植物组织中硝态氮的测定
植物组织中硝态氮的测定
何宗财 20096747
【实验目的】伤流是植物根系主动吸水的证明，不同植物或同一种植物在不同季节的伤流强度均不同，伤流强度反应根系生理活动强弱和根系又吸收面积大小。伤流除含有大量水分外，还含有各种无机盐及根部合成有机物包括植物激素。硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况，因此可作为土壤肥氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。
【原理】硝态氮与硝酸试粉作用，生成粉红色的偶氮化合物，其颜色深浅与硝态氮的浓度成正相关，将样品显示的颜色与标准比色阶进行比较，可快速求得硝态氮的浓度。硝酸试粉主要是由锌粉、柠檬酸、ɑ-萘胺、对氨基苯磺酸混合而成，硝态氮与硝酸试粉反应如下：
NO 3-+H +
NO 2-+Zn 2++H 2O
SO 3H 2+2H SO 3H
N +N +2H 2O
对氨基苯磺酸重氮化合物NH 2
SO 3H
N +N +
N NH 2 ɑ-萘胺重氮化合物对-苯磺酸-偶氮-萘胺
【实验材料】接骨木伤流液
【实验试剂】硝酸试粉、50%醋酸、50mg/L 氮流液
【实验步骤】在比色盘的五个孔中加入如表所示溶液：
5min 后即成5个不同浓度20、40、60、80、100 mg/mL 硝态氮的比色阶。再用6号孔中加入伤流液5滴及硝酸试粉1勺，搅拌，5min 后，将其所显粉红色与标准比色阶比较确定样品液中硝态氮的浓度。
【实验结果及处理】
1.经过比色样品溶液的颜色介于2~3之间。
2.根据结果，伤流液中硝态氮的浓约为(10/5+20/10)/2=2mg/mL
【讨论】
1. 如若伤流液浓度过高，超过容量范围可先将伤流液稀释一定倍数后在进行滴
加。
2.本实验中所测的硝化氮的含量不准确，因为其原因又一下几点，首先是由于
方法的原因导致的，由于进行比色来测定伤流液的浓度，因实验者不同，对色差的辨别不同，很可能导致偶人误差。其次是由于伤流液在被收集后是没有进行密封的，里面的水分可能会一定的散失，导致所测定的值偏高。
方法的改进：植物样品经硫酸+过氧化氢凯氏法消煮后,用直接吸光光度法获得硝态氮[1](包括亚硝态氮).
原理及方法如下：
硝态氮在经过硫酸2过氧化氢消煮的植物消煮液中, 硝态氮和亚硝态氮以硝酸根离子(NO3-) 存在, 利用NO3-在紫外光区220 nm处有特征吸收峰, 可以直接测定试液的吸光度来定量硝态氮。测定时, 吸取5 mL 消煮液于50 mL 比色管中, 无氨水稀释至刻度, 摇匀, 在波长210 nm处, 用1 cm石英比色皿, 以无氨水作参比, 在紫外分光光度计进行硝态氮测定。
3.通过伤流法测定植物中硝态氮含量中，伤流法需要收集伤流液，此环节消费
时间长。
[1] 吕伟仙,葛滢，吴建之,常杰.植物中硝态氮、氨态氮、总氮测定方法的比较研究.光谱学与光谱分析.V ol124 ,No12 ,pp2042206
植物中伤流液中氨基酸总量的测定—茚三酮比色法
何宗财20096747
【实验目的】根系是植物吸收水分和矿质元素的主要器官，也是许多有机物的合成和储存器官，在伤流液中除含有矿质离子外，还含有氨基酸、激素、糖、等有机物。测定伤流液中氨基酸含量，可以了解根系活力强弱。
【实验原理】氨基酸与茚三酮乙醇溶液可发生显色反应，生成紫红色化合物，颜色深浅与氨基酸含量成正比。除脯氨酸与羟胺酸外，其他各种氨基酸显色的色调与深浅相差不大，因此利用此反应可定量测定伤流液中氨基酸的总量。
【实验材料】接骨木伤流液
【实验试剂】3%茚三酮乙醇溶液
【操作方法】
1.去两只试管按照下面编号，并按照下（表二）进行加液，在沸水浴中加热两份钟，取出观察颜色是否变化。
3%茚三酮溶液 5 5
【实验结果】一号管中颜色不变，2号管中加热后由无色变成蓝紫色。伤流液中含有有理的氨基酸。
【结果讨论】
1. 本实验只是鉴定了伤流液中存在游离氨基酸，但不能确定其含量，应该在确定伤流液中含有游离氨基酸后用分光光度法测定其中氨基酸的含量。
2.通过本实验确定了一种简单鉴定伤流液中游离氨基酸的方法。
植物伤流液中无机磷含量的测定
何宗财20096747
【实验目的】磷参与植物体内多种代谢，促进碳水化合物的合成，转化和运输，施磷对提高作物产量和品质有明显的效果。通过本实验掌握植物体内磷含量的测定方法及其原理。
【实验原理】测定磷含量的方法主要有磷钼蓝比色法，可用于直接测定植物组织中可溶性磷含量。
磷钼蓝比色法：在适宜的酸性条件下，磷酸能与钼酸作用形成磷钼酸铵，并被抗坏血酸或氯化亚锡等还原剂还原，生成蓝色的磷钼蓝，并在650nm处又最大吸收峰，其颜色深浅与含磷量成正比，可直接比色测定。
【实验材料】接骨木伤流液
【实验试剂】10mg/L磷林液、订磷试剂
【实验方法】
1. 标准曲线的制作
取6支试管，分别编号0~5，按下表加入磷标准溶液及其他试剂，以制作标准曲线。另取1支试管编号6，作为样品管，按照下表加入各试剂。并将各管充分摇匀，在45℃水浴中保温25分钟，以空白为对照，在分光光计650nm处测定
吸光度。。以吸光度值为纵坐标，磷含量为横坐标，绘制标准曲线。并根据6号试管的吸光度值，从标准曲线上查出伤流液中德可溶性磷的含量。
表三
项目
管号
0 1 2 3 4 5 6
各管含磷量(ug)
10ug/L磷标准溶液(mL) 蒸馏水（mL）
定磷试液（mL）
吸光度（A650）0 2 4 6 8 10X
0 0.2 0.40.6 0.8 1.0 样品0.2
3.0 2.8 2.6 2.4 2.2 2.0 2.8 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0
0 0.103 0.180 0.285 0.392 0.490 0.025
【实验结果】
1.根据实验结果得出标准曲线
表四标准曲线
因为R2越接近1其偏差越小，本实验可得到R2=0.9982很趋近于1，故标准曲线线性相关性良好。
2. 实验结果
由Y=0.0485x 可知：6号管中的可溶性磷含量=0.250/0.0485=5.88ug.
