室温放置的酸奶中乳酸菌分析
室温放置的酸奶中乳酸菌分析
食品科学与工程：呼庆真
指导老师：吴士云
摘要：本文通过对室温放置的酸奶的品质进行鉴定，分析酸奶贮藏过程中各乳酸菌种的消长演替情况，通过对酸奶的耐受性分析、测定总酸、乳酸菌总数、菌种的菌种菌落形态、细胞形态的连续培养观察，得出在常温下贮藏和销售时酸奶乳酸菌含量在第五天为 1.2×106cfu/mL（福淋酸奶30℃时），第十天为1.5×106cfu/mL（光明酸奶30℃时）。酸度均大于70°T，在国标的范围之内。同时，结合生化试验分析菌种的耐酸耐高温特性，应用该菌种进行产品发酸试验，表明此菌应用范围宽，经驯化后可用于其它非乳制品的发酵，为研发活菌制剂提供基础资料。
关键词：酸奶，乳酸菌,保加利亚杆菌,嗜热链球菌，耐酸性.
前言
近些年来，随着人们对微生物益生作用认识的不断提高，越来越多的乳酸菌被广泛应用于医疗、食品和饲料领域。不同种类的乳酸菌适应生长在不同的环境条件下，它们在自然界分布广泛。人类及动物的肠道内、奶制品中及一些植物的表面都存在着不同类型的乳酸菌。
随着人们生活水平的提高及自我保健意识的增强，乳制品日益受到广大消费者的喜爱。酸奶中含有大量的活性乳酸菌。乳酸菌可定居在人体的鼻黏膜或消化道等处，所产生的代谢产物能降低肠道内的pH值，抑制肠道中腐败菌生长，减弱腐败菌在肠道的产毒作用，从而维持体内微环境，尤其是肠道内正常的微生态平衡[1]。用于酸奶的乳酸菌菌种主要是嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌；益生菌酸奶的乳酸菌菌种有嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌等。乳酸菌活菌体需达到一定数量，才有可能到达并定植在人体肠道内，抑制有害菌的增殖和活动，维持肠道的微生态平衡，增进人体的健康。对这类产品质量检测时进行活菌计数，即用乳酸菌数量来评价活性[2]。因此，酸奶中活性乳酸菌的含量是评价产品对于人体营养与保健作用的重要指标，而酸奶的pH值及酸度直接影响成品的质量、风味和口感。新的酸奶国家标准(GB2746-1999)中规定产品中的乳酸菌数量不得低于1×106cfu/mL，酸度应≥70°T[3]。
酸奶营养丰富，与普通牛乳比较，其蛋白质和钙更易被人体消化吸收。酸奶中含有大量活力较强的乳酸菌，它们定居在人体的嘴、鼻黏膜或消化道、肠道等处。在这些小环境里，乳酸菌产生的乳酸可以抑制一些腐败菌和病原菌的繁殖，从而维持体内这些小环境尤其是肠道内正常的微生态平衡[4]。酸奶还有增强消化、促进肠道蠕动和机体物质代谢，产生抗菌素、防衰老、抗肿瘤的作用。在新世纪的今天，酸奶作为世界公认的长寿食品之一，正愈来愈受到人们的重视和喜爱。
酸度是消费者对普通凝固型酸奶接受程度的一项重要指标，因为对于这种保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌共生发酵的产品来说，酸度与风味和质量变化息息相关[4]。高酸度的产品在我国特别是东北地区很难被接受，所以研究酸奶在贮存过程中的酸度和pH值的变化是十分必要的。而酸奶中的乳酸菌数是反映酸奶营养价值的最主要指标。酸奶一般均要求贮藏条件为2~4℃的低温环境，而我国某些地区由于条件限制无法完全实现冷链运输和销售。
本文将酸奶制品进行较长期放置，通过分析酸奶中乳酸菌的消长，随着酸度的增加，乳酸菌数量有所变化，存活的活菌的耐酸性能有所增强，结合生化试验分析菌种的耐强酸条件，为研发活菌制剂提供基础资料。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1 供试样品
福淋酸奶（市售，当日），光明酸奶（市售，当日）
1.1.2培养基
1.1.1.1 MRS培养基[5]
蛋白胨10.0g，牛肉浸粉8.0g，酵母浸粉4.0g，葡萄糖20.0g，磷酸氢二钾2.0g，柠檬酸氢二铵2.0g，乙酸钠5.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.04g，琼脂14.0g，吐温80 1.0g，pH值6.5±0.2，温度25℃。
1.1.1.2 改良M17琼脂培养基（用于乳酸菌球菌的分离培养）[6]
胰蛋白胨5.0g，鱼肉浸出汁5.0g，牛肉膏8.0g，酵母浸膏2.5g，维生素C0.5g，硫酸镁0.28g，甘油10.0g，乳糖3.0g，醋酸钠2.0g，磷酸二氢钾5.0g，琼脂18.0g，蒸馏水1000ml，pH值6.4，121℃灭菌30min。
1.1.1.3 改良MRS培养基(用于乳酸菌杆菌分离培养)[7]
蛋白胨4g，牛肉膏2g，鱼肉浸出汁5.0g，酵母浸膏2.5g，葡萄糖20g，吐温80 0.1g，醋酸钠5g，磷酸氢二钾2g，柠檬酸二胺2g，硫酸锰0.28g，硫酸镁0.28g，硫酸亚铁0.03g，琼脂18g，蒸馏水1000ml，pH值6.4，121℃灭菌30min。
1.1.3 主要试剂
胰蛋白胨、鱼肉浸出汁、牛肉膏、酵母浸膏、维生素C、硫酸镁、甘油、乳糖、醋酸钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、琼脂、蛋白胨、葡萄糖，吐温80、柠檬酸二胺、硫酸锰、硫酸亚铁、乙酸钠、氢氧化钠、冰醋酸、乙醇、酚酞指示剂、蒸馏水、甲基红试剂、革兰氏染色液。
1.1.4 仪器
3T75-2型隔水式培养箱（余姚县恒温箱厂）；
01J2003-04型立式压力蒸汽灭菌器筒（上海东亚压力容器制造有限公司）；
HH数显恒温水浴锅（金坛市金城国胜实验仪器厂）；
PHS—3D精密PH计（上海精密科学仪器有限公司）；
手持式折光仪（0~32%成都泰华光学公司）；
DHG-9101-3SA型电热恒温鼓风干燥箱（上海三发科学仪器有限公司）；
AL204分析天平（梅特勒—托利多仪器（上海）有限公司）；
C21—SK2101电磁炉(广东美的生活电器制造有限公司)。
1.2方法
1.2.1样品处理
将采集样品分别存放于35℃、10℃的条件下，连续放置，其中福琳酸奶于采样当天开始。福淋酸奶每天取样一次，光明酸奶保质期每隔两天取样，对样品进行乳酸菌计数、测定PH值及滴定总酸，直至酸奶保质期结束。
1.2.2 试验流程
酸奶→定期稀释培养→对培养后的乳酸菌进行计数并观察细胞形态、测量酸奶酸度值级PH值→进行乳酸菌生物耐受性分析→试验后期观察酸奶品质并对其品质进行鉴定。
1.2.3 乳酸菌细胞形态及菌落形态观察
定期取培养后的乳酸菌采用革兰氏染色观察乳酸菌的细胞形态，平板培养观察菌落形态。并拍摄相关图片。
1.2.4 乳酸菌生物耐受性分析
1.2.4.1 耐酸试验
将MRS液体培养基用酸度计调节pH为2.0、3.0、4.0、5.0和6.0，分别取各pH的培养基5mL置于试管中，灭菌备用。将分离的菌株接种于MRS液体培养基中培养24h后，取新鲜菌液按1%(v/v)分别接种于上述各pH的试管中，置于37℃培养24h，观察细菌生长情况。同时分别在培养8h后，从不同pH的培养物中取出适量的培养物接种于新鲜MRS液体营养
培养基，观察细菌生长情况;对怀疑无生长的试管，用MRS平板划线培养予以确认。
1.2.4.2 高温耐受性
将选出的乳酸菌接种MRS培养液，分别置于水浴中30℃、60℃培养24h，取样测定细菌存活率。
1.2.5 乳酸菌计数[8]
定期取样液，然后梯度稀释样液，将稀释液分别进行平板涂布接种于改良M17培养基、改良MRS培养基，置于厌氧罐中培养48h，观察菌落形态特征，进行菌落计数，计算后即得乳酸菌数。
菌落数计数公式为：
N=∑C/(n1+0.1n2)d
计算式中：
N 样品中菌落数；
∑C 平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和
n1 第一个适宜稀释度平板数
n2 第二个适宜稀释度平板数
d 稀释因子(第一稀释度)。
1.2.6 滴定总酸及pH的测定
用PHS—3D精密PH计直接测定待测酸奶的pH值，以及当时的温度，记录数据。用标定后的0.1mol/L的NaOH溶液滴定，测定出酸奶的酸度值。
1.2.7 制品中乳酸菌发酵用途的研究[9]
酸奶乳酸菌做发酵剂发酵泡菜制品（风味酸豆角）
泡菜制作工艺流程：
菌种活化→接种
↓
豆角洗净→沥干→切段→装瓶、密封→发酵→成品
↑↓
盐水→灭菌分析
2 结果与分析
2.1 制品PH和酸度的分析
购置新上市新鲜的福淋酸奶和光明酸奶，分别于35℃、10℃的条件下，连续放置培养，测定两种酸奶制品的PH及酸度变化，结果见表1和表2（以下以A代表福淋酸奶，B代表光明酸奶）。
表1-a 酸奶放置过程中PH值的变化A样品
Table 1-a Yogurt placed process PH change A sample
温度时间
0d 1d 2d 3d 4d 5d 6d 7d
10℃ 4.20 4.15 4.09 4.05 4.00 3.96 3.92 3.86
