分子生物学作业

一种快速简便的伪狂犬病毒EP0基因RT-qPCR检测方法的构建

1 材料与方法

1.1病毒

伪狂犬病病毒变异株JS-2012株为实验室分离鉴定并保存[15]。LLT单个启动子缺失病毒JS-L1R1 [16]、双启动子缺失病毒JS-L1R3和JS-UL1R3均由本实验构建和保存。

1.2主要试剂

反转录试剂盒、PBS磷酸盐缓冲液、Trizol试剂均购自中国赛默飞世尔公司；荧光定量PCR所用试剂购自Takara公司；细胞培养基DMEM购自上海西格玛奥德里奇公司；培养细胞所用FBS胎牛血清、消化胰酶0.25%Trypsin-EDTA（1×）购自Invitrogen（美国）。

1.3接毒以及RNA的提取

接种用细胞均匀的铺在六孔板中，待细胞长至90%以上时接毒。按照1MOI的剂量接种细胞，放置细胞培养箱（37℃、5% CO2)中吸附1h后弃掉病毒液，换成含2%的FBS培养基继续放置细胞培养箱中培养。在接毒8h后按照Trizol总RNA提取液说明书提取样品的总RNA。

1.4 DNaseⅠ消化

按照DNaseⅠ消化试剂盒使用说明书进行操作，消化体系为25μL：总DNA模板为21.5μL，DNaseⅠ消化酶为1μL，10×DNaseⅠReaction buffer 为2.5μL，轻轻

混匀后放置37℃水浴30min，之后加入0.25μL的0.5M的EDTA，最后在75℃水浴10min以终止反应。

1.5反转录过程

按照反转录试剂盒说明书进行操作，反转录总体系为20μL：RNA模板为8μL，Random primer（0.1μg/μL）为1μL，RNase-free water 为3μL，轻轻混匀后放置65℃水浴5min，立即放冰上备用。然后加入5×Reaction buffer 4μL，10mmol/L dNTP Mix 2μL，Ribolock RNase Inhibitor（20U/μL）1μL，Revert Aid M-MuL VRT（200U/μL）1μL，轻轻混匀后先放置25℃反应5min，之后45℃反应60min，最后放置70℃终止反应5min。

1.6 RT-qPCR方法的构建以及优化

根据本实验室获得的两种不同剪接方式的EP0基因序列对比结果分析，采用Primer 5软件设计了荧光定量检测引物，EP0334F：5-GGAAGAGGATGAGCCGGTCT-3；EP0442R：5-GGTTCATCCCGTGCTCCTG-3。荧光定量反应体系为：2×SYBR Green Premix ExTaqTM 10μL，上下游引物均为0.4μL，cDNA为2μL，最后用RNase-Free water 补足至20μL。并设计了3个退火温度（分别为55℃、60℃和65℃），选择反应信号强度最高，Ct值最小的退火温度作为最适反应条件。

1.7病毒基因组对RT-qPCR方法的影响

提取病毒的RNA后，将所得样品分为两份处理，一份利用DNaseⅠ消化处理，

一份不使用DNaseⅠ消化，检测DNaseⅠ消化前后的RNA中EP0基因是否表达。

1.8不同反转录引物对RT-qPCR方法的影响

分别选择反转录试剂盒中的Random Primer和Oligo（dT）对所提取的RNA进行反转录，检测不同反转录引物对EP0基因表达量的影响。

1.9 EP0基因的时态表达特征

根据JS-2012的病毒滴度按照1MOI的剂量接种细胞，分别在2h、4h、8h、12h 和16h收取病毒RNA，检测EP0基因的动态表达特征。

1.10 RT-qPCR方法的初步临床应用

将JS-2012野毒和LLT启动子缺失突变病毒按照104个TCID50的剂量滴鼻接种小鼠，观察小鼠发病情况和死亡情况，并利用构建好的RT-qPCR方法检测小鼠三叉神经组织中EP0的表达量。

2 结果

2.1 荧光定量RT-qPCR构建及优化

试验结果显示：60℃退火温度条件下可获得良好的扩增效果。在这个反应条件下反应信号强度最高，Ct值最小（图1），并且溶解曲线单一、重复性较好（图2）。所以本RT-qPCR方法的最适反应条件为：95℃预变性 3min，95℃变性 15s，60℃退火 30 s，40个循环。反应体系为：2×SYBR Green Premix ExTaqTM 10 μL，上下游引物（10 μmol/L）均为0.4μL，cDNA为2μL，最后用RNase-Free water 补

足至20 μL。

2.2 病毒基因组对RT-qPCR方法的影响

为了避免病毒基因组对反转录的影响，因此本研究利用DNaseⅠ将提取的RNA 进行消化。结果显示：将DNaseⅠ处理前后的RNA分别作为模板进行qPCR，结果显示DNaseⅠ消化前后，均检测不到EP0的转录。PRV基因组DNA为模板，也检测不到EP0的转录。但是DNaseⅠ消化前后的RNA作为模板进行反转录，得到的cDNA作为模板进行qPCR结果显示在DNaseⅠ消化前后均能检测到EP0的表达，并且差异不显著。这表明，病毒基因组DNA的存在与否不影响该RT-qPCR方法的检测结果

2.3不同反转录引物对RT-qPCR方法的影响

为了提高反转录效率，因此本研究利用反转录试剂盒中提供的两种引物Random primer和Oligo（dT）分别对总RNA进行反转录，比较两种引物的反转录效率，RT-qPCR结果显示：利用Random Primer反转录，EP0的表达量显著高于Oligo（dT）反转录表达量（p<0.0001），具有统计学意义

