降至7 天-10 天-15 天喷洒一次。恶臭味进一步减轻后，可用500-1000 倍益生菌稀释液1 个月喷洒一次。 4．用益生菌液防治畜禽疫病。患病畜禽可全天饲饮100-200倍稀释液；病重的可用EM益生菌多效活性液直接灌服，每天2 次，牲畜每头每次20-100 克，禽类每羽每次1-2 克。 提请用户注意，饲料、饮水及栏舍清扫喷洒全程配套使用益生菌，效果最佳。 三、益生菌在养殖业的其他用法提示 1.养猪 （1）如不用全发酵饲料，可根据猪只大小在日粮中加入5-30％的益生菌发酵料，拌匀喂猪。亦可将100倍益生菌发酵液与饲料拌匀饲喂,益生菌含量为饲料总量500 分之一。
蛋白质组学生物信息学分析介绍
生物信息学分析FAQ CHAPTER ONE ABOUT GENE ONTOLOGY ANNOTATION (3) 什么是GO？ (3) GO和KEGG注释之前，为什么要先进行序列比对（BLAST）？ (3) GO注释的意义？ (3) GO和GOslim的区别 (4) 为什么有些蛋白没有GO注释信息？ (4) 为什么GO Level 2的统计饼图里蛋白数目和差异蛋白总数不一致？ (4) 什么是差异蛋白的功能富集分析&WHY？ (4) GO注释结果文件解析 (5) Sheet TopBlastHits (5) Sheet protein2GO/protein2GOslim (5) Sheet BP/MF/CC (6) Sheet Level2_BP/Level2_MF/Level2_CC (6) CHAPTER TWO ABOUT KEGG PATHWAY ANNOTATION (7) WHY KEGG pathway annotation? (7) KEGG通路注释的方法&流程？ (7) KEGG通路注释的意义？ (7) 为什么有些蛋白没有KEGG通路注释信息？ (8) 什么是差异蛋白的通路富集分析&WHY？ (8) KEGG注释结果文件解析 (8) Sheet query2map (8) Sheet map2query (9) Sheet TopMapStat (9) CHAPTER THREE ABOUT FEATURE SELECTION & CLUSTERING (10) WHY Feature Selection? (10)
聚类分析（Clustering） (10) 聚类结果文件解析 (10) CHAPTER FOUR ABOUT PROTEIN-PROTEIN INTERACTION NETWORK (12) 蛋白质相互作用网络分析的意义 (12) 蛋白质相互作用 VS生物学通路？ (12) 蛋白质相互作用网络分析结果文件解析 (12)
中国饲料成分及营养价值表第27版-中国饲料数据库
20 中国饲料成分及营养价值表（第27版） TABLES OF FEED COMPOSITION AND NUTRITIVE V ALUES IN CHINA 表7 常用矿物质饲料中矿物元素的含量（以饲喂状态为基础） 序 号 中国饲料号 (CFN) 饲料名称 Feed Name 化学分子式 Chemical formular 钙(Ca) a (%) 磷(P) (%) 磷利 用率b 钠(Na) (%) 氯(Cl)(%) 钾(K) (%) 镁(Mg) (%) 硫(S) (%) 铁(Fe) (%) 锰(Mn) (%) 01 6-14-0001 碳酸钙，饲料级轻质calcium carbonate CaCO 3 38.420.02 0.080.020.08 1.6100.080.06 0.02 02 6-14-0002 磷酸氢钙,无水calcium phosphate(dibasic),anhydrous CaHPO 4 29.60 22.77 95~1000.180.47 0.15 0.800 0.80 0.79 0.14 03 6-14-0003 磷酸氢钙,2个结晶水calcium phosphate(dibasic),dehydrate CaHPO 4·2H 2O 23.2918.00 95~100 04 6-14-0004 磷酸二氢钙calcium