论醋酸杆菌最佳诱变剂的筛选

摘要：以野生型醋酸杆菌为出发菌株经紫外线，亚硝酸，5-溴尿嘧啶，吖啶橙，2-氨基腺嘌呤，盐酸羟胺六种诱变剂进行诱变，用青霉素测定醋酸杆菌对各种诱变剂的敏感性，进而筛选出对此菌种诱变效果显著的最佳诱变剂。试验结果最佳诱变剂为盐酸羟胺，诱变后其产酸能力比野生型的菌株有明显提高。关键词：醋酸杆菌；诱变剂；盐酸羟胺；突变；青霉素醋酸杆菌在自然界中分布较广，例如醋醪、水果、蔬菜表面都可以找到，它是重要的工业用菌之一，能氧化酒精为醋酸，发酵调味品食醋，葡萄糖及维生素C的生产就是利用醋酸杆菌。目前国内醋酸生产菌株以中科1.41和沪酿1.01为主[1]。目前水果醋以其食用及保健美容之功效，倍受大众青睐，为了找到适合水果醋发酵所用的优良菌种，有必要对醋酸杆菌进行诱变，诱变是遗传育种常用来培育优良菌种的方法，它主要包括物理因素如紫外线β射线、X射线等，化学因素如5-BU、芥子气、亚硝酸、烷化剂等，不同的诱变剂其诱变机理[2,3]不同，有的是改变了DNA的化学结构或是导致碱基替换、移码突变或结合到DNA分子上等。本试验就主要依据各种诱变剂的不同诱变机理[2,3]，选用了前述六种诱变剂对醋酸杆菌进行诱变处理和结果分析。1材料和方法1.1材料1.1.1菌种醋酸杆菌，从苹果皮上自行分离的野生型菌种。1.1.2仪器设备手揿计数机、血球计数板、SW-CJ-IF超净工作台、YWQGO2型高压蒸汽消毒器、WC-1型微型涡旋混合仪。1.1.3试剂紫外线：波长为253.7nm,15w的紫外灯，作用距离为20cm；亚硝酸、吖啶橙(F.M.P)、5-溴尿嘧啶：中国医药上海化学试剂公司生产；2-氨基腺嘌呤：CHEMCALCOMPANY；盐酸羟胺：上海建新试剂厂生产；青霉素：80万单位华北制药股份有限公司生产。1.1.4培养基分离培养基：葡萄糖0.3g酵母膏1g碳酸钙1g琼脂2g 酒精4(v/v)加水至100ml；试管斜面培养基：葡萄糖0.3g酵母膏1g碳酸钙2g琼脂2g酒精4(v/v)加水至100ml；种子培养基：葡萄糖0.3g酵母膏1g酒精3(v/v)加水至100ml；发酵培养基：葡萄糖0.3g酵母膏1g酒精6(v/v)加水至100ml。1.1.5培养条件分离培养条件：30℃42h；液体酵条件：30℃160h1.2试验方法1.2.1测定野生型醋酸杆菌液体发酵产酸能力将冷藏菌种活化，分离培养，进行液体发酵，用酸碱滴定法测其酸度。1.2.2诱变处理将培养好的试管用0.85的无菌盐水洗下，倒入带有玻璃珠的的大试管振荡10～15分钟，配成菌悬液（1×108个/ml），十倍稀释，涂平板[4]，培养，与同步培养的野生型菌株进行比较，计算致死率(诱变后的菌落数／诱变前的菌落数×100)。(1)紫外线诱变处理将上述菌悬液置于紫外灯下照射，采用不同的照射时间，避光十倍稀释,用黑布包住培养42h,然后记数[5]。

(2)亚硝酸诱变处理取2ml一定浓度的菌悬液于一个已灭菌的空试管中，加2ml已水浴灭菌过1mol/l的醋酸缓冲液和不同体积的已过灭菌的0.2mol/l亚硝酸钠溶液作用十分钟，然后用0.7mol/l磷酸氢二钠稀释,分别涂平板记数[4]。(3)吖啶橙诱变处理用电子天平称取适量的诱变剂水浴灭菌。取2ml一定浓度的菌悬液于一个已灭菌的空试管中，加入不同体积的诱变剂分别涂平板记数[5]。(4)5-溴尿嘧啶诱变处理用电子天平称取适量的诱变剂水浴灭菌。取

2ml一定浓度的菌悬液于一个已灭菌的空试管中,加入不同体积的诱变剂分别涂平板记数[4]。

(5)2-氨基腺嘌呤诱变处理用电子天平称取适量的诱变剂水浴灭菌。取2ml一定浓度的菌悬液于一个已灭菌的空试管中，加入不同体积的诱变剂分别涂平板记数[4]。(6)盐酸羟胺诱变处理用电子天平称取适量的诱变剂水浴灭菌。取2ml一定浓度的菌悬液于一个已灭菌的空试管中，加入不同体积的诱变剂分别涂平板记数。1.5.3青霉素测醋酸杆菌对诱变剂的敏感性用电子天平称取适量的青霉素溶解，稀释，水浴灭菌。以不同的浓度加入到诱变后的菌悬液中，将未加青霉素的菌悬液与加青霉素的菌悬液分别涂平板记数，计算相对突变率(加青霉素的菌落个数/未加青霉素的菌落个数×100)，找出突变率最高的诱变剂。1.5.4液态静止发酵试验用筛选出的最佳诱变剂诱变醋酸杆菌后涂于含有碳酸钙的平皿中，挑取透明圈与菌落直径之比较大的菌落接种试管斜面培养，24h左右后接入液体试管中，且酒精体积分数调到3,培养24h后接入液体三角瓶中，最后酒精体积分数调到6，培养7d,测其酸度，与野生型菌种同步比较，据酒精转化率高低选出产酸高产菌株.1.5.5高产菌株传代试验将高产菌株传接五代，

均测其发酵产酸能力，观察其遗传稳定性。1.5.6酸度测量方法：酸碱滴定法。

除草剂室内高通量筛选方法研究

除草剂室内高通量筛选方法研究 摘要:以狗牙根为材料,对除草剂筛选的限制因素进行了研究?结果表明,水分流失和真菌污染是引起筛选结果不稳定的主要因素;运用多种规格的组织培养板和雾化补水可以控制水分流失对筛选的不利影响;添加抗真菌剂和对种子进行杀菌处理可以消除真菌污染对靶标的侵害和延长试验的可观察时间?进一步的筛选试验结果表明,运用以上方法能够稳定?高效地对不同来源的样品进行筛选? 关键词:高通量筛选;除草活性;种子处理;抗真菌剂 Study on High Throughput Screening of Herbicide Abstract: In order to optimize the high throughput screening of herbicide, various factors that affect the growth of grass in testing plates were studied. The results showed that the key factors were the loss of water and fungal infection. So a screening model was advanced to break the series of limiting factors. The loss of water had been controlled by the application of different testing plates and addition of water by the atomizer; by the application of selective fungicide and seeds treatment, the problem of fungal infection had been solved and the period of testing had been lengthened. The screening method had been tested and verified with three standards and about 1280 samples from different sources. The results showed that it is a stable and highly efficient method for the screening of herbicide activity of samples from different sources. Key words: high throughput screening; herbicidal activity; seeds treatment; fungicide. 直接应用目标杂草进行除草剂筛选具有针对性强?活性反应真实?直观等优点,在新药发现方面更具有独特的优势?而对于来源多样?理化性质复杂及数量巨大的样品,直接使用目标杂草进行筛选存在着操作复杂?工作量大?活性重现性差?可观察时间短等诸多瓶颈?本试验以狗牙根种子为筛选起点,使用琼脂为载体对除草剂室内高通量筛选的限制因素进行了探索[1],同时选择3个标准样品和一些不同来源的样品进行了筛选,旨在找到高效?稳定的除草剂室内高通量筛选方案? 1 材料与方法 1.1 试验材料 1.1.1 种子狗牙根种子发芽率大于70%,保藏温度为17~20 ℃? 1.1.2 培养基原料琼脂粉(北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司,型号DH010-4)?PDB培养基原料(Becton,Dickinson & CO.)?