【结果讨论】
1.本实验由于所取的接骨木伤流液中水分可能会有一定的损失，导致所测的结果偏大。
土壤硝态氮的测定
土壤硝态氮的测定
土壤硝态氮的测定 A 紫外分光光度法 1、方法提要 土壤浸出液中的NO3-，在紫外分光光度计波长210nm 处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH-、CO32-、HCO3-、NO2-和有机质等外，吸光度均很小。将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO32-、HCO3-的干扰。NO2-一般含量极少，也很容易消除。因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NO3-的含量。 待测液酸化后，分别在210nm和275nm处测定吸光度。A210是NO3-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因为NO3-在275nm处已无吸收。但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A210中减去，即得NO3-在210nm处的吸光度(△A)。 2、适用范围 本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。 3、主要仪器设备 3.1紫外—可见分光光度计； 3.2石英比色皿； 3.3往复式或旋转式振荡机，满足180r/min±20r/min的振荡频率或达到相同效果； 3.4塑料瓶：200mL。 4、试剂
4.1H2SO4溶液(1：9)：取10mL浓硫酸缓缓加入90mL 水中。 4.2氯化钙浸提剂[c(CaCl2)=0.01mol·L-1]：称取2.2g氯化钙(CaCl2·6H2O，化学纯)溶于水中，稀释至1L。 4.3 硝态氮标准贮备液[ρ(N)=100mg·L-1]：准确称取0.7217g经105~110℃烘2h的硝酸钾(KNO3，优级纯)溶于水，定容至1L，存放于冰箱中。 4.4硝态氮标准溶液[ρ(N)=10mg·L-1]：测定当天吸到10.00mL硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中用水定容。 5、操作步骤 称取10.00g土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50mL 氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20℃~25℃振荡30min(180r/min±20r/min)，干过滤。 吸取25.00mL待测液于50mL三角瓶中，加1.00mL1：9 H2SO4溶液酸化，摇匀。用滴管将此液装入1cm光径的石英比色槽中，分别在210nm和275nm处测读吸光值(A210和A275)，以酸化的浸提剂调节仪器零点。以NO3-的吸光值(△A)通过标准曲线求得测定液中硝态氮含量。空白测定除不加试样外，其余均同样品测定。 NO3-的吸光值(△A)可由下式求得： △A= A210- A275×R 式中R为校正因数，是土壤浸出液中杂质(主要是有机质)在210nm和275nm处的吸光度的比值。其确定方法为：A210是波长210nm处浸出液中NO3-的吸收值(A210硝)与
水质中硝态氮和亚硝态氮测定
水质中的硝态氮测定(紫外分光光度法) 原理: 利用硝酸盐在220nm波长具有紫外吸收和在275nm波长不具吸收的性质进行测定,于275nm波长测出有机物的吸收值在测定结果中校正. 试剂: 1. 无硝酸盐纯水:采用重蒸馏或者蒸馏---去离子法制备,用于配制试剂及稀 释样品. 2. 盐酸溶液(1+11). 3. 硝酸盐氮标准储备溶液[p(NO3---N)=100ug/mL]:称取经105`C烤箱干 燥2h的硝酸钾(KNO3) 0.7218g,溶于纯水中并定容至1000mL,每升中加入2mL三氯甲烷,至少可稳定6个月. 4. 硝酸盐氮标准使用溶液[p(NO3---N)=10ug/mL]. 仪器: 1. 紫外分光光度计以及石英比色皿. 2. 具有比色管:50mL 分析步骤: 1. 水预样处理:吸收50mL水样于50mL比色管中加1mL盐酸溶液酸化. 2. 标准系列制备:分别吸收硝酸盐氮标准使用溶液0mL/L~7mg/L硝酸盐氮 标准系列,用纯水稀释到50mL,各加1mL盐酸溶液. 3. 用纯水调节仪器吸光度为0，分别在220nm和275nm波长测量吸光度. 计算: 在标准样品的220nm波长吸光度中减去2倍于275nm波长的吸光度,绘制标准曲线和在曲线上直接读出样品中的硝酸盐氮的质量浓度. 注:若275nm波长吸光度的2倍大于220nm波长吸光度的10%时,本标准将不能适用.
水质中亚硝态氮的测定(重氮偶合分光光度法) 原理: 在pH1.7以下,水中亚硝酸盐与对氨基苯磺酰胺氮化,再与盐酸N-(1-萘)-乙二胺产生偶合反应,生成紫红色的偶氮染料,比色定量. 试剂: 1. 氢氧化铝悬浮液 2. 对氨基苯磺酰胺溶液 3. 盐酸N-(1-萘)-乙二胺溶液 4. 亚硝酸盐氮标准储备液[p(NO2—N)=50ug/mL]:称取0.2463g在玻璃干 燥器内放置24h的亚硝酸钠(NaNO2),溶于纯水中,并定容至1000mL.每升中加2mL三氯甲烷保存. 5. 亚硝酸盐氮标准使用溶液[p(NO2—N)=0.10ug/mL] 仪器: 1.具塞比色管:50mL. 2.分光光度计. 分析步骤: 1. 若水样浑浊或色度较深,可先取100mL,加入2mL氢氧化铝悬浮液,搅拌 后静置数分钟,过滤. 2. 先将水样或处理后的水样用酸或碱调近中性.取50.0mL置于比色管中. 3. 另取50mL比色管8支,分别加入亚硝酸盐氮标准液 0,0.50,1.00,2.50,5.00,7.50,10.00和12.50mL,用纯水稀释至50mL. 4. 向水样以及标准色列管分别加入1mL对氨基苯磺酰胺溶液,摇匀后放置 2min~8min.加入1.0mL盐酸N-(1-萘)-乙二胺溶液,立刻混匀. 5. 于540nm波长,用1cm比色皿,以纯水作参比,在10min至2h内,测定吸 光度.如亚硝酸盐氮浓度低于4ug/L时,改用3cm比色皿. 6. 绘制曲线,查出亚硝态氮含量. 计算: 水样中亚硝态氮质量浓度计算见式: P(NO2-N)= m / V P(NO2-N):mg/L,亚硝酸氮质量浓度 M:从标准曲线上查的样品管中亚硝酸盐氮的质量,单位为微克(ug)
实验7土壤硝态氮的紫外分光光度法.doc