2.4 EP0基因的时态表达特征

将亲本病毒按照1MOI的剂量接种六孔板，利用Trizol试剂收取不同时间点的细胞总RNA，利用上述构建好的RT-qPCR方法检测细胞中的EP0的动态表达情况。结果显示：病毒感染后2 h，EP0开始表达，这表明EP0是一种早期基因；在8 h 后EP0基因的表达量达到最高，之后随着时间的延长逐渐减少

3 结论

利用分子手段检测生物标志物已经成为了一种趋势，并且随着PCR技术的发展，更加精密、灵敏、高通量的PCR检测方法被开发并应用于临床监测。如数字PCR、

seninest-PCR、多重荧光定量PCR等。对于含量极低、容易溶解、在蛋白水平检测时受基质影响较大，以及其他不能在蛋白水平检测的生物标志物，均可以尝试在核酸水平对其检测。

近来，我们检测到的EP0基因Orf中存在一内含子（231~368 nt），本研究根据EP0基因剪接后的序列成功建立了伪狂犬病病毒EP0基因的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法。由于提出的PRV感染细胞总RNA中存在病毒基因组DNA，分析病毒基因转录水平时，常需要DNaseⅠ消化去除PRV DNA的残留，以获得准确的实验结果。本文建立的EP0基因定量检测方法，对PRV基因组DNA、PRV感染细胞总RNA及其DNaseⅠ消化处理的RNA，检测结果均为阴性；但是利用引物反转录后，DNaseⅠ消化前后的样品均能检测到EP0基因的表达，并且EP0基因的表达量差异不显著。这表明，PRV基因组的存在不干扰该方法的检测结果，在EP0转录时不需要DNaseⅠ处理总RNA样品，简化了EP0转录检测的实验流程，提高了检测效率，也可节省部分成本。同时，通过比较利用随机引物和Oligo（dT）这两种引物的反转录，结果显示随机引物具有转录检测效果。我们也利用该方法检测了EP0基因在细胞中的时态表达特征，结果显示EP0基因在感染后2 h已存在转录，8 h时表达量最高，之后逐渐减少。这显示出EP0是一种早期基因。随着感染时间延长，EP0转录量出现下降，这可能与EP0具有自调控功能有关。郭洪研究显示，EP0在转染的细胞中能抑制其自身启动子的活性，表现出对自身表达的负调控功能[17]。将该方法应用于感染不同病毒株的小鼠实验中，结果显示在小鼠三叉神经组织中均能检测到EP0基因的表达，并且LAT启动子缺失后EP0的表达比亲本毒株出现显著下降。因此我们构建的这种RT-qPCR 可以很好的检测EP0基因的表达，并且方法简单快速，也为EP0基因的功能研

究奠定基础。

参考文献

[1]杨金生, 韩福成, 宫江, 等. 猪伪狂犬病的诊断与防控措施[J].科学种养, 2019(11): 52-53.

[2]Mettenleiter T C. Molecular biology of pseudorabies (Aujeszky's disease ) virus[J].Comp Immunol Microbiol Infect Dis, 1991, 14(2): 151-63.

[3]童光志, 陈焕春. 伪狂犬病流行现状及我国应采取的防制措施[J].中国兽医学报, 1999(1): 4-5.

[4]Klupp B G, Hengartner C J, Mettenleiter T C, et al. Complete, annotated seque nce of the pseudorabies virus genome[J].J Virol, 2004, 78(1): 424-440.

[5]Rziha H J, Mettenleiter T C, Ohlinger V, et al. Herpesvirus (pseudorabies virus) latency in swine: occurrence and physical state of viral DNA in neural tissues[J].Vi rology, 1986, 155(2): 600-613.

分子生物学试题及答案

分子生物学试题及答案

分子生物学试题及答案一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。

除了5’ 3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（ IF-2 ）和（IF-3 ）。4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。 5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（ DNA重组技术）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（ hnRNA在转变为mRNA 的过程中经过剪接，）、

分子生物学作业

分子生物学作业 一、名词解释 1.断裂基因 真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区相互间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因成为断裂基因。 2.单核苷酸多态性 单核苷酸多态性是由基因组DNA上的单个碱基的变异引起的DNA 序列多态性。是人群中个体差异最具代表性的DNA多态性，相当一部分还直接或间接与个体的表型差异、对疾病的易感性或抵抗能力、对药物的反应性等相关。单核苷酸多态性被认为是一种能稳定遗传的早期突变。 一、简答题 1.简述真核生物基因组的结构与功能特点。 ①真核生物基因组DNA与蛋白质结合形成染色体，储存于细胞核 内，除配子细胞外，体细胞内基因组是双份的（即双倍体），有两份同源的基因组。 ②真核生物的基因转录产物为单顺反子。即一个结构基因经过转 录生成一个mRNA分子，再翻译生成一条多肽链。 ③真核生物基因组存在重复序列，重复次数可达百万次以上。 ④真核生物基因组中不编码的区域多于编码的区域。 ⑤真核生物的大部分基因都含有内含子，因此，基因是不连续的