30℃ 4.20 4.05 3.9 3.82 3.75 3.73 3.70 3.68
表1-b 酸奶放置过程中PH值的变化B样品
Table 1-b Yogurt placed process PH change B sample
温度时间
0d 2d 4d 6d 8d 10d 12d 14d 16d 18d
10℃ 4.4 4.33 4.26 4.18 4.12 4.07 4.03 3.98 3.96 3.3
30℃ 4.4 4.28 4.09 3.85 3.74 3.66 3.62 3.60 3.59 3.58
由表1-a和1-b知，福淋酸奶和光明酸奶的pH在贮藏初期基本相当，分别为4.2、4.4。随着贮藏时间延长，两种酸奶制品pH持续下降，其中福淋酸奶在30℃条件下的酸奶下降幅度较大，在第4天后基本保持不变，在10℃酸奶在保质期内PH持续降低，但PH较30℃时高。而光明酸奶在30℃时在第10天后PH保持微弱减小，在10℃时前10天内降低幅度大，后期持续降低但幅度较前期小。这说明在较适宜的温度下，酸奶中乳酸菌持续产酸，使酸奶PH降低，但随着酸度增加，乳酸菌活动受到抑制，因此酸奶PH降低幅度减小。
表2a A样品室温下酸奶贮存过程中酸度测定结果
Table2a ASample room temperature process of storage acidity determination result
温度放置时间（d）
1 2 3 4 5 6 7
30℃71 75 83 91 101 109 115
10℃71 73 79 84 89 92 97
表2b B样品室温下酸奶贮存过程中酸度测定结果
Table2b BSample room temperature process of storage acidity determination result
温度放置时间（d）
0 2 4 6 8 10 12 14 16
30℃70 72 79 86 95 104 112 117 123
10℃70 71 72 77 83 89 95 102 107
由表2知，两种酸奶的酸度值随着贮存天数的增加而不断升高，酸奶在贮存期的酸度越来越高，是酸奶后酸化现象导致的。在贮存过程中，乳酸菌继续生长繁殖，菌体的生长消耗掉残存的乳糖产生乳酸，导致酸度进一步升高，这也是酸奶pH 值不断下降的原因[10]。2.2 不同存放期间制品中乳酸菌形态和数量变化
2.2.1 制品放置期间乳酸菌的含量的测定
福淋酸奶和光明酸奶，分别于35℃、10℃的条件下，福淋酸奶放置7d，光明酸奶放置16d，并定期测定乳酸菌数量的变化，结果见表3。
表3a 室温下酸奶贮存过程中乳酸菌数测定结果A样品
Table3a Yogurt process of storage lactobacillus determination result A sample
温度时间（d）
0 1 2 3 4 5 6 7
30℃ 2.1×109 3.5×109 4.2×109 8.6×107 4.3×106 1.2×106 5.6×105 2.3×105
10℃ 2.1×109 2.5×109 3.5×109 6.3×109 2.6×108 7.9×107 4.5×106 1.2×106
表3b 室温下酸奶贮存过程中乳酸菌数测定结果B样品
Table3b Yogurt process of storage lactobacillus determination result B sample
时间
温度0d 2d 4d 6d 8d 10d 12d 14d 16d
30℃ 5.1×109 8.5×109 4.4×108 2.3×108 5.6×107 6.5×106 1.3×106 5.2×105 2.3×105
10℃ 5.1×109 7.5×109 9.4×109 4.3×109 6.7×108 6.1×107 2.3×107 7.9×106 3.5×105
注：表中分别表示30℃、10℃时乳酸菌含量，单位为cfu/mL
由表3可知，市售福淋酸奶的乳酸菌数都随着贮存天数的增加在10℃时第2天就到达最大值而后下降，在30℃时第3天到最大值。而光明酸奶在10℃时第4天到最大值，在30℃时
第2天到最大值然后开始下降。这可能是因为开始贮藏时，酸奶酸度不高，营养丰富，适宜乳酸菌生长，随着贮存时间的延长，活菌代谢产物进一步使环境酸度升高，菌体生长受到其代谢产物的抑制，同时菌体老化、死亡数增多，菌数逐渐降低。但在放置过程后期，虽然环境逐渐变差，但仍有乳酸菌存货，说明乳酸菌对环境有很强的适应能力，可驯化性很强。因此，可通过对乳酸菌菌落形态和细胞形态的观察做详细检验。
2.2.2 放置不同时间下的乳酸菌细胞形态及菌落形态
为了对乳酸菌放置过程中乳酸菌的变化进行分析，将酸奶制品在不同温度下存放，定期取样培养后观察其中相关乳酸菌种的细胞形态和菌落形态的变化。
图1 30℃第3天保加利亚杆菌菌落形态图2 30℃第3天嗜热链球菌菌落形态
图3 30℃第显微镜油镜下保加利亚杆菌图图4 30℃第3天显微镜油镜下嗜热链球菌球菌图
由乳酸菌培养过程镜检知：两种酸奶放置前期，乳酸菌基本保持典型形态，乳酸菌杆菌灰白色，扁平菌落，边缘不整齐未见异常形态出现，乳酸菌球菌微小菌落，有些透明，圆形，边缘整齐单生，偶有成对球菌[11]。其中福淋酸奶中乳酸菌由试验第4天始，菌落形态略有变小，镜检乳酸菌个体菌株，菌株形状色泽基本不变，个体略有减小。而光明酸奶中乳酸菌在第10天才出现这种变化。同时也说明制品所用乳酸菌种稳定性较好。
2．3 制品中乳酸菌耐受性的研究
在上述实验基础上，为了增强对菌种的驯化行经行分析，进行乳酸菌的耐受性实验做进一步说明。
2.3.1 酸度耐受性试验试验
取实验保存菌种，在MRS肉汤中培养36h，后取MRS液体培养基，分装在10个三角烧瓶种，分别用1mol／LHCl溶液，调节MRS液体培养基PH至1.0、2.0、3.0、4.0、5.0，每样两份。分别将菌种保加利亚乳嗜热链球菌以5%(V/V)的接种量分别接种上述各处理，37℃静置培养。在接种初始及接种后30、60、90、120、150min取上述各处理中培养菌液，进行稀释平板计数培养。本试验及后续试验中平板计数用培养基皆为MRS固体培养基，37℃下常规培养。
表4 不同PH值条件下保加利亚杆菌和嗜热链球菌菌株的存活数
Table4 different PH conditions Bulgari a bacillus and streptococcus thermophilus cultured strains live
时间
min 保加利亚杆菌活菌数嗜热链球菌活菌数
PH1 PH2 PH3 PH4 PH5 PH1 PH2 PH3 PH4 PH5
0 7.65×106 3.94×106 3.97×106 7.45×106 8.50×106 9.20×106 7.50×106 7.85×106 8.40×106
9.50×106
30 1.5×106 3.50×105 1.15×106 6.15×106 9.15×106 6.40×105 6.70×105 6.75×106 8.70×106
1.15×107
60 ＜1.00×104 ＜1.00×104 6.50×105 7.15×106 9.55×106 ＜1.00×104 ＜1.00×104 7.55×106 8.50×106 1.35×107
90 ＜1.00×104 ＜1.00×104 3.20×105 7.35×106 9.75×106 ＜1.00×104 ＜1.00×104 7.75×106 1.05×107 1.95×107
120 ＜1.00×104 ＜1.00×104 ＜1.00×104 7.25×106 1.15×107 ＜1.00×104 ＜
1.00×104 9.15×106 1.10×107
2.25×107
150 ＜1.00×104 ＜1.00×104 ＜1.00×104 7.20×106 1.15×107 ＜1.00×104 ＜1.00×104 7.75×106 1.45×107 2.70×107
注：表中＜1.00×104表示在平板上没观察到菌种
由表可知保加利亚乳杆菌在PH等于1、2时培养60min后，均不能生长，在PH等于3时120min后不能生长，而PH大于3后能够生长，说明保加利亚杆菌对低酸度适应需要通过逐渐驯化才能够逐渐适应。而嗜热链球菌在PH等于1、2时在60min后不能测到活菌，当PH大于2时能够正常生长且在PH等于5时活菌数增加，说明嗜热链球菌较保加利亚杆菌耐酸能力强，对酸性环境适应能力更强。
2.3.2 高温耐受性试验
将2株保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌分别经30℃、60℃、90℃水浴锅中培养24h进行培养，观察生长情况，结果见表5。
