多功能酶标仪的选择要素

多功能酶标仪的选择要素

更多相关文章时间:2009-12-25 10:00:42,点击:255 近年来，随着多功能酶标仪在国内各高校实验室逐渐推广开来，多功能酶标仪品牌和型号也逐渐多了起来，乱花渐欲迷人眼。除了三大传统优势品牌PE、MD和TECAN，还出现了众多后来者插足此市场，如收购了芬兰雷勃的Thermo、从发光起家的Berthold、针对药筛领域的BMG以及新兴的BioTek等品牌。各品牌都有各自的一个甚至多个系列产品线，特性各不相同，选购时各种技术参数、技术指标令人眼花缭乱

本文尝试从用户实际使用的角度，探讨应该如何看待花样繁多的参数特性，希望能帮助大家找到真正合适自己的多功能酶标仪。

一、滤片Vs光栅

多功能酶标仪的分类方法众多，但最简单的莫过于用他们的滤光方式来作分界线。一般来说，可以分为滤光片型和光栅型两大类。当然也有一些型号，例如Synergy4和EnVision等，一台机器里面同时装上了滤光片和光栅。但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测，还是想用光栅的时候用光栅，该用滤片的时候用滤片;还有一些实验非用其中一个不可，另一模块实现不了的。所以这类仪器本质上还只是把滤片和光栅放在了一起，并没有使两者糅合而产生新的技术突破。

总体来说，滤片技术由于发展已久，配合二向色镜(其实也就是另一模式的滤光反光滤镜)等光路系统，可以实现大部分实验的需要。目前常规多功能酶标仪中最高的检测灵敏度就是用滤光片型做出来的，例如TECAN Infinite F500的荧光检测的灵敏度可以达到0.04 fmol/孔(荧光素，384孔/80ul)。

但是滤光片型仪器由于受限于滤片的波长和数量限制，不可能满足日益增加的实验类型的检测需要，而且有时需要对物质的吸收、激发和发射光谱进行研究，所以后来就诞生了光栅型仪器。

最先推出光栅的是MD公司，其光栅习惯上称为单光栅。由于光纯度的不足，在光栅的后面又加入了一组带阻滤片，再把杂光过滤一遍，达到了5×10-4的杂光率，基本与纯粹的滤光片系统一致。后来TECAN又发展出了双光栅技术，通过两次光栅滤光，杂光率降到了10-6。后来，Thermo、BioTek和PE的部分新款仪器等都使用了类似双光栅技术。由于激发和发射各用了一组双光栅，此类机器又被称为四光栅型多功能酶标仪。

光栅型酶标仪的推陈出新，光栅型使得用户在波长选择上不再受限，而且在杂光率、带宽控制等性能上还超越了滤光片系统。例如，TECAN公司在2008年底推出使用了第三代四光栅系统的M1000酶标仪，杂光率降到了2×10-7的新低，还实现了带宽2.5～20nm连续可调。这些都是目前滤光片型酶标仪所不能或者较难实现的。

二、杂光率&波长准确性

光栅型滤光系统俨然已经成为了目前通用性多功能酶标仪的主流，多家厂家共同努力，已经把光

最关键的

杂光率指得就是光源通过光栅后，得到的光线中，“不需要”的波长的光占所标称波长的光的比例，表征了滤光的纯度。由于光线干涉、衍射等的复杂性，无论使用滤光片还是光栅，杂光都是不可避免的。各种滤光技术的本质就是要想办法把杂光尽可能地去掉。

一般来说，1.滤光片型的杂光率在10-4～10-5之间，光栅型的可以做到10-6～10-7。由于此类杂光是非特异的，而且会直接进入最后的检测器，所以有多少的杂光就会引入多少的随机误差。在荧光等检测过程中，由于检测器存在放大效应，杂光率的干扰也会被指数级放大。因此，杂光率就是一个滤光系统的首要性能指标。

光栅的另一个重要指标2.就是波长选择的准确性。因为很多检测是依赖于物质在某个波长的特征图谱。就像DNA/RNA的OD260浓度测定，实际检测波长偏离260nm几个nm以上的话，OD值与最终浓度之间的数学关系就会发生改变。因此，一组性能优良的光栅系统，他的波长选择准确性应该是在±0.5～1nm之间。波长偏离过大有时就会影响到最终结果的准确性。

这两个可谓是光栅甚至滤光片滤光系统最关键的技术参数，直接影响到的是得到数据是否是真正所要测量的结果，是实验结果可靠性的最基本要求。

抗原是一种能诱发机体产生特异性免疫反应的大分子物质，如蛋白质、多糖、核酸等，在自然界中抗原分布很广，如细菌、病毒、组织细胞、血细胞、血清蛋白、毒素、花粉等都含有抗原。通过人工方法也可以改造抗原或合成抗原。外来抗原进入机体以后能诱导机体产生特异的免疫反应（抗原的这种能力叫做抗原性），这种免疫反应是通过淋巴细胞来完成的。淋巴细胞分为T淋巴细胞和B淋巴细胞两种。T 淋巴细胞受到抗原刺激就会产生排除抗原的反应。B淋巴细胞受到抗原刺激后就会分经为浆细胞，浆细胞则能产生抗体，抗体也就是免疫球蛋白（Ig）,它能够识别相对应的抗原，并且与抗原特异性结合，这样就在体内中和或者排除抗原，保护了机体不受异物的侵犯。抗原有一个最重要的特性就是它具有特异性（即专一性）和选择性。例如抗原甲诱导的免疫反应只针对抗原甲而不针对无关的抗原乙或丙。同样，抗原乙诱导的免疫反应也只针对抗原乙，而不针对无关的抗原甲或丙。因此，抗体也是特异地与某种抗原结合的，如针对感染因素的不同，就有抗细菌抗体、抗病毒抗体、抗真菌抗体、抗寄生虫抗体、抗毒素抗体等等。借助抗原体和抗体之间免疫反应的这种专一的特异性，就可以通过检验方法来鉴定抗原或抗体，用于疾病诊断。

由此看来，人体有一种自我保护的免疫功能，就是认识自身和识别异体，凡是异体的物质即可通过人体的免疫系统排出去。人的血清中也有多种针对自身抗原的抗体，属于生理性抗体，可以清除衰老、退变的自身组织（这叫作自身免疫反应），这种自身抗体含量极低，不会破坏自身成分，但如果在病理情况下，机体针对自身的组织、血液成分产生大量自身抗体就要严重破坏自身的组织，由此产生的疾病称“自身免疫性疾病”。

酶标仪的选择、自检和校准

一、酶标仪的选择

面对类型如此众多的酶标仪，实验室在选择时往往有难以适从的感觉。一般来说，用于酶免疫测定比色的酶标仪可分为普通酶标仪，多功能全自动酶标仪和全自动酶免疫分析系统等，普通酶标仪的功能基本上相当于一个微孑L板比色计，而多功能全自动酶标仪除了有微孔板比色功能外，还有酶标动力学，紫外乃至凝集等多种检测功能；全自动酶免疫分析系统则有试剂“开放”和“限定”之分，所谓试剂“开放”是指不同品牌的ELISA试剂均可用于该仪器，而试剂“限定”则必须使用仪器专用的酶免测定试剂。实验室在选择酶标仪时，一般应遵循这样几条原则：

1．根据工作需要去选择。切忌刻意去求功能多，因为一则如果仪器功能过多，易出故障，二则有些功能如酶标动力学或凝集等，可能根本就用不上；如果拟购置的酶标仪主要是用于定性测定，则不必要求完美的定量所需的软件系统。至于全自动酶免疫分析系统则对工作量比较大的血站或大型医院较为适用，对于日常工作量不太大的实验室，就无必要。

