色谱实验讲义(二)
实验一 色谱实验－色谱柱效能
实验的测定
一、实验前问题：
1、根据色谱流出曲线如何确定塔板数，需要哪些参数
二、目的
1、了解色谱仪基本结构、工作原理和操作技术
2、测定理论塔板数
3、改变操作条件观察理论塔板数变化
三、原理
n=16(W
t R )2 四、仪器和试剂
气相色谱仪122， 注射器。
苯（AR ），甲苯（AR ），对二甲苯（AR ）。
五、试验步骤
1、先按各仪器操作要求调节好仪器
GC-122 OVEN 55℃
DET ：180℃ INT ：180℃
2、苯、甲苯、对二甲苯溶液溶于二硫化碳，用1μl 注射器分别注入色谱仪中，作出色谱流出曲线，
3、根据色谱流出曲线的参数算出理论塔板数。
4、改变柱温为60℃，再次测出苯的色谱流出曲线，比较塔板数
计算结果。
六、实验后问题
1、三种物质的塔数是否相同，为什么？
2、塔板数受哪此因素影响，影响结果如何？
3、浓度是否影响塔板数，为什么？
实验二色谱实验－定性分析苯混合样中各组分并计算相对校正因子
一、实验前问题
1、你准备如何测苯、甲苯、邻二甲苯、间二甲苯、对二甲苯的相对校正因子，需要哪些数据并写出简单步骤。
2、色谱定性分析根据什么？并写出简单步骤。
二、原理
1、用FID检测器对苯、甲苯、二甲苯混合试样中各组分定性，在一定操作条件下物质均有各自确定的保留值，根据混合样色谱图和标准样色谱图的各相应组分保留值之比较，确定不同组分。
三、目的
1、计算相对校正因子：设苯的响应值为1，通过其峰高和其它组分的比较，计算其它各组分的相对应苯的相对校正因子；
2、学习用保留值定性分析。
三、实验仪器和步骤
仪器：122型毛细管色谱仪
步骤：
1、注入1μl 苯，甲苯，邻、间、对二甲苯混合液；
2、用标准苯，甲苯，邻、间、对二甲苯溶液定性混合液中各峰。
3、根据以苯峰为为标准计算其它组分的相对校正因子。
四、实验后问题：
1、改变载气流速和柱温对相对校正因子的值有何影响
2、你所测的苯系混合物，能否用归一化法定量，为什么？
实验三气相色谱实验
白酒中甲醇的百分含量及其它成分的定
性检测
一、目的
1、掌握归一化法计算组分百分含量的方法；
2、了解白酒成分定性检测方法；
二、原理
用FID检测器对白酒中各组分定性，在一定操作条件下物质均有各自确定的保留值，根据混合样色谱图和标准样色谱图的各相应组分保留值之比较，确定不同组分。
三、实验部分
1、市售白酒直接进样，观察产生多少个峰？
2、利用提供的标准样确定白酒的相应色谱峰；
3、计算甲醇大致的百分含量？（甲醇等的相对校正因子按“1”计）
四、实验后问题
请同学自己查资料了解白酒分析需使用什么固定液，为什么？
实验四气相色谱实验－γ666的校正曲线绘制
一、目的
1、了解电子捕获检测器的使用方法及注意事项；
2、掌握外标法测试样的方法及注意问题。
3、区分ECD与FID在原理上的差别。
二、原理
1、电负性强元素吸收ECD的产生电子产生电流；
三、实验部分
1、查资料了解ECD检测γ-666时的灵敏度；
2、配制0.0,0.1,0.2,0.5,0.8,1.0ppm(用2ppmγ-666稀释)范围内γ-666样品的标准溶液，然后用外标法做出曲线，并计算线性回归方程及线性相关系数。
四、实验后问题：
1、ECD适用于哪些类型的有机化合物？
2、用ECD检测器测定时需要哪几种气体，对气体有要求吗？
实验五气相色谱实验－内标法测毒死蜱
含量
一、目的
1、学习内标法测组分含量方法
2、学习将内标物作为标准物，用相对校正因子法求毒死蜱农药含量。
二、原理
同样质量的不同物质在检测器上响应不一样，故需要校正因子，因为气谱条件变动产生结果不一致，用内标法测样比较准确，将内标物同时作为校正系数的标准样是准确便利地测定方法。
三、实验
1、毒死蜱样和对苯二甲酸二丁酯样分别进行气谱分析观察保留时间；
2、请同学们参考书本自行设计以对苯二甲酸二丁酯作标准物计算毒死蜱相对校正因子；
3、自行设计以对苯二甲酸二丁酯作为内标测定毒死蜱含量的方法。
实验六水果中维生素C含量的测定
（一）线性扫描极谱法
维生素C是人体必需的营养物质，广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量较多。
维生素C（还原型）纯品为白色无臭结晶，熔点190～192℃，溶于水或乙醇中，不溶于油剂。在水溶液中易被氧化，在碱性条件下易分解，在弱酸条件中较稳定。维生素C开始氧化为脱氢型抗坏血酸，如果进一步水解则生成2，3-二酮古乐糖酸，失去生理作用。
维生素C含量的测定方法很多，本实验介绍三种测定方法：线性扫描极谱法、分光光度法和HPLC法。
一．实验目的
1、了解线性扫描极谱法的原理和应用
2、用标准曲线法测定水果中维生素C的含量。
二．实验原理
还原型维生素C中的烯二醇基具有还原性，在一定电位下，它在汞滴表面氧化，产生与含量成正比的峰电流，即i K c
。
三．仪器和试剂
1．仪器JP－303示波极谱仪
2．试剂0.2mol/L的HAc-NaAc缓冲溶液（pH=4.6），
维生素C（A.R）
四．实验步骤
1、配制Vc标准溶液（100μg/mL）：准确称取10.0mg的Vc，用0.2mol/L的HAc-NaAc缓冲溶液溶解、定容至100mL。
2、绘制标准曲线：（1）分别移取Vc标准溶液（100μg/mL）0.25、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL于6个25mL的容量瓶中，用0.2mol/L 的HAc-NaAc缓冲溶液定容；（2）分别测定各溶液的极谱峰电流，测定条件如下：线性扫描极谱法，二阶导数，扫描电位－0.2V:0.2V，扫描速度100mv/s，静止时间6s；（3）以电流强度对浓度绘制标准曲线，并求出相关系数。
3、样品测定：根据水果中Vc含量，称取一定量的水果样品（保证样品信号在工作曲线范围内），加少量水（约10mL），打碎匀浆，然后加5ml 冰HAc防止Vc被氧化，并用水定容至50mL，超声15分钟，过滤。测定滤液的极谱峰电流，根据标准曲线求出水果中的Vc含量。
实验七水果中维生素C含量的测定
（二）分光光度法
一．实验目的
用分光光度法测定水果中维生素C的含量
二．实验原理
Vc在酸性介质中可定量还原Fe(III)为Fe(II)，Fe(II)与邻二氮菲生成红色的络合物，此物在波长510nm处有最大吸收。
三．仪器和试剂
1、仪器岛津1700分光光度计
2、试剂
(1) Vc标准溶液（100μg/mL）：10.0mg的Vc＋5mL冰醋酸，用水定容至100mL，
(2) HAc－NaAc缓冲液：pH=4.74，0.2mol/L
