人鼠免疫细胞表面标志对照参考
mouse human
辅助T细胞CD3+CD4+CD3+CD4+细胞毒性T细胞CD3+CD8a+CD3+CD8a+
活化细胞毒T细胞CD3+CD8a+CD107+CD3+CD8a+CD107a(LAMP-1)+or
CD3+CD8a+CD107b(LAMP-2)+
DC细胞CD11b+CD11c+CD11b+CD11c+
成熟DC细胞CD83+CD86+可选染色:
CD83/CD80/CD40/
CD54/HLA-DR/PDL1
MDSC细胞CD11b+GR-1(Ly6g/Ly6c)+CD11b+CD14-CD33+or
LIN-HLA-DR-CD33+
调节型T细胞CD4+Foxp3+or
CD4+CTLA-4+
经典染色：CD4+CD25+Foxp3+
可选染色：
CD25/CD39/CD73/
CD101/GITR/CTLA-4/TGF-β/CCR7
初始T细胞CD45R+CD45RA+
CD45RB+
免疫细胞表面标志Mark
辅助性T细胞的典型表面标志：CD3+CD4+CD8-。（Th1主要分泌IL-2，IFN-γ或TNF-β等辅助细胞免疫或参与迟发型超敏反应；Th2主要分泌IL-4/5/6/10等辅助体液免疫、参与速发型超敏反应） 细胞毒性T细胞的典型表面标志是CD3+CD4-CD8+。（CD3+CD8+CD30-可认定为Tc1细胞；CD3+CD8+CD30+可认定为Tc2） 调节性T细胞：自然存在的，其典型标志为CD4+CD25+Foxp3+ （最重要的分子标记是一种转录因子Foxp3） 成熟B细胞均表达CD19，B1细胞CD19+CD5+，B2细胞CD19+CD5- NK细胞的典型标志：CD3-CD16+CD56+。 单核-巨噬细胞的典型表面标志为CD14。 人成熟DC的主要特征表面标志为CD1a、CD11c和CD83，但不表达MPS T/B/NK细胞的典型表面标志（CD14/3/19和CD20/16/56）。
小结 淋巴细胞并不是功能单一的群体，但其在光学显微镜下的形态基本是一样的，因此要对其进行进一步的分类和观察就不能采用形态学的方法， 而要依靠对其表面标志的检测。常用于鉴定和检测计数淋巴细胞的表面 标志是CD抗原。 进一步区分淋巴细胞亚群可使某一类淋巴细胞的功能趋向一致和单一。 但目前看来，还很少有只通过一个CD抗原就能将某一类淋巴细胞亚群 指示出来的CD抗原，CD抗原指示出来的淋巴细胞亚群多数都是相对特 异。 根据T细胞的免疫效应功能和表面CD分子表达至少可以分为：辅助性T 细胞、细胞毒性T细胞和调节性T细胞；SmIg为B细胞所特有，是鉴定B 细胞可靠的指标，以CD5和CD19为标志可将B细胞分为B1和B2两个亚群； 目前多以CD3一、CD16+、CD56+作为NK细胞的典型标志。
细胞表面标志 PCR array 芯片
Cell Surface Markers PCR Array Catalog No.PAHS-055A（人） 细胞表面标志物PCR芯片 The Human Cell Surface Markers RT2Profiler?PCR Array profiles the expression of84genes relevant to research at the cell surface marker level.These markers have been used in studies including:1)determination of the extent of leukocyte infiltration among cancer tissues;2)characterization of cell populations isolated from patients with chronic inflammatory diseases such as atherosclerosis,asthma,inflammatory bowel disease,and arthritis;3)determination of T-and B-cell lineage and clonality;4) characterization of leukocyte populations for use in the prognosis of disease stage and progression;and5)analysis of the composition of immune infiltrates and their association with organ https://www.wendangku.net/doc/ec9187383.html,ing real-time PCR,you can easily and reliably analyze expression of a focused panel of genes related to cell surface markers with this array. 细胞表面标记物RT2Profiler?PCR Array可以同时检测84个研究中至关重要的细胞表面标志物的表达水平。这些标志物主要用于以下研究：1）确定肿瘤组织中白细胞浸润的程度；2）对于慢性炎症病人，如动脉粥样硬化、哮喘、炎症性肠病和关节炎等，可通过细胞表面标记物对细胞分型；3）确定T细胞和B细胞谱系和克隆系；4）对白细胞进行分型，从而预测疾病的发展阶段及进展；5）分析免疫浸润的原理和与器官排斥反应的关系。利用实时定量PCR，你可以方便并且可信地对与TNF信号相关的基因进行同时检测。 