基因工程试卷及答案

一、名词解释

1、基因治疗：是将目的基因放进特定载体中导入靶细胞或组织，通过替换或补偿引起疾病的基因，或者关闭或抑

制异常表达的基因来克服疾病的治疗方法。

2、反义核酸：是指能与特定mRNA精确互补、特异阻断其翻译的RNA或DNA分子。

3、反义DNA：也称反义寡核苷酸或反义脱氧寡核苷酸，是一种人工合成的、能与mRNA互补的、用于抑制翻译的短

小反义核酸分子。

4、同尾酶：指切割DNA可产生相同的黏性末端的限制酶

5、转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得

细胞DNA的过程。

6、ａ-互补：指半乳糖苷酶的两个无活性片段组合而成为功能完整的酶的过程。

7、转化：指将质粒或其他外源DNA导入处于感受态的宿主细胞，并使其获得新的表型的过程。

8、基因克隆：通过体外重组技术，将一段目的DNA经切割、连接插入适当载体，并导入受体细胞，扩增形成大量

子代分子的过程。

9、核酶：是一类具有催化活性的RNA分子，具有核苷酸水解活性，可特异性剪切RNA分子，相当于RNA酶。

10、位点偏爱：某些限制酶对同一底物中的有些位点表现出偏爱性切割，即对不同位置的同一识别序列表现出不同的切割效率，这种现象称作为位点偏爱。

二、选择

1.在( B )诱导下，目的蛋白与lacZ就会以融合蛋白的形式表达出来。

A. dNTP C. DMSO

2.（ A ）可使表达蛋白避免被细胞内蛋白降解，或使表达的蛋白正确折叠，从而达到维护目的蛋白的目的。

A.分泌表达载体融合表达载体C.组氨酸标签表达载体D.内含肽表达载体

的琼脂糖凝胶电泳方向为（ B ）

A.正极向负极

B.负极向正极C浓度高向浓度低. D.浓度低向浓度高

4.影响脉冲场凝胶电泳电泳分辨率的最关键因素是（D ）

A.电场强度

B.缓冲液浓度

C.温度

D.脉冲时间

5.控制潜在RNA酶活性最重要的是（C）

A.使用R N A酶抑制剂

B.实验用具

C.细致谨慎的操作

D.温度控制

6.酵母基因表达系统的宿主不具有以下哪一条件(B )

A.安全无毒

B.载体D N A转化频率低

C.发酵周期短

D.蛋白质分泌能力好

7. 酿酒酵母的附加体形表达载体有（D）的缺点

A.蛋白分泌能力差

B.无终止子

C.不能独立复制

D.无选择压力时不稳定

8.（C）不能用大肠杆菌表达系统来生产。

A.胰岛素

B. 干扰素 D.赛若金

9.中国学者从人脐血白细胞中获得的（B）基因已用于我国第一个基因工程干扰素的生产。

A.胰岛素

B. 干扰素ａ-1b

10.下列哪项不属于反义核酸药物(D )

A.反义DNA

B. 核酶

C.肽核酸

答案：BABDC BDCBD

型限制与修饰系统的酶分子是（B）

A.内切酶与甲基化酶分子在一起

B.三亚基双功能酶

C .二亚基双功能酶 D.四亚基双功能酶

12.限制性内切酶的命名遵循的一定原则（D）

A．种名 B. 菌株号 C . 属名 D.种名，菌株号或生物型

13.大肠杆菌DNA聚合酶I 型5’→3’外切核酸酶活性的反应底物是（C）

A.单链DNA及引物’突出的双链DNA

C.双链DNA或DNA:RNA杂交体

D.带3’—OH的双链DNA或单链DNA

14．提高酶连接效率的方法（C）

A.加大酶量20倍

B.降低温度

C.加大平头末端的底物浓度

D.降低平头末端的底物浓度

15.碱性磷酸酶CIAP指（D）

A.细菌和虾的细菌碱性磷酸酶

B.虾碱性磷酸酶

C.细菌碱性磷酸酶

D.牛小肠碱性磷酸酶

16.为了突出3’末端可采用的方法（A）

A．T4—DNAPOL切平，然后平头连接补平，然后平头连接

C．S1核酸酶切平，然后平头连接补平，或S1核酸酶切平

17.能使X—gal变蓝的条件是（C）

A.有α—片段

B. α—受体片段

C.同时具有α—片段和α—受体片段

D.同时具有β—片段和β受体片段

18.当基因组DNA长度为野生型入噬菌体基因组多少时，不会明显影响存活能力（C）

％~90％％~78％％~105％％以上

19质粒PSC101带有何种抗性基因（B）

A.卡那霉素抗性基因

B.四环素抗性基因

C.青霉素抗性基因

D.链霉素抗性基因

20.宿主为rec+，可在噬菌体溶源性细菌中鉴别重组合非重组入噬菌体的条件为（C）

game 基因存在 game 基因缺失，无chi位点

game 基因缺失或替换，且有chi位点 game基因存在且无chi位点

三、判断

1.酶切反应的反应温度大多数为37℃对

连接酶只连接双链DNA分子，不需要ATP。错

3.同一质粒尽管分子量不同，不同的构型电泳迁移率不同，其中ocDNA最快，scDNA最慢。错

4．酵母DNA的原生质体转化法操作简便，容易掌握，但转化率不稳定，成本较高。错

5.同尾酶的黏性末端互相结合后形成的新位点，一般不能再被原来的酶识别。对

6.在蓝白斑筛选中，只有同时存在α—片段和α—受体片段才能使X—gal变蓝。对

7.基因组大小分左臂，中段，右臂三部分。对

基因的表达抑制λ噬菌体进入溶源状态。错

位点是一段与重组事件相关联的10bpDNA序列，它激活以rec为媒介的交换反应。错的琼脂糖凝胶电泳实验中，RNA 分析是在变性的条件下进行的，常用的变性剂为乙醛。错