(3) Fe(III)溶液：0.1mol/L，称取硫酸铁胺（A.R）2.4g，用1mol/L
的H2SO4溶解并定容至50mL
(4)邻二氮菲：0.3%水溶液
(5)HCl溶液：10％水溶液
四．实验步骤
1．绘制标准曲线：分别移取Vc标准溶液（100μg/mL）0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL置于6支25mL比色管中，依次加HAc－NaAc缓冲液3.0mL，Fe(III)溶液3.0mL，邻二氮菲溶液1.5mL，摇匀后置于30℃的水浴中加热40分钟，然后用水稀释、定容至刻
度，摇匀后，以不含Vc的试剂溶液作空白，在510nm处测量吸光度。以吸光度对浓度绘制标准曲线，并求出相关系数。
2．样品测定：（1）根据水果中Vc含量，称取一定量的水果样品（保证样品信号在工作曲线范围内），加少量水（约10mL），打碎匀浆，用10％HCl溶液定容至100mL，超声15分钟，过滤。（2）取此样品溶液2.0mL于25mL比色管中，依次加HAc－NaAc缓冲液3.0mL，Fe(III)溶液3.0mL，邻二氮菲溶液1.5mL，摇匀后置于30℃的水浴中加热40分钟，然后用水稀释、定容至刻度，摇匀后，以不含Vc的试剂溶液作空白，在510nm处测量吸光度。根据标准曲线求出水果中的Vc含量。
实验八水果中维生素C含量的测定
（三）HPLC法
一、实验前问题：
1．查阅资料，了解常见水果如苹果、橙、橘、猕猴桃等中维生素C的含量范围；
2．根据维生素C的含量，确定取样量，使样品溶液的浓度在实验方法的定量范围内
二、目的要求
1、理解反相色谱的原理和应用；
2、掌握外标法定量测定方法、
3、根据样品中维C含量制定维C标准溶液的配制方法，然后实测维C含量。
三、实验原理
高效液相色谱是一种物理化学分离方法，具有高效分离功能，它和气相色谱在基本原理方面没有显著的不同，但其应用范围更广，可对80%的有机化合物进行分离和分析。
以液体为流动相，采用高压输送，使用高效固定相，使该法具有分离效能高、分析速度快及应用范围广等特点，并且只要样品能制成溶液，不需要气化，因此不受样品挥发性的约束，克服了GC要求
样品能够气化的弱点。在高效液相色谱中，反相色谱应用较广，它采用非极性键合相，极性流动相。HPLC主要用于复杂成分混合物的分离、定性与定量，在药物分析中已广泛用于微量有机药物及中草药有效成分的分离、鉴定与含量测定。
本实验采用C18反相柱和高灵敏度的紫外检测器，对水果中V C进行分离，利用外标法进行定量，方法简便，分析速度快，结果准确。
四、仪器与试剂
1、Waters 515高效液相色谱泵，2487双通道紫外检测器；
2、微量注射器；
3、C18反相柱，
4、V C标样：配制成100μg/mL的水溶液，加5ml冰乙酸；
五、实验步骤
1、结合实物了解仪器各部分作用及使用方法；
2、流动相配制：0.05mol/L NaAc和乙腈比例为95:5
3、在UV1700紫外分光光度计扫描Vc标准溶液，确定它的最大吸收波长。
4、用V C标样配制成2.5, 5.0, 7.5, 10.0 15.0 20.0μg/mL绘制工作曲线.
5、样品溶液：将水果打碎匀浆，根据水果中V C含量并且考虑以后步骤对浓度的影响后决定称取匀浆样品的数量，以便保证样品信号在工作曲线范围内. 匀浆样品加10ml水混合，加5ml乙酸，超声15分钟，离心10分钟。上层清液过滤按适当步骤处理后检测。
实验后问题：
1、你所处理样品含量如果不在定量范围内，你将如何处理？
2、加乙酸的目的是什么？
3、实验中所处理的样品，如果含量不在标准曲线的范围内，应该如何处理？
4、比较三种测定方法的优缺点。它们对样品有无特殊要求？
实验九 HPLC 实验－可口可乐中咖啡因
的测定
一、实验前问题：
1、根据咖啡因的溶解度你还能提出除氯仿外其它的萃取剂吗？
二、原理
咖啡因在咖啡中含1.2%~1.8%，茶叶中2.0%~4.7%，可乐饮料等中均含咖啡因，LC 将咖啡因分离并且用UV 方法测定。 N N
3H 3C O O
N N CH 3
三、目的
掌握LC 操作方法和液液萃取技术，掌握通过保留时间，标准物质定性鉴别组分方法
四、实验步骤
1、自行设定方法用UV1700确定咖啡因的波长，
2、色谱条件 流动相 甲醇/水=60/40 1.0ml/min
3、咖啡因标准溶液 2,4,6,8,10mg/L
｛注：取1000ppm 的咖啡因1ml 定容到25ml 容量瓶中，此时咖啡咽浓度为40ppm ，用此溶液配制上述标准曲线。｝
4、样品处理100ml可口可乐→250ml烧杯中，超声脱气赶走CO2 5min以上，后过滤，取20.00ml可口可乐过滤于125ml分液漏斗中，加1.0ml饱和NaCl,1mol/LNaOH 1ml ,用20ml氯仿分三次萃取（10ml、5ml 、5ml）
氯仿提取液分离后经过装无水Na2SO4的小漏斗（颈部放脱脂棉，上面铺一层Na2SO4）过滤到25ml容量瓶中，如滤液不足，用少量氯仿多次洗涤小漏斗后定容到25.00ml;再取此溶液1.00ml ，稀释到50.00ml，待测。
5、绘制工作曲线
6、根据保留时间确定咖啡因峰位置
7、计算可口可乐中的咖啡因含量（单位，mg/L)
实验十原子吸收光谱实验－汞的测定
一、实验前问题：
1、测汞时所用测汞仪时需要参比溶液吗？
2、查国家标准，自来水中含汞量是多少？并依照此标准制定相应的定量范围。
二、目的要求
掌握冷原子吸收光度法测汞
三、实验原理
汞原子蒸气波长为253.7nm的紫外光具有强烈的吸收作用，汞蒸气浓度与吸光度成正比。通过氧化分解试样中以各种形式存在的汞，使之转化可溶态汞离子进入溶液，用氯化亚锡将汞离子还原成汞原子，用净化空气做载气将汞原子载入冷原子吸收测汞仪的吸收池进行测定。
汞及其化合物属于剧毒物质，可在体内蓄积，进入水体的无机离子可转变为毒性更大的有机汞，由食物链进入人体，引起全身中毒作用。天然水中含汞极少，一般不超过0.1μg/L。
四、仪器与试剂
1、仪器：冷原子吸收测汞仪
2、试剂
（1）硫酸（GR），（2）硝酸（GR），（3）盐酸（GR），
（4）重铬酸钾（AR），（5）硝酸溶液（1：1水溶液）
（6）20%（g/ml)氯化亚锡：将20g氯化亚锡加20ml盐酸中，微热溶解，冷却后用水稀释至100ml，并加几颗锡粒密塞保存。
（7）汞标准固定液：将 0.1g重铬酸钾溶于190ml水，再加10ml 硝酸。
（8）汞标准贮备液：称取0.1354g氯化汞，用固定液溶解，转移至1000ml容量瓶中，再用固定液稀释至标线，摇匀。此溶液每毫升含100μg汞。
（9）汞标准中间液：吸取汞标准贮备液1.00ml,注入100ml容量瓶中，加固定液稀释至标线，摇匀。此溶液每毫升含1.00μg汞。
