微生物学基础
微生物学讲义
第一章绪论
一、微生物与人类的关系
人类喝的酸奶、酒等发酵饮料，吃的面包、馒头甚至呼吸的新鲜空气都是微生物带来的恩
惠；而我们所遭受的感冒和其它传染病等病魔的折磨，则是有害微生物侵蚀了身体所致，但服用或注射抗生素类药物后恢复健康，又要感谢微生物，因为这类药物是微生物的“奉献”。
微生物是一把双刃剑：一方面给人类带来巨大的利益，如：许多微生物产品疫苗、维生
素、酶制剂、酒和抗生素等重要产品，物质循环中的重要组成成员以及以基因工程为代表的生
物技术也是微生物对人类做出的又一重大贡献；另一方面又“残忍”地给人类带来巨大灾难，
如：1347年的瘟疫（鼠疫耶森氏菌）几乎毁灭整个欧洲，今天的艾滋病（AIDS）、癌症、SARS 以及已被人类征服了的传染病（如肺结核、疟疾、霍乱等）也有“卷土重来”之势。随着环境
污染和破坏日益严重，一些以前从未有过的新疾病（如军团病、埃博拉病毒病、疯牛病和SARS 等）又给人类带来新的威胁。因此，你－未来的微生物学家或其他科学家任重而道远。正确地
利用微生物的两面性来造福人类是我们学习和应用微生物学的目的，也是义不容辞的责任。
1、什么是微生物？
微生物是一切肉眼所看不到的或者看不清楚的形体微小的单细胞或个体结构简单的多细胞
的甚至没有细胞结构的低等生物的总称。
2、微生物的特点：形体微小μm －mm 光镜下可见、大的肉眼可见（细胞型）
nm 电镜下可见（细胞器和非细胞型病毒）
单细胞
构造简单简单多细胞
非细胞型（分子生物）
原核类：细菌、放线菌、支原体、立克次氏体和蓝细菌等
进化地位低等真核类：真菌（酵母菌和霉菌）、原生动物和显微藻类
非细胞类：病毒、亚病毒（拟病毒、类病毒和朊病毒等）
二、微生物科学
1、研究对象及分类地位
研究对象：无细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒，具原核细胞结构的古生菌和真细
菌以及具真核细胞结构的真菌（酵母菌、霉菌和蕈xun菌）、单细胞藻类和原生动物等。
分类地位：由于微生物的极其多样性以及独特的生物学特征（个体小，比表面积大、吸
收多、转化快，生长旺盛、繁殖快，种类多、分布广，易变异、适应性强。），使其在整个生命科学中占有举足轻重的地位。无论是1969年魏塔克Whittaker提出的五界系统，还是1977年卡尔·伍斯Karl Woese（2003年格拉夫生物科学奖获得者）提出的三域系统，微生物都占据
很大比例（3/5和2/3）。
2、研究内容及分科
研究内容：微生物学是研究微生物在一定条件下的形态结构，生理生化，遗传变异以及微生物的进化、分类和生态等生命活动规律及其应用的一门学科。
分科：随着微生物学的不断发展，已形成了基础微生物学和应用微生物学两大学科，又可分为许多不同的分支学科，并还在不断地形成新的学科和研究领域。见p3图1－1
三、微生物学的发展
（一）史前期（1676年以前）
人们在显微镜出现以前并不知道微生物，只是无形中利用了微生物，也不知道这些过程中有微生物存在。如我国的制曲酿酒工业——先用霉菌制曲，再用酵母菌发酵；农业上的轮作制、积肥沤粪等；医学上人痘（鼻苗法种痘）预防天花、用麦曲治疗腹泻等。
（二）初创期（1676－1861）微生物的发现和形态学研究
列文虎克Leeuwenhoek 于1676年用自制的单式显微镜第一次发现并描述了微生物，随后
人们主要热衷于寻找和描述微生物的形态及分门别类，而没有研究其生理活动及与人类实践活动的关系。
（三）奠基期（1861－1897）微生物的生理活动研究
以法国的巴斯德Pasteur和德国的柯赫Koch为代表的科学家将微生物的研究推进到生理学
研究阶段，揭露了微生物是造成腐败发酵和人畜疾病的原因，并建立了分离、培养、接种和灭
菌等一系列独特的微生物技术，从而奠定了微生物学的基础，同时开辟了医学和工业微生物学等分支学科。
1、巴斯德主要贡献有三个方面
①提出了生命只能来源于生命的胚种学说，认为只有活的微生物才是传染病、发酵和腐
败的真正原因。用著名的曲颈瓶试验彻底否定了“自然发生”学说。
②奠定了免疫学的基础。1877年巴斯德研究了鸡霍乱，发现将病原菌减毒可诱发免疫性，以预防鸡霍乱。其后他又研究了牛、羊炭疽病和狂犬病，并首次职称狂犬病疫苗，证实其免疫
学说，为人类防病、治病作出了重大贡献。
③证实发酵是由微生物引起的。巴斯德经过不断努力，终于分离到了许多引起发酵的微
生物，并证实酒精发酵是由酵母菌引起的。此外，他还发现了乳酸发酵、醋酸发酵和丁酸发酵
都是由不同的细菌引起的，为进一步研究微生物的生理生化奠定了基础。
④其他方面：至今仍在沿用的巴斯德消毒法（60－65℃加热处理30ˊ，杀死有害微生物的一种消毒法），对蚕软化病提出隔离病原体防治传染、检查淘汰病蛾，逐渐消灭病害的理论。
2、柯赫主要贡献有两方面
⑴在微生物基本操作技术方面为微生物学的发展奠定了技术基础，主要包括①发明了明
胶、琼脂固体培养基平板分离培养技术，一直沿用至今；②创立了悬滴培养法、显微摄影技术
以及许多染色方法；③配置培养基。
⑵在病原菌研究方面①具体证实了炭疽病菌是炭疽病的病原菌；②发现了肺结核病的病原
菌（于1911年获诺贝尔奖）；提出了证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则－柯赫
法则：病原菌总是在患传染病的动物（生物）中存在，而不存在于健康个体中；这一微生物可
以离开动物体，并被培养为纯种培养物；这种纯种培养物接种到敏感的健康动物体后，应出现该微生物所引起的特有病症；该微生物可以从患病的试验动物中重新分离出来，并可在实验室中再次培养，且它仍应与原始病原微生物相同。
3、其他李斯特－消毒外科术，埃尔里赫、梅契尼科夫－免疫学，贝哲林克、维诺格拉德
斯基－土壤微生物学，伊万诺夫斯基－病毒学，埃尔里赫－化疗法。
（四）20世纪的微生物学
1941年以前微生物学家主要研究感染疾病因子、免疫、寻找新的化学治疗剂以及微生物代
谢等。直到40年代，许多生物学难以解决德理论和技术问题十分突出，特别是遗传学上的争
论问题，才使得微生物学与生物学很快结合起来，成为整个生命科学发展德前沿。
1、多学科交叉促进了微生物学的全面发展
1941年的突变实验比德尔和塔特姆用粗糙脉胞菌分离出一系列生化突变株，将遗传学和生
物化学紧密结合起来，不仅促进了微生物学的发展，形成了微生物遗传学和生理学，而且也推
动了分子遗传学的形成；与此同时，微生物的其它分支学科也得到了迅速发展。还有60年代发展起微生物生态学、环境微生物学等；50年代微生物学全面进入分子研究水平，与发展起
的分子生物学理论和技术以及其他学科汇合，使其发展成为生命科学领域内的一门前沿科学。
2、促进许多重大理论问题的突破
1941年的突变实验，提出了“一个基因一个酶”的假说；1943年鲁里亚、德尔波留克的涂布试验证明了突变的性质和来源（自发性）；长期争论而未能解决的“遗传的物质基础是什么？”的重大理论问题，也是以微生物为实验材料进行研究获得的结果证实：核酸是遗传的物质基础；DNA双螺旋结构的提出，基因的概念，基因组的测序，操从子学说，“中心法则”等理论的提出都与微生物学的研究息息相关。另外，源于微生物转化的理论和技术的转基因动植物的转化
技术、DNA重组技术、遗传工程，使人类定向改变生物、根治疾病、美化环境的梦想成为现实。
总之，20世纪的微生物学一方面在与其他学科的交叉和相互促进中获得迅猛发展，另一方
面也为整个生命科学的发展作出了巨大贡献。
3、我国微生物学的发展
我国具有5000多年文明史的古国，是认识和利用微生物最早的国家之一。特别是在制酒、
酱油和醋等微生物产品以及种痘等方面。但是微生物作为一门科学进行研究却比较落后。从本世纪初由一批从西方留学的科学家开始进行比较系统地研究。主要有伍连德－对鼠疫和霍乱病原等进行研究，并建立卫生防疫机构；汤飞凡及其助手张晓楼－医学细菌学、病毒学和免疫学，尤其是在世界上首次分离和确证了沙眼病原体；谢少文则第一次分离出立克次氏体；戴芳澜和俞大绂是我国真菌学和植物病理学的奠基人；陈华癸和张宪武开创了我国的农业微生物学；高尚荫创建了我国的病毒学和第一个微生物学专业。
五、21世纪微生物学展望
1、微生物基因组学研究将全面展开主要集中在基因组的序列分析、功能分析和比较分析，从本质上认识微生物自身以及利用和改造微生物，并带动分子微生物学等基础研究学科的发
展。
2、以了解微生物之间、微生物与其他生物、微生物与环境的相互作用为研究对象的微生物
生态学、环境微生物学和细胞微生物学等，将在基因组信息的基础上获得长足进步，为人类的生存和健康发挥重要作用。
3、与其他学科将更加广泛的交叉，相互促进发展。微生物基因组学是数、理、化、信息和
计算机等多种学科交叉的结果；随着人类认识的加深和需求，将进一步向地质、海洋、大气和
太空渗透，是更多的边缘学科得到发展。微生物学的研究技术和方法也将会在吸收其他学科的
先进技术的基础上，向自动化、定向化和定量化发展。在21世纪微生物产业除了更广泛地利用和挖掘不同生境（尤其是极端环境）的自然资源微生物外，基因工程菌将形成一批强大的工业生产菌，生产外源基因表达的产物，特别是药物的生产将出现前所未有的新局面，人类将完全征服癌症、艾滋病以及其他疾病，为人类做出更大的贡献。
思考题
1．什么是微生物？微生物学的研究内容是什么？
2．微生物学发展过程中的几位重要科学家及其贡献有哪些？
3．病原菌学说的提出和证实都有哪些人？
4．微生物有那些特点？
第二章微生物细胞的结构与功能
第一节原核微生物的细胞结构
原核微生物是指细胞核无核膜包围，只有核区的裸露DNA的原始单细胞微生物，包括古生菌和真细菌两大类群。
真细菌的细胞膜含由酯键连接的脂类，细胞壁中含特有的肽聚糖，DNA中一般没有内含子（近年来也有例外的发现）。包括细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体和衣原体等。一、真细菌细胞的构造
细菌细胞是原核细胞，就是在细胞中没有细胞核结构。只有明显核区（拟核），外面无核膜包围。与有真正细胞核的真核细胞相比，其它结构成分也有差异，如原核细胞壁的主要成分是一类含有氨基酸的多糖，称为肽聚糖，而真核细胞壁主要由纤维素或甲壳质组成。
细菌细胞的基本结构是一般细菌共有的结构，包括细胞壁、细胞质膜、拟核、细胞质。
1、细胞壁：是位于细胞最外面的一层坚韧而略具弹性的结构层，主要由肽聚糖构成，有固定
外形和保护细胞等多种功能。用一种称为革兰氏染色的方法，可将细菌分为革兰氏阳性菌（G ＋
菌）和革兰氏阴性菌（G－菌）两大类。
真细菌的细胞膜含由酯键连接的脂类，细胞壁中含有特有的肽聚糖，DNA中一般没有内含子（近年也有例外发现）；古生菌的细胞壁无肽聚糖，由多糖、糖蛋白或蛋白质构成，且多
含有酸或酸性氨基酸、多糖细胞壁。
证明细胞壁存在的方法：质壁分离技术（蔗糖溶液），姬姆萨染色（壁绿色，质红色），制成原生质体，电子显微镜观察。
革兰氏阳性菌细胞壁：化学组分简单，只由90％的肽聚糖和10％磷壁酸
肽聚糖：分子由肽和聚糖两部分组成，肽有四肽尾（按L型和D型交替连接而成）和肽桥，聚糖则由N－乙酰葡萄糖胺（NAG）和N－乙酰胞壁酸（NAM）相互间隔通过β－1、4－糖苷键（溶菌酶水解）连接而成，呈长链骨架结构。
磷壁酸：主要为甘油磷壁酸或核糖醇磷壁酸。分为壁磷酸和膜磷酸。
壁磷酸与肽聚糖上的NAG共价连接，可用稀酸或稀碱提取；膜磷酸是甘油磷酸与膜上的
磷脂共价结合，用45％的热酚或热水提取。
主要生理功能：由于含有较多的负电荷而吸收Mg2＋，而提高一些合成酶的活性；储藏磷元素；增强某些致病菌对宿主细胞的粘连，避免被白细胞吞噬以及抗补体的作用；赋予G＋菌以特异表面抗原；可为噬菌体的吸附位点。
革兰氏阴性菌的细胞壁
肽聚糖：1－2层为薄层，四肽尾的第三个氨基酸为内消旋的二氨基庚二酸（m－DAP），无肽桥，单体之间仅通过肽尾直接相连，故松散、机械强度较差。
外膜：位于细胞壁外层，由脂多糖、磷脂和脂蛋白等组成。脂多糖由类脂A、核心多糖和O －特异侧链三部分组成。其中类脂A是G－菌的致病物质－内毒素的物质基础；O－特异侧链种类极多，决定其表面抗原决定簇的多样性。
外膜蛋白：是镶嵌在LPS和磷脂层外膜上的蛋白。有两种孔蛋白，限制或控制某些物质进
入细胞，一种脂蛋白将外膜与肽聚糖内壁层上的蛋白牢固连接。
缺壁细菌：在自然界长期进化和实验室菌种的自发突变中发生细胞壁缺陷的细菌或者在实验
室用人为的方法获得的缺壁细菌。
缺壁突变－L型细菌
实验室或宿主体内形成基本去尽－原生质体（G ＋）
缺壁细菌人工去壁
部分去掉－球状体（G－）
在自然界长期进化中形成－支原体（细胞膜中含有甾醇）
革兰氏染色的机制：革兰氏发明，萨顿提出，彼弗里奇证明。结晶紫和碘在细胞膜内形
成水不溶的复合物，G＋菌的细胞壁较厚，肽聚糖网层次多和交联紧密，故乙醇脱色时，因失
水反而网孔缩小，因此该复合物留在壁内，使其仍呈紫褐色；反之G－菌则正相反，且由于其外膜的类脂迅速溶解，使薄而松散的肽聚糖层网孔变大，结晶紫碘复合物溶出而无色，故被染成复染的颜色红色。
2、细胞质膜：是紧贴在细胞壁内侧，包围细胞质的一层柔软、脆弱且富有弹性的半透性薄膜，
是重要的代谢活动中心，对于细菌的呼吸、能量的产生、运动、生物合成、内外物质的交换运
送等均有重要的作用。由磷脂和蛋白质组成。
