离子色谱 脉冲安培法同时检测蒸馏白酒中的乙醇和甘油

离子色谱-脉冲安培法同时检测蒸馏白酒中的乙醇和甘油

李仁勇，梁立娜

戴安中国应用研究中心，北京 100085，lirenyong@https://www.wendangku.net/doc/e53293618.html,

摘要建立了以CarboPac MA1阴离子交换柱分离，脉冲安培法同时检测蒸馏白酒中乙醇和甘油的方法。乙醇在25-50000 mg/L浓度范围内，而甘油则在0.005-50 mg/L浓度范围内具有良好的线性，对应检出限为分别为5 mg/L和0.001 mg/L。实际白酒样品测定乙醇的相对标准偏差均在0.5%以下，低含量甘油的的相对标准偏差均小于5%，加标回收率在91.7%和103.8%之间。该方法检测蒸馏白酒中乙醇和甘油具有操作简便、干扰少等优势，适用于蒸馏白酒的工业过程监控和产品检验。

关键词离子色谱；脉冲安培检测；蒸馏白酒；乙醇；甘油

一、引言

乙醇是蒸馏白酒的主要成分，是衡量白酒质量的重要指标之一。而丙三醇（甘油）则是蒸馏白酒中常见的添加剂，而且白酒发酵本身会产生甘油。能否快速、准确测定酒中乙醇和甘油含量，对于确保酒的质量和保护消费者的健康具有重大意义。乙醇的常见测定方法主要有容量法、红外光谱法、液相色谱法等[1-2]，而甘油的测定方法则以容量法、气相色谱法[]和液相色谱法进行测定[2-3]。但因为这两种组分浓度相差往往高达3到4个数量级，因而这些方法都很难实现两种物质的同时测定，而本文中则主要建立了离子色谱法同时测定蒸馏白酒中乙醇和甘油的方法，克服了这个困难。

二、实验部分

2.1 仪器和试剂

ICS-3000型离子色谱仪（Dionex，美国）：四元梯度泵；ED3000电化学检测器，包括Au工作电极，Ti对电极，pH/Ag/AgCl复合参比电极；AS自动进样器；Chromeleon 6.80 色谱工作站

Milli-Q Advantage A10超纯水机(Millipore，美国)；

乙醇标准储备液100 g/L；甘油标准储备液1000 mg/L

2.2测定条件

分析柱：CarboPac MA1，250×4 mm；保护柱：CarboPac MA1，50×4 mm；

淋洗液条件：450 mmol/L NaOH等度淋洗。

流速：0.40 mL/min ；进样方式：自动进样，25 μL ；柱温及检测器温度：30 ℃；

ED 3000积分脉冲安培检测：Au工作电极电极，Ag/AgCl参比电极模式，糖四电位波形。

三、结果与讨论

3.1 标准曲线和方法检出限

以峰高为研究对象，乙醇在25‐50000 mg/L浓度范围内，而甘油则在0.005‐50 mg/L浓度范围内具有良好的线性，而相关系数均在0.9999以上。根据3倍信噪比可计算出乙醇和甘油的检出限为分别为5 mg/L和0.001 m g/L。

3.2 样品测试

蒸馏样品前处理简单，仅需将样品用超纯水稀释100倍即可直接进样，六种蒸馏白酒样品（3种二锅头，3种高粱酒）采自于附近的超市。图1为3#二锅头样品的分离谱图，可见样品中在乙醇和甘油峰附近不存在太多的干扰物质，但在个别样品中在甘油后会出一个未知峰，怀疑为多元醇类物质，若需研究可通过质谱进行定性分析。白酒样品平行处理三次，乙醇的相对标准偏差均在0.5%以下，而对于部分样品的甘油含量较低，其相对标准偏差在5 %以下，样品的加标回收率在91.7%和103.8%之间。表明本方法用于实际样品的测试具有良好的重现性和较高的准确性，表1为六个样品的测定结果，表格中酒精度是按照白酒的质量浓度处以常温下酒精密度而得到。由于甲醇在此测定条件下的灵敏度非常低，仅为乙醇灵敏

度的二十分之一左右[4]，其出峰位置在乙醇和甘油之间，这两个因素导致甲醇不会干扰到乙醇和甘油的测定。

图1某二锅头样品分离谱图

表1蒸馏白酒样品的测定结果

乙醇

样品

g/L 酒精度

甘油 (mg/L)

1#二锅头 34.24 43 0.56

2#二锅头 47.61 60 58.03

3#二锅头 41.37 52 141.1

1#高粱酒 38.38 48 21.11

2#高粱酒 58.15 73 0.73

3#高粱酒 40.73 51 1.65

四、结论

离子色谱-脉冲安培法同时检测蒸馏白酒中乙醇和甘油，方法无需复杂前处理即可直接进样分析。由于白酒样品中乙醇和甘油的含量差别高达三到四个数量级，因而常规方法如液相-示差法往往无法同时测定。而本方法中乙醇在金电极上的灵敏度仅为甘油的千分之一，因而离子色谱法即可对这两种物质同时进行检测。同时由于甲醇的灵敏度更低，而无法对乙醇和甘油测定造成干扰，但也导致本方法无法测定甲醇。离子色谱法测定甲醇可采用排斥法分离，铂电极检测，具体方法可参考韩静等[5]完成的工作。

参考文献

[1].黄海涛，杨力佳，丁中涛，等，云南大学学报(自然科学版)，2002，24（5）：375-377

[2].虞精明，谢勤关，杨凤华，中国卫生检验杂志，2008，18（9）：1930-1932

[3].苗延林，酿酒科技，1994，4：37-38

[4].Dionex Application Note 122

[5].韩静，梁立娜，牟世芬，等，分析测试学报，2008，12：1343～l346

白酒酿造工艺流程

白酒酿造工艺流程文件排版存档编号：[UYTR-OUPT28-KBNTL98-UYNN208]

物流与供应链管理 课程作业 题目：白酒酿造工艺流程研究 年级： 2009级 专业：管理科学与工程 任课老师：吕周洋 组员：吴蓉肖笑颖王婷王忠会徐继尧徐永新 2010年6月27日

白酒的酿造工艺流程 科学饮用白酒，有益身体健康。由于白酒中含有乙醇，少量饮用后能刺激食欲，促进消化液的分泌和血液循环，使人精神振奋。 1.白酒分类概述 中国白酒产品种类繁多。按酒的香型可将白酒划分为5种香型，又称5种风格。 （1）酱香型：以高粱、小麦为原料，经发酵、蒸馏、贮存、勾兑而制成，具有酱香特点的蒸馏酒。采用高温制曲，二次投料，堆积发酵的生产工艺，一般一年为一个生产周期。取酒后经过勾兑、陈贮而成。其酒味呈酱香、窖底香、醇甜香而具独特风格。酒体完美，香气幽雅，酒味丰满、醇厚。酒色微黄而透明，酱香、焦香、糊香配合谐调，口味细腻、优雅，空杯留香持久。口感风味具有酱香、细腻、醇厚、回味长久等特点。酱香型白酒以国酒茅台为代表，又称茅型。 （2）清香型：以粮谷等为主要原料，经糖化、发酵、贮存、勾兑而酿制成，具有以乙酸乙酯为主体的复合香气的蒸馏酒。属大曲酒类。它入口绵，落口甜，香气清正。采用大麦、豌豆制曲，清蒸清烧两遍，固体发酵工艺生产。清香型酒生产用三种大曲，即：清茬曲、红心曲、后火曲(高温曲)。这三种大曲在生产工艺、生化指标、微生物种群数量以及在产酒量上都有一些差异，这些差异主要是由于大曲的培养温度不同而产生的。其酒气清香芬芳，醇厚绵软，甘润柔和，余味爽净是中国传统酿酒技术的正宗。清香型白酒特点的标准是：清香纯正，醇甜柔和，自然谐调，余味爽净。清香纯正就是主体香乙酸乙酯与乳酸乙酯搭

