酪氨酸激酶小分子抑制剂及其抗瘤作用研究进展
酪氨酸激酶小分子抑制剂及其抗瘤作用研究进展
发表者：曾辉 (访问人次：737)
酪氨酸激酶小分子抑制剂及其抗瘤作用研究进展
与肿瘤相关的酪氨酸激酶主要有位于细胞膜的受体酪氨酸激酶和位于胞浆的非受体酪氨酸激酶，酪氨酸激酶的过度激活与肿瘤发生、发展、预后与转归密切相关。酪氨酸激酶的过度激活，导致其下游信号途径的激活，最终导致细胞的转化、增殖和抵抗细胞凋亡、促进细胞生存。因此，许多学者致力于酪氨酸激酶抑制剂尤其是从特异性酪氨酸激酶抑制剂角度来研究新的抗肿瘤药物，并且已取得了巨大的突破，如针对Bcr-Abl的Gleevec、针对EGFR受体酪氨酸激酶Iressa，已被美国FDA批准分别用于慢性粒细胞性白血病和晚期非小细胞肺癌的治疗，效果显著。另外还有许多小分子抑制剂正在临床试验中，本实验室在HER2/neu 和VEGFR受体酪氨酸激酶小分子抑制剂方面也进行一些研究，并取得一些有意义的结果。本文将对此新领域的研究进展作一综述。
关键词：酪氨酸激酶；抗肿瘤药物；信号转导
中图分类号：R730.23
1 酪氨酸激酶分类与结构
酪氨酸激酶分为受体酪氨酸激酶与非受体酪氨酸激酶两大类。受体酪氨酸激酶是一种具有跨膜结构的蛋白，其胞外区域能与配体结合，跨膜区以及胞内激酶区域。受体酪氨酸激酶的蛋白一级结构都已从其基因结构推知，而根据其结构可以将其分成几大类。主要有EGFR家族；PDGFR家族；FGFR家族；血管内皮生长因子受体；胰岛素受体家族；Trk受体；Tie受体；M ET受体；Eph家族。非受体酪氨酸激酶主要有Src, Bcr-Abl, JAK等。Src属 SFKs家族；A bl原癌基因编码一个细胞浆和核蛋白酪氨酸激酶，90%以上的慢性粒细胞性白血病中，有t (9,22)转位，形成Bcr-Abl酪氨酸激活。JAK蛋白酪氨酸激酶家族是仅次于Src和Tec的第三大非受体酪氨酸激酶家族，共包括4个成员：Jak1、Jak2、Jak3、Tyk2。Jak家族分子
基金项目：国家自然科学基金（39900183；30171092, 广东省自然科学基金重点项目(0131 26)和广东省科技计划项目2003C30101)联合资助。
作者：朱孝峰，男（1970－），博士，副研究员
在结构上可分为两大部分：C端是两个紧密连接的酪氨酸激酶活性样结构域，其中最靠近C 端的一个是Jak激酶的催化活性区；而位于其N端的另一个激酶样结构域不具有酪氨酸激酶活性，认为它可能与其它信号分子结合。Jak激酶与细胞因子受体或其它偶联分子结合而活化，激活STAT信号途径，参与细胞的增殖、生长因子等的分泌。
2 酪氨酸激酶信号转导途径
酪氨酸激酶受体与其相应的配体结合后，往往导致受体聚合，形成二聚体的受体。一般认为，受体形成二聚体的过程对其激活有重大意义。激活的受体向细胞内部传递信息有二种方式：1、蛋白磷酸化，2、蛋白质－蛋白质之间的相互作用。首先是受体发现酪氨酸磷酸化，酪氨酸磷酸化后与接头蛋白结合如Grb2的SH2、3结构域（Src同源结构域2、3）。根据含有S H2或SH3区域的蛋白质的性质，可以把它们分成两类：一类蛋白质具有某种酶活性或已知的功能；而另一类则仅仅起连接作用。前者包括胞浆内存在的酪氨酸激酶（Src,Abl,Ayk,C sk）、磷脂酶Cγ、Ras-GAP、蛋白酪氨酸磷酸等。典型的起联接作用的第二类SH2/SH3蛋白是c-Crk、Grb2、Nck。还发现有些蛋白兼具有上述两种作用，异二聚体激活的另外一个途径是MAPK非依赖性的P70／P85S6K途径，此途径与PI3K偶联。与Ras-MAPK一样，P70／P85 S6K途径也呈现增强。胞浆癌蛋白酪氨酸激酶如Src在病毒癌基因的作用下过度激活，Abl在Bcr与其偶联形成Bcr-Abl融合蛋白下过度激活与慢性粒细胞性白血病发生相关。蛋白酪氨酸激酶激活的主要下游信号途径是Ras/MAPK和PI3K/AKT信号途径，促进细胞增殖、转化，抵抗细胞凋亡，对肿瘤的发生、发展、转移、血管生成、药物的敏感性等相关。
3 酪氨酸激酶小分子抑制剂
3.1 酪氨酸激酶小分子抑制剂STI571
Ph+染色体是慢性粒细胞性白血病的特征性改变，由9号和22号染色性长臂的转位所至，从而产生了一种融合蛋白Bcr-Abl，使该激酶长期处理激活状态。Bcr-Abl单独足够导致慢