实验土壤硝态氮的紫外分光光度法 根层土壤中硝态氮的含量与植物生长发育有着密切的关系，其测定结果可 为合理施肥，肥料规划和估产提供依据。 一 .目的要求 了解紫外 / 可见分光光度计的基本结构，掌握用波长选择消除干扰组分的 测定技术，用校正因数法测定土壤硝态氮的含量。 二 .方法原理 用氯化钠溶液提取土壤硝态氮，于紫外分光光度计上分别测量其210 和 275 纳米的吸光度，前者是硝酸根和以有机质为主的杂质的吸收值，后者是以有机 质为主的杂质的吸收。 因为 275 纳米处硝酸根已无吸收，而有机质在 275 纳米处的吸收值是 210 纳 米处的 f 倍，故可将 A275 校正为有机质在 210 纳米处的干扰吸收，从 A210 中减去，即得硝酸根在 210 纳米处得真实吸收值，再利用标准曲线法求得土壤中硝态氮 得含量。 三 .器皿与试剂 1.紫外、可见分光光度计和xx 比色皿。 2.50 毫升容量瓶 10 个， 100 和 250 毫升锥形瓶各 4 个，漏斗 4 个，普通试 管 4 支， 50 毫升胖肚吸管 1 支， 5、10 毫升和 2 毫升刻度吸管各一只，滴管 2 支。 3.氯化钠溶液 1mol/L: 称取氯化钠 58.44 克溶于 400 毫升水中，转入 1 升容量瓶中，稀释至刻度。 4.硝态氮标准溶液100μ g/ml: 称取于 105℃烘制 2 小时得硝酸钾 0.3609 克溶于水，转移至 500 毫升容量瓶中，用水定容。临用时再稀释至 20μg/ml。
5.硫酸溶液， 10％（ V/V） 四 .测定步骤 1.待测液制备 称取 10.00 克风干土样于 250 毫升锥形瓶中，加入50 毫升 1 mol/L 的氯化钠溶液，加塞振荡30 分钟，过滤于干净干燥的100 毫升锥形瓶中，初液弃去。同时做试剂空白。 2.标准曲线绘制与测定 吸取 20μg/ml硝态氮标准溶液0. 00、0. 50、1. 00、2. 00、3. 00、4.00 毫升分别置入 50 毫升容量瓶中，用水定容至刻度后，再加入 2 毫升 10％硫酸溶液，摇匀。浓度分别为 0. 00、 0. 20、0. 40、0. 80、1.20 和 1.60 μ g/ml。以零浓度标液作参比，于 210 米处测定标准系列的吸光度，绘制标准曲线或建立回归方程。 去土壤浸体液和试剂空白液各 10 毫升入试管中，加入 0.8 毫升 10％硫酸，摇匀。以试剂空白作参比，分别于 210 纳米和 275 纳米处测定吸光度，不要每
植物中硝态氮的测定方法
硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况，因此可作为土壤肥氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。 （一）原理 在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12）呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可直接比色测定。 （二）仪器与用具 （1）722型分光光度计1台；（2）电子顶载天平1台（感量1/万）；（3）刻度试管20ml26支；（4）刻度吸管0.1ml. 0.5ml. 5ml. 10ml各1支；（5）容量瓶50ml8个；（6）容量瓶25ml3个；（7）小漏斗（∮5cm）3个；（8）玻棒1根；（9）洗耳球1个；（10）电炉1个；（11）铝锅1个；（12）玻璃塞；（13）定量滤纸7cm。 试剂： 500ppmNO3-标准溶液精确称取烘至恒重的KNO3 0.7221克溶于无离水中，定容至200ml。 5%水杨酸一硫酸溶液称取5克水杨酸溶于100ml,浓硫酸中（密度为1. 84），搅拌溶解后，贮于棕色瓶中。置冰箱保存一周有效。 8%氢氧化纳溶液称取10克氢氧化纳溶于1dm3无离子水中即可。 （三）实验步骤 1. 标准曲线的制作 （1）吸取500ppmNO3-标准溶液1ml. 2ml. 3ml. 4ml. 6ml. 8ml. 10ml. 12ml分别放入501ml容量瓶中，用无离子定至刻度，使之成10. 20、30、40、60、80、100、120、ppm的系列标准溶液。 （2）吸收上述系列标准溶液0.11ml，分别放入刻度试管中，以0.11ml无离子水代替标准溶液作空白，再分别加入0.4ml水杨酸一硫酸溶液，摇匀，在室温下放置20分钟后再加入8%NaOH溶液9. 51ml摇匀冷却至室温，显色液总体积为101ml。 （3）以空白作参比，在410nm波长下测定吸光度。以NO3-N浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 2. 样品中硝酸盐的测定 （1）样品液的制备，取一定量的植物材料剪碎混匀后，精确称取2-3克分别放入三支刻度试管中，加入10ml无离子水，用玻璃塞封口，置入沸水浴中提取30分钟，到时间后取出，用自来水冷却，将是取液过滤到25ml容量瓶中，并反复冲洗残渣，最的定容至刻度。 （2）样口液的测定吸取样品0.1 ml分别于三支刻度试管中，然后加入5%水杨酸一硫酸溶液0.4 ml，混
土壤各种氮的测定
土壤铵态氮的测定 2 mol·L-1KCl浸提—蒸馏法 1方法原理用2mol·L-1KCl浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。取一份浸出液在半微量定氮蒸馏器中加MgO（MgO是弱碱，有防止浸出液中酰铵有机氮水解的可能）蒸馏。蒸出的氨以H3BO3吸收，用标准酸溶液滴定，计算土壤中的NH4+—N含量。 2主要仪器振荡器、半微量定氮蒸馏器、半微量滴定管（5mL）。 3试剂 （1）20g·L -1硼酸—指示剂。20gH3BO3（化学纯）溶于1L水中，每升H3BO3 溶液中加入甲基红—溴甲酚绿混合指示剂5mL并用稀酸或稀 碱调节至微紫红色，此时该溶液的pH为4.8。指示剂用前与硼酸混 合，此试剂宜现配，不宜放。 （2）0.005 mol·L-11/2H2SO4标准液。量取H2SO4（化学纯）2.83mL，加蒸馏水稀释至5000mL，然后用标准碱或硼酸标定之，此为 0.0200 mol·L-1 (1/2H2SO4)标准溶液，再将此标准液准确地稀释4倍， 即得0.005mol·L-11/2H2SO4标准液（注1）。 （3）2 mol·L-1KCl溶液称KCl（化学纯）14901g溶解于1L水中。 （4）120g·L–1MgO悬浊液 MgO12g经500～600℃灼烧2h，冷却，放入100mL水中摇匀。 4操作步骤