醋酸菌的分离鉴定和发酵条件研究

第2章醋酸菌的分离鉴定和发酵条件研究 2.1引言 醋酸菌包括醋酸杆菌属和醋酸单胞菌属[30]，又名醋酸细菌。醋酸菌的细胞一般为杆状、直或者稍弯，也有少部分像椭圆形，由单个、成对或者成链状排列的，大小一般在0.6～0.8×1.0～3.0 μm。醋酸菌没有芽胞是革兰氏阴性菌，它有的细胞是周生鞭毛种类，一般在液面上生长会形成较厚的菌膜。黑色醋酸杆菌等为另一些种类的醋酸菌细胞是端生鞭毛。醋酸菌的分布广泛，在未灭菌的醋、啤酒、黄酒中果酒，以及在果园的土壤中、葡萄或酸败食物表面中都有生长[31]。醋酸菌是酿醋过程中不可缺少的。醋酸菌在发酵过程中，会产生大量的醋酸和其他有机酸，而且还有醇类[32]。 本章节研究醋酸菌的分离鉴定和发酵条件，通过平板分离、革兰氏染色、产醋酸实验，并经生理生化鉴定和查阅伯杰氏手册，做出进一步鉴定。 2.2实验材料与方法 2.2.1材料与仪器 分离样品：取自湖北某果醋厂发酵的醋醅。 试验主要仪器设备型号及产地如表2.2.1.a。 表2.2.1.a主要仪器设备 Tab 2.2.1.a Main instrument equipment 主要仪器型号厂家 生化培养箱 双目生物显微镜 分析天平 手提式不锈钢蒸汽灭菌锅 超净工作台 精密数字式酸度计 PYX-250S-A BME（BA/E3） BS224S DSX-280B SW-CJ-1FD pHS-3C 长沙科技 科力仪器 德国莱卡 北京化丰 上海南鹏 上海科技

试验试剂：葡萄糖、酵母膏、甘油、无水乙醇(95%)、CaCO3、(NH4)2SO4、K2HPO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、FeCl3、乙酸钙、乳酸钙、浓硫酸均为分析纯；琼脂食用级。 2.2.2培养基[33-37] 表2.2.1.ｂ培养基成分表 Tab 2.2.1.ｂMedium composition 名称葡萄 糖 酵母 膏 无水乙醇 (v/v) 琼 脂 CaCO3备注 ⑴基础发酵培养基1%1%3%pH 4. 5 ⑵分离培养1%1%3%2%2%pH自然 ⑶斜面保藏培养基1%1%3%2%1%pH自然 ⑷液体保藏培养基1%1%1%pH自然 ⑸改进后的斜面液体 保藏培养基 1%1%3%2%1%pH自然 ⑹发酵培养基1%1%7%pH 4. 5 ⑺Horyer-Frateur培养 基 3%pH自然 ⑻GYC培养基10%5%2% 2. 5%pH自然 ⑼高糖培养基30%1%2%2%pH自然⑽生酮培养基3%2%甘油3% ⑾产5-酮基葡萄糖酸 盐培养基 3%1%2%2%pH自然 ⑿氧化乙酸培养基1% 1% 2% 乙酸钙1% pH 7.2 ⒀氧化乳酸培养基1% 1% 2% 乳酸钙2% pH7.0-7.2 ⒁乙醇培养基1% 3% 2% pH自然注：培养基⑸在斜面保藏培养基⑵上，30℃培养24 h，加入无菌碳酸钙，灌入并液体培养基到斜面上，至离管口2cm处，密封冷藏；培养基⑺其他成分有(NH4)2SO40.1%，K2HPO40.1%，KH2PO40. 01%，0.025%，FeCl30. 0005%；以上培养基均以121℃灭菌20 min。 2.2.3醋酸菌的分离纯化 2.2. 3.1分离纯化实验 称取醋醅样品5g，液态增殖培养48h后，按照浓度梯度10-6、10-7和10-8，

(整理)常用化学消毒剂的选择

化学消毒剂种类繁多，人们在消毒实践中，总要选择比较理想的化学消毒剂来使用。作为一个理想的化学消毒剂，应具备以下几个特点：（1）杀菌谱广；（2）使用有效浓度低；（3）杀菌作用速度快；（4）性能稳定；（5）易溶于水；（6）可在低温下使用；（7）不易受各种物理化学因素影响；（8）对物品无腐蚀性；（9）无臭无味，无色；（10）毒性低，消毒后无残留毒害；（11）使用安全，不易燃烧；（12）价格低廉；（13）运输方便；（14）可大量生产供应。目前的化学消毒剂中，没有一种能够完全符合上述要求的。因此在使用中，只能根据被消毒物品性质、工作需要及化学消毒剂的性能来选择使用某种消毒剂。 1 戊二醛 戊二醛属高效消毒剂，具有广谱、高效、低毒、对金属腐蚀性小、受有机物影响小、稳定性好等特点。适用于医疗器械和耐湿忌热的精密仪器的消毒与灭菌。其灭菌浓度为2%，市售戊二醛主要有：2%碱性戊二醛和2%强化酸性戊二醛两种。碱性戊二醛常用于医疗器械灭菌，使用前应加入适量碳酸氢钠，摇匀后，静置1小时，测定pH值。PH在7.5-8.5时，戊二醛的杀菌作用最强。戊二醛杀菌是其单体的作用，当溶液的pH达到6时，这些单体有聚合的趋势，随pH上升这种聚合作用极迅速，溶液中即可出现沉淀，形成聚合体后会失去杀菌作用。因此碱性戊二醛是一种相对不稳定的消毒液，2%强化酸性戊二醛是以聚氧乙烯脂肪醇醚为强化剂，有增强戊二醛杀菌的作用。它的pH低于5，对细菌芽胞的杀灭作用较碱性戊二醛弱，但对病毒的灭活作用较碱性戊二醛强，稳定性较碱性戊二醛好，可连续使用28天。 （1）杀菌原理：醛类消毒剂对微生物的杀灭作用主要依靠醛基，此类药物主要作用于菌体蛋白的疏基、羟基、羧基和氨基，可使之烷基化，引起蛋白质凝固造成细菌死亡。 （2）主要优缺点： 优点： ①戊二醛属广谱、高效消毒剂，可以杀灭一切微生物； ②可用于不耐热的医疗器械的灭菌； ③戊二醛在使用浓度下，具有刺激性小、腐蚀性低、安全低毒； ④受有机物的影响小，20%的有机物对杀菌效果影响不大。 缺点： ①灭菌时间长，灭菌一般要达到10个小时； ②戊二醛有一定的毒性，可引起支气管炎及肺水肿； ③灭菌后的医疗器械需用馏水充分冲洗后才能使用。 （3）杀菌作用 碱性戊二醛属广谱、高效消毒剂，可有效杀灭各种微生物，因而可用作灭菌剂，但强化酸性戊二醛杀芽胞效果稍弱（表1） 表1 2%戊二醛对杀芽孢的杀灭效果 （4）戊二醛的应用 ①医疗器械的消毒与灭菌 2%戊二醛（碱性、酸性、中性）可用于各种不怕湿的医疗器械消毒与灭菌。在常温下把清洁干燥的器械完全浸入戊二醛水溶液中，30分钟可达到消毒10小时以上可达到灭菌。 无论哪种制剂，在使用时均需先加入0.5%亚硝酸钠作为防腐剂，但一经加入防腐剂只可保存1个月，碱性戊二醛只可连续使用1-2周。 ②内窥镜的消毒与灭菌