白酒酿造知识读本(电子版)

目录 第一部分酒文化及白酒知识 (2) 一、白酒概述 (2) 二、酒的品评知识 (11) 三、白酒中有哪些异杂味？产生的原因是什么？ (17) 四、白酒生产的计算 (20) 第二部分微生物知识问答 (22) 第三部分白酒生产理论 (27) 一、糖化发酵基本理论 (27) 二、白酒发酵的理论 (33) 三、白酒生产名词解释 (36) 第四部分名镇坊酒的生产工艺 (42) 一、概述 (42) 二、名镇坊酒制酒生产工艺流程 (47) 三、名镇坊酒制曲生产工艺流程 (50) 四、名镇坊酒贮存、勾兑工艺流程 (53) 五、名镇坊酒包装生产工艺流程 (56) 第五部分名镇坊酒生产知识问答 (59) 一、制酒知识问答 (59) 二、制曲知识问答 (66) 后记................................................................................................................................. 错误！未定义书签。

白酒酿造知识 （电子版） 第一部分酒文化及白酒知识 一、白酒概述 （一）白酒的起源 答：白酒是从处理酸败的黄酒演变而来的，而我国黄酒已有5000多年的历史，但生产白酒必须具备蒸馏器具，因此，对白酒的起源问题，应从古籍及出土文物两方面加以考证，大体有四种提法。 1、起源于元朝 明朝李时珍在《本草纲目》中写道：“烧酒非古法也，自元时始创，其法用浓酒和糟入甑，蒸令气上，用器承取滴，凡酸败之酒，皆可蒸烧。近时惟以糯米或粳米，或黍或林，或大麦，蒸熟，和曲酸瓮中七日，以甄蒸取，其清如水，味浓烈，盖酒露也”。 2、起源于唐朝 唐诗中有“荔英新熟鸡冠色，烧酒初开琥珀香”、“自到成都烧酒熟，不思身更入长安”的描述。 3、起源于金代 1975年，河北省青龙县出土一套铜制的烧酒锅，以现代甄桶与之相比，只是将原来的天锅改为冷凝器而已，桶身部分与烧酒锅基本无异。经有关部门进行蒸馏试验与鉴定，该锅是蒸馏专用器具，在世界蒸馏技术史上是独一无二的，它的铸造年代最迟不晚于金世宗大定年间（公元1161—1189）。 4、起源于北宋 《宋史、食货志》中有“腊酿蒸鬻，侯夏而出”的叙述，这里的鬻是指发酵成熟的黄酒醪。该书中提到的“大酒”即为白酒，酿制于宋太宗太平兴国七年，即公元982年，由此可见，北宋初期已有烧酒。 （二）我国饮料酒已有多少年历史？

白酒蒸馏

酒蒸馏-生产工艺-大曲酒生产工艺 “生香靠发酵，提香靠蒸馏”。蒸馏是酿制白酒的一个重要操作阶段。 一．设备 1．甑桶：（高1米，上1.7，下1.6） 白酒的固态装甑蒸馏是我国的一种独特蒸馏方式，它是非常古老的，但也是很科学的，至今尚无取代设备。它的形状结构极其简单，但其机理 至今仍在探索中。它通过较矮的固体发酵酒醅进行水蒸汽蒸馏法，随加热水蒸汽和酒汽与酒醅相接触，层层浓缩，能从含酒精5%的酒醅中获得40- 65度独具风格的白酒，其中包含了许多芳香成分。白酒甑桶相当于一个填料蒸馏塔，物质（水与酒）和热量的传递均在酒醅中进行，酒醅既是含有 酒精成分的物料，又是蒸馏塔的填充料。甑桶与酒精蒸馏塔。甑桶上口径比下口径大15-20%，克服钻边现象，四周压紧， 2．冷凝器 如果俗称锡锅的冷凝器的锡质不纯而含铅，则铅与酒中的醋酸等有机酸会生成可溶性的盐类进入酒中，危害人体健康；铅还能与酒醅在高温下 产生的硫化氢作用，生成黑色的硫化铅沉淀，导致人体的慢性中毒。因此，蒸馏及贮酒等容器，不要采用含铅的金属。冷凝器可采用九九锡或不锈 钢、铝等，导管可使用不锈钢管或无毒塑料管等为材料。 二．装甑 1．装甑工具：装甑用木锨或簸箕均可，关键是操作人员要责任心强、操作细致、技术过硬。 2．装甑前的准备：底锅水要每天清换，底锅水温度高，可用虹吸管或手摇泵吸出。如果底锅水中有悬浮物，或溶解较多的蛋白质等成份，蒸 馏时就会产生大量泡沫，串入酒醅内造成“淤锅”而影响出酒率及酒质。 底锅水位应与帘子保持50-60cm的距离，若距离太近，也易产生“淤锅”现象。铺好底锅帘子后，撒上一薄层谷壳，再接上流酒管，放置接酒 容器，并将冷却水调整好。 3．装甑原则

甘油-乙醇法测定游离氧化钙试验过程及注意事项

甘油-乙醇法测定游离氧化钙试验过程及注意事项 一、试验所用仪器设备及化学药品 1.仪器设备：高温炉、坩埚、坩埚钳、干燥箱、干燥器（内装硅胶）、滴定架、酸式滴定管、游离氧化钙测定仪、分析天平、量筒、烧杯、容量瓶、小勺子、滴管、镊子； 2.化学药品：①无水乙醇（C 2H 5 OH），体积分数不低于99.5%；②甘油（又称为 丙三醇C 3H 8 O 3 ），体积分数不低于99%；③碳酸钙（CaCO 3 ）；④氢氧化钠(NaOH)； ⑤酚酞（C 20H 14 O 4 ）；⑥硝酸锶Sr(NO 3 ) 2 ；⑦苯甲酸（C 6 H 5 COOH）； 二、试验原理 在加热搅拌下，以硝酸锶为催化剂，使试样中的游离氧化钙与甘油作用生成弱碱性的甘油钙，以酚酞为指示剂，用苯甲酸(弱酸)- 无水乙醇标准滴定溶液滴定生成甘油酸钙至溶液退色。 三、试验过程

