常见食用豆类中黄酮类化合物含量的测定
２００９年７月
第２４卷第７期
中国粮油学报
ＪｏｕｒｎａｌｏｆｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅＣｅｒｅａｌｓａｎｄＯｉｌｓＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ
Ｖ０１．２４．Ｎｏ．７
Ｊｕｌ．２００９
常见食用豆类中黄酮类化合物含量的测定
任顺成王鹏王国良马宇翔陈丽兰
（河南工业大学粮油食品学院，郑州４５００５２）
摘要以芦丁为标样应用氯化铝显色法、硝酸铝显色法分别测定１５种常见食用豆类中的黄酮类化合物总含量，以染料木素做为标样应用直接比色法测定其中食用豆类样品中异黄酮的总含量，利用高压液相色谱法测定常见食用豆类中的４种大豆异黄酮单体成分的含量。结果表明：使用氯化铝显色法进行测定，赤豆、绿豆等７种食用豆类显示合有黄酮类化合物，并且含量最多的赤豆为０．５０１ｍｇ／ｇ。硝酸铝显色法测定豆类样品黄酮类总合量为０．２９７～８．８４４ｍｇ／ｇ。直接比色法测定食用豆类中异黄酮总含量为１．９９４—８．８４０ｍｇ／ｇ。高压液相色谱法测定４种大豆异黄酮单体成分的总含量为０．０３１～３．３４５ｍｇ／ｇ。
关键词食用豆类黄酮类异黄酮比色法高压液相色谱
中图分类号：ＴＳ２１４文献标识码：Ａ文章编号：１００３—０１７４（２００９）０７—０１３２—０６
食用豆类是以收获籽粒兼做蔬菜供人类食用的豆科作物的统称。食用豆类不仅是重要的粮食资源之一，而且具有很高的营养价值。食用豆类中除含有丰富的油脂和优质蛋白以外，还含有多种生物活性物质，其中含有多种维生素，矿物质以及黄酮类化合物［１｜。
黄酮类又称生物类黄酮，为植物多酚类的代谢物，是广泛存在于自然界的一大类化合物，大多有颜色。黄酮类化合物具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗骨质疏松、抗肿瘤等多种生物活性，是重要的食品添加剂和营养强化剂…２。其中大豆异黄酮作为黄酮类化合物中的异黄酮成分，其分子结构骨架是３一苯色原酮，目前发现的大豆异黄酮主要有１２种，分为三大类，即大豆苷类（ＤａｉｄｚｉｎＧｒｏｕｐｓ）、染料木苷类（ＧｅｎｉｓｔｉｎＧｒｏｕｐｓ）、大豆黄素苷类（ＧｌｙｃｉｔｉｎＧｒｏｕｐｓ），以游离型、葡萄糖苷型、乙酰基葡萄糖苷型、丙二酰基葡萄糖苷型等４种形式存在，其中游离型占总量的２％一３％［３１。大豆异黄酮具有明显的抗氧化作用，药理学研究表明大豆异黄酮可作为雌性激素治疗替代品，能改善妇女更年期综合症，并有效降低血胆固醉含量，防止骨质疏松及抑制癌细胞增长等［４｜。
采用氯化铝显色法、硝酸铝显色法分别测定了
收稿日期：２００８—０７—０８
作者简介：任顺成，男，１９６３年出生，副教授，博士，硕士生导师，天然活性成分及其功能评价１５种常见食用豆类中的黄酮类化合物总含量，应用直接测定法测定食用豆类中异黄酮的总含量，利用高压液相色谱法对样品中的４种大豆异黄酮单体含量进行了测定。为评价食用豆类的保健功能以及为优良品种的选育、栽培提供参考。
１材料与方法
１．１材料与仪器
大豆、黑小豆、绿大豆、黑大豆、蚕豆、绿豆、红小豆、刀豆、芸豆、饭豆、麻豇豆、豌豆、花豇豆、小扁豆和鹰嘴豆：市售。’
芦丁标样：分析纯，上海华硕精细化学品有限公司；大豆苷、大豆苷元、染料木苷、染料木素：标样，纯度ｉ＞９８％，美国ｓｉｇｎａ公司。
ＷＦＺＵＶ一２０００型紫外分光光度仪：尤尼卡（上海）仪器有限公司；ＬＣ卜１０Ａｔ、，ｐ型高效液相色谱仪、ｓＰ卜１０Ａｖｖｐ型紫外检测器、ｓｃＬ＿１０Ａ、ｒｐ型系统控制器、ＣＴＯ－－１０Ａｓｖｐ型柱温箱：日本岛津公司。
１．２试验方法
１．２．１食用豆类中黄酮类化合物的提取
将食用豆类样品粉碎，过４０目筛，以石油醚在６５℃温度下回流脱脂１ｈ，抽滤后放在５０℃左右的烘箱里干燥，备用。准确称取脱酯豆粉５．０ｇ，用７５％的乙醇，以１
ｇ
５ｍＬ的料液比，在６０℃温度下，浸提２ｈ，冷却后，用循环水式真空泵进行抽滤，最后再用中速滤纸过滤，得到澄清的提取液，定容在
万方数据
第２４卷第７期任顺成等常见食用豆类中黄酮类化合物含量的测定１３３
５０ｍＬ的容量瓶中，备用［５—６Ｊ。
１．２．２食用豆类中黄酮总量的测定
１．２．２．１氯化铝显色法测黄酮含量
用移液管准确吸取１ｍＬ食用豆类提取液置于２５ｍＬ容量瓶中，加２０ｍＬ０．１ｍｏｌ／Ｌ三氯化铝，定容，摇匀，１０ｍｉｎ后在４１９ｎｉｎ处比色测定吸光值。用芦丁作标样，配制不同浓度的标样溶液，绘制标准曲线，根据标准曲线计算食用豆类中的黄酮总量［７—９｜。１．２．２．２硝酸铝显色法测黄酮含量
用移液管准确吸取５ｍＬ食用豆类提取液置于２５ｍＬ容量瓶中，加入０．７ｍＬ５％ＮａＮ０２，摇匀，放置５ｍｉｎ后，加入０．７ｍＬ１０％硝酸铝，６ｍｉｎ后再加入５ｍＬｌｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠，混匀，用７５％乙醇定容，１０ｒｎｉｌ屑在５１０ｎｍ处比色测定。用芦丁作标样，配制不同浓度的标样溶液，绘制标准曲线，根据标准曲线计算食用豆类中的黄酮总量［１０］。
１．２．３食用豆类中大豆异黄酮总含量的测定用移液管准确吸取１ｍＬ提取液于２５０ｍＬ容量瓶中，７５％乙醇定容，摇匀，１０ｍｉｎ后直接在２７０ｎｒｆｌ处测定其吸光值。以染料木素作标样，配制不同浓度的标样溶液，绘制标准曲线，根据标准曲线计算大豆异黄酮的总量【１１Ｊ。
１．２．４高压液相色谱法测定大豆异黄酮单体含量１．２．４．１样品处理
将５ｍＬ提取液定容至２５ｍＬ。摇匀后过０．４５胛滤膜，滤液转入高压液相色谱专用小瓶中，用液相色谱分析提取液中大豆异黄酮单体的含量。１．２．４．２色谱分析条件
流动相：甲醇：０．５％醋酸溶液３０％～７０％梯度洗脱；色谱柱：ＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳ一３柱（４．６ｔｏｎｉ×２５０ｍｍ）；检测波长：２５４ｎｍ，柱温：５０℃，流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ，分析时间：２０ｍｉｎ。
１．２．４．３异黄酮定性定量方法
以大豆苷、大豆苷元、染料木苷、染料木素作为标准样品，根据豆类提取物液中大豆异黄酮成分色谱峰的保留时间与标样色谱峰的保留时间进行定性。根据提取液高压液相色谱中各组分峰面积与各标样峰面积的标准曲线对样品中４种大豆异黄酮单体含量进行测定［１２－１３｜。
１．２．４．４标准曲线绘制
准确称取一定量标样（大豆苷、大豆苷元、染料木苷及染料木素）用高级色谱纯甲醇溶解，稀释至１０ＩＩｌＬ的容量瓶中。经０．４５ｔｕｎ滤膜过滤后，分别稀释一定倍数后转入高效液相色谱专用小瓶中，在选
定色谱条件下分别将上述不同浓度标样注入ＨＰＬＣ进行分析，以浓度和峰面积作图，分别得到大豆苷、大豆苷元、染料木苷及染料木素等标样标准曲线图，根据标准曲线及标样色谱图中的保留时间分别计算大豆异黄酮单体的含量。
２结果与讨论
２．１食用豆类中黄酮总量
氯化铝显色法、硝酸铝显色法的标准曲线见图１～图２，根据其标准曲线分别计算食用豆类中的黄酮总量。
ｊ翌
兴
整
Ｏ
芦丁浓度／ｍｇ／ｍＬ
图１氯化铝显色法标准曲线
图２硝酸铝显色法标准曲线
２．１．１氯化铝显色法黄酮总量测定结果
氯化铝显色法黄酮总量测定结果见表１。
表１氯化铝显色法测定黄酮含量
豆类样品黄酮亨量豆类样品黄酮争量
“ｇ／ｇｒａｇ／ｇ赤豆０．５０１花豇豆０．００９
小扁豆０刀豆０．３０４
绿大豆０豌豆０
蚕豆０麻豇豆０
大豆０绿豆０．３５９
黑小豆０．４０３饭豆０．１１８
黑大豆０．１４０鹰嘴豆０
芸豆０
由表１可知，使用氯化铝显色法进行测定时，只有赤豆、黑小豆、黑大豆、豇豆、刀豆、绿豆、饭豆７种食用豆显示含有黄酮类化合物，并且含量最多的赤
万方数据
１３４中国粮油学报２００９年第７期
豆为０．５０１ｍｅ／ｇ（每克脱脂豆粉中所含的黄酮类），其含量由大到小的顺序为：赤豆＞黑小豆＞绿豆＞刀豆＞黑大豆＞饭豆＞豇豆，而另外８种食用豆：小扁豆、绿大豆、蚕豆、大豆、芸豆、豌豆、麻豇豆、鹰嘴豆则未检出黄酮类。
２．１．２硝酸铝显色法黄酮总量测定结果
硝酸铝显色法黄酮总量测定结果见表２。
表２硝酸铝显色测定黄酮含量
