土壤磷
贵州土壤磷素肥力
磷是植物生长发育所必需的大量营养元素之一。它既是植物体内许多重要有机化合物的组分，同时又以多种方式参与植物体内各种代谢过程。土壤[1]是植物磷营养的主要来源，生产上人们通过向土壤中施加磷肥来提高土壤中磷的含量，由于磷是以沉积的形式存在和贮存的，而且，在土壤中具有特定的化学行为，使其在当季作物的利用率仅为10%～25% [2]。为此土壤中磷的含量、存在形态及其有效性对作物磷素吸收极为重要，成为当今关注的热点问题。
贵州位于我国西南，居云贵高原东部，是介于四川盆地和广西丘陵之间的岩溶高原山区。省内地带性土壤以黄壤为主，还有红壤、黄棕壤等土壤呈酸性或强酸性，土壤中活性铁、铝含量较高，可溶性磷多与铁、铝相结合，转化为难溶性磷酸铁、磷酸铝等形态而被固定，其有效磷含量不高[3]。人们通过在土壤中施加磷肥来提高土壤中磷的含量，但是，随着磷肥的大量施用，我国各区耕地土壤速效磷含量呈显著增加趋势，部分耕层土壤速效磷含量表现为过量累积，导致农田生态系统水体富营养化，给环境带来不利影响，文章通过对磷素在土壤中存在的状态，土壤对磷的固定积累以及提高磷的有效性展开综述，以期为提高作物对土壤磷的吸收利用方面研究提供参考。
1.贵州土壤磷素肥力利用现状
贵州位于我国西南，居云贵高原东部。其具有低纬度、高海拔，自然条件复杂，地貌多种多样，母岩组合复杂，气候变化悬殊，土壤类型较多，从亚热带的红壤到暖温带的棕壤都有分布的特点。其中，以黄壤分布面积最多，遍及贵州高原的主体部分。贵州土壤pH 值在~范围。通常林草地土壤与耕地土壤之间有一定的差异。全省耕地土壤以微酸性(pH ~ 所占面积比例最大，为%。由于黄壤地区温暖湿润;地形以低山丘陵为主；旱地面积分布较广;是我国农业生产的主要区域之一，由于对土地资源的不合理利用；多数旱地土壤侵蚀严重；引起土壤养分流失；导致土壤退化，在农业生产上磷肥施用是提高作物产量的有效措施之一；然而当季施用磷肥的利用率一般为10%～25%；大量磷肥在土壤中积累;当地表径流和土壤侵蚀发生时；土壤磷由陆地向水体迁移；这不仅造成磷矿资源的损失与浪费；而且会加速附近水体富营养化的产生。据贵州省土壤肥料研究所测定，黄壤旱地耕作层土壤有效磷含量为kg，侵蚀后黄壤底土土壤有效磷为痕量。
2土壤中磷的形态分布
磷素在土壤中的形态是人们研究的重点，因为只有了解了磷素在土壤中的形态才可以正确的利用土壤，因地制宜。不同的土壤类型磷素的形态[4]以及组成成分不同。土壤中磷的形态可分为有机
态磷和无机态磷，后者包括矿物态磷、吸附态磷和土壤溶液中的磷。其中，土壤溶液中的磷是最有效的部分，是可供植物利用的主要形态。
土壤磷素分级的目的是评价土壤有效磷库大小和土壤磷素供应状况[5]。它常用于研究耕作条件下土壤中磷素的耗竭；不同管理措施对土壤磷素分布的影响；微生物活动对土壤磷素的影响；土壤磷素的迁移与转化。
土壤中无机磷的分布形态及分级测定
土壤中无机磷的形态
在农业土壤中，无机磷是主体，一般占土壤全磷的60%～80%，主要包括土壤中残存的原生含磷矿物、各种次生的无机磷酸盐和磷酸根离子，大致有3种形态: 水溶态、吸附态和矿物态。以矿物态为主。土壤水溶态磷是可供植物直接吸收利用的磷，其含量极低，一般只有～1mg/kg，最低甚至只有μg/kg[6]。它的补给主要依赖于磷酸盐矿物的溶解和吸附固定态磷的释放。
吸附态磷是土壤中为粘土矿物或有机物所吸持的那部分磷酸盐。土壤中吸附态磷的含量一般很低，通常以H2PO4-和HPO42-为主，PO43-很少。吸附态磷一般随pH下降而升高，且能通过pH调节而释放。在相同pH条件下，胶体吸附磷的数量因胶体种类而异，如氧化铁、铝吸附量最大，蒙脱石最少，高岭石介于其间。一般来说，土壤中SiO2/R2O3值愈小，胶体吸附的磷愈多。
土壤无机磷中约有99%以矿物态存在，在石灰性土壤中，部分磷肥通过一系列的沉淀反应最后成为羟基磷灰石或氟磷灰石，无机磷几乎全部为正磷酸盐，根据其所结合的主要阳离子的不同，可分为:(1) Ca-P，它是石灰性土壤中磷酸盐的主要形态;(2) Fe-P Al-P，在酸性土壤中，这一类磷酸盐占无机磷的很大部分［7］; (3) O-P，闭蓄态磷是以水化氧化铁胶膜包被的磷酸盐，其溶解度小矿物态是最难被植物吸收利用的磷素形态，在没有除去其外层铁质包膜前，很难发挥其效用，是农田土壤潜在磷库［8］，土壤解磷微生物会使部分难溶性磷酸盐分解［9］
土壤中有机磷的分布形态及分级测定
土壤有机磷分布形态
土壤中的有机磷一般占土壤全磷的10%～15%，有少数耕地土壤可达土壤全磷的50%，草地、森林土壤有机磷占全磷的20%～50%。也有研究结果显示土壤有机磷可达全磷的20%～80%[11]。这一含量范围因土壤母质的不同而有明显差异，如发育于长江中游老冲积物上的水稻土，有机磷含量为%～%，约占全磷的30%～50%;发育于酸性母岩风化物和红壤上的水稻土，有机磷含量为%～%，约
占全磷的26%～49%;发育于石灰性母岩上的水稻土，有机磷含量为%～%，占土壤全磷的18%～
48%[11]。
土壤有机磷化合物包括植酸、核酸、磷脂、磷蛋白、糖脂和磷酸盐等。植酸类有机磷约占土壤有机磷的40%～80%，可在植酸酶或植素酶的作用下分解释放出磷酸。核酸类有机磷占土壤总有机磷的例不到10%，与植素相比较为容易被磷酸酶水解释放出磷酸和糖类。磷脂、磷酸化糖类等其它含磷化合物一般很少，几乎不到有机磷总量的1%，并且不稳定，易分解。近年来，土壤有机磷在植物磷素营养中的作用已逐步受到重视。有研究证明，NaHCO3所提取的有机磷与植物吸磷量呈显著相关[12]。溶解于水的有机磷是可以直接为作物所吸收利用的形态。与无机磷相比，有机磷在土壤中具有较大的移动性，被土壤无机矿物的固定程度低，即使是难溶于水的有机磷经矿化后可持续释放出无机磷，对作物生长也极为有利。
3土壤中磷的化学行为
土壤磷素资源的化学行为直接影响土壤和肥料磷对作物的有效性。磷素在土壤中的行为包括化学作用、物理作用、物理一化学作用和生物化学作用等，其行为主要分为固定和释放过程。磷酸盐的土壤固定过程包括吸附和沉淀过程，其反方向则为释放过程，包括解吸和溶解。
土壤中磷的固定
土壤中磷的固定主要包括化学固定、吸附固定、闭蓄态固定和生物固定。
土壤中磷的化学固定
在酸性土壤中，磷的固定由铁、铝体系所控制。酸性土壤中的磷酸离子(主要是H2PO4)与活性铁、铝或交换性铁、铝以及赤铁矿、针铁矿、褐铁矿、三水合铝、无定形铁铝、等化合物作用形成一系列溶解度较低的Fe(Al)一P化合物。如磷酸铁铝、盐基性磷酸铁铝、粉红磷铁矿、磷铝石等，使植物难以吸收利用。
土壤中磷的吸附固定
大量研究证明，磷肥施入土壤后，能很快地被吸附到土壤颗粒表面或与土壤物质作用生成难溶性的磷酸盐，从而在很大程度上影响磷的解吸和对植物的有效性。普遍认为，吸附一解吸是比溶解一沉淀更为重要的土壤磷的化学过程[17]
吸附反应主要发生在溶液中磷的活度较低时，包括阴离子交换吸附和配位吸附。阴离子交换吸附是指磷酸根与土壤胶体之间通过静电引力的作用发生的吸附反应，没有专一性，又称为非专性吸附叫。在酸性条件下，活性铁铝上的轻基质子化而带正电荷，就会通过静电引力吸引带负电荷的磷酸根。这类吸附靠静电引力维持，因而是很弱的。在酸性条件下，对一般带负电的阴离子如
SO42-，SiO42-都能产生非专性吸附。由于活性铁铝必须先质子化才能进行交换吸附，所以这类吸附只能在活性铁铝等电点以下的pH环境中进行。环境酸性越强，轻基的质子化越多，非专性吸附也越大。非专性吸附的磷对作物是有效的。
土壤中磷的闭蓄态固定
闭蓄态固定是指磷酸盐被溶解度很小的无定型铁、铝、钙、等胶摸所包蔽的过程(或现象)，这中被包蔽的磷酸盐化合物称谓闭蓄态磷(0一P)。在我国南方水稻土中，闭蓄态磷大约占土壤无机磷总量的40一70%，在旱作情况下难于为植物所利用，在淹水还原条件下，其中的磷仍有可能释放出来供植物吸收利用。