1.检查操作间的工作环境，要求温度10～40℃、相对湿度≤85%。 2.准备试验所需的仪器设备及化学药品。清洗各种玻璃仪器放入干燥箱中干燥备用。 3.按照GB/T12573方法取样，所取样品要均匀具有代表性。采用四分法或缩分器将试样缩分至约100g，经80μm方孔筛筛析，用磁铁吸去筛余物中金属铁，将筛余物经过研磨后使其全部通过80μm方孔筛，充分混匀，装入试样瓶中，密封待检。尽可能快速地进行试样的制备，以防止吸潮。 4.取一定量的碳酸钙（基准试剂）置于铂（或瓷）坩埚中，在（950±25）℃下灼烧至恒重，制得氧化钙放在干燥器内备用。 5.配置氢氧化钠-无水乙醇溶液（0.1mol/L），将0.4g氢氧化钠溶于100ml无水乙醇中。 6.甘油-无水乙醇，将500ml丙三醇与1000ml无水乙醇混合，加入0.1g酚酞，混匀。用氢氧化钠-无水乙醇溶液中和至微红色，贮存于干燥密封的瓶中，防止吸潮； 7.苯甲酸-无水乙醇标准滴定溶液（0.1mol/L）,称取12.2g已在干燥器中干燥24h 后的苯甲酸溶于1000ml无水乙醇中，贮存于带胶塞（装有硅胶干燥器）的玻璃瓶内。 8.用甘油-无水乙醇法的滴定度的标定，称取0.04g氧化钙，精确值0.0001g，置于250ml干燥的锥形瓶中，加入30ml甘油-无水乙醇溶液，加入约1g硝酸锶，放入一根搅拌子，装上冷凝管，置于游离氧化钙测定仪上，以适当的速度搅拌溶液，同时升温并加热煮沸，在搅拌下微沸10min后，取下锥形瓶，立即用苯甲酸-无水乙醇标准滴定溶液滴定至微红色消失，再装上冷凝管，继续在搅拌下煮沸至红色出现，取下滴定，如此反复操作，直至在加热10min后不出现红色为止。记录消耗苯甲酸-无水乙醇标准滴定溶液的总体积。

白酒酿造工理论考试题

第一部分 一、填空题 1．大曲酒的发酵温度管理原则是前缓、（）和后缓落。 2．馏出酒液的酒度，主要以经验观察，即所谓（）。 3．（）是白酒老熟的重要标志。 4．浓香型大曲酒生产所有发酵设备都是（）。 5．浓香型白酒工艺操作方法习惯分为原窖法、跑窖法、（）。 6．白酒生产常用的辅助原料有（）、稻壳、小米糠和高粱壳。 7．白酒在贮存过程中，除少数酒样中的乙酸乙酯增加外，几乎所有的酯都减少。而与此相对应的是酸增加，尤其是乙酸、丁酸、己酸、乳酸。这充分显示白酒在贮存中主要酯类的（）是主要的。 8．根据酒的香分，小曲酒有清香型、药香型、米香型和（）香型等。 9．酒精发酵过程从外观想象可分为前发酵期、（）和后发酵期三个阶段。 10．白酒中所含呈香、呈味物质从化学角度来说，主要有醇、醛、酸和（）四大类。11．把淀粉转变为可发酵性糖的过程 所用的催化剂称为（） 12．白酒常见的微生物有（）、霉菌和细菌三类 13．白酒老熟过程中，物理作用包括（）和挥发作用，化学作用包括氧化还原反应、 缩合反应、酯化水解反应和其他变化。 14．淀粉可分为两大类：直链淀粉和（）。 15．白酒蒸馏方法分为固态发酵法蒸馏、（）和固液结合串香蒸馏法。 16．原料不同，成品酒的风味差别较大，故有高粱香、玉米（）、大麦冲、大米净的特点。 17．白酒品质优劣的鉴定，通常是（）和感官检验的方法来实现的。 18．白酒中（）主要来自醇基。 19．生产中用曲量过大就容易使酒中出现涩味和（）。 20．酱香型白酒采用的曲药是（）大曲。 二、选择题 1．谷物类酿酒原料是（）。 A 大米、玉米、蔗糖 B、大米、玉米、高粱 C、小米、高粱、薯 2．高粱淀粉含量最低要达到（）。

白酒酿造蒸馏

一、白酒的制作方法： 所用设备： 1.原料处理及运送设备。有粉碎机、皮带输送机、斗式提升机、螺旋式输送机、送风设备等。 2.拌料、蒸煮及冷却设备。有润料槽、拌料槽、绞龙、连续蒸煮机(大厂使用)、甑桶(小厂使用)、晾渣机、通风晾渣设备。 3.发酵设备。水泥发酵池(大厂用)、陶缸(小厂用)等。 4.蒸酒设备。蒸酒机(大厂用)、甑桶(小厂用)等。 我国的白酒生产有固态发酵和液态发酵两种，固态发酵的大曲、小曲、麸曲等工艺中，麸曲白酒在生产中所占比重较大，故此处仅简述麸曲白酒的工艺。 制作方法： 1.原料粉碎。原料粉碎的目的在于便于蒸煮，使淀粉充分被利用。根据原料特性，粉碎的细度要求也不同，薯干、玉米等原料，通过20孔筛者占60%以上。 2.配料。将新料、酒糟、辅料及水配合在一起，为糖化和发酵打基础。配料要根据甑桶、窖子的大小、原料的淀粉量、气温、生产工艺及发酵时间等具体情况而定，配料得当与否的具体表现，要看入池的淀粉浓度、醅料的酸度和疏松程度是否适当，一般以淀粉浓度14～16%、酸度0.6～0.8、润料水分48～50%为宜。 3.蒸煮糊化。利用蒸煮使淀粉糊化。有利于淀粉酶的作用，同时还可以杀死杂菌。蒸煮的温度和时间视原料种类、破碎程度等而定。一般常压蒸料20～30分钟。蒸煮的要求为外观蒸透，熟而不粘，内无生心即可。将原料和发酵后的香醅混合，蒸酒和蒸料同时进行，称为“混蒸混烧”，前期以蒸酒为主，甑内温度要求85～90℃，蒸酒后，应保持一段糊化时间。若蒸酒与蒸料分开进行，称之为“清蒸清烧”。 4.冷却。蒸熟的原料，用扬渣或晾渣的方法，使料迅速冷却，使之达到微生物适宜生长的温度，若气温在5～10℃时，品温应降至30～32℃，若气温在10～15℃时，品温应降至25～28℃，夏季要降至品温不再下降为止。扬渣或晾渣同时还可起到挥发杂味、吸收氧气等作用。 5.拌醅。固态发酵麸曲白酒，是采用边糖化边发酵的双边发酵工艺，扬渣之后，同时加入曲子和酒母。酒曲的用量视其糖化力的高低而定，一般为酿酒主料的8～10%，酒母用量一般为总投料量的4～6%(即取4～6%的主料作培养酒母用)。为了利于酶促反应的正常进行，在拌醅时应加水(工厂称加浆)，控制入池时醅的水分含量为58～62%。 6.入窖发酵。入窖时醅料品温应在18～20℃(夏季不超过26℃)，入窖的醅料既不能压的紧，也不能过松，一般掌握在每立方米容积内装醅料630～640公斤左右为宜。装好后，在醅料上盖上一层糠，用窖泥密封，再加上一层糠。发酵过程主要是掌握品温，并随时分析醅料水分、酸度、酒量、淀粉残留量的变化。发酵时间的长短，根据各种因素来确定，有3天、4～5天不等。一般当窖内品温上升至36～37℃时，即可结束发酵。 7.蒸酒。发酵成熟的醅料称为香醅，它含有极复杂的成分。通过蒸酒把醅中的酒精、水、高级醇、酸类等有效成分蒸发为蒸汽，再经冷却即可得到白酒。蒸