（10）汞标准使用溶液：吸取汞标准中间溶液10.00ml，注入100mL容量瓶，用固定液稀释至标线，摇匀。于室温下阴凉处保存，可稳定100天左右。此溶液每毫升含0.1000μg汞。
（11）稀释液：将0.2g重铬酸钾溶于900ml水，加入28ml硫
酸，再用水稀释至1L。
五、实验准备
1、测汞仪的线性范围0~10ppb之间，请按三（10）中的标准使用溶液配制一系列溶液作出工作曲线，然后测试样中汞。如试样中汞含量不在自己所作的工作线性范围内，请设法处理，直到测出结果（取7个点）[1]；
[1]注：分别取0.1000μg/mL汞标液，0、0.5、1.00、1.50、2.00、3.00、4.00ml定容至100ml容量瓶中——吸取0.1000μg/L汞标液的体积不足4.00ml的，用固定液补足4.00ml后再加入稀释液定容。
2、列出所有需用的试剂及玻璃仪器，配制出步骤三中溶液；
3、简单叙述测汞仪操作方法；
4、“自来水”样的配制：称0.02g重铬酸钾+90.00ml自来水，加入2.8ml浓硫酸，再用蒸馏水定容至100ml。
实验十一红外光谱法实验
一、实验前问题：
1、红外光谱主要用于检测什么？检测前要做些什么准备工作，对待测样品有何要求？
二、目的
1、了解傅立叶红外光谱的性能和使用方法；
2、了解有机分子官能团振动频率所在红外波数的大致范围。
三、原理
有机分子不同官能团在红外光谱中有不同吸收范围，可以根据这现象鉴别有关官能团。
四、实验
1、根据提供的有机物分子式，计算不饱和度；
2、制样并在在仪器上扫描有机物红外光谱图；
3、根据图找出相应的官能团；
4、结合气质联用的检测结果推测有机物结构式。
环己酮肟实验报告doc
环己酮肟实验报告 篇一：制备环己酮肟的实验 50.设计合成实验的原理和步骤。 一、以环已酮和盐酸羟胺为主要原料 【实验原理】 2 NH2OH·HCl (盐酸羟胺) + Na2CO3→NH2OH+2NaCl+ H2O +CO2 本实验以环已酮和盐酸羟胺为主要原料来制备环己酮肟。羟胺在酸性条件下稳定，因此常常做成稳定的盐酸羟胺。但是本反应中制得的环己酮肟酸性条件下不稳定易分解，在碱性环境下稳定，所以本实验的反应环境是碱性环境。 本实验中碳酸钠要过量，原因是：（1）提供碱性环境，使生成物环己酮肟稳定（2）碳酸钠弱碱性，起中和作用，使羟胺从盐酸羟胺中游离出来，与环己酮进行反应。 本实验中盐酸羟胺过量要过量，原因是：若环己酮过量，环己酮和环己酮肟的后处理比较复杂，难以提纯目的产物。 【实验步骤】 1、先在锥形瓶中加水溶解适量盐酸羟胺，再加入环己酮肟混合均匀，后将碳酸钠碱液缓慢滴加到混合液中反应，直至溶液显碱性为止。观察并记录实验现象。 2.不断搅拌，反应过程中会产生大量的CO2产生并伴有白色固体析出。用TLC跟踪反应进程，直至反应完全。
3.间歇振荡15min后用冰水浴冷却。有更多白色固体析出。 4、把产物抽滤称重并记录实验数据，后把粗产物反复洗涤、过滤2-3次后再用乙醇重结晶可得纯品环己酮肟。 5、计算理论值和收率。对本次实验进行理论分析和数据分析，得出结论。 二、环已酮和氨水、双氧水为主要原料 【实验原理】 C6H5O（环己酮）+NH3.H2O+H2O2→2H2O +C6H5=NOH(环己酮肟) 本实验以环已酮和和氨水、双氧水为主要原料来制备环己酮肟。羟胺在酸性条件下稳定，因此常常做成稳定的盐酸羟胺。但是本反应中制得的环己酮肟酸性条件下不稳定易分解，在碱性环境下稳定，所以本实验的反应环境是碱性环境，要加入氨水。 NH3.H2O、H2O2过量理由：1、提供碱性环境 2、NH3.H2O、H2O2过量，产物容易分离。若环己酮过量，若环己酮过量，环己酮和环 己酮肟的后处理比较复杂，难以提纯目的产物。 【实验步骤】 1、先搭好回流装置，取一定量的环己酮、氨水、双氧水加入单口烧瓶中，混合均匀后在一定温度下反应，观察并
薄层色谱实验
薄层色谱实验 Prepared on 22 November 2020
薄层色谱（TCL）实验 一、实验目的 1、掌握薄层色谱操作技巧 2、了解薄层色谱的基本原理和应用 二、实验原理 1、原理 薄层色谱是一种微量分析的分离过程，它将样品点在以玻璃板或铝、塑料等片材为载体的多孔吸附剂薄层的固定相上，利用流动相在特定的展开室中将混合物中的组份推移到不同距离处，在色谱展开整个过程中，样品的成份受到正反不同的力的作用。 (1)流动相利用毛细管力带着样品穿过固定相。 (2)样品与固定相的相互作用是指组份在移行过程中由于偶极-（诱导）-偶极相互作用，氢键和范德华力的作用而产生不同程度的延缓、吸附、分散、离子交换和络合等分离机理。 由于样品组份与流动相和固定相之间的相互作用力程度不同，整个毛细管流动过程中分离运动都在进行。基于这点，TLC系统（流动相和固定相）必须与样品很好地匹配。 用显色试剂处理，许多组份可在日光或紫外灯光下检视。色谱可用肉眼或使用光密度计和照相机记录或影像系统方法来评价。 2、薄层色谱的用途
1）化合物的定性检验 通过与已知标准物对比的方法进行未知物的鉴定。在条件一致的情况下，纯化合物在薄层色谱中呈现一定的移动距离，称比移值（R f值）。利用薄层色谱法可鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似化合物是否为同一种物质。 影响比移值的因素很多，如薄层的厚度，吸附剂颗粒的大小，酸碱度、活性、外界温度和展开剂纯度、组成、挥发度等。所以要获得比移值重现性就比较困难。为此，在测定某一式样时，最好用对照品和样品同时对照进行。 d2 d1 2）快速分离少量物质（几到几十u g，甚至） 3）跟踪反应进程，在进行化学反应时，常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失，来判断反应是否完成。 4）化合物纯度的检验（只出现一个斑点，且无脱尾现象，为纯物质） 3、主要操作步骤 薄层板的制备；薄层板的活化；薄层板色谱展开；薄层色谱显色与分析。 四、薄层色谱操作技巧 1、手工自制板 玻璃板的要求：用于制备薄层板的玻璃板要求表面光洁、平整，最好使用厚薄1~2mm的优质平板玻璃，普通窗玻璃一般不宜用于制作薄层板，玻璃板需
气相色谱法实验报告记录
气相色谱法实验报告记录
————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：
实验五—气相色谱法实验 姓名：张瑞芳 学号：2013E8003561147 班级：化院413班 培养单位：上海高等研究院 指导教师：李向军 组别：2013年12月30日第二组