四、简答

一简述载体应具备的特征P39

1在宿主细胞内必须能够自主复制（具备复制原点）；

2必须具备合适的酶切位点，供外源DNA片段插入，同时不影响其复制；

3有一定的选择标记，用于筛选；

4最好有较高的拷贝数，便于载体的制备。

二简述构建质粒载体的基本策略和构建过程P43

（一）基本策略

1能在受体细胞内有效的复制；

2必须含有允许外源DNA片段克隆的位点，切尽可能的多；

3含有供选择克隆子的标记基因；

4载体DNA分子尽可能小。

（二）构建过程

1选择合适的出发质粒（亲本质粒）；

2正确获得构建质粒克隆载体的元件；

3选择合适的选择标记基因；

4在能达到预期目的的前提下，过程力求简单。

三大肠杆菌表达载体的表达形式和优缺点P87

1包涵体蛋白，没有生物学活性、易于分离纯化、不会被细胞内蛋白的降解作用、不会伤害宿主细胞；

2融合蛋白，稳定性大大增加、较高效率、易于分离纯化、一般受体蛋白位于N端外源蛋白位于表面；

3分泌型外源蛋白，更易于分离纯化、需在N端加入信号肽序列、减少外源蛋白在细胞内被蛋白酶降解的概率。

四简述能够发展成基因表达系统的宿主应具备的条件P279

1安全无毒，不致病；

2遗传背景清楚，容易进行遗传操作；

3构建的载体DNA容易进入，转化频率较高；

4发酵周期短，培养条件简单，容易进行高密度发酵；

5蛋白质分泌能力良好；

6有类似高等真核生物的蛋白质翻译后的修饰功能。

五酵母基因工程的优点（至少5点）P275

1酵母是真核生物，大多具有较高的安全性，如酿酒酵母可作为单细胞蛋白直接添加于饲料中;

2酵母繁殖速度快，能够向细菌一样在廉价的培养基上高密度培养，因此能大规模生产，具有降低基因工程产品成本的潜力；

3将原核生物中已知的分子和基因操作技术与真核生物中复杂的转译后修饰能力相结合，能方便的用于外源基因的操作；

4作为真核生物，提供了翻译后加工和分泌的环境，使得产物与天然蛋白一样或类似；

5不会形成不溶性的重组蛋白包涵体易于进行分离提纯。

五、论述

裂解提取法大肠杆菌质粒DNA的过程和几种纯化质粒的方法 P101

过程：

1用溶液Ⅰ将细胞悬浮50mmol/L的葡萄糖具有维持渗透压的作用，悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管底；

2加入2倍于溶液Ⅰ体积的溶液Ⅱ，该溶液含有NaOH /SDS，能够使细胞迅速破裂溶解，使悬浮液变成完全完全澄清的液体。到染色体DNA和蛋白质变性，溶液中形成的大型复合物被SDS包被；

3加入倍于溶液Ⅰ体积的溶液Ⅲ，溶液含有醋酸钾缓冲液，中和NaOH，防止长时间碱性条件会打断DNA，使复合物PDS从溶液中沉淀下来。

4取上清液离心制取粗产品(质粒DNA),再用2倍体积的乙醇沉淀，获得质粒DNA样品（可用RNase A去除RNA，用苯酚/氯仿抽离蛋白）。

方法：

1、PEG纯化质粒

2、氯化铯----溴化乙锭梯度平衡

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基因工程 一名词解释 DNA，1、限制与修饰系统：限制酶的生物学功能一般被认为是用来保护宿主细胞不受外源DNA的感染，可讲解外 来 从而阻止其复制和整合到细胞中。一般来说，与限制酶相伴而生的修饰酶是甲基转移酶，或者说是甲基化酶，能保护 自身的 DNA不被讲解。限制酶和甲基转移酶组成限制与修饰系统。 2、各种限制与修饰系统的比较 Ⅱ型Ⅰ型Ⅲ型 识别位点4~6bp，大多为回文序列二分非对称5~7bp 非对称 切割位点在识别位点中或靠近识别位点无特异性，至少在识别位点外100bp 识别位点下游 24~26bp 简答 1. 何谓 Star activity？简述Star activity的影响因素及克服方法？ 答：在极端非标准条件下，限制酶能切割与识别序列相似的序列，这个改变的特征称为星星活性。 pH 引起星星活性的的因素：①高甘油浓度（>5%）；②酶过量（ >100U/μl ）；③低离子强度（ <25mmol/L）；④高(> ；⑤有机溶剂如DMSO （二甲基亚砜）、乙醇、乙二醇、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺等；⑥用其它二价阳离子 星星活性的抑制措施：①减少酶的用量，避免过量酶切，减少甘油浓度；②保证反应体系中无有机溶剂或乙醇；③提高离子强度到100 ～ 150mM（在不抑制酶活性的前提下）；④降低反应pH至；⑤使用Mg2+作为二价阳离子。 2. 试回答影响限制性内切核酸酶切割效率的因素？（影响酶活性的因素？） 答：外因：反应条件、底物纯度（是否有杂质、是否有盐离子和苯酚的污染）、何时加酶、操作是否恰当，反应体系的选择、反应时间的长短 内因：星星活性、底物甲基化、底物的构象 3、 DNA末端长度对酶切割的影响 答：限制酶切割 DNA 时，对识别序列两端的非识别序列有长度要求，也就是说在识别序列两端必须要有一定数量的 核苷酸，否则限制酶将难以发挥切割活性。在设计PCR引物时，如果要在末端引入一个酶切位点，为保证能够顺利切 割扩增的 PCR产物，应在设计的引物末端加上能够满足要求的碱基数目。一般需加 3 ～4 个碱基对。 4、何为载体？一个理想的载体应具备那些特点？ 答：将外源 DNA 或目的基因携带入宿主细胞的工具称为载体。载体应具备：①在宿主细胞内必须能够自主复制（具 备复制原点）；②必须具备合适的酶切位点，供外源DNA 片段插入，同时不影响其复制；③有一定的选择标记，用于 筛选；④其它：有一定的拷贝数，便于制备。 5 抗性基因（ Resistant gene）是目前使用的最广泛的选择标记，常用的抗生素抗性有哪几种？并举两例说明其原理？ 答：氨苄青霉素抗性基因（ ampr）、四环素抗性基因（tetr ）、氯霉素抗性基因（ Cmr）、卡那霉素和新霉素抗性基因（ kanr , neor ）以及琥珀突变抑制基因supF 。 ⑴青霉素抑制细胞壁肽聚糖的合成，与有关的酶结合，抑制转肽反应并抑制其活性。氨苄青霉素抗性Ampr 编码一个酶，可分泌进入细胞的周质区，并催化β - 内酰胺环水解，从而解除氨苄青霉素的毒性。 ⑵四环素与核糖体 30S 亚基的一种蛋白质结合，从而抑制核糖体的转位。 Tetr 编码一个由 399 个氨基酸组成的膜 结合蛋白，可阻止四环素进入细胞。 6. 何为α - 互补？如何利用α - 互补来筛选插入了外源DNA 的重组质粒？ 答：α - 互补指 lacZ 基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β - 半乳糖苷酶阴性的突变体之间实现互补。α - 互补是基于在两个不同的缺陷β－半乳糖苷酶之间可实现功能互补而建立的。实现α- 互补主要有两部分组成：LacZ △ M15 ，放在 F 质粒或染色体上，随宿主传代；LacZ' ，放在载体上，作为筛选标记，当在 LacZ' 中插入一个片断后，将不可避免地导致产生无α- 互补能力的β－半乳糖苷酶片断。在诱导物IPTG 和底物 X-gal （同时可作为生色剂）的作用下，含重组质粒的菌落不能产生有活性的β－半乳糖苷酶，不能分解 X-gal ，呈现白色，而含非重组质粒的菌落则呈现兰色。以此达到筛选的目的。 7、试简述λ噬菌体的裂解生长状态Lytic growth 和溶原状态 Lysogenic state 两种循环的分化及其调节过程？ 答：裂解生长状态是λ噬菌体在宿主中大量复制并组装成子代λ噬菌体颗粒，导致宿主细胞裂 解。溶原状态为λ噬菌体基因组 DNA 通过位点专一性重组整合到宿主染色体DNA 中随宿主的繁殖传到子代细胞。调节过程：由感染复数