甘油使用方法

秋冬季风大寒冷容易皮肤干燥开裂，甘油是极佳之皮肤软化剂，是製造滋润油、面霜及其化脸部化粧品的重要成份；具有极佳之吸湿性，因此能帮助保持水份，均匀的扩散在皮肤表面上。温和有效的保湿皮肤，同时在皮肤表层形成滋润膜，补足皮肤内层缺失的水分，有效改善干燥肤质，令皮肤变得柔嫩幼滑。 注意事项：纯甘油需要稀释方可使用，可以任何比率溶于水或酒精中，不要將甘油直接擦在脸上，否則非但不能滋润皮肤，反会因水份被吸收而变干。如皮肤有破损不宜再搽甘油，以免刺激皮肤影响伤口的愈合。 1.可用于做补水面膜，将面膜纸泡于纯净水（冰镇最佳）中备用，洁面后，敷于面部厚厚一层甘油，手指打圈轻按摩三分种，使其充分吸收，将泡好的面膜纸敷在脸上十五分钟拿下，再从脸部抹上少许甘油，保持面部冷静，几分钟后，甘油完全吸收，极佳的补水效果，会让你大吃一惊，感叹自己也成为一个水美人。第二天化妆都会容易很多哟。此面膜无刺激，可每天晚上使用。还可以再泡面膜纸的水改为牛奶更滋润营养，或在水中加入珍珠粉更美白等效果，可针对自己的肤质，适当调和使用。

2.可用于手部滋润，将适量甘油倒入水中，双手合十搓至发热，抹于手背需要滋润处，效果跟护手霜一样的效果。因为甘油是靠吸收空气中的水份达到皮肤滋润，所以比较适合南方空气潮湿的地区使用。 3.可用于全身补水滋润，沐浴过程中，将洗干净的脸上，身上抹上厚厚的甘油，让整个身体充分吸收浴室中潮湿的空气，几分钟后，用清水洗净。沐浴后，你会感觉整个身体都喝饱了水，身体放松皮肤不干燥。我每次洗澡用整整一瓶，您若使用，可适量调和。 具体按摩手法:和擦眼霜一样的手法,按一边一颗黄豆大小量,从内眼角轻轻擦到外眼角,涂四五秒种,等它吸收.我都是先涂眼霜,再擦甘油的.坚持使用,你会看到惊喜的哦！ DIY系列自制面膜： 番茄蜂蜜面膜 材料：甘油6滴、番茄2个、鸡蛋白1个、蜂蜜、面粉少许。 1.番茄用打果汁机打碎成汁。 2.鸡蛋白与番茄汁、甘油蜂蜜调匀。 3.稍加面粉调呈糊状。

白酒酿制工艺流程

酿酒基本原理和过程主要包括：原料处理精碾或粉碎蒸煮(蒸饭) 摊凉( 冷却)翻料淀粉糖化入缸或入窖发酵蒸馏取酒酒的老熟和陈酿勾兑调味 （1）原料处理 为了充分利用原料,提高糖化能力和出酒率,并形成特有的酒品风格,酿酒的原料都必须经过一系列特定工艺的处理,主要包括原料的选择配比及其状态的改变等，环境因素的控制也是关键的环节。 （2）精碾或粉碎 其原料处理的基本工艺和程序是精碾或粉碎。润料(浸米)，，摊凉(淋水冷却)，翻料，入缸或入窖发酵等。 （3）蒸煮(蒸饭) 将粉碎好的玉米或精碾的大米煮蒸熟透不得有夹生。 （4）摊凉( 冷却)翻料 将煮蒸熟透的玉米或精碾的大米摊凉在干净的地上翻料冷却至28℃32℃时加入酒曲，按生料计算春、秋、冬季加入%香酒曲（马关县项家广式酒曲厂生产）和%甜酒曲（马关县项家广式酒曲厂生产）；夏

季加入%香酒曲（马关县项家广式酒曲厂生产）和%甜酒曲（马关县项家广式酒曲厂生产） （5）淀粉糖化 摊凉在干净的地上翻料冷却至28℃ 32℃时加入酒曲混合均匀后堆积糖化24小时（堆积高度16cm 20cm）堆积好后盖上布匹或者麻袋。 （6）入缸或入窖发酵 当24小时过后温度升至28℃ 35℃时装入缸、桶内或者窑内密封发酵15天以上。 （7）蒸馏取酒 所谓蒸馏取酒就是通过加热,利用沸点的差异使酒精从原有的酒液中浓缩分离，冷却后获得高酒精含量酒品的工艺。在正常的大气压下,水的沸点是100℃，酒精的沸点是℃,将酒液加热至两种温度之间时,就会产生大量的含酒精的蒸汽，将这种蒸汽收人管道并进行冷凝,就会与原来的科液分开，从而形成高酒精含量的酒品。在蒸馏的过程中，原汁酒液中的酒精被蒸馏出来予以收集，并控制酒精的浓度。原汁酒中的味素也将一起被蒸馏，从而使蒸馏的酒品中带有独特的芳香和口味。 （8）酒的老熟和陈酿