表5 不同温度下两种菌的耐受性
Table 5 different temperature two kinds of bacteria tolerated
温度水浴锅中放置1天
保加利亚菌株1 保加利亚菌株2 嗜热链球菌株1 嗜热链球菌株2
30℃++ ++ ++ ++
60℃- - - -
90℃- - - -
表中++ 代表能够生长且繁殖良好+ 代表能够生长-代表不能生长
由表5可知两种菌在30℃均能良好生长，在60、90下均不能生长，说明两种菌对高温耐受性都不强。可通过进一步实验对其耐受范围及可驯化范围进行研究。
2.4 制品中乳酸菌发酵用途的研究
通过乳酸菌泡菜的发酵，对乳酸菌产酸能力和乳酸菌的用途开发进一步研究，因此进行此实验。
取实验保存菌种（酸奶中乳酸菌）在调配好的液体培养基中培养48h，后以5%（V/V）的比例加入配制好的盐度3%、PH6.0的泡菜液中，然后加入新鲜洗净的豆角，封口后在30℃的培养箱中放置。观察泡菜的变化。
表6 风味酸豆角的泡制过程中的变化
Table6 The flavor of acid beans in the process of bottle changes
评价项目放置时间
1d 2d 3d 4d 5d
色泽浅青色浅青色浅青色加重色泽加重变为青色青色
气味略微酸味酸味酸味带有泡菜味道泡菜酸味泡菜酸味
味道充满生涩感生涩感生涩感减轻生涩感基本消失味道良好
质地生、脆生、脆脆感下降轻脆轻脆
酸奶乳酸作发酵剂发酵泡菜制品（风味酸豆角）试验第一天泡菜表面出现气泡泡菜坛中出现酸味，泡菜颜色基本保持原色不变。试验第二天泡菜酸味道较浓，颜色基本不变，品尝味道，略带生味。试验第三、四天泡菜变化不大，风味变得浓厚，泡菜逐渐成熟直至第五天泡菜基本可以食用。通过对泡菜质地评价，泡菜除了脆度略微减轻外，口感良好。
通过试验可以看出乳酸菌接种发酵与自然发酵相比，具有发酵周期短、盐度低、亚硝酸盐含量低，风味醇厚等优点，可进一步开展中试研究及产品的感官评价。
3 讨论
3.1 乳酸菌的鉴定及耐受性分析
根据革兰氏染色镜检结果及耐受性试验可知;用MRS乳杆菌选择培养基从2种市售酸奶中分离到2株杆菌，2株革兰阳性球菌，经鉴定2株杆菌为保加利亚乳杆菌，2株革兰阳性球菌为嗜热链球菌，均有很高的产酸、耐酸能力，且保加利亚乳杆菌比嗜热链球菌具有较好的耐高温能力。
3.2 细菌形态
本试验中所分离得到的细菌均为革兰氏染色阳性菌，细菌形态主要有两种：圆形、单个或成链存在的球菌和两端钝圆、呈杆状、单个或成链存在的杆菌。对照《常见细菌系统鉴定手册》可知：嗜热链球菌：细菌呈卵圆形或圆形，成对或形成长链存在；保加利亚杆
菌：细菌两端钝圆，呈细杆状，单个或成链存在；嗜酸乳杆菌：细菌两端钝圆，呈杆状，单个或成对或成链存在12]。
3.3 乳酸菌在室温放置中的变化
通过对2种市售酸奶的研究，掌握其在贮存期的乳酸菌数、pH值及酸度变化趋势。常温下放置，在放置初期乳酸菌数仍然符合国家标准的规定，仍然满足酸奶提供给人体活菌的保健功能，但不同生产厂家可能因为菌种不同、生产工艺不同以及原料的差别造成贮存后期酸度及pH值变化的较大差异，有些与出厂初期相比口感已有较明显的变化。从以上分析可知，酸奶的生产与销售，只要在菌种、原料、生产工艺等方面多加改进，可以使酸奶销售的环境条件放宽，降低冷链销售费用，或者在冷藏销售条件下使酸奶的货架期延长，扩大酸奶的销售范围，提高经济效益[13]。
3.4 乳酸菌发酵能力及用途研究
在泡菜发酵过程中产生乳酸等多种酸性物质，其发酵液pH值不断降低。在较低的pH值条件下，乳酸菌仍然能够生长，继续发酵产酸，有利于提高泡菜的营养价值。在利用乳酸菌发酵泡菜过程中通过发酵时间、产酸速度等的观察得出酸奶中两种乳酸菌发酵能力强、耐酸性较好[14]。
4 结论
1 酸奶中乳酸菌的细胞形态均为典型乳酸菌形态。
本文通过实验可知酸奶在室温放置下，乳酸菌形态基本不变，保持典型形态。但酸奶的保质期变短了。光明酸奶在30℃下10天后乳酸菌含量就不打标。福淋酸奶在30℃下在第4天后乳酸菌含量不达标。
2 酸奶中乳酸菌的可驯化性强。
通过酸奶中乳酸菌的耐受性试验和泡菜试验可知：酸奶中乳酸菌有很强的训化行。
3 酸奶中乳酸菌的卡发利用充满前途。
酸奶中含有大量的活性乳酸菌。乳酸菌可定居在人体的鼻黏膜或消化道等处，所产生的代谢产物能降低肠道内的pH值，抑制肠道中腐败菌生长，减弱腐败菌在肠道的产毒作用，从而维持体内微环境。且酸奶可驯化行强，因此酸奶中乳酸菌的开发利用充满前途。
致谢：在这几个月的实验时间里，我收获颇多。“慢工出细活”这句俗语，我在实验的过程中逐渐体会到它的含义。很多的问题不是一时半会就能解决的，需要一步一步的摸索，要有足够的耐心去琢磨实验中的每一个步骤，找出其中的不足与失误，进而弥补和改正，这样才能让实验尽可能的正确合理。在本实验完成之际，我要感谢我的指导老师吴士云老师，从论文的选题、实验及论文的最终定稿，都倾注的吴老师的心血，感谢他对我的严格要求与督促，感谢他在实验过程中给予我的耐心指导与鼓励。同时，还要感谢给予我巨大帮助的领导、老师和同学！
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Room temperature placed yogurt lactic acid bacteria growth analysis
HU Qingzhen,WU Shiyun
School of Food and Drug, Anhui Science and Technology University, Fengyang 233100, Anhui, China
Abstract: This paper This article through to the room temperature of the quality of the yogurt placed identificationanalysis yogurt during storage of the lactic acid bacteria, through the ebb of yogurt succession of tolerance analysis, determination total acid, lactic acid bacteria strains of total number, strains colony morphology, cells form that continuous culture observation at room temperature, storing and selling yogurt lactobacillus content in the fifth day for 1.2 x 106cfu/mL (FuLin yoghourt30 ℃) for the tenth 1.5106cfu/mL (Guang Ming yoghourt 30 ℃) light yogurt. 700T acidity were greater than in GB range. Meanwhile, combining the biochemical test analysis of high temperature characteristics being acidproof strains, application of the products are sour test strains indicated that this bacterium wide range, the application can be used after other than domesticated for research and development of dairy products, living bacterium fermented aims to provide basic data.
Key words:acidophilus milk; lactobacillus; Bulgaria coli;Streptococcus thermophilus;acid resistance
乳酸菌饮料项目计划书(项目投资分析)
第一章总论 一、项目概况 （一）项目名称 乳酸菌饮料项目 （二）项目选址 xx高新技术产业示范基地 项目选址应符合城乡建设总体规划和项目占地使用规划的要求，同时具备便捷的陆路交通和方便的施工场址，并且与大气污染防治、水资源和自然生态资源保护相一致。项目建设区域以城市总体规划为依据，布局相对独立，便于集中开展科研、生产经营和管理活动，并且统筹考虑用地与城市发展的关系，与项目建设地的建成区有较方便的联系。 （三）项目用地规模 项目总用地面积55854.58平方米（折合约83.74亩）。 （四）项目用地控制指标 该工程规划建筑系数57.08%，建筑容积率1.01，建设区域绿化覆盖率6.37%，固定资产投资强度174.22万元/亩。 （五）土建工程指标