（断裂基因）。 ⑥真核生物基因组远远大于原核生物的基因组，具有多复制起始 点，而每个复制子的长度较小。 2.试述双向凝胶电泳技术的基本原理。 双向凝胶电泳技术是指第一向的固相pH梯度等电聚焦电泳与第二向SDS-PAGE组成的分离系统，也称双向聚丙烯酰胺凝胶电泳，简称2-DE。等电聚焦电泳是基于蛋白质等电点（pI）的差异进行分离，SDS-PAGE则是根据蛋白质分子量（Mw）的不同进行分离。 其中等电聚焦指：在电场中电泳基质形成一个从正极到负极不断增大的PH梯度，由于蛋白质为两性电解质，带负电荷的蛋白质分子向正极移动，待正电荷的蛋白质分子向负极移动，当蛋白质分子运动到各自的PI处时，所带净电荷变为零，于是停止迁移而留在该位置上，这种不同的蛋白质分别聚焦在各自的PI处，形成一条狭窄稳定的区带而彼此分开的现象就称为等电点聚焦。 SDS-PAGE是在PAGE系统中加入SDS和还原剂后所组成的电泳系统。SDS是一种阴离子去垢剂，疏水端能插入蛋白质分子内，破坏蛋白质分子内的氢键及疏水作用，改变蛋白质分子的三级和四级结构；还原剂则断裂蛋白质分子内的二硫键，使蛋白质分子去折叠，结构变得舒展。蛋白质分子与SDS充分结合后，形成带负电荷的蛋白质-SDS复合物，所带负电荷大大超过蛋白质分子原有的电荷量，消除了不同分子间原有电荷的差异。蛋白质-SDS复合物在聚丙烯酰胺凝胶电泳系统中的迁移率不再与电荷相关，而主

《公共行政学》综合练习题(四)

《行政管理学》课程综合练习题 （四） （第13—16章） 第十三章法治行政 综合习题 一、填空题 1．据考，“法治”一词是古希腊人最早提出的。 2．在近代英国，是第一个论及国家政治与法律的关系的人。 3．法国最有代表性的法治论者是孟德斯鸠和卢梭，他们虽然都属于启蒙思想家，但法治观念也不完全相同。孟德斯鸠注重的是“”。卢梭则 以为核心。 4．法治行政的特点包括职权法定、、法律优先、、职权与职责统一等方面。 5．行政机关的法定职权，一般有两种形式，一是由规定，大都以概括之语言，划定各机关的职责范围；二是由单行的，规定某一具体事项由哪一行政机关管辖。 6．行政立法的一般程度是规划、、审查、、签署公布和。 7．规划是行政立法的启动步骤。一般而言，立法规划分为五年规划和。 8．国务院对行政法规的审议，一般通过来进行。 9．行政法规和规章审议通过后，须经行政立法机关的行政首长签署。国务

院制定的行政法规，由签署；部门规章由相应的签署；地方政府规章由省长、自治区主席或市长签署。 10．根据《立法法》，行政法规和规章应当在公布后的天内报有关部门备案。 11．行政法规的制定主体是。 12．《立法法》对制定行政法规主要规定的程序是：（1）立项和起草；（2）；（3）法规草案的审查；（4）决定；（5）公布；（6）刊登。 13．国务院行使立法监督权的工作机构是，它具体负责法规、规章的备案审查和管理工作，即立法监督工作。 14．行政复议的全面审查原则包括和适当性审查两个部分。 15．1989年《》的公布，标志着中国行政法制建设进入了一个新的历史时期。 16．人民法院裁定的管辖有移送管辖、和管辖权转移三种。 17行政诉讼的程序包括起诉和受理；；二审程序；；诉讼中止、、送达等。 18．行政赔偿的具有代表性的归责原则是无过错归责原则、以及违法归责原则。 19．行政赔偿责任的构成要件有侵权行为主体、、损害的事实以及。 20．行政赔偿所针对的损害包括物质损害和。物质损害又可分为和间接损害。 二、单项选择题 1．据考，“法治”一词是古希腊人（）最早提出的。 A．毕达哥拉斯B．梭伦 C．亚里士多德D．柏拉图 2．根据《立法法》，行政法规和规章应当在公布后的（）天内报有关部门备案。

分子生物学练习题及答案

分子生物学试题 一、名词解释 I. cDNA与cccDNA: cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2?标准折叠单位：蛋白质二级结构单元a-螺旋与折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块， 此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3. CAP环腺苷酸（cAMP受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ）, cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP （cAMP activated protein ） 4. 回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5. micRNA 互补干扰RNA或称反义RNA与mRNA序列互补，可抑制mRNA勺翻译。 6. 核酶：具有催化活性的RNA在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7. 模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9. 弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10. 魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生 这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸（ppGpp）和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 II. 上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA -35区的TGACA^增强子，弱化子等。 12. DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。 13. SD序列：是核糖体与mRN黠合序列，对翻译起到调控作用。 14. 单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15. 考斯质粒：是经过人工构建的一种外源DNA载体，保留噬菌体两端的COS 区，与质粒连接构成。 16. 蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码3半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-3 -D-半乳 糖苷）产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛选重组细菌。 称之为蓝-白斑筛选。 17?顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。 18. Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5' 宀3'外切酶活性 19. 锚定PCR用于扩增已知一端序列的目的DNA在未知序列一端加上一段多聚 dG的尾巴，然后分别用多聚dC 和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20. 融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1. DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2. RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。 3. 原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1 ）、（IF-2 ）和（IF-3 ）。 4. 蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。 5. 启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6. 分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。

(完整版)分子生物学试题及答案(整理版)

分子生物学试题及答案 一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA、-35区的TGACA 及增强子，弱化子等。 12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。 14．单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15．考斯质粒：是经过人工构建的一种外源DNA载体，保留噬菌体两端的COS区，与质粒连接构成。16．蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。 17．顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。18．Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（IF-2）和（IF-3）。 4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，）、 （mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法）、（可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响）、（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭）。 10．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11．半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（ S2）开始，无G时转录从（ S1）开