B-cell Surface Markers: Activated B-cells:CD28,CD38,CD69,CD80,CD83,CD86,DPP4,FCER2,IL2RA,TNFRSF8,CD70(TNFSF7). Mature B-cells:CD19,CD22,CD24,CD37,CD40,CD72,CD74,CD79A,CD79B,CR2,IL1R2,ITGA2,ITGA3,MS4A1,ST6GAL1. Other B-cell Surface Markers:CD1C,CHST10,HLA-A,HLA-DRA,NT5E. T-cell surface markers: Cytotoxic T-cells:CD8A,CD8B1. Helper T-cells:CD4. Activated T-cells:ALCAM,CD2,CD38,CD40LG,CD69,CD83,CD96,CTLA4,DPP4,HLA-DRA,IL12RB1,IL2RA,ITGA1,TNFRSF4,TNFRSF8,CD70(TNFSF7). Other T-cell Surface Markers:CD160,CD28,CD37,CD3D,CD3G,CD3Z,CD5,CD6,CD7,FAS,KLRB1,KLRD1,NT5E,ST6GAL1. Natural Killer(NK)Cell Surface Markers:CD2,CD244,CD3Z,CD7,CD96,CHST10,IL12RB1,KLRB1,KLRC1,KLRD1,NCAM1. Monocyte and Macrophage Cell Surface Markers: Activated Macrophages:CD69,ENG,FCER2,IL2RA. Other Monocyte and Macrophage Surface Markers:C5R1,CD163,CD40,CD63,CD74,CD86,CHST10,CSF1R,DPP4,FCGR1A,HLA-DRA,ICAM2,IL1R2, ITGA1,ITGA2,S100A8,TNFRSF8,CD70(TNFSF7). Endothelial Cell Surface Markers:ENG,ICAM2,NOS3,PECAM1,SELP,TEK,VCAM1,VWF. Smooth Muscle Cell Surface Markers:MYH10,MYH9,MYOCD. Dendritic Cell Surface Markers:CD1A,CD209,CD40,CD83,CD86,CR2,FCER2. Mast Cell Surface Markers:C5R1,FCER1A,FCER2,TPSAB1. Fibroblast(Stromal)Surface Markers:ALCAM,COL1A1,COL1A2. Epithelial Cell Surface Markers:CD1D,KRT18,KRT5,KRT8,TACSTD1. Adipocyte Surface Markers:RETN. B细胞表面标记物、T细胞表面标记物、自然杀伤细胞表面标记物、单核细胞和巨噬细胞表面标记物、内皮细胞表面标记物、平滑肌细胞表面标记物、树突状细胞表面标记物、肥大细胞表面标记物、成纤维细胞（基质细胞）表面标记物、表皮细胞表面标记物、脂肪细胞标记物
干细胞标志物
干细胞标志物 胚胎干细胞的标志物 Oct-4: Oct-4（也叫Oct-3或Oct3/4）属POU转录因子一员，最初鉴定为DNA结合蛋白，可通过顺式元件活化基因转录。它在全能胚胎干细胞(ES)和生殖细胞表达。该表达对于维持干细胞的自我更新和多能性是必要的。4 ES的分化导致Oct-4的下调。5 Oct-4不仅是细胞系多能分化的主要调节因子，而且也是首要的作为鉴定全能ES细胞的标志物。 SSEAs: SSEAs 最初是用来鉴定识别糖脂表位的三个单抗。SSEA-1表达在前移植期的鼠胚表面（如八细胞期）并且也发现存在于畸胎瘤干细胞表面，但不存在分化的衍生细胞中。输卵管上皮、子宫内膜、附睾, 成年鼠脑和肾小管区域也发现和SSEA-1抗体反应。SSEA-3和4在卵子发生时合成，在卵母细胞、受精卵和早期卵裂球细胞膜上存在。这些与糖链相关的分子的生物学功能被认为是调控发育期的细胞膜间的相互作用。未分化的灵长类ES细胞，人的EC和ES细胞表达SSEA-3和SSEA-4,但不表达SSEA-1。未分化的小鼠ES细胞表达SSEA-1,但不表达SSEA-3或SSEA-4. 造血干细胞的标志物 CD34（细胞表面的唾液粘蛋白）：CD34自从被发现存在于少量人骨髓细胞以来就是兴趣的焦点。从骨髓和外周血来源的CD34阳性富集的细胞群体显出大部分的造血活性。CD34被认为是造血干细胞(HSCs). 的标志物。CD34在原始细胞分化为成熟细胞后表达下降.这点也发现在克隆的祖细胞和一些细胞系的干细胞。尽管CD34功能未知，但现在认为它参与早期造血CD34是HSCs的标志物的理论近年受到挑战。Osawa等人首先证明小鼠HSCs可以是CD34阴性。并且，人的CD34阴性细胞也有低水平的嫁接和造血能力。移植研究表明胎绵羊CD34阴性细胞有重新繁殖的能力。并且也表明人和鼠的CD34阳性细胞可能来源于CD34阴性细胞。总的说来，这些报告提示，HSCs可能是CD34+或CD34-。只选择表达CD34的细胞可能导致将更原始的干细胞排除在外。然而几乎所有的临床和实验流程包括体外培养、基因疗法和HSC抑制，目前都设计成收集富含CD34+的细胞。 CD133: CD133, 是120kDa糖基化蛋白，包括5个跨膜结构域，最初是通过AC133单抗鉴定的，它能识别人HSCs的CD34+亚类29,30。一种CD133异构体AC133-2, 最近已经被克隆并鉴定为可被AC133抗体识别的原始表面抗原。CD133可以作为用CD34筛选HSC和体外扩增的补充。CD133+富集的亚类可以以同CD34+ 富集的亚类扩增的方式扩增，从而可保留多系增殖的能力。最近的研究为CD133的表达不限于原始血细胞提供了证据，同时也确定了非造血组织中一类独特的细胞群体。