豆类样品黄酮拿量豆类样品考篡多尹
ｒａｇ／ｇ
赤豆７．７４２花豇豆５．８１７
小扁豆２．２７６刀豆１．５２７
绿大豆０．４６９豌豆０．３８１
蚕豆１．５５２麻豇豆８．８４４
大豆０．５７２绿豆０．９４９
黑小豆５．５８７饭豆３．３７８
黑大豆１．７８１鹰嘴豆Ｏ．２９ｒ７
芸豆２．５８９
由表２可知，１５种豆类中均含有黄酮类，含量为８．８４４～０．２９７ｍｇ／ｇ。其中，麻豇豆的含量最高为８．８４４ｍｅ／ｇ；鹰嘴豆的含量最低为０．２９７ｍｇ／ｇ。其含量由大到小的排序为：麻豇豆＞赤豆＞豇豆＞黑小豆≥饭豆＞芸豆＞小扁豆＞黑大豆＞刀豆＞蚕豆＞绿豆＞大豆＞绿大豆＞豌豆＞鹰嘴豆。
２．１．３两种显色方法测定结果的比较
从上述两种比色方法测定结果可以看出，三氯化铝和硝酸铝显色法测定的结果差异较大，主要是由于各样品中黄酮类类型不同以及两种显色方法的显色机理不同造成的。
三氯化铝显色法反应原理：黄酮类化合物的甲醇（或乙醇）溶液中加入三氯化铝试剂时，能使黄酮酚羟基离解或形成络合物，导致吸收光谱变化。三氯化铝可与具有３一羟基、４一羰基或５一羟基、４一羰基的黄酮或黄酮醇类化合物作用，也能与Ａ环或Ｂ环上的邻二酚羟基作用生成黄酮铝配合物，使吸收带红移，但邻二羟基与三氯化铝形成的络合物没有３一羟基、４一羰基或５一羟基、４一羰基形成的络合物稳定。此外一些黄酮类物质如异黄酮类、黄烷酮、儿茶素等在可见区和三氯化铝作用不显色，这可能会使测定结果偏低。由于大豆、绿大豆、黑小豆等中可能主要含异黄酮类化合物，不能与三氯化铝发生显色反应，使测定结果几乎为零。其它豆类中所含的大部分黄酮类化合物也不具备此显色法所需结构，使测定结果较低。
硝酸铝显色法反应原理：硝酸铝显色法是先用ＮａＮ０２还原黄酮类，再与ＡＰ＋络合，最后在ＮａＯＨ碱性条件下使黄酮类化合物开环，生成２７一羟基查耳酮而显色，在波长５１０ｎｌｎ左右有最大吸收，非黄酮类成分在此波长不具有吸收。与ＮａＮ０２一Ａ１（Ｎ０３）３一ＮａＯＨ试剂反应后，某些黄酮类物质（如黄芩苷、黄芩素、香蒲新苷、山奈酚、槲皮素、橙皮苷等）在５１０ｎｍ处无最大吸收或吸收很弱，而某些非黄酮类物质（如咖啡酸、原儿茶醛、绿原酸、原儿茶酸等）在５１０ｌｌｍ处有最大吸收或吸收较强，说明此方法专屙陛不强，有局限性，准确性较差。经过试验证明，以ＮａＮ０２一Ａ１（Ｎ０３），一ＮａＯＨ为显色体系，于５１０ａｍ处测定食用豆类中总黄酮含量与其他方法相比结果偏高，可能是因为食用豆类里含有许多在此处显色的非黄酮类物质，引起结果偏高【１４Ｊ。
２．２食用豆类中大豆异黄酮含量测定结果２．２．１食用豆类中大豆异黄酮总量测定结果染料木素法的标准曲线见图３，根据其标准曲线计算食用豆类中的大豆异黄酮总量。
染料木素浓度／ｔ－＇ｇ／ｍＬ
图３染料木素标准曲线
食用豆类中大豆异黄酮总量测定结果见表３。
表３直接比色法测定异黄酮总含量
豆类样品黄酮争量豆类样品黄印声量
ｍｅ，／ｇ／ｍｇ／ｇ豆类样品黄酮含量ｍｅ／ｇ豆类样品黄酮含量
赤豆３．４１３花豇豆３．５３０
小扁豆２．７６９刀豆３．１５０
绿大豆５．２４１豌豆１．９９４
蚕豆７．２７５麻豇豆３．７４９
大豆７．９３３绿豆４．２０６
黑小豆８．８４０饭豆２．９５９
黑大豆６．５１４鹰嘴豆２．７３４
芸豆２．８４２
由表３可知，１５种食用豆类中均含有异黄酮，含量为８．８４０～１．９９４ｍｇ／ｇ。其中，黑小豆的含量最高，
万方数据
第２４卷第７期任顺成等常见食用豆类中黄酮类化合物含量的测定１３５
为８．８４０ｍｅ／ｇ；豌豆的含量最低，为１．９９４ｍｇ／ｇ。其
含量由大到小的排序为：黑小豆＞大豆＞蚕豆＞黑
大豆＞绿大豆＞绿豆＞麻豇豆＞豇豆＞赤豆＞刀豆
＞饭豆＞芸豆＞小扁豆＞鹰嘴豆＞豌豆。
２．２．２食用豆类中大豆异黄酮单体含量测定结果
标样色谱图及标准曲线见图４一图１１。根据其
标准曲线分别计算食用豆类中大豆异黄酮单体含
量。
０?
之ｏ－
幽
罾Ｏ．
Ｏ．
０言。卸
０
Ｏ
之出Ｏ脚
Ｏ
Ｏ?
乏ｏ‘幽
脚Ｏ．
Ｏ．
１２．５１５１７．５２０．０２２．５
１／ｍｉｎ
图４大豆苷元色谱图
７．５１０１２．５１５１７．５２０．０２２．５
ｔ／ｒａｉｎ
图５大豆苷色谱图
１２，５１５１７．５２０．Ｏ２２．５
ｔ／ｍｉｎ
围６染料木苷色谱图
１２．５１５１７．５２０．Ｏ２２．５
ｔ／ｒａｉｎ
图７染料木素色谱图
齄
喧
髫
匿卜紫形
乳茸／
大豆苷浓度／＃ｇ／ｍＬ
图９大豆苷标准曲线
聪
恒
孥
染料木苷浓度／．ｇ／ｍＬ
图ｌＯ染料木苷标准曲线
染料木素浓度／ｔ－ｇ／ｍＬ
图１１染料木素标准曲线
将１５种样品的液相色谱图（几个代表性的色谱
图见图１２～图１５）与四种标样（大豆苷、染料木苷、大
豆苷元和染料木素）色谱图保留时间相同位置的峰
面积分别代人对应的标准曲线回归方程，计算出各
食用豆类中的大豆异黄酮含量，结果见表４。
万方数据
１３６中国粮油学报２００９年第７期０
乏
出０
脚
Ｏ
０之０
出却０
Ｏ
Ｏ言。名
０
Ｏ专。出
诤Ｏ
Ｏ０．０２．０５．０７．５１０１２．５１５１７．５２０．Ｏ２２．５
ｔ／ｒａｉｎ
图１２黑小豆液相色谱图
１０１２．５１５１７．５２０．Ｏ２２．５
ｔ／ｒａｉｎ
图１３黑大豆液相色谱图
７．５１０１２．５１５１７．５２０．Ｏ２２．５
ｔ／ｒａｉｎ
圉１４大豆液相色谱图
０．０２．０５．０７．５１０１２．５１５１７．５２０．０２２．５
ｔ／ｒａｉｎ
图１５绿大豆液相色谱图
表４食用豆类中的大豆异黄酮含量／ｍｇ／ｇ
通过高效液相色谱对１５种不同的食用豆类中
的大豆异黄酮的定性和定量分析表明：黑大豆、绿大
豆中４种异黄酮全部有检出，但以苷的形式存在为
主，其它样品如大豆、黑小豆、赤豆等含有其中的一
种或几种异黄酮成分，也多以苷的形式存在。样品
中４种异黄酮的总含量在０．０３ｌ～３．３４５耐ｇ之间，
其含量由大到小的排列顺序为：黑小豆＞大豆＞黑
大豆＞绿大豆＞赤豆＞花豇豆。
２．３紫外分光光度法与高效液相色谱法测定大豆
异黄酮含量方法的比较
紫外分光光度法所测定的各样品问大豆异黄酮
含量与高效液相色谱法测定的结果基本一致的，但
个别样品差别较大，其中蚕豆差异最大，紫外分光光
度法测定的异黄酮含量为７．２７５ｍｇ／ｇ，而用高效液相
色谱法却没有检出，可能是由于蚕豆中六羟黄酮醇
和五羟黄酮醇影响【１５Ｊ。紫外分光光度法的测定结果
都偏高，这可能因为１２种大豆异黄酮成分在２７０ｎｍ
左右都有最大吸收或较强的吸收，测定的是异黄酮
总含量。而高效液相色谱法只选用了常见的４种进
行测定，不包含其它的异黄酮成分，此外紫外分光光
度法测定的干扰因素较多，可能引起测定吸光值偏
高，因而造成高效液相色谱法测定结果比紫外分光
光度法偏低。
紫外分光光度法简便、快速、选择性好、线性范
围宽、重现性好、能基本反映出样品中大豆异黄酮的
总含量，适用于大豆异黄酮的快速检测，尤其是生产
过程的质量控制，但其测定结果的准确性较差，也不
能测定大豆异黄酮单体的含量。高效液相色谱法操
作较为复杂，成本较高，但是能够对大豆异黄酮进行
定性定量测定，且其测定结果具有很高的准确性。
３结论
３．１通过三氯化铝显色法和硝酸铝显色法两种方
法对食用豆类中黄酮类总量测定，发现两种测定结
果差别较大。使用氯化铝显色法进行测定，赤豆、绿
豆等７种食用豆类显示含有黄酮类化合物，并且含
量最多的赤豆为０．５０１ｍｇ／ｇ。硝酸铝显色法测定豆
类样品黄酮类总含量为０．２９７～８．８４４ｍｇ／ｇ。可能是
由于反应机理以及黄酮种类不同导致的，有待于进
一步研究。
３．２用直接测定法测定１５种食用豆类中的大豆异
黄酮总量，发现黑小豆、大豆、蚕豆、黑大豆、绿大豆
中都含有较多的大豆异黄酮。且其测定结果与高效
万方数据
第２４卷第７期任顺成等常见食用豆类中黄酮类化合物含量的测定１３７
液相色谱法的测定结果基本相符。直接比色法测定食用豆类中异黄酮总含量为１．９９４～８．８４０ｍｇ／ｇ。３．３高效液相色谱法是目前普遍应用的较准确的大豆异黄酮定性定量方法，通过定性定量分析１５种食用豆类中大豆异黄酮的定性定量分析，发现除大豆外，黑小豆、黑大豆、绿大豆等含有较高的大豆异黄酮含量外，其中黑小豆中大豆异黄酮的含量比大豆样品中的含量还高。高压液相色谱法测定４种大豆异黄酮单体成分的总含量为０．０３１～３．３４５ｍｇ／ｇ。
参考文献