土壤中磷的生物固定
上壤溶液中磷酸盐的浓度取决于磷的矿北作用和固持作用两个方向相反的过程的相对速率，它们的相对速率受被降解有机物含磷量的影响。当有机物的C/P比大于300时，出现净固持(固持作用速率>矿化速率):反之，当该比值<200时[18]就会出现净矿化。含磷量小于%一%的秸秆等植物残体分解时，出现有效磷的净固持。绿肥作物及农家肥等在分解的初期，既有无机磷的释放也有微生物对无机磷的固定。
磷的解吸
土壤中磷的解吸和溶解是磷吸附和沉淀过程的逆过程，从磷的生物有效性角度来看，磷的解吸和溶解比沉淀和吸附过程更为重要。影响土壤磷吸附和沉淀的过程都会影响磷的解吸和溶解过程。解吸的快慢和多少直接关系到磷从固相补给液相的快慢和缓冲能力的大小，从而影响到磷对植物的有效性。仅靠静电作用吸附到可变电荷表面的磷，当它们获得与吸附时所释放出的等量的能量时就可解吸。通过配位体交换而吸附的离子则不然，因为它们与表面金属离子形成了化学键。这样它们的解吸就变得非常困难而呈现明显的滞后现象。
土壤中磷沉淀一溶解是磷在上壤中转化的一个重要过程，土壤中铁、铝、钙磷酸盐等难溶性含磷化合物的溶解主要受溶度积的控制，并受土壤pH的显著影响。其它影响因素还有:土壤水分
含量、土壤氧化还原电位、水溶态离子的种类和活度、土壤水解性酸度、土壤阳离子交换量、土壤温度、土壤无机磷形态、土壤有机质以及土壤生物活性等[19]
4 影响植物对土壤磷素肥力利用的因素
从根本上看，土壤有效磷库的容量决定了土壤的供磷能力。除此之外，土壤的许多理化、生物性质也可直接或间接地影响土壤的供磷力，其中，以土壤的酸碱度、土壤酸体含量与土壤粘粒及矿物组成、土壤的氧化还原状况最为重要。
土壤有效磷库
土壤中的有效磷库形成于漫长成土过程中成土母质含磷矿物中磷的分化释放和生物的吸收富集。在这过程中，几乎所有可被植物利用的无机磷都曾一度转化为有机磷，但由于绝大多数成土母质的含磷量很低，所以，土壤有效磷库其贮量依然有限，而一经耕耘，土壤中的有机磷便迅速矿化而被植物所利用，贮量迅速减少，假若不及时补充磷素，则若干年后便可能显示土壤因缺磷而影响作物生长。
土壤酸碱度
土壤酸碱环境直接关系到土壤中无机磷的存在形态，从而影响磷的有效性和土壤的供磷力。酸性土壤由于土壤中活性铁、铝对磷的吸附固定作用和沉积作用，可降低土壤中磷的有效性和供磷力。施用石灰调节土壤的酸碱度至中性，可降低无机磷组分中的Fe-P和Al-P，提高Ca-PⅠ和Ca-PⅡ，可有效地改善土壤的供磷力，也提高土壤的有效磷测定值。施用石灰，土壤对磷的吸附强度(K)和吸持度(S)随之降低，吸附磷被解吸而较易被植物所利用[20]。
土壤粘粒及矿物组成
土壤粘粒含量及其矿物组成可显著影响土壤的供磷力。粘粒是土壤吸持磷的主要基质[21]，而组成土壤粘粒的次生矿物种类对于土壤吸持磷的影响则可显示巨大差异。一般而言，土壤中的2∶1型粘土矿物，游离碳酸钙等对磷的吸持力较弱，吸附容量也较小;1∶1型粘土矿物，铁铝氧化物等对磷的吸持力较强，而无定型铁、铝氧化物对土壤中磷的吸持作用最为强烈，主要是由于吸附作用和沉淀作用。
土壤氧化还原状况
土壤氧化还原状况对土壤供磷力的影响主要是通过改变土壤中与磷酸根结合的某些阳离子的价态及土壤中有机质的分解过程和产物而发生的。一般而言，对于酸性及中性土壤，氧化环境可降低土壤中磷的有效性，从而影响土壤的供磷力，而还原环境可使原本是难溶性的磷化物活化而提高土壤的供磷力。大量的研究表明，对我国南方酸性土壤，在水旱轮作条件下将磷肥施用于旱作较之施用于水稻可获得较高的总体增产效益。
土壤水分含量
磷与土壤水分的关系非常密切，水分状况决定磷的形态、含量和有效性。一般认为土壤水分
高时，磷的有效性高。还在20世纪60年代就有人提出磷酸铁在淹水条件下的可能转化机理。土壤有充分的水分，特别是在淹水情况下，土壤的环境发生了一系列的变化，从而影响到磷素的转化。研究发现土壤淹水后在大部分土壤中有效磷的浓度增加，造成磷浓度增加的原因是:淹水后3价铁
被还原，而使与它相结合的磷被释放;部分有机阴离子代换了部分被吸附的磷;水解了部分磷酸铁铝;淹水导致PＨ的上升，使Fe-P和Al-P溶解度增加。也有人认为淹水不但磷的浓度增加，还增大了磷的扩散系数[22]。而有些则认为有机质起着重要的作用。沈其荣等研究发现随着田间持水量的下降，土壤有机磷含量上升，有效磷下降，全磷则基本不变，总体来说水分对红壤的有效磷含量影响较大。土壤Al-P， Fe-P和Ca-P含量随着田间持水量的下降而下降，O-P则升高[23]。
5 提高植物对土壤磷素肥力利用效率的途径
调节土壤pH
土壤的酸碱环境可影响土壤中磷的存在形态与生物有效性。在贵州酸性土壤中，无机磷中有相当大的比例是磷酸铁盐，土壤中磷酸铁盐的转化可能有两种机制:一是随着土壤pH值升高，磷酸铁盐的水解作用加强，从而提高了磷素的活性;二是在土壤有机质和微生物参与下的还原作用使土壤
的氧化还原电位降低，磷酸高铁被还原成磷酸低铁，释放出磷。
通过研究表明，在不同的pH值条件下，磷的固定程度不同，进而影响有效磷的含量和供磷能力。针对贵州酸性土壤的特点，可以采用施用石灰以校正土壤的酸性环境，石灰性土壤根际pH的
降低，可显著增加土壤磷素的有效性[24]。作物栽培试验表明，在一定的范围内，酸性土壤上的作物吸磷量随石灰施用量的增加而增加。酸性土壤施用石灰对磷的吸附量增加，但其吸附强度和吸持度随之降低，说明这部分吸附态磷较易为作物吸收。
旱作改水田
土壤氧化还原状况通过改变土壤中与磷酸根结合阳离子的价位及有机物料的分解过程与产物，来影响土壤的供磷潜力。淹水能显著提高石灰性土壤速效磷含量，这是由于土壤Ca-P体系的活性提高所致;而土壤回旱后速效磷含量降低[25]。鲁如坤归纳酸性土壤淹水—落干引起土壤磷素转化的作用机理为:土壤在淹水条件下，三价铁被还原，与之相结合的磷和闭蓄态磷(O-P)被释放;淹水还原条件下生成的弱酸(如H2S)可使土壤磷活化;淹水条件下有机质分解产生的有机离子可代换吸附态磷;淹水后，土壤pH升高，Fe-P、Al-P溶解度增加，磷酸铁、铝被水解，这些作用均可改善土壤供磷能力。反之，淹水后的土壤落干，土壤的供磷能力下降。
利用VA—菌根真菌的作用提高作物吸磷率
真菌能帮助植物有效地利用土壤中的难溶性磷酸盐，有菌根真菌存在时植物吸磷明显加快。业已证明菌根在豆科和禾谷类作物利用低品位磷灰石方面有明显效果，利用VA—菌根植物来提高磷素利用率是十分有效的手段。菌根真菌促进植物吸磷的机理主要为:1)由于菌丝的延伸使植物根的吸收面积扩大，增大了根系吸磷面积。2)真菌的分泌物，如有机酸或能水解磷酸三钙的酶，可以增加难溶性无机磷的植物有效性;3)菌根分泌磷酸酶将土壤有机磷水解为植物有效磷，如小麦接种VA-菌根真菌40天后，菌根的酸性和碱性磷酸酶的活性增加了2倍[26]。4)菌根植物呼吸增强并释放出大量CO2，使土壤pH降低，从而影响植物的吸磷量。
改善土壤中微生物和酶状况
土壤微生物在有机磷和无机磷的转化过程中起着决定性的作用，土壤微生物是有机物转化的执行者。而土壤中的酶则催化着土壤中磷素化学的反应。所以改善红壤中微生物和酶状况对提高磷素有效性有不可忽视的作用。有人做过理论统计全球农业土壤中积累的磷足够维持作物生长100年，但是可利用的磷量较少。而通过微生物的增溶作用，能够提高土壤中积累磷酸盐在植物生长中的利用。许多微生物能够降低介质中的PＨ值，溶解磷矿石中的磷。土壤微生物的数量直接影响土壤生物化学活性以及土壤养分的组成和转化发，许景伟研究发现，真菌和全磷显著相关，细菌与有效磷极显著相关，放线菌与全磷显著相关。
6展望
1总体上说磷素化肥的施用与当前农作物生产水平是相适应的，贵州主要土类黄壤与红壤对可溶磷的吸附固定能力极强[28]。磷肥不宜一次过量施用，旱地需分别在每季作物种植时施用磷肥，水旱轮作时如不能每季施磷，则宜把磷肥施在冬季作物上。部分高磷稻田可适当减少磷肥用量。