phosphate(monobasic)monohydrate Ca(H 2PO 4)2·H 2O 15.9024.58 1000.20 0.160.9000.800.75 0.01 05 6-14-0005 磷酸三钙(磷酸钙)calcium phosphate(tribasic) Ca 3(PO 4)2 38.76 20.0 06 6-14-0006 石粉c 、石灰石、方解石等 limestone 、calcite etc. 35.840.01 0.060.02 0.11 2.0600.040.35 0.02 07 6-14-0007 骨粉，脱脂bone meal, 29.8012.50 80~90 0.040.20 0.300 2.40 0.03 08 6-14-0008 贝壳粉shell meal 32~35 09 6-14-0009 蛋壳粉egg shell meal 30~40 0.1~0.4 10 6-14-0010 磷酸氢铵ammonium phosphate(dibasic) (NH 4)2HPO 4 0.3523.48 1000.20 0.16 0.750 1.50 0.41 0.01 11 6-14-0011 磷酸二氢铵ammonium phosphate (monobasic) NH 4 H 2PO 4 26.93 100 12 6-14-0012 磷酸氢二钠sodium phosphate (dibasic) Na 2HPO 4 0.09 21.82 10031.04 13 6-14-0013 磷酸二氢钠sodium phosphate (monobasic) NaH 2PO 4 25.81 10019.170.020.01 0.010 14 6-14-0014 碳酸钠sodium carbonate Na 2CO 3 43.30 15 6-14-0015 碳酸氢钠sodium bicarbonate NaHCO 3 0.01 27.000.01 16 6-14-0016 氯化钠sodium chloride NaCl 0.30 39.50 59.00 0.0050.20 0.01 17 6-14-0017 氯化镁magnesium chloride hexahydrate MgCl 2·6H 2O 11.950 18 6-14-0018 碳酸镁magnesium carbonate MgCO 3·Mg(OH)2 0.02 34.000 0.01 19 6-14-0019 氧化镁magnesium oxide MgO 1.69 0.02 55.0000.10 1.06 20 6-14-0020 硫酸镁,7个结晶水magnesium sulfate heptahydrate MgSO 4·7H 2O 0.02 0.019.86013.01 21 6-14-0021 氯化钾potassium chloride KCl 0.05 1.0047.5652.440.2300.320.06 0.001 22 6-14-0022 硫酸钾potassium sulfate K 2SO 4 0.15 0.09 1.50 44.870.600 18.40 0.07 0.001 注： ①数据来源：《中国饲料学》（2000，张子仪主编），《猪营养需要》（NRC ，2012）。 ②饲料中使用的矿物质添加剂一般不是化学纯化合物，其组成成分的变异较大。如果能得到，一 般应采用原料供给商的分析结果。例如饲料级的磷酸氢钙原料中往往含有一些磷酸二氢钙，而磷酸二氢钙中含有一些磷酸氢钙。a 在大多数来源的磷酸氢钙、磷酸二氢钙、磷酸三钙、脱氟磷酸钙、碳酸钙、硫酸钙和方解石石粉中，估计钙的生物学利用率为90~100%，在高镁含量的石粉或白云石石粉中钙的生物学效价较低，为50~80%；b 生物学效价估计值通常以相当于磷酸氢钠或磷酸氢钙中的磷的生物学效价表示；c 大多数方解石石粉中含有38%或高于表中所示的钙和低于表中所示的镁。
生物信息学分析