2．根据酶标仪的性能去选择。反应酶标仪性能的指标主要有测定波长范围，滤光片配置，检测速度，吸光度范围，线性范围，分辨率，准确度，精密度等。

3．根据自己实验室的财力去选择。酶标仪品种类型多，由于性能不一，价格自然也就相差较大，实验室可根据自己的财力去选择性能／价格比较为合适的酶标仪。

4．根据售后服务去选择。实验室仪器买了以后，就跟我们家里使用的家用电器一样，在使用过程中及使用一段时间之后，很可能就会有保修或维修方面的问题，因此一定要选择售后服务好的公司的酶标仪。

5．根据实验室人员的外语水平去选择。进口酶标仪现有不少已使用中文人机对话，对于英语上有困难的实验室，应尽可能选用此类酶标仪。

确定了选择原则以后，就是怎样去选择了。选择的步骤首先是要获取有关酶标仪的信息资料，一般有这样几条途径：

①向已购不同酶标仪的多家实验室同行咨询访问，获取最直接的使用效果的信息；

②酶标仪销售商的信息广告及介绍；

③权威机构的仪器评估报告。

获取了尽可能多的酶标仪信息资料后，就是对不同类型的酶标仪的性能指标进行比较，选择较为适合本实验室的一种或二，三种再向销售商作进一步的详细咨询了解，以决定选择哪一种进行自检。

二、酶标仪的自检和校准从上述所获的酶标仪性能的有关信息资料，基本上可以说是间接的，有了目标以后，如果还想获得对某一酶标仪的感性认识，可以对其进行自检，主要有下述几个方面。

(一)外观

酶标仪上应有仪器名称，型号，编号，生产厂家，出厂日期和电源电压；各调节旋钮，按键和开关均能正常工作，外表面无明显机械损伤；显示文字应清楚完整。

(二)酶标仪的稳定性(漂移)

选用492nm波长，在吸光度o．0A处，测定标称值为1．0A的光谱中性滤光片(测定操作按仪器说明进行)，记录仪器示值或均值，10min后再次记录仪器示值或均值，前后两次测定值之差不应超过±0．005A。

(三)吸光度测定的准确度

选用405，492和620 nm波长，以空气为参比，分别测定标称值为0．5和1．0A的光谱中性玻璃滤光片，用专用测试板代替酶标板，按仪器说明连续测定3次，按下式计算准确度：AA＝1／3(A、+A。+A3)—A：(A：为标准值)。

(四)吸光度测定的重复性

波长选择同(3)，在酶标板第一排加注空白溶液，第二排加入浓度为200rig／ml的重铬酸钾溶液，重复测定5次。记录每次测定的第二排吸光度值，取第二排任一孔吸光度值与各次对应孔吸光度值。按下式计算重复性：

（五）酶标仪的线性

选用540nm波长，将标称值o．5，1．0A中性滤光片分别放入专用测试板样本位置中，以空气为参比，各重复测定3次；然后将以上两片中性滤光片叠加后置于专用测试板的同一孔位中，重复测定3次。线性误差：

式中A1为第一片中性滤光片吸光度均值，A：为第二片中性滤光片吸光度均值，A1，2为两片中性滤光片叠加后的吸光度均值。

(六)测定速度的检定．

选用492nm波长，放人96孔酶标板进行测定，用秒表计测仪器打印出全部数据的时间。

酶标仪除了在选购时，应尽可能自检外，在使用中也应定期检定，以保证酶标仪测定的有效性。

附：200ttg／ml重铬酸钾溶液的配制

将重铬酸钾固体试剂放人称量瓶中(去盖)置于烘箱中，在105±5℃下烘2h后，置于干燥器内冷却30min，在分析天平上准确称取o．2829g，置于100ml烧杯中，用o．05mol／L稀硫酸溶解后，移入500ml容量瓶中，以少量o．05mol／L稀硫酸洗烧杯3次，洗液并入容量瓶中，用0．05mol／L稀硫酸稀释至刻度线，摇匀。

酶标仪的重要指标

1.方法与原理

1.1滤光片波长精度检查及其峰值测定

1.1.1方法及其衡量的标准：用高精度紫外可见分光光度计（波长精度±0.3 nm）对不同波长的滤光片进行光谱扫描，检测值与标定值之差即为滤光片波长精度，其差值越接近于零且峰值越大表示滤光片的质量越好，波长精度越高。

1.1.2理论基础：酶标仪的滤光片质量好坏，直接影响仪器的灵敏度高低，而滤光片的质量又是以其波长精度及其峰值指标来衡量的，因此滤光片波长精度及峰值是衡量酶标仪的重要参数之一，这在厂家的仪器说明书中虽未曾提及，但在仪器的实际使用过程中，我们发现对滤光片波长精度和峰值进行检查是重要的也是必要的，通过检查可以发现滤光片的波长标定值与实测值的符合程度，可以发现滤光片的质量是否符合要求。

1.2灵敏度和准确度的监测

1.2.1方法：①灵敏度：精确配制6 ug/ml重铬酸钾（干燥）溶液（0.05 mo1／L硫酸溶解），加入200 ul重铬酸钾溶液于小孔杯中，以0.05 mo1／L硫酸溶液作空白，于450 n

m（参比波长650 nm）测定，其吸光度应≥ 0.01 A。②准确度：准确配制：1mmo/L对硝基苯酚（提纯品）水溶液，然后以10 mmo1／L氢氧化钠溶液25 倍稀释之，加入200 ul稀释液于小孔杯中，以10 mmo1／L NaOH溶液作空白，于405 nm（参比波长650 nm）检测，其吸光度应在0.4 A（0.395～0.408 A）左右。

1.2.2说明：仪器的灵敏度和准确度主要受两个因素影响：一是滤光片波长的精度，二是检测器的质量。通常情况下，滤光片原因导致仪器的灵敏度和准确度下降比较容易检查；而检测器质量差异则不易被发现，因此我们采用上述两种标准物质溶液对仪器检测器的质量进行定期监测，从而保证了仪器检测结果的可靠性。对于仪器准确性的测定，我们采用了文献报道的方法，经过多次在不同型号仪器间进行反复测定，结果发现该标准物溶液在450n m波长处有一较为恒定的测定值，由于酶标仪与其它分光光度计的光学原理不完全相同，故是否可以作为评价酶标仪准确性的参考方法还有待同行进一步研究考证。

1.3通道差与孔间差检测

1.3.1方法及其表达方式：①通道差检测：取一只酶标板小孔杯（杯底须光滑、透明、无划痕、无污染）以酶标板架作载体，分别加入三种不同浓度的甲基橙溶液200 ul先后置于8个通道的相应位置，蒸馏水调零，采用双波长（测定波长490nm，参比波长630或650 nm，以下均相同）连续测三次，观察其不同通道之间测量结果的一致性可用极差值来表示其通道差。②孔间差的测量：选择同一厂家、同一批号酶标板条（8条共96 孔）分别加入200 ul甲基橙溶液（吸光度调至0.065～0.070 A）先后置于同一通道，蒸馏水调零，采用双波长检测，其误差大小用±1.96s衡量。

1.3.2理论解释：为了提高酶标仪的检测速度，根据96孔酶标板的规格特点，目前大多数厂家的中、高档酶标仪均采用8通道的检测器（部分中、低档酶标仪目前仍采用单通道）．因而它们每个通道的检测能力是不尽相同的，它是仪器内部的固有误差，与所测溶液浓度成正相关（不同检测器对不同浓度溶液的响应能力不同），所以通道差是衡量酶标仪性能良好与否的重要指标之一；其衡量指标用极差表示，这与厂家推荐的指标是一致的；极差值越接近于零，通道差越小，说明同一样品于不同通道检测结果的一致性越好。