来源于外周血的CD133+ 可被体外诱导分化为内皮细胞。并且，can be induced to differentiate into endothelial cells in vitro.并且，人的神经干细胞用抗CD133抗体可被直接分离。 ABCG2: ABCG2 (A TP-binding cassette superfamily G member 2) 广泛存在于各种干细胞上，并决定了SP细胞的Hoechst 阴性染色表型。ABCG2是ABC转运体家族的成员，并首先定位在乳腺癌细胞系上。ABCG2在CD34阴性细胞上出现的几率最大，但细胞表达CD34后，ABCG2下调。ABCG2的下调也表现在很多造血祖细胞上。因此在原始HSC分离鉴定上，ABCG2比CD34更有希望。ABCG2特异性的表达决定了猴骨髓细胞、小鼠骨骼肌细胞和ES细胞中的Hoechst SP表型。对心肌和骨骼肌细胞可以从移植的骨髓来源的SP细胞再生证明了SP细胞的潜在可塑性. ABCG2在SP细胞上的专一表达提示ABCG2可能成为是成体多能干细胞阳性筛选的潜在标志物。ABCG2在干细胞发育生物学里也扮演着一定的功能上的角色。 Sca-1: Sca-1 (stem cell antigen 1, Ly-6A/E), 是18kDa磷脂酰肌醇锚定蛋白，属Ly-6抗原家族成员。43 Sca-1被广泛认为和Ly-6 半抗原一起，是小鼠HSC标志分子，它在多能HSCs上表达。一种抗Sca-1抗体经常和一些细胞表面标志分子表达的阴性选择一起用来鉴定和分离
免疫细胞分型常见标志物大串烧(二)——NK细胞分型标志物 (1)
免疫细胞分型常见标志物大串烧（二）——NK细胞分型标志物 自然杀伤细胞(Natural killer，NK)是细胞毒性淋巴细胞的一种类型，是天然免疫系统的主要组成部分。NK细胞在肿瘤和病毒感染细胞的宿主排斥反应中起重要作用。它们之所以被命名为“Natural killer”，是因为最初认为它们不需要激活就能杀死“缺失自我识别”的细胞(“缺失自我识别”是用来描述MHC-I类细胞表面标记表达水平较低的细胞，这种情况可能是由病毒感染引起的，或者是在杀伤T细胞的强选择压力下发生的）。 NK细胞与ILC1s（1型天然淋巴细胞）具有许多相似特征，包括转录因子T-bet的表达、活化诱导的IFNγ和TNFα的产生，但NK细胞还表达转录因子Eomes以及granzyme B 和performin，而ILC1s不表达。因此，NK细胞更被认为是CD8+T细胞在天然免疫系统里的对应细胞。 NK细胞的功能由多种细胞表面受体控制，这些受体要么具有激活的细胞毒性功能，要么具有免疫调节作用1，这些受体分类见下表1a和1b。NK细胞的细胞毒性受激活和抑制信号相互作用的调节，抑制性受体通过识别自身MHC-I类分子来阻止NK细胞的激活。
CD66CD66 CD94(NKG2E)HLA-E CD96(TACTILE)CD155(PVR) CD100CD72 CD160HLA-C CD226(DNAM-1)CD112(Nectin-2),CD155(PVR) CD314(NKG2D)ULBP(RAET),MICA/MICB CD319(CRACC)CD319(CRACC) CD335(NKp46)Viral hemagglutinins,? CD336(NKp44)Viral hemagglutinins,? CD337(NKp30)pp65,BAT-3,? CD352(NTB-A)CD352(NTB-A) CD355(CRTAM)Necl2 KIR-S HLA-C,? NKp80AICL PEN-5CD62L
临床医学检验技师考试辅导临床免疫学和免疫检验 第十四章 免疫细胞的分离及其表面标志检测技术练习题
第十四章免疫细胞的分离及其表面标志检测技术 一、A1 1、已知细胞中的黏附能力最大的为 A、树突状细胞 B、单核细胞 C、B细胞 D、T细胞 E、红细胞 2、免疫细胞检测技术中外周血单个核细胞指的是 A、有核细胞 B、淋巴细胞 C、单核细胞 D、淋巴细胞和单核细胞 E、幼稚细胞 3、下列关于T细胞亚群的分离，说法错误的是 A、原理是根据相应细胞的不同标志加以选择性纯化 B、凡根据细胞的表面标志进行纯化得到所需要的细胞群是阳性选择法 C、选择去除不需要的细胞群，仅留下所需要的细胞为阴性选择法 D、E花环沉降法是最先进的细胞分选技术 E、尼龙毛柱分离法是常用的分离方法 4、下列有关转化的淋巴细胞的形态描述中，错误的是 A、细胞变大 B、出现空泡 C、核仁消失 D、染色质疏松 E、胞质扩大 5、检测T细胞数量的试验是 A、溶血空斑试验 B、SmIg荧光抗体染色试验 C、巨噬细胞或白细胞移动抑制试验 D、E玫瑰花环试验 E、计算盘直接计数 6、溶血空斑形成试验中，空斑的大小表示 A、抗体生成细胞的多少 B、抗体生成细胞的种类 C、细胞的大小 D、抗体生成细胞产生抗体的多少 E、吞噬细胞的活性 7、做自然杀伤细胞毒试验，敏感而常用的是哪种细胞株 A、小鼠T细胞肿瘤细胞株 B、人肺癌细胞 C、K562细胞系 D、小鼠细胞毒T细胞系
E、L929细胞株 8、具有抗肿瘤效应的第一道防线是 A、TC细胞 B、中性粒细胞 C、TH细胞 D、B细胞 E、NK细胞 9、下列不属于自然杀伤（NK）细胞检测方法的是 A、酶释法和放射性核素法 B、酶释法和荧光分析法 C、放射性核素法和荧光分析法 D、放射性核素法和荧光分析法和酶释法 E、反向溶血空斑实验和酶释法 10、可刺激B淋巴细胞增殖转化的刺激物是 A、PWM B、PHA C、ConA D、MHC E、BCG 11、用于临床评价病人免疫状况的试验中，评价T细胞功能的试验是 A、血清免疫球蛋白检测 B、溶血空斑试验 C、淋巴细胞转化试验 D、膜表面Ig测定 E、EA花环试验 12、关于单个核细胞说法错误的是 A、单个核细胞包括淋巴细胞、单核细胞 B、单个核细胞的体积、形态、比重与其他细胞不同 C、可利用单个核细胞的体积不同，按照密度梯度来分离 D、在进行密度梯度分离时，单个核细胞比重比溶液的比重大 E、多核粒细胞比重比单个核细胞比重大 13、采用密度梯度分离法分离得到的细胞主要为 A、单核细胞和粒细胞 B、单核细胞 C、淋巴细胞 D、淋巴细胞和单核细胞 E、淋巴细胞和粒细胞 14、利用E花环沉降法可分离 A、单核细胞和B细胞 B、浆细胞和粒细胞 C、B细胞和T细胞 D、B细胞和粒细胞 E、B细胞和吞噬细胞 15、对分离细胞的保存说法错误的是