［１］宗绪晓，关键平．食用豆类的植物学特征、营养化及产业化［Ｊ］．资源与生产，２００３，（１１）：２８—３０
［２］ＭｉｋｓｉｃｅｋＲＪ．Ｅｓｔｒｏｇｅｎｉｃｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ：ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓｆｏｒｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．ＰｒｏｃＳｏｃＥｘｐＢｉｏｌＭｅｄ，１９９５，２０８：４４—５０［３ＪＥｌｄｒｉｄｇｅＡＣ，ＫｗｏｌｅｋＷＦ．Ｓｏｙｂｅａｎｉｓｏｆｔａｖｏｎｅｓ：ｅｆｅｃｔｏｆｅｎｖｉｒｏｎ－ｍｅｒｉｔａｎｄｖａｒｉｅｔｙＯｎｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪＡＣＦｏｏｄＣｈｅｍ，１９８３，３１：３９４—３９６
［４］李玉珍，林亲录．大豆异黄酮的功能特性研究进展［Ｊ］．中国食物与营养，２００５，（１０）：２１—２２［５］朱仕房，王善利．大豆异黄酮提取条件的研究［Ｊ］．食品科学．２００１，２２（３）：５４—５９
［６］鞠兴荣，袁建，汪海峰．大豆异黄酮提取工艺的优化［Ｊ］．中国粮油学报．２００１，１２（１６）：１７—２１
［７］彭秧锡，陈启元，钟世安，等．分光光度法测定玉竹中黄酮类化合物的含量［Ｊ］．华西药学杂志，２００４（４）：（３０４—６０５［８］李玉平，易晓．大花金挖耳细胞培养物中总黄酮含量的检测［Ｊ］．安徽农业科学，２００７，３５（２９）：９１６０—９１６１
［９］李娟，张鲁刚，张昱．橙色大白菜球叶总黄酮提取与测定方法的研究［Ｊ］．园艺学报，２００７，３４（４）：９２３—９２８
［１０３唐丹．分光光度法测定田基黄中总黄酮的含量［Ｊ］．药物分析与检验，２００７，（７）：６２０—６２３
［１１］黄芸．紫外分光光度法测定大豆中异黄酮的含量［Ｊ］．大豆科学，２００７，２６（２）：２７３—２７５
［１２］王松，丁立，周荣琪．ＨＰＬＣ法测定豆粕中大豆异黄酮的含量［Ｊ］．粮食与油脂，２００５，２４（２）：１９６—２００
［１３］李桂华，姜延超．高压液相色谱法测定大豆异黄酮含量［Ｊ］．粮食与油脂，２００４（１０）：４０—４４
［１４］任顺成．玉米须黄酮类的分离、纯化、结构鉴定及生物活性研究［Ｄ］．无锡：江南大学，２００４
［１５］李雪琴，裘爱泳．蚕豆生理活性物质研究进展［Ｊ］．粮食与油脂，２ｔＸｒ２（７）：３４—３５．
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＦｌａｖｏｎｏｉｄＣｏｎｔｅｎｔｓｉｎ
ＣｏｍｍｏｎＥｄｉｂｌｅＬｅｇｕｍｅｓ
ＲｅｎＳｈｕｎｃｈｅｎｇＷａｎｇＰｅｎｇＷａｎｇＧｕｏｌｉａｎｇＭａＹｕｘｉａｎｇＣｈｅｎＬｉｌａｎ
（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＨｅｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５００５２）
ＡｂｓｔｒａｃｔＴａｋｉｎｇｒｕｔｉｎａｓｓｔａｎｄａｒｄｓｕｂｓｔａｎｃｅ。ｔｈｅｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙｍｅｔｈｏｄｓｗｉｔｈＡＩＣｌ３ａｎｄＡＩ（Ｎ０３）３ａｓｃｏｌｏｒｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇａｇｅｎｔｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｔｏｔａｌ
ｃｏｎｔｅｎｔｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎ１５ｋｉｎｄｓｏｆｃｏｍｍｏｎｅｄｉｂｌｅｌｅｇｍｎｅｓ．Ｔａｋｉｎｇｇｅｎｉｓｔｅｉｎａｓｓｔａｎｄａｒｄｓｕｂｓｔａｎｃｅ，ｔｈｅｄｉｒｅｃｔｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｔｏｔａｌｃｏｎｔｅｎｔ
ｏｆｓｏｙｂｅａｎｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ．ＨＰＬＣｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆ４ｋｉｎｄｓｏｆｓｏｙｂｅａｎｉｓｏｔｌａｖｏｎｅｍｏｎｏｍｅｒｓｉｎｔｌｌｅｅｄｉｂｌｅｌｅｇｍｎｅｓ．１ｈｅｒｅｓｕｌｔｏｆＡ１Ｃ１３ｃｏｌｏｒｉｍｃｔｒｙｓｈｏｗｓｔｈａｔ７ｋｉｎｄｓｏｆｔｈｅｅｄｉｂｌｅｌｅｇｕｍｅｓ，ｓｕｃｈａｓｒｅｄｂｅａｎｓ，ｍｕｎｇｂｅａｎｓ，ｅｔｃ，ｃｏｎｔａｉｎｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ。ａｎｄｒｅｄｂｅａｎｓｅｘｈｉｂｉｔｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｌｅｖｅｌｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｃｏｎｔｅｎｔ（０．５０１ｍｇ／ｇ）．卟ｅｒｅｓｕｌｔｏｆＡＩ（Ｎ０３）３ｅｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙｓｈｏｗｓｔｈｅｔｏｔａｌｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓａｒｅ０．２９７—８．８４４ｍｇ／ｇ．ｎｅｄｉｒｅｃｔｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙｓｈｏｗｓｔｈｅｔｏｔａｌｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｉｓｏｔｌａｖｏｎｅｓａｍ１．９９４～８．８４０ｍｇ／ｇ．ＨＰＬＣｓｈｏｗｓｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆ４ｋｉｎｄｓｏｆｓｏｙｉｓｏｆｌａｖｏｎｅｍｏｎｏｍｅｒｓａｌｅ０．０３１～３．３４５ｍｇ／ｇ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓｅｄｉｂｌｅｌｅｇｕｍｅｓ，ｆｌａｖａｎｏｉｄｓ，ｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ，ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ，ＨＰＬＣ
万方数据
药物综述-黄酮类化合物
药物综述——黄酮类化合物 关键词：黄酮类；来源；发展史；药理作用；不足之处 摘要：黄酮类化合物分布广泛，具有多种生物活性，但目前，黄酮类药物仍有些不足之处。 正文： 1.发展史：黄酮类化合物的发现历史十分悠久。早在二十世30年代初，欧洲一 位药物化学家在研究柠檬皮的乙醇提取物时无意中得到一种白色结晶，将其命名为“维生素P”。动物试验证实：维生素P的抗坏血作用胜过维生素C10倍。2年后，这位科学家进一步发现：维生素 P实际上是一种由黄酮组成的混合物而非单一物质，故后来有人形象化地将维生素P更名为柠檬素。黄酮类化合物作为保健产品首次引起国际医药界的注意是在二十世纪八十年代末。法国一家保健食品厂商率先推出具有市场引导作用的黄酮类保健新品“碧萝芷”。它是从法国地中海沿岸地区生长的一种主要树种“滨海松”树皮中提取的一种黄酮混合物。由于碧萝芷能预防和治疗西方国家极为常见的冠心病与心肌梗塞等心血管疾病，故上市后销售情况极为红火。在上市10年以后，临床医学研究人员不断发现碧萝芷有不少令人感兴趣的新用途，其中包括抗哮喘、防止长期抽烟引起的脑动脉硬化与脑血栓形成以及降血压作用等。据科学家研究，法国生产的碧萝芷含有极其复杂的黄酮成分，其中包括：儿茶素、表倍儿茶素、紫杉素、原花青素及其单体、2倍体、3倍体与多倍体混合物。正是这些复杂的黄酮构成碧萝芷多样化药理作用的基础。 2.