生物信息学分析 生物信息学难吗？ 经常有人向我问这个问题，这有什么疑问吗？如果不难学，根本就不用问我这个问题。也无需投入那么多时间精力就能掌握，更无需花费三四千元参加线下的培训班，也不会月薪过万。所以，答案很肯定，道理很简单：生物信息比较难学。 为什么难学？ 我总结里几点原因。首先，这是一个交叉学科，要求你既要有生物学的基础，又要有很强的计算机操作技能。这个就有点困难了。因为只是一个生物学就包括多个门类，有很多东西需要去学习，还需要学习计算机知识。很多人一门内容还没学明白，现在还得在加一门，这就属于祸不单行，雪上加霜，屋漏偏逢连夜雨。因此，这种既懂生物学，又懂计算机的复合型人才就比较短缺。而且，生物信息本质上属于数据挖掘，除了生物，计算机，到后面还需要极强的统计学知识才能做好数据分析，所以，还得加上统计学，也就是生物信息学=生物学+计算机科学+统计学三门学科的知识，这也就是为什么生物信息学比较难学。 第二个原因，生物信息本身就包括很多内容，比如DNA的分析，RNA的分析，甲基化的分析，蛋白质的分析等方面，每一
门类又完全不同，从物种方面来分，动物，植物，微生物，医学等有差别很大，很难有一劳永逸，放之四海而皆准的分析方法。 第三个原因就是生物信息是一门快速发展的学习，会出现很多新的测序方法，比如sanger测序，illumina，BGIseq，PacBio，IonTorrent，Nanopore等，每一个平台技术原理完全不同，因此数据特点也完全不同，这就需要针对每一个平台的数据做专门的学习，而且每个平台又在不断的推陈出现，可能今天你刚开发好的方法，产品升级了，都得推倒重来。还有很多新的技术，例如现在比较火的单细胞测序，Hi-C测序，Bionano测序等等内容，以后还出现更多新技术新方法，足够让你活到老，学到老。当然，你先要能活到老，吾生也有涯，而知也无涯。以有涯随无涯，殆已！ 高风险才有高收益 当然啦，虽然你已经看到学习生物信息肯定是不容易了，门槛很高，但是呢，门槛高也有很多好处，就是挡住了一部分人，当你学会了，迈过门槛，你的身价就提高了。如果人人都很容易掌握了，那么也就不值钱了。所以，生物信息，前途是光明的，道路是曲折的。
饲料六大指标检测.
饲料、粪便常规指标检测 1.水分 原理:样品在103度烘箱内,在大气压下烘干,直至恒重。遗失的质量为水分。在该温度下干燥,不仅饲料中的吸附水被蒸发,同时一部分胶体水分也被蒸发,另外还有少量其他易挥发物质挥发。 步骤:1.洁净的称样皿(103±2度烘箱中烘30min, 干燥器中冷却30分钟后称重,准确至0.001g.(重复操作,直至2次质量之差小于0.0005g为恒重。 2.分析天平称取5g左右式样到称样皿中(每个样品2个平行,还要2个对照盖子无需盖严,留缝在103度烘箱中烘4h,取出盖好盖子,冷却30分钟称重。标准:GBT 6435-2006 饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定 2.粗灰分 原理:试样在550度灼烧后,所得残渣,用质量分数表示。残渣中主要是氧化物,盐类等矿物质,也包括混入饲料中的沙石,土等,故称粗灰分。 步骤:1.将坩埚于马弗炉中灼烧(550℃,30min,干燥器中冷却至室温后称重,准确至0.001g。 2.称取5克试样放入坩埚(每个样品2个平行,还要2个对照,在电炉上低温炭化至无烟为止。 3.炭化后,将坩埚移入马弗炉中,与550℃下灼烧3h。 4.观察是否有炭粒,如无炭粒,继续于马弗炉中灼烧1h,如果有炭粒或怀疑有炭粒,将坩埚冷却,用蒸馏水润湿,在103℃的干燥箱中仔细蒸发至干,再将坩埚至于马弗炉中灼烧1h,至于干燥器中冷却称重,准确至0.001g。