由于不同厂家、不同批号酶标板之间的质量差异，导致孔与孔之间的检测结果也不完全一致，这与水平光路光度计的比色皿质量是否符合要求一样，因此我们认为孔间差是仪器外部的固有误差，只有准确测知孔间差，并对结果作出相应的校正，才能使检验结果更符合实际情况、更准确可靠；采用的评价指标（士1.96 s）也是有利于结果校正的。另外，在设计孔间差测量的操作方法上，我们将200 ul甲基橙溶液吸光度调至0.065～0.070 A，是充分考虑到加样器的误差（上海求精公司，200 ul，士2％CV），其目的是使加样误差控制在仪器的分辨率（0.01 A）以下，这样也就避免了孔间差结果不因加样误差而导致假性增高。1.4零点飘移

1.4.1方法：取八只小孔杯，分别置于八个通道的相应位置，均加入200 ul蒸馏水并调零，采用双波长或单波长（490 nm）每隔30 min测定一次，观察8个通道4h内的吸光度变化。其与零点的差值即为零点飘移。

1.4.2测量原理：酶标仪的零点飘移通常是很小的，这是由于仪器在读数之前，先要做8个通道的本底测量（Io）．然后再读取样品板的各孔测定值（I），根据Beer…s law光吸收值=1ogl0（Io／I），每次读数经过如此的自动校正，使得读数误差大大降低，这样的测读方式无疑是非常正确的的；另外有的仪器是应用"DRL DYE"检测试条来进行绝对吸光度的校准的，因此在采用单波长测量时，会导致吸光度的假性增高，这种仪器可采取两种方法进行校正，一是选择一合适的参比滤光片进行双波长测定，二是引入修正参数，即在吸光度模式下单波长读取1个空白孔，其测试值和预测值之差值即为修正参数。所以零点飘移是评价仪器在一定时间内零点吸光度的变化趋势，与波长无关，它间接地反映了仪器内部检测系统在

单位时间内处于工作状态下的稳定性及仪器的机械性能情况（连续进板、检测、退出），故它是评估仪器内部电路系统、光学系统（检测器）及机械系统良好与否的指标。

1.5精密度评价

1.5.1方法及评价指标：每个通道三只小杯，分别加入200 ul高、中、低三种不同浓度的甲基橙溶液，蒸馏水调零，采用双波长作双份平行测定，每日测定两次，连续测定20天。分别计算其批内精密度、日内批间精密度、日间精密度和总精密度及相应的CV值。

1.5.2理论依据：1984年美国临床实验室标准委员会发表了EP5一T文件并于1992年进行了第二次修订：临床化学仪器精密度性能的用户评价。该评价方案在生化分析仪、血细胞计数仪等仪器和试剂的评价中得到了广泛的应用，使评价仪器的方法得到了统一；而该法应用于酶标仪的评价在国内外则尚未见有类似的报道，我们采用该法对酶标仪进行系统评价，结果是比较满意的。各指标的意义为：批内精密度系由20d中每天两批，每批两次之差（即"批内"）经统计学处理后所得的结果；日内批间精密度系由20d中每天两批测定结果均值之差（即"批间"）经统计学处理后所得的结果；日间精密度表示20 d中每天所测均值的标准差即标准误，反映了每日均值的离散度；总精密度则是对批内、批间和日间精密度进行加权统计的结果。其中以批内精密度和总精密度的应用最为广泛，与传统的批内精密度的计算方法（即对同一标本在同一天内同时重复测定多次）相比，前者更符合实验室的实际情况，更有代表性，也更加合理；而总精密度则客观地全面地反映了实验室的总体变异情况。

1.6线性测定

1.6.1方法：精确称取甲基橙配制5个系列浓度的溶液，采用双波长平行检测8次求其均值。计算回归方程、相关系数r及标准估计误差Sy,x，并用±1.96 Sy,x表示样品的95％测量范围。

1.6.2评价指标解释：线性测定也是评价仪器的重要手段之一，因为它是仪器开展定量工作的基础和前提，某些厂家用标准估计误差s来衡量线性，这与实验室通常所采用的相关系数r是一致的，因此在进行线性评估时，我们同时报告r和Sy,x，目的是为了增强用户与厂家之间的可比性。

1.7双波长评价

1.7.1方法：在运用酶标仪检测样品时，由于溶液中的小气泡、杯底的水纹印及划痕、小孔杯之间透明度的差异等等，这些都是仪器测定过程中最常见的干扰因素，而标本中的干扰组份（如溶血、黄道）因洗涤而对测定结果影响则较小，因此我们将文献中的双被长评价方法改为：取同一厂、同一批号酶标板条（每个通道2条共24孔）每孔加入200 ul甲基橙溶液（吸光度调至0.065～0.070 A）先后于8个通道分别采用单波长（490 nm）和双波长（测定波长490 nm、参比波长630／650 nm）进行检测，计算单波长和双波长测定结果的均值、离散度，比较各组之间是否具有统计学差异以考察双波长清除干扰因素的效果。

1.7.2说明：双波长测定过程中，由于标本中干扰组份的存在以及小孔杯本身质量等原因，常常导致测定结果的假性增高，而酶标仪提供的双波长测定功能则可以消除干扰组份或因素对测定结果的影响．对于标本中干扰组份的清除，在选择参比波长时，我们应对于扰组份的光谱进行研究，以正确选择参比波长；而对于小孔杯本身质量问题等干扰因素的消除，只要选择远离测定波长的参比波长即可以了、这对保证测定结果的准确性是非常重要的。

浅谈多功能酶标仪选择的要素

近年来，随着多功能酶标仪在国内各高校实验室逐渐推广开来，多功能酶标仪品牌和型号也逐渐多了起来，乱花渐欲迷人眼。除了三大传统优势品牌PE、MD和TECAN，还出现了众多后来者插足此市场，如收购了芬兰雷勃的Thermo、从发光起家的Berthold、针对药筛领域的BMG以及新兴的BioTek等品牌。各品牌都有各自的一个甚至多个系列产品线，特性各不相同，选购时各种技术参数、技术指标令人眼花缭乱。 本文尝试从用户实际使用的角度，探讨应该如何看待花样繁多的参数特性，希望能帮助大家找到真正合适自己的多功能酶标仪。 一、滤片Vs光栅 多功能酶标仪的分类方法众多，但最简单的莫过于用他们的滤光方式来作分界线。一般来说，可以分为滤光片型和光栅型两大类。当然也有一些型号，例如Synergy4和EnVision等，一台机器里面同时装上了滤光片和光栅。但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测，还是想用光栅的时候用光栅，该用滤片的时候用滤片；还有一些实验非用其中一个不可，另一模块实现不了的。所以这类仪器本质上还只是把滤片和光栅放在了一起，并没有使两者糅合而产生新的技术突破。 总体来说，滤片技术由于发展已久，配合二向色镜（其实也就是另一模式的滤光反光滤镜）等光路系统，可以实现大部分实验的需要。目前常规多功能酶标仪中最高的检测灵敏度就是用滤光片型做出来的，例如TECAN Infinite F500的荧光检测的灵敏度可以达到0.04 fmol/孔（荧光素，384孔/80ul）。 但是滤光片型仪器由于受限于滤片的波长和数量限制，不可能满足日益增加的实验类型的检测需要，而且有时需要对物质的吸收、激发和发射光谱进行研究，所以后来就诞生了光栅型的仪器。 最先推出光栅的是MD公司，其光栅习惯上称为单光栅。由于光纯度的不足，在光栅的后面又加入了一组带阻滤片，再把杂光过滤一遍，达到了5×10-4的杂光率，基本与纯粹的滤光片系统一致。后来TECAN 又发展出了双光栅技术，通过两次光栅滤光，杂光率降到了10-6。后来，Thermo、BioTek和PE的部分新款仪器等都使用了类似双光栅技术。由于激发和发射各用了一组双光栅，此类机器又被称为四光栅型多功能酶标仪。 光栅型酶标仪的推陈出新，使得用户在波长选择上不再受限，而且在杂光率、带宽控制等性能上还超越了滤光片系统。例如，TECAN公司在2008年底推出使用了第三代四光栅系统的M1000酶标仪，杂光率降到了2×10-7的新低，还实现了带宽2.5～20nm连续可调。这些都是目前滤光片型酶标仪所不能或者较难实现的。 二、杂光率&波长准确性 光栅型滤光系统俨然已经成为了目前通用性多功能酶标仪的主流，多家厂家共同努力，已经把光栅技术推到了历史新高。在光栅的众多技术参数之中，最关键的无疑就是光栅的杂光率和波长选择的准确性了。 杂光率指得就是光源通过光栅后，得到的光线中，“不需要”的波长的光占所标称波长的光的比例，表征了滤光的纯度。由于光线干涉、衍射等的复杂性，无论使用滤光片还是光栅，杂光都是不可避免的。各种滤光技术的本质就是要想办法把杂光尽可能地去掉。一般来说，滤光片型的杂光率在10-4～10-5之间，光栅型的可以做到10-6～10-7。由于此类杂光是非特异的，而且会直接进入最后的检测器，所以有多少的杂光就会引入多少的随机误差。在荧光等检测过程中，由于检测器存在放大效应，杂光率的干扰也会被指数级放大。因此，杂光率就是一个滤光系统的首要性能指标。 光栅的另一个重要指标就是波长选择的准确性。因为很多检测是依赖于物质在某个波长的特征图谱。就像

