%80种快速实用的人心房肌细胞分离方法
一种快速实用的人心房肌细胞分离方法
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一种快速实用的人心房肌细胞分离方法
作者：梁延春， 张荣庆， 周更须， 贾国良， 蔡振杰
作者单位：梁延春,张荣庆,贾国良(第四军医大学西京医院心脏内科,陕西,西安,710032)， 周更须,蔡振杰(第四军医大学西京医院心脏外科,陕西,西安,710032)
刊名：
心脏杂志
英文刊名：CHINESE HEART JOURNAL
年，卷(期)：2000，12(4)
引用次数：5次
参考文献(7条)
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4.Feng JL.Wible B.Li GR Antisense oligodeoxynucleotides directed against Kv1.5 mRNA specifically inhibit ultrarapid delayed rectifier K+ current in cultured adult human atrial myocytes 1997(04)
5.司徒镇强细胞培养 1996
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7.Lixia Y.Jianlin F.Rania G Ionic remodeling underlying action potential changes in a canine model of atrial fibrillation 1997(03)
相似文献(10条)
1.期刊论文梁延春.韩雅玲.王祖禄.徐凯.张荣庆.贾国良慢性心房颤动对人心房组织及心房肌细胞的影响-解放军医学杂志2005,30(3)
目的观察慢性心房颤动(AF)对人心房组织及细胞结构的影响.方法 20例风湿性心脏病(RHD)患者分为两组,实验组为伴慢性AF的患者(n＝10),对照组为不伴AF患者(n＝10),对两组患者的右心耳组织进行了光镜、电镜观察.结果实验组心房纤维结缔组织含量(26.7±7.2)明显高于对照组(12.4±5.9),差异有统计学意义(P＜0.01).实验组心房肌细胞肌纤维溶解、线粒体增生、糖元累积的发生率分别为67%、71%、76%,明显高于对照组(29%、34%、39%),差异均有统计学意义(P<0.01).结论慢性AF能使心房组织发生纤维结缔组织增生、肌纤维溶解、线粒体增生、糖元累积等解剖重构变化,这些改变可能在AF终止后心房顿抑的发生和AF的自身维持中起作用.
2.期刊论文张荣庆.程何祥.王海昌.贾国良.郭文怡.周更须.张殿新.王海燕.李雪人心房肌细胞的培养与鉴定-中华心血管病杂志2004,32(9)
目的探索人心房肌细胞的原代及传代培养方法.方法取心外科手术患者(1.5～6.0岁,平均2.5岁)常规切除的右心耳,利用组织贴块法原代培养心房肌细胞并进行传代培养,对培养细胞(取第3代)进行光镜、透射电镜形态学观察和免疫细胞化学鉴定,并绘制生长曲线.结果原代培养10 d左右时细胞数目可达106～107/ml;此后每4～5 d可传代一次,大多可传至第8代.透射电镜观察到典型心肌细胞的超微结构,免疫细胞化学分析显示90%以上的细胞呈α-肌动蛋白及心肌特异性肌钙蛋白Ⅰ抗体染色阳性.细胞生长曲线显示第3代细胞在密度为1×106～8×106/ml呈对数生长,倍增时间约24 h.结论利用组织贴块法成功培养出人心房肌细胞,所得心房肌细胞纯度高并能传代培养,为深入研究人心房肌细胞的病理生理及分子生物学奠定了基础.