来源：天然黄酮类化合物是植物体多酚类的内信号分子及中间体或代谢物， 包括黄酮、异黄酮、黄酮醇、异黄酮醇、黄烷酮、异黄烷酮、查耳酮等，最集中分布于被子植物中。如黄酮类以唇形科、爵麻科、苦苣苔科、玄参科、菊科等植物中存在较多；黄酮醇类较广泛分布于双子叶植物；二氢黄酮类特别在蔷薇科、芸香科、豆科、杜鹃花科、菊科、姜科中分布较多；二氢黄酮醇类较普遍地存在于豆科植物中；异黄酮类以豆科蝶形花亚科和鸢尾科。 植物中存在较多。在裸子植物中也有存在，如双黄酮类多存在松柏纲、银杏纲和凤尾纲等植物中。黄酮类化合物具有能够改变机体对变能反应原、病毒及致癌物反应的能力，并保护机体组织不受氧化性侵袭的伤害，因此具有"天然生物反应调节剂"的美称。黄酮类化合物一般存在于蔬菜和水果的可食性果肉中。当把它们从中分离出来后，其味道有些发苦，如桔子、柠檬、葡萄和柚等这些柑桔类植物是黄酮类化合物特别丰富的来源。许多植物如樱桃、葡萄、蔷薇果、青椒、花茎甘蓝、洋葱和番茄等，以及许多草药如越桔、银杏、乳蓟等都含有高质量的黄酮类化合物。此外，多种植物的叶、干和根部也发现了一些黄酮类化合物，如山茶花报春黄甙（干燥后用来生产绿茶和黑茶）的叶子，松树皮和成熟和葡萄籽是各种黄酮类化合物的最好来源。 3.药理活性： a.心血管系统活性。不少治疗冠心病有效的中成药均含黄酮类化合物。研究发现黄酮类化合物不仅有明显的扩冠作用，对缺血性脑损伤有保护作用，对心肌缺血性损伤有保护作用，对心肌缺氧性损伤有明显保护作用，还有有抗心率失常作用。
黄酮类化合物提取方法的研究
黄酮类化合物提取方法的研究 发表时间：2019-07-23T09:36:27.620Z 来源：《医师在线（学术版）》2019年第10期作者：鲍兴隆[导读] 旨在研究黄酮类化合物的提取分离工艺，为选择合适的方法提供参考依据。 浙江大学校医院浙江杭州310000 摘要：近年来，随着对黄酮研究的深入，国内外对黄酮的研究也越来越重视，本文旨在研究黄酮类化合物的提取分离工艺，为选择合适的方法提供参考依据。通过对比黄酮类化合物传统及新型方法的总黄酮提取率发现，新型提取方法相对于传统提取法而言提取率具有明显优势，但新型提取技术对原料、设备、处理要求也相应提高，目前国内外研究相对偏少。 关键词：黄酮类化合物；微波提取；超临界流体萃取法 黄酮类化合物是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮结构的化合物，泛指两个苯环通过三个碳原子或一个吡喃环或吡喃环连接而成的化合物，主要包括：黄酮和黄酮醇类、二氢黄酮和二氢黄酮醇、异黄酮类及二氢异黄酮类、查尔酮和二氢查耳酮类及花青素类等[1]。黄酮类化合物属植物次生代谢产物，在植物体内大部分与糖结合成苷类，小部分以苷元的形式存在，具有多种生物活性，有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗衰老等药理活性，在医药、保健食品等行业中均有广泛的开发利用。对黄酮类化合物的提取有传统的超声波提取法等；以及新型的：微波提取法、超临界流体萃取法、双水相萃取法等。 1传统提取方法 1.1超声波提取法 超声波空化作用使植物细胞壁及整个生物体破裂，这样有利于黄酮类化合物的释放和溶出，另一方面可加速提取液的分子运动，使得提取液和苎麻叶中的黄酮类化合物快速接触，相互溶合、混合，此外超声波热效应也有利于水溶作用，有效缩短了提取时间。贺波[2]以“华苎4号”苎麻叶为原料，采用超声辅助提取法,通过单因素及正交实验,得出最佳的提取工艺条件是：液固比30:1,乙醇浓度70%,超声功率60W,超声时间30min,超声温度60℃,提取一次。在此工艺条件下苎麻叶中黄酮类化合物得率为4.94%。2新型提取方法 2.1微波提取法 微波提取法是微波转化成热能使细胞内部温度上升，当细胞内部压力超过细胞壁的承受能力，细胞破裂，其有效成分流出，在较低的温度条件下萃取介质捕获并溶解。此外，微波产生的电磁场还能加速被萃取部分成分向萃取溶剂界面扩散速率，缩短萃取组成的分子由物料内部扩散到萃取溶剂界面的时间。张海慧等[3]以黑穗醋栗为试材，进行单因素实验，在此基础上设计了四因素三水平正交试验。最后确定了微波辅助法提取黑穗醋栗黄酮的最佳条件为：以95%乙醇为溶剂，微波功率500W，微波65℃，提取8min，液料比10:1，此时提取率可达到0.738mg/g。张鹏等[4]通过实验得出银杏黄酮微波提取的最佳条件为乙醇浓度50%，料液比1:25，回流温度70℃，微波时间120s，在此条件下总黄酮提取率为11.02%。与传统方法相比，微波提取法具有省时、节约溶剂、提取率高等优点，有较大的推广价值。 2.2超临界流体萃取法 超临界流体萃取分离过程的原理是利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系，即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超临界状态下，将超临界流体与待分离的物质接触，使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来。余青等[5]采用单因素与正交试验对超临界CO2萃取具乌饭树叶总黄酮的工艺进行了研究，结果表明，最佳提取条件为：萃取压力18MPa，萃取时间1.5h，萃取温度50℃，夹带剂乙醇浓度75%，CO2流量20kg/h，夹带剂添加量5mL/g在此条件下乌饭树叶总黄酮平均提取率为73.10%（n=3，RSD=3.58%）。谢建华等[6]利用响应面发优化超临界CO2萃取苦瓜总黄酮的工艺参数,在实验的基础上,确定最佳工艺条件:以无水乙醇为夹带剂1.0mL/g，萃取压力33.4MPa，萃取温度46℃，萃取时间53.2min。此条件下苦瓜总黄酮提取率达到84.3%。超临界流体萃取技术萃取速度快，提取率高，流程简单，且对生物活性保留较好，具有一定的应用价值。 除以上的提取方法外，还有双水相萃取分离、双水相—超声耦合、超声—酶法耦合、酶法—高压脉冲电场耦合等技术。总的来说，传统提取方法的总黄酮提取率基本在5%左右，而新型提取方法的提取率在10%以上（有的甚至可达80%-90%），相对于传统提取法而言，新型提取方法的提取率具有明显优势，但对新型提取技术对原料、设备、处理要求也相应提高，目前国内外研究相对偏少。3展望 黄酮类化合物分布范围广、种类多，黄酮类化合物的保健品也早在二十世纪八十年代末就引起国际医药界的注意，而且大部分毒理学研究提示其一般无毒，近年来此类化合物一直是生化制药、保健品生产方面的热门之一，在最近上市的保健产品中也有很大一部分其主要功效成分就属于黄酮类化合物，其涉及的功能食品也很多。最近由于心血管疾病、癌症等疾病死亡人数呈快速增长，而黄酮对心血管系统及防癌抗癌有一定的作用，许多国家和地区正在开发相关的产品，前景较好。由于黄酮类化合物可能存在几种不同的作用机制与合成途径，有些实验结果的解释可能依然存在不足之处。因此今后黄酮类化合物的研究还需要关注的是生物利用度、代谢动力学、体内的氧化损伤及长期服用产生的慢性后果等方面[7]。开发出更加可靠、令人信服的模型或系统，以此来精确评估黄酮类化合物在人体内的代谢作用是非常必要的。 参考文献 [1] TAYLOR L P,GROTEWOLD E. Flavonoids as developmental regulatoes [J].Current Opinion in Plant Biology,2005,3(8)：317-323. [2] 贺波.苎麻叶中黄酮的提取、分离纯化、结构及抗氧化活性研究[D].武汉:华中农业大学硕士学位论文,2010. [3] 张海慧.微波辅助法提取黑穗醋栗中黄酮类物质的研究[J].东北农业大学学报,2008.39(9):32-35. [4] 张鹏.银杏叶黄酮的微波提取及抗氧化性研究[J].安徽农业科学,2009,37(12):5496-5497,5730. [5] 余青,郑小严,黄红霞,等.超临界CO2萃取乌饭树叶总黄酮的工艺[J].2009,38(01):97-102. [6] 谢建华,单斌,彭云.超临界CO2流体萃取苦瓜总黄酮工艺及其抗氧化活性[J].2010,08(1):66-71. [7] 佟永薇.黄酮类化合物提取方法的研究及展望[J].食品研究与开发,2008,29(7):188-190.