多功能酶标仪技术规格要求

多功能酶标仪技术规格要求 一、采购内容 二、技术要求 1、系统性能 多模式检测模块：可见光/紫外光吸收、荧光强度（顶读&底读）、超高灵敏化学发光、时间分辨荧光和超灵敏Alpha检测。 2、激发光源： 2.1光吸收、荧光强度、TRF模块光源采用高能闪烁氙灯，波长范围230-1000 nm。*2.2 Alpha光源采用680 nm 高能固态激光光源，激光输出功率>200 mw。 *3、检测器：多模式检测模块：同时配置两个PMT：一个红敏PMT和一个独立超高灵敏度PMT。 4、可见/紫外吸收光：双光栅系统可进行光吸收检测，波长范围230-1000 nm，双光栅分光步进（increments）0.5nm。 *5、荧光强度（顶读和底读）：高精度四光栅系统，要求前置cut-off滤光片，波长范围250-850nm；分光步进（increments）0.5nm。 *6、超敏感化学发光：独立于荧光检测之外的单独光路，独立超敏感PMT检测器。 7、时间分辨荧光：激发配置320 nm/340 nm滤光片/二向色镜优化组合，保证激发光强度。发射光路为双光栅，满足包括615nm和665 nm在内的单/多波长检测。*8、超灵敏Alpha检测：优化独立Alpha专用光路，采用高能固态激光+独立超灵敏PMT优化高速组合，以达到最佳的检测效率和灵敏度。要能提供Alpha检测试剂盒及特殊应用的定制化服务。 9、温控模块：保证样品检测温度稳定到室温+3至65摄氏度。

10、具有三种振荡模式：线形、圆形、8字形，可设定震荡速度、振幅及振荡时间。具有仪器外（outside）振荡功能，在程序运行的过程中，微孔板可以伸出仪器外部振荡，便于实现程序运行中观察振荡效果，而不必中止程序。 11、具有板孔扫描功能：可选孔内圆形或方形区域中的多点扫描检测，适用于贴壁细胞或不均匀样本检测，以减少因样品分布不均匀造成的检测偏差。软件可自动优化调节检测器Z轴高度，以保证检测的灵敏度，减少孔间信号串扰。 12、配备专业仪器自动化控制及数据分析处理软件，软件友好，易学易用。具备线性拟合、动力学、剂量效应等多种常用的数据计算及分析功能，结果可以Excel、文本、网页、图片等多种格式输出。 三、技术服务要求 3.1设备安装调试 在用户指定的地点完成安装调试，并配合用户进行测试验收。 3.2 技术培训及服务 3.2.1完成设备现场安装调试和验收后，在用户所在地免费提供专业培训，就 设备的操作使用和保养维护等内容进行重点培训。 *3.2.2 要能提供原厂AlphaScreen/AlphaLISA检测试剂以及时间分辨荧光检 测试剂，并具有专业技术开发实验室及服务能力，并由应用技术工程师提供蛋 白-蛋白等分子间相互作用实验的现场操作培训以及后期新实验开发培训。 3.3质保期 整机保修1年，保修期自验收签字之日起计算。 3.4维修响应时间 接到维修通知后，2小时内作出响应，24小时内到场排除故障。

多功能酶标仪SpectraMaxi3的操作规程

多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程Standard Operation of SpectraMax i3 部门Department 签名/日期Signature/Date 起草人：Prepared by 樊小川，Xiaochuan Fan QC 审核人：Reviewed by 黄思佳，Sijia Huang QC 审核人：Reviewed by 褚夫兰，Fulan Chu QA 批准人：Approved by 张伯彦，Boyan Zhang 质量负责人 1 目的 建立多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作程序，规范SpectraMax i3 多功能酶标仪检测时的操作。 2 适用范围

本规程适用于所有对多功能酶标仪SpectraMax i3的操作 3 术语或定义 多功能酶标仪：指功能较强、精度较高的单体台式酶标仪，可检测吸光度（Abs)、荧光强度(FL)、时间分辨荧光（TRF)、化学发光（Lum)等。 4 责任 4.1 仪器负责人负责多功能酶标仪的日常及定期维护，出现故障时负责联系厂家维修，保 证运行正常。 4.2 实验操作人员需严格按照本规程执行，保证仪器正常使用，每次用完后填写仪器使用 记录，且使用后及时清理台面，保持仪器洁净。 5 EHS要求 N/A 6 程序 6.1 仪器安装 仪器与电脑连接完毕并连接电源以后，按仪器背面的按钮可以直接启动仪器，经过几分钟后的仪器自检后就可以开始用于检测。在连有电源的情况下，保持24小时开机，不要罩防尘罩以保持透气，隔1-2月关机重启一次。 6.2 SoftMax Pro软件操作基本步骤 6.2.1 打开软件 点击“SoftMax Pro 6.3”图标，打开SoftMax Pro 软件，出现"Plate Setup Helper"对话框。若无则点击图标。 6.2.2 连接仪器 点击‘Choose a diffecient instrument’，打开‘Instrument Connection’对话框，在“Availible Instruments”菜单中选择仪器连接线与电脑所接的串口号(COM)。 选择所购买的酶标仪型号SpectraMax i3或添加模块卡盒型号。最后点击“OK”键连接。 6.2.3 仪器检测参数设定 点击图标后出现“Settings”对话框，对话框最上方出现Read Mode（读板模式）和Read Type（读板类型）两个选项，读板模式有ABS(光吸收)、FL(荧光强度)、LUM(化学发光)和TRF(时间分辨荧光)，读板类型有终点检测（Endpoint）、动力学（Kinetic）、单孔扫描（Well Scan）和光谱扫描（Spectrum）四种。使用者根据实验

