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化学发光、荧光、可见光成像系统的技术...-中山大学(精)

项目编号:中大招(特)[2011]023号

项目名称:中山大学公卫学院激光共聚焦扫描显微镜采购项目

附件: 激光共聚焦扫描显微镜,1套,要求如下:

(一)光学共聚焦扫描系统:

1) 检测成像通道:物理通道数5个,其中荧光通道4个,透射光DIC通道不少于1个。

2) 荧光检测通道均可使用狭缝光谱扫描技术,可进行400~800nm连续无极的光谱扫描;

3) 荧光检测器的要求:有1个荧光通道采用磷砷化镓(GaAsP)超高灵敏度探测器;对极弱荧光信号或者单分子荧光信号可进行检测。另外,荧光检测器提供2个的大靶面探测器(PMT)。

4) 采用单针孔, 各通道扫描图像无错位问题;

5) 激光能快速的双向来回扫描,在扫描完的回程中可进行图象采集,便于快速的FRAP试验;

6) 自动焦面控制系统,通过850nm的LED光对焦面进行实时自动校准;

7) 扫描图像分辨率(不管是二维还是三维图象)均可达到8192X8192以上,线扫描速度可达2800线/秒;

8) 扫描镜:扫描镜采用X2Y三镜扫描;

9) 扫描旋转:自由旋转200°,可在扫描过程中任意旋转;

10) 扫描视场:22mm;

11) 扫描速度: 5帧/秒(512x512 象素);

12) 共聚焦分析软件系统能控制快速制冷CCD,在不开激光的情况下,共焦软件系统能与CCD、显微镜、快速外置滤块转盘、荧光光源、CO2系统组成完整的活细胞观察系统;

(二)激光器及相关配置:

由AOTF声光调制器控制所有激光谱线:

Ar:458/476/488/514 nm 65mW,有4条谱线;

HeNe: 543 nm 1mW,

HeNe: 633 nm 10mW。

近紫外激光器:405nm 50mW

(三)智能型倒置显微镜主机配置:

1) 采用全自动研究级倒置荧光显微镜。由计算机的激光共聚焦扫描软件系统全自动控制;含明场、荧光、DIC、等基本功能

2) 显微镜通过一个智能外置控制器控制,快速方便,无需接触显微镜,减少样品的污染机会和显微镜震

动。

3) 液晶板显示显微镜的当前工作状态,如所用物镜数据、荧光透射光状态、视场光栏和孔径光栏等;

4) 6位电动控制转换的物镜转换台;

5) 配平场半复消色差长工作距离物镜:20X/N.A=0.40;40X/N.A=0.65

6) 共聚焦专用物镜:

(1)10×平场全复消色差荧光物镜,N.A.=0.40;

(2)20×平场全复消色差荧光物镜,N.A.=0.70;

(3)40×平场全复消色差荧光物镜,N.A.=1.30;

(4)100×平场全复消色差荧光物镜,N.A.=1.40,油镜;

7) 电动显微镜调焦精度≤15nm;

8) 三板载物台;

9) 显微镜除了荧光和透射光之外,配全自动微分干涉,从明场到微分干涉一键操作。

10) 目镜系统符合人体功能学的设计,观察角度10o~45o垂直可调。采用大视野的10X目镜,FOV=25mm,;

11) 显微镜透射光源:100卤素灯箱及集光器和灯座,12V 100W 卤素灯。

12) 电动长工作距离聚光器,工作距离28mm,7孔位电动转盘,电动孔径光阑,N.A.=0.55。

13) 荧光光源:应采用长寿命金属卤化物做光源,使用寿命不低于2000小时,光源应为光纤导入式的冷光源;

14) 6位电动荧光滤块转盘,置换方便,配紫外、蓝、绿三块荧光激发滤块,其中紫外激发:BP340-380,400,LP425、蓝色激发BP470/40,500,BP500~550、绿色激发:BP515-560,580,LP590;15) Fura 2滤片组包括: Fura 2 滤片给外置滤片转轮插片, 滤光块Fura 2 340nm/380nm;

(四)计算机及软件部分

1、计算机:高性能的世界知名品牌原装机,各种硬件配置(图像象、数据储存介质)齐全,可靠和稳定,配置应不低于:

P Ⅳ3.2G CPU;

2.0G DDR2内存;

200GB硬盘;

16X HP DVD-Writer

配两台大屏幕的19寸LCD显示器或1台30寸液晶显示器,更加方便使用者对采集图象的观察,分析和处理。

2、分析软件:一般要求建立在windows 7系统上,使用先进程序语言,程序执行效率高,快,稳定。整个系统程序,包括控制,检测、分析功能设计合理,操作界面友好,操作简便。扫描后图象以及数据输出转换快捷,多样,容易。能进行三维重组分析,时间扫描分析。提供生理学软件模块,可用于离子测量、PH测量等应用,包括各种离子测量用荧光染料的数据库,可直接计算离子浓度,实时获得离子浓度信号和图象。可编程的Time course 功能,复杂扫描程序的预先编程。执行过程中的互动调整。适合活细胞研究,如FRAP, FLIP, FRET等应用。也可标记出ROI进行特定区域荧光信号变化的跟踪,如钙离子测定的研究。能对样品发射荧光,进行从400-800纳米光谱扫描,及光谱解混分析软件功能,包含dye finder 软件。