蔗田除草剂新品种的筛选试验

蔗田除草剂新品种的筛选试验 云南德宏蔗区，地处祖国西南边陲，云南省西部，位于东经97°31′～98°43′，北纬23°50′～25°20′，热量丰富，气候温和，属南亚热带季风性气候。蔗区主要分布区域年均温19.2℃～20.2℃，年均雨量1417～1629mm，年温差小，日温差大，蔗区立体气候明显，具有冬热优势，春温回升快，夏季长，秋多雨，雨热同期，干凉同季，既有利于甘蔗丰产、高糖，同时又是各种甘蔗杂草滋生蔓延、繁衍生息的天然温床，加之，随着甘蔗种植年限的增长，人们长期习惯使用同一剂型的除草剂进行防治，杂草的发生愈来愈重，防治效果愈来愈差，用药量则愈来愈多，不断加大了农民的种蔗成本，严重制约着蔗糖产业的持续健康发展。为改变蔗农的用药习惯，筛选出高效、低毒、安全、环保、广谱的农药新品种和剂型，为甘蔗田间除草用药提供科学依据。 1材料及方法 1.1试验概况 试验地点：云南省陇川县景罕镇，德宏州甘科所良繁基地蔗田进行。供试甘蔗品种为粤糖60 号，1 年新植 1 年宿根。试验时间：2013 年5 月28 日上午，甘蔗大培土后，甘蔗杂草多处于4～7 叶期时用药剂防治。 1.2参试剂药与设计 试验共8 个处理，A.雷斯利（40%莠灭净+15%敌草隆+10%二甲四氯），上海威敌生化（南昌）有限公司生产；B.首丰（8%硝磺草酮+72%莠去津），广西田园生化股份有限公司生产； C.玉三金（38%硝磺莠去津+40%烟嘧磺隆），沈阳科创化学品有限公司生产； D.玉尔好（15%硝磺草酮+48%莠去津），江苏瑞帮农药厂生产；CK（对照）：20%百草枯+38%莠去津胶悬剂； E.苞卫（30%苯唑草酮+助剂），巴斯夫欧洲公司生产； F.老草灭（40%莠灭净+80%敌草隆+56%二甲四氯）； G.耕杰（5%硝磺草酮+50%莠去津）+助剂，先正达（苏州）作物保护有限公司生产。各处理用量见表1。 采用随机区组设计，南北走向，3 行区，试验地行长6.67m，行距1.1m，小区面积为22.01m2，试验地杂草种类多，分布均匀，土壤肥力中等，水肥管理一致。 1.3调查时间和方法 试验前进行1 次杂草基数及种类调查，试验后20d 进行茎叶处理情况调查；药后30d 调查杂草封闭情况。每小区 3 点取样，每点0.5m2，分别调查单子叶、双子叶杂草株数及鲜草总重，计算防除效果。同时不定期观察蔗株药害发生和恢复生长情况。喷药时间及天气情况：2013年5 月28 日上午9：00-11：00 喷药；下午15：00-15：50 下阵雨（药后 4 个小时）。 2试验结果及分析 2.1药前杂草发生情况调查 2013 年5 月27 日划小区、插牌，5 月28 日上午喷药前调查杂草种类及数量（表2）。药前草种主要有：香附子、牛筋草、升马唐（熟地草）、胜红蓟（臭草）、日本草（解放草）、孔明草、空心莲子、冰粉草、粟米菜、牵牛花等。杂草以双子叶为主，且大多处于4～7 叶期。 2.2药后杂草药害表现 药后24h，A（雷斯利）、CK（对照）、F（老草灭）3 个处理杂草有药害表现，其它处理没有；药后5d 观察，B（首丰）、C（玉三金）、D（玉尔好）、G（耕杰）4 个处理杂草有药害表现，E（苞卫）处理单子叶杂草有一定药害，双子叶未见药害，A（雷斯利）处理有