多功能酶标仪基本操作规程

多功能酶标仪基本操作规程 一、可见与紫外光原始吸光值的直接测定方法 1、首先打开连接酶标仪的电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。 2、再打开电脑开关。（注意，一定要先开仪器，后开电脑，以免仪器连接出现问题。） 3、在电脑主屏幕上选择[Magellan6]。 4、仪器自检后，酶标板托架自动伸出（注意仪器前部不要放置物品，以免档住托架的伸出）。将酶 标板按数字正确的方向（A1位于左上角）放在托架上。 5、点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标，酶标板将自动进入仪器中。（注意：千万不要用手 将酶标板推入仪器，造成仪器损坏）。 6、在屏幕上选Start measurement。点击绿色箭头。 7、在Select a File窗口左上角选Obtain Raw Date 然后点击绿色箭头。 8、在plate 栏中的plate definition 下拉条中，对板的类型进行选择。酶标的吸光度测定，一般情况 下选xxxxx xx Flat Transparent (x孔，平底，透明板)。（注意测定紫外吸收时要使用可以透过紫外光的透明板）如果板要加盖子，就要再选中Plate with cover。 9、在Measurements 栏内双击Absorbance ，出现Absorbance的对话框。 10、在Absorbance的对话框中： ⑴在Wavelength栏中Measurement项输入测定波长值；Reference项,在需要扣除背景波长时选中并 输入背景波长值。一般情况不选. ⑵在Multiple read per well栏中对于吸光值的测定可不选 ⑶在Read 栏中: Number of flashes 项一般选10；Settle time（使平静时间）项对于96或384孔 板一般选0；对于其他孔数的板可考虑输入适当的值；孔数越少的板，Settle time 设置时间要较长,以防止在测定过程中板移动距离大,对液面平稳的影响。 ⑷在Label栏中Name后输入你为此块板自定义的英文名；也可不设置。 11、在Part of plate 栏中，用鼠标左键拉框，选择要测定的样品孔（使待测定的样品孔变为黄色）， （注意：待测孔只可横向或纵向连续选择，不可以被间断）。如果选择错误需要更改，不要做任何删除，只要再直接重新选择即可。点击本栏中的Detail 对所选的样品孔进行确认后，点击OK，（如果选孔有错误，选择Cancel 返回上页再重复以上操作。） 12、点击OK后，箭头变绿，点击绿色箭头，在Measurement 的workspace处输入（日、月、年- 自定义文件名wsp）再点击Start，仪器开始自动测定。 13、测定结束后，点击File 选择print,直接打印测定参数与结果，或在最上方Edit选择Copy to Excel， 然后打开下方出现的Excel表（显示为板式数据）并打印结果。 14、关机，退出当前界面，点击左下角Exit Megellan 回到主屏幕。关电脑，关仪器电源和插板电 源。 二、荧光值的直接测定方法 1、首先打开连接酶标仪的电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。 2、再打开电脑开关。（注意，一定要先开仪器，后开电脑，以免仪器连接出现问题。） 3、在电脑主屏幕上选择[Magellan6]。 4、仪器自检后，酶标板托架自动伸出（注意仪器前部不要放置物品，以免档住托架的伸出）。将酶 标板按数字正确的方向（A1位于左上角）放在托架上。 5、点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标，酶标板将自动进入仪器中。（注意：千万不要用手 将酶标板推入仪器，造成仪器损坏）。 6、在屏幕上选Start measurement。点击绿色箭头。 7、在Select a File窗口左上角选Obtain Raw Date 然后点击绿色箭头。 8、在plate 栏中的plate definition 下拉条中，对板的类型进行选择。荧光酶标的测定，一般情况下 选xxxxx xx Flat black (x孔，平底，黑板。6孔板测定时没有黑板可选,可选择6孔,平底,透明板)。

SPETROstarOmega全波长全自动多功能酶标仪

SPECTROstar Omega 全波长全自动多功能酶标仪 仪器介绍： SPECTROstar Omega 全波长全自动多功能酶标 仪是BMGLABTECH Omage 系列的一员， SPECTROstar Omega 全波长全自动多功能酶标 仪可以使用于固定波长或者连续波长检测，波长范 围220-1000nm,1nm 扫描递进，与单色器相似， 但是速度更快，分光计可以实现紫外/可见光测量 <1秒/孔，无需扫描。分光计的检测速度和操作简 易的软件让用户能更灵活地优化实验参数。 作为Omega 多功能酶标仪系列的一员， 同时带有振荡孵育，试剂进样功能。 SPECTROstar Omega 具备以下特性： SPECTROstar Omega ·即使在全波长扫描时，内置式的智能注射器仍然能够同时进行试剂的配给并启动动力学反应 ·精确的温度控制可达60oC ，多种振荡模式 ·模板管理器能够进行多种数据处理 ·多功能的动力学软件可用于终点法，long-term 和快速动力学检测 ·实时动力学检测 ·兼容384孔板 ·”QuickStart”模式允许用户只需点击3次鼠标键即可进行读数

·Stacker和机械臂兼容 ·可根据需要升级为FLUOstar Omega或POLARstar Omega。 控制和分析软件 BMG LABTECH的多功能酶标仪软件包同时提供实验步骤设计与数据分析功能。并完全符合FDA 21CFR Part 11。 控制软件能让用户自定义设定仪器的参数和实验步骤，功能包括实时数据显示、检测孔的独立标记、优化动力学分析、用户自定义微孔板、精确的多模式自动进样、振荡和读数，以及可以跟其它分析软件兼容的多模式数据输出功能。 数据分析软件MARS能为用户展示数据、单图、光谱和2D/3D的标准曲线图。数据可以通过预设的模板进行处理，也可以对通过改变统计数据来进行处理。 该软件同样能够制作标准曲线，并可根据如下曲线拟合函数计算得到EC50、IC50和r2值： 线性回归拟合 4-参数拟合 点对点拟合 分段回归拟合 三次样条函数拟合 2nd和3nd多项式拟合 MARS软件包对标准曲线进行一步步的推算，所以很容易得到如：S/N，Delta F%和Z’等重要参数。利用标准拟合等式即可快速的进行酶动力学数据分析，让MARS软件更为完善。 只需按一下鼠标，通用型的微孔板测读器软件包就能为用户提供快速、简单的实验结果，实验步骤设计，和用户自定义数据处理。

多功能酶标仪Gen5软件使用方法_SynergyH4_201

Gen5简要操作说明 一：新建方案 双击桌面上Gen5软件图标，出现如下界面，新建实验可以用来编辑新实验或者选择已经编辑好的方案来读板，新建方案可以编辑新的读板方法。 点击新建方案按钮，并选择标准方案（默认设置），弹出如下界面 双击程序（步骤），弹出如下界面，在此我们可以编辑检测（Read）方法 点击检测，进入下面界面 根据自己的实验类型和检测模式，选择对应的选项： 吸收光： 点击终点法后，如下设置 若点击光谱扫描，如下设置： 点击区域扫描，如下设置： 荧光强度 点击终点法，选择滤光片或者光栅，如果滤光片，如下设置： Gain值设定，默认是35，可以收到根据信号调节或者采用自动校正，如下： 或者已知微孔板信号孔分布情况，可以根据信号孔来校正增益值 选择完成后点击OK即可完成设定； 如果选择光栅检测，设置如下： 编辑完成即可： 注：1）Gain值的设定是为了获得合适的检测信号值，并不会改变信号的趋势，可以在预实验中完成，以后的相同实验固定设置来检测 2）光谱扫描，区域扫描设置方法与吸收光设置类似。 编辑完成后点击OK，确认就可以。 发光 终点法，区域扫描选择滤光片，光谱扫描选择光栅 终点法设置如下： 选择终点法时： 完成后点击OK。