浓香型白酒蒸馏过程实验研究_李海龙

2011 年10月 Journal of Chemical Engineering of Chinese Universities Oct. 2011文章编号：1003-9015(2011)05-0745-06 浓香型白酒蒸馏过程实验研究 李海龙1, 黄卫星1, 沈才洪2, 易彬2 (1. 四川大学化工学院, 四川成都 610065; 2.四川省酿酒生物技术及应用重点实验室, 四川泸州 646000) 摘要：对浓香型白酒蒸馏过程进行系统实验研究，考察分析了加热蒸汽量、酒醅填装高度与密度、串蒸技术、潽甑 现象对白酒产率与品质的影响以及主要风味物质的馏出规律。结果表明，以正品酒产率及品质为指标，加热蒸汽量存 在最佳值，过低不足以形成乙醇充分蒸发条件，过高则导致酒醅糊化使组分扩散阻力增加；正品酒产率和品质随酒醅 填装密度的增加呈下降趋势，表明疏松床层利于蒸馏；将填装高度由600 mm逐级增加到1250 mm，正品酒产率和品 质均逐级提高，表明了现行蒸馏设备(填装高度为700~900 mm)具有较大扩能潜力；底锅中添加适量食用酒精(串蒸技 术)有利于提高白酒产量，但过量添加将导致品质急剧下降；潽甑导致正品酒产率和品质显著降低，启动阶段设备内滞 留空气导致的系统瞬时升压是潽甑的主要原因。气相色谱分析显示，风味物质的馏出规律与其在乙醇中的溶解性密切 相关。研究结果为白酒蒸馏过程强化及设备优化提供了重要依据。 关键词：浓香型白酒；蒸馏；填装高度；填装密度；潽甑 中图分类号：TQ028.31；TS262.31 文献标识码：A Experimental Study on the Distillation Process of Chinese Strong-Fragrance Type Liquor LI Hai-long1, HUANG Wei-xing1, SHEN Cai-hong2, YI Bin2 (1. School of Chemical Engineering, Sichuan University, Chengdu 610065, China; 2. Key Laboratory of Liquor Making Bio. Tech. & Appl. of Sichuan Province, Luzhou 646000, China) Abstract: Systematic experiments were carried out to investigate the effects of operation conditions on the liquor yield and quality, and the variations of liquor components during the distillation process of Chinese strong-fragrance type liquor. It was found that an optimal steam flowrate exists in the sight of enhancing liquor yield and quality. The lower steam flowrate can not provide the thermal condition for full evaporation of ethanol, while the higher steam flowrate causes the fermented grains to be pasted and increases the diffusion resistance. The yield and quality drop down with the increase of bed density, it indicates that the loosely packed grain bed is recommended. When the bed height increases from 600 to 1250 mm, the yield and quality are gradually enhanced. It implies that the great potential exists for the improvement of current distillation equipments (their bed height is only 700~900 mm). Adding small amount of edible alcohol to the steam boiler (cross-steaming technique) is helpful to increase the yield, but excess addition leads to degrade the quality sharply. The liquor-vapor leaking observably brings down both the yield and quality, and this phenomenon is attributed to the temporal pressure rise caused by the trapped air in the distillation system. The gas chromatography analysis result shows that the variations of flavor compounds during the distillation process are closely related to their dissolving properties in ethanol. The findings provide valuable guidance for the improvements of distillation process and equipment for the strong-fragrance type liquid production. Key words: Chinese strong-fragrance type liquor; distillation; bed height; bed density; liquor-vapor leaking 收稿日期：2011-01-29；修订日期：2011-04-27。 作者简介：李海龙(1985-), 男, 四川剑阁人, 四川大学博士生。通讯联系人：黄卫星, E-mail：hwx@https://www.wendangku.net/doc/e53293618.html,

白酒蒸馏“看花摘酒”

白酒蒸馏“看花摘酒” “生香靠发酵，提香靠蒸馏”。蒸馏是酿制白酒的一个重要操作阶段。 一．设备 1．甑桶：白酒的固态装甑蒸馏是我国的一种独特蒸馏方式，它是非常古老的，但也是很科学的，至今尚无取代设备。它的形状结构极其简单，但其机理 至今仍在探索中。它通过较矮的固体发酵酒醅进行水蒸汽蒸馏法，随加热水蒸汽和酒汽与酒醅相接触，层层浓缩，能从含酒精5%的酒醅中获得40- 65度独具风格的白酒，其中包含了许多芳香成分。白酒甑桶相当于一个填料蒸馏塔，物质（水与酒）和热量的传递均在酒醅中进行，酒醅既是含有 酒精成分的物料，又是蒸馏塔的填充料。甑桶与酒精蒸馏塔。甑桶上口径比下口径大15-20%，克服钻边现象，四周压紧， 2．冷凝器 如果俗称锡锅的冷凝器的锡质不纯而含铅，则铅与酒中的醋酸等有机酸会生成可溶性的盐类进入酒中，危害人体健康；铅还能与酒醅在高温下 产生的硫化氢作用，生成黑色的硫化铅沉淀，导致人体的慢性中毒。因此，蒸馏及贮酒等容器，不要采用含铅的金属。冷凝器可采用九九锡或不锈 钢、铝等，导管可使用不锈钢管或无毒塑料管等为材料。 二．装甑 1．装甑工具：装甑用木锨或簸箕均可，关键是操作人员要责任心强、操作细致、技术过硬。 2．装甑前的准备：底锅水要每天清换，底锅水温度高，可用虹吸管或手摇泵吸出。如果底锅水中有悬浮物，或溶解较多的蛋白质等成份，蒸 馏时就会产生大量泡沫，串入酒醅内造成“淤锅”而影响出酒率及酒质。 底锅水位应与帘子保持50-60cm的距离，若距离太近，也易产生“淤锅”现象。铺好底锅帘子后，撒上一薄层谷壳，再接上流酒管，放置接酒 容器，并将冷却水调整好。 3．装甑原则

固体酒精配方,制备方法

固体酒精配方生产制作方法酒精膏制备配制 产品名称：固体酒精增稠剂FR400 固体酒精也被称为“酒精块”或固体燃料块。固体酒精是将工业酒精（乙醇,CH3CH2OH）中加入凝固剂使之成为固体型态。使用时用一根火柴即可点燃，燃烧时无烟尘，火焰温度均匀，温度可达到600 ℃左右。每250 g可以燃烧1.5小时以上。固体酒精，因使用、运输和携带方便，燃烧时对环境的污染较少，与液体酒精比较安全性较高，作为一种固体燃料，广泛应用于餐饮业、旅游业和野外作业等场合。 用固体酒精增稠剂FR400的优势： 环保型膏状固体酒精，是固体酒精中一种性能超群的新品种,FR400用于固体酒精生产，可完美代替传统的硝化棉，让你的固体酒精更晶莹剔透外观为形似水晶般晶莹透明的凝胶状物质,也可为其染色.捏,挤,取用,均无液体渗出. 丙烯酸树脂性能：FR400是丙烯酸与烯丙基蔗糖交联的高分子聚合物，常规用量0.5-1.0%就能产生高效的增稠作用.是非常理想的酒精增稠剂.飞瑞化工可为您提供样品及配方技术。 甲醇乙醇增稠剂增稠机理:成盐增稠：最通常的办法是将酸性的树脂变成适当的盐,使卷曲的树脂分子被张开而导致增稠.在水及其它极性溶剂中,用NaOH、KOH、NH40H之类中和,容易生成盐；在极性较弱或非极性溶剂中就要用有机胺进行中和。当树脂用作乳化剂时，为使油/水乳化剂取得最佳稳定性，需对树脂采用水溶性无机碱和油溶性有机胺进行双重中和，使生成在水中和油中都可溶的盐，在油相和水相中起桥梁作用。 b.轻键增稠，在树脂中加入一种羟基给予体，树脂分子作为羧基给予体能与一个或两个以上羟基结合形成氢健而增稠，此方法需要时间，可能从5分钟以至几个小时，稠度才能达到最高值。 固体酒精配方 序号原料编码配比(%) 1 水 30.00 2 酒精 70.00 3 酒精增稠剂FR400 0.50 4 碱性中和剂 0.50 5 火焰赋色剂 0.3 固体酒精的生产工艺及制备方法 1.将0.5份的FR400加到30份水和70份酒精中，适当搅拌然后放置6个小时（放置的过程注意要密封，防止酒精挥发），等到粉末均匀溶解为透明液体，切记不允许有小疙瘩出现。（另一种溶解方法：用均质机打均质10分钟，消泡即可使用）。 2.将上述溶液边搅拌边滴加TEA，滴加原则为少量多次（切记滴加的过程必须搅拌充分），确保FR400可以均匀中和，直到产品为无色透明凝胶状为止。 3.如果希望产品增加色彩，可以添加少量甘油搅拌，然后密封保存即可。 制作固体酒精的注意事项 1.水质因素：硬水中含有2价阳离子，比如Cu，Mg，Ca等阳离子的存在，会破坏FR400