取新鲜土样10.0g（注2），放入100mL三角瓶中，加入2mol·L-1KCl 溶液50.0mL。用橡皮塞塞紧，振荡30min，立即过滤于50mL三角瓶中（如果土壤NH4+—N含量低，可将液土比改为2.5:1）。 吸取滤液25.0mL（含NH4+—N25μg以上）放入半微量定氮蒸馏器中，用少量水冲洗，先把盛有20g·L–1硼酸溶液5mL的三角瓶放在冷凝管下，然后再加120g·L–1 MgO悬浊液10mL于蒸馏室蒸馏，待蒸出液达30～40mL 时（约10min）停止蒸馏，用少量水冲洗冷凝管，取下三角瓶，用 0.005mol·L-11/2H2SO4标准液滴至紫红色为终点，同时做空白试验。 5结果计算 土壤中铵态氮NH4+—（N）含量（mg·kg-1） = 式中：c——0.005mol·L-11/2H2SO4标准溶液浓度； V——样品滴定硫酸标准溶液体积(mL)； V0——空白滴定硫酸标准溶液体积(mL)； 14.0——氮的原子摩尔质量（g·mol-1）； ts——分取倍数；
土壤硝态氮及铵态氮的取样测定
土壤硝态氮和铵态氮的取样测定 1．田间取样与保存 根据小区面积，随机选2～3个样点，采样地点应避开边行以及头尾。在行间取样，以30cm为一层，取样深度可以是0-90cm或0-210cm或更深，分层取样，等层混合。新鲜土样须田间将土壤样品立即放入冰盒，没有冰盒者应将土样放置阴凉处，避免阳光直接照射，并尽快带回室内处理。 2．土样的处理 在田间采样后，立即将土样放置在冰盒中，低温保存。返回实验室后，如果样品数量较多，则放置于冰箱中4℃保存。也可以直接进行土样处理：土壤过3-5cm筛，测定土壤的水分含量，同时作浸提。 3．土样的浸提 称取混匀好的新鲜土壤样品24.00g，放入振荡瓶，加100 ml 1mol/L 优级纯KCl浸提液，充分混匀后放入振荡机振荡1个小时，用定性滤纸过滤（注意：国内好多滤纸含有铵态氮，需选择那些无铵滤纸）到小烧杯或胶卷盒中，留滤液约20ml备用，每批样做3个空白。若样品不能及时测定，应放入贮藏瓶中冷冻保存。 同时称取20-30 g鲜土放入铝盒中105℃下烘干测定土壤水分。剩余土样自然风干后保存。 4．土壤硝态氮、铵态氮测定 测定前先解冻贮藏瓶盒中的滤液，并保持滤液均匀（注意：解冻后的样品有时有KCl 析出，必须等KCl溶解后，液体完全均匀后再测定），上流动分析测定溶液中的铵态氮和硝态氮含量（专门的试验人员负责）。所用标准溶液必须是用1mol/L KCl浸提液配制。 有时样品浓度超出了机器的测定范围，需对样品进行稀释（注意：应以最低稀释倍数把样品测定出来，且不可放大稀释倍数，这样会引起很大误差）。 流动分析测定的是溶液中的铵态氮和硝态氮浓度，单位是mg/L，必须根据土壤样品含水量和土壤干重换算成mg N/kg。如果要换算成kg N/ha，可以通过下列公式：土壤硝态氮或铵态氮（kg N/ha）=土壤硝态氮或铵态氮（mg N/kg）* 采样层次（30cm 或20cm）* 土壤容重/ 10
植物组织中硝态氮的测定植物伤流液中无机磷含量的测定
植物组织中硝态氮的测定 【实验目的】伤流是植物根系主动吸水的证明，不同植物或同一种植物在不同季节的伤流强度均不同，伤流强度反应根系生理活动强弱和根系又吸收面积大小。伤流除含有大量水分外，还含有各种无机盐及根部合成有机物包括植物激素。硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况，因此可作为土壤肥氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。 【原理】硝态氮与硝酸试粉作用，生成粉红色的偶氮化合物，其颜色深浅与硝态氮的浓度成正相关，将样品显示的颜色与标准比色阶进行比较，可快速求得硝态氮的浓度。硝酸试粉主要是由锌粉、柠檬酸、ɑ-萘胺、对氨基苯磺酸混合而成，硝态氮与硝酸试粉反应如下： NO 3-+H + NO 2-+Zn 2++H 2O SO 3H NH 2+2H SO 3H N +N +2H 2O 对氨基苯磺酸重氮化合物NH 2 SO 3H N +N + N NH 2 ɑ-萘胺重氮化合物对-苯磺酸-偶氮-萘胺 【实验材料】接骨木伤流液 【实验试剂】硝酸试粉、50%醋酸、50mg/L 氮流液 【实验步骤】在比色盘的五个孔中加入如表所示溶液： 5min 后即成5个不同浓度20、40、60、80、100 mg/mL 硝态氮的比色阶。再用6号孔中加入伤流液5滴及硝酸试粉1勺，搅拌，5min 后，将其所显粉红色与标准比色阶比较确定样品液中硝态氮的浓度。 【实验结果及处理】 1.经过比色样品溶液的颜色介于2~3之间。 2.根据结果，伤流液中硝态氮的浓约为(10/5+20/10)/2=2mg/mL 【讨论】 1. 如若伤流液浓度过高，超过容量范围可先将伤流液稀释一定倍数后在进行滴加。
铵态氮和硝态氮测定方法!!! - 副本
铵态氮测量方法（2mol?L-1KCl浸提—靛酚蓝比色法） 1）方法原理 2mol?L-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。在含氮0.05～0.5mol?L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。 2）试剂 （1）2mol?L-1KCl溶液称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯）溶于水中，稀释至1L。 （2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH，化学纯）10g和硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀释至1L。此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。 （3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4?7H2O，化学纯）7.06g、磷酸钠（Na3PO4?12H2O，化学纯）31.8g和52.5g?L-1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含10%有效氯的漂白粉溶液)5mL溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。 （4）掩蔽剂将400g?L-1的酒石酸钾钠（KNaC4H4O6?4H2O，化学纯）与100g?L-1的EDTA二钠盐溶液等体积混合。每100mL 混合液中加入10 mol?L-1氢氧化钠0.5mL。