3、拟核：位于细胞质内，是一种没有核膜、没有核仁、没有固定形态、结构也较简单的原始
形态的核，其实质是一个大型环状的双链DNA分子，是负载细菌遗传信息的物质基础。
4、细胞质：是由细胞质膜包围着的，除拟核以外一切透明、胶状、颗粒状物质的总称。具有
维持细胞内环境平衡等多种功能，分散于细胞质中的核糖体颗粒是蛋白质合成的场所。
内含物主要有PHB聚β－羟丁酸、磁小体和羧化酶。PHB存在于许多细菌细胞质内属于
类脂性质的碳源类贮藏物，不溶于水，可溶于氯仿，用尼罗兰或苏丹黑染色，具有贮藏能量、
碳源和降低细胞渗透压的作用。由于其具有无毒、可塑和易降解的特性，故被认为是生产医用塑料、生物降解塑料的良好原料。
磁小体：趋磁细菌中含有的大小均匀、数目不等的磁小体，其成分为Fe3O4，外有一层膜包裹，是单磁畴晶体，无毒、大小均匀。功能是导向作用，即借鞭毛游向该菌最有利的环境处生
活。目前认为该菌有实用前景，可生产磁性定向药物或抗体，以及制造生物传感器等。
细菌细胞的特殊结构包括鞭毛、菌毛、荚膜、芽孢等，是某些细菌在某生长阶段具有的结
构。
1、鞭毛：是某些细菌表面着生的一至数根由细胞内伸出的细长、波曲的丝状体，具有运动的
功能。鞭毛在菌体上的着生位置、数目因种而异。
2、菌毛（又名纤毛）：是在细菌体表的比鞭毛更细、更短、直硬，且数量较多（250～300根）的丝状体，与细菌吸附或性结合有关。
3、荚膜：是某些细菌向细胞壁表面分泌的一层厚度不定的胶状物质，它犹如穿在菌体表面的
一件外套，用显微镜观察，中心部位是细菌菌体，在暗色背景下荚膜呈透明状环绕菌体，具有抗干燥，抗吞噬和附着作用。
4、芽孢：是某些细菌于生长后期，在细胞内形成的一个圆形、椭圆形或圆柱形、厚壁、含水
量极低和具有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压等特性的休眠体，，称为内生孢子，亦称芽孢。堪称生命世界之最，所以有些细菌在环境条件不利于生长繁殖时便会形成芽孢。能产生芽孢的多为杆菌，产芽孢母细胞的外壳称芽孢囊。芽孢在菌体内的位置、形状、大小因种
而异，有中央位、端位、近端位等。在有些细菌中，芽孢的直径小于菌体直径，这些细菌称为
芽孢杆菌，为好氧细菌；在另一些细菌中，芽孢的直径大于菌体直径，使整个菌体呈梭形或鼓
塑形，这些细菌称为梭状芽孢杆菌，为厌氧菌。在球菌和螺菌中，只有少数种类有芽孢。
芽孢形成和结构
芽孢的形成是一个极其复杂的过程，包括形态结构、化学成分等多方面的变化。
光学显微镜和电子显微镜观察研究的结果，表明芽孢的形成在结构上主要经历以下几个阶
段：①核物质融合成轴丝状（杆状）。②在细胞中央或一端，细胞膜内陷形成隔膜包围核物质，
产生一个小细胞。③小细胞被原来的细胞膜包围，生成前孢子。前孢子实质上是一个被两层同
心膜包围着的原生质体，抗辐射。④前孢子再向外分泌芽孢肽聚糖、DPA（吡啶二羧酸），积累钙离子，再经脱水，形成皮层、芽孢衣等多层膜，最后成为成熟的芽孢，由于细胞壁的溃溶
而释放出来。
芽泡形成过程中在化学成分方面也发生很大变化。生芽孢的细胞大量吸收钙离子并大量合
成营养细胞中没有的吡啶二羧酸。在成熟的芽孢中，芽孢原生质体含有极高的吡啶二羧酸钙
DPA-Ca，在新合成的、具有特殊化学构造的外层（皮层和孢子衣，有时还有芽孢外壁）中也
有这种物质。芽孢的壁含有一种特殊的肽聚糖－芽孢肽聚糖。同时，芽孢中还含有一些特殊的
蛋白质。
芽孢的萌发：刚形成的芽孢总是处于休眠状态。热处理（如65℃放置几十分钟）可以使芽孢加速活化。芽孢萌发时首先发生吸胀作用，随之折光性和抗性丧失，继而呼吸作用开始，显
出代谢活性，芽孢物质（干重）的30％变为可溶物释出，营养细胞壁迅速合成，最后，新形
成的营养细胞从孢子衣里萌发出来。萌发通常有三种方式：赤道脱出，末端脱出，斜出。
芽孢耐热机制：渗透调节皮层膨胀学说认为芽孢的耐热性在于芽孢衣对多价阳离子和水分
的透性很差，皮层由于含有大量交联度低、负电荷强的芽孢肽聚糖，其与低价的阳离子一起使
皮层的离子强度很高，从而使皮层产生极高的渗透压去夺取芽孢核心的水份，其结果造成皮层的充分膨胀，而有生命的核心部分的细胞质却变得高度失水，因此，具极强的耐热性。
伴孢晶体：少数芽孢杆菌如苏云金芽孢杆菌在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形
或双锥形的碱溶性蛋白质晶体－（δ）内毒素，称为伴孢晶体。对200多种昆虫尤其是鳞翅目昆虫的幼虫有毒杀作用，蛋白质晶体的毒性是有高度专性的，对其他动物与植物完全没有毒性，故是一种理想的有利于环保的生物农药。
研究芽孢的意义：1．分类鉴定不同细菌的芽孢具有不同的特点，从形状、大小、表面特征，直到与菌体的关系等都有不同的表现，因此可以作为分类鉴定的依据或参考。2．科研材料由于芽孢独特的产生方式，成为研究形态发生和遗传控制的好材料。3．保存菌种芽孢对不良环境有很强的抵抗力，可以保持生命力达数十年之久，在自然界使细菌度过恶劣的环境，
在实验室是保存菌种的好材料。4．分离菌种芽孢的耐热性有助于芽孢细菌的分离。将含菌悬浮液进行热处理，杀死所有营养细胞，可以筛选出形成芽孢的细菌种类。5．生物杀虫。这种杀虫剂的生产，并不需将蛋白质分离出来，只需培养大量细菌，在其形成芽孢并产生晶体时收获、干燥，做成粉剂即可
第二节真核微生物的细胞结构
细胞核具有核膜，能进行有丝分裂、细胞质中存在线粒体等细胞器的生物。
真核微生物包括真菌、显微藻类、原生动物以及地衣等。
一、细胞壁（真菌和藻类）：主要成分是多糖（葡聚糖、甘露聚糖、纤维素、几丁质等），另有少量的蛋白质和脂类。
1、酵母菌的细胞壁：甘露聚糖、蛋白质、葡聚糖、几丁质和少量的脂质。葡聚糖有两类β－1、3和β－1、6葡聚糖，位于细胞壁内层，起维持酵母细胞的机械强度作用。
2、丝状真菌的细胞壁：由外到内依次为葡聚糖、糖蛋白、纤维素和几丁质。
3、藻类的细胞壁：纤维素、杂多糖及少量的蛋白质和脂类。
除壁的方式为蜗牛酶水解或葡聚糖酶、甘露聚糖酶、纤维素酶和几丁质酶等混合酶水解。
二、鞭毛和纤毛
与原核微生物鞭毛的区别主要是鞭杆为：“9＋2”结构，基体为“9＋0”结构。运动方式为弯曲运动。
三、细胞器
1、核糖体：又称核蛋白体，是存在于一切细胞中的无膜包裹的颗粒状细胞器，具有合成蛋白
质的功能，主要成分由表到内是蛋白质（40％）和RNA（60％），共价结合形成。真核生物内
质网和细胞基质中的核糖体为80S，其它细胞器如线粒体、叶绿体中的为70S。
2、线粒体：是一种进行氧化磷酸化反应的重要细胞器，其功能是把蕴藏在有机物中的化学潜
能转化为生命活动所需的通用能源ATP，故为真核生物的“动力车间”。由双层膜包裹而成，内膜上有嵴、基粒和四种脂蛋白复合体，嵴增大进行化学反应的面积；基粒或F1颗粒为ATP 合成酶复合体，四种脂蛋白是电子传递链（呼吸链）的组成部分。
3、叶绿体：将光能转化为化学能，并通过光合作用将CO2和H2O合成葡萄糖等碳水化合物，
放出O2的绿色颗粒状细胞器。
课后思考题
1.那些特征可用于区别真核生物与原核生物？
2.什么是缺壁细菌？试述其各自的特点和意义。
3.用渗透调节皮层膨胀学说解释芽孢的耐热机制。
4.简述线粒体和叶绿体的主要特征及功能。
第三章微生物的营养
微生物的营养主要是研究和阐明营养物质在微生物生命活动过程中的生理功能，以及微生
物细胞从外界环境摄取营养物质的机制。
营养物质和营养：那些能够满足微生物机体生长、繁殖和完成各种生理活动所需的物质称
为营养物质。微生物获得和利用营养物质的过程称为营养。
第一节微生物的营养要求
一、微生物细胞的化学组成
1．化学元素：C、H、O、N、P、S、K、Mg、Ca、Fe等为主要元素
Zn、Mn、Na、Cl、Mo、Se、Co、Cu、W、Ni、B等为微量元素。
组成微生物细胞的各类化学元素的比例因微生物的种类不同而异；也随菌龄及营养条件的不同而发生变化。
2．化学成分及其分析
对细胞有机物成分的分析常采用两种方式：一是用化学方法直接抽提细胞内的各种有机物
成分，再加以定性和定量分析；另一种是先将细胞破碎，获得不同的亚显微结构，再分析这些
结构的化学成分。
对细胞无机物成分的分析则将干细胞在高温炉（如马沸炉）中焚烧成灰，再采用无机化学
常规分析法可定性定量分析出灰分中的各种无机元素含量。
灰分：干细胞于高温炉（550℃）中焚烧后而剩下的各种无机元素的氧化物的总称（混合物）。
水：是一切细胞维持正常生命活动所必不可少的，一般占细胞重量的70％－90％。（湿重－干重）/湿重×100％
二、营养物质及其生理功能
根据营养物质在有机体中的生理功能不同，可将其分为碳源、氮源、无机盐、生长因子
和水五大类。
1．碳源：在微生物生长过程中为微生物提供碳素来源的物质。在细胞中经一系列复杂的
生物化学反应后变为微生物自身的细胞物质和代谢产物。其中化能异养菌还能产生生物能。
微生物利用碳源物质具有选择性，其顺序依次为：糖类[单糖（己糖﹥戊糖）﹥双糖﹥淀
粉﹥纤维素、纯多糖﹥杂多糖] ﹥有机酸﹥醇﹥脂﹥烃﹥HCO3-、CO2(自养菌) ﹥蛋白质、核酸等。
2．氮源：在微生物生长过程中为微生物提供氮素来源的物质。一般不作为能源，只有消
化细菌和少数厌氧菌在厌氧条件下利用氨基酸作为营养物质。
常用的蛋白质类：蛋白胨、鱼粉、蚕蛹粉、黄豆饼粉、花生饼粉、玉米浆、牛肉膏、酵
母膏等。
微生物对氮源的利用也具有选择性，对主要以氨基酸和肽等较易吸收的蛋白质降解产物
和NH3+、NO3-形式存在的氮源的利用速度快，称为速效氮源；对主要以大分子蛋白质形式存
在，需进一步降解成小分子的氨基酸和肽后才能利用吸收的氮源称为迟缓氮源。即速效氮源有利于菌体生长，后者有利于代谢产物的形成。在发酵生产中常利用微生物的这一特性，将两者
按一定比例制成混合氮源，以控制菌体生长时期与代谢产物形成时期的协调，达到提高产量降低成本的目的。酶的活性中心组成部分
3．无机盐：维持生物大分子和细胞结构的稳定性
在机体的生理功能调节并维持细胞的渗透压平衡、控制氧化还原电位
作为某些化能自养菌生长的能源物质
微量元素对微生物生长是必需的，若缺乏则会导致细胞生理活性降低甚至停止生长；若
过量则对机体产生毒害作用，而且单独一种过量毒害更大，因此配制培养基时要控制其在正常的范围内，并注意各种微量元素之间的比例协调。通常情况下没有必要向培养基中添加微量元素。
4．生长因子：指那些微生物生长所必需而且需要量很少，但微生物自身又不能合成或合
成量不足以满足机体生长需要的有机化合物。
根据生长因子的化学结构和它们在机体中的生理功能不同，将其分为维生素、氨基酸与
碱基（嘌呤和嘧啶）三大类。
5．水：生理功能主要有：①起到溶剂与运输介质的作用，营养物质的吸收与代谢产物的
分泌必须以水为介质才能完成；②参与细胞内一系列化学反应；③维持蛋白质、核酸等生物大分子稳定的天然构象；④因为水的比热高，是热的良导体，能有效地吸收代谢反应产生的能量并及时散发出体外，从而有效控制细胞温度；⑤通过水合作用和脱水作用控制由多亚基组成的结构，如酶、鞭毛等。
水活度：指在一定的温度和压力条件下，溶液的蒸汽压力与同样条件下的纯水蒸气压力
之比，即a w＝P W/P W0。
三、微生物的营养类型
微生物种类繁多，其营养类型比较复杂，依据不同，划分结果亦不同。
根据碳源、能源及电子供体性质的不同，将绝大多数微生物分为：
表3－1 微生物的营养类型
营养类型能源碳源电子供体例子
光能无机自养型光能CO2和HCO3-为唯
一碳源
还原性无机物
如水、H2S、H2
等
着色细菌、蓝
细菌
光能有机异养型光能有机物有机物红螺细菌
化能无机自养型化学能－无机物
氧化
CO2和HCO3-为唯
一或主要碳源
还原性无机物
如H2S、Fe2+、
NO2-、NH3等
氢、铁、硫细
菌和消化细菌
等
化能有机异养型化学能－有机物
氧化
有机物
有机物多为中
间代谢物
绝大多数细
菌、所有真菌
其中化能有机异养型又分为腐生型和寄生型等，而且该类型也能固定CO2，总之不同类型之间的界限不是绝对的，有的类型在不同条件下会发生改变，如紫色非硫细菌在没有有机物时同化CO2，表现为自养型，反之则为异养型；在有光照和厌氧条件下表现为光能营养型，无
光和好氧条件下，又为化能营养型。
营养缺陷型：某些菌株由于发生基因突变而丧失合成某种或某些对该菌生长比不可少的物
质（通常是生长因子）的能力，必须从外界环境获得该物质才能生长繁殖，这种突变型菌株称
为营养缺陷型。
第二节培养基
培养基是指人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。
一、配制培养基的原则
1．选择适宜的营养基质：首先要依据微生物的营养要求配制针对性强的培养基。由于微
生物营养类型复杂，不同微生物对营养物质的需求不一样，同一种微生物在不同的营养条件下会产生不同的代谢产物。
如：①培养自养型微生物的培养基，由简单的无机物组成，不需要有机物；②培养光能
微生物则还需要光照提供能源；③培养化能自养型的微生物，培养基中还要添加该菌所需的提供能源的无机化合物；④谷氨酸发酵生产中，培养菌种的培养基与发酵培养基的营养成分就有很大差异。
表3－2几种类型的培养基组成
成分
氧化硫硫
杆菌培养基
大肠杆菌
培养基
牛肉膏蛋
白胨培养基
高氏I号
合成培养基
查氏合成
培养基
LB
培养基
主要作用
牛肉膏 5 碳源（能源）、氮源、无机盐、生长因子