气相色谱法实验 一、实验目的 1.了解气相色谱仪的各部件的功能。 2.加深理解气相色谱的原理和应用。 3.掌握气相色谱分析的一般实验方法。 4.学会使用FID气相色谱对未知物进行分析。 二、实验原理 1.气相色谱法基本原理 气相色谱的流动向为惰性气体，气-固色谱法中以表面积大且具有一定活性的吸附剂作为固定相。当多组分的混合样品进入色谱柱后，由于吸附剂对每个组分的吸附力不同，经过一定时间后，各组分在色谱柱中的运行速度也就不同。吸附力弱的组分容易被解吸下来，最先离开色谱柱进入检测器，而吸附力最强的组分最不容易被解吸下来，因此最后离开色谱柱。如此，各组分得以在色谱柱中彼此分离，顺序进入检测器中被检测、记录下来。气相色谱仪器框图如图1所示： 图1.气相色谱仪器框图 仪器均由以下五个系统组成：气路、进样、分离、温度控制、检测和记录系统。 2.气相色谱法定性和定量分析原理 在这种吸附色谱中常用流出曲线来描述样品中各组分的浓度。也就是说，让
分离后的各组分谱带的浓度变化输入换能装置中，转变成电信号的变化。然后将电信号的变化输入记录器记录下来，便得到如图2的曲线。它表示组分进入检测器后，检测器所给出的信号随时间变化的规律。它是柱内组分分离结果的反映，是研究色谱分离过程机理的依据，也是定性和定量的依据。 图2.典型的色谱流动曲线 3.FID的原理 本次试验所用的为氢火焰离子化检测器(FID)，它是以氢气和空气燃烧的火焰作为能源，利用含碳有机物在火焰中燃烧产生离子，在外加的电场作用下，使离子形成离子流，根据离子流产生的电信号强度，检测被色谱柱分离出的组分。 三．实验试剂和仪器 (1)试剂：甲醇、异丙醇、异丁醇 (2)仪器：气相色谱仪带氢火焰离子化检测器(GC-2014气相色谱仪)； 氢-空发生器(SPH-300氢气发生器)、氮气钢瓶； 色谱柱； 微量注射器。 四．实验步骤 1.打开稳定电源。 2.打开N2钢瓶（减压阀），以N2为载气，开始通气，检漏；调整柱前压约为 0.12MPa。
色谱分析实验讲义
实验一气相色谱的基本操作及进样练习 一、实验目的 (1) 了解气相色谱仪的主要结构组成和应用。 (2) 掌握仪器基本操作和调试程序，熟悉气路运行过程。 (3) 明确热导池检测器的操作注意事项。 (4) 掌握气相色谱进样操作要领，练习微量注射器的使用方法。 二、实验原理 通过实验了解气相色谱仪的结构与原理。气相色谱仪是实现气相色谱过程的仪器，按其使用目的可分为分析型、制备型和工艺过程控制型。但无论气相色谱仪的类型如何变化，构成色谱仪的5个基本组成部分皆是相同的，它们是载气系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统及数据处理系统。 载气系统：载气是构成气相色谱过程中的重要一相——流动相，一般由高压钢瓶供气。 进样系统：汽化室是进样系统中不可缺少的组成部分，它的作用是把液体样品瞬间加热变成蒸汽，然后由载气带人色谱柱。 分离系统：色谱柱比作气相色谱仪的“心脏”，样品就是在此根据其性质的不同进行分离的。检测系统：检测器是气相色谱仪的关键部件。它的作用是将经色谱柱分离后顺序流出的化学组分的信息转变为便于记录的电信号，然后对被分离物质的组成和含量进行鉴定 和测量。 数据处理系统：数据处理系统目前多采用微机型色谱数据处理机和配备操作软件包的工作站，既可对色谱数据进行自动处理，又可对色谱系统的参数进行自动控制。 三、仪器与试剂 1．仪器 气相色谱仪(GC9790型)；检测器(热导池TCD)；色谱柱(邻苯二甲酸二壬酯DNP)；微量进样器(1 μL)。 2．试剂 环己烷(AR)；载气(氮气或氢气，含量99.99%以上)。 四、实验内容 1．开机操作步骤 (1)通气：首先连接好色谱柱，在检查气路密封良好的情况下，先逆时针旋转钢瓶总阀，调整减压阀输出压力0.4 ~ 0.5 Mpa，调节气相色谱仪上的载气稳压阀(总压)，使其输出压力为0.3Mpa，调节柱前压1和2的稳流阀2~3圈，载气流量氮气约为30mL·min-1，氢气约为40 mL·min-1。 (2) 通电：检查仪器开关都应处于“关闭”位置后，开启气相色谱仪右侧的电源开关，仪器接通电源以后计算机首先进入仪器的自检程序，其状态显示为指示灯全部打开，直到屏幕出现“OK！”字样后表示仪器自检通过，可以进入正常操作程序，并且显示器自动切换到屏
乙酰二茂铁的制备及柱色谱分离预习实验报告及思考题
乙酰二茂铁的制备及柱色谱分离 一．实验目的 1. 通过乙酰二茂铁的制备，理解Friedel-Crafts 酰基化反应原理。 2. 掌握机械搅拌等操作。 3. 掌握用柱色谱分离和提纯化合物的原理和技术。 二．实验原理 1.乙酰二茂铁的制备 二茂铁及其衍生物是一类很稳定的有机过渡金属络合物。二茂铁是橙色的固体，又名双环戊二烯基铁，是由两个环戊二烯负离子和一个二价铁离子键合而成，具有夹心型结构。二茂铁具有类似苯的一些芳香性，比苯更容易发生亲电取代反应。以乙酸酐为酰化剂，三氟化硼、氢氟酸或磷酸为催化剂，二茂铁可以发生Friedel-Crafts 酰基化反应，主要生成一元取代物及少量1,1′-二元取代物。二茂铁及其衍生物可作为火箭燃料的添加剂、汽油的抗爆剂、硅树脂和橡胶的防老剂及紫外线吸收剂等。 二茂铁的乙酰化可以形成乙酰二茂铁，根据反应条件，可以生成单乙酰二茂铁或者双乙酰二茂铁。由于二茂铁分子中存在亚铁离子，对氧化的敏感限制了它在合成中的应用，如不能够用混酸对其消化。制备乙酰二茂铁的反应式如下： 32 343+3H 3二茂铁 乙酰二茂铁 1,1′-二乙酰基二茂铁 在上述条件下，主要生成单乙酰二茂铁，双乙酰二茂铁很少，但同时有未反应的二茂铁。 2.柱色谱分离 本实验用柱色谱分离提纯产品。柱色谱分离提纯是根据二茂铁和乙酰二茂铁对硅胶吸附能力的差异而进行分离提纯。 柱层析是在层析柱中装入作为固定相的吸附剂，把试样流经固定相而被吸附，然后利用薄层层析中探索到的能分离组分的溶剂流经层析柱，试样中的各组在固定相和溶剂间重新分配，分配比大的组分先流出，分配比小的组分后流出，对于不易流出的组分可另选择合适的溶剂再进行洗脱，这样就可以达到各组分的分离提纯。 柱色谱（柱上层析）常用的有吸附色谱和分配色谱两类。吸附色谱常用氧化铝和硅胶作固定相；而分配色谱中以硅胶、硅藻土和纤维素作为支持剂，以吸收较大量的液体作固定相，而支持剂本身不起分离作用。? 吸附柱色谱通常在玻璃管中填入表面积很大经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂。当待分离的混合物溶液流过吸附柱时，各种成分同时被吸附在柱的上端。当洗脱剂流下时，由于不同化合物吸附能力不同，往下洗脱的速度也不同，于是形成了不同层次，即溶质在柱中自上而下按对吸附剂的亲和力大小分别形成若干色带，再用溶剂洗脱时，已经分开的溶质可以