白酒基础知识大全!(全了)

白酒基础知识大全！（全了） 1.酒精 任何含有糖分的液体，经过发酵便会产生醇，醇分甲醇、乙醇等几种。甲醇有毒性，饮用后会中毒而亡；乙醇无毒性，能刺激人的神经和血液循环，但过量饮用也会引起中毒。酒类的主要成分是乙醇，俗称酒精，是一种无色透明、气味飘逸的易燃、易挥发液体，其沸点为78℃，冰点为-114℃。 2.酒度 酒精在酒液中的含量用酒度来表示，通常有公制和美制两种表示法。 （1）公制酒度。公制酒度以百分比或度表示，是指在20℃条件下, 酒精含量在酒液内所占的体积比例。如某种酒在20℃时含酒精38％，即称为38度。 （2）美制酒度。美制酒度以Proof表示，是指在20℃条件下，酒精含量在酒液内所占的体积比例达到50％时，酒度为100Proof。如某种酒在20℃时含酒精38％，即为76Proof。 另外，还有英制酒度，以Sikes表示，但较少见。 3.酒精饮料 酒精饮料(Alcoholic Drinks)是指含有0.5％～75.5％酒精的任何适宜饮用的饮料。与此相对的是无酒精饮料(Non alcoholic Drinks)，俗称软饮料(Soft Drinks)。 4、白酒中的有害成份 1、甲醇：导致中毒、失明乃至死亡，即使少量含量也会引起头痛等不良感觉。 2、杂醇油：含量超标引起头痛即“上头”易醉。 3、铅PB、呻、AS均引起中毒。 二、酒的分类 1、按制造方法分 （1）酿造酒。酿造酒是指以水果、谷物等为原料，经发酵后过滤或压榨而得的酒。一般都在20度以下，刺激性较弱，如葡萄酒、啤酒、黄酒等。 （2）蒸馏酒。蒸馏酒又称烈性酒，是指以水果、谷物等为原料先进行发酵，然后将含有酒

汾酒酿造工艺操作经验之浅见

[6]熊翔,杨志龙，方跃进等.超浓缩复合己酸菌液在湘窖酒业窖泥培养中的应用[J].酿酒科技,2011(9)：62-64. [7]赵兴青,杨柳燕,陈灿等.PCR-DGGE 技术用于湖泊沉积物中微生物群落结构多样性研究[J].生态学报,2006,11:3610-3616. [8]林海龙,李伟光,闫险峰等.中药废水污泥群落结构解析中 PCR-DGGE 引物的选择与评价[J].环境科学,2011,5:1505-1510[9]Olga Sanchez,Josep M.Gasol,Ramon Massana,et https://www.wendangku.net/doc/e53293618.html,parison of different denaturing gradient gel electrophoresis primersets for the study of marine bacterioplankton communities [J].Applied And Environmental Microbiology,2007,73(18):5962-5967. 汾酒酿造工艺操作经验之浅见 任全明，刘 帅，甄 攀 （山西杏花村汾酒集团有限责任公司，山西汾阳032205） 摘要:以近三年汾酒酿造最优秀的班组为代表，围绕汾酒酿造的各个环节和关键控制点，对汾酒工艺操作手法和参数进行了经验性的总结。关键词：汾酒；酿造；关键控制点中图分类号： TS262.32；TS261.4文献标识码：B The Experience of Shallow View on Fen Liquor Brewing Process Operation REN Quan-ming,LIU Shuai,ZHEN Pan （Shanxi Xinghuacun Fen Distillery Co.Ltd,Fenyang 032205,Shanxi,China) Abstract:Nearly three years of Fen Liquor brewing the best team as representatives,around all aspects and critical control point Fen brewing,operating practices and empirical parameters are summarized.Key words:Fen Liquor;brewing;the key control points 汾酒是清香型白酒的代表，连续五届评酒会被评为国家名酒，口味醇和、绵甜，适合现代饮用者的口感与保健要求，其生产环境卫生，所以更容易进入国际市场[1]。汾酒清香纯正、绵甜爽净的口感与其流传千年的精湛工艺，“清蒸二次清，地缸固态分离发酵”是分不开的[2]，而决定汾酒优秀品质的中国传统固态发酵，是开放式的生产过程，其间微生物变化极其复杂，现代的生物学技术尚不能完全解释，而我们的酿酒师傅，却凭借自己的经验，充分利用“人、机、料、法、环”的相互配合，完美传承与诠释了汾酒酿造工艺，为汾酒酿造技艺的不断传承与改进做出了卓越的贡献。 本文以近几个周期汾酒酿造最优秀的班组为代表，围绕汾酒酿造工艺，对其经验性的总结进行阐述。 1润粮操作注意事项1.1 细化和糁法 和糁是汾酒发酵前期最重要的基础工作，要求 红糁吃水均匀，无疙瘩、无干糁、不落浆，保证了红糁干湿、温度均匀一致。汾酒传统的和糁工艺是“四二合一再倒一”，通过多年的酒班一线经验，笔者又将传统工艺细化为“十字”和糁法。 要点：“一滩、二放、三顶、四锄、五堆、六分、七合、八搓、九倒、十消灭”的十字和糁法。即首先均匀的把干红糁摊成圆圈，和糁至少四人以上放水近一半时。由内向外开始顶糁，顶完干糁为止。再由外向里、由下到上锄糁，堆积成锥形。然后分成均匀的四堆，仍为锥形。将底部疙瘩搓烂。按照四二合一的顺序合成一堆为锥形。继续搓烂溜到底部的疙瘩。堆积2~3个小时，再按照里倒外、外倒里的要求倒一次 收稿日期：2014-06-23 作者简介：任全明（1969-），男，山西汾阳人，高级酿造技师，主要从事汾酒酿造工作。 *通讯作者：甄攀（1983-），男，硕士研究生，工程师，主要从事白酒微生物与工艺技术研究。 文章编号:1002-8110（2014）05-0083-03 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!第41卷第5期2014年9月 酿酒LIQUOR MAKING Vol.41.№.5Sep.，2014 83

蒸馏酒(白酒)品质分析

华南农业大学 设计性实验报告 实验项目名称：蒸馏酒（白酒）品质分析 实验项目性质：设计性实验 计划学时：6学时 所属课程名称：食品与发酵工业分析 班级：2010级生物工程1班 姓名：林耀灿 学号：201030620116 指导老师：徐振林 实验完成时间：2013年5月17日