基因工程选择题试题库,很全

2. 第一个作为重组DNA载体的质粒是() (a) pBR322 (b)ColEI (c)pSCI01 (d)pUCI8 3. 关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有()不太恰当 (a) 由作用于同一DNA序列的两种酶构成 (b) 这一系统中的核酸酶都是U类限制性内切核酸酶 (c) 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰 (d) 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统 4. H型限制性内切核酸酶：() (a) 有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列 (b) 仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供 (c) 限制性识别非甲基化的核苷酸序列(d)有外切核酸酶和甲基化酶活性(e) 仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供 5?下面有关限制酶的叙述哪些是正确的?() (a) 限制酶是外切酶而不是内切酶 (b) 限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割 (c) 同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的 (d) 一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA，产生黏末端 (e) 一些限制酶在识别位点内相同的位臵切割双链DNA，产生平末端

6 .第一个被分离的U类酶是：() (a) EcoK (b)Hind 川(c)Hind U(d)EcoB 7?在下列进行DNA部分酶切的条件中，控制那一项最好?() (a) 反应时间(b)酶量(c)反应体积(d)酶反应的温度 8. 在下列试剂中，那一种可以螯合Ca2+离子?() (a) EDTA (b)柠檬酸钠(c)SDS (d)EGTA 9. 在下列工具酶中，那一种可以被EGTA抑制活性?() (a) S1单链核酸酶(b)末端转移酶(c)碱性磷酸酶(d)Bal 31核酸酶 10 .限制性内切核酸酶可以特异性地识别：() (a)双链DNA的特定碱基对(b)双链DNA的特定碱基序列 (c)特定的三联密码(d)以上都正确 11.下列关于限制性内切核酸酶的表示方法中，正确一项的是()。 (a) Sau3A I (b)E . coRI (c)hind III (d)Sau 3A1 12 .限制性内切核酸酶的星号活性是指：() (a)在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性。(b)活性大大提高 (c)切割速度大大加快(d)识别序列与原来的完全不同 13 .下面哪一种不是产生星号活性的主要原因?() (a)甘油含量过高(b)反应体系中含有有机溶剂 (c)含有非Mg2+的二价阳离子(d)酶切反应时酶浓度过低 14. 关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有()不太恰当

基因工程练习题

1．cDNA克隆与基因组克隆有何不同? 2．怎样将一个平末端DNA片段插入到EcoRI限制位点中去? 3．在Cohen构建有生物功能重组体的第一步实验中，用EcoRI切割了R6-5质粒，然后转化E．coli C600，在卡那霉素抗性子板上筛选到了pSCl01，它是由R6-5的三个EcoRI片段组成，请推测这个质粒具有什么遗传特性? 4．某学生在用EcoRI切割外源DNA片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因? 5．在序列5’—CGAACATATGGAGT-3’中含有一个6bp的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么? 6．用连接酶将Sau 3AI('GATC)切割的DNA 与经BamHI(G 'GATCC)切割的DNA连接起来后，能够被BamHI切割的机率有多大(用百分比表示)? 7．用Klenow酶填补的办法可使5’黏性末端转变成平末端。这种方法常使DNA 上的某些限制酶的识别位点消失。请 问，对于下列限制酶，用这种方法处

理会不会使它们的识别序列都消失? Sau 3AI('GATC)；Taq I(T 'CGA)， BssHⅡ(G 'CGCGC)。 8.以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码动物激素的基因，并使之在大肠杆菌中进行表达，简要说明实验中可能遇到的问题及可能的解决办法。 9．假定你分离到一个E．coli的Thr-突变体，并推测有可能是ThrA基因突变。 请设计一个方案用PCR从染色体DNA 扩增突变的ThrA基因，测定突变的序 列。(注：E．coli野生型的ThrA基因 的序列是已知的) 10．酵母人工染色体要在酵母细胞中稳定存在，必须有哪些基本的结构? 11．用EcoRI和HindⅢ分别切割同一来源的染色体DNA，并进行克隆，在前者的克隆中筛选到A基因，但在后者的克隆中未筛选到A基因，请说明原因。 12．一个携带有氨苄和卡那霉素抗性基因的质粒被仅在卡那霉素基因中有识别位点的EcoRI消化。消化物与酵母DNA连接后转