现代分子生物学第六章作业

现代分子生物学第六章作业 09级一班芮世杭222009317011027 1，列举两种研究基因表达模式的方法并简述其原理。 （1）基因表达序列分析技术（SAGE）是一种以DNA序列测定为基础定量分析全基因组表达模式的技术能够直接读出任何一种细胞类型或组织的基因表达信息在转录组水平上，任何长度超过9—10个碱基的核苷酸片段都可能代表一种特异性核苷酸的转录产物，因此，用特定限制性核酸内切酶分离转录产物中具有基因特异性的9—10个碱基的核苷酸序列并制成标签。将这些序列标签连接，克隆，测序后，根据其占总标签数的比例即可分析其对应编码基因的表达频率。 （2）原位杂交技术（ISH）是用标记的核酸探针，经放射自显影或非放射检测体系，在组织，细胞，间期核及染色体上对核酸进行定位和相对定量研究的一种手段，分为RNA和染色体原位杂交两大类。RNA原位杂交用放射性或非放射性标记的特异性探针与被固定的组织切片反应。若细胞中存在与探针互补的mRNA分子，两者杂交产生双链RNA，课通过反射性标记或经酶促免疫显色，对该基因的表达产物做出定性定量分析。 （3）基因芯片技术（FISH）对寡核苷酸探针做特殊的修饰和标记，用原位杂交与靶染色体或DNA上特定的序列结合，再通过与荧光素分子相耦联的单克隆抗体来确定该DNA序列在染色体上的位置。 2，简述基因芯片技术对分子生物学研究的意义。 解某些基因对特定生长发育阶段的重要性；基因芯片还可用于进行基因诊断，可建立正常人特定组织、器官的基因芯片，给出标准杂交信号图。用可疑病人的cDNA做探针与之杂交，检查哪些基因的表达受抑制或激活，另可研究表达基因的生物学特性。 3，比较酵母双杂交技术和免疫共沉淀技术在研究蛋白质相互作用方面的优缺点？ （1）酵母双杂交技术称Two-hybrid system也叫interaction trap（相互作用陷井），是90年代初发展起来的分离基因的新方法，可用于分离能与已知靶蛋白质（target protein）相互作用的基因。 基本原理： 真核生物的转录因子大多是由两个结构上分开、功能上独立的结构域组成的。如GAL4的N端1-147aa是DNA结合域（BD），其C端768-881aa是转录激活域（AD）。一般情况下，AD能与GAL4效应基因启动子上游的特定DNA区段（UAS）相结合，而此时，AD 则推动了转录起始。 若用基因工程的方法，将GAL4 AD和BD分别克隆到不同的载体上，导入同一细胞株中表达，效应基因无法被激活,但可把来自不同转录因子的AD或BD区域连成一个功能基因。 主要实验过程： a. 选择缺失GAL4编码基因的酵母寄主菌株-SFY526或HF7c； b. 构建带有GAL1 UAS-启动子-lac Z（His3）的转化载体; c. 把已知的靶蛋白质编码基因克隆到pGBT9的多克隆位点上，把所有cDNA都克隆到pGAD424载体上，构成cDNA表达文库。 d. 从大肠杆菌中分别提取这两种重组质粒DNA，共转化感受态酿酒酵母菌株。 e. 将共转化的酵母菌株涂布于缺少Leu，Trp和His的培养基上，筛选表达相互作用的杂种蛋白的阳性菌落。

行政管理学课程作业及答案4

行政管理学作业4 单项选择题 第1题行政决策体制的核心()。 A、信息支持系统 B、公民磋商与参与系统 C、专家咨询系统 D、领导决策系统 答案：D 第2题世界上第一个建立文官制度的国家是()。 A、法国 B、美国 C、中国 D、英国 答案：D 第3题非执政党和非国家机关对行政行为的监督称为()。 A、法制监督 B、事前监督 C、事中监督 D、社会监督 答案：D 第4题行政执行过程的第一阶段是()。 A、实施阶段 B、总结阶段 C、协调阶段 D、准备阶段 答案：D 第5题批准是一种约束力较强的()监督方式。其内容包括：要求监督对象报送审批材料、审查和批准

(含不批准)三个步骤。 A、事先 B、事中 C、事后 D、全面 答案：A 第6题高斯发表于1936年，提出了公共行政和公共行政环境之间的关系问题并予以研究的行政学论著是()。 A、《公共行政生态学》 B、《政府生态学》 C、《美国社会与公共行政》 D、《比较公共行政模式》 答案：C 第7题回归后的香港行政区和澳门行政区属于()的行政区。 A、现代型 B、特殊型 C、传统型 D、发展型 答案：B 第8题构成公共组织结构的基本要素是()，它是公共组织结构的支撑点和联络点。 A、行政职位 B、职能目标 C、行政职权 D、行政人员 答案：A 第9题我国由人民代表投票选举产生政府领导者的制度属于()。 A、聘任制

B、委任制 C、考任制 D、选任制 答案：D 第10题根据《立法法》，行政法规和规章应当在公布后的()天内报有关部门备案。 A、15 B、30 C、45 D、60 答案：B 多项选择题 第11题我国公务员制度的主要特点是（）。 A、体现了分类管理原则 B、体现了“政务官”与“事务官”划分的原则 C、具有合理的竞争择优机制 D、体现了“政治中立”的原则 E、具有健全的法规体系 答案：A|C|E 第12题职位受社会政治、经济发展状况制约，其主要特点是（）。 A、职位是以“事”为中心确定的 B、职位是以“人”为中心确定的 C、职位的数量有限 D、职位具有相对稳定性 E、职位上的行政领导人员担任职务与责任的时间长短、职务与责任是否主要，对职位本身产生影响答案：A|C|D 第13题下列属于市场失效范围的有（）。 A、不平等问题