蛋白胨10 10 碳源（能源）、氮源、
生长因子
酵母浸膏 5 氮源、生长因子葡萄糖 5 碳源（能源）蔗糖30 碳源（能源）可溶性淀粉20 碳源（能源）CO2 来自空气碳源
(NH4)SO4 0．4 氮源、无机盐NH4H2PO4 1 氮源、无机盐、缓冲剂KNO3 1 氮源、无机盐NaN03 3 氮源、无机盐MgSO4?7H2O 0．5 0.2 0.5 0.5 无机盐FeSO4 0．01 0.01 0.01 无机盐
KH2PO4 4 无机盐、缓冲剂K2HPO4 1 0.5 1 无机盐、缓冲剂NaCl 5 5 0.5 10 无机盐
KCl 无机盐CaCl2 0．25 无机盐
S 10 能源
H2O 1000ml 溶剂
PH 7．0 7.0～7.2 7.0～7.2 7.2～7.4 自然7．0
灭菌条件121℃20min 112℃
30min
121℃20min 121℃20min
121℃
20min
121℃
20min
2.营养物质浓度及配比合适：培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好，营养物
质浓度过低不能满足微生物正常生长需求，浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用。培养基中各种营养物质之间的浓度配比（尤其是C/N）也能直接影响微生物的生长繁殖或产物的形
成和积累。
例如：①谷氨酸发酵过程中 C/N为1/4时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少；为1/3时，菌体繁殖受抑制，谷氨酸产量大量增加。
②抗生素发酵生产过程中，则通过控制速效氮（或碳）源与迟效效氮（或碳）源之间的比
例来控制菌体生长与抗生素的合成协调。
3．控制pH条件：培养基的pH值必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生
长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的最适pH条件各不同：一般来说，真细菌生长的pH在7.0～7.5，真菌生长在 4.5～6.0或者是自然pH。在微生物生长繁殖和代谢过程中，由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累，会导致培养基pH发生变化，所以通常在培养基中加入缓冲剂。缓冲剂组成的缓冲系统只能在一定的范围内起调节作用，
故对产酸量很大的菌，其培养基中则需要加CaCO3等来调节。
4．控制氧化还原电位（Ф）：不同类型的微生物生长对Ф的要求不一样，一般好氧菌的Ф在＋0.1以上，通常在＋0.3～＋0.4V为宜；厌氧菌只能在Ф低于＋0.1V的条件下生长；兼性微生物一般在Ф为＋0.1以上时为好氧，以下时发酵。由于Ф值与pH有关，所以也受代谢产物的影响。
5．原料来源的选择：应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基的成分，以利于降低
成本，提高经济效益。
6．灭菌处理：要获得纯培养，就必须避免杂菌污染，对培养基一般采用高压蒸汽灭菌，
以彻底杀灭培养基中的杂菌。一般用 1.05kg/cm2(121.3℃)持续灭20min或者0.56kg/cm2(112.6℃)下维持30min。某些含有特殊成分如血清等则需过滤除菌或间歇灭菌，有些由于一起灭菌会产生沉淀或分解，则需分别灭菌后在混合或者加鳌合剂如乙二胺四乙酸（EDTA）等。
二、培养基的类型及应用
培养基之类繁多，根据其成分、物理状态和用途可将其分为多种类型。
1．按成分不同划分
（1）天然培养基：含有的化学成分还不清楚或不恒定的天然有机物，成本较低，亦称为
非化学限定培养基。如牛肉膏蛋白胨培养基、LB培养基、豆芽汁培养基和马铃薯培养基等。
（2）合成培养基：由化学成分完全了解的物质配制而成的培养基。成本较高，重复性好，
常用来进行微生物的营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的
研究。如高氏1号合成培养基、查氏合成培养基
（3）半合成培养基。
2．根据物理状态划分依据凝固剂的有无和含量多少。
（1）液体培养基：培养基中不加任何凝固剂。通过搅拌或振荡可以增加培养基的通气量，
同时使营养物质分布均匀，故常用于大规模工业生产以及在实验室进行微生物的基础理论和应
用研究。
（2）固体培养基：在液体培养基中加入一定量的凝固剂（琼脂、明胶或硅胶），使其成为固体培养基。主要用于进行微生物的分离纯化、分类鉴定、活菌计数以及菌种保藏等。
理想的凝固剂应具备的条件：①不被所培养的微生物分解利用；②在所培养的微生物生长
温度范围内保持固体状态，即凝固剂的凝固点温度不能太低和量不能太少；③凝固剂对所培养的微生物无毒害作用；④凝固剂在灭菌过程中不会被破坏；⑤透明度好，粘着力强；⑥配制方
便且价格便宜。
天然固体培养基－天然固体基质制成的培养基。如酒曲、棉子壳培养基等。
（3）半固体培养基：其凝固剂的含量比较少，一般琼脂含量为0.2～0.7%。主要用作观察微生物的运动特征、分类鉴定及效价测定等。
3．按用途划分
（1）基础培养基：含一般微生物生长繁殖所需的基本营养基质。如LB培养基、牛肉膏蛋白胨培养基等。
（2）加富培养基：在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基。如：血清、血液、动物组织液、牛奶等，为半合成培养基。主要用来对营养要求苛刻的异养微
生物进行富集培养和分离。
（3）选择培养基：用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。
即根据不同种类微生物的特殊营养要求或对某种化学物质敏感性不同，在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长，从而达到分离所需微生物的目的。
（4）鉴别培养基：在培养基中加入某种能与某种微生物在培养基中生长后产生的某种代
谢产物发生明显特征反应的特殊化学物质，达到分离鉴别和筛选该种微生物目的的培养基。
（5）其他培养基：分析培养基、还原性培养基、组织培养物培养基等。
第三节营养物质进入细胞（运输方式）
营养物质能否被微生物利用的关键是这些营养物质能否进入微生物细胞。影响营养物质进
入细胞的因素主要有三个：
一是营养物质本身的性质即相对分子量的大小、溶解性、电负性和极性等。
二是微生物所处的环境。如温度。PH、离子强度、诱导物质、抑制剂和解偶联剂等。温度
通过影响营养物质的溶解度、细胞膜的流动性及运输系统的活性来影响微生物的吸收能力；pH 和离子强度通过影响营养物质的电离程度来影响其进入细胞的能力；诱导物质通过诱导运输系统形成而有利于微生物吸收营养物质；抑制剂和解偶联剂等通过与原生质膜上的物质发生作用
而影响物质的运输速率。
三是微生物细胞的透过屏障。主要由原生质膜、细胞壁、荚膜及粘液层等组成的结构。尤
其是原生质膜对跨膜运输的物质具有选择性，这是本节的重点，根据运输物质的特点，将运输方式分为扩散、促进扩散、主动运输和膜泡运输。
一、扩散
营养物质通过原生质膜上的含水小孔，由胞内外高浓度的环境向低浓度的环境进行非特异
性的扩散。孔的大小和形状对扩散的营养物质有选择性。物质在扩散过程中，既不与膜上的各类分子发生反应，自身分子结构也不发生变化，是一种纯粹的物理学过程，不消耗能量，动力
来自物质在膜内外的浓度差，直到达到动态平衡。运输的物质主要是水和相对分子量小、脂溶性和极性小的物质（如脂肪酸、乙醇、甘油和某些氨基酸等）。
二、促进扩散
与扩散的区别是：被运输的物质需要借助载体的作用（胞内外的亲和力不同）才能进入细
胞，具有较高的专一性。不消耗能量，载体与被运输物质在这个过程中都不发生化学变化，载
体蛋白为透过酶，大多是诱导酶。运输的物质主要有氨基酸、单糖、维生素及无机盐。
三、主动运输
是微生物的主要运输方式，与前两者相比，其重要特点是在物质运输过程中需要消耗能量，且可以进行逆浓度运输，需要载体蛋白。具体的方式有初级主动运输、次级主动运输、基团移
位、Na＋、K＋—ATP酶系统及ATP偶联主动运输等。
1．初级主动运输：由电子传递系统、ATP酶或细菌嗜紫红质引起的质子运输方式。主要
由于原核微生物是在细胞膜上产能，从而在膜内外形成质子浓度差，使膜处于冲能状态即形成能化膜。
2．次级主动运输：通过初级主动运输建立的能化膜在质子浓度差消失的过程中，往往偶
联其它物质的运输。
3．基团移位：经过一个复杂的运输系统—磷酸转移酶系统（PTS）来完成物质的运输，物质和酶在运输过程中发生化学变化。即被运输的物质在进入细胞内的过程中被磷酸化。
4．Na＋、K＋—ATP酶系统：亦称Na＋，K＋泵系统。该酶利用ATP的能量将Na＋由细胞内泵到胞外，并将K＋泵如胞内，从而使胞内的Na＋浓度低，K＋浓度高，而且不受环境中Na＋、K＋浓度高低的影响。
5．膜泡运输：主要存在于原生动物尤其是变形虫中的一种运输方式。分为胞饮和胞吞作
用两种。
练习题
1．培养基、碳源、氮源、生长因子、选择培养基、加富培养基等名词解释。
2．课后P95的1、3、4题。
第四章微生物的代谢
第一节代谢概论
代谢：指发生在有机体中的各种化学反应的总称，是一切生命有机体的基本特征，主要由
分解代谢和合成代谢（同化和异化作用）两个过程组成。
1．分解代谢：指细胞将复杂的大分子有机物通过酶系的催化，分解为简单的小分子物质
并释放能量ATP和还原力[H]的生化反应。
2．合成代谢：指活细胞利用简单的小分子物质合成复杂大分子，并同时消耗能量和还原
力的生化反应。
3．合成代谢与分解代谢的关系：复杂大分子?简单小分子＋ATP＋[H]
前者是后者的基础，为其提供酶等，后者又为前者提供原料、能量及还原力，两者相互偶
联，共同决定着生命的存在和发展。
4．根据代谢过程中产生的代谢产物在生命中的作用不同，代谢又被分成初级代谢与次级
代谢两种类型。
初级代谢：能使营养物质转变为有机体的结构物质或对机体具有生理活性作用的物质，或
为机体生长提供能量的一类代谢类型。
次级代谢：存在于植物和微生物中并在他们一定生长时期内出现的一类代谢类型。次级代
谢产物有抗生素、生长刺激素、生物碱、色素等。
第二节微生物产能代谢
能量代谢：生物体把外界环境中的各种形式的最初能源转换成对一切生命活动都能使用的
通用能源ATP的过程。
日光光能营养菌
最初能源有机物化能异养菌通用能源ATP
还原态无机物化能自养菌
生物氧化：指发生在生物体内的一系列产能性氧化反应的总称。
一、化能异养菌的生物氧化和产能
异养微生物生物氧化有机物的方式，根据氧化还原反应中电子受体的不同可分为发酵和呼
吸两种类型，而呼吸又分为有氧呼吸和无氧呼吸两种方式。
1．底物脱氢的四条主要途径
以单糖作为典型的生物氧化底物，可通过EMP、HMP、ED和磷酸解酮酶途径（PK和HK 途径）四条途径将单糖降解为丙酮酸，同时产生其它小分子中间代谢物、能量和还原力，该过
程称为糖酵解。
（1）EMP途径（2）HMP途径（生化已讲过不在阐述）该处需掌握各途径的关键酶（特征性酶）、生理学意义及底物水平磷酸化的定义。
（3）ED途径：是细菌特有的，可单独存在的从葡萄糖氧化产生丙酮酸的另一条途径。
ATP ADP NADP＋NADPH
葡萄糖葡萄糖－6－磷酸葡萄糖酸－6－磷酸
丙酮酸
2－酮－3脱氧－葡萄糖酸－6－磷酸（KDPG）EMP
甘油醛－3－磷酸
关键酶为KDPG醛缩酶，1分子的葡萄糖经ED途径最后产生1分子ATP，1分子NADPH 和1分子NADH，2分子的丙酮酸。
（4）磷酸解酮酶途径：是明串珠菌进行异型乳酸发酵过程中分解己糖和戊糖的途径。关
键酶是磷酸解酮酶，有根据解酮酶（或底物）的不同，分为PK（磷酸戊糖解酮酶的）和HK （磷酸己糖解酮酶的）途径。
乙酰磷酸乙酸
PK途径：戊糖木酮糖－5－磷酸
磷酸甘油醛丙酮酸乳酸
HK途径：6－p－果糖乙酰磷酸乙酸核糖
2葡萄糖4－p－赤藓糖3－p－甘油醛5－p－
6－p－果糖木酮糖
7－p－景天庚酮糖
5－p－核糖5－p－核酮糖5－p－木酮糖2乙酰磷酸乙酸
5－p－木酮糖2甘油醛－3－p 2乳酸
2．发酵：狭义指微生物细胞在无氧条件下，将有机物氧化（底物脱氢）所产生的还原力[H]或电子直接交给某一内源氧化性中间代谢物，并通过底物水平磷酸化产生ATP的低效产能过程。广义指任何大规模生产微生物产品的过程。
（1）由EMP途径中丙酮酸出发的发酵：不同微生物可进行多种发酵，且同一微生物在不
同条件下又可产生不同的代谢产物。
乙醛乙醇（酵母菌的同型酒精发酵C1C2、C5C6）
乳酸（同型乳酸发酵）
草酰乙酸琥珀酸丙酸
丙甲酸H2
酮CO2 乙酸
酸乙酰～CoA 乙醇（还原）
乙酰乳酸3－羟基丁酮（乙酰甲基甲醇）2，3－丁二醇（产气）
CO2H2碱性胍基
CO2二乙酰红色化合物
乙醛乙醇丁酸丁醇（酸性）
乙酰～CoA 乙酰乙酰～CoA 丙酮2－丙醇
丙酮丁醇发酵：是迄今为止由严格厌氧菌所进行的唯一能大规模生产的发酵产品。丙酮：
丁醇：乙醇＝3：6：1（重量比）
Ⅱ型甘油发酵：乙醛在有HSO3-的条件下产生乙醛？HSO3，不能做受体，从而磷酸二羟丙酮被还原成甘油。
Ⅲ型甘油发酵：碱性条件下，乙醛发生歧化反应产生乙醇和乙酸，使磷酸二羟丙酮积累