各种豆类的功效和作用
各种豆类的功效和作用 豆类泛指所有能产生豆荚的豆科植物，同时，也常用来称呼豆科的蝶形花亚科中的作为食用和饲料用的豆类作物。在成百上千种有用的豆科植物中，至今广为栽培的豆类作物不逾20种。下面就由为大家介绍下常见的各种豆类的功效和作用，希望对大家有帮助。 红豆的功效与作用 红豆有清心养神、健脾益肾功效，加入莲子、百合更有固精益气、止血、强健筋骨等作用，能治肺燥、干咳，提升内脏活力，增强体力。养生也是护肤的重要的一部分，外调加上内养，才能造就一个水灵灵的女人。 红豆在传统医学上，主要应用于行水;;去水肿、利气;;去脚气、健脾，如将红豆和鲤鱼煮汤食用，对水肿、脚气、小便困难等起食疗作用，还能治疗肝硬化、肝腹水、补体虚;红豆与冬瓜同煮后的汤汁是全身水肿的食疗佳品;红豆与扁豆、薏仁同煮，可治疗腹泻。另外，红豆还可与中药同用，如红豆配连翘和当归煎汤，可治疗肝脓肿;红豆配以蒲公英、甘草煎汤，可治疗肠痛等。 中医专家认为，红豆具有消肿、轻身的功效。适宜各类型水肿之人，包括肾脏性水肿、心脏性水肿、肝硬化腹水、营养不良性水肿等患者食用。夏季天气闷热，有些人会出现水肿的现象，这个时候喝些红豆汤，对于水肿有着非常好的食疗功效。如果能在刚出现水肿的时
候喝红豆汤来调治，第二天就可以看到水肿的减退，再连服8天左右，就可以使水肿现象完全消失。 绿豆的功效与作用 小豆，因其颜色青绿而得名，在我国已有两千余年的栽培史。由于它营养丰富，用途较多，李时珍称其为“菜中佳品”。绿豆是夏令饮食中的上品，更高的价值是它的药用。盛夏酷暑，人们喝些绿豆粥，甘凉可口，防暑消热。小孩因天热起痱子，用绿豆和鲜荷服用，效果更好。若用绿豆、赤小豆、黑豆煎汤，既可治疗暑天小儿消化不良，又可治疗小儿皮肤病及麻疹。常食绿豆，对高血压、动脉硬化、糖尿病、肾炎有较好的治疗辅助作用。此外绿豆还可以作为外用药，嚼烂后外敷治疗疮疖和皮肤湿疹。如果得了痤疮，可以把绿豆研成细末，煮成糊状，在就寝前洗净患部，涂抹在患处。“绿豆衣”能清热解毒，还有消肿、散翳明目等作用。 黄豆的功效与作用 现代医学研究认为，黄豆不含胆固醇，并可以降低人体胆固醇，减少动脉硬化的发生，预防心脏病，黄豆中还含有一种抑胰酶的物质，它对糖尿病有一定的疗效.因此，黄豆被营养学家推荐为防治冠心病，高血压动脉粥样硬化等疾病的理想保健品.黄豆中所含的软磷脂的大脑细胞组成的重要部分，常吃黄豆对增加和改善大脑技能有重要的效能。 祖国医学认为，服食黄豆可另人长肌肤，益颜色，填精髓，增力气，补虚开胃，是适宜虚弱者使用的补益食品，具有益气养血.健脾
黄酮类化合物
黄酮测定的研究进展 简要：黄酮类化合物（Flavonoids），又称生物黄酮（Bioflavon-oids）或植物黄酮，是植物在长期自然选择过程中产生的一些次级代谢产物，黄酮类化合物有着广泛的生物活性和多种药理活性，比如抗氧化、抗炎、抗诱变、抗肿瘤形成与生长等，特别是近年来关于黄酮在心血管、脑血管、肿瘤等方面的研究已经比较深入，此外黄酮类物质还有低毒性的特点，因此长期以来一直是天然药物和功能性食品研究开发的热点[1]。 关键词：黄铜，含量，测定方法，研究进展 前言：黄酮类物质是植物光合作用产生的一种天然有机物。植物界中分布广泛，主要分布于芸香料、唇形科、豆科、伞形科、银杏科、菊科等。根据化学方法定义黄酮类物质为含一个共同的苯基苯并二氢吡喃环结构，有一个或多个羟基取代基，包括其衍生物。在食物中，黄酮类物质一般以酯类、醚类或配糖类衍生物及混合物的形式存在，共有5000 多种化合物。对于哺乳动物，只能通过饮食获取黄酮物质，这些食物包括水果、蔬菜、谷物、坚果、茶及红酒。在日常膳食中，黄酮类物质通常表现为具有抗氧化性的羟基衍生物形态，显示出多种生物活性，对于一些疾病，例如癌症和心血管疾病，胃和十二指肠的病理性失调，以及病毒和细菌感染的预防和治疗。此外，类黄酮还被发现有广泛的药物特性，包括抗氧化性、抗过敏、抗病毒及预防糖尿病，对肝和胃的保护，抗病原体及抗瘤活性。除在医药工业上已广泛应用其生理活性外，目前也将黄酮类物质作为功能食品的添加剂[2] 。 （一）测定黄铜的几种方法 1 紫外分光光度法 紫外分光光度法具有重复性好、准确、简便、易掌握、不需要复杂的仪器设备, 加之所需试剂便宜易得, 因此该方法应用于测定植物中黄酮含量最为广泛[ 3]。 1.1 直接测定法 大多数黄酮类化合物分子中存在桂皮酰基和苯甲酰基组成的交叉共轭体系, 其MeOH 谱200 nm～400 nm的区域内存在两个主要的紫外吸收带, 峰带I(300 nm～400nm)和峰带Ⅱ( 220 nm～280 nm)[ 4]。 1.2 比色法 向供试样品中加入显色剂后测定吸光度以测定其含量, 这种方法称为比色法。黄酮类化合物分子中若具有3- 羟基、5- 羟基或邻二酚羟基, 易于与金属盐类如铝盐、锆盐、锶盐、镁盐等反应, 生成有色金属络合物。常用于黄酮类化合物含量测定的金属盐试剂有Al(NO3)3、A1Cl3等,这些络合物作用在光
农作物分类表(中图法)
农作物分类表(中图法)
农作物分类表(中图法) S5农作物 S51禾谷类作物 S52豆类作物 S53薯类作物 S54饲料作物、牧草 S55绿肥作物 S56经济作物 S58野生植物 S59热带、亚热带作物S63蔬菜园艺 S631根菜类（直根类）S632薯芋类（块茎类）S633葱蒜类 S634白菜类 S635甘蓝类 S636绿叶菜类 S637芥菜类 S641茄果类 S642瓜类 S643豆荚类 S644多年生菜类 S645水生菜类
S646菌类（食用菌） S647野生蔬菜 S649其他蔬菜 S65瓜果园艺 S66果树园艺 S661仁果类 S662核果类 S663浆果类 S664坚果类（壳果类） S665杂果类 S666柑桔类 S667热带及亚热带果类 S668多年生草本果类 S68观赏园艺（花卉和观赏树木） S681一、二年生花卉类 S682多年生花卉类 S685观花树木类 S686观果树木类 S687观叶树木类 S688园林植物栽培及应用技术S51禾谷类作物 S511稻
S512麦 S513玉米（玉蜀黍） S514高粱 S515粟（谷子、小米） S516黍、稷（糜子、黍子、粘糜子）S517荞麦 S519其他 豆类作物 S521小豆（赤豆） S522绿豆 S529其他 薯类作物 S531甘薯（红薯） S532马铃薯（土豆） S533木薯（树薯） S539其他 S54饲料作物、牧草 S541多年生豆科牧草 S541+.2三叶草 S541+.3紫云英
S541+.4驴食豆（红豆草）S541+.5胡枝子 S541+.6五叶草（百脉根）S541+.9其他 S542一年生豆科牧草 S542+.1鸡眼草 S542+.2猪屎豆 S542+.3巢菜（野豌豆）S542+.4天蓝苜蓿 S542+.9其他 S543多年生禾本科牧草S543+.1猫尾草（梯牧草）S543+.2鹅观草 S543+.3鸭茅（鸡脚草）S543+.4红顶草（小糠草）S543+.5狐茅（牛尾草）S543+.6黑麦草 S543+.7燕麦草 S543+.8雀麦草 S543+.9其他
黄酮类化合物的提取纯化方法
黄酮类化合物的提取、药用价值和产品开发应用前景 任红丽2009090141 摘要：对黄酮类化合物的药用价值、提取工艺、分离方法等方面进行综述。在 药用价值方面,讨论了其抗抑郁作用、抗氧化与自由基消除活性作用、对化学性肝损伤的保护作用、抗肿瘤作用、抗骨质疏松作用、抗心肌缺血作用;在提取工艺方面,讨论了溶剂提取法、超声提取法、酶法、微波法等;及其开发应用，为今后黄酮类化合物的深入研究提供理论基础。 关键词：黄酮类化合物提取工艺药用价值 黄酮类物质是一类低分子天然植物成分，是自然界中存在的酚类物质[14]，又称生物黄酮或植物黄酮，属植物次级代谢产物，广泛存在于各种植物的各个部位，尤其是花、叶，主要存在于芸香科、唇形科、豆科、伞形科、银杏科与菊科中。迄今，已有数百种不同类型的黄酮类化合物在植物中被发现，人工合成的黄酮类化合物也不断问世。最初这类物质仅用于染料方面，自20世纪20年代，槲皮素、芦丁等黄酮类物质用于临床后，才开始引起人们的关注，研究发现其中相当一部分具有显著的生理及药理活性，例如抗氧化、抗病毒、抗炎、调节血管渗透性，改善记忆，抗抑郁、抗焦虑、中枢抑制、神经保护等功能[2,12]诸多生理和药理特性使其广泛应用于食品、医药等领域。 1.提取纯化方法 1．1 传统提取方法 1．1．1 热水提取法 水是最廉价的提取溶剂，是地球最丰富的物质，无色无味无毒，对人体和环境无害，挥发性不大，具有真正的绿色环保意义。但用水作为提取溶剂时，从中药材中提取的黄酮类化合物中杂质含量较多，往往因泡沫或粘液很多，给进一步分离带来许多麻烦，而且浓缩也会很困难。此外，水提取物容易发霉发酵[22]。1．1．2 碱性水、碱性稀醇浸提法 中草药中黄酮类成分多为多酚类化合物，因其结构中具有酚羟基[7]，故可用碱性水或碱性稀醇液来提取中草药中的黄酮类化合物。黄酮母核的多样性主要是由黄酮本身骨架、环系的变化、氧化程度和数量而定，当碱的浓度过高，加热时便破坏黄酮类化合物的母核。 1．1．3 有机溶剂热回流及冷浸提取法 根据杂质极性不同，可选用不同的有机溶剂(如石油醚、乙酸乙酯、氯仿、乙醇、甲醇、丙酮等)，一般采取乙醇为提取溶剂[15]。