项目净用地面积55854.58平方米，建筑物基底占地面积31881.79平 方米，总建筑面积56413.13平方米，其中：规划建设主体工程39466.74 平方米，项目规划绿化面积3591.18平方米。 （六）设备选型方案 项目计划购置设备共计121台（套），设备购置费5945.32万元。 （七）节能分析 1、项目年用电量944089.70千瓦时，折合116.03吨标准煤。 2、项目年总用水量23864.60立方米，折合2.04吨标准煤。 3、“乳酸菌饮料项目投资建设项目”，年用电量944089.70千瓦时， 年总用水量23864.60立方米，项目年综合总耗能量（当量值）118.07吨标准煤/年。达产年综合节能量29.52吨标准煤/年，项目总节能率25.04%， 能源利用效果良好。 （八）环境保护 项目符合xx高新技术产业示范基地发展规划，符合xx高新技术产业 示范基地产业结构调整规划和国家的产业发展政策；对产生的各类污染物 都采取了切实可行的治理措施，严格控制在国家规定的排放标准内，项目 建设不会对区域生态环境产生明显的影响。 （九）项目总投资及资金构成 项目预计总投资17997.43万元，其中：固定资产投资14589.18万元，占项目总投资的81.06%；流动资金3408.25万元，占项目总投资的18.94%。
乳酸菌做酸奶
乳酸菌做酸奶 用乳酸菌做酸奶这个对于大多数人来说基本上是不会的，因为乳酸菌做酸奶这已经涉及到技术和特定的专业层面了，而我们大家一般知道的只是酸奶里面含有乳酸菌，但是要我们用乳酸菌做酸奶那是不切实际的，首先不谈技术方面，就连最基本的步骤，大家也是不知道的。 酸奶是我们子啊现实生活中经常可以喝到的，而且有很多人基本是每天都要喝酸奶的，因为大家都知道酸奶对于我们身体的好处。而乳酸菌则是制作酸奶的一个关键成分，它主要负责的就是酸奶的发酵。下面，就来说说乳酸菌做酸奶的具体方法。 材料 鲜奶，乳酸菌 做法 1、所用器皿用滚开水消毒。 2、把手彻底洗干净。 3、选用陶瓷或玻璃容器不能用铁或搪瓷器皿。 4、倒入鲜奶，再把菌扔进去，密封后放在室温15℃-20℃的地方。 5、24小时后，酸奶做成。发酵时间最长不能过48小时。 6、将菌从酸奶中滤出，奶就可以喝了(菌吃掉也是没问题的，如果以后不想再喝亲手做的酸奶的话) 7、把滤出的菌用凉开水冲洗干净，然后放回干净的容器内(必
须是陶瓷或玻璃制品)，再注鲜奶，盖好容器盖(应有透气孔若干)放于室温下(约16度左右，参考温度)，但不能放冰箱8、酸奶一次喝不完可放入冰箱，保质期为5天(要在2至6摄氏度保存，否则酸奶中有益的乳酸菌会死亡，奶就变的没有营养了，另外酸奶不要空腹喝，也是防止胃酸会杀死这些菌，失去营养价值)。 9、健康的菌每10-17天长大一倍，可分割使用。菌不要日晒，不要接触金属，不喝的时候也要每天清洗并用鲜奶侵泡，同以往一样滋润它，以防止减低药效或死去。 10、最后就是喝完酸奶后一定要漱口，不然会腐蚀牙齿。 虽然上面文章详细地介绍了乳酸菌做酸奶的具体方法，但是对于很多人来说还是不太会的，因为这个方法对于一般人来说都是挺复杂的。不过没有关系，大家如果真想学做的话，多花点时间就可以了。另外，酸奶对于人体的功效和作用是多方面的，所以大家平时可以经常食用。
民间自制酸奶--藏灵菇菌知识
民间自制保健酸奶---藏灵菇菌知识 一种菌类泡到纯牛奶里面然后牛奶变酸，这种菌也能吃，是什么菌呢？ 单位的同事问的，我小的时候也吃过，这种菌类放到纯牛奶里面会慢慢的长大，然后分离出许多许多的小的，然后小的再放到纯牛奶里面还会继续长大，吃起来有些弹性，然后纯牛奶也会变得酸酸的，但是这种菌是有益菌，经常喝用这种菌做成的酸牛奶对身体很好，这个就是民间流传的叫做“藏灵菇”的菌类。现在很多地方都有。雪莲菌泡牛奶好吗？那个对身体有什么好处科学吗 一位波兰医学教授因工作赴印度及西藏，不幸患肝癌，当地的喇嘛用雪莲菌给他治疗，经过一年半后，他的癌症细胞消失，身体完全康复。在他离开西藏回国前，他请求喇嘛把一些雪莲菌送给他，作为一件造福人类的礼物。到目前为止，这些雪莲菌已从亚洲遍布美国和欧洲。 西藏雪莲菌的功效：含有人体所需的营养，有降低胆固醇、调整血压、防止癌细胞的扩散、有规律的助长肝脏、脾脏及胰脏的生命力，调整身体、消除疲劳的功效。可制造抗菌素，以及抵抗和消除部分器官感染的传染病。治疗心脏病、治疗胃和十二指肠，治疗和刺激肾和膀胱功能。 雪莲菌的供养： 1、将两汤勺半分量的菌种浸入鲜奶中24小时。 2、将浸养牛奶的雪莲菌倒入滤网中，牛奶由滤网滤入容器，然后将滤网内的雪莲菌用凉开水冲洗干净，再加入半斤鲜牛奶浸养着，用一层纱布遮盖防尘。 3、雪莲菌牛奶最好在临睡前饮用，每饮20天后，需停10天。在此期间内任何奶类品都不可饮用。在停饮雪莲菌牛奶期间，雪莲菌照常过滤、冲洗及更换鲜牛奶。 5、雪莲菌需放置在通风的房间。不可密封。不可放在冰箱内。 6、雪莲菌供养出的是带酸味的牛奶（实在不适者可加点蜂蜜，但不可放糖）。
酸奶中优势微生物的分离及乳酸菌饮料的制作
酸奶中优势微生物的分离及乳酸菌饮料的制作 滕小艳 生命科学学院生物科学专业2006级1班指导老师：宋波 摘要：为了解我们日常饮用的酸奶中益生菌的基本情况，本次实验通过酸奶的制作，菌种的活化，传代，分离鉴定和平板划线等方法，对其中的2种菌进行镜检和革兰氏染色以确定其类型，；然后用1种或2种等量混合的方法，发酵制成的产品，比较其发酵性能。 结论：在琼脂培养基上，圆形稍扁平的黄色菌落，及其周围培养基变为黄色者，即为乳酸菌。乳酸菌根据细胞为球状或杆状，可分为两大类，即为乳酸链球菌和乳酸杆菌族。嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌混合发酵的酸奶风味明显优于嗜酸乳杆菌单独发酵。凝乳时间也大为缩短。 关键字：保加利亚乳杆菌嗜酸乳杆菌嗜热链球菌革兰氏染色混合发酵 Yogurt microorganisms and lactobacillus drink production TengXiaoYan Life science college of biological science class 1 grade 2006 ，instructor: song bo Abstract: in order to understand our everyday drinkable probiotic yogurt, the basic condition of this experiment through, yogurt, strains of activation, separation and identification of flat nestin crossed, the method of the two kinds of bacteria for gram's staining and to determine the types. Then use one or two equal mixing method, fermented product, compares the performance of fermentation. Conclusion: in AGAR medium, circular slightly flat yellow, and its surrounding medium colony, to become yellow lactobacillus. According to the cells to aspen, globular or can be divided into two categories, namely, streptococcus and lactobacillus to lactic acid. Acidophilus and Key words：Bulgaria lactobacillus acidophilus streptococcus thermophilus cultured mixed fermentation gram's staining. 嗜酸乳杆菌存在于人类和一些动物的小肠内，它在代谢过程中产生能产生乳酸﹑过氧化氢﹑乳酸杀菌素和类细菌素，从而抑制肠道内有害菌的生长，调整胃肠环境，同时嗜酸乳杆菌还有防治结肠癌和降低体内胆固醇的作用。 由于嗜酸乳杆菌优良的保健功能及耐酸和耐胆汁的特点，因而被称为第三代乳酸发酵剂，发展前景十分广阔，但嗜酸乳杆菌的生产特性差，凝乳时间长，风味口感不好，本研究利用球菌和杆菌之间相互促进的共生作用，将嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌混合培养，以求得最佳的生产效果，从实验结果可以看出：两种菌混合的产酸能力要高于单独培养。影响凝乳时间各个因素的主次顺序为：其中接种量对对凝乳时间的影响要远远大于其它三个因素。影响产品感官评定指标各个因素的主次顺序为：其中加糖量对感官评定指标的影响最大，其次为接种量和培养温度，菌种配比的影响最小。综合考虑各因素对凝乳时间和感官评定的影响后得出和混合发酵生产酸奶的最佳工艺参数：接种量，加糖量，培养温度。 1．材料和方法