BD人间充质干细胞表面标记检测试剂盒说明书
BD Stemflow?Technical Data Sheet Human MSC Analysis Kit Product Information Material Number:562245 Size: 50 tests Confirmed: Human Reactivity: Description Human multipotent mesenchymal stromal cells (MSCs), also referred to as mesenchymal stem cells, are a rare population of adult stem cells that can be isolated from a variety of tissues. MSCs that have been isolated from bone marrow and subsequently cultured can differentiate to a variety of cell types, most notably adipocytes, osteocytes and chondrocytes. MSCs also have immunomodulatory effects in vivo and in vitro. In 2006, the International Society for Cellular Therapy (ISCT) proposed a cell surface marker panel for the minimal identification of human MSCs derived from bone marrow. Under this recommendation MSCs should be positive for CD73, CD90, and CD105, but be negative for CD34, CD45, CD11b or CD14, CD19 or CD79α, and HLA-DR. MSCs are also known to express numerous cell surface markers such as CD44, CD29, CD200, CD166, CD146 and CD271. In this kit we include the panel that was proposed by the ISCT. In addition, we designed this kit to be modular so that additional markers could be “dropped-in”. Specifically, the MSC positive cocktail (FITC CD90, PerCP-Cy?5.5 CD105 and APC CD73) leaves the PE channel open to use in combination with the supplied negative MSC cocktail (PE CD45, PE CD34, PE CD11b, PE CD19 and PE HLA-DR), the included PE CD44 antibody conjugate, or a variety of other commercially available PE antibody conjugates. Multi color analysis minimizes cell numbers required for an assay and antibody cocktails facilitate a streamlined staining protocol to analyze multiple samples. Individual positive markers are included for compensation set-up. Kit Components Component Description Size Vol. Per Test Storage Buffer 51-9007661PE hMSC Negative Cocktail50 Test20 μl Aqueous buffered solution containing BSA and ≤0.09% sodium azide 51-9007662PE hMSC Isotype Control Negative Cocktail50 Test20 μl Aqueous buffered solution containing BSA and ≤0.09% sodium azide 51-9007663hMSC Positive Cocktail50 Test20 μl Aqueous buffered solution containing BSA and ≤0.09% sodium azide 51-9007664hMSC Isotype Control Positive