而被还原成甘油。
（2）由PK（HMP）途径进行的发酵：异型乳酸发酵。
（3）通过ED途径进行的发酵：细菌的酒精发酵产生的乙醇为C2C5、C5C6。
（4）利用氨基酸的发酵－Stickland反应：少数厌氧梭菌利用氨基酸做碳氮源和能源，以
一种氨基酸做氢的供体，以另一种氨基酸做氢的受体而产能的独特发酵类型。以丙酮酸和甘氨
酸间的发酵为例说明其生化机制。
CoASH CO2P CoASH ADP+Pi ATP
NH3
丙氨酸丙酮酸乙酰CoA 乙酰～磷酸乙酸
NAD＋NADH2NAD＋NADH2
甘氨酸2乙酸甘氨酸
NH3NH3
3．呼吸作用：微生物在降解底物的过程中，将释放出的电子（或H）交给NAD（P）＋、FAD或FMN等电子载体，再经电子传递系统传给外源电子受体，从而生产水或其他还原型产
物并释放出能量的过程。其中以氧作为最终电子受体的称为有氧呼吸；以氧化型化合物作为最终电子受体的称为无氧呼吸。
丙酮酸
NAD＋CoASH
NAD＋＋H＋NADH＋H＋CO2
乙酰辅酶 A
NAD＋草酰乙酸
苹果酸柠檬酸
H2O
延胡索酸NAD（P）＋异柠檬酸
FADH2NAD（P）H2
琥珀酸FAD 草酰琥珀酸
CoASH NADH＋H＋NAD＋CO2
GTP 琥珀酰辅酶α－酮戊二酸
GDP+Pi
CO2 CoASH
三羧酸循环
（1）有氧呼吸：糖经酵解成丙酮酸后，在有氧条件下，进入TCA循环（三羧酸循环），被彻底氧化生产CO2和水，同时释放大量能量。
呼吸链：是位于原核微生物细胞膜上或真核微生物线粒体膜上的由一系列氧化还原电势不
同的氢传递体（或电子传递体）组成的一组链状传递顺序，能把氢或电子从低氧化还原势的化合物处传递给高氧化还原势化合物或分子氧，同时释放大量能量ATP。
NADH脱氢酶、黄素蛋白、铁硫蛋白、细胞色素、醌及其化合物。
2．无氧呼吸：某些厌氧和兼性厌氧微生物在无氧条件下进行无氧呼吸。根据最终电子受
体不同又分为无机盐呼吸（如硝酸盐、硫酸盐、硫和碳酸盐呼吸等）和延胡索酸呼吸。
分解性代谢产物及其检查方法
通过生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，借以区别和鉴定细菌
的种类。与此有关的试验称为细菌的生化反应。
（1）糖发酵试验
（2）吲哚试验（indole test）：有色氨酸酶，能分解色氨酸形成吲哚；用（对二甲基氨基苯
甲醛）加入细菌蛋白胨水培养液中，吲哚与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛结合，呈红色反应，
形成玫瑰吲哚，为吲哚试验阳性。不出现红色，为阴性。
（3）甲基红试验（methyl red test）：pH偏酸，当以甲基红为指示剂测定pH时，培养液呈红色，为甲基红试验阳性；呈桔黄色，为阴性。
（4）V-P试验（Voges-Proskauer test）：分解葡萄糖产生丙酮酸，二分子丙酮酸缩合成乙酰
甲基甲醇。若在培养液中加入氢氧化钾，生成红色化合物，称为V-P阳性。反之则为V-P阴性。
（5）枸橼酸盐利用试验（citrate utilization test）
（6）硫化氢试验
吲哚试验、甲基红试验、V-P试验、枸橼酸盐利用试验可缩写为IMViC试验。大肠杆菌的IMViC结果为++--；产气杆菌为--++。
二、化能自养微生物的生物氧化
化能自养型微生物包括消化细菌、硫细菌、铁细菌和氢细菌等。
1．氨的氧化：消化细菌氧化NH3和NO2－无机氮化合物产生能量来同化CO2。
消化细菌分为亚消化细菌和消化细菌两类，前者将NH3氧化成亚硝酸，后者将亚硝酸氧化成硝酸。都是专性好氧的革兰氏阳性菌，无芽孢，生长缓慢。这两类细菌往往是伴生在一起，
在它们共同作用下将铵盐氧化成硝酸盐，避免亚硝酸积累所产生的毒害作用。这类细菌在自然界氮素循环中也起着重要作用。
由于NO2－的氧化还原电势高，故H＋和e只能从细胞色素a1部位进入呼吸链，若顺着呼吸链传递至O2，一次仅产1分子的ATP；而逆着呼吸链传递，一次则需要消耗大量的ATP后才能产生1分子的[H]，同化过程更需要大量的能量ATP和还原力[H]，所以消化细菌虽然生长缓慢，且土壤中即使有很少的消化细菌菌体，而消化作用却很旺盛。
2．硫的氧化：硫杆菌能氧化一种或多种还原态或部分还原态的硫化物（包括硫元素、硫
化物、硫代硫酸盐、多硫酸盐和亚硫酸盐）获得能量。由于硫细菌能将硫化物或元素硫氧化成
硫酸，因而硫细菌生长的结果将导致环境pH值的明显下降，有的可下降到2以下。因此，这在细菌是极为耐酸的机体。它们中有的可以在pH值为1~2的环境中生长。
3．铁的氧化：氧化亚铁硫杆菌能利用亚铁氧化成高铁获得能量，由于当培养基的pH偏高时，亚铁氧化成高铁所释放的能量不能偶联ATP合成；只有当培养基的pH低时，亚铁氧化成高铁所释放的能量才能偶联ATP合成，因此这类细菌只有在pH4以下的环境中生长。已被用作细菌冶金（沥滤），利用该菌将FeSO4氧化成Fe2(SO4)3，后者为浸矿剂，能将铜等有色金属
不断地从低品位的矿石中溶解出来，成为硫酸铜等盐类的溶液，再用废铁粉等金属置换或用离子交换等方法来获取其中的铜等有色金属或其它稀有金属。
溶矿－黄铜矿：CuFeS2+2Fe2(SO4)3+2H2O+3O2→CuSO4+5FeSO4+2H2SO4
赤铜矿：Cu2O+ Fe2(SO4)3+ H2SO4→CuSO4+2FeSO4+ H2O
辉铜矿：Cu2S+2Fe2(SO4)3→2CuSO4+4FeSO4+S
4．氢的氧化：氢细菌都是革兰氏阴性的兼性化能自养菌，能利用分子氢氧化产生的能量
同化CO2，也能利用其他有机物生长。电子直接从氢传递给电子传递系统，经呼吸链传递产生
能量ATP。
三、能量转换
在产能代谢过程中，微生物通过底物水平磷酸化和氧化磷酸化将某种物质氧化而释放的能
量储存于ATP等高能分子中，光能微生物则通过光合磷酸化将光能转变为化学能储存于ATP 中。
1．底物水平磷酸化：物质在生物氧化过程中产生的含高能键的化合物直接偶联ATP或GTP 的合成的产能方式。
2．氧化磷酸化：物质在氧化过程中形成的NAD（P）H和FADH2可通过位于线粒体膜和细菌质膜上的电子传递系统将电子传递给氧或其他氧化型物质，同时产生ATP的过程。
ATP合成的机制：①英国学者米切尔1961年提出的化学渗透偶联假说，其中心思想是电
子传递过程中导致膜内外出现质子浓度差，从而将能量蕴藏在质子势中，质子势推动质子由膜外进入细胞内，在此过程中通过存在膜上的F1-F0ATP酶偶联ATP的形成；②美国科学家博耶提出构象变化偶联假说，其中心思想是质子势推动的质子跨膜运输启动并驱使F1-F0ATP酶构象发生变化，导致该酶的催化部位对ADP和Pi的亲和力发生改变，并促进ATP的产生和释放。
3．光合磷酸化：当一个叶绿素（或菌绿素）分子吸收光量子后变为激活态，导致其释放
一个电子而处于氧化状态，释放出的电子通过电子传递系统逐步释放出能量，同时形成ATP。这种由光能引起叶绿素分子逐出电子，并通过电子付递来产生ATP的方式称为光合磷酸化。分为环式光合磷酸化和非环式光合磷酸化两种。
①环式光合磷酸化：在光合细菌中，菌绿素（P870）吸收光量子被激活，释放出高能电子
变为氧化态，释放出的高能电子依次通过铁氧还蛋白、辅酶Q、细胞色素b和c的传递并将能量转换成ATP，电子再返回菌绿素本身，从而使菌绿素分子回复到原来的状态。由于在这种光
合磷酸化里，电子是从叶绿素分子逐出，通过由电子传递体组成的环形途径又回到叶绿素分子
本身，因而又称为环式光合磷酸化。其表示式为：NADP+nPi→nATP ②非环式光合磷酸化：还
有一种类型是光合系统Ⅰ的叶绿素分子P700吸收光量子逐出高能电子以后，高能电子通过电
子载体铁氧还蛋白还原NADP，使之生成NADPH2；在光合系统Ⅱ的叶绿素分子P680吸收光量子逐出高能电子，该电子通过电子传递后传给光合系统Ⅰ的叶绿素分子，使P700还原，同时产生ATP。失去电子的P680，由水的光解产生的电子还原，因而这种产生ATP的方式称为非环式光合磷酸化, 反应式为：2NADP＋+2ADP+2Pi+2H2O→2NADPH+2H＋+2ATP+O2。有的光合细菌虽然只
有一个光合系统，但是由于从光反应中心释放出的高能电子用于还原NAD＋生产NADH。菌绿素的还原依靠外源电子供体如S2032－、H2S等，并同时偶联ATP的生成。由于该电子传递途径也没
有形成环式回路，故也称为非环式光合磷酸化。反应式为：NAD＋+ H2S+ADP+Pi→NADPH+H＋+ATP+S。
第三节耗能代谢（合成代谢）
本节主要自学，只简述微生物特有的合成代谢途径－生物固氮和肽聚糖的合成。
一、生物固氮：
为仅次于光合作用的第二大生物化学反应，是分子N2通过固氮微生物固氮酶系的催化而
形成氨的生化过程。
1．固氮的生化机制：固氮反应的必要条件－ATP、[H]；固氮酶和严格的无氧微环境；还
原底物N2；镁离子。
固氮酶－含有两种成分铁蛋白和钼铁蛋白。前者与ATP结合并使之水解放能，用来活化
电子，为电子活性中心；钼铁蛋白为N的络合中心。这两种成分对氧均敏感，遇氧宜失活。
固氮的生化途径：H＋H2
ATP ADP+Pi
NAD(P)H FD（铁氧还蛋白）铁蛋白钼铁蛋白
Fld（黄素氧还蛋白）Mg2＋6H＋＋N22NH3
形成的氨可与酮酸结合形成各种氨基酸，再进一步合成有关化合物。固氮酶还可催化乙炔形成
乙烯的反应，而乙烯、乙炔极易精确测定，故乙炔还原法常被用来测定固氮酶的活性。
2．好氧性固氮菌固氮酶的抗氧机制：固氮酶对氧极其敏感，且一旦遇氧就会很快导致不
可逆失活，而大多数固氮酶为好氧菌，要利用氧来呼吸和产能，故其发展出多种抗氧机制来解
决其既需氧又需防止氧对固氮酶损伤的矛盾。主要有：呼吸保护、构象保护、异形胞保护和根
瘤菌的由豆血红蛋白专门运输氧。
二、肽聚糖的合成
（1）首先在细胞质内合成UDP－N－乙酰葡萄糖胺和UDP－N－乙酰胞壁酸肽；（2）合成肽聚糖亚单位－二糖肽；（3）肽聚糖亚单位转接到细胞壁上的生长点上；（4）通过转肽反应形
成完整的肽聚糖分子。
6－P－G→6－P－果糖→ 6-P-葡萄糖胺→1－P－葡萄糖胺 N－乙酰葡萄糖胺－1磷酸
Gln Glu [H] 乙酰CoA CoA
UDP－N－乙酰葡萄糖胺UDP－N－乙酰胞壁酸→→→→→UTP PPi PEP Pi 4ATP
UDP－N－乙酰胞壁酸肽
UDP－N－乙酰胞壁酸肽由细胞质转到膜上的载体磷脂酸上，放出UMP。然后UDP－N－乙酰葡萄糖胺转到胞壁酸上，生成双糖肽脂焦磷酸，再由膜内表面转移到膜外表面，连接到细胞壁的生长点上，放出载体脂焦磷酸。脂焦磷酸再脱去一个磷酸（杆菌肽抑制）成为有生物活性的
载体脂磷酸进行下一步反应。多个肽聚糖单位连接到细胞壁上之后，通过转肽反应（青霉素抑制），发生交联形成网状结构，并放出一个D－Ala。
第四节微生物代谢的调节
微生物的体积极小，而所处的环境条件却十分多变，每个细胞要在复杂多变的环境条件下
生存、繁殖，就必须具备一整套发达的代谢调节系统。微生物可以在三个水平上对其代谢进行
调节：酶活性的调节、酶合成的调节和细胞内区域化调节。
一、酶活性的调节指一定数量的酶，通过其分子构象或分子结构的改变来调节其催化反应的
速率，包括酶共价修饰和变构调节两种方式。
1．变构调节：某一代谢途径的末端产物过量积累，使其与该途径的第一个酶或是最关键
反应的酶结合抑制了底物与酶活性中心的结合，从而调节反应速度，以避免末端产物过量积累的现象。
2．共价修饰调节：共价调节酶通过修饰酶催化其多肽链上某些基团进行可逆的共价修
饰，使之处于活性和非活性的互变状态，从而导致调节酶的活化或抑制，以控制代谢的速度和方向。
二、分支合成途径调节调节方式比较复杂，每一个分支途径的末端产物控制分支点后的第一
个酶，同时又对整个途径的第一个酶有部分的抑制作用，分支代谢的反馈调节方式有多种。
1．同工酶调节：催化同一生化反应而分子结构有差异的一组酶，分别受不同末端产物的
反馈调节，且只有几种末端产物同时过量时，才能完全抑制反应的进行。
2．协同反馈抑制：分支代谢途径中的几种末端产物同时都过量时，才能抑制共同途径中
的第一个酶，单种过量不起作用的反馈调节。
3．累积反馈抑制：每一分支途径的末端产物按一定百分比单独抑制共同途径中的第一个
酶，且互不干扰，当各种末端产物共同存在时，它们的抑制是累积的。
4．顺序反馈抑制：分支途径中的各种末端产物不能直接抑制代谢途径中的第一个酶，而
是分别抑制分支点后的反应步骤，造成分支点上的中间产物积累，从而又反馈抑制第一个酶的活性，这种有顺序性的反馈抑制方式称为顺序反馈抑制。
二、酶合成调节在遗传水平上调节酶的合成量，包括酶合成的诱导和阻遏。
1．酶合成的诱导机制
1961年法国人雅各布和莫诺提出乳糖操纵子模型：认为 E.coli的乳糖操纵子由调节基因、控制基因和结构基因组成。
调节基因：是编码产生阻遏蛋白的基因，当培养基中其它的可利用糖存在即无乳糖或同时
有葡萄糖等易利用糖存在时，该基因便转录、翻译出阻遏蛋白与操纵基因特异结合，而使之失活，并阻止RNA聚合酶的移动，从而抑制诱导酶——β－半乳糖苷酶的合成。
控制基因：位于启动基因和结构基因间的一段碱基顺序，能与阻遏物结合，以次来决定结
构基因的转录能否进行。当培养基中只有乳糖时，乳糖分子便与阻遏蛋白结合，使控制基因被释放，RNA聚合酶便催化结构基因进行转录、翻译合成β－半乳糖苷酶等与乳糖有关的酶。