注意事项:1.样品自然放在坩埚中,勿压,避免样品氧化不足。2.样品开始炭化时,应有坩埚盖,防止损失,并打开部分坩埚盖,便于气流流通。3.炭化时,温度应逐渐上升,防止火力过大而使部分样品颗粒被逸出的气体带走。4.灼烧温度不宜超过600度,否则会引起磷硫等盐的挥发。 标准:GBT6438-2007 饲料中粗灰分的测定 3.粗脂肪 原理:油重法:用乙醚等有机溶剂反复浸提饲料样品,使其中脂肪溶于乙醚,并收集于盛醚瓶中,然后将所有的浸提溶剂加以蒸发回收,直接称量盛醚瓶中的脂肪重,即可计算出饲料样品中的脂肪含量。 步骤:1.索氏提取器干燥处理。抽提瓶(内有数粒沸石——(103±2度烘箱,烘干30分钟——干燥器冷却30分钟——称重——重复操作至两次之差小于0.0008g为恒重。2.试样的称取与烘干。分析天平称试样1.3g——滤纸包——铅笔注明标号——103度烘箱烘干2h——干燥器冷却——称重。(此步骤中,要带手套称重,且保证滤纸包长度可全部浸于石油醚中为准。3.试样的反复抽提。滤纸包——抽提管——抽提瓶加石油醚60~100毫升——60~75度水浴加热——石油醚回流——控制回流速度和时间。(抽提前,先将滤纸包浸泡在石油醚较长时间,可减少抽提时间;一般控制回流10次/h,共回流约50次,本实验中,滤纸包已在石油醚浸泡20h以上,回流(3~4次/h,共回流2h;检查抽提管流出的石油醚挥发后不留下油迹为抽提终点。4.抽提后的烘干称重。取出滤纸包——干净表面皿——晾干——装入称样皿——103度烘箱烘至恒重——称重。 注意事项:1.全部称重操作,样品包装时要带乳胶或尼龙手套。2.测定样品在浸提前必须粉碎烘干,以免在浸提过程中样品水分随乙醚溶解样品中糖类而引起误差。3.除样品需干燥外,索氏提取器也应干燥。4.实验所用提取试剂为石油醚,需要无水,无醇,无过氧化物,否则会使测定结果偏高,或者过氧化物会导致脂肪氧化,在烘干时有引起爆炸的危险。5.加热乙醚或石油醚严禁用明火直接加热。
肠道益生菌常见种类
肠道益生菌常见种类 Document serial number【NL89WT-NY98YT-NC8CB-NNUUT-NUT108】
益生菌种类：到目前为止，已有芽孢杆菌属、乳杆菌属、弧菌属、假单孢菌属的众多种类及硝化细菌、光合细菌等应用于水产养殖业。 根据中国农业部2013年发布的《饲料添加剂品种目录（2013）（征求意见稿）》，可用于养殖动物的饲料级微生物添加剂菌种有：地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、两歧双歧杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、乳酸肠球菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、乳酸乳杆菌、植物乳杆菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌、产朊假丝酵母、酿酒酵母、沼泽红假单胞 菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、嗜热链球菌、罗伊氏乳杆菌、动物双歧杆菌、黑曲霉、米曲霉、迟缓芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、纤维二糖乳杆菌、发酵乳杆菌、保加利亚乳杆菌等。 1.乳酸菌 乳酸菌是最早用作微生物饲料添加剂的益生菌，种类繁多。从微生物特性来说，乳酸菌为革兰阳性、分解糖类产生乳酸、无芽胞; 通常在厌氧或者兼性厌氧条件下生长; 耐酸，在pH 3． 0 ～ 4． 5 下仍能够生存; 不耐高温，经80 ℃处理5 min，损失达70% ～ 80%; 包括乳杆菌属、链球菌属、明串珠菌属、片球菌属［15］。作为微生物饲料添加剂，乳酸菌在动物体内发挥的作用主要有: ①维持肠道微生态平衡，阻止和抑制致病菌，降解消化道内的有害物质; ②产生超氧化物歧化酶，增强动物的非特异性免疫; ③产生淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶等消化酶; ④产生细菌素，抑制致病菌的生长。 2.芽胞杆菌 芽胞杆菌是应用很广泛的一类微生物饲料添加剂，如枯草芽胞杆菌和地衣芽胞杆菌，属于需氧菌，以内孢子的形式零星存在于动物肠道的微生物群落中［1］。与乳酸菌相比，由于芽胞杆菌能够耐受高温、高压，经过饲料制粒等过程依然可保持良好的活性，更加适宜在饲料加工过程中添加应用，在饲料中比较稳定。