(完整版)分子生物学复习题及其答案

一、名词解释 1、广义分子生物学：在分子水平上研究生命本质的科学，其研究对象是生物大分子的结构和功能。2 2、狭义分子生物学：即核酸（基因）的分子生物学，研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程，以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和酶的结构与功能 3、基因：遗传信息的基本单位。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位，是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的RNA病毒而言则是RNA序列)。 4、基因：基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，包含产生一条多肽链或功能RNA 所必需的全部核苷酸序列。 5、功能基因组学：是依附于对DNA序列的了解，应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。 6、蛋白质组学：是以蛋白质组为研究对象，研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。 7、生物信息学：对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输 8、蛋白质组：指的是由一个基因组表达的全部蛋白质 9、功能蛋白质组学：是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。 10、单细胞蛋白：也叫微生物蛋白，它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而，单细胞蛋白不是一种纯蛋白质，而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。 11、基因组：指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。 12、C值：指生物单倍体基因组的全部DNA的含量，单位以pg或Mb表示。 13、C值矛盾：C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。 14、重叠基因：共有同一段DNA序列的两个或多个基因。 15、基因重叠：同一段核酸序列参与了不同基因编码的现象。 16、单拷贝序列：单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次，因而复性速度很慢。单拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息，编码各种不同功能的蛋白质。 17、低度重复序列：低度重复序列是指在基因组中含有2～10个拷贝的序列 18、中度重复序列：中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万（<105）次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序，但慢于高度重复顺序。 19、高度重复序列：基因组中有数千个到几百万个拷贝的DNA序列。这些重复序列的长度为6~200碱基对。 20、基因家族：真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因，可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。 21、基因簇：基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位，定位于染色体的特殊区域。 22、超基因家族：由基因家族和单基因组成的大基因家族，各成员序列同源性低，但编码的产物功能相似。如免疫球蛋白家族。 23、假基因：一种类似于基因序列，其核苷酸序列同其相应的正常功能基因基本相同、但却不能合成功能蛋白的失活基因。 24、复制：是指以原来DNA（母链）为模板合成新DNA（子链）的过程。或生物体以DNA/RNA

现代分子生物学第四章作业【修订版】

现代分子生物学第四章作业（5-13题） 222009317011128 牛旭毅2011.10.15 5，比较原核与真核的核糖体组成？ 答：相同点：核糖体是一个致密的核糖核蛋白颗粒，可以解离为两个亚基，每个亚基都含有一个相对分子质量较大的rRNA和许多不同的蛋白质分子。 不同点：（1）原核生物核糖体由约2/3的RNA及1/3的蛋白质组成。真核生物核糖体中RNA占3/5，蛋白质占2/5。（2）大肠杆菌核糖体小亚基由21种蛋白质组成，分别用S1……S21表示，大亚基由33种蛋白质组成，分别用L1……L33表示。真核生物细胞核糖体大亚基含有49种蛋白质，小亚基有33种蛋白质。 6，什么是SD序列？其功能是什么？ 答：定义：因澳大利亚学者夏因(Shine)和达尔加诺(Dalgarno)两人发现该序列的功能而得名。信使核糖核酸(mRNA)翻译起点上游与原核16S 核糖体RNA或真核18S rRNA 3′端富含嘧啶的7核苷酸序列互补的富含嘌呤的3～7个核苷酸序列(AGGAGG)，是核糖体小亚基与mRNA结合并形成正确的前起始复合体的一段序列。 功能：此序列富含A-G，恰与16SRNA3’端富含T-C的序列互补，因此mRNA 与核蛋白体sRNA容易配对结合。因此SD序列对mRNA的翻译起重要作用。 7，核糖体有哪些活性中心？ 答：核糖体有多个活性中心，即mRNA结合部位、结合或接受AA- tRNA部位（A 位）、结合或接受肽酰-tRNA的部位（P位）、肽基转移部位及形成肽键的部位（转肽酶中心），此外还应有负责肽链延伸的各种延伸因子的结合位点。 8，真核生物与原核生物在翻译起始过程中有什么区别？ 答：原核生物的起始tRNA是fMet-tRNA(fMet上角标），30s小亚基首先与mRNA 模板相结合，再与fMet-tRNA(fMet上角标）结合，最后与50s大亚基结合。 真核生物的起始tRNA是Met-tRNA(Met上角标），40s小亚基首先与Met-tRNA(Met上角标）相结合，再与模板mRNA结合，最后与60s大亚基结合生成起始复合物。真核生物蛋白质生物合成的起始机制与原核生物基本相同，其差异主要是核糖体较大，有较多的起始因子参与，其mRNA具有m7GpppNp帽子结构，Met-tRNA （Met上角标）不甲酰化，mRNA分子5' 端的“帽子”参与形成翻译起始复合物。9，链霉素为什么能预制蛋白质合成？ 答：链霉素是一种碱性三糖，干扰fMet-tRNA与核糖体的结合，从而阻止蛋白质合成的正确起始，并导致mRNA的错读。若以poly（U）作模板，则除苯丙氨酸（UUU）外，异亮氨酸（AUU）也会掺入。链霉素的作用位点在30S亚基上。

《公共行政学》综合练习题(四).