温度控制 需要注意的是，温控设定后需要加热一定时间才能达到目的温度，所以可以根据实际情况在打开仪器同时设定预加热。方法如下： 点击第二排最右边按钮（仪器图标，数字显示目前仪器内部的温度），点开后出现以下对话框： 点击预热， 实验完成后，记得关闭预加热。 震荡： 动力学检测： 接着设置检测步骤： 延迟： 方案编辑完成后取名字，保存。 编辑完成后，之间点击绿色三角按钮进行读板。 点击后，将板子放在载板台上，点击ok，即可进行读数，同时读数结束后可以保存在自己的文件夹下面。如不需要原始的实验数据，也可以点击取消不保存。 三：数据导出 读板过程结束，载板台会弹出，软件上出现读板结果，我们只需要点击Excel导出数据图标，就可以把数据导出到Excel表中，进行后续的数据处理。

酶标仪的检测原理

酶标仪的检测原理 光是电磁波，波长100nm～400nm称为紫外光，400nm～780nm之间的光可被人眼观察到，大子780nm称为红外光。人们只所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。 检测单位： 光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。 检测单位用OD值表示，OD是optical delnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度，OD＝1og（1／trans），其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer 法则，OD值与光强度成下述关系： E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度，Ι0 为在检测物之前的光强度，Ι为从被检测物出来的光强度。 OD值由下述公式计算： E＝OD=C×D×E C为检测物的浓度 D为检测物的厚度 E为摩尔因子 在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不准确。因此，在测定检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波长。 但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收，为了消除这种非特异性吸收，我们再选取一个参照波长，以消除这个不准确性。在参照波长下，检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。 Anthos 酶标仪检测值计算 仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量，转换成二进位数字信号，最大为4095。仪器定义没有光源下的透光值为0％，没有检测物的透光值为100％。则实际检测中，检测物的透光值均在0％一100％之间。透光值 的计算如下： T＝（Meas—Min）／（Max—Min） 其中T为透光值，Meas为检测的二进位数值，Min为在0％的情况下检测的二进位数值，Max为在100％的情况下检测的二进位数值，举例如下： MaX=3600 Mn=20 Meas＝30 T=（30-20）/3600-20)＝0．0028 OD＝1og（1/T）=1og（1/0.0028）=2.552 Anthos 酶标仪的中心定位 仪器会自动对酶标孔进行中心定位，中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时，仪器其实要进行35个点的测量，选取最中间的5个点的均值为本孔的OD值。 光源的参照通道 参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。 酶标仪的用途和其它提示 用于ELISA试剂的测定，广泛用于各种实验室，包括临床实验室。

酶标仪原理及结构-科邦实验室

酶标仪的原理及结构 酶标仪即酶联免疫检测仪，是酶联免疫吸附试验的专用仪器。可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计，即用比色法来分析抗原或抗体的含量。 酶标法是什么 酶联免疫吸附试验方法简称酶标法，是标记技术中的一种，是从荧光抗体技术，同位素免疫技术发展而来的一种敏感，特异，快速并且能自动化的现代技术。 酶标法的基本原理是将抗原或抗体与酶用胶联剂结合为酶标抗原或抗体，此酶标抗原或抗体可与固相载体上或组织内相应抗原或抗体发生特异反应，并牢固地结合形成仍保持活性的免疫复合物。当加入相应底物时，底物被酶催化而呈现出相应反应颜色。颜色深浅与相应抗原或抗体含量成正比。 由于此技术是建立在抗原-抗体反应和酶的高效催化作用的基础上，因此，具有高度的灵敏性和特异性，是一种极富生命力的免疫学试验技术。 酶标仪的原理 酶标仪就是应用酶标法原理的仪器，酶标仪类似于一台变相光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。

光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上，光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号，电信号经前置放大，对数放大，模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算，Z后由显示器和打印机显示结果。 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板，从而实现自动进样检测过程。而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测，因此省去了X，Y方向的机械驱动机构和控制电路，从而使仪器更小巧，结构也更简单。 微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板，板上有多排大小均匀一致的小孔，孔内都包埋着相应的抗原或抗体，微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液。其常见规格有40孔板，55孔板，96孔板等多种，不同的仪器选用不同规格的孔板，对其可进行一孔一孔地检测或一排一排地检测。 酶标仪测定是在特定波长下，检测被测物的吸光值。随着检测方式的发展，拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。 酶标仪从原理上可以分为光栅型酶标仪和滤光片型酶标仪。光栅型酶标仪可以截取光源波长范围内的任意波长，而滤光片型酶标仪则根据选配的滤光片，只能截取特定波长进行检测。 酶标仪的结构 酶标仪所用的单色光既可通过相干滤光片来获得，也可用分光光度计相同的单色器来得到。在使用滤光片作滤波装置时与普通比色计一样，滤光片即可放在微孔板的前面，也可放在微孔板的后面，其效果是相同的。光源灯发出的光经聚光镜，光栏后到达反射镜，经反射镜作90°反射后垂直通过比色溶液，然后再经滤光片送到光电管。 酶标仪可分为单通道和多通道2种类型，单通道又有自动和手动2种之分。自动型的仪器有X，Y方向的机械驱动机构，可将微孔板L的小孔一个个依次送入光束下面测试，手动型则靠手工移动微孔板来进行测量。

多功能酶标仪SpectraMax-i3的操作规程

多功能酶标仪SpectraMax-i3的操作规程编号 M-SOP-2-0083 No. 标准操作规程版本号 Standard Operating Procedure 01 Version 多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程 多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程 Standard Operation of SpectraMax i3 部门签名/日期 Department Signature/Date 起草人: XX， Xiaochuan X Prepared by QC 审核人: XX， Sijia XX Reviewed by QC 审核人: XX， Fulan X Reviewed by QA 批准人: XX， Boyan XX Approved by 质量负责人 颁发部门执行日期质量保证部-QA Issued by Effective Date 替换文件复审日期 Version 00 Replaced For Review Date 分发部门 QA，QC Distributed to 1 of 7 编号 M-SOP-2-0083 No. 标准操作规程版本号 Standard Operating Procedure 01 Version 多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程 1 目的 建立多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作程序，规范SpectraMax i3 多功能酶标仪 检测时的操作。 2 适用范围

本规程适用于所有对多功能酶标仪SpectraMax i3的操作 3 术语或定义 多功能酶标仪:指功能较强、精度较高的单体台式酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧 光强度(FL)、时间分辨荧光(TRF)、化学发光(Lum)等。 4 责任 4.1 仪器负责人负责多功能酶标仪的日常及定期维护，出现故障时负责联系厂家维修，保 证运行正常。 4.2 实验操作人员需严格按照本规程执行，保证仪器正常使用，每次用完后填写仪器使用 记录，且使用后及时清理台面，保持仪器洁净。 5 EHS要求 N/A 6 程序 6.1 仪器安装 仪器与电脑连接完毕并连接电源以后，按仪器背面的按钮可以直接启动仪器，经过几分钟后的仪器自检后就可以开始用于检测。在连有电源的情况下，保持24小时开机，不要罩防尘罩以保持透气，隔1-2月关机重启一次。 6.2 SoftMax Pro软件操作基本步骤 6.2.1 打开软件 点击“SoftMax Pro 6.3”图标，打开SoftMax Pro 软件，出现 "Plate Setup Helper"对话框。若无则点击图标。

酶标仪使用说明

酶标仪基本知识及其检测原理 酶标仪基本知识及其检测原理，文章简要介绍了酶标仪的原理和及应用。 光是电磁波，波长100nm-400nm称为紫外光，400nm-780nm 之间的光可被人眼观察到，大子780nm称为红外光。人们只所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。 检测单位： 光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。 检测单位用OD值表示，OD是opticaldelnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度，OD=10g（1/trans），其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则，O D值与光强度成下述关系： E=OD=logⅠ0/Ⅰ其中E表被吸收的光密度，Ⅰ0为在检测物之前的光强度，Ⅰ为从被检测物出来的光强度。 OD值由下述公式计算： E=OD=C×D×E 其中：C为检测物的浓度；D为检测物的厚度；E为摩尔子。