2贵州地处岩溶山区，生态系统脆弱，水土流失严重。这是导致旱地土壤养分含量下降的重要原因。因地制宜，采用生物梯化与工程措施相结合，逐步变坡地为梯土是防治农田水土流失的根本措施。长期定位试验结果表明，生物梯化( 等高植物篱) 技术是一项费省效宏，能有效保护水土与养分资源的增产措施，应因地制宜予以推广。
3. 合理施肥
施肥的过程中，应以作物增产和保持、扩大土壤有效磷库为目标的磷肥施用原则。具有有效磷库容较丰的农田土壤，在供磷的能力方面不仅具有更高的稳定性和持续性，而且当农田环境处于某种逆境状态时，作物也具有较强的抗逆能力，从而可保持较稳定的产量。因此，对于贫磷土壤，欲在增加作物产量的同时，也能较快地扩大土壤有效磷库，提高土壤的供磷力，那就只有加大磷肥的施用量;而对于丰磷土壤，使用磷肥只是为了保持土壤有效磷库稳定在一定的水准以上，磷肥的用量通常仅需相当或略高于作物收获磷量。但是，若过量或不合理的施用磷肥以及水土流失等，会造成磷的严重流失，导致河流和湖泊富营养化[29，30]。
土壤速效氮磷钾、有机质测定方法
土壤水解性氮的测定(碱解扩散法) 土壤水解性氮，包括矿质态氮和有机态氮中比较易于分解的部分。其测定结果与作物氮素吸收有较好的相关性。测定土壤中水解性氮的变化动态，能及时了解土壤肥力，指导施肥。 测定原理 在密封的扩散皿中，用1.8mol/L氢氧化钠(NaOH)溶液水解土壤样品，在恒温条件下使有效氮碱解转化为氨气状态，并不断地扩散逸出，由硼酸(H3BO3)吸收，再用标准盐酸滴定，计算出土壤水解性氮的含量。旱地土壤硝态氮含量较高，需加硫酸亚铁使之还原成铵态氮。由于硫酸亚铁本身会中和部分氢氧化钠，故需提高碱的浓度(1.8mol/L，使碱保持1.2mol/L的浓度)。水稻土壤中硝态氮含量极微，可以省去加硫酸亚铁，直接用1.2mol/L氢氧化钠水解。 操作步骤 1.称取通过18号筛(孔径1mm)风干样品2g(精确到0.001g)和1g硫酸亚铁粉剂，均匀铺在扩散皿外室内，水平地轻轻旋转扩散皿，使样品铺平。(水稻土样品则不必加硫酸亚铁。) 2.用吸管吸取2%硼酸溶液2ml，加入扩散皿内室，并滴加1滴定氮混合指示剂，然后在皿的外室边缘涂上特制胶水，盖上毛玻璃，并旋转数次，以便毛玻璃与皿边完全粘合，再慢慢转开毛玻璃的一边，使扩散皿露出一条狭缝，迅速用移液管加入10ml1.8mol/L氢氧化钠于皿的外室(水稻土样品则加入10ml1.2mol/L氢氧化钠)，立即用毛玻璃盖严。 3.水平轻轻旋转扩散皿，使碱溶液与土壤充分混合均匀，用橡皮筋固定，贴上标签，随后放入40℃恒温箱中。24小时后取出，再以0.01mol/LHCl标准溶液用微量滴定管滴定内室所吸收的氮量，溶液由蓝色滴至微红色为终点，记下盐酸用量毫升数V。同时要做空白试验，滴定所用盐酸量为V0。 结果计算 水解性氮(mg/100g土)= N×(V-V0)×14／样品重×100 式中： N—标准盐酸的摩尔浓度； V—滴定样品时所用去的盐酸的毫升数； V0—空白试验所消耗的标准盐酸的毫升数；
土壤有效磷测定(精)
土壤速效磷的测定(0.5M碳酸氢钠法) （一）方法原理： 用PH8.5的0.5M碳酸氢钠溶液，于温度25℃左右提取分离土壤速效磷。取一定量的提取液,控制显色中的硫酸的浓度为0.4N，钼酸铵的浓度为0.1%，以氯化亚锡为还原剂，使形成“磷钼兰”溶液。用比色计测定其兰色强度，然后于标准曲线上查找其相应的浓度，从而计算土壤中的速效磷的含量。 （二）试剂配制： （1）0.5MNaHCO3：称取化学纯NaHCO3 420.0克放入血清瓶中。加8000ml水溶解后，定容10000ml，摇匀，一般情况下，这样配制的溶液可得PH8.5。应用酚酞指示剂检查：取溶解后的溶液2ml于试管中，加入1滴酚酞应为微红色，否则用0.5N NaOH逐滴加入，边加边摇动血清瓶。调节至PH8.5，在定容10000ml，摇匀。 （2）硫酸—钼酸铵试剂： a.贮存液：称化学纯钼酸铵50.0克于800ml水中，微热溶解。另取化学纯浓硫酸（比重1.84）903ml，分次徐徐加入盛有2000ml水的3000ml三角瓶，并不断用玻棒搅拌，冷却后备用。 将钼酸铵溶液徐徐加入硫酸溶液中，并不断搅拌，稀至5000ml（用容量瓶稀释多次定容），摇匀，此溶液贮于紧塞的细口瓶中，放在暗处保存，其钼酸铵浓度为1%，硫酸浓度为6.5N。 b.使用液：使用时视其用量，将贮存液准确稀释5倍（即1份体积贮存液加4 份体积水），摇匀，即可使用。 （3）10%HCL溶液：取分析纯浓盐酸（比重1.19）239ml，加入500ml水中，以水稀释定容至1000ml，摇勺。 （4）氯化亚锡溶液：称取1.00克氯化亚锡（二级）溶于40ml10%HCL中。此试剂每天新鲜配制。 （5）标准磷溶液：准确称取经45℃烘干6小时分析纯KH2PO4 4.3936克于小烧杯中，用少量水溶解后，将溶液毫无损失地溶解洗入1000ml量瓶中，加入2ml 浓硫酸，稀释至刻度，摇匀，即为1000PPm/ml标准磷溶液。再准确吸取此液25.00ml于500ml量瓶中，用0.5M NaHCO3稀释至刻度，摇匀，即为50PPm磷的标准溶液。将50PPm磷的标准溶液用0.5M NaHCO3溶液准确稀释至50倍，即为1PPm磷的工作曲线标准磷溶液。每次使用前必需摇匀（不要长期保存）。 （三）操作步骤： 1.制备待测液:称取过20目筛的风干土样 2.50克于200ml左右塑料瓶中，用快速自动加液管加0.5M NaHCO3 50.00ml，盖紧瓶塞，放在25℃±1℃恒温室或保温箱内，保温振荡30分钟，立即用干燥过滤器保温过滤，滤液承接于60ml塑料杯内。 2.显色：分别用快速移液管吸取滤液5.00ml于20×180mm试管中，再加硫酸—钼酸铵使用液5.00ml，轻轻摇动，以驱除CO2（防止试液溅出），最后充分摇匀，加氯化亚锡溶液1滴，再摇匀，当室温在20℃左右显色10—15分钟，否则应延长至20—25分钟。 3.比色：取一对经检查消光值相等的直径1cm比色皿，一制装蒸馏水做空白，另一支在测定时先倒入显色液冲洗后，装入显色液，于光电比色计上，用红色（或680nm波长）滤光板测定其消光值（E）。根据E值在标准工作曲线上查出其相
土壤有效磷测定
土壤中有效磷的测定 -NY/T 1121.7-2014 A 碳酸氢钠提取——钼锑抗比色法 适用于石灰性、中性土壤 PH≥6.5 方法提要 由于浸提液(0.5MNaHCO3)提高了CO32-离子的活性，使其与 Ca2+形成CaCO3沉淀，从而降低了Ca2+的活性, 使一定量活性较大的Ca-P被浸出，同时也可使比较活性的Fe—P 和AI-P通过水解作用而浸出(由于碳酸盐的碱溶液，也降低了铝和铁离子的活性，有利于磷酸铝和磷酸铁的提取。此外，NaHCO3碱溶液中存在着OH-、HCO3-、CO32-等阴离子均能置换吸附态的磷酸盐H2PO4-。) ，从而增加了碳酸氢钠提取中性和石灰性土壤速效磷的能力。由于浸出液中Ca、Fe、Al浓度较低，不会产生磷的再沉淀；浸出液中的磷可用钼锑抗比色法定量测定。 主要仪器设备 1 千分之一电子天平； 2 恒温水浴振荡器； 3 150ml塑料瓶和50ml塑料小烧杯； 4 锥形瓶(或比色管)：50mL或25mL比色管； 5 紫外分光光度计； 试剂 1 氢氧化钠：10%(m/V)溶液；(调节浸提剂pH至8.5)