《行政管理学》课程综合练习题 (四 (第13—16章 第十三章法治行政 综合习题 一、填空题 1.据考,“法治”一词是古希腊人最早提出的。 2.在近代英国,是第一个论及国家政治与法律的关系的人。 3.法国最有代表性的法治论者是孟德斯鸠和卢梭,他们虽然都属于启蒙思想家,但法治观念也不完全相同。孟德斯鸠注重的是“”。卢梭则 以为核心。 4.法治行政的特点包括职权法定、、法律优先、、职权与职责统一等方面。 5.行政机关的法定职权,一般有两种形式,一是由规定,大都以概括之语言,划定各机关的职责范围;二是由单行的,规定某一具体事项由哪一行政机关管辖。 6.行政立法的一般程度是规划、、审查、、签署公布和。 7.规划是行政立法的启动步骤。一般而言,立法规划分为五年规划和。 8.国务院对行政法规的审议,一般通过来进行。 9.行政法规和规章审议通过后,须经行政立法机关的行政首长签署。国务 院制定的行政法规,由签署;部门规章由相应的签署;地方政府规章由省长、自治区主席或市长签署。

10.根据《立法法》,行政法规和规章应当在公布后的天内报有关部门备案。 11.行政法规的制定主体是。 12.《立法法》对制定行政法规主要规定的程序是:(1立项和起草; (2;(3法规草案的审查;(4决定;(5公布;(6刊登。 13.国务院行使立法监督权的工作机构是,它具体负责法规、规章的备案审查和管理工作,即立法监督工作。 14.行政复议的全面审查原则包括和适当性审查两个部分。 15.1989年《》的公布,标志着中国行政法制建设进入了一个新的历史时期。 16.人民法院裁定的管辖有移送管辖、和管辖权转移三种。 17行政诉讼的程序包括起诉和受理;;二审程序;;诉讼中止、、送达等。 18.行政赔偿的具有代表性的归责原则是无过错归责原则、以及违法归责原则。 19.行政赔偿责任的构成要件有侵权行为主体、、损害的事实以及。 20.行政赔偿所针对的损害包括物质损害和。物质损害又可分为和间接损害。 二、单项选择题 1.据考,“法治”一词是古希腊人(最早提出的。 A.毕达哥拉斯 B.梭伦 C.亚里士多德

分子生物学历年大题

2012年1月分子生物学自考试卷大题 26.半不连续复制 27.上游启动子元件 28.遗传密码 29.报告基因 30.锌指结构 31.简述DNA双螺旋结构模型 32.简述启动子的作用特点 33.简述原核生物蛋白质生物合成的起始过程 34.简述半乳糖操纵子的结构特点 35.简述在原核生物翻译水平上影响基因表达调控的因素 36.试述利用λ噬菌体构建基因组DNA文库的方法 37.试述真核生物基因表达调控的主要特点 2011年7月分子生物学自考试卷大题 26.SOS反应 27.RNA再编码 28.cDNA文库 29.RNA干扰 30.物理图谱 31.比较原核生物与真核生物在复制过程中的差异。 32.简述增强子的作用特点。

33.简述CAP对gal操纵子的作用。 34.真核生物在转录前对基因表达调控的方式有哪些？ 35.反式作用因子有哪些结构特征。 https://www.wendangku.net/doc/da9286395.html,c操纵子的调控机理。 37.试述蛋白质合成的基本过程，并比较原核与真核生物在蛋白质合成过程中的差异。 2010年10月： 26.C值反常 27.同工Trna 28.释放因子 29.细菌转化 30.选择性剪接 31.简述DNA复制的特点 32．核糖体上与翻译有关的位点有哪些？ 33.简述操纵子的一般结构 34.简述真核生物DNA甲基化抑制基因表达的原因 35.简述细胞内癌基因的激活方式。 36.色氨酸操纵子在高色氨酸浓度和低色氨酸浓度时表达水平相差约600倍，但阻遏作用仅只能使转录水平降低70倍，请利用色氨酸操纵子的调控机制解释上述现象。 37.试比较原核生物与真核生物转录产物mRNA的异同。

2010年7月： 名词解释：同源域基因、基因定点突变、基因、遗传密码、冈崎片段简答：1.简述细胞中原癌基因转变为癌基因的主要途径。 2.简述sanger双脱氧链终止法测序基本原理。 3.简述原核生物蛋白质合成具体步骤。 4.简述大肠杆菌RNA聚合酶中a因子生物学功能。 简单应用：色氨酸操纵子调节作用。 论述：真核生物与原核生物在基因结构、转录和翻译主要差异。 2010年1月部分大题： 名词解释：中心法则、转座子、基因敲除、增强子、基因治疗 简单：1.简述原核生物RNA转录终止信号分类、结构特点。 2.简述tRNA mRNA tRNA各自生物学功能。 3.简述聚合酶链式反应（PCR）基本原理。 简单应用：乳糖操纵子的调节功能。 论述：真核生物基因表达可在多个层次上进行调控，根据发生先后顺序，叙述真核生物基因表达调控过程。 09年10月部分大题： 名词解释：半不连续复制、基因家族、基因扩增 简答：1.RNA编辑生物学意义。 2.转录与翻译不同点