高中生物选修三基因工程单元测试题含答案

专题1 《基因工程》单元测试题 一、单选题(每小题只有一个正确答案) 1、在基因工程中用来修饰改造生物基因得工具就是( ) A．限制酶与DNA连接酶 B．限制酶与水解酶 C．限制酶与载体 D． DNA连接酶与载体 2、下列说法正确得就是( ) A．质粒就是广泛存在于细菌细胞中得一种颗粒状细胞器 B．用适当得化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌 C．质粒就是基因工程中惟一用作运载目得基因得载体 D．利用载体在宿主细胞内对目得基因进行大量复制得过程不能称为“克隆” 3、某研究小组为了研制预防禽流感病毒得疫苗，开展了前期研究工作。其简要得操作流程如下 图。下列有关叙述错误得就是( ) A．步骤①所代表得过程就是反转录 B．步骤②需使用限制性核酸内切酶与DNA连接酶 C．步骤③可用CaCl处理大肠杆菌，使其从感受态恢复到常态2D．检验Q蛋白得免疫反应特 性，可用Q蛋白与患禽流感康复得鸡得血清进行抗原—抗体特异性反应试验 ) ( 、与“限制性内切酶”作用部位完全相同得酶就是4． A．反转录酶 B． RNA聚合酶 C． DNA连接酶 D．解旋酶 5、转基因抗虫棉得研制过程中，为了检测抗虫基因就是否成功导入，最简捷有效得方法就是( ) A．用DNA探针检测受体细胞中得目得基因就是否存在 B．用DNA探针检测受体细胞中得目得基因就是否转录出相应得mRNA C．直接将培育出得棉株叶片饲喂原本得棉花害虫 D．检测标记基因就是否正常地表达出来 6、下列哪项不就是表达载体所必需得组成( ) A．目得基因 B．启动子 C．终止子 D．抗青霉素基因 7、下列说法正确得就是( ) A．限制性核酸内切酶得识别序列就是GAATTC，只能在G与A之间切断DNA

基因工程测试题

基因工程测试题 一、选择题： 1.人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成。通过转基因技术可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( ) A.大肠杆菌 B.酵母菌 C.肺炎双球菌 D.乳酸菌 2.下列有关基因工程的叙述，正确的是( ) A．DNA连接酶将碱基对之间的氢键连接起来 B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变 C．限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大 D．常用的载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等 3.我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是( ) A.抗虫基因的提取和运输需要专用的工具酶和载体 B.重组DNA分子中替换一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失 C.抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物，从而造成基因污染 D.转基因抗虫棉是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的 4.如图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因(kan r)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养

基上生长。下列叙述正确的是( ) A.构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶 B.愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株 C.卡那霉素抗性基因(kan r)中有该过程所利用的限制性核酸内切酶 的识别位点 D.抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传 5.上海医学研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，以下与此有关的叙述中正确的是( ) A.“转基因动物”是指体细胞中出现了新基因的动物 B.“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因 C.只有从转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中含有 D.转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，不能合成人白蛋白 6.下列关于蛋白质工程和基因工程的比较，不合理的是( )

基因工程测试题经典

xxxXXXXX 学校XXXX 年学年度第二学期第二次月考 XXX 年级xx 班级 姓名：_______________班级：_______________考号：_______________ 一、选择题 （每空？ 分，共？ 分） 1、下列有关基因工程和蛋白质工程的叙述，正确的是 A ．蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的 B ．基因工程合成的是天然存在的蛋白质，蛋白质工程合成的可以不是天然存在的蛋白质 C ．基因工程是分子水平操作，蛋白质工程是细胞水平（或性状水平）操作 D ．基因工程完全不同于蛋白质工程 2、PCR 是一种体外迅速扩增DNA 片段的技术，下列有关PCR 过程的叙述，不正确的是 A ．变性过程中破坏的是DNA 分子内碱基对之间的氢键 B ．复性过程中引物与DNA 模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成 C ．延伸过程中需要DNA 聚合酶、ATP 、四种核糖核苷酸 D ．PCR 与细胞内 DNA 复制相比所需要酶的最适温度较高 3、35．采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。下列有关叙述，正确的是（ ） A ．人体细胞中凝血因子基因的碱基对数目，小于凝血因子氨基酸数目的3倍 B ．可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA 分子导入羊的受精卵 C ．在该转基因羊中，人凝血因子基因只存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中 D ．人凝血因子基因开始转录后，DNA 连接酶以DNA 分子的一条链为模板合成mRNA

4、ch1L基因是蓝细菌拟核DNA上控制叶绿素合成的基因．为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞．技术路线如图所示，对此描述错误的是（） 5、下图表示基因工程中目的基因的获取示意图，不正确的是： A、同种生物的基因组文库大于cDNA文库 B、③表示PCR技术，用来扩增目的基因 C、从基因文库中要得到所需目的基因，可根据目的基因的有关信息来获取 D、只要基因的核苷酸序列已知，就只能通过人工合成的方法获取 6、图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序 列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为：C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。下列分析中正确的是：