醋酸菌

葡萄酒与醋酸菌 梁曼发酵工程2011050783 摘要：葡萄酒是一种成分复杂的胶体溶液，从葡萄汁酿成葡萄酒以后，不管是在酒厂的贮藏阶段，还是装瓶以后，它总是在一刻不停地变化着。由于各种微生物在葡萄酒中的生长繁殖，使得葡萄酒失去了原有的风味，这种现象称为葡萄酒的病害。在酿酒学领域，醋酸菌几乎不受关注，可能是因为醋酸菌是严格好氧菌，因此人们认为该类菌在葡萄酒中不能生存，除了葡萄酒表面能够永久的与空气接触。醋酸菌是葡萄酒酿造中的大敌。凡是有酒花生长之处，就有醋酸菌在一起繁殖；一旦条件具备，会迅速把酒精氧化变成醋酸，使葡萄酒产生醋酸气味，有刺舌感，严重破坏酒质。在发酵过程中，可通过合理措施来防治醋酸菌的污染。 关键词：醋酸菌；醋酸菌污染；防治措施 1葡萄和葡萄酒相关的醋酸菌 1.1醋酸菌的分类 醋酸菌是能够将酒精氧化成醋酸的一类微生物的总称。醋酸菌是多种形态，细胞椭圆到杆状，0.5-0.8×0.9-4.2微米。单个，成对或成链，不形成孢子。革兰氏染色阴性。醋酸菌是专性好氧菌。有的醋酸菌不会运动，也有具极生或周生鞭毛的运动型。 醋酸菌被分为醋杆菌属（Acetobacter）、酸单胞菌属(Acidomonas)、葡糖醋杆菌（Gluconobacter）、葡糖酸醋酸杆菌（Gluconacetobacter）( Ruiz et al., 2000)。其中关于各属醋酸菌间的不同（表1），主要区别是葡糖杆菌不能将乙醇最终氧化生成CO2和H2O，而其他属均可。 1.2与葡萄和葡萄酒相关的醋酸菌 与葡萄和葡萄酒相关的醋酸菌一般有下列几种：氧化葡糖杆菌、纹膜醋杆菌、巴士醋杆菌、Gluconacetobacter liquefaciens（原来一直被认作是液化醋杆菌）、Gluconacetobacter hansenii（以前一直被认作汉生醋杆菌）。 在未损坏葡萄上发现的醋酸菌主要是氧化葡糖杆菌，菌体数量一般为 102-105cells/mL( Du Toit and Lambrechts, 2002)。人们认为氧化葡糖杆菌低耐酒精能力，所以在酒精发酵过程中很快就死了，在酒中分离得到其细胞数量为104cells/mL(Drysdale and Fleet, 1985)。一般在酒精发酵结束后其细胞数目会减少，为0-102cells/mL( Du Toit and Lambrechts, 2002)。 腐烂或感染灰霉菌的葡萄上醋酸菌数量会大幅度增加，细胞数目由每毫升很少到106cells/mL(Barbe et al., 2001)。葡萄刚污染醋酸菌时，醋杆菌属为优势菌。可能是由于受损葡萄污染了的野生酵母产生的酒精的原因，醋杆菌属能够优先利用酒精作为碳源。 当压榨完的葡萄带皮在较低温度下放置几天，冷浸渍用来在酒精发酵开始前浸提更多色素(Ribéreau-Gayon et al., 2000)。在这段时期内，发酵液的微生物学状态会发生变化，尽管会添加SO2来防止危害酵母菌和细菌的生长。在该过程中，发酵液的pH也会影响醋酸菌的数量：较高pH，细菌数量增加，在这种状况下，较少SO2会产生抗菌作用，而是在较低pH下（pH＜3.5）保持最初的浓度(Du Toit and Lambrechts, 2002)。 由于对酒精耐受力和把酒精作为碳源和能源的偏好的不同，多种醋杆菌经常从葡萄酒中分离得来，而葡糖杆菌常从葡萄汁中分离得到。氧化葡糖杆菌是葡萄与葡萄汁的混合液中主要的菌种。汉生醋杆菌和液化醋杆菌最近被重新指定为汉生氧化葡糖杆菌和液

常用化学消毒剂的选择

常用化学消毒剂的选择 化学消毒剂种类繁多，人们在消毒实践中，总要选择比较理想的化学消毒剂来使用。作为一个理想的化学消毒剂，应具备以下几个特点：（1）杀菌谱广；（2）使用有效浓度低；（3）杀菌作用速度快；（4）性能稳定；（5）易溶于水；（6）可在低温下使用；（7）不易受各种物理化学因素影响；（8）对物品无腐蚀性；（9）无臭无味，无色；（10）毒性低，消毒后无残留毒害；（11）使用安全，不易燃烧；（12）价格低廉；（13）运输方便；（14）可大量生产供应。目前的化学消毒剂中，没有一种能够完全符合上述要求的。因此在使用中，只能根据被消毒物品性质、工作需要及化学消毒剂的性能来选择使用某种消毒剂。 1 戊二醛 戊二醛属高效消毒剂，具有广谱、高效、低毒、对金属腐蚀性小、受有机物影响小、稳定性好等特点。适用于医疗器械和耐湿忌热的精密仪器的消毒与灭菌。其灭菌浓度为2%，市售戊二醛主要有：2%碱性戊二醛和2%强化酸性戊二醛两种。碱性戊二醛常用于医疗器械灭菌，使用前应加入适量碳酸氢钠，摇匀后，静置1小时，测定pH 值。PH在7.5-8.5时，戊二醛的杀菌作用最强。戊二醛杀菌是其单体的作用，当溶液的pH达到6时，这些单体有聚合的趋势，随pH上升这种聚合作用极迅速，溶液中即可出现沉淀，形成聚合体后会失去杀菌作用。因此碱性戊二醛是一种相对不稳定的消毒液，2%强化酸性戊二醛是以聚氧乙烯脂肪醇醚为强化剂，有增强戊二醛杀菌的作用。它的pH低于5，对细菌芽胞的杀灭作用较碱性戊二醛弱，但对病毒的灭活作用较碱性戊二醛强，稳定性较碱性戊二醛好，可连续使用28天。 （1）杀菌原理：醛类消毒剂对微生物的杀灭作用主要依靠醛基，此类药物主要作用于菌体蛋白的疏基、羟基、羧基和氨基，可使之烷基化，引起蛋白质凝固造成细菌死亡。 （2）主要优缺点：

常用化学诱变剂的种类及作用机制

常用化学诱变剂的种类及作用机制 （一）烷化剂 是栽培作物诱发突变的最重要的一类诱变剂。药剂带有一个或多个活泼的烷基。通过烷基置换，取代其它分子的氢原子称为烷化作用所以这类物质称烷化剂。 烷化剂分为以下几类：

1.烷基磺酸盐和烷基硫酸盐 代表药剂：甲基磺酸乙酯（EMS）、硫酸二乙酯（DES） 2.亚硝基烷基化合物 代表药剂：亚硝基乙基脲（NEH）、N-亚硝基-N-乙基脲烷（NEU）3.次乙胺和环氧乙烷类 代表药剂：乙烯亚胺（EI） 4.芥子气类

氮芥类、硫芥类 烷化剂的作用机制--烷化作用作用重点是核酸，导致DNA断裂、缺失或修补。 （二）核酸碱基类似物 这类化合物具有与DNA碱基类似的结构。 代表药剂： 5-溴尿嘧啶（BU）、5-溴去氧尿核苷（BudR）为胸腺嘧啶（T）的类似物 2-氨基嘌呤（AP）为腺嘌呤（A）的类似物 马来酰肼（MH）为尿嘧啶（U）的异构体 作用机制：作为DNA的成份而渗入到DNA分子中去，使DNA复制时发生配对错误，从而引起有机体变异。 （三）其它诱变剂 亚硝酸能使嘌呤或嘧啶脱氨，改变核酸结构和性质，造成DNA复制紊乱。HNO2还能造成DNA双链间的交联而引起遗传效应。

叠氮化钠(NaN3)是一种呼吸抑制剂，能引起基因突变，可获得较高的突变频率，而且无残毒。 用秋水仙素诱导多倍体。 秋水仙素是从百合科植物秋水仙的器官和种子中提取出来的一种剧 毒的植物碱。纯品为无色或淡黄色针状结晶，熔点155℃，有苦味，易溶于冷水、酒精、氯仿和甲醛。通常用水或酒精作溶媒。 （1）秋水仙素诱导多倍体的原理

秋水仙素与正在分裂的细胞接触后，可抑制微管的聚合过程，不能形成纺锤丝，使染色体无法分向两极，从而产生染色体加倍的核。 适宜浓度的秋水仙素溶液，能阻碍纺锤丝的形成，但对染色体结构无明显影响。处理的细胞在一定时间内可恢复正常，重新进行分裂。（2）秋水仙诱导多倍体应注意的问题 ①注意诱变材料的选择 选主要经济性状优良的品种； 选染色体组数少的品种因为倍性高的种在进化过程中已经利用了它的多倍性。