芽胞杆菌在一定条件下产生芽胞，作为微生物饲料添加剂，具有以下优点: ①抗性强，耐高温、酸碱、高压，对颗粒饲料加工具有良好的耐受力; ②贮藏过程中以孢子形式存在，不消耗饲料的营养成分; ③在肠道上部迅速 复活，复活率接近100%; ④可产生多种氨基酸及淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等多种消化酶; ⑤消耗肠道内的氧，维持厌氧环境，抑制致病菌生长。2013饲料添加剂目录中允许使用的芽胞杆菌有枯草芽胞杆菌、地衣芽胞杆菌、短小芽胞杆菌、迟缓芽胞杆菌、凝结芽胞杆菌、侧孢短芽胞杆菌等。 3.酵母菌 饲料添加剂目录( 2013) 中，作为微生物饲料添加剂使用的酵母主要有产朊假丝酵母、酿酒酵母等。酵母在动物肠道的作用包括: ①改善肠道微生态环境; ②提高动物体免疫功能，增强抗病力; ③可直接和肠道病原体结合，中和肠道中毒素; ④促进动物生长。 4.光合细菌 光合细菌作为微生物饲料添加剂主要应用于水产方面。该类细菌是一类能够进行光合作用的微生物，在厌氧条件下利用光能同化二氧化碳。光合细菌作为微生物饲料添加剂，在水产养殖方面发挥的作用主要有: ①净化水质条件，提高水产动物生产性能; ②菌体蛋白中含有多种必需氨基酸，为水产动物提供丰富的营养物质; ③产生生物活性物质，增强动物的免疫力。
中国饲料成分与营养价值表第28版
20 中国饲料成分及营养价值表（第28版） TABLES OF FEED COMPOSITION AND NUTRITIVE V ALUES IN CHINA 表7 常用矿物质饲料中矿物元素的含量（以饲喂状态为基础） 序 号 中国饲料号 (CFN) 饲料名称 Feed Name 化学分子式 Chemical formular 钙(Ca) a (%) 磷(P) (%) 磷利 用率b 钠(Na) (%) 氯(Cl)(%) 钾(K) (%) 镁(Mg) (%) 硫(S) (%) 铁(Fe) (%) 锰(Mn) (%) 01 6-14-0001 碳酸钙，饲料级轻质calcium carbonate CaCO 3 38.420.02 0.080.020.08 1.6100.080.06 0.02 02 6-14-0002 磷酸氢钙,无水calcium phosphate(dibasic),anhydrous CaHPO 4 29.60 22.77 95~1000.180.47 0.15 0.800 0.80 0.79 0.14 03 6-14-0003 磷酸氢钙,2个结晶水calcium phosphate(dibasic),dehydrate CaHPO 4·2H 2O 23.2918.00 95~100 04 6-14-0004 磷酸二氢钙calcium phosphate(monobasic)monohydrate Ca(H 2PO 4)2·H 2O 15.9024.58 1000.20 0.160.9000.800.75 0.01 05 6-14-0005 磷酸三钙(磷酸钙)calcium phosphate(tribasic) Ca 3(PO 4)2 38.76 20.0 06 6-14-0006 石粉c 、石灰石、方解石等 limestone 、calcite etc. 35.840.01 0.060.02 0.11 2.0600.040.35 0.02 07 6-14-0007 骨粉，脱脂bone meal, 29.8012.50 80~90 0.040.20 0.300 2.40 0.03 08 6-14-0008 贝壳粉shell meal 32~35 09 6-14-0009 蛋壳粉egg shell meal 30~40 0.1~0.4 10 6-14-0010 磷酸氢铵ammonium phosphate(dibasic) (NH 4)2HPO 4 0.3523.48 1000.20 0.16 0.750 1.50 0.41 0.01 11 6-14-0011 磷酸二氢铵ammonium phosphate (monobasic) NH 4 H 2PO 4 26.93 100 12 6-14-0012 磷酸氢二钠sodium phosphate (dibasic) Na 2HPO 4 0.09 21.82 