2．酶合成的阻遏包括降解物阻遏和末端产物阻遏
（1）降解物阻遏：在一种培养基中同时存在两种以上底物时，其中一种底物被优先利用，
而催化其他底物被利用的酶的合成被某些中间代谢物或末端产物的过量积累所阻遏的现象。
二次生长现象：在含有两种底物的培养基中培养微生物时，由于该菌首先利用易利用的底物，而催化另一底物的酶被抑制，在前一底物完全耗尽后，才开始利用后一底物，从而产生了
在两个对数期间隔一个生长延滞期的“二次生长现象”。
（2）末端产物阻遏：某代谢途径末端产物的过量积累而引起的有关酶的合成阻遏。
三、细胞区域化调节利用细胞中的区域化作用对不同的代谢进行调节，使不同的代谢途径和不同的酶类在细胞中各自的空间分布，有利于代谢途径顺利进行，互不干扰，且各代谢途径之间还可以相互协调和制约。
第五节微生物次级代谢与次级代谢产物
一、初级代谢与次级代谢
次级代谢是一类存在于某些生物（如植物和微生物）当中的特殊代谢类型。指这些生物
为了避免在初级代谢过程中的某种中间代谢产物积累所造成的不利作用，而在一定的生长时
期，以初级代谢产物为前体，合成一些对自身的生命活动无明确功能、分子结构比较复杂的物质，以有利于生存代谢类型。这一过程的产物称为次级代谢产物。根据其作用可分为抗生素、
激素、生物碱、毒素及维生素等。
初级代谢与次级代谢的关系：前者是后者的基础，后者是前者的继续与发展。初级代谢
的关键性中间产物往往是次级代谢的前体；次级代谢一般在菌体对数生长后期或稳定期间进
行，但会受到环境条件的影响；某些催化次级代谢的酶的专一性不高；次级代谢产物的合成，
因菌株不同而异，甚至因不同环境条件而异，故与分类地位无关；质粒与次级代谢的关系密切，控制着多种抗生素的合成。
二、次级代谢的调节
1．初级代谢产物的调节由于次级代谢一般以初级代谢产物为前体，因此必然会受到初
级代谢产物的调节。如青霉素的合成会受到赖氨酸的强烈抑制，因为α－氨基己二酸是合成赖氨酸和青霉素的共同前体，赖氨酸过量会抑制该反应的第一个酶，从而也抑制了青霉素的合成，因此生产用的高产菌株中乙酰乳酸合成酶对赖氨酸的反馈抑制更不敏感，且该酶的含量比低产菌株的高两倍以上；再如甲硫氨酸对头孢霉素C合成有促进作用，因为半胱氨酸是甲硫氨酸和头孢霉素C合成途径中的共同前体物，当前者累积时反馈抑制了半胱氨酸的分解和阻止了
由半胱氨酸继续合成甲硫氨酸，导致半胱氨酸进入头孢霉素C的合成。
2．分解代谢物的调节（碳、氮代谢物的调节）一般能被微生物快速利用的碳源和氮源的分解产物能明显阻遏次级代谢酶系的合成，因此，只有在对数后期或稳定期，这类底物被完全耗尽后，才能解除阻遏作用，使次级代谢产物得以合成。
3．诱导作用及产物的反馈抑制末端产物即抗生素的过量积累也与初级代谢一样能反馈
抑制其合成酶系，主要存在于青霉素、氯霉素、卡那霉素、嘌呤霉素、霉酚酸和杀真菌素的生
物合成途径中。因此，要提高抗生素发酵单位就需不断地用遗传学方法筛选出抗末端产物抑制
的高产菌株。
表4－1次级代谢产物的反馈调节
产生菌产物调节作用
产黄青霉（Pen. chrysogenum）青霉素高浓度能抑制青霉素的合成
委内瑞拉链霉菌（Str.
氯霉素阻遏第一个酶：芳香胺合成酶
venezuelae）
卡那霉素链霉菌（Str.
卡那霉素阻遏乙酰基转移酶
Kanamyceticus）
白黑链霉菌（Str. Alboniger）嘌呤霉素抑制O－去甲基嘌呤霉素甲基转移酶
匍枝青酶（Pen. Stoloniferum）霉酚酸抑制合成途径最后一步转甲基酶
此外，培养基中的磷酸盐、溶解氧、金属离子及细胞膜透性对次级代谢产物的产生也有一
定的影响。
课后思考题
1．课本P127。
2．名次解释：代谢、呼吸（有氧、无氧）、氧化磷酸化、光合作用、光合磷酸化（环式、非环式）、发酵、生物固氮、乙醛酸循环、卡尔文循环、酶活性调节、诱导酶、二次生长现象等。3．是非题：
①用KOH把CO2去掉，会使好氧的化能异氧菌生长的更好。（）
②微生物的生物氧化有发酵和呼吸，二者的不同在于电子的传递方式，即是否通过呼吸链。
（）
③所有异养型微生物在任何条件下都不能同化CO2。（）
④酵母菌的甘油发酵是由酵解途径产生的，故该发酵过程不需要通氧。（）⑤兼性厌氧的酵母，无论在什么情况下，只要其生长的环境有O2，便不会产生乙醇。（）
⑥鉴定大肠杆菌时，IMVIC试验结果为- -++。（）
4．选择题（将正确的答案序号填入括号内，每题1分，共10分）
（1）硝化细菌属于（）微生物。
A、光能自养
B、光能异养
C、化能自养
D、化能异养
（2）酵母菌进行甘油发酵的产物是（）
A、乙醇+CO2
B、甘油+乙醇+乙酸+ CO2
C、甘油+乙醇+ CO2
D、甘油+乙醛—HSO3+ CO2 （3）IMViC是鉴别大肠杆菌和产气杆菌的四项生化指标，两菌的实验结果是（）
A、+ + - -和- - + +
B、- - + +和+ + - -
C、+ - - +和- + + -
D、- + + -和+ - - +
(4)乳酸杆菌等细菌由（）途径进行同型乳酸发酵，其产物是（）。
A、EMP
B、HMP
C、ED
D、乳酸
E、乳酸、CO2、酒精
(5)化能自养菌生长缓慢的主要原因是（）。
A、自然界中CO2供应不足
B、环境中的其他生物的抑制作用
C、生长所需的能量不足
D、合成作用所需还原剂的获得要消耗大量ATP
(6)乳酸链球菌在无氧条件下，葡萄糖经发酵成为（）。
A、乳酸
B、乳酸+乙酸
C、乙醇+CO2
D、乳酸+乙醇
(7)绿色细菌和蓝细菌的光合作用基本过程相同，其差别在于供氢体。前者是（），后者是（）。
A、S2O2－3
B、SO2－4
C、延胡索酸
D、H2O
（8）由EMP途径进行的发酵有（）。
A、异型乳酸发酵
B、同型乳酸发酵
C、细菌酒精发酵
D、酵母酒精发酵
（9）化学渗透假说解释（）。
A、氨基酸转变为糖类分子
B、糖酵解过程淀粉分子分解为葡萄糖分子
C、捕获的能量在ATP分子中
D、用光作为能源合成葡萄糖分子
（10）微生物代谢中，硝酸盐和硫酸盐可作为电子受体是在（）。
A、无酶时
B、无ATP时
C、无氧时
D、有细胞色素时
5、填空体
（1）某些细菌能固定CO2，他们通过▁▁▁▁使CO2还原成▁▁▁▁，CO2的受体是▁▁▁▁▁。
（2）肽聚糖的基本重复单位由▁▁▁▁、▁▁▁▁和▁▁▁▁组成。
（3）微生物产生能量的主要方式有▁▁▁▁▁▁▁▁、▁▁▁▁▁▁▁▁、▁▁▁▁▁▁▁▁。
（4）糖解途径的关键酶和代表性微生物为EMP▁▁▁▁▁▁、HMP▁▁▁▁▁▁、ED▁▁▁▁▁。
（5）生物固氮所具备的条件是▁▁▁、▁▁▁▁、▁▁▁▁、▁▁▁▁。
（6）要富集脱硫弧菌，培养基必须含有供氢体▁▁▁，受氢体是▁▁▁及▁▁▁的环境条件。（7）蓝细菌可以固氮和进行放氧性光合作用，是因为固氮在▁▁▁▁里进行，放氧性光合作用在▁▁▁▁里进行。
（8）底物分子丢失电子并从中获得能量的化学反应，通常称为▁▁▁▁。
6、填表格
（1）环境条件对酵母代谢及生长的影响：
培养条件呼吸类型受氢体产生能量代谢终产物生长情况
有O2
无O2
（2）比较异养微生物的生物氧化的三种类型
类型氧化的底物氧化产物末端电子受体微生物代表
（3）比较硝化细菌和反硝化细菌
微生物名称营养类型呼吸类型C源能源与氧关系电子受体
7．画出表示 E.coli在含有少量葡萄糖和乳糖的培养液中的生长曲线
（1）在图中用虚线画出糖的消耗曲线。
（2）为什么细菌会出现这样的生长曲线？称为什么效应？
第五章微生物的生长繁殖及其控制
生长：生物在适宜的条件下，不断地从外界吸取养料，通过代谢作用，合成自身结构物质成分，使细胞物质有规律地、不可逆增加，导致体积增大的生物学过程。
繁殖：单细胞微生物由于细胞分裂而引起的个体数目增加或所有微生物通过有性或无性孢子而是个体数目增加的过程。微生物生长到一定阶段，由于细胞结构的复制与重建并通过特
定方式产生新的生命个体即引起生命个体数量增加的生物学过程。
第一节微生物生长的测定
微生物的生长是指其群体的生长，即整个群体细胞数目的增加和生物量的增加。测定微生
物生长的方法有很多，各种方法各有优缺点，在实际应用中应根据具体情况选择合适的方法。一、单细胞微生物数目的测定
《环境微生物学》复习重点总结
《环境微生物学》复习重点 1、微生物是如何分类的？答：各种微生物按其客观存在 的生物属性（如个体形态及大小、染色反应、菌落特征、细胞结构、生理生化反应、与氧的关系、血清学反应等）及它们的亲缘关系，由次序地分门别类排列成一个系统，从大到小，按界、门、纲、目、科、属、种等分类。种是分类的最小单位，“株”不是分类单位。 2、微生物有哪些特点？答：（一）个体极小。微生物的个体极小，有几纳米到几微米，要通过光学显微镜才能看见，病毒小于0.2微米，在光学显微镜可视范围外，还需要通过电子显微镜才可看见。（二）分布广，种类繁多。环境的多样性如极端高温、高盐度和极端pH造就了微生物的种类繁多和数量庞大。（三）繁殖快。大多数微生物以裂殖的方式繁殖后代，在适宜的环境条件下，十几分钟至二十分钟就可繁殖一代。在物种竞争上取得优势，这是生存竞争的保证。（四）易变异。多数微生物为单细胞，结构简单，整个细胞直接与环境接触，易受外界环境因素影响，引起遗传物质DNA的改变而发生变异。或者变异为优良菌种，或使菌种退化。 3 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁结构有什么异同？各有哪些化学组成？答：革兰氏阳性菌细胞壁厚约20-80nm，结构较简单，含肽聚糖，革兰氏阴性菌细胞壁厚约10nm，结
构复杂，分外壁层和内壁层，外壁层又分三层：最外层是脂多糖，中间是磷脂层，内层是脂蛋白。内壁含肽聚糖，不含磷壁酸。化学组成：革兰氏阳性菌含大量肽聚糖，含独磷壁酸，不含脂多糖。革兰氏阴性菌含极少肽聚糖，含独脂多糖，不含磷酸壁。 4、叙述革兰氏染色的机制和步骤。答：将一大类细菌染上色，而另一类染不上色，一边将两大类细菌分开，作为分类鉴定重要的第一步。其染色步骤如下：1在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀，固定。2用草酸铵结晶紫染色1min，水洗去掉浮色。3用碘—碘化钾溶液媒染1min，倾去多余溶液。4用中型脱色剂如乙醇或丙酮酸脱色，革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色。革兰氏阴性菌被褪色而成无色5用蕃红染液复染1min，格兰仕阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和格兰仕阴性菌即被区分开。 5、何谓放线菌？革兰氏染色是何种反应？答:在固体培养基上呈辐射状生长的菌种，成为放线菌。除枝动菌属革兰氏阴性菌，革兰氏染色呈红色外，其余全部放线菌均为革兰氏阳性菌，革兰氏染色呈紫色。 6、什么叫培养基？按物质的不同，培养基可分为哪几类？按试验目的和用途的不同，可分为哪几类？答：根据各种微生物的营养要求，将水、碳源、氮源、无机盐及生长因子等
环境微生物学考研试题及答案
2011环境微生物学考研试题及答案一、名词解释 包含体： 细胞膜： 衣原体： 同宗配合： 酵母菌： 生态系统： 碳源： 拮抗： 菌种复壮： DNA的变性： DNA复制： 根际微生物： 物质流： 类菌体： 硝化细菌： 细菌活性污泥法： 生物反应器：
微生物细胞固定化： 堆肥化： 自生固氮作用： 二、是非题 原噬菌体是整合在宿主DNA上的DNA片段,它不能独立进行繁殖。() 细菌的异常形态是细菌的固有特征。（） 真核微生物比原核微生物更能在高温下生长。（） 芽孢是芽孢细菌的繁殖器官。（） 光合细菌和蓝细菌都是产氧的光能营养型微生物。() 用来固化细菌培养基的多糖是琼脂。() 微生物生长的衰亡期，细胞死亡速率超过细胞分裂速率。() 碱基腺嘌呤、鸟嘌呤和胞嘧啶存在于RNA或DNA，但只RNA中有胸腺嘧啶。() 真菌最适的生长条件是有点碱性的。() 凡是影响微生物生长速率的营养成分均称为生长限制因子。() 三、选择题 1．大部分微生物___。
(a）是原生动物(b）帮助改善生活质量 (c)生活在海洋的底层(d)发现于外层空间 2.噬菌体是一种感染____的病毒。 （a）酵母菌（b）霉菌 （c）放线菌和细菌（d）原生动物 3.G＋菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是___ （a）支原体(b)L型细菌(c)原生质体(d)原生质球 4.下列微生物中，______属于革兰氏阴性菌 （a）大肠杆菌(b)金黄葡萄球菌(c)巨大芽孢杆菌(d).肺炎双球菌5.下列能产游动孢子的霉菌是____。 （a）腐霉(b)毛霉 (c)赤霉(d)青霉 6.硝酸细菌依靠____方式产能。 （a）发酵作用(b)有氧呼吸(c)无氧呼吸(d)光合磷酸化 7.酵母菌适宜的生长pH值为____ (a)5.0-6.0(b)3.0-4.0(c)8.0-9.0(d)7.0-7.5 8.进人三羧酸循环进一步代谢的化学底物是____。 (a)乙醇(b)丙酮酸（c）乙酰CoA(d)三磷酸腺苷 9.称为微好氧菌的那些细菌能___生长。
微生物学发展简史