人教版基因工程单元测试21

基因工程 学校: ___________ 姓名： ___________ 班级： __________ 考号： ____________ 一、选择题 1 .下列关于限制酶的说法不正确的是 （ ） A. 限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很常分布 B. 自然界中限制酶的天然作用是用来提取目的基因 C. 不同的限制酶切割 DNA 勺切点不同 D. —种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 【答案】B 【解析】 试题分析：限制酶广泛存在于各种生物中，其中微生物中分布很常见，所以 A 正确；自 然界中限制酶的天然作用是用来对自身生物细胞的保护， 所以B 错误；限制酶具有特异 性，所以C 正确；因限制酶具有特异性，所以 D 正确。 考点：本题考查基因工程限制酶的内容，意在考查考生对所学知识的理解。 2 .科学家将控制某药物蛋白合成的基因转移到白色来亨鸡胚胎细胞的 DNA 中，发育后 的雌鸡就能产出含该药物蛋白的鸡蛋，在每一只鸡蛋的蛋清中都含有大量的药物蛋白； 出的鸡，仍能产出 含该药物蛋白的鸡蛋。据此分析不 B .这种变异属于可遗传的变异 D .该种变异属于定向变异 【答案】C 【解析】 试题分析：根据题干信息分析，将目的基因（控制某药物蛋白合成的基因）导入了来亨 鸡胚胎细胞的 DNA 中,发育成的鸡产生了该药物蛋白的鸡蛋， 说明目的基因在这些鸡中 表达了，A 正确；这些含该药物蛋白的鸡蛋孵 出的鸡，仍能产出 含该药物蛋白的鸡蛋， 说明这 种变异属于可遗传的变异， B 正确；该技术为第一代基因工程技术，并没有利用 蛋白质工程对控制蛋白质合成的基因的结构进行改造， C 错误；基因工程的原理是基因 重组，且是对生物性状的定向改造，即这种变异是定向的， D 正确。 考点：基因工程 3 .以SARS 病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体，下列正确的是（ ） A. 用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B. 体外培养单个浆 B 细胞可以获得大量针对 SARS 病毒的单克隆抗体 C. 将等量浆B 细胞和骨髓瘤细胞混合，经 PEG 诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D. 用该单克隆抗体与 SARS 病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出该病毒感染者 【答案】D 【解析】 试题分析：单 克隆抗体是浆细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞分泌的， A 错误；单独的效应B 淋巴细胞有产生抗体的能力，但没有无限增殖的本领， 因此在体外培养的情况下是不可能得到大量的单克隆抗体的，B 错误；将等 量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG 诱导融合后的细胞有浆细胞自身融合细 胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞和杂交瘤细胞三种，C 错误；单克隆抗体具有 特异性强、灵敏度高的特点，因此利用该单克隆抗体与SARS 病毒核衣壳蛋 白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者，D 正确。 考点：本题主要考查单克隆抗体制备的相关知识，该内容是动物细胞工程中的重 点内容，考生要 而且这些含该药物蛋白的鸡蛋孵 正确的一项是（ ） A .这些鸡是基因工程的产物 C.该过程属于蛋白质工程技术

基因工程和细胞工程测试题(附答案,可用于考试)

5 高二生物《基因工程和细胞工程》测试题姓名班级 （时间：90分钟分数：100分） 一．选择题（本大题包括25题，每题2分，共50分。每题只有一个选项符合题意。） 1．以下说法正确的是（） A.所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B．质粒是基因工程中惟一的运载体 C．运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 2．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不．相符的是（） A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C．植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性 D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂 3．有关基因工程的叙述正确的是（） A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可作运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 4．能克服远缘杂交障碍培育农作物新品种的技术是（） A.基因工程 B.组织培养 C.诱变育种 D.杂交育种 5．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( ) A．培养人的效应T细胞能产生单克隆抗体 B．培养人的B细胞能够无限地增殖 C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞 6．PCR技术扩增DNA,需要的条件是( ) ①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体 A、①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥ 7．以下对DNA的描述，错误的是（） A.人的正常T淋巴细胞中含有人体全部遗传信息 B.同种生物个体间DNA完全相同 C.DNA的基本功能是遗传信息的复制与表达 D.一个DNA分子可以控制多个性状 8. 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（） A.氨基酸结构 B.蛋白质空间结构 C.肽链结构 D.基因结构 9．细胞工程的发展所依赖的理论基础是（） A.DNA双螺旋结构模型的建立 B.遗传密码的确立及其通用性的发现 C.生物体细胞全能性的证明 D.遗传信息传递的“中心法则”的发现 10．下列不是基因工程中的目的基因的检测手段的是：（） A.分子杂交技术 B.抗原—抗体杂交 C.抗虫或抗病的接种 D.基因枪法 11．在以下4种细胞工程技术中，培育出的新个体中，体内遗传物质均来自一个亲本的是（） A.植物组织培养 B. 单克隆抗体 C. 植物体细胞杂交 D.细胞核移植 12．动物细胞融合与植物细胞融合相比特有的是（） A.基本原理相同 B.诱导融合的方法类 C.原生质体融合 D.可用灭活的病毒作诱导剂 13．下列哪一项属于克隆（） A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C．将鼠骨髓细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞

基因工程试题及答案

基因工程试题及答案 【篇一：基因工程题库以及答案】 因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。 2．基因工程的两个基本特点是： (1)____________， (2)___________。 3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和 __________。 4．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的___________。 5．限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自_______，第二、三两个字母取自_________，第四个字母则用___________表示。 6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。 7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。 8．限制性内切核酸酶bsuri和haeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。 9．dna聚合酶i的klenow大片段是用_____________切割dna聚合酶i得到的分子量为76kda的大片段，具有两种酶活性： (1)____________； (2)________________的活性。 10．为了防止dna的自身环化，可用_____________去双链 dna__________________。 11．egta是____________离子螯合剂。 12．测序酶是修饰了的t7 dna聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。 13．切口移位(nick translation)法标记dna的基本原理在于利用 _________的_______和______的作用。 14．欲将某一具有突出单链末端的双链dna分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。 15．反转录酶除了催化dna的合成外，还具有____________的作用，可以将dna- rna杂种双链中的___________水解掉。

基因工程练习题(附答案)