3.期刊论文张殿新.黄岚.王海昌.张荣庆.程何祥.刘兵.张清.郭文怡.李伟杰.秦涛胺碘酮对人心房肌细胞钙电流和钙离子浓度影响的研究-上海医学2005,28(4)
目的采用血管紧张素(Ang)Ⅱ刺激人的心房肌细胞,观察细胞膜钙通道电流及胞内游离钙浓度的变化,了解AngⅡ参与房性心律失常的电生理机制,同时观察胺碘酮的干预作用,为临床应用胺碘酮提供实验依据.方法急性分离单个人心房肌细胞,采用全细胞膜片钳方法记录L-型钙电流(I Ca-L ),同时应用共聚焦显微镜技术测定细胞内游离钙的浓度.实验分为对照组、AngⅡ组(0.1 μmol/L AngⅡ)、胺碘酮组(30 nmol/L胺碘酮)及AngⅡ+胺碘酮组.结果与对照组相比,0.1 μmol/L AngⅡ能使人心房肌细胞膜I Ca-L 峰值电流密度明显增加[(-12.77±1.61) pA/pF比(-5.78±0.81) pA/pF,P<0.05];30 nmol/L胺碘酮对人心房肌细胞膜I Ca-L 无明显影响[(-5.58±0.62) pA/pF];但胺碘酮可拮抗AngⅡ的作用,Ang Ⅱ+胺碘酮组的I Ca-L 峰值电流密度[(-7.16±0.82) pA/pF]与AngⅡ组的差异有显著性(P<0.05).共聚焦显微技术发现,对照组和胺碘酮组人心房肌细胞内荧光强度和荧光吸光度值较低;加入AngⅡ后即刻,细胞内荧光吸光度值开始增加,15 min后细胞内荧光强度和荧光吸光度值明显增高,与对照组比较,差异有显著性(P<0.05);而AngⅡ+胺碘酮组细胞内荧光吸光度值显著低于AngⅡ组(P<0.05).结论 AngⅡ使人心房肌细胞膜I Ca-L 峰值电流密度明显增加,同时可引起人心房肌细胞内钙超载,可能因此参与人类心房肌电重构并与心房纤颤的发生、发展有关;胺碘酮可拮抗AngⅡ的上述作用.
4.期刊论文肖国胜.廖玉华西洛他唑对人心房肌细胞瞬间外向钾电流的影响-中国应用生理学杂志2004,20(3)
目的:观察西洛他唑对人心房肌细胞瞬间外向钾电流(Ito1)的影响,探讨该药抗心律失常作用的机制.方法:二步酶解法分离人单个右心房肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录人心房肌细胞Ito1.结果:在保持电位-50 mV和去极化脉冲为+50 mV条件下,30 μmol/L西洛他唑显著降低Ito1,使Ito1幅值由加
药前(8.16±0.70)pA/pF降至(4.84±0.60)pA/pF(P<0.01).西洛他唑在1～50 μmol/L范围内呈浓度依赖性的抑制Ito1,1 μmol/L时即产生作用,50
μmol/L时达最大效应(降低51.09%±3.00%),IC50为(13.18±2.60)μmol/L.此外,该药对Ito1的电压依赖性激活和失活曲线以及恢复曲线均无显著影响.结论:本实验结果表明西洛他唑浓度依赖性地阻滞人心房肌细胞的Ito1.
5.期刊论文郭海平.宋治远.舒茂琴.钟理.庄国强.史光鉴快速心房电刺激对人心房不应期的影响及卡托普利的干
预作用-中国心脏起搏与心电生理杂志2002,16(2)
探讨快速心房电刺激对人心房有效不应期(AERP)的影响及卡托普利的干预作用.选择本院行射频消融术的38例成年患者为研究对象,随机分为卡托普利组(14例)、维拉帕米组(12例)及生理盐水对照组(12例).分别在阻断心脏自主神经后,观察各组用药前、后及快速心房刺激后AERP的变化及AF诱发情况.结果:①快速心房刺激可使57.9%成人正常心脏诱发AF;②诱发AF后AERP明显缩短,而未诱发AF者的AERP无明显变化;③卡托普利及维拉帕米均能显著延长诱发AF患者的AERP;④卡托普利能减少AF诱发率,并缩短AF持续时间;而维拉帕米则使AF诱发率增加、持续时间延长.结论:①快速心房刺激可使部分患者AERP缩短,并诱发这类患者发生AF;②卡托普利可显著延长诱发AF患者的AERP,并使AF诱发率降低、持续时间缩短.