黄酮含量的测定
黄酮含量的测定 1.提取（以麦苗粉为例） 根据仿生学原理，人体胃、小肠、大肠的体液酸度最佳pH分别为2.0,7.5,8.3。称取1g麦苗粉末，选用乙醇-水作为浸取剂，模拟胃肠道的pH，分别调pH值2.0,7.5,8.3,在60℃下超声50min，合并3次提取剂，，定容。 工艺流程：1g麦苗粉末→一次提取（加入10ml70﹪的乙醇，乙醇pH2.0）→抽滤→留渣继续二次提取，滤液保存→二次提取（加10ml70﹪的乙醇，提取剂pH7.5）→抽滤→留渣继续三次提取，滤液保存→三次提取（加入10ml70﹪的乙醇，乙醇pH8.3）→合并三次滤液→定容至30mL→黄酮类化合物含量的测定分光光度法测吸光值。 麦苗汁的提取 直接从榨汁后定容至100ml的麦苗汁中取36.5ml，加入85.2ml无水乙醇，60℃超声提取150min。 2.试剂配置 芦丁标准液：准确称取芦丁标准品7.5mg，用50%乙醇溶解并定容至25mL，得到浓度为300mg/mL的芦丁标准溶液。 10% Al(NO3)3溶液：称取5g Al(NO3)3，用蒸馏水溶解并定容至50mL。 5% NaOH 溶液：称取2.5g NaOH，用蒸馏水溶解并定容至50mL。 5% NaNO2 溶液：称取2.5g NaNO2，用蒸馏水溶解并定容至50mL。 0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(pH=8.2)：0.1mol/L Tris 50mL，加入0.1mol/L HCl 22.9mL，混匀，稀释定容至100mL。 3 mmol/L 邻苯三酚-HCl溶液：准确称取0.0189g邻苯三酚，用10 mmol/L HCl溶解并定容至100mL。 9mmol/L水杨酸-乙醇：准确称取1.2430g水杨酸，用95%乙醇溶解并定容到1000mL 容量瓶中。 9mmol/L FeSO4：准确称取1.3680g FeSO4，定容到1000mL容量瓶中。 10mmol/L HCl：准确量取83.3mL分析纯HCl，定容到100mL容量瓶中。 8.8 mmol/L H2O2 溶液：吸取0.109mL 30% H2O2，用蒸馏水溶解并定容至500mL。 3.标准曲线的绘制 准确称取芦丁标准品15mg，用50%乙醇溶解并定容至50mL，得到浓度为0.3mg/mL的芦丁标准溶液。取7支试管编号，分别按表1中所给的量加入各种试剂，并测定其吸光值。 表6 芦丁标准曲线的绘制 试剂0(mL) 1(mL) 2(mL) 3(mL) 4(mL) 5(mL) 6(mL) 芦丁标准溶液0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 50%乙醇 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0 5% NaNO2 溶液0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 10% Al(NO3)3 溶液0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 5% NaOH 溶液 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 蒸馏水 2.2 2.2 2.2 2.2 2.2 2.2 2.2 加入5% NaNO2 溶液0.4 mL后，摇匀，放置6min ；加入10% Al(NO3)3 溶液0.4 mL
豆类食品介绍
健康美味“豆”生活 我国传统饮食讲究“五谷宜为养，失豆则不良”，意思是说五谷是有营养的，但没有豆子就会失去平衡。可见豆类的营养价值非常高，不论宝宝还是成人，每天豆制品的摄取是很有必要的。让我们一起来了解健康的豆类家族吧。 豆类的营养价值 豆类所含蛋白质含量高、质量好，其营养价值接近于动物性蛋白质，是最好的植物蛋白。其氨基酸的组成接近于人体的需要，是我国人民膳食中蛋白质的良好来源。 豆类所含的脂肪以大豆为最高，可达18％，因而可作食用油的原料，其他豆类含脂肪较少。豆类含糖量以蚕豆、赤豆、绿豆、豌豆含量较高，为50％～60％， 大豆含糖量较少，约为25％左右。因此，豆类供给的热量也相当高。豆类中维生素以B 族维生素最多，比谷类含量高。此外，还含有少量的胡萝卜素。豆类富含 钙、磷、铁、钾、镁等无机盐，是膳食中难得的高钾、高镁、低钠食品。 每100克豆类、花生、芝麻的营养成分表 食物名称 蛋白质／ 克 脂肪/克 碳水化合物/克 热量/千焦 粗纤维/克 钙/微克 磷/微克 铁/微克 胡萝卜/微克 硫胺素/微克 核黄素/微克 黄 豆 36.3 18.4 25.3 1724 4.8 367 571 11.0 0.4 0.79 0.25 青 豆 37.3 18.3 29.6 1808 3.4 240 530 5.4 0.36 0.66 0.24 黑 豆 49.8 12.1 18.9 1607 6.8 250 450 15.5 0.4 0.51 0.19 豌 豆 24.6 10.0 57 1402 10.7 84 400 5.7 0.04 1.02 0.12 蚕 豆 28.2 0.8 48.6 1314 14.7 71 340 7 -- 0.39 0.27 红 豆 22 20 55.5 1373 8.2 100 456 7.6 -- 0.33 0.11 豆类的营养 大豆 大 豆的品种很多，根据皮色可分为黄豆、青豆和黑豆等，其中以黄豆为主。大豆是一种高植物蛋白食物，其蛋白质的必需氨基酸的组成与牛奶和鸡蛋的蛋白质相似。大 豆富含蛋白质，约 40％左右，为大米蛋白质含量的6 倍，大豆也是一种油料植物，油脂中85％属于不饱和脂肪酸，以亚油酸最为丰富，而且油脂不含胆固醇，其中所含的亚麻油酸、亚麻油烯酸、皂草甙等均可减少体 内胆固醇的含量。
黄酮类化合物
黄酮类化合物 黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环（A-与B-环）通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物黄酮类化 合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。此外，它还常与糖结合成苷。多数科学家认为黄酮的基本骨架是由三个丙二酰辅酶A和一个桂皮酰辅酶A生物合成而产生的。经同位素标记实验证明了A环来自于三个丙二酰辅酶A，而B环则来自于桂皮酰辅酶A[1]。1、分类：根据中央三碳链的氧化程度、B-环连接位置（2-或3-位）以及三碳链是否构成环状等特点，可将主要的天然黄酮类化合物分类：黄酮类(flavones)、黄酮醇(flavonol)、二氢黄酮类(flavonones)、二氢黄酮醇类(flavanonol)、花色素类(anthocyanidins)、黄烷-3，4二醇类(flavan-3,4-diols)、双苯吡酮类(xanthones)、查尔酮(chalcones)和双黄酮类(biflavonoids)等十五种。另外，还有一些黄酮类化合物的结构很复杂，其中包括榕碱及异榕碱等生物碱型黄酮。2、理化性质：天然黄酮类化合物多以苷类形式存在，并且由于糖的种类、数量、联接位置及联接方式不同可以组成各种各样黄酮苷类。组成黄酮苷的糖类包括单糖、双糖、三糖和酰化糖。黄酮苷固体为无定形粉末，其余黄酮类化合物多为结晶性固体。黄酮类化合物不同的颜色为天然色素家族添加
了更多色彩。这是由于其母核内形成交叉共轭体系，并通过电子转移、重排，使共轭链延长，因而显现出颜色。黄酮苷一般易溶于水、乙醇、甲醇等级性强的溶剂中；但难溶于或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。糖链越长则水溶度越大。黄酮类化合物因分子中多具有酚羟基，故显酸性。酸性强弱因酚羟基数目、位置而异。3、显色：1.盐酸-镁粉（或锌粉） 反应为鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应，反应机理现在认为是因为生成了阳碳离子缘故[1]。2.四氢硼钠（NaBH4）是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂，产生红～紫色。而与其它黄酮类化合物均不显色。3. 黄酮类化合分子中常含有下列结构单元，故常可与铝盐、铅盐、锆盐、镁盐、锶盐、铁盐等试剂反应，生成有色络合物。与1%三氯化铝 或硝酸铝溶液反应，生成的络合物多为黄色（λmax=415nm），并有荧光，可用于定性及定量分析。4、黄酮对身体的好处黄酮广泛存在自然界的某些植物和浆果中,总数大约有4千 多种,其分子结构不尽相同,如芸香苷、橘皮苷、栎素、绿茶 多酚、花色糖苷、花色苷酸等都属黄酮。不同分子结构的黄酮可作用于身体不同的器官，如山楂--心血管系统，兰梅-- 眼睛，酸果--尿路系统，葡萄--淋巴、肝脏，接骨木果--免疫系统，平时我们可以通过多食葡萄、洋葱、花椰莱、喝红酒、多饮绿茶等方式来获得黄酮，作为身体的一种补充。 黄酮的功效是多方面的，它是一种很强的抗氧剂，可有效清