10031.04 13 6-14-0013 磷酸二氢钠sodium phosphate (monobasic) NaH 2PO 4 25.81 10019.170.020.01 0.010 14 6-14-0014 碳酸钠sodium carbonate Na 2CO 3 43.30 15 6-14-0015 碳酸氢钠sodium bicarbonate NaHCO 3 0.01 27.000.01 16 6-14-0016 氯化钠sodium chloride NaCl 0.30 39.50 59.00 0.0050.20 0.01 17 6-14-0017 氯化镁magnesium chloride hexahydrate MgCl 2·6H 2O 11.950 18 6-14-0018 碳酸镁magnesium carbonate MgCO 3·Mg(OH)2 0.02 34.000 0.01 19 6-14-0019 氧化镁magnesium oxide MgO 1.69 0.02 55.0000.10 1.06 20 6-14-0020 硫酸镁,7个结晶水magnesium sulfate heptahydrate MgSO 4·7H 2O 0.02 0.019.86013.01 21 6-14-0021 氯化钾potassium chloride KCl 0.05 1.0047.5652.440.2300.320.06 0.001 22 6-14-0022 硫酸钾potassium sulfate K 2SO 4 0.15 0.09 1.50 44.870.600 18.40 0.07 0.001 注： ①数据来源：《中国饲料学》（2000，张子仪主编），《猪营养需要》（NRC ，2012）。 ②饲料中使用的矿物质添加剂一般不是化学纯化合物，其组成成分的变异较大。如果能得到，一 般应采用原料供给商的分析结果。例如饲料级的磷酸氢钙原料中往往含有一些磷酸二氢钙，而磷酸二氢钙中含有一些磷酸氢钙。a 在大多数来源的磷酸氢钙、磷酸二氢钙、磷酸三钙、脱氟磷酸钙、碳酸钙、硫酸钙和方解石石粉中，估计钙的生物学利用率为90~100%，在高镁含量的石粉或白云石石粉中钙的生物学效价较低，为50~80%；b 生物学效价估计值通常以相当于磷酸氢钠或磷酸氢钙中的磷的生物学效价表示；c 大多数方解石石粉中含有38%或高于表中所示的钙和低于表中所示的镁。
饲料常规检测的注意问题
饲料7项常规检测要注意的问题 1、饲料中水分含量测定需要注意的问题 饲料是由水分和干物质组成的，水分含量是饲料品质的重要指标，直接关系到饲料中有效成分的含量。采用直接干燥法，依据GB/T6435—86进行饲料中水分的测定，适用于配合饲料和单一饲料，但不适用于做饲料的奶制品及动物油、植物油中的水分测定。 1.1仪器和设备应满足的要求 ①分样筛的孔径为0.45 mm(40目)。孔径过大不利于水分蒸发，孔径过小、样本过轻，不利于操作且使样本易于被氧化。 ②分析天平感量为0.000 1 g，以适应小量采样的要求。 ③控热式恒温烘箱，可控温度应包括(105±2)℃范围，以防止温度过高或达不到干燥温度。 ④称样皿应为玻璃或铝质，一般采用铝质较好，不宜破碎;称样皿直径应为40 mm以上，高度在25 mm以下，以利于水分蒸发，不宜过高或过细。 ⑤干燥器中的干燥剂用硅胶为好，因为变色硅胶颜色变化明显，有利于判断其吸附水的程度。 1.2实验操作中应注意的问题 ①取风干样用植物样品粉碎机粉碎，过40目试验筛，注意过筛时一定要将样品全部过筛并混合均匀。 ②在烘箱中干燥时，称样皿应敞开盖子且与盖子一起干燥。 ③称样皿应预先在烘箱中烘1 h，冷却称重再烘，直到两次称重之差小于0.000 5 g。注意冷却的时间应尽可能保持一致。 ④称量样品时，要戴细纱手套或脱脂薄纱手套，禁止直接用手操作，以免造成偶然误差，且手套不能带离天平室。在用半自动天平称量时，应先加大砝码后加小砝码。添加样品时，如若操作不慎，将样品撒在了托盘上，应将样品用毛刷刷掉，再重新称量。 ⑤要注意干燥剂的颜色(含钴，干燥时呈蓝色)变化，当吸水过多(变棕或白色)时，应放在烘箱中烘干(烘干条件：135 ℃，2～3 h)，使之转变为脱水干燥色以后再用。 ⑥恒温箱内的温度分布往往不均匀，所以需要预先在恒温箱内摆满一层相同的试样，观察测定值的变化幅度，找出可以使用的位置。 ⑦恒温箱内温度高，操作时应带白色手套。 1.3其它注意事项 ①当试样为湿润样时，可取适量样品置于预先已称重的大蒸发皿中，在80 ℃的条件下进行初步的烘干，然后在室内放置作为风干样，求出其减量。 ②如果饲料样品是含多汁的鲜样，如青贮、牧草等，无法直接粉碎，应进行预干燥处理。称取200～300 g(准确至0.01 g)鲜样，在105 ℃烘箱中烘干15 min，立即把温度降至65 ℃，烘6～8 h，取出在空气中冷却4 h，称量，失重即为初水分，冷却后样品所含水为吸附水。 ③两个平行样测定值之差不得超过0.2%，否则即为失败。 ④多汁鲜样应预先干燥处理，应按下式计算原来试样中的水分含量： 原试样水分(%)=预干燥减重(%)+[100-预干燥减重(%)]×风干试样水分(%)。 ⑤某些含脂肪高的样品，烘干时间长反而会增重，乃脂肪氧化所致，应以增重前那次称重为准，且取最小值。 ⑥含糖分高的易分解、易焦化试样，应使用减压干燥法(70 ℃，600 mmHg以下，烘5 h)测定水分。 ⑦含有挥发性物质，成分易变成棕色或可引起新的化学变化如奶制品、植物性油脂、糖
益生菌发酵饲料研究及应用现状
益生菌发酵饲料研究及应用现状 摘要: 近年来, 随着世界上许多国家限制或禁止在饲料中使用抗生素, 寻找新的抗生素替代品成为畜牧业的一个紧迫的任务。益生菌发酵饲料是一类集益生菌的功效与优质饲料的优点, 具有潜在替代含抗生素饲料的一种新型饲料。动物饲养实践显示, 其具有维持动物肠道的菌群平衡,提高动物生产性能, 减少肠道病原微生物和净化畜舍环境的积极作用。本文在国内外已有的研究基础上, 就益生菌发酵饲料在动物生产中的应用研究进展进行了综述。 关键词: 益生菌发酵饲料; 动物生产; 饲料工业 自上世纪50年代开始, 在动物日粮中添加抗生素显著促进了动物生产, 并对集约化畜牧业的发展做出了重大贡献。然而随着时间的推移, 饲料中添加抗生素的危害日益显现, 并受到社会的广泛关注。2004年, WTO、联合国粮农组织( FAO) 和世界动物卫生组织(OIE) 联合召开专题讨论会, 讨论了非人用抗生素的使用和抗生素的耐药性问题。欧盟自2006年1月起全面禁止在畜禽饲料中添加抗生素。在生猪等饲养中不得添加抗生素目前已经是国际公认的食品安全标准。人们开始纷纷寻求其它的替代品和替代技术, 以保证畜牧业生产的效率与效益不受影响。益生菌发酵饲料技术是新近成长起来的具有许多优点的新型饲料技术, 饲料经益生菌发酵后含有更多的活性益生菌菌体、各种酶、各级代谢产物、多种维生素、蛋白质分解产物、活性小肽、氨基酸、抑菌物质、免疫增强因子、促生长因子等, 起到促进生长, 维持动物肠道的菌群平衡作用; 由于不添加抗生素等药物, 不会造成抗生素药物残留, 益生菌发酵饲料技术是一种生态健康型饲料生产技术。本文就当前益生菌发酵饲料的研究进展作一综述。 1 益生菌发酵饲料生产中常使用的益生菌 益生菌种类繁多, 美国食品药物管理局( FDA)和美国饲料公定协会(AAFCO) 公布了40余种。我国农业部2003年12月发布的第318号公告“饲料添加剂品种目录”中有15种: 地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、两歧双歧杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、乳酸肠球菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、乳酸乳杆菌、植物乳杆菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌、产朊假丝酵母、酿酒酵母、沼泽红假单胞菌。目前市场上用于饲料发酵的益生菌种类主要是乳酸菌、芽孢杆菌、酵母和霉菌。 乳酸菌是应用最早、最广泛的益生菌, 是一类能在可利用的碳水化合物发酵过程中产生大量乳酸的细菌的总称。