6.期刊论文彭文蔚.高瞻.朱妙章.周京军.朱肖星.裴兆辉.PENG Wen-wei.GAO Zhan.ZHU Miao-zhang.ZHOU Jing-jun.ZHU Xiao-xing.PEI Zhao-hui Tamoxifen对人心房肌细胞超快速激活延迟整流钾电流的作用-心脏杂志
2005,17(6)
目的:研究发现tamoxifen可延长患者心电图QT间期,易致心律失常,但其离子机制目前还不清楚.本实验将观察tamoxifen对人心房肌细胞超快速激活延迟整流钾电流(IKur)的影响,以探讨tamoxifen影响心肌QT间期的可能机制.方法:通过胶原酶消化法得到单个人心房肌细胞,并通过全细胞电压钳方法记录心肌细胞上的IKur.结果:本法可得到横纹清楚的单个耐钙人心房肌细胞,Tamoxifen(1～30 μmol/L)可剂量依赖性并可逆地抑制Ikur.结论
:Tamoxifen对人心房肌细胞IKur具有显著的抑制作用.
7.学位论文张殿新人心房肌电和结构重构与房颤的关系及Ang Ⅱ的作用2005
心房颤动(atrialfibrillationAF)是临床上最常见的复杂心律失常之一，其发病率随年龄增长而显著增加，并成为一种独立的危险因素使患者残率、致死率增加，因而是当前心血管疾病的一个研究重点，也是心律失常领域中亟待解决的难题。目前房颤的治疗包括药物疗法和近十几年来开展的介入疗法和新的手术方法，但其效果有限，绝大多数患者的症状和预后得不到明显的改观。为此，加深对房颤机制的认识，针对病理基础寻求治疗手段是当前房颤研究的重点，其中对心房重构(包括心房电重构与心房解剖重构)的深入研究可能会使我们发现房颤的更深层次的机制，从而找到解决房颤的有效方法。
近年来人们观察到房颤具有自身延续性，慢性持续性房颤常由多次的阵发性房颤做为先导，房颤终止以后再次复发的可能性与房颤持续的时间密切相关。1995年Wijffels等在山羊模型上发现，随着快速心房刺激时间的延长，有效不应期(AERP)进行性缩短，房颤的诱发率明显增高，持续时间逐渐延长；即房颤本身可诱发心房的电生理改变，使房颤容易发生和持续，人们将这种现象称为心房电重构(AtrialelectricalremodelingAER)，主要表现为有效不应期缩短和有效不应期频率适应不良。它在房颤的发生、持续及房颤引起的一系列心房功能改变中起着重要作用。作为持续性房颤产生机制的最新进展，心房电重构为房颤的防治提供了新的方向，成为目前的研究热点。
在对心房电重构不断深入的研究中，人们还发现，房颤转复为窦性心律后，心房的电生理特性很快恢复到正常状态，而心房收缩功能却需几周甚至数月才能恢复正常。在快速起搏右心室产生心力衰竭后诱发房颤的动物模型中发现，心房有效不应期、房颤波长及其离散度没有发生明显改变，这说明除了心房电重构之外，还有其它因素参与了房颤的发生与维持。近来研究表明，心房肌细胞在房颤期间发生了非常明显的结构变化，即发生了结构重构(atrialanatomicalremodelingAAR)。
多年来人们对心房电重构和结构重构进行了大量的研究和探索，取得了一些成绩，但有关房颤发生和维持的确切机制仍然不是很明确，临床治疗中药物的有效性和副作用等方面的很多问题仍没有得到很好的解决。因此有必要在房颤发生的电生理机制和药物干预方面做进一步的深入研究，为最终解决房颤问题提供实验依据。
研究目的:通过实验探讨心房颤动时血管紧张素Ⅱ参与心房电重构和解剖重构的可能机制，并观察其受体拮抗剂对心房重构的影响，为临床应用血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂治疗心房颤动提供实验依据。