2 碳酸氢钠浸提剂［c(NaHCO3)=0.50mol·L-1，pH=8.5］称取 42.0gNaHCO3溶于950mL水中，用10%氢氧化钠溶液调节pH至8.5(用酸度计测定)，用水稀释至1L。贮存于。pH，使用时须重新校正20d 塑料瓶中备用。如贮存期超过． 作用,：0.30%(m/V)溶液；(提供三价锑离子3 酒石酸锑钾 ［K(SbO)C4H4O6·1/2H2O］加快抗坏血酸的还原反,是生成的三元杂多酸比磷钼酸铵具有更强的吸光作用;同时.) 应抗坏血酸主要优点分析纯)(还原剂, +21-224 抗坏血酸(C6H8O6左旋，比旋光度°,是生成的颜色稳定，干扰离子的影响较小，适用范围较广，但显色慢，需要加温。如在室温下也能果溶液中有一定的三价锑存在时，则大大加快了抗坏血酸的还原反应，显色。℃水中，300mL约60钼酸铵［(NH4)6Mo7O24·4H2O］溶于称取5 钼锑贮备液：10.0g水中，搅匀，冷却。然后将稀硫酸注入钼181mL浓硫酸，缓缓注入800mL冷却。另取，酒石酸涕钾溶液，最后用水稀释至2L酸铵溶液中，搅匀，冷却。再加入100mL0.3%) (提供一定酸度和三价锑离子盛于棕色瓶中备用。钼锑贮备液中。此溶液有效期不长，建议抗坏血酸溶于100mL6 显色剂：称取0.5g 现用现配。优级(105℃烘干 2h的磷酸二氢钾·7 磷标准贮备溶液 ［c(P)=100μg mL-1］：称取，转入,可使溶液长期保存)防长霉菌纯)0.4390g，用水溶解后，加入5mL浓硫酸 ( 1L容量瓶中，用水定容。此贮备溶液在冰箱中可长期保存。容量瓶100mL：吸取·mL-1］
土壤有效磷测定教案资料
土壤有效磷测定
土壤中有效磷的测定 -NY/T 1121.7-2014 A 碳酸氢钠提取——钼锑抗比色法 适用于石灰性、中性土壤 PH≥6.5 方法提要 由于浸提液(0.5MNaHCO3)提高了CO32-离子的活性，使其与Ca2+形成CaCO3沉淀，从而降低了Ca2+的活性, 使一定量活性较大的Ca-P被浸出，同时也可使比较活性的Fe—P 和AI-P通过水解作用而浸出(由于碳酸盐的碱溶液，也降低了铝和铁离子的活性，有利于磷酸铝和磷酸铁的提取。此外，NaHCO3碱溶液中存在着OH-、HCO3-、CO32-等阴离子均能置换吸附态的磷酸盐H2PO4-。) ，从而增加了碳酸氢钠提取中性和石灰性土壤速效磷的能力。由于浸出液中Ca、Fe、Al浓度较低，不会产生磷的再沉淀；浸出液中的磷可用钼锑抗比色法定量测定。 主要仪器设备 1 千分之一电子天平； 2 恒温水浴振荡器； 3 150ml塑料瓶和50ml塑料小烧杯； 4 锥形瓶(或比色管)：50mL或25mL比色管； 5 紫外分光光度计； 试剂 1 氢氧化钠：10%(m/V)溶液；(调节浸提剂pH至8.5) 2 碳酸氢钠浸提剂［c(NaHCO3)=0.50mol·L-1，pH=8.5］称取42.0gNaHCO3溶于950mL水中，用10%氢氧化钠溶液调节pH至8.5(用酸度计测定)，用水稀释至1L。贮存于塑料瓶中备用。如贮存期超过20d，使用时须重新校正pH。
3 酒石酸锑钾［K(SbO)C4H4O6·1/2H2O］：0.30%(m/V)溶液；(提供三价锑离子,作用是生成的三元杂多酸比磷钼酸铵具有更强的吸光作用;同时,加快抗坏血酸的还原反应.) 4 抗坏血酸(C6H8O6左旋，比旋光度+21-22°,分析纯)(还原剂, 抗坏血酸主要优点是生成的颜色稳定，干扰离子的影响较小，适用范围较广，但显色慢，需要加温。如果溶液中有一定的三价锑存在时，则大大加快了抗坏血酸的还原反应，在室温下也能显色。 5 钼锑贮备液：称取10.0g钼酸铵［(NH4)6Mo7O24·4H2O］溶于300mL约60℃水中，冷却。另取181mL浓硫酸，缓缓注入800mL水中，搅匀，冷却。然后将稀硫酸注入钼酸铵溶液中，搅匀，冷却。再加入100mL0.3%酒石酸涕钾溶液，最后用水稀释至2L，盛于棕色瓶中备用。(提供一定酸度和三价锑离子) 6 显色剂：称取0.5g抗坏血酸溶于100mL钼锑贮备液中。此溶液有效期不长，建议现用现配。 7 磷标准贮备溶液［c(P)=100μg ·mL-1］：称取105℃烘干 2h的磷酸二氢钾(优级纯)0.4390g，用水溶解后，加入5mL浓硫酸 (防长霉菌,可使溶液长期保存)，转入1L容量瓶中，用水定容。此贮备溶液在冰箱中可长期保存。 8 磷标准工作溶液［c(P)=5μg ·mL-1］：吸取5.00mL磷标准贮备液于100mL容量瓶中，加水定容。此工作溶液不宜久存。 分析步骤 1. 有效磷的浸提:
土壤有效磷测定方法
土壤有效磷测定方法 氮、磷、钾、钙等大量元素，是植物生长发育不可缺少的，虽然作物对这些元素需要的量相差很大，但是它们对作物生长发育起的作用同等重要，而且不可相互代替。过多地使用某种营养元素，不仅会对作物产生毒害，还会妨碍作物对其它营养元素的吸收，引起缺素症。例如磷过多会降低钙、锌、硼的有效性。土壤有效磷的测定，不仅可了解近期磷素供应水平状况，而且是植物合理施肥的依据之一。因此，推广测土配方施肥，大力宣传植物所需营养元素的重要性及测定土壤营养元素的含量迫在眉睫。现就土壤有效磷的测定方法介绍如下： 1 方法原理及适用范围 碳酸氢钠提取采取钼锑抗比色法。石灰性土壤中的有效磷，多以磷酸一钙和磷酸二钙状态存在，可用pH值8.50，浓度0.05mol/L的碳酸氢钠提取到溶液中。磷酸一钙可直接溶于碳酸氢钠水溶液中，而磷酸二钙与碳酸氢钠反应成为磷酸钠而溶解，钙则成为碳酸钙的沉淀而析出。其反应式为：Ca(H2P04)2+2NaHC03→CaHC03上+NaH2P04 CaHP04+NaHC03→CaC03↓+NaH2P04 土壤被浸提出的磷量与土液比、液温、振荡时间及方式有关。测定时土液比为1:20，浸提液温度为25℃，振荡提取时间为30min。浸出液中的磷采取钼锑抗比色法测定，用紫外可见分光度计测定。该方法适用于测定含碳酸盐土壤的有效磷含量，也可用于测定中性土壤的有效磷含量。 2主要仪器设备 ①紫外可见分光光度计；②恒温振荡机或往返式振荡机；③带盖塑料瓶； ④酸度计；⑤具塞；⑥比色管25mL;⑦150mL试剂三角瓶。 3相关试剂的制定 3.1 无磷活性炭粉 将活性炭粉先用1:1盐酸浸泡24h，然后移至平板，抽气过滤，用水淋洗4-5次，再用浸提剂浸泡24h，在平板漏斗上抽气过滤，用水洗尽碳酸氢钠，并至无磷为止，烘干备用。 3.2 0.50mol/L碳酸氢钠浸提剂(ph值8.50)
NYT 1121.7-2014 土壤有效磷 方法证实
1.检验依据 NY/T 1121.7-2014土壤有效磷的测定 2.仪器和设备 紫外-可见分光光度计；电子天平；酸度计； 3.分析步骤 参考NY/T 1121.7-2014 土壤有效磷的测定钼锑抗比色法测定 4. 验证结果 4.1 校准曲线及线性范围 4.1.1 酸性土壤试样（pH<6.5）校准曲线及线性范围 表1 酸性土壤试样（pH<6.5）的校准曲线 含量(μg) 0.00 5.00 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 吸光度A 0.000 0.056 0.110 0.213 0.318 0.421 0.520 回归方程: y = 0.0104x+0.0039 r=0.9999 4.1.2 中性、石灰性土壤试样（pH≥6.5）校准曲线及线性范围 表2 中性、石灰性土壤试样（pH≥6.5）校准曲线含量(μg) 0.00 2.50 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 吸光度A 0.000 0.071 0.149 0.291 0.437 0.583 0.719