分子生物学习题集及答案

第一章绪论 1. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的？ 分子生物学是从分子水平研究生命本质的一门新兴边缘学科，它以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象，是当前生命科学中发展最快并正在与其它学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域。狭义：偏重于核酸的分子生物学，主要研究基因或 DNA 的复制、转录、表达和 调节控制等过程，其中也涉及与这些过程有关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。分子生物学的发展为人类认识生命现象带来了前所未有的机会，也为人类利用和改造生物创造了极为广阔的前景。所谓在分子水平上研究生命的本质主要是指对遗传、生殖、生长和发育等生命基本特征的分子机理的阐明，从而为利 用和改造生物奠定理论基础和提供新的手段。这里的分子水平指的是那些携带遗传信息的核酸和在遗传信息传递及细胞内、细胞间通讯过程中发挥着重要作用的蛋白质等生物大分子。这些生物大分子均具有较大的分子量，由简单的小分子核苷酸或氨基酸排列组合以蕴藏各种信息，并且具有复杂的空间结构以形成精确的相互作用系统，由此构成生物的多样化和生物个体精确的生长发育和代谢调节控制系统。阐明这些复杂的结构及结构与功能的关系是分子生物学的主要任务。 2. 分子生物学研究内容有哪些方面？ 分子生物学主要包含以下三部分研究内容：A.核酸的分子生物学，核酸的分子生物学研究核酸的结构及其功能。由于核酸的主要作用是携带和传递遗传信息，因此分子遗传学（moleculargenetics）是其主要组 成部分。由于 50 年代以来的迅速发展，该领域已形成了比较完整的理论体系和研究技术，是目前分子生物学内容最丰富的一个领域。研究内容包括核酸/基因组的结构、遗传信息的复制、转录与翻译，核酸存 储的信息修复与突变，基因表达调控和基因工程技术的发展和应用等。遗传信息传递的中心法则（centraldogma）是其理论体系的核心。 B.蛋白质的分子生物学蛋白质的分子生物学研究执行各种生命功能的主要大分子──蛋白质的结构与功能。尽管人类对蛋白质的研究比对核酸研究的历史要长得多，但由于其研究难度较大，与核酸分子生物学相比发展较慢。近年来虽然在认识蛋白质的结构及其与功能关系方面取得了一些进展，但是对其基本规律的认识尚缺乏突破性的进展。 3. 分子生物学发展前景如何？ 21 世纪是生命科学世纪，生物经济时代，分子生物学将取得突飞猛进的发展，结构基因组学、功能基因 组学、蛋白质组学、生物信息学、信号跨膜转导成为新的热门领域，将在农业、工业、医药卫生领域带来新的变革。 4. 人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么？ 社会意义：人类基因组计划与曼哈顿原子计划、阿波罗登月计划并称为人类科学史上的三大工程，具有 重大科学意义、经济效益和社会效益。 1）.极大地促进生命科学领域一系列基础研究的发展，阐明基因的结构与功能关系、生命的起源和进化、细胞发育、生产、分化的分子机理，疾病发生的机理等，为人类自身疾病的诊断和治疗提供依据，为医药产业带来翻天覆地的变化； 2）.促进生命科学与信息科学、材料科学和与高新技术产业相结合，刺激相关学科与技术领域的发展，带动起一批新兴的高技术产业； 3）.基因组研究中发展起来的技术、数据库及生物学资源，还将推动对农业、畜牧业（转基因动、植物）、能源、环境等相关产业的发展，改变人类社会生产、生活和环境的面貌，把人类带入更佳的生存状态。 科学意义： 1）确定人类基因组中约 5 万个编码基因的序列基因在基因组中的物理位置，研究基因的产物及其功能 2）了解转录和剪接调控元件的结构和位置，从整个基因组结构的宏观水平上了解基因转录与转录后调节 3）从总体上了解染色体结构，了解各种不同序列在形成染色体结构、DNA 复制、基因转录及表达调控中 的影响与作用 4）研究空间结构对基因调节的作用

分子生物学作业(完整版)

分子生物学作业 第一次 1、Promoter：（启动子）一段位于结构基因5…端上游、能活化RNA聚合酶的DNA序列，是RNA聚合酶的结合区，其结构直接关系转录的特异性与效率。 2、Cis-acting element：（顺式作用元件）影响自身基因表达活性的非编码DNA序列，组成基因转录的调控区包括：启动子、增强子、沉默子等 一、简述基因转录的基本特征。（作业）P35 二、简述蛋白质生物合成的延长过程。P58 肽链的延伸由于核糖体沿mRNA5 ′端向3′端移动，开始了从N端向C端的多肽合成。 起始复合物，延伸AA-tRNA，延伸因子，GTP,Mg 2+，肽基转移酶 每加一个氨基酸完成一个循环，包括: 进位：后续AA-tRNA与核糖体A位点的结合 起始复合物形成以后，第二个AA-tRNA在EF-Tu作用下，结合到核糖体A位上。 通过延伸因子EF-Ts再生GTP,形成EF-Tu?GTP复合物，参与下一轮循环。 需要消耗GTP，并需EF-Tu、EF-Ts两种延伸因子。 转位：P位tRNA的AA转给A位的tRNA,生成肽键； 移位：tRNA和mRNA相对核糖体的移动； 核糖体向mRNA3’端方向移动一个密码子，二肽酰－tRNA2进入P位，去氨酰-tRNA 被挤入E位，空出A位给下一个氨酰-tRNA。移位需EF-G并消耗GTP。 三、真核细胞mRNA分子的加工过程有哪些？P40 1、5’端加帽 加帽指在mRNA前体刚转录出来或转录尚未完成时，mRNA前体5’端在鸟苷酸转移酶催化下加G,然后在甲基转移酶的作用下进行甲基化。 帽子的类型 0号帽子(cap1) 1号帽子(cap1) 2号帽子(cap2) 2、3’端的产生和多聚腺苷酸花 除组蛋白基因外，真核生物mRNA的3?末端都有poly(A)序列，其长度因mRNA种类不同而变化，一般为40～200个A 。 大部分真核mRNA有poly(A)尾巴，1/3没有。 带有poly(A)的mRNA称为poly(A)+， 不带poly(A)的mRNA称为poly(A)－。 加尾信号： 3?末端转录终止位点上游15～30bp处的一段保守序列AAUAAA。 过程： ①内切酶切开mRNA3?端的特定部位； ②多聚A合成酶催化加poly(A)。 3、RNA的剪接