黄酮类化合物
第五章黄酮类化合物 一、选择题 （一）单项选择题（在每小题的五个备选答案中，选出一个正确答案，并将正确答案的序号填在题干的括号内） 1．构成黄酮类化合物的基本骨架是（） A. 6C-6C-6C B. 3C-6C-3C C. 6C-3C D. 6C-3C-6C E. 6C-3C-3C 2．黄酮类化合物的颜色与下列哪项因素有关（） A. 具有色原酮 B. 具有色原酮和助色团 C. 具有2-苯基色原酮 D. 具有2-苯基色原酮和助色团 E.结构中具有邻二酚羟基 3．引入哪类基团可使黄酮类化合物脂溶性增加（） A. -OCH3 B. -CH2OH C. -OH D. 邻二羟基 E. 单糖 4．黄酮类化合物的颜色加深，与助色团取代位置与数目有关，尤其在（）位置上。 A. 6，7位引入助色团 B. 7，4/-位引入助色团 C. 3/，4/位引入助色团 D. 5-位引入羟基 E. 引入甲基 5．黄酮类化合物的酸性是因为其分子结构中含有（） A. 糖 B. 羰基 C. 酚羟基 D. 氧原子 E. 双键 6．下列黄酮中酸性最强的是（） A. 3-OH黄酮 B. 5-OH黄酮 C. 5，7-二OH黄酮
D. 7，4/-二OH黄酮 E. 3/，4/-二OH黄酮 7．下列黄酮中水溶性性最大的是（） A. 异黄酮 B. 黄酮 C. 二氢黄酮 D. 查耳酮 E. 花色素 8．下列黄酮中水溶性最小的是（） A. 黄酮 B. 二氢黄酮 C. 黄酮苷 D. 异黄酮 E. 花色素 9．下列黄酮类化合物酸性强弱的顺序为（） （1）5，7-二OH黄酮（2）7，4/-二OH黄酮（3）6，4/-二OH黄酮A.（1）＞（2）＞（3） B.（2）＞（3）＞（1） C.（3）＞（2）＞（1）D.（2）＞（1）＞（3） E.（1）＞（3）＞（2） 10．下列黄酮类化合物酸性最弱的是（） A. 6-OH黄酮 B. 5-OH黄酮 C. 7-OH黄酮 D. 4/-OH黄酮-二OH黄酮 11．某中药提取液只加盐酸不加镁粉，即产生红色的是（） A. 黄酮 B. 黄酮醇 C. 二氢黄酮 D. 异黄酮 E. 花色素 12．可用于区别3-OH黄酮和5-OH黄酮的反应试剂是（） A. 盐酸-镁粉试剂 B. NaBH4试剂 C.α-萘酚-浓硫酸试剂 D. 锆-枸橼酸试剂 E .三氯化铝试剂 13．四氢硼钠试剂反应用于鉴别（） A. 黄酮醇 B. 二氢黄酮 C. 异黄酮
银杏叶中黄酮类化合物的含量测定
江苏畜牧兽医职业技术学院 毕业论文（设计） 专业药品质量检测技术班级药检071 学号200703123124 论文 (设计) 题目：银杏叶中黄酮类化合物的含量测定 学生姓名：刘江南 设计地点：江苏畜牧业兽医职业技术学院 指导教师：赵丽职称讲师 论文完成时间： 2010年5月20日
银杏叶中黄酮类化合物的含量测定 刘江南 药品质量检测技术 摘要：黄酮类化合物是银杏叶的主要药用成分，其黄酮含量在很大程度上决定着银杏叶的利用价值。以十二烷基硫酸钠(SDS)一正丁醇一正庚烷一水 微乳系统为流动相，预制聚酰胺薄层板为固定相，通过调节微乳系统的 极性，较好地分离出十几种银杏叶黄酮。与传统的流动相系统—有机溶 液系统相比，微乳系统显示出较强的分离优势。通过对大龄银杏叶不同 生长时期黄酮含量的测定与比较，分析银杏叶中黄酮含量随生长期的变 化规律，揭示出大龄银杏树采摘叶片的最佳时期。试验结果表明：不同 生长时期的银杏叶黄酮含量变化幅度较大,在1年中黄酮含量出现2次峰 值，8月份出现第1个峰值，黄酮含量为0.884%, 以后下降较快,10月叶 色发黄后又上升到最高值 0.977%。 关键词：银杏叶黄酮含量薄层色谱生长时期高效液相色谱 Title：In Gingko leaf flavonoid content determination Liujiangnan Drug quality testing technology Abstract：Flavonoids are the main medicinal components of ginkgo biloba,its flavonoid content to a large extent determines the value of ginkgo biloba use. Sodium dodecyl sulfate (SDS) 1-butanol 1-heptane microemulsion system of water as the mobile phase, pre-polyamide thin-layer plate as the stationary phase, by adjusting the polarity of the microemulsion system, well separated a dozen of flavonoids. Mobile phase with the traditional system - the organic solution systems, the microemulsion system showed strong separation advantage.Leaves of Ginkgo biloba on older growth and flavonoids content during the comparison, analysis of flavonoids of Ginkgo biloba in the variation with growth phase, revealing the older leaves of ginkgo trees picking the best time. The results showed that: different growth stages of the content of flavonoids in a significant reduction in 1 year in the flavonoid content of 2 times the
银杏叶黄酮类化合物的提取研究进展
银杏叶黄酮类化合物的提取研究进展 银杏树Ginkgo biloba L.又称白果树、公孙树，是我国古老的树种之一，具有“活化石”的美称。由于其生长规律特殊，抗病能力强而受到国内外的重视。有关银杏叶的有效成分及疗效的研究日益受到重视，已开发出保健品、化妆品、药品等多达100多种，形成国际市场上销售额20多亿美元的新兴产业。银杏叶的化学成分有黄酮类、萜类、内酯类、酚酸类以及生物碱、聚异戊二烯等化合物。黄酮类为银杏叶的主要有效成分之一，含量随品种、产地、树龄、不同的采摘时间而不同。黄酮类化合物优异的抗氧化、抗病毒、防治心血管疾病、增强免疫力等作用而受世人瞩目。 药学研究表明，有38种银杏黄酮类化合物从银杏叶中分离出来，其中黄酮类化合物主要有3类：黄酮(醇)及其昔28种：如槲皮黄酮等；黄烷醇类：如儿茶素等4种；双黄酮：如白果双黄酮等6种(儿茶素)。 1 银杏叶黄酮的提取分离 1.1 溶剂提取法目前国内外掀起了研究开发银杏叶热。国内银杏叶常用溶剂例如乙醇、丙酮、醋酸乙酯、水以及某些极性较大的混合溶剂浸泡银杏叶进行提取，溶剂提取方法一般有：煎煮、冷浸、回流、渗施等经典方法。 1.1.1 水提取树脂分离法有关水浸提银杏黄酮苷的文献报道不多。肖顺昌等报道了用l 6倍量沸水分3次浸提银杏叶，得到的水溶液，经冷藏、分离杂质得溶液，然后用D101型吸附树脂吸附得到浓度达38％的黄酮苷。胡敏等研究水浸提银杏叶黄酮苷并用树脂精制的工艺，探讨了影响黄酮苷浸出的主要因素以及最适的精制方法，结果表明：水为提取剂，在9 0℃水溶回流浸提银杏叶2次，4h／次，经沉淀，过滤，浓缩后，用树脂精制、冷冻干燥后，制得总黄酮苷含量高的提取物、产品得率为银杏叶干重的 1.2％-1.5％。 水提取成本低，没有任何环境污染，产品安全性高，但是水对有效成分的选择性差，提取率低。
黄酮类化合物的生理功能