醋酸菌分离及鉴定

醋酸菌分离及鉴定 一、培养基 1、分离培养基（溴甲酚紫显色平板）:葡萄糖1%、酵母膏1%、无 水乙醇3%（体积分数）、0.04%溴甲酚紫5%（体积分数）、琼 脂1.8%、水100 mL，0.1 Mpa 灭菌20 min，无水乙醇在灭菌 后培养基温度降到75 ℃左右时加入。 2 、保藏培养基: 葡萄糖1%、酵母膏0.5%、琼脂2%、丙三醇2.5% （体积分数）、水100 mL，121℃灭菌20 min 备用。 3、液体培养基:葡萄糖1%、酵母膏0.5%、丙三醇2.5%（体积分 数）、水100 mL，调节pH 至6.30，121 ℃灭菌20 min 备用。 二、醋酸菌分离纯化流程 样品→醋酸菌发酵液中富集培养→稀释分离→纯化→斜面试管 保藏→产醋酸定性测试。 三、步骤 1 、菌株分离 取1g 醋醅样品置入无菌试管，装入9 mL 无菌水，振荡均匀后得到10-1 的稀释液，之后10 倍梯度稀释直到10-6 稀释度。取 10-2至10-6 稀释度的样品稀释液分别涂布溴甲酚紫显色平板，每个稀释度涂布2 个平板，每个平板涂布0.2 mL 的样品稀释液，涂布完成后30 ℃倒置培养48 h左右。选取菌落数在30~50 个左右的平板，挑取该平板上的所有单菌落转入斜面保藏培养基中， 30 ℃培养24 h 左右后保存于4 ℃冰箱。

2 、菌株纯化将试管斜面中的菌株平板划线分离后再转接试管斜面， 4℃冰箱保存。 3、菌株归类以上述各菌株划线分离的平板为基准，将形成菌落极 其相似的菌株归为一大类。 4 、菌悬液的制备用接种环挑取新鲜培养的斜面菌株半环，溶于 装有200 μL 无菌超纯水的Eppendorf 管中，于试管振荡器上 混匀后得到菌悬液。 四、鉴定 1、菌株形态特征:镜下细胞呈短杆状,革兰阴性,无芽胞,单个或成 对、成链排列,个体大小为（0.5～0. 7)μm ×(1. 0～1. 5)μm。 2、培养特征:在葡萄糖、酵母膏、乙醇、CaCO3平板培养基上生 长旺盛,菌落圆形、油脂状,表面光滑、凸起,边缘整齐,培养2 d能 产酸,使CaCO3 溶解形成透明圈,继续培养将乙酸氧化分解产生 CO2 和水,菌落周围出现白色透明圈。在斜面培养基上生长良好, 培养2 d后呈油脂状,并产酸。在10% ( v / v)乙醇的培养基上、 Hoyer2Frateur培养液中、30%葡萄糖培养基上均不生长。 五、测试 1、产酸量的测定方法取1 mL 发酵液, 加入10 mL 蒸馏水, 3 滴～ 5 滴0.02 %酚酞酒精溶液, 用标定的0.1 mol/L NaOH 溶液滴定 至浅粉色。由所耗的NaOH 溶液的量来计算样品中的含酸量(以 醋酸计)。 产酸量( %) =( V- V0) ×CNaOH×0.06×100 %

醋酸菌培养条件的优化及醋酸分批发酵

醋酸菌培养条件的优化及醋酸分批发酵 来源：生物化学资料网 摘要:目的醋酸菌培养条件的优化与醋酸发酵实验。方法通过正交试验确定最佳培养条件,并在优化条件下进行分批发酵。结果优化培养条件为:葡萄糖10 g/L,酵母膏10 g/L,乙醇10%(v/v),pH 5.5,装量50 mL/500 mL,静置培养5 d。在优化条件下,醋酸产量比用普通产酸培养基提高了36.4%。应用于分批发酵试验产酸较高。结论优化培养条件适合醋酸菌生长与醋酸发酵。 关键词:醋杆菌属巴氏醋杆菌;培养条件;正交设计;分批发酵 山西老陈醋不仅是具有“绵、酸、香、甜、鲜”独特风味的调味品,还因其富含多种氨基酸、维生素和微量元素而作为保健品得到广泛使用。近年山西醋业发展迅猛,生产规模日渐扩大,生产技术日新月异,促进了山西老陈醋的发展。在食醋生产中,菌种起着至关重要的作用。一株优良的生产菌株能起到提高产量、稳定质量的目的。本实验室从醋醅中分离到一株醋杆菌属巴氏醋杆菌S12,经N+离子注入诱变获得高产突变株SM12-87。对其培养条件进行了优化设计,得出了最佳培养条件。在正交试验对醋酸菌发酵条件掌握的基础上,通过液态分批发酵对优化后的培养条件进行检验。在67 h生产出92.8 g/L的醋酸,乙醇转酸率达到90.08%,极大地缩短了生产周期,减少了成本。 1仪器与材料 1.1材料 山西老陈醋醋醅(由山西老陈醋集团有限公司提供);醋杆菌属巴氏醋杆菌(Acetobacter past-eurianus)SM12-87(本实验室保存)。 1.2主要设备仪器 全自动式 5 L发酵罐(Edison.N.J.,USA);GC9800型气相色谱仪(上海科创公司);HQL150B型恒温摇床(中科院武汉科学仪器厂)。 1.3培养基 1.3.1产酸培养基葡萄糖10 g/L,酵母膏10 g/L,pH 5.5,分装于500 mL三角瓶,每瓶100 mL,121 ℃灭菌20 min,使用前加入7%(v/v)无水乙醇。 1.3.2发酵培养基葡萄糖10 g/L,酵母膏10 g/L,磷酸二氢钾0.5 g/L,硫酸镁0.5 g/L,pH 5.5,121℃灭菌20 min,冷却至60 ℃以下加入10%(v/v)无水乙醇。