乳酸菌饮料项目可行性方案
目录 第一章概述 第二章项目建设单位说明第三章建设背景 第四章市场调研预测 第五章产品规划方案 第六章项目选址 第七章工程设计方案 第八章项目工艺及设备分析第九章项目环境分析 第十章安全经营规范 第十一章项目风险评估 第十二章节能方案分析 第十三章计划安排 第十四章项目投资方案 第十五章项目经济效益可行性第十六章项目综合评价 第十七章项目招投标方案
第一章概述 一、项目概况 （一）项目名称 乳酸菌饮料项目 （二）项目选址 xx工业示范区 节约土地资源，充分利用空闲地、非耕地或荒地，尽可能不占良田或少占耕地；应充分利用天然地形，选择土地综合利用率高、征地费用少的场址。项目选址应符合城乡建设总体规划和项目占地使用规划的要求，同时具备便捷的陆路交通和方便的施工场址，并且与大气污染防治、水资源和自然生态资源保护相一致。场址应靠近交通运输主干道，具备便利的交通条件，有利于原料和产成品的运输，同时，通讯便捷有利于及时反馈产品市场信息。 （三）项目用地规模 项目总用地面积22824.74平方米（折合约34.22亩）。 （四）项目用地控制指标 该工程规划建筑系数66.00%，建筑容积率1.62，建设区域绿化覆盖率7.57%，固定资产投资强度170.94万元/亩。 （五）土建工程指标
项目净用地面积22824.74平方米，建筑物基底占地面积15064.33平 方米，总建筑面积36976.08平方米，其中：规划建设主体工程22624.61 平方米，项目规划绿化面积2799.83平方米。 （六）设备选型方案 项目计划购置设备共计115台（套），设备购置费1755.74万元。 （七）节能分析 1、项目年用电量1378584.14千瓦时，折合169.43吨标准煤。 2、项目年总用水量8818.72立方米，折合0.75吨标准煤。 3、“乳酸菌饮料项目投资建设项目”，年用电量1378584.14千瓦时，年总用水量8818.72立方米，项目年综合总耗能量（当量值）170.18吨标 准煤/年。达产年综合节能量69.51吨标准煤/年，项目总节能率28.54%， 能源利用效果良好。 （八）环境保护 项目符合xx工业示范区发展规划，符合xx工业示范区产业结构调整 规划和国家的产业发展政策；对产生的各类污染物都采取了切实可行的治 理措施，严格控制在国家规定的排放标准内，项目建设不会对区域生态环 境产生明显的影响。 （九）项目总投资及资金构成 项目预计总投资7542.71万元，其中：固定资产投资5849.57万元， 占项目总投资的77.55%；流动资金1693.14万元，占项目总投资的22.45%。
酸乳中乳酸菌的测定
实验乳及乳制品中乳酸菌的测定 一、目的 1、解酸乳中乳酸菌分离原理 2、学习并掌握酸乳中乳酸菌菌数的检测方法。 二、原理 活性酸奶需要控制各种乳酸菌的比例，有些国家将乳酸菌的活菌数含量作为区分产品品种和质量的依据。由于乳酸菌对营养有复杂的要求，生长需要碳水化合物、氨基酸、肽类、脂肪酸、酯类、核酸衍生物、维生素和矿物质等，一般的肉汤培养基难以满足其要求。测定乳酸菌时必须尽量将试样中所有活的乳酸菌检测出来。要提高检出率，关键是选用特定良好的培养基。采用稀释平板菌落计数法，检测酸奶中的各种乳酸菌可获得满意的结果。 三、材料 1、培养基 改良MC培养基（MRS培养基，改良CHALMERS培养基，M17培养基）。 2、仪器和器具 无菌移液管（25ml,1ml），无菌水（225ml带玻璃珠三角瓶，9ml试管），无菌培养皿，旋涡均匀器，恒温培养箱。 四、流程 酸奶→稀释→制平板→培养→检查计数 五、方法 1、样品稀释 先将酸奶样品搅拌均匀，用无菌移液管吸取样品25ml加入盛有225ml无菌水的三角瓶中，在旋涡均匀器上充分振摇，务必使样品均匀分散，即为10-1的样品稀释液，然后根据对样品含菌量的估计，将样品稀释至适当的稀释度。 2、制平板 选用2~3个适合的稀释度，培养皿贴上相应的标签，分别吸取不同稀释度的稀释液1ml 置于平皿内，每个稀释度作2个重复。然后用溶化冷却至45℃左右的MC培养基倒平皿，迅速转动平皿使之混合均匀，冷却成平板。 3、培养和计数 将平皿倒置于37℃恒温箱内培养72h，观察长出的细小菌落，计菌落数目，按常规方法选择30~300个菌落平皿进行计算。 六、结果 1、指示剂显色反应 乳酸菌的菌落很小，1~3mm，圆形隆起，表面光滑或稍粗糙，呈乳白色、灰白色或暗黄色。由于产酸菌落周围能使CaCO3产生溶解圈，酸碱指示剂呈酸性显色反应。 2、镜检形态 必要时，可挑取不同形态菌落制片镜检确定是乳杆菌或乳链球菌。保加利亚乳杆
乳酸菌饮料的研究现状与发展趋势
乳酸菌饮料的研究现状及展望 摘要：阐述了乳酸菌饮料的概念及其营养与保健作用及其发展的现状，指出了我国乳酸菌饮料市场存在的问题并给出了解决对策，同时预测其发展前景。 关键词：乳酸菌饮料：问题：对策； 随着我国消费饮食习惯已经从精细转变为健康、绿色，代表着健康的益生菌制品将会进一步扩大市场份额。乳酸菌饮品也不断走向成熟，新技术不断发展，迎合消费者口味和理念的新产品不断涌现。 1乳酸菌发酵饮料的概念及其保健作用 1.1乳酸菌及其代谢产物的营养与保健作用 乳酸菌是指那些能发酵糖产生大量乳酸的细菌总称。从形态上可分为球菌和杆菌。呈球形的菌有乳球菌、片球菌及明串珠菌属;呈杆状的菌有乳杆菌及双歧杆菌两个属。从发酵类型来看,可分为同化和异化两个类型。常用的菌株为乳杆菌、乳球菌及双歧杆菌属。乳酸菌的作用可分为活菌、死菌及其代谢产物两方面功能。活菌占据定居场所,抑止并排除腐败菌,其活性物质直接或间接作用于机体;死菌及其代谢产物可被机体吸收能增强机体免疫功能,促进并维持肝功能正常运转[1]。 1.2乳酸菌发酵饮料的营养和保健作用 1.2.1乳酸菌发酵饮料的营养作用 1.2.1.1蛋白质乳酸菌发酵饮料含有较丰富的蛋白质,这些蛋白质通过乳酸作用可以变成微小的凝乳,如:多肽类、胨等易被消化酶作用而被机体吸收,为机体提供能量和重新构成机体蛋白。 1.2.1.2脂肪和维生素通过乳酸菌作用可以增加发酵饮料中脂肪酸含量和维生素含量,而且脂肪酸的结构不同程度地被改变,易于消化吸收。 1.2.1.3矿物质元素发酵饮料中富含多种矿物质,如钙、钾、镁、锌、铁等。这些元素是构成机体的重要成分,同时也是维持机体正常功能的重要 物质。 1.2.2乳酸菌发酵饮料的保健作用 1.2.2.1对乳糖不耐症的治疗作用 众所周知,黄种人、黑种人肠道中的乳糖分解酶比白种人少,因此,饮用牛奶后易发生腹泻等不良反应。对于发酵饮料,由于乳酸菌可以将牛奶中20%~40%乳糖分解掉,所以喝发酵饮料不会发生 腹泻现象。 1.2.2.2降低胆固醇、抑止肾病发生 有人调查食用高胆固醇膳食的东非麻塞族人,他们同时饮用发酵饮料(酸奶),经测试其血液中胆固醇含量较低。有人用高肉食喂饲地鼠进行致肾病试验,一组用高肉食饲喂,另一组是高肉加酸奶饲喂进行对比,结果是高肉食组地鼠致肾病,而加酸奶饲喂组的地鼠血液中胆固醇、尿素氮和肌酸酐都降低,可抑制肾病发生[2]。 1.2.2.3抑菌和抗感染 乳酸菌产生的乳酸和醋酸具有杀菌作用,有些菌种如嗜酸杆菌、植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌还能产生H2O2,抑制葡萄球菌生长;此外有些菌种还可产生抗菌素,对沙门氏菌、志贺氏菌、葡萄球菌等均有拮抗作用[3]。
自制酸奶
自制酸奶 自制酸奶采用的是恒温发酵法，所以酸奶机最基本的功能就是加热和恒温，只要可以加热并可以恒温在适合的温度，这台酸奶机就可以做出酸奶；除了温度，自制酸奶的另一个主要因素就是时间，而酸奶发酵的时间并不是一成不变的，牛奶的质量、酸奶发酵粉的质量、环境温度、牛奶的初始温度还有酸奶机的恒定温度都会影响发酵时间的长短，所以即使带有定时控制功能，也是形同虚设，需要经过实践来调整，每一个因素的改变都会带来时间的变化；而且酸奶发酵好以后，即使酸奶机自动断电，也不能置之不理，必须要迅速放入冰箱冷藏，以免有害菌的侵入，这样的酸奶才是安全的。 酸奶机自制酸奶详细步骤 1.把冷冻的酸奶发酵剂从冰箱拿出 2.用开水对酸奶机的容器进行杀菌消毒 3.在容器里倒入少量的纯牛奶，再把酸奶发酵剂整小包倒入容器，用勺子或 筷子充分搅拌均匀 4.把剩余的纯牛奶倒入容器，用勺子或筷子再次搅拌均匀 5.把容器盖盖好，放入酸奶机本体内 6.冬天制作的时候，可以在本体内加入温水 7.把酸奶机的上盖盖好 8.插好插头，酸奶机开始工作；微电脑酸奶机需要设定好发酵时间（详情请 参照使用说明书）； 9.用纯酸奶作发酵源时，发酵时间6-8小时；用酸奶发酵剂作发酵源时，发 酵时间8-12小时；发酵时间会受环境温度及原料初始温度的影响，所以环境温度低或用冷藏的牛奶制作时需适当延长时间。但最长不超过14小时。（用纯酸奶作发酵源时最长不超过10小时） 10.发酵好的酸奶凝结成“豆腐花”状，温度在40℃左右可立即食用。夏天 的时候，放入冰箱冷藏下，酸奶香味纯正，口感极佳 11.酸奶在食用前，可根据自己的口味要求填加水果汁、果糖、蜂蜜等进行调 味后食用