（5）2.5μg?mL –1铵态氮（NH4+—N）标准溶液称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO4，分析纯0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制备成含铵态氮（N）100μg?mL –1的贮存溶液；使用前将其加水稀释40倍，即配制成含铵态氮（N）2.5μg?mL –1的标准溶液备用。 3）仪器与设备：往复式振荡机、分光光度计。 4）分析步骤 （1）浸提称取相当于10.00g干土的新鲜土样（若是风干土，过10号筛）准确到0.01g，置于150mL三角瓶中，加入氯化钾溶液100mL，塞紧塞子，在振荡机上振荡1h。取出静置，待土壤—氯化钾悬浊液澄清后，吸取一定量上层清液进行分析。如果不能在24h内进行，用滤纸过滤悬浊液，将滤液储存在冰箱中备用。 （2）比色吸取土壤浸出液5mL(含NH4+—N2μg～25μg)放入50mL容量瓶中，用氯化钾溶液补充至10mL，然后加入苯酚溶液5mL和次氯酸钠碱性溶液5mL，摇匀。在20℃左右的室温下放置1h后（注1），加掩蔽剂1mL以溶解可能产生的沉淀物，然后用水定容至刻度。用1cm比色槽在625nm波长处（或红色滤光片）进行比色，读取吸光度。 （3）工作曲线分别吸取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL NH4+—N标准液于50mL容量瓶中，各加10mL氯化钠溶液，
土壤硝态氮和铵态氮的测定方法
一、原理： 过滤后的样品经过一个开放的镀铜镉还原器通道后，硝酸根被还原成亚硝酸根，亚硝酸根通过磺胺处理后，与N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐偶联，形成深红色的偶氮染料，然后在550nm或者520nm比色分析。 二、样品处理 土壤鲜样采取四分法处理，根据实验用量进行过筛（比目大小视样品含水量而定）。过筛后的土样，取出5g土样放入离心管，加入25ml 氯化钾提取液（2moL/L），震荡2小时后进行离心（8000 g ，15min），静置后过滤，取上清液测定。若不能及时测定，放入4℃冰箱保存。 三、试剂配制： 试剂用水：蒸馏水或去离子水。 （1）显色试剂：（棕色玻璃瓶，避光保存） 150ml水，加入25ml浓磷酸▲，冷却至室温后，加入10g磺胺，再加入0.5g N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐溶解。用水定容至250ml。加入浓缩探针清洗液（表面活性剂）。 （2）氯化铵-EDTA缓冲液（ammonium chloride-EDTA）：把85g氯化铵和0.1g 乙二胺四乙酸二钠盐（EDTA-Na2）溶解 于水，定容至1L。用浓氨水▲调节PH至。 （3）硝化组件缓冲液：{用来清洗OTCR(镀铜镉还原器通道)}取100ml的氯化铵-EDTA缓冲液，稀释至1L。调节PH至。（4）2%硫酸铜： 10g 五水硫酸铜（）溶于水，定容至500ml。 （5）5mol/L盐酸： 小心慢慢加入浓盐酸▲于水中，冷却后定容至100ml。 （6）硝酸盐存储溶液(1g/L)：（溶液6个月内有效） 7.218g硝酸钾溶于水，定容至1L，加入1ml氯仿▲（防腐剂）。（7）比色管清洗液：（定容时缓慢，防止出现泡沫，室温保存,两个月内有效）取50ml比色管清洗液，加水定容至1L。 （8）进样针清洗液：（定容时缓慢，防止出现泡沫，室温保存，两个月内有效。） 取进样针清洗液，加水定容至1L。 四、测定方法： 土壤硝态氮测定采用SmartChem全自动间断化学分析仪。
土壤中氮含量的测定分析(精)
土壤中氮含量的测定分析 核心提示：摘要：概述了土壤中氮元素的存在形式、土壤全氮、无机氮(包括铵态氮、硝态氮)水解氮、酰胺态氮的测定方法。关键词：土壤；全氮；测定方法土壤是作物氮素营养的主要来源，土壤中的氮素包括无机态氮和有机态... 摘要：概述了土壤中氮元素的存在形式、土壤全氮、无机氮(包括铵态氮、硝态氮)水解氮、酰胺态氮的测定方法。 关键词：土壤；全氮；测定方法 土壤是作物氮素营养的主要来源，土壤中的氮素包括无机态氮和有机态氮两大类，其中95%以上为有机态氮，主要包括腐殖质、蛋白质、氨基酸等。小分子的氨基酸可直接被植物吸收，有机态氮必须经过矿化作用转化为铵，才能被作物吸收，属于缓效氮。 土壤全氮中无机态氮含量不到 5%，主要是铵和硝酸盐，亚硝酸盐、氨、氮气和氮氧化物等很少。大部分铵态氮和硝态氮容易被作物直接吸收利用，属于速效氮。无机态氮包括存在于土壤溶液中的硝酸根和吸附在土壤颗粒上的铵离子，作物都能直接吸收。土壤对硝酸根的吸附很弱，所以硝酸根非常容易随水流失。在还原条件下，硝酸根在微生物的作用下可以还原为气态氮而逸出土壤，即反硝化脱氮。部分铵离子可以被粘土矿物固定而难以被作物吸收，而在碱性土壤中非常容易以氨的形式挥发掉。土壤腐殖质的合成过程中，也会利用大量无机氮素，由于腐殖质分解很慢，这些氮素的有效性很低。 土壤中的氮素主要来自施肥、生物固氮、雨水和灌溉水，后二者对土壤氮贡献很小，施肥是耕作土壤氮素的主要来源，而自然土壤的氮素主要来自生物固氮。 土壤含氮量受植被、温度、耕作、施肥等影响，一般耕地表层含氮量为0.05%～0.30%，少数肥沃的耕地、草原、林地的表层土壤含氮量在 0.50%～0.60%以上。我国土壤的含氮量，从东向西、从北向南逐渐减少。进入土壤中的各种形态的氮素，无论是化学肥料，还是有机肥料，都可以在物理、化学和生物因素的作用下进行相互转化。 1 土壤全氮的测定 1.1 开氏法 近百年来，许多科学工作者对全氮的测定方法不断改进，提出了许多新方法，主要有重铬酸钾-硫酸消化法、高氯酸-硫酸消化法、硒粉-硫酸铜-硫酸消化法。但开氏法目前仍作为一个统一的标准方法，此法容易掌握，测定结果稳定，准确率较高。 开氏法测氮的原理为：在盐类和催化剂的参与下，用浓硫酸消煮，使有机氮分解为铵态氮。碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以酸标准溶液滴定，求出土壤全氮含量（不包括硝态氮）。含有硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消
铵态氮硝态氮测量方法