气相色谱实验报告word精品
气相色谱实验报告 一、实验目的 1、了解气相色谱仪的基本结构及掌握分离分析的基本原理； 2、了解顶空气相色谱法； 3、了解影响分离效果的因素； 4、掌握定性、定量分析与测定的方法。 二、实验原理气相色谱分离是利用上试样中各组分在色谱柱中的气相和固定相间的分配系数不同，当气 化后的试样被载气带入色谱柱进行时，组分就在其中的两相中进行反复多次的分配，由于固定相各个组分的吸附或溶解能力不同，因此各组分在色谱柱中的运行速度就不同。经过 一定的柱长后，使彼此分离，顺序离开色谱柱进入检测器。检测器将各组分的浓度或质量的变化转换成一定的电信号，经过放大后在记录仪上记录下来，即可得到各组分的色谱峰。根据保留时间和峰高或峰面积，便可进行定性和定量的分析。 （1）顶空色谱法及其原理介绍顶空气相色谱是指对液体或固体中的挥发性成分进行气相色谱分析的一种间接测定法，它是在热力学平衡的蒸气相与被分析样品同时存在于一个密闭系统中进行的。这一方法从气相色谱仪角度讲，是一种进样系统，即“顶空进样系统” 。其原理如下： 一个容积为V、装有体积为V o浓度为0）的液体样品的密封容器，在一定温度下达到平衡时，气相体积为Vg,液相体积为Vs,气相样品浓度为Cg,液相中样品浓度为Cs,贝平衡常数K=Cs/Cg 相比3 =Vg/Vs V=Vs+Vg=V o+Vg 又因为是密封容器,所以 C o V o=CoVs=CsVs+CgVg= KCgVs + CgVg C o=KCg+CgVg/Vs=KCg+ 3 Cg=Cg（）K+ 3 Cg=C0/（K+ 3 = K'（C 可见, 在平衡状态下, 气相组成与样品原组成为正比关系, 根据这一关系我们可以进行定性和定量分析。（2）顶空色谱法的优点 顶空色谱进样器可与国内外各种气相色谱仪相连接, 它是将液体或固体样品中的挥发性组分直接导入气相色谱仪进行分离和检测的理想进样装置。 它采用气体进样,可专一性收集样品中的易挥发性成分,与液-液萃取和固相萃取相比 既可避免在除去溶剂时引起挥发物的损失, 又可降低共提物引起的噪音, 具有更高灵敏度和分析速度,对分析人员和环境危害小,操作简便,是一种符合“绿色分析化学”要求的分析手段。固相萃取和液相萃取时不可避免地带入共萃取物干扰分析。顶空分析可看成是气相萃
圆二色谱资料
圆二色光谱(简称CD)是应用最为广泛的测定蛋白质二级结构的方法，是研究稀溶液中蛋白质构象的一种快速、简单、较准确的方法。它可以在溶液状态下测定，较接近其生理状态。而且测定方法快速简便，对构象变化灵敏，所以它是目前研究蛋白质二级结构的主要手段之一，并已广泛应用于蛋白质的构象研究中。 一．简介 圆二色谱是用于推断非对称分子的构型和构象的一种旋光光谱。光学活性物质对组成平面偏振光的左旋和右旋圆偏振光的吸收系数(ε)是不相等的，εL≠εR，即具有圆二色性。如果以不同波长的平面偏振光的波长λ为横坐标，以吸收系数之差Δε=εL-εR为纵坐标作图，得到的图谱即是圆二色光谱，简称CD。如果某手性化合物在紫外可见区域有吸收，就可以得到具有特征的圆二色光谱。由于εL≠εR，透射光不再是平面偏振光，而是椭圆偏振光，摩尔椭圆度[θ]与Δε的关系为：[θ]=3300Δε。圆二色谱也可以摩尔椭圆度为纵坐标，以波长为横坐标作图。由于△ε有正值和负值之分，所以圆二色谱也有呈峰的正性圆二色谱和呈谷的负性圆二色谱。在紫外可见光区域测定圆二色谱与旋光谱，其目的是推断有机化合物的构型和构象。 二．样品要求 1、样品必须保持一定的纯度不含光吸收的杂质，溶剂
必须在测定波长没有吸收干扰;样品能完全溶解在溶剂中, 形成均一透明的溶液。 2、氮气流量的控制 3、缓冲液、溶剂要求与池子选择：缓冲液和溶剂在配制溶液前要做单独的检查，看是否在测定波长范围内有吸收干扰，看是否形成沉淀和胶状；在蛋白质测量中，经常选择透明性极好的磷酸盐作为缓冲体系。 4样品浓度与池子选择 样品不同，测定的圆二色光谱范围不同，对池子大小(光径)的选择和浓度的要求也不一样。蛋白质CD光谱测量一般在相对较稀的溶液中进行。 三．谱带宽度 选为1 nm。对于高分辨率测量，要用较窄的狭缝宽度，此时光电倍增管的电压较高，谱的信噪比差。虽然对于正常测量最佳谱带宽度是1~2 nm，但是在下列情况下要牺牲分辨率而需要较宽的狭缝宽度。当样品的吸光度很高但CD信号很弱时，一方面要尽量保证测定CD峰所需要的足够浓度，另一方面要设置较宽的狭缝。不过此时要特别小心，因为样品在吸光度过高(A>2)的情况下可能存在荧光或杂散光引起的某些假象。另外，在固体CD光谱测试时也需要较大的狭缝宽度(一般要求> 2 nm)。 (2)椭圆率和摩尔椭圆率都依赖于测量条件。因此，温度、
薄层色谱法实验报告
实验报告 一、实验目的 掌握薄层色谱的基本原理及其在有机物分离中的应用。 二、实验原理 有机混合物中各组分对吸附剂的吸附能力不同，当展开剂流经吸附剂时，有机物各组分会发生无数次吸附和解吸过程，吸附力弱的组分随流动相迅速向前，而吸附力弱的组分则滞后，由于各组分不同的移动速度而使得她们得以分离。物质被分离后在图谱上的位置，常用比移值R f表示。 R f 原点至层析斑点中心的距离原点至溶剂前沿的距离 三、实验仪器与药品 5.0cm×15.0cm硅胶层析板两块，卧式层析槽一个，点样用毛细管。 四、物理常数 五、仪器装置图
“浸有层析板的层析槽”图 1-层析缸，2-薄层板，3-展开剂饱和蒸汽，4-层析液 六、实验步骤 （1）薄层板的制备： 称取2～5g层析用硅胶，加适量水调成糊状，等石膏开始固化时，再加少许水，调成匀浆，平均摊在两块5.0×15cm的层析玻璃板上，再轻敲使其涂布均匀。（老师代做！）固化后，经105℃烘烤活化0.5h，贮于干燥器内备用。 （2）点样。 在层析板下端2.0cm处，（用铅笔轻化一起始线，并在点样出用铅笔作一记号为原点。）取毛细管，分别蘸取偶氮苯、偶氮苯与苏丹红混合液，点于原点上（注意点样用的毛细管不能混用，毛细管不能将薄层板表面弄破，样品斑点直径在1~2mm为宜！斑点间距为1cm） （3）定位及定性分析 用铅笔将各斑点框出，并找出斑点中心，用小尺量出各斑点到原点的距离和溶剂前沿到起始线的距离，然后计算各样品的比移值并定性确定混合物中各物质名称。
实验注意事项 1、铺板时一定要铺匀，特别是边、角部分，晾干时要放在平整的地方。 2、点样时点要细，直径不要大于2mm,间隔0.5cm以上，浓度不可过大，以免出现拖尾、混杂现象。 3、展开用的烧杯要洗净烘干，放入板之前，要先加展开剂，盖上表面皿，让烧杯内形成一定的蒸气压。点样的一端要浸入展开剂0.5cm 以上,但展开剂不可没过样品原点。当展开剂上升到距上端0.5－1cm 时要及时将板取出，用铅笔标示出展开剂前沿的位置。 讨论： 七、思考题