Cocktail50 Test20 μl Aqueous buffered solution containing BSA and ≤0.09% sodium azide 51-9007657FITC Mouse Anti-Human CD9050 Test 5 μl Aqueous buffered solution containing BSA and ≤0.09% sodium azide 51-9007656PE Mouse Anti-Human CD44100 Test 5 μl Aqueous buffered solution containing BSA and ≤0.09% sodium azide 51-9007655PE Mouse IgG2b, k Isotype Control50 Test 5 μl Aqueous buffered solution containing BSA and ≤0.09% sodium azide 51-9007649APC Mouse Anti-Human CD7350 Test 5 μl Aqueous buffered solution containing BSA and ≤0.09% sodium azide 51-9007648PerCP-Cy?5.5 Mouse Anti-Human CD10550 Test 5 μl Aqueous buffered solution containing (Endoglin)BSA and ≤0.09% sodium azide Description of Kit Components Vial Contents Purpose hMSC Positive Cocktail CD90 FITC (Clone: 5E10)Cocktail to positively identify hMSCs CD105 PerCP-Cy5.5 (Clone: 266) CD73 APC (Clone: AD2) hMSC Positive Isotype Control Cocktail mIgG1, κ FITC (Clone: X40)Corresponding Isotype Control for hMSC Positive mIgG1, κ PerCP-Cy5.5 (Clone: X40)Cocktail mIgG1, κ APC (Clone: X40)
T细胞亚型与标记物对照表
T细胞亚型与标记物对照表 请关注： ↑Abcam 助您更快实现研究使命 >建议收藏 T 细胞在细胞介导的免疫中起着核心作用，其研究有助于揭示癌症等多种疾病的发病机制。 T 细胞是一种白细胞或淋巴细胞，可识别和靶向病原体感染的细胞或癌症细胞，以对其进行清除。T 细胞来源于骨髓中的造血干细胞，其前体被运送至胸腺完成最终成熟。T 细胞具有选择性，因此可以容忍身体自身的细胞（自我分子），但对非自身病原体保持高度敏感。 我们为什么要研究 T 细胞？ T 细胞的功能缺陷与许多疾病状态有关，这些疾病会使患者患有严重的免疫缺陷。完全丧失 T 细胞功能是致命的。因此，研究 T 细胞如何识别和激活免疫应答对于了解免疫调节紊乱至关重要： 部分 T 细胞紊乱使患者无法对感染产生完全的免疫应答。 这些紊乱可能与 T 细胞数量减少或 T 细胞活性丧失有关。例如，DiGeorge 综合征是一种遗传疾病，患者胸腺通常不发达，并带有反复感染的症状。 严重联合免疫缺陷 (SCID) 是由多种免疫调节异常导致的免疫缺陷极端例子，这是由影响 T 细胞和其他白细胞（包括 B 细胞）发育和分化的基因突变引起。 自身免疫病发生在 T 细胞无法区分自我和非自我分子，并对患者自身细胞产生免疫应答的情况。类风湿性关节炎等常见疾病被归类为影响全身的全身性自身免疫病，器官特异性自身免疫病则包括克罗恩病和乳糜泻（麸质不耐受）。 淋巴细胞白血病的类型众多，其中一部分起源于未成熟或成熟 T 细胞（T 细胞淋巴瘤）。这些癌症会对红细胞的产生和血小板造成负面影响，导致贫血、凝血缺陷以及抗感染能力受损。T 细胞癌有时是由病毒引起，例如 T 细胞非霍奇金淋巴瘤，这与 HTLV-1（人 T 细胞白血病病毒 1）感染有关。 >>>abcam 2018-06-06 abcam 此为临时链接，仅用于预览，将在短期内失效。
骨髓间充质干细胞的主要表面标志
骨髓间充质干细胞的主要表面标志 1 骨髓间充质干细胞的发现和来源 骨髓组织中有多种细胞成分，除基质细胞等已经分化的细胞外，还含有两类多潜能干细胞：造血干细胞和间充质干细胞。1987 年Friedenstein 等发现在塑料培养皿中培养的贴壁的骨髓单个细胞在一定条件下可分化为多种类型的细胞，而且经过20－30个培养周期仍能保持其多向分化潜能。由于骨髓中的这种多能细胞能够分化为多种中胚层来源的间质细胞, 故称之为间充质干细胞(Mesenchymal stem cells，MSCs),或间质祖细胞(MPCs)，是成人多能干细胞的一类。早期分离培养时，发现其形状呈成纤维细胞样而称其为成纤维细胞集落形成单位(Colony-forming unit-fibroblast，CFU-F)，或骨髓基质成纤维细胞(Marrow stromal fibroblast，MSF)。Friedenstein AJ , Chailakhyan RK, Gerasimov UV. Bone marrow o steogenic stem cells: in vit ro cult ivat ion and t ransp lantat ion in diffusion chambers. Cell T issue Kinet, 1987, 20 (3) : 263-267] 2 鉴于其强大的增殖能力及多向分化潜能，可在体外长期培养和遗传背景较稳定，而且用自体干细胞诱导构建的组织不涉及伦理问题，也不存在MHC限制，所以骨髓间充质干细胞日益受到重视。