在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不准确。因此，在测定检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波长。 但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收，为了消除这种非特异性吸收，我们再选取一个参照波长，以消除这个不准确性。在参照波长下，检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。 酶标仪检测值计算 仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量，转换成二进位数字信号，最大为4095.仪器定义没有光源下的透光值为0%，没有检测物的透光值为100%。则实际检测中，检测物的透光值均在0%-100%之间。 透光值的计算如下： T=（Meas-Min）/（Max-Min） 其中T为透光值，Meas为检测的二进位数值，Min为在0%的情况下检测的二进位数值，Max为在100%的情况下检测的二进位数值，举例如下： 酶标仪的中心定位 仪器会自动对酶标孔进行中心定位，中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标

LUMIstar Omega 化学发光多功能酶标仪

仪器介绍： BMG LATECH 公司为您专门开发出一款LUMIstar Omega 化学发光多功能酶标仪，为快速发光和持续发光提供了高灵敏度的分析检测平台。在需要时可以升级到FLUOstar Omega 或者POLARstar Omega。LUMIstar Omega化学发光多功能酶标仪应用： ·荧光素酶报告基因分析, 启动子分析。 ·化学发光免疫分析 ·细胞基础分析(如：细胞毒性、凋亡和增殖） ·胞内水母发光蛋白Ca2+分析 ·ATP分析 ·GUS分析(?-葡萄糖醛酸酶) ·ROS (reactive oxygen species) ·BRET检测监控分子间的相互作用 控制和分析软件 BMG LABTECH的多功能酶标仪软件包同时提供实验步骤设计与数据分析功能。并完全符合FDA 21CFR Part 11。 控制软件能让用户自定义设定仪器的参数和实验步骤，功能包括实时数据显示、检测孔的独立标记、优化动力学分析、用户自定义微孔板、精确的多模式自动进样、振荡和读数，以及可以跟其它分析软件兼容的多模式数据输出功能。 数据分析软件MARS能为用户展示数据、单图、光谱和2D/3D的标准曲线图。数据可以通过预设的模板进行处理，也可以对通过改变统计数据来进行处理。

该软件同样能够制作标准曲线，并可根据如下曲线拟合函数计算得到EC50、IC50和r2值： 线性回归拟合 4-参数拟合 点对点拟合 分段回归拟合 三次样条函数拟合 2nd和3nd多项式拟合 MARS软件包对标准曲线进行一步步的推算，所以很容易得到如：S/N，Delta F%和Z’等重要参数。利用标准拟合等式即可快速的进行酶动力学数据分析，让MARS软件更为完善。 只需按一下鼠标，通用型的微孔板测读器软件包就能为用户提供快速、简单的实验结果，实验步骤设计，和用户自定义数据处理。 LUMIstar Omega化学发光多功能酶标仪指标参数：

多功能酶标仪常见配置及全参数

Infinite M200 PRO 1．一般参数： 支持的检测模式：光吸收、荧光顶部底部、时间分辨荧光（TRF）、连续发光、瞬时发光、双色发光、BRET、光吸收和荧光波长扫描 1.1 光源：UV高能闪烁氙灯，10^8次闪烁寿命，自带光强监测、校准，免维护无需预热 1.2 光栅杂光率：＜10^-6 1.3 支持板型：6-384孔板，预设常用品牌型号；自动扫描并定义特殊规格板型，NanoQuant微量检测板，4位卧式比色杯，立式比色杯（选配） 1.4 孔内多点读数（光吸收/荧光顶底）：6-384孔板，最多15×15个点（依板型模式可有不同），覆盖全孔，7种点布局 1.5 温度控制：环境温度+5℃至42℃（选配） 1.6 振荡：线性或圆形可选；振幅1-6mm，0.5mm步进；1-1000秒可调 1.7 多标记多模式检测：单个实验中可进行无限制的多波长、多模式检测（光吸收、荧光、发光、波长扫描） 1.8 最快读板速度：96孔板：20秒；384孔板：30秒 1.9 波长扫描速度（FI EX/EM）：150秒；450-550nm，5nm步进，96孔板 1.10 认证：DLReady，Transcreener Red FI 2.光吸收模块 2.1 波长范围：230-1000nm，1nm连续可调 2.2 波长选择：双光栅 2.3 带宽：＜5nm（λ≦315nm），＜9nm（λ＞315nm） 2.4 波长准确性：＜±0.3nm（λ≦315nm），＜±0.5nm（λ＞315nm） 2.5 波长重复性：＜±0.3nm（λ≦315nm），＜±0.5nm（λ＞315nm） 2.6 检测器：紫外硅光电二级管 2.7 检测范围：0-4 OD 2.8 检测分辨率：0.0001 OD 2.9 检测准确性：＜0.5% @260nm 2.10 检测精确性：＜0.2% @260nm 2.11 260/280nm精度：±0.07

酶标仪工作原理及使用方法

酶标仪简介： 酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。 酶标仪原理： 酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上，光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大，对数放大，模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算，最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板，从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测，因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路，从而使仪器更小巧，结构也更简单. 微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板，板上有多排大小均匀一致的小孔，孔内都包埋着相应的抗原或抗体，微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液. 光是电磁波，波长100nm~400nm称为紫外光，400nm~780nm之间的光可被人眼观察到，大于780nm称为红外光。人们之所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光，但对绿色不吸收，反射出来，所以植物呈现为绿色。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。 随着检测方式的发展，拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。 酶标仪从原理上可以分为光栅型酶标仪和滤光片型酶标仪。光栅型酶标仪可以截取光源波长范围内的任意波长，而滤光片型酶标仪则根据选配的滤光片，只能截取特定波长进行检测。 检测单位 光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。

多功能酶标仪参数

A：四功能多功能酶标仪 实现功能：光吸收、荧光顶底读、发光、时间分辨荧光功能。 1. 一般光学参数 1.1 光源：UV 高能闪烁氙灯 1.2 波长选择 1.2.1 带宽Ex:≤20nm Em: ≤20nm #1.2.2 光栅系统或滤光片 1.3 光吸收 *1.3.1 波长准确性±2.0nm 1.3.2 波长精确度<±0.3nm for λ≤315nm <±0.5nm forλ>315nm 或±1 nm （0-2 OD/ABS） 1.4 波长范围 1.4.1 荧光强度：Ex 250-850nm, Em 280-850nm 1.4.2 光吸收 230-999nm 1.5 检测器 1.5.1 光吸收：光电二极管 1.5.2 荧光：光电倍增管（PMT） 1.5.3 发光低暗电流单光子计数光电倍增管 1.6 检测范围 0-4 OD 1.7 板型： 6-384孔板或微量检测板(可检测低至2微升的核酸样本) 1.8 温度控制：室温+5℃ 至42℃ 1.9 振板方式：多种振荡模式，速度和振幅可调 2. 荧光参数 2.1 荧光强度模块顶读、底读模式，包括时间分辨荧光检测功能（TRF）2.2 荧光背景校正功能 2.3 荧光灵敏度 #2.3.1 荧光顶部阅读≤1fmol/孔（384孔板） *2.3.2 荧光底部阅读≤5fmol/孔（384孔板） *2.3.3 测量范围≥5个数量级 #2.4 具有自动增益功能 3. 时间分辨荧光 3.1 灵敏度：≤120amol/孔 (0.9pM; 384孔板) 3.2 测量范围≥6个数量级 4. 发光参数