通常为厌氧或者兼性厌氧菌, 耐酸, 在pH值为415以下时仍可生长, 研究发现代谢产物和活菌液对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌都有很强的抑菌效果, 随着pH值的降低抑菌作用逐渐变强, 活菌体内和代谢产物中含有较高的超氧化物歧化酶( SOD) , 能增强动物的体液免疫和细胞免疫。 芽孢杆菌是一种能够产生芽孢的好氧菌, 能耐受高温、高压和酸碱, 生命力强。芽孢杆菌能够耐受胃酸和消化道上段胆盐和消化液破坏, 在到达消化道下段以后出芽生长繁殖; 芽孢杆菌是好氧菌, 在消肠道内消耗大量的氧气, 维持肠道厌氧环境, 从而促进乳酸菌双歧杆菌等厌氧益生菌的生长, 抑制需氧致病菌的生长, 维持动物肠道的菌群平衡。芽孢杆菌能够产生维生素B1、B2、B6 等B族维生素、维生素C、蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等酶以及多种代谢产物, 对饲料的降解消化吸收和动物的营养代谢起到促进作用。
益生菌的理解~
益生菌（probiotic）的理解 什么是益生菌？ 益生菌顾名思义，有“益于生命（for life）”的意思，英文名为“Probiotics”。对益生菌的定义，1989年 Fuller称：“改善肠道内菌种，给寄主动物带来有益影响”，1991年 Huis I n't Veld与 Havenear则定义为：“改善人或动物肠内微生物平衡，给寄主带来效果的单独微生物或混合培养物。”，并将混合培养物纳入益生菌的范畴。1999年 Salminen定义益生菌为：“对寄主产生有益作用的微生物制剂或微生物成分”，从而不仅是活着的微生物，微生物的组成成分及代谢产物都被纳入到益生菌。 益生菌的必要性 随着家畜的培育、饲料产业的发展，抗生素不仅用于疾病治疗，还适用到疾病预防及促进生长之用途，家畜的生产性大幅提升，进而转换为大规模饲养方式。但是，这种注重生产性的养殖法加重了家畜的压力，再者，随着社会发展，政府开始管制抗生素的使用，从而对替代抗生素的物质开发需求越来越大。尤其，在2006 年以后，抗生素仅能用于治疗，不得用于促进家畜生长，益生菌的必要性备受关注。加之，最近国民意识变化、安全畜产品的需求、高级畜产品或品牌需求、畜牧环境改善、疾病预防等多个层面上体现出益生菌的重要性。 益生菌的条件 利用为益生菌的微生物有杆茵（Bacillus）、产气荚膜杆菌（Clostridium）、乳酸菌（Lactic acid bacteria）、酵母（Yeast）、真菌（Fungi）等。此类微生物要想用作为益生菌，需要满足以下条件。 用于益生菌的微生物应没有致病性。为了确认致病程度，要正确判断微生物的种类。同时，易于在生产益生菌的设施培养；可在寄主动物肠内短时间增殖，给寄主动物带来有益效果（促进生长、预防疾病等）。不仅如此，还需要具有合成抵抗有害细菌或病原体的有机酸及抗菌物质，不能与病原体杂交、室温里失去活性的比例较低、易于用在饲料等特点。 益生菌的作用机理 家畜在摄取饲料后分解并消化饲料的过程中，大部分的氧气都消失。因此，消化器官内几乎没有氧气呈厌氧状态，所以，最为理想的益生菌应为厌氧菌。这类益生菌可在家畜的肠内比起有害菌更好的利用环境，竞争上站优势，降低肠内还原电势，生成抗菌物质，有效抑制有害菌的增殖。若正常微生物在消化器官内站优势，可抑制有害菌生成有害酶或毒素，进而降低患上疾病的危险。而占优势的微生物可以合成各种维生素及消化酶供应给寄主动物。同时，构成微生物的肽聚糖（Peptidoglycan）、葡聚糖（glucan）甘露聚糖（mannan）等成分刺激小肠绒毛提高免疫力。如果持续供应有益于身体的益生菌，可以维持肠内黏膜上的有益菌优势，可抑制有害细菌的功能，但不能抵抗非细菌性病毒。很多疾病都源于病毒，因此，今后有必要研究抑制病毒增殖的益生菌。与此同时，家畜受压力或环境急剧变化时，生理上皮质激素（corticos teroids）分泌增多，黏膜细胞外部的穆辛（musin）减少，而附着于穆辛生长的有益菌也随之减少，导致有害菌感染，因此需要持续供应益生菌。