诱变剂的作用机理

3．1甲基磺酸乙酯( EMS) EMS分子式CH3SO2OC2H5,中文名为甲基磺酸乙酯,无色液体,分子量124,水中溶解度为8%。pH7条件下在水中半衰期20℃时是93 h, 30℃时26 h。EMS是烷化剂的一种。烷化剂通常带有1个或多个活性烷基,此基团能够转移到其它电子密度高的分子上去,使碱基许多位置上增加了烷基,从而在多方面改变氢键的能力。EMS被证明是最为有效而且负面影响小的诱变剂。与其他烷化诱变剂类似,是通过与核苷酸中的磷酸、嘌呤和嘧啶等分子直接反应来诱发突变。EMS诱发的突变主要通过两个步骤来完成,首先鸟嘌呤的O6位置被烷基化,成为一个带正电荷的季铵基团,从而发生两种遗传效应:一是烷化的鸟嘌呤与胸腺嘧啶配对,代替胞嘧啶,发生转换型的突变;二是由于鸟嘌呤的N27烷基活化,糖苷键断裂造成脱嘌而后在DNA复制过程中,烷基化鸟嘌呤与胸腺嘧啶配对,导致碱基替换,即G∶C变为A∶T。当然,化学诱变存在着染色体结构和数量方面的诱导变异,但这种单一碱基对改变而形成的点突变仍是化学诱变的主要形式。这样的点突变将是品种改良和退化特性恢复的希望所在。诱变剂也可与核苷结构的磷酸反应,形成酯类而将核苷酸从磷酸与糖分子之间切断,产生染色体的缺失。这些DNA结构上的变化都可能促使不表达的基因或区段被激活,而表现出被掩盖的性状。EMS化学诱变产生点突变的频率较高,而染色体畸变相对较少,可以对作物的某一种特殊性状进行改良。与其它诱变剂相比,EMS诱变后产生的突变频率高,且多为显性突变体,易于突变体的筛选。EMS是目前运用最广泛也是公认最为有效的诱变剂。 3.2叠氮化钠( NaN3) NaN3等电点是pH=4. 18,在pH=3时NaN3溶液中主要产生呈中性的分子HN3,易透过膜进入细胞内,以碱基替换方式影响DNA的正常合成,从而导致点突变的产生。由于NaN3只作用于复制中的DNA,所以处理种子时把种子预浸到种胚中,有利于提高处理效果。NaN3具有高效、无毒、便宜及使用安全等优点。在酸性溶液中对大麦叶绿素缺失和形态突变诱发非常有效。 3.3平阳霉素(PYM) PYM是一种抗生素,属于博莱霉素的一类,是博莱霉素的A5组分。目前主要作为抗肿瘤药应用于临床,对多种癌症具有较好的疗效。抗生素具有高度选择性,能抑制细胞的生长,其中的大多数对维持生命有重要意义。作为一种新的诱变剂, PYM在许多实验中均被证明具有安全、高效、诱变频率高、范围大等特点。与EMS的诱变特点相近,在某些方面优于EMS,很具有开发和应用前景。

最新 除草剂生物测定方法及操作方法-精品

除草剂生物测定方法及操作方法 生物测定技术是除草剂研究的一项基本工作，是除草剂活性测定、安全性检测以及残留诊断的常用方法，特别是在除草剂新品的研制开发中发挥着不可替代的作用，也是高通量筛选中必不可少的手段之一[1]。 1 除草剂生物测定方法 除草剂生物测定的主要方法有：点滴法、小杯法或培养皿法、浮萍法、玉米幼苗法、黄瓜幼苗法、燕麦幼苗法、萝卜子叶法、番茄水培法、稗草胚轴法等[2]。除草剂具有控制生长激素的分泌，干扰蛋白质、叶绿素、脂类等的生物合成，抑制光合作用、细胞分裂、呼吸作用等多种作用方式，利用生物活体作为靶标是生物测定中的一种常规选择，生物测定中靶标生物的生长发育情况、生理生化指标以及形态特征的变化可作为除草剂生物活性的判定依据。另外，在进行除草剂生物测定时，除草剂的不同作用方式决定了靶标生物和测定方法的选择。 1.1 组织或器官水平测定 组织或器官水平测定常用的有叶片、种子、根尖等，一般在实验室进行。选用种子作为生物测定的供试材料时，通常采用小杯法或培养皿法。培养皿法的培养介质一般是常规自来水，在培养皿内垫上两层滤纸，把一定数量的种子均匀地铺在滤纸上，提前把需要测定的除草剂按事先设定好的浓度梯度进行稀释，再用移液枪将不同浓度梯度的除草剂加入培养皿，放入培养箱，设定好适宜的温度和湿度，进行培养。小杯法可以采用灭菌、过筛的沙子，均匀地将细沙填充到小杯的固定位置，把一定数量的种子均匀铺设到沙子上，再覆盖上厚度基本一致的细沙。可以用地上植株鲜重、株高或主根长作为测量指标，具体采用哪项指标应依据预备实验结果来确定，但是选定的指标应具备稳定性好、相关性好以及容易测量的特点。以主根长生测法应用最为广泛。例如采用油菜或玉米主根长生测法测定磺酰脲类除草剂残留活性[3,4]。在选用种子作为生测材料时, 供试的种子一定是近一年或两年的，必须进行预实验，确保种子发芽率高、发芽势稳定，否则会影响试验结果。 1.2 整株水平测定 采用整株植物测定除草剂的活性，通常是在温室进行。用不同规格的花盆或培养皿等培养供试植物，然后根据试验预设，把供试除草剂按一定浓度梯度进行稀释，用喷雾法对供试植物进行处理，根据除草剂特性，待除草剂作用症状明显后分两次进行观察、测量、记录、评价。评价的指标为株高、鲜重、死亡率等，还可对植物受害症状进

餐饮服务化学消毒常用消毒剂及使用

餐饮服务化学消毒常用消毒剂及使用 注意事项 一、常用消毒剂及使用方法 （一）漂白粉 主要成分为次氯酸钠，此外还含有氢氧化钙、氧化钙、氯化钙等。配制水溶液时，应先加少量水，调成糊状，再边加水边搅拌成乳液，静置沉淀，取澄清液使用。漂白粉可用于环境、操作台、设备、餐饮具等的涂擦和浸泡消毒。 （二）次氯酸钙（漂粉精）、二氯异氰尿酸钠（优氯净）、三氯异氰尿酸 使用时，应将其充分溶解在水中。普通片剂应碾碎后，加入水中，充分搅拌溶解。泡腾片可直接加入水中溶解。使用范围同漂白粉。 （三）次氯酸钠 使用时，应将其在水中充分混匀。使用范围同漂白粉。 （四）二氧化氯 因配制的水溶液不稳定，应在使用前加入活化剂，且现配现用。使用范围同漂白粉。因氧化作用极强，使用时应避免其接触油脂，防止加速其氧化。 （五）乙醇 浓度为75%的乙醇可用于操作台、设备、工具、手部等涂擦消毒。 （六）乙醇类免洗速干手消毒剂

取适量的乙醇类速干手消毒剂于掌心，按照标准洗手方法，充分搓擦双手20～30秒。 二、消毒液配制方法举例 以每片含有效氯0.25g的漂粉精片配制1L的有效氯浓度为250mg/L的消毒液为例： （一）在专用容器中事先标好1L的刻度线。 （二）在专用容器中加自来水至刻度线。 （三）将1片漂粉精片碾碎后加入水中。 （四）搅拌至漂粉精片充分溶解。 三、化学消毒注意事项 （一）使用的消毒剂应处于保质期，并符合消毒产品相关标准，按照规定的温度等条件贮存。 （二）严格按照规定浓度进行配制。 （三）固体消毒剂应充分溶解使用。 （四）餐饮具和盛放直接入口食品的容器在消毒前，应先清洗干净，避免油垢影响消毒效果。 （五）餐饮具和盛放直接入口食品的容器消毒时应完全浸没于消毒液中，保持5分钟以上，或者按消毒剂产品使用说明操作。 （六）使用时，定时测量消毒液中有效消毒成分的浓度。有效消毒成分浓度低于要求时，应立即更换消毒液或适量补加消毒剂。 （七）定时更换配置好的消毒液，一般每4小时更换一次。