1.采用胶原酶两步消化法急性分离单个人的心房肌细胞并对其进行鉴定；采用组织块法进行人的心房肌细胞体外培养的尝试，通过上述两种方法得到单个人的心房肌细胞，为直接应用人的心房肌细胞进行实验建立细胞模型。
2.观察血管紧张素Ⅱ对正常人的心房肌细胞L型钙电流(ICa-L)；瞬时外向钾电流(Ito)和内向整流钾电流(IK1)的影响，并与心房颤动患者心房肌细胞上述电流的改变进行比较，了解血管紧张素Ⅱ参与心房颤动时心房电重构的机制；并给与血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂替米沙坦进行干预，了解其拮抗作用。
3.观察心房颤动和不伴心房颤动患者心房肌细胞钙超载的情况，并在正常心房肌细胞上用血管紧张素Ⅱ进行验证，观察其对钙超载的影响，同时给予血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂替米沙坦进行干预，了解其对心房肌细胞钙超载的作用。
4.对伴心房颤动和不伴有心房颤动的患者心房肌细胞进行光镜下组织结构、电镜下超微结构和心肌细胞间缝隙连结蛋白的对比研究，了解心房结构重构与房颤的关系及可能的机制。
方法与技术路线:1、人单个心房肌细胞的急性分离及活性鉴定：心脏外科接受体外循环手术的患者建立体外循环前切取右心耳组织，常规处理后，采用胶原酶和蛋白酶两步消化法，再加磁力搅拌及充氧分离出单个人的心房肌细胞。进行浓度梯度法复钙后，在倒置显微镜下观察细胞形态并摄片；全细胞膜片钳法记录细胞膜钾电流；台盼蓝染色鉴定活细胞。
人心房肌细胞的培养及鉴定：采用组织块贴壁法培养心房肌细胞，用胰酶消化后进行传代培养。倒置显微镜下观察细胞形态并摄片；制备细胞片固定后加鼠抗人平滑肌α-Actin和SPA-HRP标记的二抗作免疫细胞化学染色；加羊抗人TnI、鼠抗人平滑肌α-Actin、加兔抗羊IgG-FITC和羊抗鼠IgG-
CY3作免疫荧光染色；制备电镜标本进行透射电镜观察。
2、电生理学测定：采用全细胞膜片钳模式记录细胞膜各种电流：取保存在KB液中的人的心房肌细胞悬液，置于倒置显微镜实验平台上的灌流槽内，静置使细胞贴附于底壁，而后根据所要记录的电流来选择不同的细胞外液进行灌流。拉制膜片钳微电极；选择合适的细胞后进行电极尖端与细胞膜之间的巨阻抗封接；破膜后进行电容补偿，建立全细胞记录模式。
取急性分离的正常人的心房肌细胞，复钙后采用全细胞膜片钳法记录细胞膜L型钙电流(ICa-L)；瞬时外向钾电流(Ito)和内向整流钾电流(IK1)。再分别加入血管紧张素Ⅱ和替米沙坦进行干预，观察各电流的变化。
取急性分离的心房颤动和不伴心房颤动患者的心房肌细胞(部分房颤患者预先给予替米沙坦制剂干预)，再记录上述细胞膜各种电流的变化。
3、应用激光扫描共聚焦显微镜测定人心房肌细胞内的钙离子浓度：首先用Fluo-3/AM负载单个人心房肌细胞，然后在激光扫描共聚焦显微镜下扫描细胞内钙荧光强度，应用数字传入式摄像机和高速度计算机处理软件得到清晰的细胞内钙分布图像，利用其图像量化、分析系统进行图像分析，并换算出某一选定区域内Ca2+荧光强度随时间变化的曲线
首先对正常人的心房肌细胞进行测定，细胞外液中加入血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂替米沙坦进行干预后，分别测定各组细胞的钙离子浓度。然后用同样的方法再测定房颤和非房颤患者心房肌细胞的钙离子浓度。
4、收集心脏外科行心脏手术的慢性房颤和不伴慢性房颤患者的右心耳标本，固定后分别制备组织切片标本进行光镜下纤维结缔组织的定量评定
；制备电镜标本进行超微结构改变的评估；制备免疫组化标本进行细胞缝隙连结蛋白CX40的半定量分析。