基因工程练习题 1、在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是( ) A、将目的基因从染色体上切割出来 B、识别并切割特定的DNA核苷酸序列 C、将目的基因与运载体结合 D、将目的基因导入受体细胞 2、基因工程中常用细菌等原核生物作受体细胞的原因不包括( ) A、繁殖速度快 B、遗传物质相对较少 C、多为单细胞，操作简便 D、DNA为单链，变异少 3、基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是( ) A、限制酶只用于切割获取目的基因 B、载体与目的基因可以用同一种限制酶处理 C、基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶 D、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测 4、运用现代生物技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中，为检测实验是否成功，最方便的方法是检测棉花植株是否有( ) A、抗虫基因 B、抗虫基因产物 C、新的细胞核 D、相应性状 5、转基因动物转基因时的受体细胞是( ) A、受精卵 B、精细胞 C、卵细胞 D、体细胞 6、基因工程中常见的载体是( ) A、质体 B、染色体 C、质粒 D、线粒体 7、水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly、Ser构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是( ) A、促使目的基因导入宿主细胞中B、促使目的基因在宿主细胞中复制 C、使目的基因容易被检测出来 D、使目的基因容易成功表达 8、运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种，这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白质，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用，据以上信息，下列叙述正确的是( ) A、Bt基因的化学成分是蛋白质 B、Bt基因中有菜青虫的遗传物质 C、转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt基因 D、转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物 9、人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成，通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( ) A、大肠杆菌 B、酵母菌 C、T 噬菌体 D、质粒DNA 4 10、不属于质粒被选为基因运载体的理由是（） A．能复制 B.有多个限制酶切点C．具有标记基因D．它是环状DNA

人教版基因工程单元测试(2)

基因工程 学校: _________ 姓名： ___________ 班级：____________ 考号：____________ 一、选择题 1．下列关于基因表达载体构建的相关叙述中，不正确的是（） A. 需要限制酶和DNA1接酶 B. 抗生素抗性基因可作为标记基因 C. 在细胞外进行 D. 启动子位于目的基因的首端，是启动翻译的一段DNA 【答案】D 【解析】构建基因表达载体过程中需要用限制酶切割目的基因和载体，最后用DNA连接酶把目的基因和载体连接起来，A正确；抗生素抗性基因可以用作标记基因，B正确； 基因表达载体的构建过程一般在体外进行，C正确；启动子位于目的基因的首端，是启 动转录的一段DNA D错误。 2. 不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A. 能复制 B. 有多个限制酶切点 C. 具有标记基因 D. 它是环状DNA 【答案】D 【解析】 试题分析：质粒作为运载体理由是在宿主细胞内能稳定复制增殖, 具有标记基因, 具有多个限制酶切点，是环状DNA分子但不是作为运载体的条件，D项错误。 考点：本题考查基因工程中运载体的作用。 3. 上下列对酶、ATP激素、神经递质、载体、抗体等物质的叙述，正确的有 ①控制酶合成的直接模板是mRNA ②人在剧烈运动时，肌细胞产生ATP的速率增大 ③激素具有微量、高效、可重复使用的特点 ④神经递质发挥作用时，突触后膜电位会由外正内负变为外负内正 ⑤细胞膜上的载体与基因工程的载体的本质相同 ⑥杭体合成和分泌的过程，体现了细胞器之间的分工和协作 A. —项 B. 两项 C. 三项 D. 四项 【答案】B 【解析】酶的本质是蛋白质或RNA而控制RNA合成的模板应为DNA单链，①错误。人剧烈运动时需要消耗大量能量，此时肌细胞产生ATP的速率将增大，② 正确。激素发挥作用后将会被灭活，③错误。神经递质有兴奋性递质和抑制性递质，其中只有兴奋性递质才能使突触后膜的电位由外正内负变为外负内正，④错误。细胞膜上的载体的本质为蛋白质，而基因工程的载体的本质为DNA⑤ 错误。抗体是分泌蛋白，其合成和分泌过程需要多种细胞器参与，体现了细胞器之间的分工和合作，⑥正确。 4. 科学家将B干扰素基因进行定点突变后通过载体导入大肠杆菌表达，使干扰素第17 位的半胱氨酸改变成丝氨酸，结果大大提高了储存稳定性，该生物技术 为（） A. 基因工程 B. 蛋白质工程

基因工程实验考试试题(答案)

1.简述本学期从基因组DNA提取到重组质粒鉴定的实验流程？ 答：①基因组DNA的提取；②PCR扩增目的基因；③凝胶电泳分离纯化PCR扩增的DNA片段以及DNA的体外连接；④重组质粒的转化及转化子的筛选；⑤重组质粒的抽提；⑥重组质粒的酶切鉴定。 2.如何正确使用微量移液器？ 答：①选取合适量程的移液器；②根据取液量设定量程；③安装（吸液）枪头；④按至第一档，将枪头垂直伸入液面下适当位置吸液；⑤按至第二档将液体打入容器；⑥弃掉枪头；⑦将量程调至最大，放回原处。 3.在琼脂糖凝胶电泳点样时，DNA通常和什么试剂混匀，其主要成分和作用是什么？ 答：loading Buffer。主要成分为溴酚蓝，二甲苯青和甘油。 溴酚蓝和二甲苯青起指示作用；甘油加大样品密度，从而沉降于点样孔中，以免浮出。 4.简述制作1%的琼脂糖凝胶电泳的操作步骤。 答：①取0.5g琼脂糖置于锥形瓶，量取50ml 1×TBE溶液于瓶中，微波炉加热至琼脂糖溶解；②将移胶板放入胶室中，选取合适梳子垂直安插在移胶板上方，待琼脂降温至55℃下后，缓慢导入该胶室里；③量取合适量1×TBE溶液导入洗净的电泳槽，并正确插好电泳线； ④等凝胶凝固后，将梳子垂直拔出；⑤点样；⑥轻放移胶板至电泳槽的合适位置；⑦打开电泳仪的开关，调好参数，开始电泳；⑧一定时间后，停止电泳，取出凝胶板，然后经BE染色放入成像系统显色、观察。 5.琼脂糖凝胶电泳中DNA分子迁移率受哪些因素的影响？（实验书P75） 答：①样品DNA的大小和构象；②琼脂糖浓度；③电泳电场；④温度；⑤缓冲液；⑥嵌入染料的存在与否； 6.在使用苯酚进行DNA抽提时应注意什么？（实验书P31） 答：注意不要吸取中间的变性蛋白质层。 7.在基因组DNA提取过程中常用酚、氯仿、异戊醇试剂，它们各有什么作用？ 答：酚——是蛋白质变性，抑制DNA酶的降解作用；氯仿——除去脂类，同时加速有机相与水相的分层；异戊醇——降低表面张力，从而减少气泡的产生。 8.提取DNA实验中，通常可选用哪些试剂沉淀DNA？ 答：冷的无水乙醇、冷的异丙醇、终浓度为0.1～0.25mol/L 的NaCl 9.简述在DNA提取实验中个试剂的作用（SDS，EDTA，酚/氯仿/异戊醇、无水乙醇，70%乙醇）。 答：SDS——破坏细胞膜，解聚核蛋白；EDTA——整合金属离子，抑制DNase活性；酚/氯仿/异戊醇——见第7题；无水乙醇——沉淀DNA；70%乙醇——洗涤DNA沉淀。 10.简述PCR扩增技术的原理及各种试剂的作用（Mg2+，dNTP，引物，DNA，缓冲液，Taq DNA聚合酶）。 答:(1)利用半保留复制的原理，以待扩增的DNA为模板，通过一系列酶在体外引物介导下，