气相色谱法挥发性有机物测定实验报告
GC-MS测定挥发性有机物实验报告 专业：环境工程学号：1233351 姓名：刘鹏一、实验方法 进样器参数设定如下: 用预溶剂冲洗次数: 3 用溶剂冲洗次数: 3 用样品冲洗次数: 2 柱塞速度: 高粘度补偿时间: 0.2 sec 柱塞进样速度: 高进样器进样速度: 高注射模式: 一般抽吸次数: 5 进样口停留时间: 0.3 sec 尾部空气间隙: 否活塞吹扫速度: 高清洗体积: 8uL 注射器吸入位置: 1.0 mm 注射器注射位置: 0.0 mm 使用3个溶剂瓶: 1个瓶 [GC-2010] 柱箱温度:30.0℃进样温度:250.00℃进样模式:分流 流量控制模式:线速度压力:45.6 kPa 总流量:14.0 mL/min 柱流量:1.00 mL/min 线速度:35.9 cm/sec 吹扫流量:3.0 mL/min 分流比:10.0 高压进样模式:关载气节省器:关分流阻尼固定:关 柱温箱: 是SPL1: 是MS: 是 < 检测器(FTD)检查完毕> < 基线移动检查完毕> < 进样流量检查完毕> SPL1 载气: 是SPL1 吹扫: 是 < APC流量检查完毕> < 检测器APC流量检查完毕> 外部等待:否平衡时间: 2.0 min [GC 程序] [GCMS-QP2010 SE] 微扫描半峰宽:0.00 amu 离子源温度:200.00 ℃接口温度:250.00 ℃ 溶剂延迟时间:2.50 min 检测器增益方式:相对检测器增益:0.83 kv +0.00 kV
二、标准物质色谱图 三、实验结果 ①实验数据
答：常用的定量分析方法有标准曲线法、内标法和归一化法。 ①标准曲线法（外标法）：用被测组分纯物质配制系列标准溶液，分别定量进样，记录不同浓度溶液的色谱图，测出峰面积，用峰面积对相应的浓度作图，得到一条直线，即标准曲线。有时也可用峰高代替峰面积，作峰高—浓度标准曲线。在同样条件下测定样品，根据峰面积或峰高及标准曲线计算出样品中被测组分的浓度。 外标法简便，不需要校正因子，但进样量要求十分准确，操作条件也需严格控制。它适用于日常控制分析和大量同类样品的分析。 ②内标法：选择一种样品中不存在，且其色谱峰位于被测组分色谱峰附近的纯物质作为内标物，以固定量（接近被测组分量）加到标准溶液中和样品溶液中，分别定量进样，记录色谱峰，以被测组分峰面积（或峰高）与内标物峰面积（或峰高）的比值对相应浓度作图，得到标准曲线。根据样品中被测物质与内标物峰面积（或峰高）的比值，从标准曲线中查的被测组分浓度。这种方法可抵消因实验条件和进样量变化带来的误差。 内标物的要求：样品中不含有内标物质；峰的位置在各待测组分之间或与之相近；稳定、易得纯品；与样品能互溶但无化学反应；内标物浓度恰当，使其峰面积与待测组分相差不太大。 ③归一化法：标准曲线法（外标法）和内标法适用于样品中各组分不能全部出峰、或多组分中只测量一种或几种组分的情况。如果样品中各组分都能出峰，并要求定量，则归一化法比较简单。设样品中各组分的质量分别为M1、M2、…、Mn，则各组分的质量分数（Wi）按照下式计算：
实验六 气相色谱的定量分析(学生实验讲义)
实验六、气相色谱的定量分析 一、实验目的： 1. 熟练掌握气相色谱仪的使用方法和进样技术。 2. 了解气相色谱仪及氢火焰离子化检测器的基本结构和工作原理。 3. 熟练掌握定量校正因子的测定。 4. 熟悉用归一化法定量测定混合物各组分的含量。 二、实验原理 在一定的色谱条件下，组分i 的质量m i 与检测器的响应信号峰面积A i ，成正比： i A i i A f m ?= (6-1) 式中，A i f 称为绝对校正因子。式(6-1)是色谱定量的依据。不难看出，响应信号A 及校正因了的准确测量直接影响定量分析的准确度。 由于峰面积的大小不易受操作条件如柱温、流动相的流速、进样速度等因素的影响，故峰面积更适于作为定量分析的参数。 由式(6-1)，绝对校正因子可用下式表示： i i A i A m f = 6-2 式中，m i 可用质量、物质的量及体积等物理量表示，相应的校正因子分别称为质量校正因子、摩尔校正因子和体积校正因子。由于绝对校正因子受仪器和操作条件的影响很大，其应用受到限制，一般采用相对校正因子。相对校正因子是指组分i 与基准组分s 的绝对校正因子之比，即： s i i S A is m A m A f = 6-3 因绝对校正因子很少使用，一般文献上提到的校正因子就是相对校正因子。 根据不同的情况，可选用不同的定量方法。归一化法是将样品中所有组分含量之和按100%计算，以它们相应的响应信号为定量参数，通过下式计算各组分的质量分数： 46%1001 -??= =∑=n i i A is i A is i i A A m m f f 总 ? 该法简便、准确。当操作条件变化时，对分析结果影响较小，常用于定量分析，尤其适于进样量少而体积不易准确测量的液体试样。但采用本法进行定量分析时，要求试样中各组分产生可测量的色谱峰。
圆二色光谱实验报告
圆二色光谱实验 一、实验目的 1、了解圆二色（CD）光谱的原理和使用方法。 2、学会用圆二色光谱检测蛋白质二级构象的基本原理和方法，并学会分析物质的手性。 3、了解圆二色光谱仪的基本构造，并学会使用。 二、实验原理 1.CD光谱的基本知识 圆二色性是研究分子立体结构和构象的有利手段。在一些物质的分子中，没有任意次旋转反映轴，不能与镜像相互重叠，具有光学活性。电矢量相互垂直，振幅相等，位相相差四分之一波长的左和右圆偏振光重叠而成的是平面圆偏振光。 平面圆偏振光通过光学活性分子时，这些物质对左、右圆偏振光的吸收不相同，产生的吸收差值，就是该物质的圆二色性。 圆二色性用摩尔系数系数差ΔεM来度量，且有关系式：ΔεM = εL –εR，其中，εL 和εR分别表示左和右偏振光的摩尔吸收系数。如果εL –εR >0，则ΔεM为“+”，有正的圆二色性，相应于正Cotton效应；如果εL –εR<0，则ΔεM为“-”，有负的圆二色性，相应于负Cotton效应。 由于这种吸收差的存在，造成了矢量的振幅差，因此从圆偏振光通过介质后变成了椭圆偏振光。圆二色性也可用椭圆度θ或摩尔椭圆度[θ]度量。[θ]和ΔεM之间的关系式：[θ]=3300*Δε 圆二色光谱表示的[θ]或ΔεM与波长之间的关系，可用圆二色谱仪测定。一般仪器直接测定的是椭圆度θ，可换算成[θ]和ΔεM：[θ] = 100θ/cl，ΔεM= θ/33cl 其中，c表示物质在溶液中的浓度，单位为mol/L；l为光程长度（液池的长），单位为cm。输入c和l的值，一般仪器能自动进行换算，给出所需要的关系。 2.定性分析原理 圆二色光谱仪需要将平面偏振调制成左、右圆偏振光，并用很高的频率交替通过样品，因而设备复杂，完成这种调制的是电致或压力致晶体双折射的圆偏振光发生器（也称Pocker池或应力调制器）。圆二色谱仪一般采用氙灯作光源，其辐射通过由两个棱镜组成的双单色器后，就成为两束振动方向相互垂直的偏振光，由单色器的出射狭缝排除一束非寻常光后，寻常光由CD调制器制成交变的左圆偏振光、