铵态氮和硝态氮测定方法 铵态氮测量方法（2mol ?L -1KCl 浸提—靛酚蓝比色法） 1）方法原理 2mol ?L -1KCl 溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。在含氮0.05～0.5mol ?L -1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。 2）试剂 （1）2mol ?L -1KCl 溶液称取149.1g KCl ，化学纯）溶于水中，稀释至1L 。 （2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH ，化学纯）10g 和硝基铁氰化钠 [Na2Fe(CN)5NO 2H 2O]100mg稀释至1L 。此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。 （3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g 、磷酸氢二钠（Na 2HPO 4?7H 2O ，化学纯）7.06g 、磷酸钠（Na 3PO 4?12H 2O ，化学纯）31.8g 和52.5g ?L -1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含10%有效氯的漂白粉溶液)5mL 溶于水中，稀释至1L ，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。 （4）掩蔽剂将400g ?L -1的酒石酸钾钠（KNaC 4H 4O 6?4H 2O ，化学纯）与100g ?L -1的EDTA 二钠盐溶液等体积混合。每100mL 混合液中加入10 mol?L -1氢氧化钠0.5mL 。 （5）2.5μg ?mL – 1铵态氮（NH4+—N ）标准溶液称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO 4，分析纯0.4717g 溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L ，制备成含铵态氮（N ）100μg ?mL – 1的贮存溶液；使用前将其加水稀释40倍，即配制成含铵态氮（N ）2.5μg ?mL –1的标准溶液备用。 3）仪器与设备：往复式振荡机、分光光度计。 4）分析步骤 （1）浸提称取相当于10.00g 干土的新鲜土样（若是风干土，过10号筛）准确到0.01g ，置于150mL 三角瓶中，加入氯化钾溶液100mL ，塞紧塞子，在振荡机上振荡1h 。取出静置，待土壤—氯化钾悬浊液澄清后，吸取一定量上层清液进行分析。如果不能在24h 内进行，用滤纸过滤悬浊液，将滤液储存在冰箱中备用。 （2）比色吸取土壤浸出液5mL(含NH4+—N2μg ～25μg) 放入50mL 容量瓶中，用氯化钾溶液补充至10mL ，然后加入苯酚溶液5mL 和次氯酸钠碱性溶液5mL ，摇匀。在20℃左右的室温下放置1h 后（注1），加掩蔽剂1mL 以溶解可能产生的沉淀物，然后用水定容至刻度。用1cm 比色槽在625nm 波长处（或红色滤光片）进行比色，读取吸光度。 （3）工作曲线分别吸取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL NH4+—N 标准液于50mL 容量瓶中，各加10mL 氯化钠溶液， 同（2）步骤进行比色测定。 5）结果计算 土壤中NH4+—（N ）含量（mg ?kg-1）= 式中：ρ——显色液铵态氮的质量浓度(μg ?mL –1) ；V ——显色液的体积(mL)；ts ——分取倍数； m ——样品质量（g ）。 6）注释 注1. 显色后在20℃左右放置1h ，再加入掩蔽剂. 过早加入会使显色反应很慢，蓝色偏弱；加入过晚，则生成的氢氧化物沉淀可能老化而不易溶解.
土壤硝态氮铵态氮的测定
（二）土壤硝态氮的测定 1、酚二磺酸比色法 1）方法原理 土壤用饱和CaSO4 2H2O溶液浸提，在微碱性条件下蒸发至干，土壤浸提液中的NO3－—N在无水的条件下能与酚二磺酸试剂作用，生成硝基酚二磺酸。 C6H3OH(HSO3)2+HNO3→C6H2OH(HSO3)2 NO2+H2O 2，4-酚二磺酸 6-硝基酚-2，4-二磺酸 此反应必须在无水条件下才能迅速完成，反应产物在酸性介质中无色，碱化后则为稳定的黄色溶液，黄色的深浅与NO3－—N含量在一定范围内成正相关，可在400～425nm处（或用蓝色滤光片）比色测定。酚二磺酸法的灵敏度很高，可测出溶液中0.1mg?L-1 NO3－—N，测定范围为0.1～2mg?L-1。 2）主要仪器 分光光度计、水浴锅、瓷蒸发皿。 3）试剂 （1）酚二磺酸试剂： 称取白色苯酚（C6H5OH，分析纯）25.0g置于500mL三角瓶中，以150mL纯浓H2SO4溶解，再加入发烟H2SO475mL并置于沸水中加热2h，可得酚二磺酸溶液，储于棕色瓶中保存。使用时须注意其强烈的腐蚀性。如无发烟H2SO4，可用酚25.0g，加浓H2SO4225mL，沸水加热6h配成。试剂冷后可能析出结晶，用时须重新加热溶解，但不可加水，试剂必须贮于密闭的玻塞棕色瓶中，严防吸湿。 （2）10μg?mL-1 NO3－—N标准溶液： 准确称取KNO3（二级）0.7221g溶于水，定容1L，此为100μg?mL-1 NO3－—N 溶液，将此液准确稀释10倍，即为10μg?mL-1 NO3－—N标准溶液。 （3）CaSO4?2H2O（分析纯、粉状）、 （4）CaCO3（分析纯、粉状）、 （5）1:1 NH4OH、 （6）活性碳（不含NO3－），用以除去有机质的颜色。 （7）Ag2SO4（分析纯、粉状）、Ca(OH)2（分析纯、粉状）和MgCO3（分析纯、粉状），用以消除Cl-1的干扰。 4）操作步骤 （1）浸提： 称取新鲜土样（注1）50g（风干土样25g）放在500mL三角瓶中，加入CaSO4?2H2O 0.5g（注2）[凝聚剂的作用，使滤液不混浊而澄清]和250.00mL蒸馏水，盖塞后，用振荡机振荡10min。放置5 min后，将悬液的上部清液用干滤纸过滤，澄清的滤液收集地干燥洁净的三角瓶中。如果滤液因有机质而呈现颜色，可加活性碳除之（注3、4）。还有NO2-干扰和Cl干扰： （1）同时做空白。 （2）测定 吸取清液 25～50mL（含NO3－—N 20～150μg）于瓷蒸发皿中，加CaCO3约0.05g （注5）[调节pH，防止NO3－—N在酸性和中性条件下蒸干分解而损失]，在水浴上蒸干（注6），到达干燥时不应继续加热。稍冷，迅速加入酚二磺酸试剂1---2 mL，将皿旋转，使试剂接触到所有的蒸干物。静止10min使其充分作用后，加水20 mL，用玻璃棒搅拌直到蒸干物完全溶解。冷却后缓缓加入1：1 NH4OH（注7）并不断搅拌混匀，至溶液呈微碱性（溶液显黄色不再加深）再多加2mL，以保
土壤硝态氮的测定