黄酮类化合物的生理功能 黄酮类化合物广泛存在于植物中，实际上存在于植物的所有部分，包括根、心材、树皮、叶、果实和花中，光全作用中约有2%的碳源被转化成类黄酮。早在30年代人们就发现了黄酮类化合物具有维生素C样的活性，曾一度被视为是维生素P。至今法国与俄罗斯仍继续称黄酮类化合物为维生素P。Pratt等人研究了黄酮类化合物的抗氧化性质，认为黄酮是作为一级抗氧化剂而起作用的，它们具有显著的抗氧化性能。黄酮抗油脂过氧化的作用早在60年代就已经被证实了。80年代以来，对黄酮类化合物的研究逐渐转向其清除自由基的能力、抗衰老及对老年病的防治功效上。 黄酮类化合物中含有消炎、抑制异常的毛细血管通透性增加及阻力下降、扩张冠状动脉、增加冠脉流量、影响血压、改变体内酶活性、改善微循环、解痉、抑菌、抗肝炎病毒、抗肿瘤具有重要生物活性的化合物，有很高的药用价值。中草药含黄酮类化合物的很多，已经证明类黄酮是许多中草药的有效成份。例如满山红中的杜鹃素、小叶枇杷中的小叶枇杷素、矮地茶中的槲皮苷、铁包金中的芦丁、白毛夏枯草和青兰中的木犀草素、红管药中的槲皮素、葛根中的黄豆苷与葛根素、毛冬青与银杏叶中的黄酮醇苷、黄芩中的抗菌成分黄芩素和解热有效成分黄芩苷等。此外，还有很多中草药富含黄酮类成分，如槐米、陈皮、射干、红花、甘草、蒲黄、枳实、芫花、金银花、菊花、山楂、淫羊藿、桎木和地锦等。除了药用价值外，其中的部分黄酮类化合物（特别是来源自药食两用的中草药）显然可应用在功能性食品。 黄酮和黄酮醇是植物界分布最广的黄酮类化合物，广泛存在于食用蔬菜及水果中，在沙棘、山楂、洋葱等中含量较高，茶叶、蜂蜜、果汁、葡萄酒中含量丰富。椐估计人体每天从食物中摄入这类物质可达1g，产生有益的生理作用。黄酮类化合物无显著毒性，大鼠对槲皮素的经口LD50为10～50g/kg ，小鼠一次口服15g/kg，观察7d无一死亡。临床病人摄取芦丁2.25g持续7d或60mg/d连续5年，均无任何副反应。在其他一系列大剂量、长时间的动物试验中，均未发现有致癌性。显性致死试验、细胞姐妹染色体试验、微核试验证明槲皮素类衍生物无致突变作用。 黄酮类化合物的生理功能可概括为： ⑴调节毛细血管的脆性与渗透性。 ⑵是一种有效的自由基清除剂，其作用仅次于维生素E。 ⑶具有金属螯合的能力，可影响酶与膜的活性。 ⑷对维生素C有增效作用，似乎有稳定人体组织内维生素C的作用。 ⑸具有抑制细菌和抗生素的作用，这种作用使普通食物抵抗传染病的能力相当高。 ⑹在两方面表现有抗癌作用，一方面是对恶性细胞的抑制（即停止或抑制细胞的增长），另一方面是从生化方面保护细胞免受致癌物的损害。 尽管对黄酮类化合物的看法尚有矛盾的方面，但它目前仍被应用来防治下列一些疾病： ⑴毛细血管的脆性和出血。 ⑵牙龈出血。 ⑶眼的视网膜内出血。
黄酮类化合物的提取分离方法
一.黄酮类化合物的提取分离方法 按所用溶剂不同分类 (1)热水提取法(以水作溶剂)---------- 灵芝多糖热水提取 (2)有机溶剂萃取法-----------生产茶多酚工业试验、乳酸 (3)碱提取酸沉淀法.---------- 橙皮苷、黄芩苷、芦丁等都可用此法提取. 2.按提取条件不同分类 (1)回流提取法----------从苦楝树皮中提取苦楝素 (2)索式提取法----------柑橘属类黄酮 (3)微波辅助提取法----------采用微波辅助法从黎蒿中提取黄酮类化合物 (4)超声提取法----------提取山楂中黄酮类物质 (5)超滤法----------黄岑甙 (6)酶提取法----------采用纤维素酶对红景天进行酶解处理,可提高黄酮类物质的浸出率 (7)超临界流体提取法----------竹叶黄酮、从干姜片中提取挥发油 PH 梯度萃取法：石榴果皮褐变产物、葛花总异黄酮 高效液相色谱分析法：五味子、葛根 高速逆流色谱分离法：甘草、分离蜜环菌发酵液乙醇提取部位 柱色谱法 （1）硅胶柱色谱：姜黄素 （2）聚酰胺柱色谱：紫锥菊 （3）葡聚糖凝胶柱色谱：回心草、茵陈蒿 （4）大孔吸附树脂分离法：川草乌、三七总皂甙 二. 槐米中芸香苷（芦丁）的提取方法有哪些（设计） 方法：渗漉法、煎煮法、回流提取法 （1） 槐米粗粉20g 加约120ml 的%硼砂水溶液， 搅拌下加入石灰乳至pH8-9， 并保持该pH 值煮沸20分钟，四层纱布 趁热滤过，反复2次 提取液 药渣 浓盐酸调pH2~3 搅拌，静置放冷，滤过。 滤液 沉淀 热水或乙醇重结晶 芸香苷结晶 碱溶酸沉法提取分离槐米中芸香苷的流程图 （2）取30g 槐花米，置于250mL 烧杯中，加入%硼砂沸水200ml ，在搅拌下缓缓加入石灰乳调节pH=8～9，在此pH 下保持微沸20～30min ，趁热用棉花滤过，残渣再加水，同上法再煎一次，趁热抽滤。合并滤液，在60～70℃下用浓盐酸调至pH=4—5，静置。 提 碱 取 溶 分 酸 离 沉
黄酮类化合物提取分离纯化及其活性的研究进展
黄酮类化合物提取分离纯化及其活性的研究进展姓名常姣专业微生物学 摘要文章综述了黄酮类化合物的结构特征及提取、分离纯化技术介绍了黄酮类化合物的生物活性，并对其开发利用进行了展望。旨在为黄酮类化合物的研究、开发以及应用提供参考。 关键词黄酮；提取；分离纯化；生物活性 民以黄酮类化合物也称黄碱素, 是广泛存在于自然界的一大类化合物, 在植物体内大多与糖结合成甙的形式存在, 也有部分以游离状态的甙元存在。由于最先发现的黄酮类化合物都具有一个酮式羰基 结构, 又呈黄色或淡黄色, 故称黄酮[ 1]。 目前对天然黄酮类化合物的提取方法较多,如溶剂提取法、微波提取法、超声波提取法、酶解法、超临界流体萃取法、双水相萃取分离法及半仿生提取法等, 每种方法都有它各自的优点和点。用上述方法提取的黄酮类化合物仍然是一个混合物, 不仅是含有其它杂质的粗品, 而且是几种黄酮类成分的混合物, 需进一步分离纯化, 常用的方法有柱层析法、重结晶法、铅盐沉淀法和高效液相色谱法等。 黄酮类化合物具有降低血管脆性及异常的通透性、降血脂、降血压、抑制血小板聚集及血栓形成、抗肝脏病毒、抗炎、抗菌、解栓、抗氧化、清除自由基、抗衰老、抗癌、防癌、降血糖、镇痛和免疫等生理活性[ 2-5]。这些生理活性已被关注，对该类化合物的研究成为医药界的热门课题。人体自身不能合成黄酮类化合物而只能从食物中摄取，因此多年来科学家都在积极研究探讨从植物体中分离 纯度高、活性强的黄酮类化合物[6]。 1黄酮类化合物的理化性质 黄酮类化合物是以2-苯基色原酮为母核而衍生的一类通过三碳链相互连接而成的大多具有基本碳 架的一系列化合物，且母核上常有羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等助色取代基团。黄酮类化合物多为晶体固体，多数具有颜色，少数（如黄酮苷类）为无定形粉末，除二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷及黄烷醇有旋光性外，其余则无旋光性) 黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态（苷或苷元、单糖苷、双糖苷或三糖苷）不同而有很大差异) 一般游离态苷元难溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂) 其中，黄酮、黄酮醇、查儿酮等平面型分子，因堆砌较紧密，分子间引力较大，故更难溶于水；而二氢黄酮及二氢黄酮醇等，因系非平面型分子，故排列不紧密，分子间引力降低，有利于水分子进入，水中溶解度稍大。 2黄酮类化合物的提取分离及纯化 黄酮类化合物在花、叶、果等组织中多以苷元的形式存在，而在根部坚硬组织中，则多以游离苷元形式存在。因此，不同来源、部位、种类黄酮提取所采取的方法不同[6]。分离黄酮类化合物的方法很多，根据黄酮类化合物与混入其他化合物的极性不同可采用溶剂萃取法，根据黄酮化合物在酸性水中难溶、碱性水中易溶的特点可采用碱提酸沉法等。 2.1溶剂法 2.1.1 热水提取法
黄酮类化合物的提取
一、溶剂提取法：国内外使用最广泛的方法，步骤多、周期长、产率低、产品中有机溶剂易残留。溶剂系统主要有乙醇，水溶液、丙酮-水溶液、NaOH-水溶液、NaOH-乙醇等。精提物常在粗提物制备基础上精制，常用液-液提取法、沉淀法和吸附．洗脱法。以60％丙酮为起始溶剂粗提取，再脱脂、去银杏酚酸等15道工艺制成提取物。NaOH-水溶液提取效果最好，NaOH-乙醇溶液次之，正丁醇萃取水溶液中银杏黄酮苷，获得最佳萃取条件为萃取5 min温度60℃4次，萃取物中黄酮苷含量为57％。V水：V正丙醇=1:25最佳。银杏叶精提物树脂吸附纯化法以石油醚回流提取，再以80％乙醇回流提取，减压浓缩，新型澄清剂沉降，树脂分级吸附，pH值为3—4酸水和酸性25％乙醇洗涤，75％乙醇洗脱，喷雾干燥将银杏叶洗净，于60℃烘干至恒重，粉碎，过50目筛。称取粉末25 g，置于索氏提取器中恒重，粉碎，过50目筛。称取粉末25 g，置于索氏提取器中加入60％乙醇至250．0 ml，80℃下回流提取3．0 h，蒸馏回收乙醇，并用活性炭脱色，得银杏叶黄酮提取物。乙醇浓度为50％一70％时,提取率随浓度增加提高，当浓度70％时提取率达最大。随水浴温度升高总黄酮提取率快速增加。当温度80℃时提取率达最大。提取时间为三小时为佳。 黄酮类化合物（英语：Flavonoid，又称类黄酮[1]）是指基本母核为2-苯基色原酮类化合物，现在则泛指两个具有酚羟基的苯环通过中央三碳原子相互连接的一系列化合物。他们来自于水果、蔬菜、茶、葡萄酒、种子或是植物根。虽然他们不被认为是维生素，但是在生物体内的反应里，被认为有营养功能，曾被称为“维生素P”： 黄酮类（英语：Flavones）是一类基于2-苯基色原酮-4-酮（2-苯基-1-苯并吡喃-4-酮）骨架的黄酮类化合物，如右图所示。 银杏叶黄酮的研究程序 溶剂提取法：国内外使用最广泛的方法，步骤多、周期长、产率低、产品中有机