回归方程: y = 0.0289x+0.0017 r=0.9999 4.2 检出限实验 4.2.1 酸性土壤试样（pH<6.5）的检出限实验 在10个空白样品中分别加入4倍检出限浓度的标准物质进行测定，按 HJ 168-2010规定MDL=S t n ?-)99.0,1(进行计算，结果如下： 表3 方法检出限测定结果（N=10） 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 吸光度A 0.026 0.029 0.024 0.026 0.027 0.028 0.031 0.029 0.030 0.028 吸光度A 0 0.002 0.002 0.003 吸光度(A-A 0) 0.024 0.027 0.022 0.024 0.025 0.026 0.028 0.026 0.027 0.025 样品浓度（μg ） 1.93 2.22 1.74 1.93 2.03 2.12 2.32 2.12 2.22 2.03 平均值μg 2.07 标准偏差Sb （μg ） 0.171 t 值 2.821 最低检出含量（μg ） 0.48 检出限（mg/kg ） 0.5
石灰性土壤有效磷测定方法
石灰性土壤有效磷测定方法 （土壤肥料） 1 主题内容与适用范围 本标准规定了测定土壤有效磷的碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法。 本标准适用于石灰性土壤有效磷含量的测定；碱性或中性土壤也可参照使用。 2 方法提要 用0.50mol/L碳酸氢钠溶液浸提土壤有效磷。碳酸氢钠可以抑制溶液中Ca2+的活度，使某些活性较大的磷酸钙盐被浸提出来；同时也可使活性磷酸铁、铝盐水解而被浸出。浸出液中的磷不致次生沉淀；可用钼锑抗比色法定量。测定值与作物对磷肥反应的相关性高。 3 试剂和溶液 分析中仅能用蒸馏水或相当纯度的水。 3.1 碳酸氢钠（GB 640，分析纯）； 3.2 氢氧化钠（GB 629，化学纯）：50％（m/V）溶液； 3.3 活性炭（HG 3─1290，化学纯）； 3.4 盐酸（GB 622，化学纯）：1+1溶液； 3.5 钼酸铵（GB 657，分析纯）； 3.6 硫酸（GB 625，分析纯）； 3.7 酒石酸氧锑钾〔K（SbO）C4H4O621/2H2O，分析纯〕：0.30 ％（m/V）溶液； 3.8 抗坏血酸（C6H8O6，左旋，比旋光度＋21～＋22°，分析纯）； 3.9 磷酸二氢钾（GB 1274，分析纯）； 3.10 浸提剂（0.50mol/L NaHCO3，pH=8.5）。将42.0g碳酸氢钠（3.1）溶于约800mL水中，稀释至1L，用氢氧化钠溶液（3.2）调节至pH至8.5（用pH计测定）。贮存于聚乙烯或玻璃瓶中，用塞塞紧。如贮存期超过20d，使用时必须检查并校准pH； 3.11 无磷活性碳粉：如果所用活性炭（3.3）含磷，应先用1+1盐酸（3.4）浸泡12h以上，然后移放在平板漏斗上抽气过滤，用水淋洗4～5次，再用浸提剂（3.10）浸泡12h以上，在平板漏斗上抽气过滤，用水洗尽碳酸氢钠，并至无磷为止，烘干备用； 3.12 钼锑贮备液：10.0g钼酸铵（3.5）溶于300mL约60℃的水中，冷却。另取181mL硫酸（3.6）缓缓注入约800mL水中，搅匀，冷却。然后将稀硫酸注入钼酸铵溶液中，随时搅匀；再加入100mL酒石酸氧锑钾溶液（3.7）；最后用水稀释至2L，盛于棕色瓶； 3.13 显色剂：0.50g抗坏血酸（3.8）溶于100mL钼锑贮备液（3.12）中。此试剂有效期在室温下为24h，在2～8℃冰箱中可贮存7d； 3.14 磷标准贮备溶液〔c（P）＝100mg/L〕：称取105℃烘干的磷酸二氢钾（3.9）0.4394g，溶于约200mL 水中，加入5mL硫酸（3.6），转入1L容量瓶中，用水定容。此贮备溶液可以长期保存；3.15 磷标准工作溶液〔c（P）＝5mg/L〕：将磷标准贮备溶液（3.14）用浸提剂（3.10）准确稀释20倍。此工作溶液不宜久存。 4 仪器和设备 4.1 土壤筛：1mm方孔筛； 4.2 分析天平：感量为0.01g； 4.3 锥形瓶：50和150mL，带橡皮塞； 4.4 漏斗：7cm； 4.5 滤纸：11cm，不含磷； 4.6 移液管：5，10和20mL； 4.7 吸量管：5mL；
土壤中磷的测定(全磷、速效磷)
1土壤全磷的测定(硫酸一高氯酸消煮法) 方法原理 在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与高沸点的硫酸和强氧化剂高氯酸作用，使之完全分解，全部转化为正磷酸盐而进入溶液，然后用钼锑抗比色法测定。 操作步骤 1.在分析天平上准确称取通过100目筛(孔径为0.25mm)的土壤样品1g(精确到0.0001)置于50ml三角瓶中，以少量水湿润，并加入浓H2SO48ml，摇动后(最好放置过夜)再加入70—72%的高氯酸(HClO4)10滴摇匀。 2.于瓶口上放一小漏斗，置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20分钟，全部消煮时间约为45—60分钟。 3.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。同时做空白试验。 4.吸取滤液2—10ml于50ml容量瓶中，用水稀释至30ml，加二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H2SO4)溶液调节pH至溶液刚呈微黄色。 5.加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀，用水定容至刻度。 6.在室温高于15℃的条件下放置30分钟后，在分光光度计上以700nm的波长比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的P—mg/L数。 7.工作曲线的绘制。分别吸取5mg/L标准溶液0，1，2，3，4，5，6ml于50ml 容量瓶中，加水稀释至约30ml，加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。即得0，0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,mg/LP标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值。在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标，Pmg/L数为横坐标，绘制成工作曲线。 结果计算 全P %=显色液mg/L×显色液体积×分取倍数／(W×106)×100 式中： 显色液Pmg/L—从工作曲线上查得的Pmg/L； 显色液体积—本操作中为50ml；
土壤有效磷的测定-盐酸硫酸浸提法
FHZDZTR0058土壤有效磷的测定盐酸硫酸浸提法 F-HZ-DZ-TR-0058 土壤—有效磷的测定—盐酸硫酸浸提法 1范围 本方法适用于质地较轻的酸性土壤有效磷的测定。 2原理 土样以盐酸和硫酸溶液浸提，使土样中较活性的磷酸铁、铝盐被溶解释出，然后以钼锑抗光度法测定磷。 3试剂 3.1盐酸-硫酸浸提剂：0.05mol/L盐酸-0.025mol/L硫酸，量取 4.0mL盐酸（ρ1.19g/mL）和0.7mL硫酸（ρ1.84g/mL），加入水中，再加水稀释至1000mL。 3.2无磷活性碳。 3.3对硝基酚指示剂：称取0.20g对硝基酚，溶于100mL水中。 3.4氢氧化钠溶液：2mol/L，称取80.0g氢氧化钠溶于水，再加水稀释至1000mL。 3.5硫酸溶液：0.5mol/L，量取28.0mL硫酸（ρ1.84g/mL） ，缓慢加入水中，再加水稀释至1000mL。 3.6钼锑贮存液：量取153mL硫酸（ρ1.84g/mL） ，缓慢地加入400mL水中，搅拌，冷却。另取10g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]溶解于约60℃的300mL水中，冷却。然后将硫酸溶液 缓慢倒入钼酸铵溶液中，再加入100mL5g/L酒石酸锑钾（KSbOC4H4O6·21H2O）溶液，最后用水稀释至1000mL，避光贮存。 3.7钼锑抗显色剂：称取1.50g抗坏血酸（C6H8O6） ，溶于100mL钼锑贮存液中，随用随配。3.8磷标准溶液：称取在105℃烘2h 的磷酸二氢钾（KH2PO4）0.4394g(精确至0.0001g)溶于水中，加5mL硫酸（ρ1.84g/mL），再加水稀释至1000mL，此溶液1mL含100μg磷。吸取10.00mL 上述标准溶液置于200mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，此溶液1mL含5μg 磷，不宜久存。 4仪器