土壤硝态氮的测定 A 紫外分光光度法 1、方法提要 土壤浸出液中的NO 3- ，在紫外分光光度计波长210nm 处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH -、CO 32-、HCO 3-、NO 2-和有机质等外，吸光度均很小。将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH -、CO 32-、HCO 3-的干扰。NO 2-一般含量极少，也很容易消除。因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NO 3-的含量。 待测液酸化后，分别在210nm 和275nm 处测定吸光度。A 210是NO 3-和以有机质为主的杂质的吸光度；A 275只是有机质的吸光度，因为NO 3-在275nm 处已无吸收。但有机质在275nm 处的吸光度比在210nm 处的吸光度要小R 倍，故将A 275校正为有机质在210nm 处应有的吸光度后，从A 210中减去，即得NO 3-在210nm 处的吸光度(△A)。 2、适用范围 本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。 3、主要仪器设备 3.1紫外—可见分光光度计； 3.2石英比色皿； 3.3往复式或旋转式振荡机，满足180r/min ±20r/min 的振荡频率或达到相同效果； 3.4塑料瓶：200mL 。 4、试剂 4.1H 2SO 4溶液(1：9)：取10mL 浓硫酸缓缓加入90mL 水中。 4.2氯化钙浸提剂[c(CaCl 2)=0.01mol ·L -1]：称取2.2g 氯化钙(CaCl 2·6H 2O ，化学纯)溶于水中，稀释至1L 。 4.3 硝态氮标准贮备液[ρ(N)=100mg ·L -1]：准确称取0.7217g 经105~110℃烘2h 的硝酸钾(KNO 3，优级纯)溶于水，定容至1L ，存放于冰箱中。
硝态氮测定
土壤铵、硝态氮的测定 （1）待测滤液的制备（水：土=10：1） 称取10g待测样品准确到0.01g，置于大白瓶中，加入100ml 0.01mol/l的CaCl2溶液，以200 r/min 25℃振荡30min，取出静置5-10min后将悬液的上部清液用干滤纸（定性滤纸）过滤，得待测滤液。 （2）硝态氮—紫外分光光度法 取上述滤液5.00 ml于50 ml容量瓶，用重蒸水定容，得待测液（一般不需要稀释，浸提液过滤后直接测定即可，但是刚施完肥的土壤硝态氮含量较高，建议取2-3样品做直接上机测定一下，标线5mg/L对应读数为1.05-1.1左右，然后决定稀释倍数）。用标线0调零，测定此待测液在220nm和275nm处吸光度A220和A275。按照下式计算校正吸光度A：A= A220-2A275。 绘制硝态氮标准曲线： 分别取100mg/L硝酸盐(NO3--N)标准溶液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL 于100mL容量瓶,若直接测定则用浸提剂（0.01mol/l的CaCl2）定容摇匀（用蒸馏水定容即可，蒸馏水与CaCl2吸光值无差异），即分别配成0、1、2、3、4、5 mg/L 的标准系列溶液。用标线0调零，分别用石英比色皿在220nm和275nm处测定标曲吸光度。用公式：A= A220 -2A275求得校正吸光度，以氮浓度为纵坐标，A （A= A220-2A275）为横坐标绘制得标准曲线。 注:标准曲线要先进行配置，并且在配置前先把紫外分光光度计打开预热30min，以节约时间。标曲根据土壤中硝态氮含量配制，标线最大值做到5，R2可达0.999以上，一般做到6/7/8即可，R2仅0.99，线性相关不好，标线要重新配置，标线275nm读数一般为0。 （3）铵态氮—靛酚蓝比色法 取步骤（1）中的滤液10.00 ml（一般吸取土壤浸出液5或10ml，具体吸取量要考虑施肥时期）于50mL容量瓶中，再加入苯酚溶液5.00 ml和次氯酸钠碱性溶液5.00mL，摇匀。在20 ℃左右的室温（或烘箱）下放置1h显色后，加掩蔽剂1ml以溶解可能产生的沉淀物，然后用水定容至刻度。用标线0调零，用1cm石英（玻璃）比色皿于625nm波长处进行比色，记录下吸光度。 注：掩蔽剂应在20 ℃左右的室温下放置1h显色后加入。过早加入会使得显色反应过慢，蓝色偏弱；加入过晚则生成的氢氧化物沉淀可能老化而不易溶解。 配制铵态氮标准曲线： 测定当天将100mg/L的铵态氮标准储存液稀释40倍,即为2.5mg/L的铵氮标准液。分别移取2.5mg/L铵态氮标准溶液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00于50mL容量瓶中，即分别配成0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/L的标准系列溶液，然后加入苯酚溶液5.00 ml和次氯酸钠碱性溶液5.00mL，摇匀。在20 ℃左右的室温下（烘箱）放置1h后，加掩蔽剂1ml以溶解可能产生的沉淀物，然后用水定容至刻度。用标线0调零，用1cm比色皿于625nm波长处进行比色，记录吸光度。以铵态氮浓度为纵坐标，A625为横坐标绘制得标准曲线。
土壤硝态氮的测定
土壤硝态氮的测定 This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020
土壤硝态氮的测定 A 紫外分光光度法 1、方法提要 土壤浸出液中的NO3-，在紫外分光光度计波长210nm处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH-、CO32-、HCO3-、NO2-和有机质等外，吸光度均很小。将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO32-、HCO3-的干扰。NO2-一般含量极少，也很容易消除。因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NO3-的含量。 待测液酸化后，分别在210nm和275nm处测定吸光度。A210是NO3-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因为NO3-在275nm处已无吸收。但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A210中减去，即得NO3-在210nm处的吸光度(△ A)。 2、适用范围 本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。 3、主要仪器设备 紫外—可见分光光度计； 石英比色皿； 往复式或旋转式振荡机，满足180r/min±20r/min的振荡频率或达到相同效果； 塑料瓶：200mL。