摘要：本文简述了对白酒进行酒品分析的过程，介绍了白酒总酯和总酸，酒精度，固形物含量，甲醇含量的测定方法，加深了我们对白酒质量常规指标的测量方法与原理的掌握。近年来恶性食品安全事故频繁发生，危害广大群众的生命安全，加强食品安全质量监控变得越加重要。因此，监测白酒安全质量具有重要意义。 关键词 白酒 品质分析 总酸总酯 酒精度 固形物 甲醇 1.前言]1[ 蒸馏酒的各项理化指标卫生标准系以酒精度60°(% ,V/V ) 蒸馏酒为标准浓度, 高于或低于60°需要进行折算, 因此, 乙醇浓度测定在蒸馏酒的理化卫生检验中显得较为重要。建立比重计法测定白酒中酒精度的分析方法,从而评定测定白酒的质量。 甲醇为白酒中的有害成分, 其来源为原料和辅料中果胶质内甲基酯分解而成。在使用薯干、谷糠、野生植物等为原辅料时, 酒中甲醇含量就高。甲醇在人体内氧化为甲醛、甲酸, 产物毒性更胜于甲醇, 甲醇在体内有积累作用。因此, 即使是少量甲醇也能引起慢性中毒, 头痛恶心, 视力模糊, 严重时失明。 总酸是白酒中必检项目之一,是评价白酒是否合格的重要指标。目前,白酒中总酸的检测方法是《GB/T 10345.4–1989》标准方法,该方法是经典的化学方法- 酸碱滴定法。该方法操作简便,测定结果准确。 酯为有机酸与醇在酸性条件下经酯化作用而得。白酒中香味在很大程度上与酯类的组成及合量有关，它是酒的一个很重要的质量指标。白酒中酯类成分极为复杂，其中有乙酸乙酯、己酸乙酯、丁酸乙酯、乳酸乙酯等。用化学分析法测得的为总酯，常以乙酸乙酯计。 白酒是一种蒸馏酒, 它除了含有易蒸发的水、醇类、酯类、酸类、醛类等物质以外, 不应该含有固形物。可是, 由于白酒受蒸馏、贮存、勾兑、包装等诸因素的影响, 形成了可溶性固形物与不溶性固形物沉淀物与悬浮物。白酒中固形物含量是衡量白酒质量的一个指标, 在某种意义上讲, 还是衡量优劣的一个重要指标。 所以熟练掌握白酒的指标品质控制因子的检测对生产和保证顾客健康有重要意义。 2.实验材料 2.1 实验试剂 2.1.1 酚酞指示剂（10g/L ）：按GB/T603配制。 2.1.2 氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH)=0.1mol/L]:按GB/T601配制与标定。 2.1.3 氢氧化钠标准溶液[c(NaOH)= 3.5mol/L]:按GB/T601配制。 2.1.4 硫酸标准滴定溶液[c(42SO H 21)=0.1mol/L]:按GB/T601配制与标定。 2.1.5 乙醇（无脂）溶液[40%（体积分数）]：量取95%乙醇600mL 于1000mL 回流瓶中（2.2.2），加氢氧化钠标准溶液（2.1.3）5mL ，加热回流皂化1h 。然后移入蒸馏器中重蒸，再配成40%（体积分数）乙醇溶液。

甘油酒精法测游离氧化钙

FCLJCSN0021 水泥游离氧化钙的测定甘油酒精法 F_CL_JC_SN_0021 水泥―游离氧化钙的测定―甘油酒精法 1 范围 本推荐方法采用甘油酒精法测定游离氧化钙普通硅酸盐水泥火山灰质硅酸盐水泥复合硅酸盐水泥以及制备上述水泥的熟料中游离氧化钙的测定使试样与甘油无水乙醇溶液在微沸的温度下作用生成甘油钙用苯甲酸无水乙醇标准滴定溶液滴定 3.2 酚酞指示剂溶液 3.3 氢氧化钠将0.2g 氢氧化钠(NaOH)溶于500mL 无水乙醇中 将220 mL 甘油[C 3H 5(0H)3]放入500mL 烧杯中 在不断搅拌下分批加入30g 硝酸锶然后在160下加热2但对试验无影响)冷却至60后将其倒入1L 无水乙醇中以氢氧化钠 3.5 苯甲酸无水乙醇标准滴定溶液[c(C 6H 5COOH)=0.1mol/L] 3.5.1 标准滴定溶的配制 将苯甲酸(C 6H 5COOH)置于硅胶干燥器中干燥24h 后贮存在带胶塞(装有硅胶干燥管)的玻璃瓶内 1000从中称取0.04置于150 mL 干燥的锥形瓶中装上回流冷凝器 立即以苯甲酸无水乙醇标准滴定溶液(0.1mol/L)滴定至红色消失 继续加热煮沸至红色出现如此反复操作 苯甲酸无水乙醇标准滴定溶液(0.1mol/L)对氧化钙的滴定度按下式计算 T CaO ──每毫升苯甲酸无水乙醇标准滴定溶液相当于氧化钙的质量 V 1──滴定时消耗苯甲酸无水乙醇标准滴定溶液的总体积 m 1──氧化钙的质量 4 仪器 4.1 电炉 4.2 玻璃器皿锥形瓶 5 试样制备 将送来的样品采用四分法缩分至约100g 用磁铁吸去筛余物中金属铁将样品充分混匀后 1 1 1000V m T CaO ×=中国分 析网

白酒酿造工理论知识考核试卷_A卷

白酒酿造工（化验员）理论知识考核试卷A卷 单位：姓名：得分： 一、填空题（每空1分，共40分） 1、列举出我国白酒的五大香型：浓香型、酱香、清香、 米香和兼香型。 2、用移液管转移液体以前，应先用待吸溶液润洗移液管2-3 次。 3、米香型白酒是以米为原料，经半固态发酵、蒸馏、储存、 勾兑而制成的，具有小曲米香型特点的蒸馏酒。 4、按数值修约规则，将修约成五位有效数字：。 5、百分浓度有以下几种表示质量、体积、质量/体积。 6、中国白酒的传统蒸馏器具有甑桶。 7、实验室最常见的滴定管有酸式和碱式。 8、黄酒按其总糖含量分为干黄酒、半干黄、半甜黄酒和甜黄酒。 9、白酒按糖化发酵剂分为大曲、小曲和麸曲白酒。 10、以谷物、薯类、糖蜜为原料，经发酵、蒸馏而制成的含水酒精，即食品工业专用的食用酒精。 11、葡萄酒按其色泽可分为白葡萄酒、红葡萄酒和桃红葡萄酒。 12、浓香型白酒的主体香气成份是己酸乙酯，清香型白酒的主体香气成份是乙酸乙酯和乳酸乙酯。 13、滴定管读数应读到小数点后第 2 位，即要求估计到mL。 14、刚经高温干燥后的试剂药品，应先放入干燥器内冷却再称量。 15、除了强碱溶液外，其他溶液作为滴定液时一般均可以采用酸式 滴定管。 16、GB 2757中，国家规定白酒中甲醇含量为0.04 g /100ml 、杂醇油为0.02 g/100ml 。 17、化学试剂的纯度AR、CP、LR、GR分别表示、分析纯、化学试剂、实验纯、优级纯。 18、溶液由溶质和溶剂组成。 19、分析天平和分光光度计的干燥剂是硅胶。 20、对于滴定方式来说，被测物质的物质量，可通过直接或 间接求得。