1、史前期（约8000 年前一1676 ) ,各国劳动人民,①未见细菌等微生物的个体；②凭实践经验利用微 生物是有益活进行酿酒、发面、制酱、娘醋、沤肥、轮作、治病等）。 在17世纪下半叶，荷兰学者吕文虎克用自制的简易显微镜亲眼观察到细菌个体之前，对于一门学科来说尚没形成。这个时期称为微生物学史前时期。在这个时期，实际上人们在生产与日常生活中积累了不少关于微生物作用的经验规律，并且应用这些规律，创造财富，减少和消灭病害。民间早已广泛应用的酿酒、制醋、发面、腌制酸菜泡菜、盐渍、蜜饯等等。古埃及人也早已掌握制作面包和配制果酒技术。 这些都是人类在食品工艺中控制和应用微生物活动规律的典型例子。积肥、沤粪、翻土压青、豆类作物与其它作物的间作轮作，是人类在农业生产实践中控制和应用微生物生命活动规律的生产技术。种痘预防天花是人类控制和应用微生物生命活动规律在预防疾病保护健康方面的宝贵实践。尽管这些还没有上升为微生物学理论，但都是控制和应用微生物生命活动规律的实践活动。 2、初创期（1676 一1861 年）,列文虎克,①自制单式显微镜,观察到细菌等微生物的个体；②出于个人 爱好对一些微生物进行形态描述。微生物的形态观察是从安东·列文虎克（Antony Van Leeuwenhock 1632-1732）发明的显微镜开始的，它是真正看见并描述微生物的第一人，他的显微镜在当时被认为是最精巧、最优良的单式显微镜，他利用能放大50～300倍的显微镜，清楚地看见了细菌和原生动物，而且还把观察结果报告给英国皇家学会，其中有详细的描述，并配有准确的插图。1695年，安东·列文虎克把自己积累的大量结果汇集在《安东·列文虎克所发现的自然界秘密》一书里。他的发现和描述首次揭示了一个崭新的生物世界——微生物世界。这在微生物学的发展史上具有划时代的意义。这是首次对微生物形态和个体的观察和记载。随后，其他研究者凭借显微镜对于其它微生物类群进行的观察和记载，充实和扩大了人类对微生物类群形态的视野。但是在其后相当长的时间内，对于微生物作用的规律仍一无所知。这个时期也称为微生物学的创始时期。 3、奠基期（1861 一1897 年）,巴斯德,①微生物学开始建立；②创立了一整套独特的微生物学基本研究方法；③开始运用“实践―理论―实践”的思想方法开展研究；④建立了许多应用性分支学科；⑤进入寻找人类动物病原菌的黄金时期。继列文虎克发现微生物世界以后的200年间，微生物学的研究基本上停留在形态描述和分门别类阶段。直到19世纪中期，以法国的巴斯德和德国的柯赫为代表的科学家才将微生物的研究从形态描述推进到生理学研究阶段，揭露了微生物是造成腐败发酵和人畜疾病的原因，并建立了分离、培养、接种和灭菌等一系列独特的微生物技术。从而奠定了微生物学的基础，同时开辟了医学和工业微生物等分支学科。巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人。(1)巴斯德 巴斯德原是化学家，曾在化学上做出过重要的贡献，后来转向微生物学研究领域，为微生物学的建立和发展做出了卓越的贡献。主要集中在下列三个方面：①彻底否定了“自然发生”学说。“自生说”是一个古老学说，认为一切生物是自然发生的。到了17世纪，虽然由于研究植物和动物的生长发育和生活循环，是“自生说”逐渐消弱，但是由于技术问题，如何证实微生物不是自然发生的仍是一个难题，这不仅是“自生说”
sy环境微生物学
江苏自考环境工程大纲-环境微生物学 河海大学编 (高纲号 0727) 一、课程性质及其设置目的与要求 （一）课程性质和特点 《环境微生物学》课程是江苏省高等教育自学考试环境工程专业（独立本科段）的一门基础专业课程，它的特点是包括了生物化学、有机化学和生态学等多学科交叉的一门课程。本课程系统地介绍环境微生物学的基本知识和理论、基本技术和方法。 本课程在内容上分为四篇，第一篇是介绍了环境微生物学基础，包括特点、任务、分类、生长与代谢、遗传与变异、分布及其相关关系和微生物在物质循环中的作用。第二篇是介绍了微生物治理环境，包括降解与转化、污水的生物处理、废渣与废气的生物处理、生物修复、开发应用和资源化。第三篇是介绍了微生物环境污染，包括致病微生物、代谢产物与环境污染和微生物与水体富营养化。第四篇是介绍了微生物环境监测，包括指示微生物、污染物生物毒性的微生物学检测方法、污染物致突变性的微生物检测方法和微生物监测技术的新发展。 通过学习应考者可以了解环境微生物学的基本理论，掌握微生物学在治理环境污染中的基本技术和基本方法，并能够应用在具体的科学研究和实际工作中，为环境微生物学的发展培养专业人才。 （二）本课程的基本要求 通过本课程的学习，应考者应达到以下要求： 1、了解环境微生物学的基本知识； 2、理解微生物学在治理环境污染中基本作用； 3、掌握微生物学在治理环境污染中基本方法和技术； 4、熟练掌握微生物学中常见术语的名称和意义。 （三）本课程与相关课程的联系 本课程的前修课程是生物化学、有机化学和生态学。这三门课程可以帮助学生理解环境微生物学的基本知识，更好地掌握微生物学在治理环境污染中的基本方法和技术。同时为在工作和研究中的具体应用打下良好的基础。 二、课程内容与考核目标
微生物学基础知识培训
微生物学基础知识 第一章微生物概述 一. 什么是微生物 微生物是一类肉眼不能直接看见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍才能观察到的微小生物的总称。 微生物具有形体微小、结构简单；繁殖迅速、容易变异；种类繁多、分布广泛等特点。 二. 微生物的分类： 根据微生物有无细胞基本结构、分化程度、化学组成等特点，可分为三大类。 1. 非细胞型微生物无细胞结构，无产生能量的酶系统，由单一核酸（DNA/RNA）和蛋白质衣壳组成，必须在活细胞内增殖。病毒属于此类微生物。 2. 原核细胞型微生物细胞核分化程度低，只有DNA盘绕而成的拟核，无核仁和核膜。这类微生物包括细菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体和放线菌。 3. 真核细胞型微生物细胞核的分化程度高，有核膜、核仁和染色体，能进行有丝分裂。如真菌、藻类等。 三. 微生物的作用及危害 1. 微生物的作用 绝大多数微生物对人和动物是有益的，已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来越重要的作用。例如与我们日常生活密切相关的如酸奶、酒类、抗生素、疫苗等。 2. 微生物的危害 微生物中也有一部分能引起人及动、植物发生病害，这些具有致病性的微生物，称为病原微生物。如人类的许多传染病（感冒、伤寒、痢疾、结核、脊髄灰质炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。 从药品生产的卫生学而言，微生物对药品的原料、生产环境和成品的污染是造成生产失败、成品不合格的重要因素。 第二章微生物的类群和形态结构 一. 细菌 细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛。 1. 细菌的形态与结构 观察细菌最常用的仪器是光学显微镜，其大小可以用测微尺在显微镜下测量，一般以微米为单位。细菌按其形态不同，主要分为球菌、杆菌和螺形菌三类。
2018环境微生物学考研试题及答案
2018环境微生物学考研试题及答案一、名词解释 包含体： 细胞膜： 衣原体： 同宗配合： 酵母菌： 生态系统： 碳源： 拮抗： 菌种复壮： DNA的变性： DNA复制： 根际微生物： 物质流： 类菌体： 硝化细菌： 细菌活性污泥法： 生物反应器： 微生物细胞固定化： 堆肥化：
自生固氮作用： 二、是非题 原噬菌体是整合在宿主DNA上的DNA片段,它不能独立进行繁殖。( > 细菌的异常形态是细菌的固有特征。( > 真核微生物比原核微生物更能在高温下生长。( > 芽孢是芽孢细菌的繁殖器官。( > 光合细菌和蓝细菌都是产氧的光能营养型微生物。( > 用来固化细菌培养基的多糖是琼脂。( > 微生物生长的衰亡期，细胞死亡速率超过细胞分裂速率。( > 碱基腺嘌呤、鸟嘌呤和胞嘧啶存在于RNA或DNA，但只RNA中有胸腺嘧啶。( > 真菌最适的生长条件是有点碱性的。( > 凡是影响微生物生长速率的营养成分均称为生长限制因子。( > 三、选择题 1.大部分微生物___。 (a>是原生动物(b>帮助改善生活质量 (c>生活在海洋的底层(d>发现于外层空间 2.噬菌体是一种感染____的病毒。 (a>酵母菌(b>霉菌 (c>放线菌和细菌(d>原生动物 3.G+菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是___
(a>支原体(b>L型细菌(c>原生质体(d>原生质球 4.下列微生物中，______属于革兰氏阴性菌 (a>大肠杆菌(b>金黄葡萄球菌(c>巨大芽孢杆菌(d>.肺炎双球菌 5.下列能产游动孢子的霉菌是____。 (a>腐霉(b>毛霉 (c>赤霉(d>青霉 6.硝酸细菌依靠____方式产能。 (a>发酵作用(b>有氧呼吸(c>无氧呼吸(d>光合磷酸化 7.酵母菌适宜的生长pH值为____ (a>5.0-6.0(b>3.0-4.0(c>8.0-9.0(d>7.0-7.5 8.进人三羧酸循环进一步代谢的化学底物是____。 (a>乙醇(b>丙酮酸(c>乙酰CoA(d>三磷酸腺苷 9.称为微好氧菌的那些细菌能___生长。 (a>在高浓度盐中(b>在低浓度氧中 (c>没有ATP或葡萄糖(d>只在有病毒时 10.深层穿刺接种细菌到试管固体培养基中____。 (a>提供厌氧菌生长条件(b>除去代谢废物的一个机会 (c>增加氧气(d>增加钾和钠离子的数目 11.微生物分批培养时，在延迟期_____ (a>微生物的代谢机能非常不活跃(b>菌体体积增大 (c>菌体体积不变(d>菌体体积减小 12.下面所有特征皆适用于胞嘧啶和胸腺嘧啶，除了___之外。
(完整版)环境微生物学试题(精华版)
环境微生物学试题答题要点(精华版) 一、名词解释（每题1.5分，计30分） 噬菌体：是侵染细菌、放线菌、霉菌等微生物的病毒。 菌落：菌落是指在固体平板培养基上，微生物的单细胞经过生长繁殖，形成肉眼能看到的，具有一定形态特征的微生物群体。PHB：是细菌细胞中含有的叫聚羟基丁酸盐的贮藏物质。 初生菌丝体：担子菌的孢子直接萌发而成的菌丝体，一般不会繁殖成为子实体。 分生孢子：分生孢子是由菌丝分枝顶端细胞或者由菌丝分化成的分生孢子梗的顶端细胞分割缢缩而成的单个或者成簇的孢子。间歇灭菌法：是利用常压蒸气反复灭菌的方法。 生物氧化：物质在生物体内经过一系列连续的氧化还原反应逐步分解并释放能量的过程。 化学杀菌剂：能够抑制和杀死微生物的化学物质。 共生：两个微生物在一起时形成特殊的结构和功能，两者高度的协调和彼此得利。 启动子：是一个“开始”的信号，它含有与RNA聚合酶结合并启动转录的保守序列。 操纵子：负责合成特殊蛋白质的基因簇。 生态系统：是生物群落与其生存环境组成的整体系统。 活性污泥：污水处理过程中的具有活性的微生物絮凝体。 联合固氮：是指某些生活在植物根的表面至根皮层细胞间而不进入植物根细胞的微生物进行固氮作用的现象。 反硝化细菌：反硝化作用是指微生物还原硝酸产生气态氮的过程。 活性污泥法：以活性污泥为主体的污水生物处理技术。 生物反应器：是通过酶、微生物、动植物细胞等的固定化，进行物质转化的反应器。 根际微生物：生长在植物根系直接作用土壤范围内的微生物。 纯培养：是指在实验室条件下，从一个微生物细胞繁殖得到的后代。 细胞壁：细胞壁是包在细菌细胞表面、内侧紧贴细胞质膜的较为坚韧并略具弹性的结构。 二、是非题（每题1分，计10分） ?溶源性细菌在一定条件诱发下,可变为烈性噬菌体裂解寄主细胞。( + ) ?细菌形态通常有球状、杆状、螺丝状三类。自然界中杆状最常见，球状次之，螺旋菌最少。( - ) ?某些藻类如团藻属存在群体形态。( + ) ?光合磷酸化和氧化磷酸化一样都是通过电子传递系统产生ATP。( - ) ?在固体培养基中，琼脂的浓度一般为0.5—1.0%。( - ) ?称为嗜碱菌的那些细菌是能在pH 7.0以上的环境中生长的细菌。( + ) ?在真核微生物细胞的染色体中，DNA是与组蛋白结合形成染色体的。( + ) ?EMP、ED等糖酵解途径的共同特点是将葡萄糖降解到丙酮酸。( + ) ?精确定量某些成分而配制的培养基是所有成分的性质和数量已知的培养基，称为天然培养基。( - ) ?在实验室中细菌不能形成菌落。( - ) 三、选择题（每题1分，计20分） 1. 适合所有微生物的特殊特征是__c__。 (a)它们是多细胞的（b)细胞有明显的核 (c)只有用显微镜才能观察到（d）可进行光合作用 2. 病毒缺乏__b___。 (a)增值能力(b)独立代谢的酶体系 (c)核酸 (d)蛋白质 3. G－菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是___d__。 (a) 支原体(b) L型细菌(c) 原生质体(d) 原生质球 4. 酵母菌的细胞壁主要含___d__。 (a) 肽聚糖和甘露聚糖 (b) 葡聚糖和脂多糖 (c) 几丁质和纤维素 (d)葡聚糖和甘露聚糖 5. 下列能产子囊孢子的霉菌是__c__。 (a) 毛霉和根霉 (b) 青霉和曲霉
微生物学基础知识试题及答案审批稿