土壤中有效磷的测定(精)
土壤中有效磷的测定 D e te r m i na ti o n o f Ava il a b l e P ho sp ho ru s i n So il 王芹 1徐清波 2姚振琴 1 (1、淮安市环境监测中心站江苏淮安223001; 2、淮安市环境监察局江苏淮安 223001 [摘要 ]叙述了土壤中有效磷测定的原理 , 绘制了校准曲线 , 相关系数、斜率、截距满足分光光度法的要求 ; 实际土壤样品测定 RS D 为 1. 07﹪ ~2. 68﹪ , 加标回收率为 93. 4﹪ ~100﹪ , 精密度和准确度均符合要求。 [关键词 ]有效磷 ; 分光光度法 ; 土壤 [中图分类号 ] X 132 [文献标志码 ] B 地壳中磷元素 (以 P 2 O 5计的平均含量大约为 0. 28%, 可分为有机磷和无机磷两大类。无机磷主要以钙、镁、铁、铝等形态结合为磷酸盐 , 有机磷以卵磷脂、核酸、磷脂为主。土壤中的磷素大部分以迟效性状态存在 , 了解土壤有效磷的状况 , 对于施用磷肥有着直接的指导意义。 1方法原理 用 0. 50mol/L。在石灰性土壤中碳酸氢钠可以抑制溶液中 Ca 2+的活度 , 使某些活性较大的磷酸钙盐被浸提出来 ; 在酸性土壤中因 pH 提高可使活性磷酸铁、铝盐水解而被浸出。在浸出液中由于 Ca 、 Fe 、 A l 浓度较低 , 不会产生磷的再沉淀 ; 可用钼锑抗比色法定量测定。 2试剂和材料 分析时均使用符合国家标准或专业标准的分析纯试剂和蒸馏水或去离子水。
碳酸氢钠 (分析纯 ; 氢氧化钠 (分析纯 :50%(m /V 溶液 ; 活性炭 (化学纯 ; 盐酸 (化学纯 :1+1溶液 ; 钼酸铵 (分析纯 ; 硫酸 (分析纯 :1+1溶液 ; 酒石酸氧锑钾〔 K (Sb O C 4 H 4O 6? 1/2H2O, 分析纯〕 ; 抗坏血酸 (C 6 H 8O 6, 左旋 , 比旋光度 +21°~+ 22°, 分析纯 ; 磷酸二氢钾 (分析纯 ; 浸提剂 (0. 50mol/LNaHCO 3 , pH =815 。将 42. 0g 碳酸氢钠溶于约 800mL 水中 , 稀释至约 990mL, 用氢氧化钠溶液调节至 pH 至 8. 5(用 pH 计测定 , 1。 , 保存不宜过久 , 应先用 112h 以上 , 然后移放在平板漏斗上抽气过滤 , 用水淋洗 4~5次 , 再用浸提剂浸泡 12h 以上 , 在平板漏斗上抽气过滤 , 用水洗尽碳酸氢钠 , 并至无磷为止 , 烘干备用。
土壤全磷的测定方法
土壤全磷的测定方法（高氯酸-硫酸法） 方法原理:在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与高沸点的硫酸和强氧化剂高氯酸作用，使之完全分解，全部转化为正磷酸盐而进入溶液，然后用钼锑抗比色法测定。 操作步骤: 1.在分析天平上准确称取通过100目筛(孔径为的土壤样品1g(精确到置于50ml三角瓶中，以少量水湿润，并加入浓H2SO48ml，摇动后(最好放置过夜)再加入70—72%的高氯酸(HClO4)10滴摇匀。 2.于瓶口上放一小漏斗，置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20分钟，全部消煮时间约为45—60分钟。 3.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。同时做空白试验。 4.吸取滤液2—10ml于50ml容量瓶中，用水稀释至30ml，加二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H2SO4)溶液调节pH至溶液刚呈微黄色。 5.加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀，用水定容至刻度。 6.在室温高于15℃的条件下放置30分钟后，在分光光度计上以700nm的波长比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的P—mg/L数。 7.工作曲线的绘制。分别吸取5mg/L标准溶液0，1，2，3，4，5，6ml于50ml容量瓶中，加水稀释至30ml，加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。即得0，，,，，，LP标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值。在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标，Pmg/L数为横坐标，绘制成工作曲线。 结果计算 全P%=显色液mg/L×显色液体积×分取倍数／(W×106)×100 式中：显色液Pmg/L—从工作曲线上查得的Pmg/L； 显色液体积—本操作中为50ml； 分取倍数—消煮溶液定容体积/吸取消煮溶液体积； 106—将ug换算成g W—土样重(g)。 两次平行测定结果允许误差为%。 仪器、试剂 1.主要仪器： 分析天平、小漏斗、大漏斗、三角瓶(50ml和100ml)、容量瓶(50ml和100ml)、移液管(5ml 和10ml)、电炉、分光光度计。 2.试剂： (1)L碳酸氢钠浸提液。称取化学纯碳酸氢钠溶于800ml水中，以L氢氧化钠调节pH至，洗入1000ml容量瓶中，定容至刻度，贮存于试剂瓶中。此溶液贮存于塑料瓶中比在玻璃瓶中容易保存，若贮存超过1个月，应检查pH值是否改变。 (2)无磷活性炭。活性碳常常含有磷，应做空白试验，检查有无磷存在。如含磷较多，须先用2mol/L盐酸浸泡过夜，用蒸馏水冲洗多次后，再用L碳酸氢钠浸泡过夜，在平瓷漏斗上抽气过滤，每次用少量蒸馏水淋洗多次，并检查到无磷为止。如含磷较少，则直接用碳酸氢钠处理即可。 (3)磷(P)标准溶液。准确称取45℃烘干4—8小时的分析纯磷酸二氢钾于小烧杯中，以少量水溶解，将溶液全部洗入1000ml容量瓶中，用水定容至刻度，充分摇匀，此溶液即为含50mg/L 的磷基准溶液。吸取50ml此溶液稀释至500ml，即为5mg/L的磷标准溶液(此溶液不能长期
土壤有效磷测定
土壤中有效磷的测定 -NY/T A 碳酸氢钠提取——钼锑抗比色法 适用于石灰性、中性土壤 PH≥ 方法提要 由于浸提液提高了CO32-离子的活性，使其与Ca2+形成CaCO3沉淀，从而降低了Ca2+的活性, 使一定量活性较大的Ca-P被浸出，同时也可使比较活性的Fe—P 和AI-P通过水解作用而浸出(由于碳酸盐的碱溶液，也降低了铝和铁离子的活性，有利于磷酸铝和磷酸铁的提取。此外，NaHCO3碱溶液中存在着OH-、HCO3-、CO32-等阴离子均能置换吸附态的磷酸盐H2PO4-。) ，从而增加了碳酸氢钠提取中性和石灰性土壤速效磷的能力。由于浸出液中Ca、Fe、Al浓度较低，不会产生磷的再沉淀；浸出液中的磷可用钼锑抗比色法定量测定。 主要仪器设备 1 千分之一电子天平； 2 恒温水浴振荡器； 3 150ml塑料瓶和50ml塑料小烧杯； 4 锥形瓶(或比色管)：50mL或25mL比色管； 5 紫外分光光度计； 试剂