基因工程作业题及答案

第二章 1. 名词解释：核酸内切酶、核酸内切限制酶、同裂酶、同尾酶、核酸外切酶、末端脱氧核苷酸转移酶 答： 核酸内切酶：是一类从多核苷酸链的内部催化磷酸二酯键断裂的酶。 核酸内切限制酶：是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列（4—8bp），并由此处切割DNA双链的核酸内切酶。 同裂酶：识别位点的序列相同的限制性内切酶。 同尾酶：识别的序列不同，但能切出相同的粘性末端。 核酸外切酶：是一类从多核苷酸链的一头开始催化降解核苷酸的酶。 末端脱氧核苷酸转移酶：可以不需要模板，在单链DNA或突出的双链DNA 3’-OH端随机 添加dNTPs的酶 2. 限制性内切核酸酶的命名原则是什么？ 答：限制性内切核酸酶按属名和种名相结合的原则命名的，即：属名+种名+株名+序号； 首字母：取属名的第一个字母，且斜体大写； 第二字母：取种名的第一个字母，斜体小写； 第三字母：(1)取种名的第二个字母，斜体小写； (2)若种名有词头，且已命名过限制酶，则取词头后的第一字母代替。 第四字母：若有株名，株名则作为第四字母，是否大小写，根据原来的情况而定，但用正体。 顺序号：若在同一菌株中分离了几种限制酶，则按先后顺序冠以I、Ⅱ、Ⅲ、…等，用正体。 3．部分酶切可采取的措施有哪些？ 答：1）缩短保温时间 2）降低反应温度 3）减少酶的用量 4. 在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'中含有一个6bp 的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么? 答：回文序列是：5'-CATA TG-3， 5．什么是限制性内切核酸酶的星号活性? 受哪些因素影响? 答：Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性，但是这种特异性受特定条件的限制，即在一定环境条件下表现出来的特异性。条件的改变，限制酶的特异性就会松 动，识别的序列和切割都有一些改变，改变后的活性通常称第二活性，而将这种因 条件的改变会出现第二活性的酶的右上角加一个星号表示，因此第二活性又称为星 活性。 概括起来，诱发星活性的因素有如下几种：(1)高甘油含量(>5％, v／v)；(2)限制性 内切核酸酶用量过高(>100U／ugDNA)；(3)低离子强度(<25 mmol／L)；(4)高pH(8．0 以上)；(5)含有有机溶剂，如DMSO，乙醇等；(6)有非Mg2+的二价阳离子存在(如 Mn2+，Cu2+，C02+，Zn2+等)。 第三章 1．如何将野生型的λ噬菌体改造成为一个理想的载体? 答：①删除λ噬菌体的非必需区，留出插入空间；并在余下的非必须区内制造限制酶切点 ②引进某些突变表型，作为选择标记 ③突变某些基因，使它成为安全载体 ④删除λDNA必须区段上常用的限制酶切点

人教版高中生物选修三基因工程单元检测试题

人教版高中生物选修三基因工程单元检测 试题 单元检测一专题1基因工程 （时间: 45分钟满分：100分） 一、选择题（共12个小题，每小题5分，共60分） 1. 下列关于基因工程的叙述，错误的是（） A. 目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B. 限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物 活性 D. 载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促 进目的基因的表达 2.基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是（） A.人工合成目的基因 B?目的基因与载体结合 c.将目的基因导入受体细胞 D?目的基因的检测和表达 3?下列有关基因工程的叙述中，错误的是（） A. DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B ?限制性核酸内切酶用于目的基因的获得

C.目的基因需由载体导入受体细胞 D.大多数限制酶的识别序列由6个核昔酸组成 4.如下图所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZl（3. 7kb, lkb = 1000对碱基）上相应的E-F区域（0. 2kb）,那么所形成的重组质粒pZHZ2（） A.既能被E也能被F切开 B?能被E但不能被F切开 c.既不能被E也不能被F切开 D?能被F但不能被E切开 5.下列四条DNA片段，可以是由同一种限制酶切割而成的是（） A.①② B.②③c?③④D?②④ 6.下面是5种限制性核酸内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图Z表示剪切点，切出的断面为黏性末端）限制酶1：— I GATc—； 限制酶2：—cATG 限制酶3：一G I GATcc—； 限制酶4：—ccGc I GG—；

高中生物高考题分类题基因工程(可编辑修改word版)

知识点一基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA 重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA 分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA 重组技术。 注意：对本概念应从以下几个方面理解： 知识点二基因工程的基本工具 1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀” (1)限制性内切酶的来源：主要是从原核生物中分离纯化来的。 (2)限制性内切酶的作用：能够识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并能将每一条链上特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。 (3)限制性内切酶的切割方式及结果：①在中心轴线两侧将DNA 切开，切口是黏性末端。 ②沿着中心轴线切开DNA，切口是平末端。 2.DNA 连接酶——“分子缝合针” (1)来源：大肠杆菌、T4噬菌体 (2)DNA 连接酶的种类：E.coliDNA 连接酶和T4DNA 连接酶。 (3)作用及作用部位：E.coliDNA 连接酶作用于黏性末端被切开的磷酸二酯键，T4DNA 连接酶作用于黏性末端和平末端被切开的磷酸二酯键。 注意：比较有关的DNA 酶 (1)DNA 水解酶：能够将DNA 水解成四种脱氧核苷酸，彻底水解成磷酸、脱氧核糖和含氮碱基 (2)DNA 解旋酶：能够将DNA 或DNA 的某一段解成两条长链，作用的部位是碱基和碱基之间的氢键。注意：使DNA 解成两条长链的方法除用解旋酶以外，在适当的高温(如94℃)、重金属盐的作用下，也可使DNA 解旋。(3)DNA 聚合酶：能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成DNA 长链。 (4)DNA 连接酶：是通过磷酸二酯键连接双链DNA 的缺口。注意比较DNA 聚合酶和DNA 连接酶的异同点。 3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”