《公共行政学》作业1-4参考答案教学文案

《公共行政学》作业1-4参考答案

《公共行政学》作业1答案 一、名词解释： 1、地方政府体制：是地方政府按照一定的法律或标准划分的政府组织形式。。 2、非营利组织：是指组织的设立和经营不是以营利为目的，且净盈余不得分配，由志愿人员组成，实行自我管理的、独立的、公共或民间性质的组织团体。 3、人事行政：是指国家的人事机构为实现行政目标和社会目标，通过各种人事管理手段对公共行政人员所进行的制度化和法治化管理。 4、公文管理：就是对公文的创制、处置和管理，即在公文从形成、运转、办理、传递、存贮到转换为档案或销毁的一个完整周期中，以特定的方法和原则对公文进行创制加工、保管料理，使其完善并获得功效的行为或过程。 二、单项选择： 1．被称为“人事管理之父”和行为科学的先驱者的是( C )。 A．普耳 B．斯密 C．欧文 D．斯图亚特 2．公共行政生态学的代表作《公共行政生态学》于1961年发表，该书的作者是 ( A )。 A．里格斯 B．古立克 C．德鲁克 D．高斯 3．20世纪30年代，古立克把管理职能概括为( A )。 A．计划、组织、人事、指挥、协调、报告、预算 B．领导、决策、组织、指挥、协调、人事、预算 C．计划、领导、人事、指挥、组织、报告、预算 D．计划、领导、人事、沟通、协调、组织、预算 4、职位分类最早产生于19世纪的（ B ）国，后被许多国家所效仿。 A、法 B、美 C、中 D、英 5、由立法机关或其他任免机关经过考察而直接任命产生行政领导者的制度是（C）。 A、选任制 B、考任制 C、委任制 D、聘任制 6．公共行政学研究的核心问题是( A )。 A．政府职能 B．行政监督 C．行政决策 D．行政体制 7．法国第五共和国宪法所确立的一种中央政府体制是( C )。 A．内阁制 B．总统制 C．半总统制 D．委员会制 8．内阁制，起源于18世纪的( A )国，后来为许多西方国家所采用。 A．英国 B．美国 C．日本 D．加拿大 9．我国最早提出学习行政学的是梁启超，他于1876年在( B )中提出“我国公卿要学习行政学”。

分子生物学复习题

1、分子生物学的定义。 从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学，主要指遗传信息的传递（复制）、保持（损伤和修复）、基因的表达（转录和翻译）与调控。 2、简述分子生物学的主要研究内容。 a.DNA重组技术（基因工程） （1）可被用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽 ; （2）可用于定向改造某些生物的基因组结构 ; （3）可被用来进行基础研究 b.基因的表达调控 在个体生长发育过程中生物遗传信息的表达按一定时序发生变化（时序调节），并随着内外环境的变化而不断加以修正（环境调控）。 c.生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学） 一个生物大分子，无论是核酸、蛋白质或多糖，在发挥生物学功能时，必须具备两个前提： (1)拥有特定的空间结构（三维结构）； (2)发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化。 结构分子生物学就是研究生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。它包括3个主要研究方向： (1) 结构的测定 (2) 结构运动变化规律的探索 (3) 结构与功能相互关系 d.基因组、功能基因组与生物信息学研究 3、谈谈你对分子生物学未来发展的看法？ (1)分子生物学的发展揭示了生命本质的高度有序性和一致性，是人类认识论上的重大飞跃。生命活动的一致性，决定了二十一世纪的生物学将是真正的系统生物学，是生物学范围内所有学科在分子水平上的统一。 (2)分子生物学是目前自然学科中进展最迅速、最具活力和生气的领域，也是新世纪的带头学科。

(3)分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以及信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的，同时也推动这些学科的发展。 (4)分子生物学涉及认识生命的本质，它也就自然广泛的渗透到医学、药学各学科领域中，成为现代医药学重要的基础。 1、DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的?简述其基本内容。 DNA双螺旋模型在1953年由Watson和Crick提出的。 基本内容： (1) 两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕，两条链均为右手双螺旋。 (2) 嘌呤与嘧啶碱位于双螺旋的内侧，3′,5′- 磷酸与核糖在外侧，彼此通过磷酸二酯键相连接，形成DNA分子的骨架。 (3) 双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻碱基对之间相距的高度即碱基堆积距离 为0.34nm,两个核苷酸之间的夹角为36。。 (4) 两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相连系而结合在一起，A与T相配对形成两个氢键，G与C相配对形成3个氢键。 (5) 碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制，但根据碱基互补配对原则，当一条多核苷酸的序列被确定后，即可决定另一条互补链的序列。

分子生物学复习题(有详细答案)

绪论 思考题：（P9） 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义？ 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念，即将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面？什么是反向生物学？什么是 后基因组时代？ 研究内容： DNA的复制、转录和翻译；基因表达调控的研究；DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学：是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能，在体外使基因突变，再导入体内，检测突变的遗传效应，即以表型来探索基因结构。 后基因组时代：研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件（年代、发明者、简要内容） 1953年Watson和Click发表了?脱氧核糖核苷酸的结构?的著名论文，提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年，重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术，并完成了第一个细菌基因的克隆，开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的？ 随着基因组计划的完成，人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代，人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生，如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题：（P130） 1、基因的概念如何？基因的研究分为几个发展阶段？ 概念：基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段：○120世纪50年代以前，主要从细胞的染色体水平上进行研究，属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后，主要从DNA大分子水平上进行研究，属于分