4、试剂 溶液(1：9)：取10mL浓硫酸缓缓加入90mL水中。 氯化钙浸提剂[c(CaCl2)=·L-1]：称取2.2g氯化钙 (CaCl2·6H2O，化学纯)溶于水中，稀释至1L。 硝态氮标准贮备液[ρ(N)=100mg·L-1]：准确称取0.7217g 经105~110℃烘2h的硝酸钾(KNO3，优级纯)溶于水，定容至1L，存放于冰箱中。 硝态氮标准溶液[ρ(N)=10mg·L-1]：测定当天吸到硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中用水定容。 5、操作步骤 称取10.00g土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50mL氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20℃~25℃振荡 30min(180r/min±20r/min)，干过滤。 吸取待测液于50mL三角瓶中，加：9 H2SO4溶液酸化，摇匀。用滴管将此液装入1cm光径的石英比色槽中，分别在210nm和275nm处测读吸光值(A210和A275)，以酸化的浸提剂调节仪器零点。以NO3-的吸光值(△A)通过标准曲线求得测定液中硝态氮含量。空白测定除不加试样外，其余均同样品测定。 NO3-的吸光值(△A)可由下式求得： △A= A210- A275×R 式中R为校正因数，是土壤浸出液中杂质(主要是有机质)在210nm和275nm处的吸光度的比值。其确定方法为： A210是波长210nm处浸出液中NO3-的吸收值(A210硝)与杂质(主要是有机质)的吸收值(A210杂)的总和，即A210= A210硝+ A210杂，得出A210
硝态氮的测定
第四章硝态氮的测定 4.1 实验材料 4.1.1 实验土样 与2.1.1相同 4.1.2 实验仪器 分光光度计、具塞比色管（25ml）、自动移液管（1ml）和一般实验室常用仪器和设备。 4.1.3 实验药品 锌卷、氯化铬溶液（20g/L）、氨基苯磺酰胺溶液、1-萘替乙二胺盐酸溶液。 4.2 实验方法 4.2.1 标准工作曲线的绘制（0μmol/ml—16.0μmol/ml） 1、在两组个六个25ml容量瓶中，分别依次移入硝酸盐标准使用溶液（100mol/L）0ml,0.50ml,1.00ml,1.50ml,2.50ml,4.00ml,用盐度为35的人工海水稀释至标线，混匀。次标准溶液系列系列硝酸盐-氮浓度依次为0μmol/ml,2.00μmol/ml,4.00μmol/ml,6.00μmol/ml,10.00,16.0μmol/ml。 2、将上述标准液系列分别全量转移一组干燥的25ml具塞比色管中，向每管中放入一个5cm*3cm的锌卷，加入0.50ml氯化铬溶液，迅速放在振荡器上震荡10min。震荡后迅速将管中的锌卷取出。 3、加入0.50ml对氨基苯磺酰胺溶液，混匀，放置5min，再加入0.50ml1-萘替乙二胺盐酸溶液，混匀，放置15min，颜色可稳定4h。 4、颜色稳定后，在分光光度计上用2cm比色池，以水做参比，于543nm波长处测定吸光度As，其中空白吸光值为Ah。测定结果记录于标准工作曲线记录表中。 5、已扣除空白吸光值Ah后的吸光值An为纵坐标，硝酸盐-氮的浓度Co为横坐标绘制标准工作曲线，并用线性回归法求出标准曲线截距a和斜率b。 4.2.2 水样测定 量取25.0ml水样（双样）于25ml干燥的具塞比色管中，一下按4.2.1中的2—4步骤测定水样的吸光值Aw，并记录于硝酸测定记录表中。 如果水样盐度低于25，测定时每份水样应加入0.5g优级纯氯化钠。 将海水样样品中原有亚硝酸盐在“亚硝酸盐测定”测得的净平均吸光值 A NO3-N（已扣除试剂空白）。和“硝酸盐测定”与“亚硝酸盐测定”的比色池长度的壁纸X，记录于硝酸盐测定记录表中。
土壤硝态氮和铵态氮的测定方法
土壤硝态氮和铵态氮的测定方法 土壤硝态氮测定方法 一、原理: 过滤后的样品经过一个开放的镀铜镉还原器通道后～硝酸根被还原成亚 硝酸根～亚硝酸根通过磺胺处理后～与N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐偶 联～形成深红色的偶氮染料～然后在550nm或者520nm比色分析。二、样品 处理 土壤鲜样采取四分法处理～根据实验用量进行过筛,比目大小视样 品含水量而定,。过筛后的土样～取出5g土样放入离心管～加入25ml 氯化钾提取液,2moL/L,～震荡2小时后进行离心,8000 g ～15min,～ 静置后过滤～取上清液测定。若不能及时测定～放入4?冰箱保存。三、试剂配制: 试剂用水:蒸馏水或去离子水。 (1)显色试剂:,棕色玻璃瓶～避光保存, 150ml水～加入25ml浓磷酸?～冷却至室温后～加入10g磺胺～ 再加入0.5g N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐溶解。用水定容至 加入2.0ml浓缩探针清洗液,表面活性剂,。 250ml。 (2)氯化铵-EDTA缓冲液,ammonium chloride-EDTA,: 把85g氯化铵和0.1g 乙二胺四乙酸二钠盐,EDTA-Na,溶解于2 水～定容至1L。用浓氨水?调节PH至8.5。 (3)硝化组件缓冲液:{用来清洗OTCR(镀铜镉还原器通道)} 取100ml的氯化铵-EDTA缓冲液～稀释至1L。调节PH至8.5。 (4)2%硫酸铜: 10g 五水硫酸铜,CuSO.5HO,溶于水～定容至500ml。 42
(5)5mol/L盐酸: 小心慢慢加入50.69ml浓盐酸?于水中～冷却后定容至100ml。 ,6,硝酸盐存储溶液(1g/L):,溶液6个月内有效, 7.218g硝酸钾溶于水～定容至1L～加入1ml氯仿?,防腐剂,。 (7)比色管清洗液:,定容时缓慢～防止出现泡沫～室温保存,两个月 内有效,取50ml比色管清洗液～加水定容至1L。 (8)进样针清洗液:,定容时缓慢～防止出现泡沫～室温保存～两个 月内有效。, 取0.5ml进样针清洗液～加水定容至1L。 四、测定方法: 土壤硝态氮测定采用SmartChem全自动间断化学分析仪。 土壤铵态氮测定方法 一、样品处理 土壤鲜样采取四分法处理～根据实验用量进行过筛,比目大小视样品含水量而定,。过筛后的土样～取出5g放入离心管～加入25ml KCL提取液,2moL/L,～震荡2小时后进行离心,8000 g ～15min,～静置后过滤～取上清液测定。若不能及时测定～放入4?冰箱保存(最长保存期限28天)。二、试剂配制: 试剂用水:蒸馏水或去离子水。空气中存在氨～易被吸收～故试剂用水不宜久放。 (1)苯酚钠溶液:,棕色玻璃瓶～避光保存～可稳定两周, 称取8g氢氧化钠?～溶于水～待冷却到室温后～加入20.75g 苯酚?～定容至250ml。 (2)次氯酸钠溶液:(每日新鲜配制, 取25ml的安替福民,次氯酸钠溶液,?～定容至50ml。