基因工程试题及答案全集

作业一： 一、名词解释： 1、基因：是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。 2、基因组该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子 3、操纵子:原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，转录生成一个mRNA，然后分别翻译成几种不同的蛋白质。这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶，或共同完成某种功能。这些结构基因与其上游的启动子，操纵基因共同构成转录单位，称操纵子。 4、启动子:是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，包括至少一个转录起始点。在真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。有时，将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。 5、增强子:是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV40病毒中发现的长约200bp 的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中都发现了增强子。增强子通常占100～200bp长度，也和启动子一样由若干组件构成，基本核心组件常为8～12bp，可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。 6、基因表达：是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子。 二、简答题 1、说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。 答：限制性内切核酸酶采用三字母的命名原则,即属名+种名+株名的各一个首字母,再加上序号. 基本原则: 3-4个字母组成,方式是:属名+种名+株名+序号; 首字母: 取属名的第一个字母,且斜体大写;第二字母: 取种名的第一个字母,斜体小写;第三字母: (1)取种名的第二个字母,斜体小写;(2)若种名有词头,且已命名过限制酶,则取词头后的第一字母代替.第四字母: 若有株名,株名则作为第四字母,是否大小写,根据原来的情况而定,但用正体. 顺序号: 若在同一菌株中分离了几种限制酶,则按先后顺序冠以I,Ⅱ,Ⅲ,…等,用正体. 2、什么是限制性内切核酸酶的星号活性受哪些因素影向 答：Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性，但是这种特异性受特定条件的限制，即在一定环境条件下表现出来的特异性。条件的改变，限制酶的特异性就会松动，识别的序列和切割都有一些改变，改变后的活性通常称第二活性，而将这种因条件的改变会出现第二活性的酶的右上角加一个星号表示，因此第二活性又称为星号活性。 概括起来，诱发星活性的因素有如下几种： (1)高甘油含量(>5％, v／v)； (2)限制性内切核酸酶用量过高(>100U／ugDNA)； ；L)／mmol(<25 低离子强度(3)． (4)高pH以上)；(5)含有有机溶剂，如DMSO，乙醇等； (6)有非Mg2+的二价阳离子存在(如Mn2+，Cu2+，C02+，Zn2+等)。 3、影响DNA连接酶催化连接反应的因素有哪些 答：（1）DNA的纯度（2）DNA甲基化的程度（3）酶切消化反应的温度（4）DNA的分子结构（5）核酸内切限制酶的缓冲液 4、什么是Klenow酶有哪些活性在基因工程中有什么作用 答：Klenow酶是1974年Klenow用枯草杆菌蛋白酶水解DNA聚合酶I，得到两个片段，其中大片段的分子量为75kDa，它具有5'-3'聚合酶和3'-5'外切核酸酶的活性，小片段具有5'-3'外切核酸酶活性。由于大片段失去了DNA聚合酶I中会降解5'引物的5'-3'外切核酸酶的活性，所以在

基因工程练习题

第一章绪论 1基因:是指DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位。 2管家基因与奢侈基因：具有相同遗传信息的同一个体细胞间其所利用的基因并不相同，有的基因活动是维持细胞基本代谢所必须的，而有的基因则在一些分化细胞中活动，这正是细胞分化、生物发育的基础。前者称为管家基因，而后者被称为奢侈基因 结构基因与调节基因：结构基因是可以转录成为各种RNA（rRNA,tRNA,snRNA）直接行使功能，或者转录成信使RNA（mRNA）然后翻译成多肽链，最终形成各种功能蛋白质和酶。从广义上讲，任何一种能够调节或限制其他基因活性的基因都可以叫做调节基因。 移动基因：转座子属于可移动的遗传因子 重叠基因：它的同一部分DNA可以编码两种不同的蛋白质，也就是说同一部份DNA存在2个重叠基因 3基因组:是指一个生物体、细胞器或病毒的全部基因 4断裂基因:被间隔序列间隔成若干个部分，而形成不连续形式的基因，是真核基因的普遍形式 5假基因:是一类在基因组中稳定存在，序列组成也酷似正常基因，但不能表现出任何功能的DNA序列。 6启动子：DNA链上能指示RNA转录起始的DNA序列称为启动子，(1)-35序列提供RNA聚合酶全酶识别位点，(2)-10序列是酶与DNA紧密结合的位点，(3)RNA 合成的起始点 7复制子：DNA 中发生复制的独立单位称为复制子(Replicon)，这是一段具有特殊结构的DNA序列，载体有复制起点才能使与它结合的外源基因在宿主细胞中独立复制繁殖。 8增强子：就是远离转录起始点（1 ~ 30 kb）、决定基因的时间、空间特异性表达、增强启动子转录活性的DNA序列，其发挥作用的方式通常与方向、距离无关。9单克隆抗体：由单一细胞克隆生成的抗体是单克隆抗体，所有这些抗体分子都是相同的并以同样的亲合力结合在抗源的相同部位上 10黏性末端：由限制性内切酶切割后在双链DNA的切口处产生交替互补的单链末端 11操纵子：是指染色体控制蛋白质（酶）合成的功能单位，操纵子包括调节基因、操纵基因和结构基因 12终止子：模板DNA上存在终止转录的特殊信号称为终止子。 13克隆：是指从一个共同祖先无性繁殖下来的一群遗传上同一的DNA分子细胞或由个体所组成的特殊的生物群体