结果:1、单个人心房肌细胞的急性分离及培养的结果：采用改良的胶原酶两步消化法及磁力搅拌后分离出的细胞具有人心房肌细胞的典型特征。细胞呈杆状、横纹清晰、细胞膜完整，部分细胞还有收缩现象发生。膜片钳记录到的钾电流符合正常人心房肌细胞钾电流的特征。经台盼蓝染色，细胞成活率50-70％，细胞存活时间超过24小时。
采用组织块贴壁法培养的人心房肌细胞在光学显微镜观察，贴块4-5d后即可见有细胞从肌小粒边缘爬出，细胞呈梭形，10d左右细胞生长密度可达瓶底的70％～80％，每4-5d可传代一次，大多可传8代，细胞生长共1.5月余。经免疫细胞化学鉴定，培养的细胞90％以上非特异性α-Actin抗体染色阳性，平滑肌特异性α-Actin抗体染色阴性；心肌特异性TnI抗体染色阳性，证明培养的细胞为心肌细胞。透射电镜观察，培养3代的细胞可见较多微(肌)丝和线粒体，细胞器靠近细胞核，符合典型心房肌细胞的超微结构的特征。
2、全细胞膜片钳法记录细胞膜电流的变化：血管紧张素Ⅱ使人心房肌细胞Ito峰值电流密度明显下降。替米沙坦对Ito无显著影响，但可拮抗血管紧张素Ⅱ的作用，使Ito峰值电流密度下降程度减轻。
血管紧张素Ⅱ使人心房肌细胞ICa-L和IK1峰值电流密度明显增加，替米沙坦可使ICa-L和I¨峰值电流密度增加程度减轻，对血管紧张素Ⅱ产生拮抗作用。
房颤组心房肌细胞所记录的Ito峰值电流密度与非房颤组心房肌细胞相比明显下降；IK1峰值电流密度明显增加；房颤组ICa-L峰值电流密度低于非房颤组。
加替米沙坦干预后IK1的电流密度明显降低；Ito的电流密度明显回升；ICa-L的电流密度值略高于房颤组。
3、激光扫描共聚焦显微镜测定结果：血管紧张素Ⅱ加入后即刻，细胞内荧光强度开始增加，15min后细胞内荧光强度和光密度值显著增高，而加入替米沙坦15min后细胞内钙荧光强度和荧光光密度值低于血管紧张素Ⅱ。房颤患者心房肌细胞内[Ca2+]i显著升高，替米沙坦干预后患者心房肌细胞内钙荧光强度和荧光光密度值降低。
4、光镜下可见慢性房颤心房组织中细胞数目减少，结缔组织增生明显，并可见肌细胞溶解。超微结构水平，可见房颤细胞收缩元素减少，肌纤维溶解区线粒体增生。细胞缝隙联接蛋白CX40在房颤细胞明显减少且排列紊乱。
结论:1、成功建立的急性分离及培养方法所得到的人心房肌细胞具有心肌细胞的典型形态特征、细胞生物学和电生理学特性。为进一步开展人心房肌细胞分子生物学、人心房肌细胞移植、人心房肌细胞基因表达及信号转导的研究提供了实验基础。
2、血管紧张素Ⅱ对人心房肌细胞具有明显的电生理作用，能使心房肌细胞膜L型钙电流(ICa-L)、瞬时外向钾电流(Ito)和内向整流钾电流(IK1)发生变化，血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂替米沙坦可以使其作用减轻，血管紧张素Ⅱ通过影响人心房肌细胞膜主要离子流参了与AF的发生和发展。
3、人心房肌细胞在血管紧张素Ⅱ的刺激下细胞内钙离子浓度明显升高，血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂替米沙坦能拮抗这一作用，而且还能减低房颤患者心房肌细胞内的钙离子浓度，提示心房肌胞内钙超载也参与AF的形成。
4、心房颤动时心房肌细胞发生细胞、组织结构变化及细胞缝隙联接蛋白的改变，证明其对房颤的发生和维持具有重要的作用。
8.期刊论文张毅男.张铁铮.王凤学.周锦.谭宏宇.韩冬云氯胺酮对人单个心房肌细胞ATP敏感性钾电流
(IK·ATP)的影响-第四军医大学学报2003,24(24)