微生物学基础知识试题 及答案 YKK standardization office【 YKK5AB- YKK08- YKK2C- YKK18】
微生物学基础知识试题 部门姓名成绩 一. 判断题 1、消毒可以杀灭物体上的所有微生物，而灭菌只杀死物体上的病原微生物。（×） 2、微生物数量多、分布广，但繁殖不快，适应性不强。（×） 3、多数细菌的最适培养温度时30~35℃. （√） 4、药品中存在微生物并不一定会引起药品变质。（×） 5、洁净区中的所有操作均不应大幅度或快速动作。（√） 6、一个不锈钢托盘擦拭得非常光亮，因此它不存在微生物污染。（×） 7、药品中添加抑菌剂，可以杀灭含有的全部微生物。（×） 8、常用于消毒的乙醇浓度为70%~75%。（√） 9、酵母菌为多细胞真菌。（×） 10、洁净室（区）的工作人员不能化妆，但可以戴戒指和项链。（×） 二. 填空题 1. 细菌按其形态不同，主要分为球菌、杆菌和螺旋菌三类，多以二分裂方式繁殖。 2. 洁净室（区）应定期消毒。使用的消毒剂不得对设备、物料和成品产生污染。 消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药菌株。 3. 细菌的生长曲线包括四个生长时期为延滞期、对数期、稳定期、衰亡期。 4. 形体最微小，结构最简单的微生物是病毒。
5. 微生物生长繁殖所需的营养物质主要有水、碳源、氮源、能源、无机盐和生长因子等。 6.酵母菌最最主要的繁殖方式是芽殖。 7. 大肠杆菌在合适的生长条件下， ~20 分钟便可繁殖一代 三、选择题 1 不属于细胞生物的微生物（ B ） A、细菌 B、病毒 C、真菌 D、放线菌 2 抗生素产生菌中，其主要产生菌是（ C ） A、真菌 B、酵母菌 C、放线菌 D、病毒 3. 细菌的测量单位。( B ) B.μm 4. 酵母菌在自然界中分布很广，尤其喜欢在的环境中生长。( A ) A.偏酸性且含糖较多 B.偏酸性且含糖较少 C.偏碱性且含糖较多 D.偏碱性且含糖较少 5. 真菌生长最适的温度为℃。( B ) A. 16～22， B. 23～28， C. 30～35， D. 28～35 6. 下列不属于辐射灭菌的是。( D ) A.紫外线灭菌法 B.电离辐射灭菌法 C.微波灭菌法 D.高压蒸汽灭菌法 7. 细菌液体培养过程中哪一个阶段细菌数以几何级数增加（ B ） A、延迟期 B、对数期 C、稳定期 D、衰亡期 8. 波长为的紫外线最具有杀菌作用。（ C ）
环境微生物学知识点
环境微生物学知识点 教材：环境工程微生物周凤霞白京生主编化学工业出版社 单元知识一绪论 1.环境问题与可持续发展 概念现状 2.微生物作用 微生物概念微生物作用（有益、有害） 3.微生物特点 个体小繁殖快种类多结构简单易变异 单元知识二环境微生物主要类群 1.原核微生物 ①细菌（形态结构及作用 ②放线菌（形态菌落培养污泥丝状膨胀的类型） ③蓝细菌（特征作用水华、赤潮类别） 2.真核微生物 ①酵母菌（类型结构特征应用 ②霉菌（类型结构特征应用特种污水处理优势 ③真核微型藻类（分类作用水华、赤潮类别） 3.原生动物 ①鞭毛虫（形状特征指示性作用） ②肉足虫（形状特征分类指示性作用） ③纤毛虫（形状特征分类 ④包囊（形成原因过程指示性作用） 4.微型后生动物 ①轮虫（形状特征分类指示性作用） ②线虫（形状特征分类指示性作用） ③水蚤（形状特征分类指示性作用） 5.病毒 ①病毒特征 ②病毒结构 ③繁殖（5 ④溶原性 单元知识三微生物原理 1.微生物营养 ①营养要素（5大要素 ②营养类型（4个） ③培养基（原则分类作用生化营养保证） 2.生长曲线（曲线多周期过程及对比分析 3.环境因素影响（温度ph 4.微生物代谢（酶 5.遗传变异（遗传变异污泥驯化） 单元知识四微生物生态
1.微生物环境分布（土壤大气水体） 2.微生物间关系（共生互生寄生拮抗 3.微生物与物质循环（C N P 循环污水处理中应用）单元知识五微生物的环境污染 1.水体富营养化（水华赤潮） 2.产生毒素 单元知识六微生物在水污染治理中的作用 1.污水生物处理分类（好氧厌氧兼氧） 2.活性污泥法（微生物组成净化机理培养驯化） 3.生物膜法（微生物组成净化机理培养驯化）
微生物学基础知识资料
第一模块微生物学基础知识 第一章微生物概述 一. 什么是微生物 微生物是一类肉眼不能直接看见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍才能观察到的微小生物的总称。 微生物具有形体微小、结构简单；繁殖迅速、容易变异；种类繁多、分布广泛等特点。 二. 微生物的分类： 根据微生物有无细胞基本结构、分化程度、化学组成等特点，可分为三大类。1. 非细胞型微生物无细胞结构，无产生能量的酶系统，由单一核酸（DNA/RNA）和蛋白质衣壳组成，必须在活细胞内增殖。病毒属于此类微生物。 2. 原核细胞型微生物细胞核分化程度低，只有DNA盘绕而成的拟核，无核仁和核膜。这类微生物包括细菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体和放线菌。 3. 真核细胞型微生物细胞核的分化程度高，有核膜、核仁和染色体，能进行有丝分裂。如真菌、藻类等。 三. 微生物的作用及危害 1. 微生物的作用 绝大多数微生物对人和动物是有益的，已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来越重要的作用。例如与我们日常生活密切相关的如酸奶、酒类、抗生素、疫苗等。 2. 微生物的危害 微生物中也有一部分能引起人及动、植物发生病害，这些具有致病性的微生物，称为病原微生物。如人类的许多传染病（感冒、伤寒、痢疾、结核、脊髄灰质炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。 从药品生产的卫生学而言，微生物对药品的原料、生产环境和成品的污染是造成生产失败、成品不合格的重要因素。
第二章微生物的类群和形态结构 一. 细菌 细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛。 1. 细菌的形态与结构 观察细菌最常用的仪器是光学显微镜，其大小可以用测微尺在显微镜下测量，一般以微米为单位。细菌按其形态不同，主要分为球菌、杆菌和螺形菌三类。 （1）球菌多数球菌直径在1微米左右，外观呈球形或近似球形。由于繁殖时分裂平面不同可形成不同的排列方式，分为双球菌、链球菌、葡萄球菌等。 （2）杆菌形态多数呈直杆状，也有的菌体稍弯，多数呈分散存在，也有的呈链状排列，分为棒状杆菌、链状杆菌、球杆菌等。 （3）螺形菌菌体弯曲，呈弧形或螺旋形。如幽门螺杆菌。 细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等各种细菌都有，是细菌的基本结构。 2. 细菌的繁殖 二分裂繁殖是细菌最普遍、最主要的繁殖方式。在分裂前先延长菌体，染色体复制为二，然后垂直于长轴分裂，细胞赤道附近的细胞质膜凹陷生长，直至形成横隔膜，同时形成横隔壁，这样便产生两个子细胞。 细菌生长速度很快，一般约20min分裂一次。若按此速度计算，细菌群体将庞大到难以想象的程度。但事实上由于细菌繁殖中营养物质的逐渐消耗，有害代谢产物的逐渐积累，细菌不可能始终保持高速度的无限繁殖。经过一段时间后，细菌繁殖速度逐渐减慢，死亡菌数增多，活菌增长率随之下降并趋于停滞。 3. 细菌的菌落 单个或少数细菌细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。细菌菌落常表现为湿润、粘稠、光滑、较透明、易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位颜色一致等。 二. 真菌
(整理)微生物学基础
一．名称解释 1. L型细菌 2. 毒血症 3. 侵袭力 4. LD50 5. 补体 6. 单克隆抗体 7. 化能异养菌 8. 发酵 9. 互生10. 佐剂11. SPF动物12. 菌血症13. 内毒素14. CPE 15. 灭菌16. 体液免疫17. 荚膜18. 病毒包涵体19. 干扰素20. 类毒素21. 细菌22. 消毒23. 抗原24. 病原微生物25. 凝集反应26. 鞭毛27. 滤过除菌28. 外毒素29. 抗体30. 沉淀反应31.病毒32.无菌法33.毒素34.半数致死量35.单克隆抗体36. 芽胞 四．填空 1. 细菌的一般形态主要有三种，即、和。 2. 外毒素、类毒素、内毒素的化学成分分别是、、。 3. 病毒的复制过程包括、、 和。 4. 请简述病毒体外培养的主要方法有三种，即、和。 5. 血清里含量最多的抗体种类是；抗原免疫后机体产生最早的抗体种类是。 6. 大肠杆菌、嗜血杆菌、葡萄球菌、沙门氏菌、链球菌、结核杆菌在革兰氏染色反应中分别呈性、性性、性和性。 7. 细菌的一般形态主要有三种，即、和。 8. 外毒素、类毒素、内毒素的化学成分分别是、、。 9. 细菌吸收营养物质的方式主要有四种，即、、 和。 10. 请简述病毒体外培养的主要方法有三种，即、和。 11. 机体免疫应答分为三个阶段，即、和。 12. 鸡新城疫病毒、禽流感病毒、口蹄疫病毒、狂犬病病毒、伪狂犬病病毒所属病毒科名分别 是、、 和。 13. 细菌的特殊结构主要有、、和纤毛。 14. 内毒素的化学成分是。 15. 病原微生物引起传染的必要条件是、、 和。 16. 抗体种类有五类，分别、、、和。 17. 中枢免疫器官包括、和；外周免疫器官包 括、和。 18. 致仔猪水肿的大肠杆菌、嗜血杆菌在革兰氏染色反应中分别呈性、性。 19. 病原微生物的毒力包括二个方面的组成，即和。 20. 病原微生物引起传染的必要条件是、、 和。 21. 完整的抗原应具有二种性能，即抗原的和。 22. 能感染细菌的病毒称为。 23. 免疫的生理作用包括、和。 24. 致羊流产的羊布氏杆菌、牛乳房炎链球菌、炭疽杆菌、破伤风杆菌在革兰氏染色反应中分别呈 性、性、性、性。 25. 口蹄疫病毒、禽流感病毒、鸡新城疫病毒和猪瘟病毒所属的病毒科名分 别、、 和。 26. 青贮饲料中最主要的有益微生物种类是。 27. 正常哺乳动物血清中含量最丰富的抗体种类是；机体受到外来抗原免疫后最早诱导 产生的抗体种类是。 28. 在青贮饲料中起作用的最主要的有益微生物种类是。 29. 小鹅瘟病毒、猪瘟病毒、禽流感病毒、口蹄疫病毒、鸡马立克氏病病毒所属的病毒科分别 为、、、 和。 30. 只对病原微生物有抑制或杀灭作用，而对机体无影响的药物被称为药。 31. 中等大小细菌在光学显微镜下一般至少放大约倍时肉眼才可见。 32. 既是细菌的运动器官，又是细菌的特殊构造的是。 33. 能感染细菌的病毒称为。 34. 病毒的成分来自于宿主细胞膜。 35. 75%酒精消毒的机理是。
环境工程微生物学++讲义
本课程是环境学院各专业学生的专业基础课；与另一门课《环境微生物学实验》相结合，构成一个完整的体系；本课程强调每个学生要动手，通过实验，加深对讲课内容的理解和记忆； 本课程内容分两大部分：一是微生物学的基础知识；二是微生物学在环境领域中的应用。 绪论 主要内容： 环境微生物学的研究对象和任务研究对象研究任务微生物学概述微生物的定义 微生物的特点原核微生物与真核微生物微生物的命名与分类 第一节环境工程微生物学的研究对象和任务 一、环境微生物学的研究对象 定义：环境微生物学是研究与环境领域（包括环境工程、给水排水工程）有关的微生物及其生命活动规律。?其内容包括：微生物个体形态、群体形态；细胞结构功能、生理特性、生长繁殖、遗传变异等；微生物与环境的关系（尤其是微生物与污染环境之间的关系）；微生物对物质的转化分解作用（特别是应用微生物来处理各种污染物质，如废水、废气和固体废弃物）。 二、环境工程微生物学的研究任务 总的归纳起来有两大方面的任务： （1）防止或消除有害微生物 （2）充分利用有益的微生物资源 三、微生物在环境污染治理（水处理）中的应用 １）在环境监测方面（水污染的监测） 利用在环境中生存的生物的种类、数量、活性等特征，来判断环境状况的好坏。这些生物称为指示生物。 生物监测的优缺点： 生物监测的主要优越性： (a)长期性——汇集了生物在整个生活时期中环境因素改变的情况，可以反映当地的环境变化； (b)综合性——能反映环境诸因子、多成分对生物有机体综合作用的结果； (c)直观性——直接把污染物与其毒性联系起来； (d)灵敏性——有时甚至具有比精密仪器更高的灵敏性，有助于提早发现环境污染。 生物监测的主要缺点： (a)定量化程度不够； (b)需要一定的专业知识和经验。 ２）在环境治理方面 包括水、大气、固体废弃物处理方面其中特别在水处理方面，有着大量成功应用的例子。
环境微生物学试题(九)