酸奶制作及乳酸菌的分离计数
酸奶制作及乳酸菌的分离计数 一、实验目的 1、学习自制酸奶的方法。 2、熟悉从酸奶中分离和纯化乳酸菌的一般方法。 3、掌握用浇注平板法分离微生物纯种。 4、了解简便、快速厌氧菌菌落计数法的基本原理。 5、学习用简便、快速厌氧菌菌落计数法对乳酸菌进行活菌计数。 二、实验原理 酸奶又称酸乳，是以牛奶为主要原料，经乳酸菌发酵而制成的一种营养丰富、风味独特、国际流行的保健饮料。酸奶发酵中的主要生物化学变化是：乳酸菌将牛奶中的乳糖发酵成乳酸使其pH降至酪蛋白等电点附件从而使牛奶形成凝固状；其次，乳酸菌还会触使部分酪蛋白降解、形成乳酸钙和产生一些脂肪、乙醛、双乙酰和定二酮等风味物质。酸奶发酵过程通常是由双菌或多菌的混合培养实现的。其中的杆菌先分解酪蛋白为氨基酸和小肽，由此促进球菌的生长，而球菌产生的甲酸又刺激了杆菌产生大量的乳酸和部分乙醛，由此链球菌还产生了双乙酰这类风味的物质，因此，达到了稳定状态的混合发酵。 根据高层半固体培养基具有良好厌氧性能的原理，我们设计了一种适用于乳酸菌等不产气的厌氧菌进行简便快速菌落计数的方法。此法把稀释（在半固体培养基凝固前）和（在半固体培养基凝固后）集中在同一支试管中内，以不易透氧、装有高层半固体培养基的试管代替常规的培养皿平板进行菌落计数，从而使活菌计数操作简化成“试样分散----逐级稀释+常规培养---菌落计数”3步，而传统的方法则需“试样分散----逐级稀释---涂布或浇注平板---厌氧培养---菌落计数”5步。因此，本法不仅有简化操作步骤的优点，还有省略专用厌氧培养装置、缩短培养时间以及节约试剂和材料等优点。 三、实验器材 1、菌种：德氏乳杆菌保加利亚亚种、唾液链球菌嗜热亚菌（可从品牌酸奶商品中自行 分离） 2、培养基：（1）LAB半固体培养基100ml （2）MRS琼脂培养基200ml (3)MRS液体培养基10ml 3、材料：优质全脂牛奶或奶粉（内含脂肪28%，蛋白石27%，乳糖37%，矿物质6%，水分2%），蔗糖：市售优质酸奶（1瓶） 4、器皿：锥形瓶（3个）、空试管（14支）、无菌移液管（1ml*15根，10ml*2根）、培养皿（6套）、涂布棒、量筒、酒精灯、恒温水浴锅，恒温箱，冰箱
酸奶中乳酸菌的微生物学检测与酸奶的制作
乳酸菌饮料中乳酸菌的微生物学检验与酸奶的制作 摘要 本实验选用达能酸奶作为材料，通过制作改良MC和改良TJA两种培养基，观察分析比较达能酸奶在两种培养基中生成菌落的异同，并以达能酸奶作为菌源接种到奶粉液中制作酸奶，对所得酸奶进行感官评定，讨论影响菌落生成及酸奶感官的因素。 关键词：酸奶乳酸菌菌落形态菌落总数感官评价 前言 酸奶为纯绿色食品, 它是由牛奶经乳酸菌发酵制成的, 除具有鲜牛奶的营 养价值外, 因内含乳酸菌并在发酵过程中产生乳酸及B族维生素（B 2、B 6 、B 12 ）等, 可促进人体消化呼吸, 提高人的免疫力, 长期饮用既可保证钙质的需求, 又可健肠胃, 调节人体代谢,提高人的抗病能力, 使人健康长寿[1]。酸奶中的乳酸菌主要有乳杆菌、双歧杆菌和片球菌三个属，它们能够定植在人体内，起到改善营养健康状况、改善胃肠道功能、改善免疫能力、抗有害菌和抗衰老的作用[2]。对酸奶中的这些益生菌进行研究，有助于了解酸奶的保健原理，对制作更加营养、更优质的酸奶具有指导意义。 1 材料与方法 1. 1 仪器与材料 1. 1. 1 仪器 玻璃瓶（无盖，2个），电磁炉（带不锈钢锅），不锈钢杯，移液管及移液管筒，电子天平，量筒，具塞锥形瓶（带玻珠，3个），具塞试管（7支），培养皿（16个），接种环，酒精灯，载玻片（4片），光学显微镜。 1. 1. 2 材料 达能酸奶，脱脂奶粉，白砂糖，MC培养基粉末，TJA培养基粉末，擦镜纸，吸水纸，牛皮纸，保鲜膜，橡皮筋。 1. 2 培养基和试剂
1. 2. 1 改良MC培养基（每升） 大豆蛋白胨5g，牛肉膏粉5g，酵母膏粉5g，葡萄糖20g，乳糖20g，碳酸钙10g，琼脂15g，中性红0.05g，最终pH6.0±0.2。 1. 2. 2 改良TJA培养基（每升）[3] 番茄汁50mL，酵母抽提液5g，肉膏10g，乳糖20g，葡萄糖2g，K 2HPO 4 2g， 吐温-80 1g，乙酸钠5g，琼脂15g，最终pH6.8±0.2。 1. 2. 3 试剂 蒸馏水，结晶紫染液，卢氏碘液，95%的乙醇溶液，番红染液，香柏油，二甲苯。 1. 3 方法 1. 3. 1 无菌水和培养基的制备 1、无菌水的制备：量取90mL自来水于带玻珠的具塞锥形瓶中，用牛皮纸和橡皮筋封口；用7支具塞试管分别量取9mL自来水，用牛皮纸封口并用橡皮筋捆成一束。上述锥形瓶和试管在121℃下灭菌15min备用。 2、改良MC培养基的制备：称取16g改良MC培养基粉末置于不锈钢杯中，加入200mL蒸馏水，加热使其溶解完全，倒进具塞锥形瓶中用牛皮纸和橡皮筋封口，在121℃下灭菌15min备用。 3、改良TJA培养基的制备：称取12g改良TJA培养基粉末置于不锈钢杯中，加入190mL蒸馏水和10mL番茄汁，加热使其溶解完全，倒进具塞锥形瓶中用牛皮纸和橡皮筋封口，在121℃下灭菌15min备用。 1. 3. 2 乳酸菌的分离和培养 1、稀释平板分离：在无菌操作下，用移液管吸取10mL达能酸奶于冷却至45℃左右的90mL无菌水中，振荡混合，制得10-1稀释度的菌液。再从10-1稀释度的菌液中吸取1mL置于另一装有9mL无菌水的试管中，制得10-2稀释度的菌液。用上述方法重复操作，分别制得10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8稀释度的菌液。待两种培养基冷却至45℃左右时，取10-6、10-7、10-8这三种稀释度的菌液，用移液管吸取每一种菌液0.2mL滴在四个培养皿中央，然后分别向其中两个培养皿倒入15mL改良MC培养基，向另外两个倒入15mL改良TJA培养基，摇匀静置使其凝固，一共制
家庭自制酸奶实验报告
家庭自制酸奶实验报告 一、酸奶市场背景 （1）、市场上酸奶市场可谓异彩纷呈，除了之前一直受欢迎的“原味酸奶、果粒酸奶等种类，许多品牌都有了自己的洋名：风情酸奶、欧式酸奶酪、法式布丁、酸奶凝酪、希腊酸奶等。这些产品包装精美，被放在货架最显眼的位置，售价也比其他酸奶贵了不少。 （2）、选酸奶不要被名字干扰，主要观察包装上的”产品类别“一项，上面写着”发酵乳“,就是真正的酸奶。如果酸奶里加了奶、糖、发酵菌种和增稠剂以外的配料，它就叫做”风味发酵乳“,比如加了果汁、果粒、麦芽、杂粮、椰果的大部分酸奶产品都是风味发酵乳。 （3）、对于市面上销售的酸奶，消费者总是有许多疑问，酸奶里是不是放了很多添加剂？尤其是老酸奶事件曝光之后，面对精致、可口的老酸奶，想一想可能遇到“皮鞋酸奶”的隐忧，又打消了购买念头。 二、酸奶自制原因 （1）、为了家里老幼大小都能吃上安全的，美味的，价廉的，营养的，易吸收的酸奶。 （2）、为了证明你是一个入得厨房出得厅堂的上好男人（女人），告诉他（她）：我会给你幸福，但你要好好珍惜我，不然别人会把我给抢走哦！ （3）、为了让你另一半开心，自己动手，给她（他）一个惊喜。 （4）、为了让一吃牛奶就拉肚子的亲，吃上酸奶。 （5）、牛奶通过发酵变成酸奶，乳糖转化成乳酸，这样会更容易吸收营养。 三、酸奶制作原理：将乳酸菌接入牛奶，采用恒温发酵法，通过乳酸菌发酵牛奶中的乳糖产生乳酸，乳酸使牛奶中酪蛋白（约占全乳的2．9％，占乳蛋白的85％）变性凝固而使整个奶液呈凝乳状态。 四、酸奶的发酵条件： 1、将原料奶及容器作灭菌处理 2、原料奶中不能含有抗菌素等抑制细菌生长的成分 3、足够数量的乳酸活菌发酵剂 4、温度恒定（最佳发酵温度为40℃～45℃） 5、一定的发酵时间（一般发酵时间为6小时） 五、酸奶自制材料：发酵酸奶一包，纯牛奶两包，酸奶机一个，（没有酸奶机就要密封保鲜盒一个），细砂糖一包（约100克/2两），葡萄干，苹果，开水一壶，勺子两个。 六、酸奶自制流程 先清洗容器与勺子，再高温灭菌（用开水烫洗三到四遍）把细砂放进容 器中（量自己 喜欢，不放也 行） 再倒入半小杯发 酵酸奶（为了接 入菌种） 再倒入纯牛 奶（你想吃 多少就倒多 小） 用灭菌过的勺子搅 拌均匀 盖上盖子，有酸奶机的， 放进酸奶机，没有酸奶 机的，放置于干燥的地 方（温度最好控制在 45℃） 等待8个小 时。。。。。。。。 过程中不能 打开容器。 8小时后，你可以将事先准备好的水果切成粒，还有果干放进已经发酵好的酸奶里，再放一些糖来调节个人口味。不吃的话要转移到冰箱放置