1 氢氧化钠：10%(m/V)溶液；(调节浸提剂pH至 2 碳酸氢钠浸提剂［c(NaHCO3)=·L-1，pH=］称取溶于950mL水中，用10%氢氧化钠溶液调节pH至(用酸度计测定)，用水稀释至1L。贮存于塑料瓶中备用。如贮存期超过20d，使用时须重新校正pH。 3 酒石酸锑钾［K(SbO)C4H4O6·1/2H2O］：%(m/V)溶液；(提供三价锑离子,作用是生成的三元杂多酸比磷钼酸铵具有更强的吸光作用;同时,加快抗坏血酸的还原反应.) 4 抗坏血酸(C6H8O6左旋，比旋光度+21-22°,分析纯)(还原剂, 抗坏血酸主要优点是生成的颜色稳定，干扰离子的影响较小，适用范围较广，但显色慢，需要加温。如果溶液中有一定的三价锑存在时，则大大加快了抗坏血酸的还原反应，在室温下也能显色。 5 钼锑贮备液：称取钼酸铵［(NH4)6Mo7O24·4H2O］溶于300mL约60℃水中，冷却。另取181mL浓硫酸，缓缓注入800mL水中，搅匀，冷却。然后将稀硫酸注入钼酸铵溶液中，搅匀，冷却。再加入%酒石酸涕钾溶液，最后用水稀释至2L，盛于棕色瓶中备用。(提供一定酸度和三价锑离子) 6 显色剂：称取抗坏血酸溶于100mL钼锑贮备液中。此溶液有效期不长，建议现用现配。 7 磷标准贮备溶液［c(P)=100μg ·mL-1］：称取105℃烘干 2h的磷酸二氢钾(优级纯)，用水溶解后，加入5mL浓硫酸 (防长霉菌,可使溶液长期保存)，转入1L容量瓶中，用水定容。此贮备溶液在冰箱中可长期保存。 8 磷标准工作溶液［c(P)=5μg ·mL-1］：吸取磷标准贮备液于100mL容量瓶中，加
土壤速效磷的测定
实验十五土壤速效磷的测定 一、目的和意义 测定土壤中速效磷的含量，是评价土壤对当季作物供应磷素能力的一种手段，对于施肥有着直接的参考价值。由于提取剂的不同，所得结果也不一致。在中性土壤和石灰性土壤，一般采用碳酸氢钠或碳酸铵来提取。 二、方法原理 中性、石灰性土壤中的速效磷，多以磷酸一钙和磷酸二钙的状态存在，可用0.5M碳酸氢钠提取到溶液中；酸性土壤中的速效磷，多以磷酸铁和磷酸铝的状态存在，0.5M碳酸氢钠能同时提取磷酸铁和磷酸铝表面的磷，故也可使用酸性土壤中速效磷的提取。然后将待测液用钼锑抗混合显色剂在常温下进行还原，使黄色的锑磷钼杂多酸还原成为磷钼兰，进行比色。 三、测定方法 1. 称取通过20号筛的风干土样5克（精确到0.01克）置于250毫升三角瓶中，加100毫升0.5M碳酸氢钠溶液，再加一小角勺无磷活性炭，塞紧瓶塞，在振荡器上震荡30分钟，立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤，滤液承接于250毫升三角瓶中。 2. 吸取滤液10毫升（含磷量高时取2.5~5毫升，同时应补加0.5M碳酸氢钠溶液至10毫升）于50毫升容量瓶中，加7.5N硫酸钼锑抗混合显色剂5毫升，利用其中多余的硫酸来中和碳酸氢钠、充分摇匀，等二氧化碳充分排出后加水定容至刻度，再充分摇匀（最后的硫酸浓度为0.65N）。 3. 30分钟后在光电比色计上用红色滤光板比色，或用72型分光光度计比色（波长660微米），比色时须同时做空白测定。 4. 磷标准曲线绘制：分别吸取5ppm磷标准溶液0、1、2、3、4、5毫升于50毫升容量瓶中，每一容量瓶即为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ppm磷，再逐个分别加入0.5M碳酸氢钠10毫升和7.5N硫酸—钼锑抗混合显色剂5毫升，然后同待测液一样进行比色，在半对数纸上绘制成曲线。
土壤有效磷的测定
实验四 土壤中速效磷的测定 一、实验目的及测定方法 了解土壤中速效磷的供应状况，对于施肥有着直接的指导意义。土壤中速效磷的测定方法很多，由于提取剂的不同所得结果也不一样。一般情况下，石灰性土壤和中性土壤采用碳酸氢钠提取，酸性土壤采用酸性氟化铵提取。 二、实验原理 中性、石灰性土壤中的速效磷，多以磷酸一钙和磷酸二钙状态存在，用0.5M 碳酸氢钠液可将其提取到溶液中，然后将待测液用钼锑抗混合显色剂在常温下进行还原使黄色的锑磷钼杂多酸还原成为磷钼兰进行比色。 三、实验仪器 往返震荡机、分光光度计、具塞三角瓶、容量瓶、吸管、洗瓶。 四、实验步骤 1.称取通过18目筛孔的风干土5.00克（精确到0.01克）于250ml 具塞三角瓶中，加100ml 0.5M NaHCO 3液，再加一角匙无磷活性炭，塞紧瓶塞，在25℃下振荡30分钟，取出用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于100ml 的三角瓶中。 2.吸取滤液10ml 于50ml 量瓶中，加硫酸钼锑抗混合显色剂5ml ，利用其中多余的硫酸来中和碳酸氢钠，充分摇匀，排除二氧化碳后蒸馏水定容到刻度，再充分摇匀。 3.在室温高于15℃的条件下放置30分钟，用722型分光光度计（在波长660nm 的光）进行比色，测定光密度值。比色时同时做空白测定。以空白溶液的光密度为0，读出测定液 的光密度为0.061，在标准曲线上查出显色液的磷浓度（mgkg -1）。 4.磷酸标准曲线的绘制：吸取含磷（P ）5mgkg -1的标准溶液0、1、2、3、4、5ml,分别 加入50ml 容量瓶中，加0.5 M NaHCO 3液10ml,加水至约30ml,再加入钼锑抗显色剂5ml ，摇 匀,定容到50ml ，即得0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mgkg -1磷标准系列溶液，用分光光度计 进行比色，读取吸收值，在方格坐标纸上以吸收值为横坐标，磷mgkg -1数为纵坐标,绘制成 标准曲线。 得到线性回归方程0081.01934.1?+=x y ， ∴显色液的磷浓度=1.1934*0.061+0.0081 =0.0808974（mgkg -1） 五、结果计算 土壤中速效磷（mg/kg ）分取倍数比色液*5100*)/(kg mg ==5*5 100*0.0808974 =8.08974（mg/kg ） [分取倍数=5] 吸光值（x ） 0 0.075 0.155 0.245 0.321 0.420 含磷浓度（y ） 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
土壤有效磷测定
土壤有效磷测定 A 碳酸氢钠提取——钼锑抗比色法（Olsen 法） 1 方法提要 碳酸氢钠溶液除可提取水溶性磷外，也可以抑制Ca 2+的活性，使一定量活性较大的Ca-P 盐类中的磷被浸出，也可使一定量活性Fe-P 和Al-P 盐类中的磷通过水解作用而浸出。由于浸出液中Ca 、Fe 、Al 浓度较低，不会产生磷的再沉淀。浸提液中的磷可用钼锑抗比色法定量测定。土壤浸出的磷量与土液比、液温、振荡时间及方式有关。本法严格规定土液比为1：20，浸提液温度为25℃±1℃，振荡提取时间为30min 。 2 适用范围 本方法适用于石灰性土壤有效磷含量的测定；中性土壤及水稻土也可参照使用。 3 主要仪器设备 3.1分光光度计或紫外－可见分光光度计； 3.2恒温（25?C ±1?C ）往复式或旋转式振荡机，或普通振荡机及恒温室，满足180r/min ±20r/min 的振荡频率或达到相同效果； 3.3塑料瓶，200mL ； 3.4无磷滤纸。 4 试剂 4.1 无磷活性碳粉：如所用活性碳含磷，应先用1：1盐酸溶液浸泡24h ，然后移至平板漏斗抽气过滤，用水淋洗到无Cl -为止（约4～5次），再用碳酸氢钠浸提剂浸泡24h ，在平板漏斗上抽气过滤，用水洗尽碳酸氢钠，并至无磷为止，烘干备用； 4.2 氢氧化钠溶液［ρ(NaOH)=100g ·L -1］：称取10g 氢氧化钠溶于100mL 水中； 4.3 碳酸氢钠浸提剂［ρ(NaHCO 3)=0.50mol ·L -1，pH=8.5］称取42.0g 碳酸氢钠（NaHCO 3）溶于约950mL 水中，用100g ·L -1氢氧化钠溶液调节pH 至8.5(用酸度计测定)，用水稀释至1L 。贮存于聚乙烯瓶或玻璃瓶中备用。如贮存期超过20d ，使用时须重新校正pH ； 4.4 酒石酸锑钾溶液［ρ（K(SbO)C 4H 4O 6· 2 1H 2O ）＝5g ·L -1］：称取0.5g 酒石酸锑钾溶于水中，稀释至100mL ； 4.5 钼锑贮备液：称取10.0g 钼酸铵［(NH 4)6Mo 7O 24·4H 2O ］溶于300mL 约60℃水中，冷