菌种诱变方法

微生物诱变育种的方法 摘要:介绍了几种常用的物理诱变和化学诱变育种方法的原理、特点以及成功案例等,为微生物诱变育种提供了一个总体的方法框架。 关键词:诱变; 微生物育种 微生物与酿造工业、食品工业、生物制品工业等的关系非常密切，其菌株的优良与否直接关系到多种工业产品的好坏，甚至影响人们的日常生活质量，所以选育优质、高产的微生物菌株十分重要。微生物育种的目的就是要把生物合成的代谢途径朝人们所希望的方向加以引导，或者促使细胞内发生基因的重新组合优化遗传性状，人为地使某些代谢产物过量积累，获得所需要的高产、优质和低耗的菌种。作为育种途径之一的诱变育种一直被广泛应用。目前，国内微生物育种界主要采用的仍是常规的物理及化学因子等诱变方法。 1 物理诱变 1.1紫外照射 紫外线照射是常用的物理诱变方法之一，是诱发微生物突变的一种非常有用的工具。DNA和RNA的嘌呤和嘧啶最大的吸收峰260nm，因此在260nm的紫外辐射是最有效的致死剂。紫外辐射的作用已有多种解释，但比较确定的作用是使DNA分子形成嘧啶二聚体[1]。二聚体的形成会阻碍碱基间正常配对，所以可能导致突变甚至死亡[2]。 马晓燕[3]等以紫外诱变原生质选育法筛选发酵乳清高产酒精菌株马克斯克 鲁维酵母菌株ZR-20，比优化前的酒精产率提高10.5%，较出发菌株提高了68%。顾蕾[4]等通过紫外诱变红酵母ns-1原生质体，获得类胡萝卜素产量明显提高的突变株，其生物量、色素产量分别为6.15g/L、6.41mg/L，分别比原始菌株提高了67.6%、54.1%。 紫外照射诱变操作简单，经济实惠，一般实验室条件都可以达到，且出现正突变的几率较高，酵母菌株的诱变大多采用这种方法。 1.2电离辐射 γ-射线是电离生物学上应用最广泛的电离射线之一，具有很高的能量，能产生电离作用，可直接或间接地改变DNA结构。其直接效应是可以氧化脱氧核糖的碱基，或者脱氧核糖的化学键和糖-磷酸相连接的化学键。其间接效应是能使

最新整理常用消毒剂的消毒原理知识讲解

消毒的原理 消毒是用物理的、化学的和生物的方法杀灭病原微生物。其目的是预防和控制传染病的发生、传播和蔓延。大型养殖集团因有较为完备的实验室，完善的管理措施和雄厚的技术力量，能够科学的选择消毒剂，检验消毒剂的质量和在现场使用后的实际消毒效果，使消毒工作达到理想的效果。而广大的养殖场(户)面对销售商上百种消毒剂的名称，品牌无法正确选择消毒剂，更无法检验消毒剂的内在质量和实际使用效果，本文按将消毒剂的作用机理就如何正确选择和使用消毒剂。 一、通过分子碰撞原理，即通过消毒剂分子碰到病原微生物杀灭病原微生物：这类消毒剂的配比浓度越高，消毒剂分子就越多；温度越高，消毒剂分子运动越快；环境中有机物越少；消毒剂分子碰到病原微生物机会就越多，消毒效果越好。具体使用时，须注意配比浓度(酒精则以75%最好)、环境温度和环境中有机物浓度。 (一)通过分子碰撞原理，使病原体蛋白质变性、发生沉淀的消毒剂： 这类消毒剂的作用特点是杀菌、杀病毒无选择性，可损害一切生命物质，属于原浆毒，消毒过程中可破坏宿主组织，即对猪、鸡有毒性，会引起畜禽应激，会污染环境，破坏设备。此类消毒剂仅可用于空室、环境消毒，绝不能带鸡带猪消毒。如酚类、醛类、强酸强碱类等。 1.酚类消毒剂： 石炭酸、来苏儿、煤酚、苯酚、复合酚等具有臭药水味的一类消毒剂：这类消毒剂商品名最多，其中苯酚对芽胞、病毒无效，复合酚含41%～49%的酚和22%～26%的醋酸，是其中消毒效果最好的，此类消毒剂因其具有特别的药臭味，又具原浆毒，吸入皮肤有至癌性，常用于消毒池和排泄物的消毒，很少用于空室消毒，更不能带鸡带猪消毒。具体消毒时须先把环境冲洗的干干净净，浓度要达到0.5%～1%以上，温度不能低于8℃，消毒效果才好。禁止在碱性环境或同碱性溶液及其它消毒液混合使用。 2.碱类消毒剂： 烧碱、生石灰等，常用2%～3%烧碱加10%～20%石灰乳消毒及刷白畜禽场墙壁、屋顶、地面等，假如配制烧碱溶液时提高温度、加入食盐消毒效果更佳。用烧碱液消毒时应注意防护，消毒畜禽舍地面后6小时～12小时，应再用清水冲洗干净，以免引起畜禽肢蹄、趾足和皮肤损害。生石灰是价廉易得的消毒药，许多养殖场喜用干石灰粉进行消毒，这是错误的。石灰必须在有水份的情况下才会

醋酸菌在葡萄酒中的特性及其预防措施

醋酸菌在葡萄酒中的特性及其预防措施 在葡萄酒酿造过程中，不同种类微生物的代谢活动最终都会在葡萄酒的质量中反映出来。这些微生物主要包括酵母菌、霉菌、乳酸菌以及醋酸菌等。醋酸菌是指能够生成醋酸的一类细菌的统称。在生产过程中，能够分解酒精生成醋酸，使葡萄酒中的挥发酸含量升高从而败坏酒质。 生产中发现，醋酸菌在葡萄酒的贮藏过程中，能够在半厌氧和厌氧条件下生存，其危害也不单是生成醋酸，同时还能代谢葡萄酒中的碳水化合物，甘油、糖醇类物质和有机酸等其他成分。另外，葡萄浆果上生长的醋酸菌能够改变葡萄汁的组成，影响酒精发酵过程中酵母菌和苹果酸—乳酸发酵过程中乳酸菌的生长。因此，充分认识醋酸菌的微生物特征，影响醋酸菌生存和生长的葡萄酒环境及代谢规律等问题，对于预防葡萄酒醋酸菌病害具有十分重要的意义。 一、醋酸菌生态学 葡萄酒中的醋酸菌主要来源于葡萄浆果和酿造设备，这些醋酸菌包括醋酸杆菌（Acetobacter）的醋化醋杆菌（A.actei）、液化醋杆菌（A.Liquefaciens），汉逊氏醋杆菌（A.hansenii）和巴氏醋杆菌（A.pasteurianus）以及葡萄糖杆菌属（GLuconobacter）的氧化葡萄糖杆菌（G.oxydans）等种的细菌。 经研究表明，健康的、未被病害感染的葡萄浆果附着的醋酸菌的群体数量较少，大约为102个细胞/g，此时氧化葡萄糖杆菌为主体菌群。破损的、遭受病害尤其是灰霉病（Botrytis、cinerea）危害的葡萄浆果，醋酸菌的群体数量很大，约为106个细胞/g，此时醋化醋杆菌和巴氏醋杆菌为主体菌群。 在新鲜葡萄汁中，氧化葡萄糖杆菌占优势，而随着发酵的进行，醋酸杆菌尤其是液化醋杆菌和巴氏醋杆菌逐渐变为主导菌，这与它们优先利用的碳源有关，氧化葡萄糖杆菌优先利用糖作为碳源，而醋酸杆菌属优先利用酒精作为碳源，因而后者较前者耐酒精的能力高很多。 二、影响醋酸菌生存和生长的环境因素