1)生理学分析软件

活细胞图像时间变化记录

快速同步双扫描点漂白实验

离子浓度测量

有强大的BestFocus功能,使共焦在长期观察时能始终处于最佳焦面。

2)三维软件

各种重组和表达功能

立体显示,三维动画,3D过滤等

多种表达方式:平均法,最大点法

3)能对样品发射荧光,进行从400-800纳米光谱扫描,及光谱解混分析软件功能,包含dye finder 软件

多染色区分

染料分离

相似发射波长的光谱分离

4)专用的FRET及FRAP,FLIP软件包

5)共聚焦分析软件系统能控制快速制冷CCD,在不开激光的情况下,共焦软件系统能与CCD、显微镜、荧光光源、CO2系统组成完整的活细胞观察系统;

(五)CO2孵育观察装置

1)双通道温度控制器,双通道可独立调节,温度使用线性的PID 控制;温度控制范围:高于环境3 至60 度, 0.1 度调节;

2)CO2控制器:温度范围:高于环境3至40 度,控制精度:±0.1℃;

CO2检测范围:0~10%,控制范围:0~7.5%;控制精度:0.1%;

3)配两个培养箱,一个专用于培养皿或灌流培养装置,一个专用于多孔板;

4)热插件P:温度控制范围:高于环境3至40 度,高26mm,顶开口80X90mm,外径220X180X50mm;5)6孔板热插件和96孔板热插件:高于环境3至40 度,高29mm,顶开口135X123mm,外径245X210X50mm;

(六)活细胞系统:

1.核心应用软件,其功能如下:

1) 界面友好直观, 优化数据处理和快速采集和大数据量显示.

2) 应用: 多维度采图, 图象叠加. Z轴对叠(需电动Z 调焦装备).

3) 时间顺序采图.

4) 定标,寻找和拼图(需备电动物台).

5) 完整控制数码相机,如曝光, 增益, binning, 黑的, 白的, 伽玛值,区域采集等.

6) 完全控制电动显微镜.

7) 自动实验条件保存和恢复.

8) 大图象视窗, 自动的显示时间顺序和Z轴对叠.

9) 实验结构数据管理费储存, 重命名, 拷贝, 删除, 输出为tif, avi, jpeg 等格式.

10) 图象处理:调节反差, 亮度和伽玛, 图象剪裁.

11) 测量: 强度, 长度和面积. 整个图象堆叠区域强度测量. 在活图上在线测量. 比率测量. 可添加应用模块选项. 在线帮助, 用户手册

12) 用光密度发测量荧光强度.

13) 高速套装: 照相机高速控制, 高速控制外置滤片转轮,

2.3D软件:

建立多通道3D 电影, 硬件狗保护. 能够象共聚焦显微镜一样采集各个焦平

面的图像,根据需要能够分析特定焦平面图像,并可以把含有不同Z轴信息

的图像输出成一张包含3D信息的2D图像。

3. 动态生理学软件模块,其功能如下:

1) 实时改变参数设置

2) 用图形宏语言连接不同时间序列: 不同时间序列的设置; 不同时间序列

3) 的连接( 设置暂停时间; 设置循环; 设置触发模式),可依实验条件不同如施加处理因素(前、中、后)预设多个时间序列,不同序列的采图条件可相同或不同,多个序列之间可用图形宏语言通过不同方式连接,包括:直接连接或设置一定暂停时间;设置循环;通过TTL 控制, 触发功能可结合外围器件如显微注射器, 药物灌流装置和电生理器件, 电极,膜片钳等, 与外接装置的信号记录同步化,要求外部设备的信号采集能够同步化或延迟特定时间。实现多通道3D图像采集,对活细胞进行动态观察并快速高清晰成像,活细胞图像处理、活细胞动态成像示踪,可实现分子水平的研究

4) 实时及离线定量: 感兴趣区域荧光强度的实时在线定量; 不同通道荧光

5) 强度比值计算; Ca2+比值或浓度计算; 相对荧光强度改变分析;

6) 自动聚焦跟踪.

4. FRET敏感发射. 一步接一步提示来在活样品中做一个容易的过程给

FRET 测量, 记录在活细胞中分子交互作用发生的荧光能量转移事件. 用

户导引做背景修正和串色移除. 在线和离线定量FRET 效率在用户定义

区域内和该结果将会为一个FRET 效率地图来显示. 输出数据为*.xml

格式.

5.数码成像器:

1. 0.70x图象接口

2. 半导体制冷显微数码相机: 制冷温度低于环境-20℃。

3. 物理分辨率1392×1040,Pixel Size = 6.45μm×6.45 μm,Sensor Size = 9.0 mm×6.7 mm。

4. 动态范围1:2000

5. 像素尺寸:

6.45 μm x 6.45 μm

6. 芯片尺寸:2/3"CCD

7. 最大采集速度: 20 frames/sec(1392×1040)。

8. 曝光时间:4 μs to 600 s

9. 数字化范围:14Bit

10. 具有BINNING模式,2X2,3X3,4X4,5X5,

11. 传输方式:IEEE 1394b。

12. 信噪比:1250:1。

售后服务:自验收合格之日起,由乙方提供不少于2年的免费保修服务(另有特别说明的,按其要求执行),该项为不可偏离条款。保修期有不同提供方的,需说明提供方的顺序和各自期限。保修提供方最多不得超过两个。