乳酸菌的作用
乳酸菌的作用 ①防治腹泻和便秘； ②缓解不耐乳糖症状； ③调理妇科炎症和阴道感染； 4增强人体免疫力； ⑤缓解过敏作用； ⑥降低血清胆固醇； ⑦预防**和抑制肿瘤生长。 乳酸菌是什么 我们平时喝的酸奶、乳酸菌饮料都含有个关键成分——乳酸菌。乳酸菌是可以发酵糖类的一类肠道有益菌，广泛存在于人体的肠道中。大部分是具有改善肠道消化功能的作用。 乳酸菌的作用 大家为什么经常喝酸奶呢?就是因为里面的乳酸菌，乳酸菌对人体的功能和作用有哪些呢? 1.防治有些人种普遍患有的乳糖不耐症(喝鲜奶时出现的腹胀、腹泻等症状)。 2.促进蛋白质、单糖及钙、镁等营养物质的吸收，产生维生素B族等大量有益物质。 3.使肠道菌群的构成发生有益变化，改善人体胃肠道功能，恢复人体肠道内菌群平衡，形成抗菌生物屏障，维护人体健康。 4.抑制腐败菌的繁殖，消解腐败菌产生的毒素，清除肠道垃圾。 5.抑制胆固醇吸收，降血脂、降血压作用。 6.免疫调节作用，增强人体免疫力和抵抗力。 乳酸菌的副作用 乳酸菌素颗粒剂如果使用合理，可给您带来满意的疗效，也可能产生一些不良反应，但不是每人都发生，您可能不会遇到任何一个，不必紧张。目前还没有关于乳酸菌素可能产生的不良反应的报道。 一些药品(或食物)可能会与本品互相干扰而不宜合用，比如铋剂、鞣酸、药用炭、酊剂等能吸附本品而降低疗效，而不宜合用的还有磺胺类、呋喃唑酮类等肠道消炎药物。 食用酸奶注意事项
1.所用菌种酸奶不可以用加入果料的，更不可用果味酸奶。 2.牛奶加热的温度如过高，会杀死酸奶中的乳酸菌造成发酵失败，如温度过低又会造成发酵缓慢，以摸着不烫手为度(微波炉加热常常会造成受热不均，应该用勺子搅拌一下再试温度)。 3.不可用电饭锅的保温档进行发酵，因为保温的温度过高，保温发酵时，电饭锅必须断电。如果在冬天制酸奶，可以把瓷杯放在暖气上发酵。 4.发酵容器用带盖瓷杯最好，硬塑料杯子也可，但如被子质量不过关的话，加热消毒时容易变形。盖子很重要，乳酸菌是厌氧菌，无氧环境更有利于发酵。 5.容器消毒最好不用消毒液，因为如果冲洗不干净，会杀死乳酸菌，使发酵失败。加热消毒是最安全的方法。 6.有抗奶(含有抗生素)或还原奶(用奶粉还原成的牛奶)都不适合作制作酸奶的原料。 7.菌种酸奶因为质量不稳定偶尔也会造成发酵失败。 乳酸菌的保质日期不会很长 开瓶后您记得密封好 放入冰箱 保持活性成份
乳酸菌饮品广告策划书
伊利每益添广告策划书 客户：伊利每益添策划机构：No.1小组 组长：杨淑稚时间：2013年9月-10月 组员：吴桐臧义兰任凯莉郭凯丽李艳芬孙芳芳代玉静刘文婧张利达魏赫
一、前言 乳酸菌指发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳 性细菌的总称。由于乳酸菌有预防大肠癌发生的作用，作为一种健康饮品，乳酸菌产业在全球的年产值已超过3000亿美元。 乳酸菌饮品即以鲜乳或乳制品为原料经类培养发酵制得得乳液中加入水、糖液等调制而成得制品。成品中蛋白质含量不低于7g/l 的称为乳酸菌饮品。 中国乳酸菌市场发展迅猛，产业规模已超过200亿元人民币，中国的乳酸菌产业正处于快速发展期,在世界各国备受欢迎的乳酸菌饮品在中国市场也迅速走红，正以每年25%的速度递增。中国乳酸菌奶饮品的年总产量已突破100万吨，年产值突破50亿元人民币。 国内乳品企业已经发力乳酸菌产品市场。 二、市场环境分析 我国乳酸菌饮品产量目前正以每年25%的速度递增，而现行生产质量标准对数在保质期内的要求过低。我国急需制定与国际标准相接轨的乳酸菌奶饮品国家标准，提高生产企业的准入门槛。我国乳酸菌奶饮品的年总产量已突破50万吨，年产值突破了25亿元。但我国有相当比例的消费者缺乏对乳酸菌、益生菌的基本常识，更无从识别产品的优劣。目前我国乳酸菌奶市场竞争较为混乱，一些小品牌充斥着市场，品质和质量存在一定的问题，未来我国要加强对该领域的管理。 真对大学生我们做了一下调查,其中乳酸菌的隐形市场是巨大的，大多数人没有养成定期和乳酸菌饮品的习惯，并且还有22%的人从来没有购买过乳酸菌饮品，如果有合适的价位或者促销方式，乳酸菌饮品销售的前景是很乐观的。
酸奶中乳酸菌的研究与展望
酸奶中乳酸菌的研究与展望 食品科学与工程：呼庆真 指导老师：吴士云 摘要：本文主要分析了酸奶现状及酸奶发展趋势进行了展望。同时，对酸奶中乳酸菌的作用 进行说明。并对酸奶的现状、未来、储存方式及消费群体等方面进行分析。 关键词：酸奶，乳酸菌,室温 1概述 酸奶是以新鲜牛乳经有效杀菌,用不同乳酸菌发酵剂制成的乳制品,味酸甜细腻,营养丰富,深受人们喜爱,专家称它是“21世纪的绿色食品”,是一种“功能独特的营养品”[1]。它对人体 有较多的好处,可以维持肠道正常菌群平衡,调节肠道有益菌群到正常水平等[2];在我国,近几年生产销售的酸乳及酸乳饮品数量直线上升,品种花样繁多,很受消费者的青睐。目前市售的各种酸奶制品中,作为发酵剂的乳酸菌,通常为保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌这两株菌,乳制品中可任意添加乳粉、脱脂乳粉、乳清粉等,在最终产品中必须大量存在这些微生物[3]。 乳酸菌是一种存在于人类体内的益生菌。乳酸菌能够将碳水化合物发酵成乳酸，因而得名。益生菌能够帮助消化，有助人体肠脏的健康，因此常被视为健康食品，添加在酸奶之内。在人体肠道内栖息着数百种的细菌，其数量超过百万亿个。其中对人体健康有益的叫益生菌，以乳酸菌、双歧杆菌等为代表，对人体健康有害的叫有害菌，以大肝杆菌、产气荚膜梭状芽胞杆菌等为代表。益生菌是一个庞大的菌群，有害菌也是一个不小的菌群，当益生菌占优势时（占总数的80%以上），人体则保持健康状态，否则处于亚健康或非健康状态。长期科学研究结果表明，以乳酸菌为代表的益生菌是人体必不可少的且具有重要生理功能的有益菌，它们数量的多和少，直接影响到人的健康与否，直接影响到人的寿命长短，科学家长期研究的结果证明，乳酸菌对人的健康与长寿非常重要。 目前世界上常用于益生菌的菌种大多为乳酸菌，如嗜酸乳杆菌（Lactobacillusacidophilus）、发酵乳杆菌（Lactobacillusfermentum）、干酪/副干酪乳杆菌（Lactobacillus casei/paracasei）、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）、罗伊氏乳杆菌Lactobacillus reuteri）、鼠李糖乳杆菌（Lactobacillusrhamnosu s）、双歧杆菌（Bifidobacterium）等中的一些菌株。但并不是这些菌种中的每一株菌都可以作为益生菌，只要经过科学验证的菌株才可以作为益生菌。同时，并不是每一株益生菌都是全面手，能够发挥所有的健康功效[4]。 目前的食品和保健品市场上,很多产品的保健概念比较好,但是对人体的实际效果则很一般。益生菌常常耐受不了销售过程中的环境条件而导致含量大幅度下降,或者耐受不了胃酸和胆汁的杀菌作用而丧失活性。因此,选育耐酸和耐胆汁的益生菌菌株以保证它们能够在 人的胃酸和肠道的胆汁中生存等菌种选育课题都是非常活跃的研究领域[5]。鉴于乳酸菌在 - 1 -
自制酸奶的过程
下面是不用酸奶机的 自制酸奶 原料： 纯牛奶……………………………………500ml 原味酸奶…………………………………125ml 工具： 电饭锅、带盖瓷杯、勺子、微波炉（也可以用其他方法加热牛奶，但用微波炉不仅速度快，而且加热温度好掌握） 做法： 1．将瓷杯（连同盖子）、勺子放在电饭锅中加水煮开10分钟消毒。 2．将杯子取出倒入牛奶（7分满，牛奶如果是新开封的，本身已消毒得很好，可以不用煮开消毒），将牛奶放入微波炉加热，以手摸杯壁不烫手为度。 3．在温牛奶中加入酸奶，用勺子搅拌均匀，盖盖。 4．将电饭锅断电，锅中的热水倒掉，将瓷杯放入电饭锅，盖好电饭锅盖，上面用干净的毛巾或其他保温物品覆盖，利用锅中余热进行发酵。 5．8～10小时后，低糖酸奶就做好了。如果是晚上做的，第二天早晨就能喝到美味的酸奶了。 注意事项： 1．所用菌种酸奶不可以用加入果料的，更不可用果味酸奶。 2．牛奶加热的温度如过高，会杀死酸奶中的乳酸菌造成发酵失败，如温度过低又会造成发酵缓慢，以摸着不烫手为度。 3．不可用电饭锅的保温档进行发酵，因为保温的温度过高，保温发酵时，电饭锅必须断电。如果在冬天制酸奶，可以把瓷杯放在暖气上发酵。 4．发酵容器用带盖瓷杯最好，硬塑料杯子也可，但如杯子质量不过关的话，加热消毒时容易变形。盖子很重要，乳酸菌是厌氧菌，无氧环境更有利于发酵。 5．容器消毒最好不用消毒液，因为如果冲洗不干净，会杀死乳酸菌，使发酵失败。加热消毒是最安全的方法。