气象色谱实验报告
在GC中使用归一法测定正构烷烃相对含量实验报告 一、实验目的： 1.学习Varian CP-3800的基本操作、气象色谱工作站和数据处理。 2.考察进样平行性。 二、实验原理： 气相色谱GC主要是利用物质的沸点、极性及吸附性质的差异来实现混合物的分离。待分析样品在汽化室汽化后被惰性气体（即载气，也叫流动相）带入色谱柱，柱内含有液体或固体流动相，由于样品中各组分的沸点、极性或吸附性能不同，每种组分都倾向于在流动相和固定相之间形成分配或吸附平衡。但由于载气是流动的，这种平衡实际上很难建立起来。也正是由于载气的流动，使样品组分在运动中进行反复多次的分配或吸附/解吸附，结果是在载气中浓度大的组分先流出色谱柱，而在固定相中分配浓度大的组分后流出。当组分流出色谱柱后，立即进入检测器。检测器能够将样品组分的与否转变为电信号，而电信号的大小与被测组分的量或浓度成正比。 气相色谱仪的组成部分：载气系统，进样系统，色谱柱（包括恒温控制装置），检测系统，记录系统。氢火焰检测器FID是GC最基本的检测器，当有机物经过检测器时，在火焰中会产生离子，在极化电压的作用下，喷嘴和收集极之间的电流会增大，对这个电流信号进行检测和记录即可得到相应的谱图。一般有机化合物在FID上都有响应，一般分子量越大，灵敏度越高。可以根据信号的大小对有机物进行定量分析。 三、仪器与试剂 正构烷烃原液：含0.88mg/ml (正构二十碳烷烃n-Eicosane), 0.261mg/ml (正构二十二碳烷烃n-Docosane),0.373mg/ml (正构二十四碳烷烃n-Tetracosane). 正己烷、样品瓶、CD-3800 GC、FID、针筒 四、实验步骤 1、制备正构烷烃稀释液 2、色谱条件 Injector：250℃ Column flow：1.0l/min FID HEATER：300℃ H2：30ml/min AIR：300ml/min
气相色谱法讲义
气相色谱法 用气体作为流动相的色谱法称为气相色谱法。根据固定相的状态不同，又可将其分为气固色谱和气液色谱。气固色谱是用多孔性固体为固定相，分离的主要对象是一些永久性的气体和低沸点的化合物。但由于气固色谱可供选择的固定相种类甚少，分离的对象不多，且色谱峰容易产生拖尾，因此实际应用较少。气相色谱多用高沸点的有机化合物涂渍在惰性载体上作为固定相，一般只要在450℃以下有1.5KPa-10KPa的蒸汽压且热稳定性好的有机及无机化合物都可用气液色谱分离。由于在气液色谱中可供选择的固定液种类很多，容易得到好的选择性，所以气液色谱有广泛的实用价值。 第一节气相色谱仪 （一）气相色谱流程 气相色谱法用于分离分析样品的基本过程如下图： 气相色谱过程示意图 由高压钢瓶1供给的流动相载气。经减压阀2、净化器3、流量调节器4和转子流速计5后，以稳定的压力恒定的流速连续流过气化室6、色谱柱7、检测器8，最后放空。 气化室与进样口相接，它的作用是把从进样口注入的液体试样瞬间气化为蒸汽，以便随载气带入色谱柱中进行分离，分离后的样品随载气依次带入检测器，检测器将组分的浓度（或质量）变化转化为电信号，电信号经放大后，由记录仪记录下来，即得色谱图。 （二）气相色谱仪的结构 气相色谱仪由五大系统组成：气路系统、进样系统、分离系统、控温系统以及检测和记录系统。 1. 气路系统 气相色谱仪具有一个让载气连续运行、管路密闭的气 路系统。通过该系统，可以获得纯净的、流速稳定的载气。它的气密性、载气流速的稳定性以及测量流量的准确性，对色谱结果均有很大的影响，因此必须注意控制。 常用的载气有氮气和氢气，也有用氦气、氩气和空气。载气的净化，需经过装有活性炭或分子筛的净化器，以除去载气中的水、氧等不利的杂质。流速的调节和稳定是通过减压阀、稳压阀和针形阀串联使用后达到。一般载气的变化程度<1%。 2. 进样系统 进样系统包括进样器和气化室两部分。 路系统。通过该系统，可以获得纯净的、流速稳定的载气。它的气密性、载气流速的稳定性以及测量流量的准确性，对色谱结果均有很大的影响，因此必须注意控制。 常用的载气有氮气和氢气，也有用氦气、氩气和空气。载气的净化，需经过装有活性炭
离子色谱仪器实验报告
离子色谱实验报告 刘鹏1233351 环境工程 一．实验目的 1．掌握离子交换色谱分析法中的基本原理 2．了解RFIC淋洗液发生器KOH发生原理 3．了解电导检测器的基本原理。 4．基本了解离子色谱（IC 1000）组成结构，硬件操作及掌握化学工作站的开机，关机，参数设定，数据采集及分析的基本操作。 5．掌握离子交换色谱定性、外标定量方法。 二．基本原理 离子交换分离原理：离子交换色谱是离子色谱中的一种，其分离机制主要是离子交换，是基于离子交换树脂上可离解的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子之间进行的可逆交换，依据这些离子对交换剂有不同的亲和力而被分离。 抑制器ASRS-4mm工作原理（用OH-体系）：（1）水进入阳极电离，产生H+，通过阳离子交换膜进入抑制器（中间通道）；（2）OH-携带Cl-、SO42-等进入抑制器，并与H+结合生成HCl，H2SO4等，以离子形式存在，进入检测器检测。（3）剩下的阳离子通过阳离子交换膜，进入并与阴极电离产生的OH-结合，废液排出。（实质是用H+代替其他阳离子进入检测器，因为H+的摩尔电导最高，所以以HCl形式进入电导检测器，能够降低背景电导，从而提高待测离子的灵敏度）。 抑制器ASRS-4mm工作原理（用CO32-/HCO3-体系）：（1）水进入阳极电离，产生H+，通过阳离子交换膜进入抑制器（中间通道）；（2）CO32-/HCO3-携带Cl-、SO42-等进入抑制器，并与H+结合生成HCl，H2SO4等，以离子形式存在，进入检测器检测。（3）剩下的阳离子通过阳离子交换膜，进入并与 阴极电离产生的OH-结合，废液排出。（实质是用H+代替其他阳离子进入检测器，因为H+的摩尔电导最高，所以以HCl形式进入电导检测器，能够降低背景电导，从而提高待测离子的灵敏度）。 RFIC淋洗液发生器发生原理（KOH淋洗液发生原理）：淋洗液发生器由高压KOH发生室和低压K+电解槽组成。KOH发生室装有一个穿孔的铂金阴极，钾离子电解槽装有一个铂金阳极。