目的:探讨氯胺酮对人单个心房肌细胞ATP敏感性钾电流(IK·ATP)的影响.方法:取房缺或室缺修补术患者的右心耳组织,置于100%氧饱和的无钙心肌细胞保护液中,30 min内送至实验室.将标本剪成1 mm3的小块,用二步酶解法分离出单个心房肌细胞.采用膜片钳全细胞记录方法,观察两种浓度氯胺酮对人单个心房肌细胞IK·ATP的影响.结果:在电极内液含ATP(0.3 mmol·L-1)的条件下,记录到一束外向K+电流.该电流可被KATP通道特异阻滞药格列苯脲(10μmol·L-1)抑制,表明此电流为IK·ATP在指令电位为+20mV时,用含低浓度氯胺酮(0.01 mmol·L-1)的细胞外液灌流时,IK·ATP受到抑制,抑制率为11.1%(n=3,P＜0.01).用含高浓度氯胺酮(0.1 mmol·L-1)的细胞外液灌流时,IK·ATP被大量激活,增加率为57.6%(n=3,P＜0.01).结论:低浓度氯胺酮(0.01 mmol·L-1)对人心房肌细胞IK·ATP具有抑制作用;高浓度氯胺酮(0.1 mmol·L-1)对IK·ATP则有激活作用.
9.期刊论文张殿新.程何祥.张荣庆.黄岚.王海昌.郭文怡.刘兵.张清.ZHANG Dian-Xin.CHENG HE-Xiang.ZHANG Rong-Qing.Huang Lan.Wang Hai-chang.Guo Wen-yi.Liu Bing.Zhang Qing大蒜素对血管紧张素Ⅱ诱发人心房肌
细胞钙电流和游离钙离子浓度的影响-中国临床康复2005,9(19)
背景:近年来发现血管紧张素Ⅱ可诱发心房电重构,而大蒜素具有相应的拮抗作用,可阻止或减轻心房电重构的发生.目的:观察大蒜素对血管紧张素Ⅱ诱发人心房肌细胞膜钙通道电流和细胞内游离钙离子浓度的影响.设计:以急性分离的人的心房肌细胞为实验对象,随机对照设计.单位:一所军医大学医院心内科. 方法:实验于2003-06/2004-06在第四军医大学西京医院心脏内科实验室完成.选择在此期间接受心脏体外循环手术的先天性心脏病患者
10例;男6例,女4例,平均年龄(15±6)岁.术中取患者右心耳标本送至实验室后,急性分离单个人心房肌细胞,实验分4组:对照组(不加任何干预措施);血管紧张素Ⅱ组:加入终浓度为0.1μmol/L的血管紧张素Ⅱ;大蒜素组:加入终浓度为50 μmol/L的大蒜素;血管紧张素Ⅱ+大蒜素组:大蒜素50 μmol/L与血管紧张素Ⅱ0.1 μmol/L同时加入.采用全细胞膜片钳方法记录L型钙电流;以钙荧光探针荧光指示剂负载,应用激光共聚焦显微镜技术,分别于加入干预药物后即刻与15 min检测游离钙离子浓度变化.主要观察指标:各组人心房肌细胞L型钙电流峰值电流密度及钙离子游离钙离子的荧光强度变化率.结果:①血管紧张素Ⅱ组人心房肌细胞膜L型钙电流峰值电流密度明显高于对照组[(-12.77±1.61),(-5.78±0.81)pA/pF,P＜0.05).②大蒜素组人心房肌细胞膜L型钙电流峰值电流密度与对照组比较,无明显差异[(-5.69±0.83)pA/pF,P＞0.05].③血管紧张素Ⅱ+大蒜素组人心房肌细胞膜L型钙电流峰值电流密度明显低于血管紧张素Ⅱ组[(-8.75±0.97)pA/pF,P＜0.05).④血管紧张素Ⅱ组人心房肌细胞内游离钙离子荧光强度和游离钙离子荧光强度变化率明显高于对照组和大蒜素组[(2610.1±112.6,(299.2±27.3)%;653.9±42.5,0;639.5±44.7,(-2.2±0.6)%,P＜0.05].血管紧张素Ⅱ+大蒜素组人心房肌细胞游离钙离子荧光强度和游离钙离子荧光强度变化率明显低于血管紧张素Ⅱ组[(1284.9±85.2,(96.5±8.4)%,P＜0.05].结论:大蒜素可拮抗血管紧张素Ⅱ致人心房肌细胞膜L型钙电流峰值电流密度的增加,拮抗人心房肌细胞内钙超载,产生减轻心房肌细胞电重构的作用.
