酶稳定剂

于老师：

由于我对现在您手头上的酶的具体情况不是很熟悉，也不熟悉这些酶，不能提出一些具体的有针对性的建议，但我根据我工作中积累的一些经验，提供如下的信息，希望对您选择合适的蛋白稳定剂有帮助：

1、如果活性蛋白（酶）需要在高于室温下使用的话，可以加入一些起热稳定和热激活作用的海藻糖

2 、蛋白在使用时候存在冻融情况下：可以选甘露醇、右旋糖酐40、蔗糖，另外40%-50%的甘油一般为必选项。

3、对PH变化敏感的活性蛋白：可以选用一定浓度的两性氨基酸（比如说甘氨酸）作为一个缓冲系统。

4、容易被氧化的蛋白：可以试一下DTT和维生素C的使用。

5、为防止长菌（防腐）：可以使用一定浓度的庆大霉素，或者是叠氮钠、硫柳汞。

6、如果蛋白储存一定时间容易降解，可以适当加一些蛋白酶抑制剂（种类很多）和一定浓度的EDTA，但EDTA会使对金属离子依赖的酶丧失酶活，不知道蛋白酶抑制剂和EDTA 会不会抑制我们自己的酶活。

7、在蛋白浓度比较低但情况下，BSA的使用会对蛋白活性起一定但保护作用。

总之我们使用稳定剂的原则是：不管我们怎么选择蛋白酶稳定剂，都不能让让稳定剂的成分影响后面的使用效果，更不能损失了蛋白活性，不同蛋白使用的稳定剂不一定都是一样的。如果蛋白在液态情况下，实在不稳定，建议使用蛋白冻干保护剂（羟丙基-beta-环糊精，终浓度20-100mg/ml）和防腐剂将样品冻干后4度或-20度保存。

蛋白稳定剂应用举例：

T4 DNA Ligase 储存缓冲液

Tris-HCl (pH 7.5) 10 mM，KCl 50mM，DTT 1mM，EDTA 0.1mM，Glycerol 50%

抗体稳定剂常用配方：

1、 3%蔗糖 + 50%甘油 + 1.3%NaCl+1%BSA+0.02%DDN

2、 0.1%明胶 + 50%甘油 + 1.3%NaCl+1%BSA+0.02%DDN

3、 0.1EDTA + 50% 甘油 + 1.3%NaCl+1%BSA+0.02%DDN

4、 3%蔗糖 + 50%甘油 + 0.1EDTA + 1.3%NaCl +1%BSA+0.02%DDN

5、 0.1%明胶 + 50%甘油 + 0.1EDTA + 1.3%NaCl+1%BSA+0.02%DDN

祝顺利！

张勇