KOH发生室通过阳离子交换膜与K+电解槽连接。离子交换连接器允许来自K+电解槽的K+通过并进入高压KOH发生室，而阻止来自K+电解槽的其他阴离子进入。离子交换连接器将高压KOH发生室与低压K+电解槽隔开，泵驱动去离子水通过KOH发生室，在正负极之间加上直流电压，水在正极和负极发生电解，在正极产生的H+代替电解质溶液中的K+，被置换出的K+跨过阳离子交换连接器进入KOH发生室，这些K+与在阴极产生的OH-结合生产KOH，即用于阴离子交换色谱的淋洗液。 电导检测器是离子色谱的通用型检测器，其检测的原理是电导，主要用于测定无机阴阳离子和部分极性有机物。电导检测器通过在外加电场作用下使待测物质发生电离，离子通过流通池引起电导率的变化来进行检测。一般而言，呈离子态的物质都可以用电导法测定，但溶液的电导率是其各种离子的加和，供离子分离用的溶剂本身的高电导率会掩盖待测介质中离子的电导，所以只有在一种离子电导率占绝对优势的情况下方可检测。 外标法定量：外标法是色谱分析中一种简便的定量方法。当样品中所有组分都得到良好的分离并都能被检测而得到色谱峰时，则可利用外标法定量计算样品中各组分的浓度。其定量的依据是被测物质的量与它在色谱图上的峰面积（或峰高）成正比。数据处理软件（工作站）可以给出包括峰高和峰面积在内的多种色谱数据。一般由被测物所配标准浓度与峰面积做标准曲线，由标准曲线求出被测物浓度。 Dionex IC 1000 离子交换色谱仪的工作过程：泵将Miniport超纯水，以稳定的流速（或压力）输
薄层色谱中展开剂的选择
薄层色谱中展开剂的选择 2007-04-05 02:03 （一）有机合成中展开剂的选择 做有机合成时走板子是常有的事，展开剂的选择就至关重要了。 选择适当的展开剂是首要任务.一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油迷<己烷<苯<乙醚 气相色谱仪的硬件与软件操作 【实验目的】 1.安全教育； 2.气相色谱仪的硬件操作及软件操作； 3.了解气相色谱仪的基本结构及掌握仪器分离分析的基本原理。 【实验原理】 气相色谱仪是实现气相色谱过程的仪器，仪器型号繁多，但总的说来，其基本结构是相似的，主要由载气系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统以及数据处理系统构成。气相色谱仪利用试样中各组分在色谱柱中的气相和固定相的分配系数不同，当气化后的试样被载气带入色谱柱进行时，组分就在其中的两相中进行反复多次的分配，由于固定相各个组分的吸附和溶解能力不同，因此各组分在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长后，是彼此分离，顺序离开色谱柱进入检测器。检测器将各组分的浓度或质量的变化转换成一定的电信号，经过放大后在记录仪上记录下来，即可得到各组分的色谱峰。根据保留时间，便可进行定性分析。 【主要试剂及物理性质】 【实验仪器】 仪器：GC-2010气相色谱仪；SPB-3全自动空气泵；SPN-300氮气发生器；SPH-300氢气发生器；微量进样器（1μL）；容量瓶；毛细管色谱柱（SPB-5 30.0m×0.32mm×0.25um）； 【实验步骤】 1. 开机：依次打开全自动空气泵，氮气发生器（注意排气，逆时针旋转松开氮气发生器右 侧螺丝，约30分钟后，待载气稳定即压力表指针稳定指向0.4 M pa后顺时针旋转拧紧氮气发生器右侧螺丝）），氢气发生器。然后打开GC GC-2010气相色谱仪开关“POWER”由“0”至“-”，最后打开电脑上的工作站。 2.点击工作站桌面GC Real Time Analysis→ 纸层析的实验报告 前言 纸层析法纸层析法又称纸色谱法，是目前广泛应用的一种分离技术。本世纪初俄国植物学家M.Tswett发现并使用这一技术证明了植物的叶子中不仅有叶绿素还含有其它色素。现在层析法已成为生物化学、分子生物学及其它学科领域有效的分离分析工具之一。它是一种以纸为载体的色谱法。固定相一般为纸纤维上吸附的水分，流动相为不与水相溶的有机溶剂；也可使纸吸留其他物质作为固定相，如缓冲液，甲酰胺等。将试样点在纸条的一端，然后在密闭的槽中用适宜溶剂进行展开。当组分移动一定距离后，各组分移动距离不同，最后形成互相分离的斑点。将纸取出，待溶剂挥发后，用显色剂或其他适宜方法确定斑点位置。根据组分移动距离（Rf值）与已知样比较，进行定性。用斑点扫描仪或将组分点取下，以溶剂溶出组分，用适宜方法定量（如光度法、比色法等）。 纸层析法（paper chromatography）是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术，可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定；也是定性或定量测定多肽、核酸碱基、糖、有机酸、维生素、抗菌素等物质的一种分离分析工具。纸层析法是用滤 纸作为惰性支持物的分配层析法，其中滤纸纤维素上吸附的水是固定相，展层用的有机溶溶剂是流动相。 在环境分析测试中，有时用纸层析法分离试样组分，它用于一些精度不高的分析，如3，4-苯并芘。但不如GC、HPLC应用普遍。在 做叶绿体色素分离时用到,将叶片碾碎，浸出绿色液体，将液体与层析液（石油醚）混合，将滤纸一段进入混合液体，四种色素在层析液中的溶解度不同，在滤纸上留下4条色素带。由此观查出各种色素的相对含量和种类。 纸层析法一般用于叶绿体中色素的分离，叶绿体中色素主要包括胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b，它们在层析液中的溶解度不同，溶解度大的随层析液在滤纸上扩散地快，反之则慢；含量较多者色素带也较宽。最后在滤纸上留下4条色素带，所以利用纸层析法能清楚地将叶绿体中的色素分离。 氨基酸氨基酸是构成蛋白质的基本单位，广泛用于食品、医药、添加剂及化妆品行业。随着生物工程技术产业的发展逐渐成为2l世纪全球的主要产业之一，氨基酸的需求量越来越大，品种变更越来越快，工艺改革越来越新。目前全世界氨基酸每年的产量为100万吨，而需求总量是800万吨。我国自20世纪20xx年代起，氨基酸的应用在食品工业占61％，在饮料工业占30％，医药、日用化工、农业、冶金、环保、轻工、生物工程技术等方面占用的比例逐年增加。 氨基酸在人类生活的很多方面都有着应用： (1)在食品行业的应用 (2)在医药工业的应用 (3)在饲料添加剂行业的应用 (4)在化妆品行业的应用 (5)在农业上的应用 (6)在其他行业的应用气相色谱仪的硬件与软件操作实验报告
【实验报告】纸层析的实验报告