10.期刊论文刘荣韬.幸浩洋.陈立国.肖静.郭慧玲.王正荣.LIU Rong-tao.XING Hao-yang.CHEN Li-guo.XIAO Jing.GUO Hui-ling.WANG Zheng-rong重组人心房肽对高血压大鼠心肌肥大的抑制作用及其机制-华西药学杂志
2005,20(5)
目的观察重组人心房肽(rhANP)对高血压大鼠心肌肥大的治疗效果,并探讨其作用机制.方法建立两肾一夹(2K1C)高血压大鼠模型,通过在高血压大鼠腹腔植入微囊化人心房肽 cDNA重组质粒转染细胞,形成稳定的体内心房肽给药系统.检测假手术正常血压对照组、高血压模型组、rhANP治疗组大鼠的尾动脉收缩压(SBP)、血浆rhANP水平、心肌血管紧张素II(AngII)含量、心肌重量指数(MWI)、左心室肥厚指数(LVWI)、心肌胶原含量和心肌纤维直径等指标.结果 rhANP治疗组大鼠的血浆rhANP浓度为217.3±11.3 ng·L-1,显著高于另两组;高血压组大鼠的SBP、心肌AngII含量、MWI、LVWI、心肌胶原含量和心肌纤维直径较对照组显著增加(P＜0.01).rhANP治疗 45 d 后显著降低高血压大鼠SBP、MWI、LVWI、心肌胶原含量、心肌纤维直径和心肌AngII含量(P＜0.01).结论由微囊化rhANP cDNA质粒转染细胞产生和分泌的rhANP可抑制心肌细胞肥大及胶原增生,有效防治左室肥厚,此作用与rhANP降低高血压大鼠的血压和心肌AngII含量有关.此结果也为高血压的心房肽基因治疗提供了新途径.
引证文献(5条)
1.李妙龄.曾晓荣.杨艳.刘智飞.丁银元.周文.裴杰一种改进的人体心房肌细胞分离方法[期刊论文]-生理学报2007(6)
2.梁延春.张荣庆.周更须.贾国良慢性心房颤动对人心房肌细胞内向性钠离子流的影响[期刊论文]-辽宁药物与临床 2003(3)
3.梁延春.张荣庆.周更须.贾国良慢性心房颤动对心房肌细胞外向钾电流及L型钙电流的影响[期刊论文]-辽宁药物与临床 2003(2)
4.周更须.梁延春.张荣庆.蔡振杰.贾国良.郭群.张作明风湿性心脏病慢性心房颤动对心房肌细胞外向钾电流影响
的研究[期刊论文]-中国心脏起搏与心电生理杂志 2001(6)
5.周更须.梁延春.张荣庆.蔡振杰.贾国良.郭群.张作明风湿性心脏病心房纤颤和窦性心律患者心房肌细胞外向钾
电流的比较[期刊论文]-心脏杂志 2001(6)
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