4.1 化学发光检测模块具有双色化学发光检测能力；配备单光子计数光电倍增管4.2 发光灵敏度 #4.2.1 瞬时发光：<25amolATP/孔 (218 fM; 384孔板) 4.2.2 测量范围≥6个数量级 4.3 具有自动增益功能 5. 加样器 *5.1 可同时添加两支或以上微量注射泵，1μl 步进 5.2 可用于快速触发的动力学荧光、化学发光和光吸收 #5.3 吸收检测加样泵速度：100-300μl/秒；加样体积：最大300μl 5.4 自动完成加样器清洗和维护工作 5.5 具有自适应功能，防止过量加液的溢出 6. 标准配置 6.1 具有光吸收、荧光等功能的酶标仪主机（可正常开机，实现基本业务需求）1台 6.2 时间分辨荧光模块 1个 6.3 化学发光模块 1个 6.4 必备操作软件 1套 6.5 专用计算机 1台 6.6 打印机 1台 6.7 稳压电源 1个 B：六功能多功能酶标仪 实现功能：光吸收、荧光顶底读、发光、时间分辨荧光功能、ALPHASCREEN功能、气体控制模块功能 1. 一般光学参数 1.1 光源：UV 高能闪烁氙灯或LED光源或激光光源 1.2 波长选择 1.2.1 带宽Ex:≤20nm Em: ≤20nm #1.2.2 光栅系统或滤光片 1.3 光吸收 *1.3.1 波长准确性±2.0nm 1.3.2 波长精确度<±0.3nm for λ≤315nm <±0.5nm forλ>315nm 或±1 nm （0-2 OD/ABS）

多功能酶标仪SpectraMax-i3的操作规程

Standard Operating Procedure版本号 Version 01 多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程 多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程Standard Operation of SpectraMax i3 部门Department 签名/日期Signature/Date 起草人：Prepared by 樊小川，Xiaochuan Fan QC 审核人：Reviewed by 黄思佳，Sijia Huang QC 审核人：Reviewed by 褚夫兰，Fulan Chu QA 批准人：Approved by 张伯彦，Boyan Zhang 质量负责人 颁发部门Issued by 质量保证部-QA 执行日期 Effective Date 替换文件Replaced For Version 00 复审日期 Review Date 分发部门 Distributed to QA，QC

Standard Operating Procedure版本号 01 Version 多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程 1 目的 建立多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作程序，规范SpectraMax i3 多功能酶标仪检测时的操作。 2 适用范围 本规程适用于所有对多功能酶标仪SpectraMax i3的操作 3 术语或定义 多功能酶标仪：指功能较强、精度较高的单体台式酶标仪，可检测吸光度（Abs)、荧光强度(FL)、时间分辨荧光（TRF)、化学发光（Lum)等。 4 责任 4.1 仪器负责人负责多功能酶标仪的日常及定期维护，出现故障时负责联系厂家维修，保 证运行正常。 4.2 实验操作人员需严格按照本规程执行，保证仪器正常使用，每次用完后填写仪器使用 记录，且使用后及时清理台面，保持仪器洁净。 5 EHS要求 N/A 6 程序 6.1 仪器安装 仪器与电脑连接完毕并连接电源以后，按仪器背面的按钮可以直接启动仪器，经过几分钟后的仪器自检后就可以开始用于检测。在连有电源的情况下，保持24小时开机，不要罩防尘罩以保持透气，隔1-2月关机重启一次。 6.2 SoftMax Pro软件操作基本步骤 6.2.1 打开软件 点击“SoftMax Pro 6.3”图标，打开SoftMax Pro 软件，出现"Plate Setup Helper"对话框。若无则点击图标。 6.2.2 连接仪器

酶标仪的分类方式

酶标仪的分类方式 酶标仪是实验室常用的一种仪器，酶标仪的分类方式一般可以按照滤光 方式的不同和功能的不同进行划分。一。酶标仪基于滤光方式的不同可分为滤光片式的酶标仪和光栅式酶标仪。滤光片式酶标仪采用滤光片来进行波长的选择，酶标仪内置滤光片轮，可选择试验所需的不同波长的滤光片来进行分光，光源发出的全波谱光经过滤光片后，大部分被过滤，只剩下滤光片本身允许的波长通过，这样就可就通过滤光片来获得特定的波长。滤光片轮一般包含4-6 块滤光片，通过选择不同的滤光片可获得不同的波长，但是获得的波长都是固定的，受到一定的限制，不能获得任意所需的波长，而且更换滤光片价格比较昂贵。一般波长固定的滤光片有405，450，490，630NM。光栅式酶标仪是美国分子仪器公司最先发明使用的（Versamax），虽然才出现短短十年，但是发展非常迅猛，现在已经是主流的酶标仪。它采用光栅进行分光，光源发出的全波谱光线经过光栅后，通过光栅上面分布的一系列狭缝的分光，就可以获得任意波长的光，波长连续可调，一般递增量为1nm.光栅式酶标仪使用方便灵活，可以通过软件选择任意波长的光，而且可以进行全波长的扫描，通过全波长扫描可以获得未知样品的吸收峰，从而可以达到检测未知样品的目的，在实验室中很受欢迎，可以进行更多实验的检测。因此目前在国内的普及程度很高。 二。按照功能的划分，酶标仪可以分为光吸收酶标仪，荧光酶标仪，化学发光酶标仪和多功能的酶标仪。光吸收酶标仪是用来进行可见光与紫外光吸光度的检测。特定波长的光通过微孔板中的样品后，光能量被吸收，而被吸收的光能量与样品的浓度呈一定的比例关系，由此可以用来定性和定量的检测。光吸收的检测技术成熟，成本低，操作简单，但是动态范围窄，灵敏度比较低，

FLUOstar OPTIMA 多功能酶标仪

无论是对灵敏度、灵活性或宽动力学范围等方面的需求，来自德国BMG LABTECH公司的FLUOstar OPTIMA都是科研和制药研究的最佳选择。 ·内置式的智能注射器能够进行试剂的配给并启动动力学反应 ·多功能的动力学软件可用于终点法，long-term和快速动力学检测 ·实时动力学检测 ·8位滤光片轮，激发光和发射光各8个滤光片位置 ·快速滤光片转换适应比率检测的应用 ·自动光学元件转换性能适应顶读和底读的转换 ·”QuickStart”模式允许用户只需点击3次鼠标键即可进行读数 ·孔扫描功能让细胞学检测更加简易 ·专有的发光检测系统 ·精确的温度控制可达60oC ·Stacker和机械臂兼容 检测模式： FLUOstar OPTIMA是一款整合了共振能量转移检测(FRET, BRET)功 能、由四个独立检测模块组成的多功能酶标仪： · 荧光强度，包括FRET和就、多种应用 FLUOStar OPTIMA · 时间分辨荧光，包括DELFIA@

· 发光（快速发光和持续发光，DLReady@） · 吸收光（UV/Vis，光程校正） FLUOstar OPTIMA在所有检测模式中都可以检测384-孔微孔板。 标配用于动力学曲线检测的自动进样器。由于每个检测孔的进样体积都是独立可调的，因此可以在整个酶标板范围内产生不同的稀释梯度和浓度区域。顶部和底部检测模式、最高45°C （60°C可选）的精确控温功能、孔扫描、多振荡模式和气体控制功能增强了FLUOstar OPTIMA的应用灵活性。 ..多种规格酶标板 优化的动力学反应检测功能 动力学分析，如Ca2+ 荧光和瞬时荧光素酶化学发光，都可以很容易的进行高精确度和高重复性的检测。两个高精度的进样器进样端都直接位于微孔板的读数位置，使得进样与读数可同时进行，确保不丢失任何实验数据。 控制软件允许用户控制进样器的进样时间、泵的参数如进样速度、进样体积和每孔的进样次数。动力学曲线数据可以在最快每秒钟50个读数到最慢每2?小时读取一个数据。而且可以在同一个测定中进行不同速率读数，方便用户监控所研究的不同时间和不同位置的信号。