但是与造血干细胞等其他细胞相比，骨髓中MSCs的数量非常少，约占整个骨髓有核细胞的十万分之一，并随年龄的增加，细胞数量逐渐减少。因此，如何简便有效地从骨髓中获取高纯度的MSCs显得尤为重要，寻找高度特异性的MSCs的表面抗原也就成为MSCs研究中的一项重要任务和目标。 不仅如此，一种同样来源于骨髓、贴壁生长、被认为更原始（可以分化为MSCs）也具有更强增殖能力的干细胞也被鉴定，它就是多能成体祖细胞（multipotent adult progenitor cell (MAPC) or mesodermal progenitor cell(MPC)）[Reyes, M., Lund, T., Leuvik, T., Aguiar, D., Koodie, L., Verfaillie, C.M. (2001) Purification and in vivo expansion of postnatal human marrow mesodermal progenitor cells. Blood 98, 2615-2625]，因能和MSCs一起被纯化而统称BM stromal stem cell。 3 利用流式细胞仪的研究显示,MSCs属混杂细胞群，其表面抗原也具有非专一性, 它表达了间质细胞、内皮细胞和表皮细胞的表面标志。主要包括: ①
神经生物学常见标志物
神经生物学研究中的常用标志物 每一类列举了常用标志物，有的给出了解释和用途。 神经元轴突标志物 Tau： Neuron Type of MAP; helps maintain structure of the axon ---------------------------------------------------------------------------- 神经元树突标志物 Drebrin、MAP、SAP102 微管相关蛋白Microtubule-associated protein-2(MAP-2)：Neuron Dendrite-specific MAP; protein found specifically in dendritic branching of neuron 是组成神经元细胞骨架的重要组成成分，包括：MAP5、MAP1.2和MAP1(x)三种不同类型。在神经系统发育、形成和再生过程的不同时期扮演着重要的角色。其中MAP5为早期微观相关蛋白，在胚胎期和新生动物大脑中有较高表达，并随大脑的逐渐成熟而退化，对神经元突起的生长具有重要的引导作用。MAP2包括三种亚型：MAP2a、MAP2b和MAP2c。其中MAP2b和MAP2c出现较早。随着 年龄的增长MAP2被组织蛋白酶D所降解，在不同类型的神经元中表达量存在差异。 ---------------------------------------------------------------------------------------------- 神经元早期标志物 Tubulin、b-4 tubulin ：Neuron Important structural protein for neuron; identifies differentiated neuron Nervous System微管蛋白为球形分子, 分为两种类型:a微管蛋白(a-tubulin)和β 微管蛋白(β-tubulin), 这两种微管蛋白具有相似的三维结构, 能够紧密地结合成二聚体, 作为微管组装的亚基，能够聚合并且参与细胞分裂。a和β微管蛋白各有一个GTP结合位点, 位于a亚基上的GTP结合位点, 是不可逆的结合位点，结合上去的GTP不能被水解，也不能被GDP替换。位于β亚基上的GTP结合位点结合GTP后能够被水解成GDP，所以这个 位点又称为可交换的位点(exchangeable site,E位点)。β-III Tubulin又名tubulin β-4，是原始神经上皮中所表达的最早的神经元标志物之一。其作为神经元特有标志物，被广泛应用于神经生物学研究。 Noggin： Neuron A neuron-specific gene expressed during the development of neurons Neurosphere Embryoid body (EB)： ES Cluster of primitive neural cells in culture of differentiating ES cells; indicates presence of early neurons and glia ----------------------------------------------------------------------------------------- 星型胶质细胞标志物 Astrocyte、S-100、Microglia Markers Glial fibrillary acidic protein (GFAP) ：Astrocyte Protein specifically produced by astrocyte属于三型中间丝蛋白家族成员，在星型胶质细胞中大量特异性表达。在外周 神经系统中的卫星细胞和部分雪旺氏细胞中也有少量表达。神经干细胞也会频繁并大量的表达GFAP。因此，GFAP抗体经常被作为星型胶质细胞的标志物用于神经生物学研究。另外，对于一些来源于星型胶质细胞的脑源性肿瘤，GFAP的表达量也较高。最近研究表明：在位 于肝脏的枯否细胞、镜上皮细胞、唾液腺肿瘤细胞和红细胞中亦有GFAP的表达。 ------------------------------------------------------------------------------------------- 少突胶质细胞标志物 Myelin basic protein (MPB) ：Oligodendrocyte Protein produced by mature