工业微生物育种诱变剂

第一章工业微生物育种诱变剂 1物理诱变剂的总类：物理辐射分为电离辐射和非电离辐射。 包括紫外线、X射线、r射线。快中子。微波，超声波、电磁波、激光射线和宇宙线等。（X 射线、r射线属于电离辐射，紫外线属于非电离辐射） 2物理诱变剂对微生物的影响实质：由高能辐射导致生物系统损伤，继而发生遗传变异的一系列复杂的连锁反应过程。 3辐射作用的时相阶段： 物理阶段——直接作用DNA或作用于水 物理化学阶段——激发和电离DNA分子或激发电离水分子 化学阶段——产生生物自由基 生物学阶段——分子发生变化，变异或死亡 4细菌中紫外线对DNA的影响：促使G:C A:T的转换； DNA链断裂，单链或双链；嘧啶或嘌呤被氧化脱去氨基；碱基分子结构中碳与碳之间的链断裂形成开环现象；辐射击中单个核苷酸后，使碱基或磷酸酯游离出来；交联作用 5辐射引起的生物学效应的影响因素：微生物的遗传背景；微生物的生理状态；可见光；细胞水分；温度；空气或氧气。 6紫外线的诱变机理及原因？ 机理：(1)DNA与蛋白质交联(2)胞嘧啶与尿嘧啶之间的水合作用(3)DNA链断裂，形成嘧啶二聚体 原因：形成嘧啶二聚体 7DNA损伤修复中光修复与暗修复的主要机理？ 光修复：嘧啶二聚体被一种光激活酶结合形成复合物，这种复合物在可见光下由于光激活酶获得光能而发生解离，从而使二聚体重新分解成单体。 暗修复：嘧啶二聚体的5’端限制性内切酶和外切酶的作用下，造成单链断裂，接着在外切核酸酶的作用下，切除嘧啶二聚体。然后再DNA聚合酶Ⅰ、Ⅲ的作用下，并以另一条完整的单链做模板合成正确的碱基对序列，最后由连接酶完成双链结构。 8紫外线有效波长（诱变）范围是：200~300nm 9紫外线的剂量以什么计算？绝对剂量：erg/mm2；相对剂量：照射时间、杀菌率表示 10紫外线诱变的步骤方法（以及应用，包括如何计数、致死率的计算） 步骤：（1）出发菌株的选择将细菌斜面培养至对数期，霉菌或放线菌培养至孢子刚成熟（2）前培养培养基中可添加咖啡碱或异烟肼等抗修复物质。将菌体培养至最佳状态（对数期）。 （3）制备菌悬液离心去除培养基，用生理盐水制备菌悬液，要求菌体浓度108，107， 106 mL-1等 （4）紫外线照射紫外灯预热20min；避免光修复。 （5）后培养将照射完毕的菌悬液加入到适合于正突变体增殖的培养基中，在适宜温度下培养1.5-2h。 （6）稀释涂皿后培养结束后，从中取一定量培养物，经不同稀释，涂皿，并且以未经紫外线照射过的菌悬液做对照皿，培养后，挑取菌落，以待筛选。 11化学诱变剂的概念：一类能够对DNA起作用、引起遗传变异的化学物质。 12以5-BU为例，详述碱基类似物的诱变机理：（见书43页） 答：诱变作用是取代核酸分子中碱基的位置，再通过DNA的复制，引起突变，因此，也叫掺入诱变剂。 1）争产掺入错误复制

最常用的化学消毒剂及功能

最常用的化学消毒剂及功能 1、含氯消毒剂：是指溶于水产生具有杀微生物活性的次氯酸的消毒剂，其杀微生物有效成份常以有效氯表示。次氯酸分子量小，易扩散到细菌表面，并穿透细胞膜进入菌体内，使菌体蛋白氧化导致细菌死亡。含氯消毒剂可杀灭各种微生物，包括细菌繁殖体、病毒、真菌、结核杆菌和抗力最强的细菌芽胞。这类消毒剂包括：无机氯化合物，如次氯酸钠(10-12%) 、漂白粉(25%) 、漂粉精( 次氯酸钙为主,80-85%) 、氯化磷酸三钠(3-5%) ；有机氯化合物，如二氯异氰尿酸钠(60-64%)、三氯异氰尿酸(87-90%)、氯铵T(24%)等。无机氯性质不稳定,易受光、热和潮湿的影响, 丧失其有效成分，有机氯则相对稳定, 但是溶于水之后均不稳定。它们的杀微生物作用明显受使用浓度、作用时间的影响，一般说来，有效氯浓度越高、作用时间越长消毒效果越好。PH 越低消毒效果越好；温度越高杀微生物作用越强；但是当有机物( 如血液、唾液和排泄物) 存在时消毒效果可明显下降。此时应加大消毒剂使用浓度或延长作用时间。但是高浓度含氯消毒剂对人呼吸道黏膜和皮肤有明显刺激作用，对物品有腐蚀和漂白作用，大量使用还可污染环境。因此，使用时应详细阅读说明书，按不同微生物污染的物品选用适当浓度和作用时间，一般说来, 杀灭病毒可选用有效氯1000mg/L,作用30min。此类消毒剂常用于环境、物品表面、食具、饮用水、污水、排泄物、垃圾等消毒。 2、过氧化物类消毒剂：由于它们具有强氧化能力，各种微生物对其十分敏感，可将所有微生物杀灭。这类消毒剂包括过氧化氢(30-90%不等) 、过氧乙酸(18-20%) 、二氧化氯和臭氧等。它们的优点是消毒后在物品上不留残余毒性，但是，由于化学性质不稳定须现用现配，使用不方便，且因其氧化能力强，高浓度时可刺激、损害皮肤黏膜、腐蚀物品。其中过氧乙酸常用于被病毒污染物品或皮肤消毒，一般消毒物品时可用0.5%,消毒皮肤时可用0.2-0.4% 作用时间为3min。在无人环境中可用于空气消毒，用2%i氧乙酸喷雾(按8ml/m3 计算) ，或加热过氧乙酸( 按1g/m3 计算) ，作用1 小时后开窗通风。二氧化氯可用于物品表面消毒，浓度为500mg/L,作用 30min。臭氧也是一种强氧化剂，溶于水时杀菌作用更为明显，常用于水的消毒，饮用水消毒时加臭氧量为0.5-1.5mg/L ，水中余臭氧量0.1-0.5mg/L 维持10min 可达到消毒要求，在水质较差时，应加大臭氧加入量，3-6mg/L。