环境微生物学试题(九) 一、名词解释（每题1.5分，计30分） 温和噬菌体放线菌蓝细菌霉菌子实体光能无机营养型发酵世代时微生物生长基因突 变内含子微生物生态学活性污泥反硝化作用 产甲烷菌好氧生物膜酶的固定化绝对厌氧菌微生物传感器好氧堆肥 二、是非题（每题1分，计10分） 1.一个病毒的毒粒内既含有双链DNA和双链RNA。( ) 2.真菌、原生动物和单细胞藻类中主要的繁殖方法都是二分裂。( ) 3.碱基排列顺序差异越小，它们之间亲缘关系就越近，反之亦然。( ) 4.大多数原生动物一般可在固体培养基上培养。( ) 5.在最适生长温度下，微生物生长繁殖速度最快，因此生产单细胞蛋白的发酵温度应选择最适生长 温度。( ) 6.作为污染指示物的大肠菌群是一类革兰氏阴性的肠杆菌，包括大肠埃希氏菌等。( ) 7.真菌与藻类形成的地衣以及根瘤菌与豆科植物形成的根瘤，都属于微生物与微生物共生。( ) 8.最低温度是指微生物能生长的温度下限。( ) 9.芽孢在杆菌中比较多见，但在球菌中也有发现。（） 10.土壤中的自生固氮菌的固氮作用的强弱不受土壤中化合态氮浓度的影响。（） 三、选择题（每题1分，计20分） 1. 在微生物学中提出采用化学治疗剂治疗传染病是由于_______。 (a) Hooke的工作(b)发现了抗生素 (c)阐明了DNA的结构(d)发展了遗传工程 2. 细菌形态通常有球状、杆状、螺丝状三类。自然界中最常见的是______。 (a)螺旋菌(b)杆菌(c)球菌(d) 弧菌 3. 蓝细菌的固氮部位是______。 (a)静息孢子(b)类囊体(c)异形胞(d)链丝段 4. 酵母菌的细胞壁主要含______。 (a) 肽聚糖和甘露聚糖(b) 葡萄糖和脂多糖 (c) 几丁质和纤维素(d) 葡聚糖和甘露聚糖 5. 当一个NADH分子经代谢并让其电子通过电子传递链传递后，可产生____。 (a) 6个氨基酸分子(b) 1个葡萄糖分子 (c) 3个ATP分子(d) 1个甘油三酯和2个甘油二酯 6. 培养亚硝酸细菌时，要以______为唯一能源，接种少量不含有机质淤泥，加富培养。 (a)N2(b)亚硝酸盐(c)硝酸盐(d)铵盐 7. 当进行糖酵解化学反应时，______。 (a)糖类转变为蛋白质 (b)酶不起作用 （c)从二氧化碳分子产生糖类分子 （d)从一个单个葡萄糖分子产生两个丙酮酸分子 8. 微生物在干旱环境中存活是因为______。
环境微生物学
。 第四章微生物的处理 1.根据碳源和能源的不同可将细菌分为哪四类? 根据能源不同分为光能自养型微生物和化能自养型微生物；根据碳源不同分为光能异养微生物和化能异养微生物。 2.紫硫细菌和绿硫细菌属于哪一类?有何用途? 光能自养微生物只有紫硫细菌和绿硫细菌。用途：依靠体内的光合作用色素，利用阳光（或灯光）做能源，以H2O和H2S作供氢体，CO2为碳源合成有机物，构成自身细胞物质。 3.无机自养型细菌在环保中有哪些用途? 固氮，除硫 4.有机污水处理中最重要的细菌营养型是哪一种? 有机营养微生物（异养微生物），异养菌是有机污水处理的主角。 5.红螺菌属于哪一类细菌?有何用途? 光能异养微生物:主要指红螺菌（有氧无光时可化能异养生存)。用途：不受氧气限制，尤其适于高浓度有机废水（食品行业）的高效处理。 6.在液体培养基中添加%的可制得固体培养基? 向液体培养基中加入2％左右的琼脂，加热至100℃溶解，40℃下冷却并凝固。 7.废水好氧、厌氧活性污泥生物处理时BOD5:N:P分别为多少? 污(废)水生物处理中：好氧微生物群体(活性污泥)要求为BOD5：N：P＝100：5：1 厌氧生物处理中的厌氧微生物群体要求BOD5：N：P＝100：6：1 8.比较营养物质进入细胞的四种方式。 无载体不耗能溶质分子不变单纯扩散 不耗能溶质分子不变促进扩散 有载体 耗能溶质分子不变主动运输 溶质分子改变基团移位 9.按照微生物和氧的关系如何进行呼吸的分类？每种呼吸类型属于哪种微生物？ 按与氧气关系分为好氧呼吸和厌氧呼吸。 好氧有机物呼吸：化能异养型；好氧无机盐呼吸：化能自养型； 厌氧有机物呼吸：化能异养型；厌氧无机盐呼吸：化能异养型。 作业：为什么水处理中都是先异养菌脱碳再由自养菌脱氨? 1.自养菌反驯化,利用有机物,不再利用氨氮； 2.有机物为主时自养菌生长慢竞争不过异养菌； 3.异养菌分解蛋白质等产生的氨再被自养菌利用； 4.异养菌分解有机物产生碳酸盐作为自养菌碳源。 第五章微生物的生长繁殖和生存因子 1.生长繁殖灭菌消毒世代时间 生长——微生物体积的增长; 繁殖——微生物群体数量的增长; 灭菌——通过超高温或其他的物理、化学因素将所有微生物的营养细胞和所有的芽孢或孢子全部杀死； 消毒：采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动、植物有害的病原菌。而对被消毒的对象基本无害的措施； 代时（时代时间）——细菌两次细胞分裂之间的时间； 2.细菌数量生长曲线。说明细菌的各个生长时期及在废水处理中的应用。 迟滞期:
环境微生物试卷
《环境微生物学》练习题及答案 一、填空题 1.微生物的命名采用双名法，即由一个种名和一个属名构成，排列上__属___名在前， __种__名在后。 2.原核微生物和真核微生物的区别在于___真核微生物__能进行有丝分裂而__原核 微生物_进行无丝分裂。 3.病毒在固体培养基上形成的培养特征称为__噬菌斑___。 4.废水生物处理工艺中，常利用微生物中的_原生动物__和_微型后生动物__类群作 为污水生物处理好坏的指示生物。 5.水分子进入细胞的方式属于_单纯扩散_。 6.微生物之间的竞争关系是指：不同的微生物种群在同一环境中，对生存所需要的条件互 相竞争，互相受到不利影响。 7.检测空气中的微生物常采用__平皿落菌法__法。 二、判断题 1.细菌两次细胞分裂之间的时间称为世代时间。（√） 2.主动运输和协助扩散都会消耗细胞能量。（×） 3.质粒在构建“超级降解菌”中发挥了重要的作用。（√） 4.微生物的新陈代谢速度随着环境温度的升高而加快。（×） 5.废水生物处理中微生物的适宜温度在20摄氏度左右。（×） 6.产甲烷菌是一种古菌，也是一种专性厌氧菌。（√） 7.格兰氏染色法的第一个步骤是利用蕃红染液对细胞进行染色。（×） 8.细菌表面总是带负电荷。（√） 9.放线菌都是格兰氏阳性菌。（×） 10.芽孢是细菌分类鉴定的依据之一。（√） 11.鞭毛是细菌的运动器官，不作为分类鉴定的依据。（×） 12.真菌可分为酵母菌和霉菌两纲。（×） 13.常规活性污泥法利用处于对数期的微生物进行污染物的生物降解。（×） 14.干燥的环境不利于微生物的生长，所以常被利用来保存物品。（√） 15.紫外线能杀菌是因为它能破坏细胞中的蛋白质，使之变性。（×） 16.噬菌体和细菌是捕食关系。（×） 17.厌氧生物处理系统中，水解细菌和产甲烷细菌之间是原始合作关系。（√） 18.定向培育是利用微生物在人工诱导下会发生诱发突变的特点，筛选出适合特定污水水 质的降解微生物。（×） 19.土壤自净的能力取决于土壤微生物的种类、数量和活性。（√） 20.微生物对有机污染物好氧处理的效果比厌氧处理更彻底。（√）
环境微生物学复习知识点总结
绪论 微生物是所有形态微小的单细胞细胞或个体结构简单的多细胞以及没有细胞结构的低等生物的通称。 界、门、纲、目、科、属、种、变种、型、株 命名依据：形态特征、生理生化反应、生态特征、血清化反应、细胞成分、红外吸收光谱、GC含量、DNA杂交、DNA-RNA杂交、16S RNA碱基顺序分析等 二名法： 1、学名=属名+种名+（首次定名人姓）+现定人姓+定名年分 Pseudomonas aeruginosa (schrocter) Migula 1920 铜绿假单细胞 2、学名=属名+种名+菌株（用字母、符号等字形表示） Bacillus subtilis AS 1.398 枯草杆菌中能产生蛋白酶的一株菌株 3、学名=属名+sp.(or spp) 微生物特征： 1.个体积小，比表面积大，结构简单 2.代谢活跃，类型多样 3.防止迅速，容易变异 4.抗逆性强，休眠期长 5.种类繁多，数量巨大 6.分布广泛，分类界级宽 微生物的重要性： 1．环境、能源 降解、转化、清除污染物 2．医药 3．农业、食品 4．生物工程 5．科学研究 1.2 微生物的发展史 一、感性认识阶段（史前段） 8000年前---1676年 细菌冶金、制曲酿酒 二、形态学发展阶段（初创段） 1676---1861 列文虎克（Leeu wenhoek） 特点：自制单式显微镜观察细小生物 三、生理学发展阶段（奠基期） 1861---1897 帕斯特、可科赫Pasteur\koch 特点：建立一系列研究微生物所必须的独特方法 借助了良好的研究方法，开创了寻找病原微生物的黄金时期 把微生物的研究从形态描述推进到了生理学研究 科赫法则： 1.在患病动物中存在可疑病有机体，而健康动物没有。 2.可疑有机体在纯培养中生长
04525环境微生物学每章知识点整理
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 04525环境微生物学每章知识点整理 04525 环境微生物学每章知识点整理绪论 1、微生物的命名方法？微生物的命名按国际生物命名法命名，即采用林奈(Linnaeus)的双名法。 每一微生物的拉丁学名由属名和种名组成。 属名在前，用拉丁文名词表示第一字母大写，种名在后，用拉丁文的形容词表示用小写。 属名和种名均用斜体表示。 如大肠埃希氏杆菌 Escherichia coli。 （1）当泛指某一属微生物，而不特指该属中某一种（或未定种名）时，可在属名后加 sp. 或 ssp.（分别代表 species 缩写的单数和复数形式）例如： Saccharomyces sp. 表示酵母菌属中的一个种。 （2）菌株名称——在种名后面自行加上数字、地名或符号等，如：Bacillus subtilis BF7658 BF=北纺 Clostridium acetobutylicum ATCC824 丙酮丁醇梭菌 ATCC＝American Type Culture Collection 美国模式菌种保藏中心（3）当文章中前面已出现过某学名时，后面的可将其属名缩写成 1~3 个字母。 如 Escherichia coli 可缩写成 E.coli Staphylococcus aureus 可缩写成 S. aureus 2、微生物的特点？（1）个体极小微生物的个体极小，有微米（?m）级的，要通过光学显微镜才能看见。 大多数病毒小于 0.2?m，是纳米（nm）级的，在光学显微镜可视 1/ 34
微生物学基础知识试题(答案)
微生物学基础知识试题(答案) 部门姓名成绩 一. 判断题（每题2分，共20分） 1. 常用于消毒的乙醇浓度为70%~75%。（√） 2. 酵母菌为多细胞真菌。（×） 3. 洁净室（区）的工作人员不能化妆，但可以戴戒指和项链。（×） 4. 消毒可以杀灭物体上的所有微生物，而灭菌只杀死物体上的病原微生物。（×） 5. 微生物数量多、分布广，但繁殖不快，适应性不强。（×） 6. 药品中存在微生物并不一定会引起药品变质。（×） 7. 洁净区中的所有操作均不应大幅度或快速动作。（√） 8. 一个不锈钢托盘擦拭得非常光亮，因此它不存在微生物污染。（×） 9.药品中添加抑菌剂，可以杀灭含有的全部微生物。（×） 10.多数细菌的最适培养温度时30~35℃. （√） 二. 填空题（每空2分，共40分） 1. 细菌按其形态不同，主要分为球菌、杆菌和螺旋菌三类，多以二分裂方式繁殖。 2. 洁净室（区）应定期消毒。使用的消毒剂不得对设备、物料和成品产生污染。 消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药菌株。 3. 细菌的生长曲线包括四个生长时期为延滞期、对数期、稳定期、衰亡期。 4. 形体最微小，结构最简单的微生物是病毒。 5. 微生物生长繁殖所需的营养物质主要有水、碳源、氮源、能源、无机盐和生长因子等。 6.酵母菌最最主要的繁殖方式是芽殖。 7. 大肠杆菌在合适的生长条件下， ~20 分钟便可繁殖一代 三、选择题（每题2分，共16分）
1 不属于细胞生物的微生物（ B ） A、细菌 B、病毒 C、真菌 D、放线菌 2 抗生素产生菌中，其主要产生菌是（ C ） A、真菌 B、酵母菌 C、放线菌 D、病毒 3. 细菌的测量单位。( B ) B.μm 4. 酵母菌在自然界中分布很广，尤其喜欢在的环境中生长。( A ) A.偏酸性且含糖较多 B.偏酸性且含糖较少 C.偏碱性且含糖较多 D.偏碱性且含糖较少 5. 真菌生长最适的温度为℃。( B ) A. 16～22， B. 23～28， C. 30～35， D. 28～35 6. 下列不属于辐射灭菌的是。( D ) A.紫外线灭菌法 B.电离辐射灭菌法 C.微波灭菌法 D.高压蒸汽灭菌法 7. 细菌液体培养过程中哪一个阶段细菌数以几何级数增加（ B ） A、延迟期 B、对数期 C、稳定期 D、衰亡期 8. 波长为的紫外线最具有杀菌作用。（ C ） A、100~200nm B、150~250nm C、200~300nm D、250~300nm 四. 多项选择题（每题3分，共24分） 1. 微生物的特征有。（ ABCD ） A.体积小面积大 B.吸收多转化快 C.生长旺繁殖快 D.适应强变异频 2. 适用于干热灭菌的物品有。（ AB ） A.玻璃器皿 B.瓷器 C.糖类、明胶 D.饮用水 3. 属于原核细胞型微生物的有。（ AC ） A.细菌 B.酵母菌 C.放线菌 D. 流感病毒 4. 细菌的基本结构有。（ ABC ） A.细胞壁 B.细胞质 C.核物质 D.芽孢 5. 0.1％新洁尔灭消毒的作用机制是：（ BD ）