土壤有效磷
土壤有效磷测定 碳酸氢钠提取——钼锑抗比色法（Olsen 法） 1 方法提要 碳酸氢钠溶液除可提取水溶性磷外，也可以抑制Ca 2+ 的活性，使一定量活性较大的Ca-P 盐类中的磷被浸出，也可使一定量活性Fe-P 和Al-P 盐类中的磷通过水解作用而浸出。由于浸出液中Ca 、Fe 、Al 浓度较低，不会产生磷的再沉淀。浸提液中的磷可用钼锑抗比色法定量测定。土壤浸出的磷量与土液比、液温、振荡时间及方式有关。本法严格规定土液比为1：20，浸提液温度为25℃±1℃，振荡提取时间为30min 。 2 适用范围 本方法适用于石灰性土壤有效磷含量的测定；中性土壤及水稻土也可参照使用。 3 主要仪器设备 3.1分光光度计或紫外－可见分光光度计； 3.2恒温（25?C ±1?C ）往复式或旋转式振荡机，或普通振荡机及恒温室，满足180r/min ±20r/min 的振荡频率或达到相同效果； 3.3塑料瓶，200mL ； 3.4无磷滤纸。 4 试剂 4.1 无磷活性碳粉：如所用活性碳含磷，应先用1：1盐酸溶液浸泡24h ，然后移至平板漏斗抽气过滤，用水淋洗到无Cl -为止（约4～5次），再用碳酸氢钠浸提剂浸泡24h ，在平板漏斗上抽气过滤，用水洗尽碳酸氢钠，并至无磷为止，烘干备用； 4.2 氢氧化钠溶液［ρ(NaOH)=100g 2L -1］：称取10g 氢氧化钠溶于100mL 水中； 4.3 碳酸氢钠浸提剂［ρ(NaHCO 3)=0.50mol 2L -1，pH=8.5］称取42.0g 碳酸氢钠（NaHCO 3）溶于约950mL 水中，用100g 2L -1氢氧化钠溶液调节pH 至8.5(用酸度计测定)，用水稀释至1L 。贮存于聚乙烯瓶或玻璃瓶中备用。如贮存期超过20d ，使用时须重新校正pH ； 4.4 酒石酸锑钾溶液［ρ（K(SbO)C 4H 4O 62 2 1H 2O ）＝3g 2L -1］：称取0.5g 酒石酸锑钾溶于水中，稀释至100mL ；
有效磷的测定
一、土壤样品的制备 程序等 土壤样品的制备：把挖回来的土壤样品，放在太阳下风干，直至样品充分风干，便于捣碎。风干后的土壤直接捣碎，形成小块状或颗粒状，用一塑料盆把土壤装起来。 把土壤样品混合均匀，在其中取出少量后，放置研钵中研碎，充分磨细，直至粉末状。再把粉末状的土壤样品滤过20目筛子。 用电子天平准确称出2g置于干燥的50ml塑料瓶中，自此，土壤样品制备完成。 二、土壤有效磷的测定 （0.5molL-1NaHCO3浸提—钼锑抗比色法） 一、实验目的及说明 土壤中有效磷的含量，随土壤类型、气候、施肥水平、灌溉、耕作栽培措施等条件的不同而异。通过土壤有效磷的测定，有助于了解近期内土壤供应磷的情况，为合理施用磷肥及提高磷肥利用率提供依据。 土壤速效磷的测定中，浸提剂的选择主要是根据土壤的类型和性质测定。浸提剂是否适用，必须通过田间试验来验证。浸提剂的种类很多，近20年各国渐趋于使用少数几种浸提剂，以利于测定结果的比较和交流。我国目前使用最广学的浸提剂是0.5molL-1NaHCO3溶液（Olsen法），测定结果与作物反应有良好的相关性[注1]，适用于石灰性土壤、中性土壤及酸性水稻土。此外还使用0.03molL-1NH4F-0.025molL-1HCl溶液（BrayⅠ法）为浸提剂，适用于酸性土壤和中性土壤。 同一土壤用不同的方法测得的有效磷含量可以有很大差异，即使用同一浸提剂，而浸提时的土液比、温度、时间、振荡方式和强度等条件的变化，对测定结果也会产生很大的影响。所以有效磷含量只是一个相对的指标。只有用同一方法，在严格控制的相同条件下，测得的结果才有相对比较的意义。在报告有效磷测定的结果时，必须同时说明所使用的测定方法。 二、方法原理 石灰性土壤中磷主要以Ca-P（磷酸钙盐）的形态存在。中性土壤Ca-P、Al-P（磷酸铝盐）、Fe-P（磷酸铁盐）都占有一定的比例。0.5molL-1NaHCO3、（pH8.5）可以抑制Ca2+的活笥，使某些活性更大的与Ca结合的P浸提出来；同时，也可使比较活性的Fe-P和Al-P起水解作用而被浸出。浸出液中磷的浓度很低，须用灵敏的钼蓝比色法测定，其原理详见土壤全磷的测定章节。 当土样含有机质较多时，会使浸出液颜色变深而影响吸光度，或在显色出现浑浊而干扰测定，此时可在浸提排荡后过滤前，向土壤悬液中加入活性碳脱色，或在分光光度计800nm 波长处测定以消除干扰。 三、实验仪器 研钵、20目筛子、电子天平、振荡器、uv-754分光光度计、振荡器、勺子、小塑料瓶 四、试剂配制 （1）0.5molL-1NaHCO3(pH8.5)浸提剂42.0gNaHCO3（化学纯）溶于约800ml水中，
土壤有效磷测定的步骤
土壤有效磷测定的步骤 （一）试剂的配置 1、0．5摩尔每升碳酸氢钠浸提剂 称42.0克碳酸氢钠（三级）溶于约900毫升水中，用4摩尔每升的NaOH溶液调剂PH至8.5（用PH计测定），保存于塑料瓶中。如果超过1月，用时需重新校正PH值。 2、钼锑贮存液 浓硫酸181毫升缓慢倒入约800毫升水中，搅拌、冷却。10克钼酸铵溶解于约60℃的300毫升水中，冷却。然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中，再加100毫升0.3%酒石酸锑钾溶液（0.3克酒石酸锑钾溶于100毫升水），最后用水稀释至2升，保存于棕色瓶中。 3、钼锑抗显色剂：0.50克抗坏血酸溶于100毫升钼锑贮存液中，此溶液必须随配随用，有效期不宜超过1天。 4、磷标准贮备溶液【c（p）=100毫克每升】 称取105℃烘干2小时的磷酸二氢钾0.4394克，溶于约500毫升蒸馏水中，加入5毫升浓硫酸，转入1升容量瓶中，用水定容。此贮备溶液可以长期保存。 5、5毫克每升磷（P）标准溶液 取磷标准贮备溶液【c（P）=100毫克每升】溶液用蒸馏水准确稀释20倍，即为5毫克每升磷标准溶液，此溶液不宜久存。 （二）操作步骤 1、称土2.50克于塑料瓶，加入一小勺无磷活性炭份和0.5摩尔每升碳酸氢钠浸 提剂50毫升，在25℃下振荡30分钟（振荡机速每分钟160至200次为宜），取出后用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于三角瓶中。 2、量取浸出液10毫升于小烧杯或三角瓶中，先加入钼锑抗显色剂5毫升，气泡 少时摇匀几次，再加入蒸馏水10毫升，室温高于20℃放置显色30分钟。在分光光度计上用波长880纳米测定，根据标准曲线读出浓度，记下读书，设为A。 3、工作曲线的绘制 分别吸取5毫克每升磷标准溶液0,1,2,3,4,5,6毫升于50毫升容量瓶中，加入碳酸氢钠浸提剂10毫升，加入钼锑抗显色剂5毫升，摇匀，定容。即得0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6毫克每升磷标准系列溶液，用0浓度调节仪器的零点，测量吸光值，绘制工作曲线，测定待测液。 （三）结果计算 有效磷（毫克每千克）=50×A