95%酒精固定蛋白甘油凝集法细胞块的制备

95%酒精固定蛋白甘油凝集法细胞块的制备 发表时间：2018-12-07T10:39:31.317Z 来源：《医药前沿》2018年30期作者：陈杨刘盛均 [导读] 细胞块技术是将可疑病变的细胞学标本中单个细胞富集成团、固定脱水处理制作成细胞团蜡块，进一步HE切片染色、免疫组化染色等的新技术。 （绵阳市中心医院病理科四川绵阳 621000） 【摘要】目的：研究95%酒精固定蛋白甘油凝集法细胞块的制备。方法：取新鲜鸡蛋的蛋清至于烧杯中。按7:3比例加入甘油，以玻璃棒充分混匀，搅拌至均匀泡沫状，放置于冰箱冷藏室过夜。去除表面凝结浮沫，收集下部澄清液于200ml滴管瓶，置于4～8摄氏度冰箱保存。每100ml可加入0.5g麝香草酚以防腐。结果：细胞块完整，不易破碎，可多次重复切片；HE染色镜下细胞富集，有效成分多，核浆分明；免疫组化染色结果定位准确，易于判读；可进行FISH、PCR、重排、测序等分子病理检测。结论：可在各级医院病理科开展。 【关键词】细胞块；95%酒精；蛋白甘油 【中图分类号】R36 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）30-0317-01 细胞块技术是将可疑病变的细胞学标本中单个细胞富集成团、固定脱水处理制作成细胞团蜡块，进一步HE切片染色、免疫组化染色等的新技术。根据文献报道主要方法有琼脂包埋法、固定沉淀法、血浆凝血酶沉淀法、鸡蛋清凝集法等，方法各有优劣[1-5]。根据自身条件及临床要求，本科室摸索出了95%酒精固定蛋白甘油凝集法细胞块技术，该法操作简单，成本低，效果理想，现介绍如下。 1.材料与方法 1.1 材料 脱落细胞学、细针穿刺细胞学等病理细胞学标本。 1.2 仪器与试剂 斜角式低速离心机，10ml离心管，2ml吸管，蛋白甘油，95%酒精。 1.3 方法 1.3.1蛋白甘油制备：取新鲜鸡蛋的蛋清至于烧杯中。按7：3比例加入甘油，以玻璃棒充分混匀，搅拌至均匀泡沫状，放置于冰箱冷藏室过夜。去除表面凝结浮沫，收集下部澄清液于200ml滴管瓶，置于4～8摄氏度冰箱保存。每100ml可加入0.5g麝香草酚以防腐。 1.3.2液基细胞学制片后剩余的细胞学标本，静置2小时后，倾去多余上清液，留10～20ml标本液，震荡混匀，将细胞悬液移至10ml离心管，2500r/min离心5min。 1.3.3缓慢倾去上清液，加入2ml的95%酒精，若细胞沉淀较少则加入2滴蛋白甘油，用吸管吹打混匀后完全吸入吸管，倒立使细胞悬液完全收集于吸管头，编号后剪去吸管尖多余部分，放入离心机4000r/min，离心10min。 1.3.4弃去上清，剪刀剪去吸管头，轻轻倒出细胞块于滤纸中，包裹后放入已编号组织包埋盒，与活体病理检查组织同放于全自动病理组织脱水机中，进行后续处理。 1.3.5常规包埋、切片、HE染色、诊断。根据诊断需要，进行特殊染色、免疫组化、分子病理等检测。 2.结果 细胞块完整，不易破碎，可多次重复切片；HE染色镜下细胞富集，有效成分多，核浆分明；免疫组化染色结果定位准确，易于判读；可进行FISH、PCR、重排、测序等分子病理检测。 3.讨论与体会 3.1 操作要点 纯鸡蛋清太过粘稠，不易吸取，且离心后容易与沉淀物分层；本科室采用甘油，按照蛋清、甘油7:3的比例混匀制成蛋白甘油使用，稀释度合理，离心后细胞团块坚实，不易散。 该方法的原理是95%酒精使蛋白变性凝固作为基质对分散的单个细胞进行包裹，胸膜腔积液等含蛋白较多的体液标本，初次离心后可留1ml上清液不必倾去，加入95%酒精可使蛋白析出，再次离心后形成自体蛋白基质；如细胞团小则同时加入蛋白甘油作为基质。尿液、脑脊液、细胞穿刺液等细胞量较少，应加入蛋白甘油作为基质，才能制作出较完整的细胞块。 为了使蛋白质充分变性形成蛋白基质网络细胞，在标本中加入95%酒精和蛋白甘油后，必须用吸管反复吹打混匀。 血性标本液，需在初次离心沉淀后，加入细胞清洁液，充分震荡后再次离心，去除红细胞后再按照上述方法制作细胞块。 3.2 技术缺陷 对于浆膜腔积液，特别是临床怀疑恶性肿瘤患者的浆膜腔积液，阳性检出率高，效果显著；但是对于尿液、脑脊液等细胞较少的体液标本，做出的细胞块有效成分较少，仅作为辅助运用； 部分细胞块进行免疫组化染色后发现背景较深，估计与自体蛋白有关，后续将进行相关工作的研究。 3.3 技术优势 细胞学病理检查，是通过有创或微创的方法，采集人体可疑病变部位的细胞及组织碎片，经病理细胞学技术员制片，病理医师显微镜下观察细胞形态，进行疾病诊断的病理学方法之一。与活体组织检查相比，具有创伤小、标本易获得、报告时限短等优点。但在诊断阳性率、准确性方面，与活体组织检查有一定差距，以及无法进行特殊染色、免疫组化、分子病理等进一步检测与诊断，限制了病理细胞学的发展。我科开展的蛋白甘油凝集法细胞块制作技术，将有可疑病变的细胞学标本制作成细胞块，固定、脱水、透明、浸蜡、包埋后，作出的蜡块具有能多次切片、易于长期保存，可进行特殊染色、免疫组化和分子病理诊断等优点，提高细胞学诊断的阳性率，是对细胞学诊断有力的补充和扩展。 对于文献报道的琼脂包埋法、固定沉淀法、血浆凝血酶沉淀法、鸡蛋清凝集法等[1-4]。琼脂包埋法较复杂，琼脂不易得且需要加热溶解，其对脱水影响也很大，现已很少使用；血浆凝固酶难以采购；固定沉淀法作出的细胞块易碎不坚固，对于细胞很少的体液难以成功，缩小的细胞块可用范围。经反复实验总结，95%酒精固定蛋白甘油凝集法成功率高适用于所有送检体液标本、且操作简单，稳定兴高，材料易得，成本低廉，得到的细胞块较坚实完整、脱水处理佳，HE染色红蓝对比分明、免疫组化染色结果清楚。 本科室从2013年至今用此方法制作了细胞块4000余例，免疫组化染色1300余例，证实该方法切实可行，可在各级医院病理科开展。