干细胞表面标记
Marker Name Cell Type Significance Blood Vessel Fetal liver kinase-1 (Flk1) Endothelial Cell-surface receptor protein that identifies endothelial cell progenitor; marker of cell-cell contacts Smooth muscle cell-specific myosin heavy chain Smooth muscle Identifies smooth muscle cells in the wall of blood vessels Vascular endothelial cell cadherin Smooth muscle Identifies smooth muscle cells in the wall of blood vessels Bone Bone-specific alkaline phosphatase (BAP) Osteoblast Enzyme expressed in osteoblast; activity indicates bone formation Hydroxyapatite Osteoblast Minerlized bone matrix that provides structural integrity; marker of bone formation Osteocalcin (OC) Osteoblast Mineral-binding protein uniquely synthesized by osteoblast; marker of bone formation Bone Marrow and Blood Bone morphogenetic protein receptor (BMPR) Mesenchymal stem and progenitor cells Important for the differentiation of committed mesenchymal cell types from mesenchymal stem and progenitor cells; BMPR identifies early mesenchymal lineages (stem and progenitor cells) CD4 and CD8 White blood cell (WBC) Cell-surface protein markers specific for mature T lymphocyte (WBC subtype) CD34 Hematopoietic stem cell (HSC), satellite, endothelial progenitor Cell-surface protein on bone marrow cell, indicative of a HSC and endothelial progenitor; CD34 also identifies muscle satellite, a muscle stem cell CD34+Sca1+ Lin- profile Mesencyhmal stem cell (MSC) Identifies MSCs, which can differentiate into adipocyte, osteocyte, chondrocyte, and myocyte CD38 Absent on HSC Present on WBC lineages Cell-surface molecule that identifies WBC lineages. Selection of CD34+/CD38- cells allows for purification of HSC populations CD44 Mesenchymal A type of cell-adhesion molecule used to identify specific types of mesenchymal cells c-Kit HSC, MSC Cell-surface receptor on BM cell types that identifies HSC and MSC; binding by fetal calf serum (FCS) enhances proliferation of ES cells, HSCs, MSCs, and hematopoietic progenitor cells Colony-forming unit (CFU) HSC, MSC progenitor CFU assay detects the ability of a single stem cell or progenitor cell to give rise to one or more cell lineages, such as red blood cell (RBC) and/or white blood cell (WBC) lineages
项目十七 T淋巴细胞表面标志和功能检测