6．有抗奶（含有抗生素）或还原奶（用奶粉还原成的牛奶）都不适合作制作酸奶的原料。 7．成功的酸奶呈半凝固状，表面洁白光滑，没有乳清（淡黄色透明液体）析出，闻之有奶香味，如不怕胖又喜欢甜食，可在吃前加砂糖。不可在发酵前放糖。 8．自制酸奶保质期为2～3天。 ■制作酸奶的过程■ ◇1.准备一升的鲜奶.150G的酸奶一杯(最好选高钙低脂滴,因为健康嘛)放在室温下。 ◇2.准备一个玻璃瓶和搅拌棒.并且用沸水冲洗它们.给他们消毒。 ◇3.鲜奶用热水泡一会直到牛奶温热就可以了.大概30-40度.因为这个温度很 适合乳酸菌的繁殖。 ◇4.把温热的牛奶倒入消毒好的玻璃瓶里面,把150G的酸奶放入里面,并且搅拌均匀。 ◇5.然后用保险膜盖上。 ◇6.放入烤箱,温度大概为30-40度左右.太高或者太低都不适合乳酸菌的生长。 ◇7.六小时后取出即可。 ■制作酸奶的诀窍■ 制作所需要的定温发酵器具也可以是闷烧锅，电饭锅，保温瓶，烤箱，带烧烤功能的微波炉，烘碗机，消毒碗柜，插电保温器等等器具代替，总之就是要拥有实验精神，初次制作时多测试温度变化及发酵时间，发酵时间会随着温度降低而拉长。 ◆1.制作时所使用的器具都要先经过沸水消毒为佳。 ◆2.最适合乳酸菌发酵温度为 43－45℃ ,温度过高菌种会被杀死，过低则延长发酵时间而影响风味。 ◆3.用接种法制作的时候，购买的酸奶一定要选用生产日期最为接近的产品，因
做酸奶用菌粉好还是酸奶好呢
做酸奶用菌粉好还是酸奶好呢在炎热的夏季，如果我们自己在家里做上一杯酸奶，然后配上好看电视剧对于我们每个人来说都是极好的，但是有的人不会做酸奶，会问做酸奶用菌粉好还是酸奶好吗？答案很明显做酸奶当然是用酸奶好，菌粉有一定的局限性，而且做出来的味道也很差很多，接下来让我们一起来了解一下就酸奶用菌粉好还是酸奶好呢？原因有哪些呢？以后当我们要做的时候，也能多一份选择多一份答案。 1自制酸奶的基本原理是什么？可以不用酸奶机吗？ 自制酸奶的基本原理就是牛奶中接种乳酸菌，让它在合适的温度（常用40-42摄氏度）下大量繁殖。因为乳酸，牛奶发酵液的酸度逐渐下降，到pH值大致达到4.6左右的时候，牛奶中的酪蛋白就会缓慢地沉降下来，形成细腻的凝冻。其他杂菌虽然也存在于牛奶中，但它们的数量和乳酸菌相比实在太少，成不了气候。而乳酸菌产生的乳酸和其他抗菌物质，也让杂菌们感觉十分不舒服，无法大量繁殖。这样就保证了酸奶的安全性。 家庭自制酸奶最好用酸奶机，因为它可以提供稳定的温度，保证旺盛繁殖的一定是乳酸菌，而不是其他杂菌。酸奶机的温度是40-42摄氏度，正好是制作酸奶所用的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的最佳繁殖温度。 2用菌粉做种好还是用市售酸奶做种好？ 答案是均可。用菌粉时，加入的是冷冻干燥的菌种，它们在
温暖环境中能够“苏醒”过来发挥作用。用市售酸奶时，一定要注意买最新出厂的冷藏酸奶，因为随着储藏时间的延长和储藏温度的上升，其中活菌数会不断下降，影响制作酸奶时的效果。一定要注意，那些常温下销售的酸奶就不要用来做种了，因为它们的活菌数已经严重下降，不能保证制作酸奶的安全性。 3购买菌粉的时候，是买很多保健菌的还是最简单两种菌的？ 酸奶制作的基本要求是有足够多的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌，所以买两种基本菌的菌粉即可。其他的保健菌，如嗜酸乳杆菌、双歧杆菌、某些乳酪乳杆菌的菌株等，研究证明它们如果能够定植在人体大肠中的话，的确对健康有益。不过，如果需要这些菌的好处，前提是发酵后能够有足够的活菌数。可是，这些菌的最适发酵条件不一定和前面说的这两种基本菌一样。特别双歧杆菌，它们属于严格厌氧菌，也就是说，一见到氧气就会死亡。所以，一般家庭的酸奶制作过程很难得到活的双歧杆菌。因此，不必对菌种中的保健菌期待太高。 在夏季，特别是天气比较干燥的时候，酸奶的确是一个不错的选择，无论做酸奶用菌粉好还是酸奶好，每个人的口味都不相同，我们不能强迫每个人都按照别人的做法去做，如果你不确定，你可以用菌粉做一次酸奶然后再用酸奶做一次酸奶，进行对比，哪一种会比较好以后就用哪一种，这样就不会导致错误的判断而错失美味的酸奶。
常见甜味剂对酸奶中乳酸菌的影响
常见甜味剂对乳酸菌的影响 I.实验意义 我们从研究常见的甜味剂（阿斯巴甜、安赛蜜、三氯焦糖、糖精、木糖醇）对活性乳酸菌的影响，了解食品（如酸奶）内甜味剂是否会对乳酸菌的活性或增殖造成影响，进一步延伸成随着食品进入到人体肠道中的甜味剂对乳酸菌的产生影响的研究，从而得出甜味素对人体健康的影响的结论。而在存在于酸奶中的添加剂中，甜味剂是广泛存在的，常见的甜味剂有安赛蜜、阿斯巴甜等。本项课题在于研究甜味剂是否对存在于酸奶中的活性乳酸菌产生影响。 II.研究方法 使用控制变量法，以不添加甜味素的酸奶作为空白对照组，以甜味素的种类作为变量，别的条件不变，做出对照组。一定时间内观察各组乳酸菌的存活数量及其存活状态，再分别统计各组乳酸菌存活的总时间。进行对比，反复实验，最后总结甜味素对乳酸菌的影响。 III.测定方法 PH值得测定：PH计测定酸度值：滴定酸度的测定粘度的测定：旋转粘度计测定乳酸菌总数的测定：平板计数法 IV.实验目的 1.了解常见甜味素对乳酸菌的影响。 2.了解甜味素对人体健康的影响 V.实验仪器及材料 材料的准备：铁架台锥形瓶滴定管量筒烧杯灭菌锅ph试纸培养箱天平培养皿移液管试管等 试剂及药材的准备：新鲜酸奶乳酸菌种固体ANOH 蒸馏水邻苯二甲胺氢钾酚酞胶头滴管. T5甜味剂.（糖精钠木糖醇甜蜜素三氯蔗糖(TGS) 安赛蜜）牛肉膏，蛋白胨，NaCl等 VI.实验内容 一.乳酸菌培养二.标准氢氧化钠的制备三.测T5甜味剂在酸奶发酵过程中滴定酸度，粘度，ph值四.酸奶中乳酸菌活菌数量检测 乳酸菌培养 实验步骤及结果：制作培养基： 配方：每L蛋白胨10.0g 牛肉膏3.0g 氯化钠5.0g 琼脂18.0g 配制步骤： （1）依照比例按照所需量取适量水于锅中，加热。 （2）称取药品依次加入水中（不加琼脂）。 （3）待锅中药品沸腾后倒入加了琼脂的锥形瓶中加塞、包扎。 （4）121℃灭菌20min。 其他事项： （1）培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方可使用。 （2）培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。 （3）蛋白胨易潮解，需快速称量
乳酸菌
乳酸菌的保存与筛选 《高效浓缩乳酸菌发酵剂的制作与应用》（专项技术，1998）乔发东吴秀芳 菌种的保存与活化制备浓缩乳酸菌发酵剂的菌种应与发酵乳制品生产所使用的菌种相一致。将纯乳酸菌种按10%的比例接种于含甘油15%(v/v)的无菌脱脂乳中(无脂干物质为11%)搅拌均匀，立即冷冻，在-20℃保存。使用前，将冷冻菌种在30℃水浴中溶化，按菌种的特性要求，在适宜的温度下培养至凝乳状态。然后，按1%的接种量进行继代培养三次备用。 《几种中和剂对乳酸茵浓缩效果的影响》（中国畜产与食品，1997）刘会平等 优良菌株的筛选将纯菌株充分活化4～5代．当活力稳定时，按3%的量进行接种．进行发酵性能试验、感官评定、抗冻试验，从而综合选择出适宜制备高效浓缩发酵剂的菌株． （X、M6、LB为保加利亚乳杆菌， G、H、KS、N为嗜热链球菌。选择的是LB和H） 《乳酸菌发酵乳中挥发性风味物质的动力学分析》（食品科学，1998）吕加平骆承庠 培养基:11% NFS的灭菌脱脂乳。在105℃下灭菌15min。每管分装5ml。 样品预处理：在5ml发酵乳样中，加人10％磺基水杨酸lml，涡流混合后，在6000r／rain下离心15min，取出后吸取上清液经孔径为0．45um的微孔滤膜过滤，制得测试样液。 仪器分析色谱条件：160 x 3mm玻璃填充柱，内装12％DEGS，程序升温，初始温度50℃，保持6min，然后以每分钟5℃的速率升温至160℃并保持至分析结束(约2min)。 气体流速：H2压力：0．5 kg／cm2，流速为35ml／min。 空气压力：0．5 kg／cm2，流速为500ml／min 一般认为当乙醛含量为10-15ppm时，即为典型风味，而Gyosheva(1982)等认为高质量的酸奶乙醛含量应大于31．27ppm。 《酸奶、乳酸菌饮料风味及其部分理化特性的研究》（乳业科学与技术，2004）梅林王志耕 从市售酸奶及乳酸菌饮料中选取6种国产品牌产品，应用物理化学方法测定分析各产品中乙醛、丁二酮、粘度和酸度值。探讨市售酸奶及乳酸菌饮料的主要理化指标的分布和变化范围。结果表明：被测酸奶产品中乙醛含量分布范围11mg/kg-18mg/kg，丁二酮0.5mg/kg-0.9mg/kg，粘度值15mPa.s-55mPa.s，酸度值 1000T-llO0T。乳酸菌饮料中乙醛含量范围3mg/kg-8 mg/kg，丁二酮含量O.08mg/kg-0.6mg/kg，粘度值 8mPa.s-200mPa.s，酸度值600T一900T。