项目十七T淋巴细胞表面标志和功能检测 一、E花环形成试验 (Erythrocyte rosette formation assay) 【实验原理】 人外周血T淋巴细胞表面具有绵羊红细胞(SRBC)受体，可与SRBC结合形成花环样细胞团(即E花环)。此试验用于计数T细胞数量，进而可判断机体细胞免疫状况。由于T 细胞的异质性，其中在4℃放置1h以上，所形成的花环数代表T细胞总数，称为总花环(Et 花环)，而淋巴细胞与SRBC混合后不经4℃作用，立即反应形成的花环称为活性花环(Ea花环)。 【试剂和器材】 1．肝素抗凝剂用Hanks液将肝素配成500U/ml，分装，每管0.1ml，置4℃备用。 2．淋巴细胞分离液(密度为1.077±0.001)。 3．小牛血清56℃加热灭活30min，按2:1比例与沉积SRBC混合，置37℃30min，离心，收集血清备用。 4．0.5％SRBC悬液取脱纤维或Alsever液保存的羊血，用5～10倍量生理盐水洗3 次。第3次2500r/min离心10min，弃上清液，用生理盐水配成0.5％的SRBC悬液(约108个细胞/ml)。 5．0.8％戊二醛取30.25ml 4.5 g/L NaCl 盐水，加入1ml 25％戊二醛即可。 6．姬姆萨-瑞氏染液取磷酸缓冲液(PB：1/15 mol/L, pH7.0～7.4)10ml，加入姬姆萨染液6滴及瑞氏染液1滴。 7．Alsever液、Hanks液(无Ca2+和Mg2+, pH7.2～7.4)、PB(1/15 mol/L, pH7.0～7.4)、生理盐水。 8．离心机、水浴箱、电冰箱、显微镜、离心管、载玻片、盖玻片、吸管、吸球、注射器。 【步骤和方法】 1．淋巴细胞悬液的制备取2ml肝素抗凝血，加入2ml Hanks液，叠加于2ml 淋巴细胞分离液上，水平离心2000 r/min 20 min。取出单个核细胞层，用4~5倍Hanks液洗2次，每次离心1000r/min 10min。弃去上清液，留下沉淀细胞约0.2ml。 2．Et花环试验 (1)取0.2ml 0.5％SRBC悬液和0.1ml小牛血清，加入到沉淀细胞管中混匀，置37℃水浴5min。 (2)取出离心500 r/min 5min，置4℃1~2h或过夜。 (3)沿管壁加入0.8％戊二醛0.2 ml，置4℃20min。 (4)弃上清，留约0.2ml，轻轻吹吸混匀沉淀细胞。 (5)结果观察①湿片法观察：取1滴细胞悬液滴加于载玻片上，加入少许姬姆萨-瑞氏染液染色，加盖玻片后高倍镜下观察。②干片法观察：取细胞悬液涂片，自然干燥，用姬姆萨-瑞氏染液染10min，水洗，干燥后高倍镜或油镜下观察。 3．Ea花环试验与Et花环试验基本相同，不同之处是SRBC悬液的浓度为0.1％，SRBC与淋巴细胞混合之比为10:1~20:1，混合后立即离心1000r/min 5min。加入戊二醛固定，染色，观察均与Et花环试验相同。 【结果判定】 淋巴细胞呈蓝紫色或淡蓝色，SRBC不着色，凡结合3个SRBC或以上者为E花环形成
免疫细胞分型常见标志物大串烧(三)——B细胞分型标志物
免疫细胞分型常见标志物大串烧（三）——B细胞分型标志物 一、B细胞的背景 B淋巴细胞简称B细胞，是由骨髓中的造血干细胞分化发育而来。与T淋巴细胞相比，它的体积略大。B淋巴细胞受抗原刺激后，会增殖分化出大量浆细胞。浆细胞可合成和分泌抗体并在血液中循环。大部分发挥效应功能的B细胞在体内存活的时间较短，仅数天至数周，但其记忆细胞在体内可长期存在1。 B细胞也是一异质性群体，显示不同的功能和表面标志。CD5表达与否，将B细胞分为B1和B2两个亚群。B1细胞为CD5+B细胞，主要识别非蛋白质抗原，属于固有类淋巴细胞，B2即通常指的B细胞，为CD5-B细胞，主要识别蛋白质抗原。在Th细胞的辅助下，B2细胞才能被完全激活并介导对T细胞依赖抗原的免疫应答，产生特异性抗体。B2细胞介导的免疫应答特点为：可发生体细胞突变，有亲和力成熟，产生高亲和力抗体，可产生免疫记忆细胞1。 二、B细胞的功能 1.产生抗体介导体液免疫应答 ●中和作用：针对病毒、胞内寄生菌、细菌外毒素。 ●调理作用：针对胞外复制的细菌。 ●参与补体的溶细胞或溶菌作用。 ●抗体依赖细胞介导的细胞毒性作用（ADCC）：针对病毒感染细胞、肿瘤细胞。 2.提呈可溶性抗原 B细胞是一类抗原提呈细胞，活化后其表面BCR结合可溶性抗原，通过内吞和加工后，以抗原肽-MHCⅡ类分子复合物形式提呈给CD4+T细胞。 3.参与免疫调节
激活的B细胞产生大量细胞因子、参与免疫调节、炎症反应及造血。 三、B细胞的分化和成熟 哺乳类动物B细胞的分化和成熟主要分为祖B细胞、前B细胞、不成熟B细胞、B细胞的成熟（过渡B细胞到成熟B细胞）、活化B细胞和浆细胞几个阶段2。其中祖B细胞、前B细胞和不成熟B细胞的分化是抗原非依赖的，其分化过程在骨髓中进行。抗原依赖阶段是指成熟B细胞在抗原刺激后活化，并继续分化为合成和分泌抗体的浆细胞，这个阶段的分化主要是在外周免疫器官中进行的。 ●祖B细胞（pro-B cell） 这种发育早期的B细胞，发生在人胚胎约第9周开始，小鼠约第14天开始。尚未表达B细胞系的特异表面标志，也未发生lg基因重排，仍处于胚系基因（germline）阶段。但祖B细胞的晚期可出现B系特异标志，Thy-1、Tdt、B200、mb-1等分子。 ●前B细胞（pre-B cell） 是前B细胞是在骨髓中由祖B细胞分化而来，只存在于骨髓和胎肝等造血组织，约占成人骨髓有核细胞的5%。前B细胞胞浆中可检测到IgM的重链μ链，但无轻链，也无膜表面Ig的表达，因此缺乏对抗原的反应能力。末端脱氧核甘酸转移酶（terminal deoxy nucleotidyl transferase，TdT）以及共同型急性淋巴母细胞白血病抗原（common acute lymphoblastic leukaemia antigen，CALLA，即CD10）可表达在前B细胞，进入非成熟B细胞后这两种标志即消失，因此TdT和CD10对于区分前B细胞与B细胞其它发育阶段非常有用。此阶段还表达MHCⅡ、CD19、CD20和CD24等分化抗原。其中CD19、CD20、和CD22在胞浆中的出现均早于μ链。前B细胞对抗原无应答能力，不表现免疫功能。