性粒细胞性白血病，且其酪氨酸激酶活性是其致癌所必需的，因此针对Bcr-Abl的小分子抑制剂应该是一个有效的高选择性的慢性粒细胞白血病治疗药物。
STI571，又名CGP57148B，Gleevec，是由Novartis公司开发研制的针对Bcr-Abl的酪氨酸激酶的小分子抑制剂，2001年已被美国FDA正式批准应用于临床治疗慢性粒细胞性白血病。STI571能抑制Bcr-Abl酪氨酸激酶及其下游信号转导途径。大分子与小分子对接实验表明，STI571与ATP竞争结合于酪氨酸激酶的ATP结合袋中，使ATP不能与此激酶的ATP结合位点结合，从而抑制该激酶的活性。Druker BJ 等报导的临床研究证明STI571的副作用很小，主要为恶心、水肿和腹泻等，最大耐受剂量没有测出，在300mg或最高的剂量下，54例慢粒病人中有53例血象完全缓解，多数发生在治疗的第一个四周内，其中细胞遗传学反应有29例，17例为主要缓解，7例为完全缓解。STI571对慢粒治疗效果十分显著，但也发现对STI571耐药的病例，Gorre ME等研究发现对STI571耐药的慢粒病人主要是由于Bcr-Abl 基因扩增或突变所至。
尽管STI571被用于治疗Bcr-Abl相关的白血病，但它对PDGFR和c-kit酪氨酸激酶均有明显抑制作用。因此，STI571对这些激酶相关的肿瘤也有效果。C-kit激活性突变与罕见的胃肠间质肿瘤GIST相关，试验表明STI571在治疗GIST中有明显的效果。70%小细胞肺癌表达c-kit和其配体干细胞因子，STI571呈现抑制小细胞肺癌细胞株生长。用于该病的缓解后巩固治疗。慢性单核细胞白血病中呈现持续活性Tel-PDGFR融合蛋白酪氨酸激酶，胶质母细胞瘤与PDGF及其受体自分泌生长循环相关。STI571呈现能抑制这些肿瘤的生长。
2.2 EGFR受体家族抑制剂
ZD1839，Gefitinib，也称为Iressa是由Astra Zeneca公司开发的一个针对EGFR酪氨酸激酶的可口服的小分子抑制剂。Sirotnac FM 等[7]研究表明，ZD1839单药最大耐受量下（1 50mg/kg）在裸鼠体内诱导上皮细胞肿瘤A431部分缓解，对不同程度EGFR表达的肿瘤A549、SKLC－16、TSU－PR1、PC－3的抑制作用为70－80％。I期临床研究结果可见ZD1839在体内的半衰期为27~41小时，病人对其耐受性很好，最常见的毒副作用为皮肤红疹、恶心、呕吐和腹泻，且这些毒副作用均易处理，Gefitinib口服吸收好，主要经P4503A4代谢，在给予50-700mg/d，稳态浓度在7-10天达到。对64例肿瘤病人的研究表明，最大耐受剂量为7 00mg/d，此剂量使血浆浓度达到体外＞90％抑制作用的浓度。在64例中，15例（23％）有效，非小细胞肺癌16例中2例（12.5％）有效。在进展期非小细胞肺癌化疗失败病例，每天给予250-500mg，有效率为11.8-8.8%，约40%呈现疾病相关的症状改善。
机理研究可见，在A431异体移植瘤标本中，Gefitinib诱导剂量和时间依赖性c-fos mRNA 的抑制。C-fos mRNA在给药后6小时抑制作用最强，36小时后，尚未恢复至正常水平。50或200mg/kg的gefitinib处理后，c-fos mRNA转录减少至对照的6%或0.4%。在人A431细胞和DiFi肿瘤细胞株中抑制生长的浓度Gefitinib也抑制MAPK活性。Gefitinib在非小细胞肺癌病人I期临床试验后皮肤穿刺检测发现MAPK表达明显减少，与增殖细胞减少相一致(K i67减少和P27表达的增加)。在另一研究中，Gefitinib能破坏CDK2的调节延长细胞周期进展。Gefitinib诱导细胞周期停止于G1期在用药后72小时，同时P27明显上调和CDK2活性下降。Gefitinib也抑制抗凋亡AKT/NFkB途径。Gefitinib处理后，抑制肿瘤坏死因子α诱导的AKT和IkB磷酸化。另外，Gefitinib显著地抑制NFkB转录活性和NFkB寡聚核苷酸结合。在另一研究，Gefitinib抑制P21激活激酶1活性。Gefitinib抑制EGFR诱导的细胞骨架结构的形成和体外侵袭等。另外，Gefitinib抑制EGF诱导的血管生成因子VEGF和I L-8的形成。在体内也可见抑制血管生成。
Erlotinib, 也叫Tarceva, OSI774, CP-358774是由OSI医药公司与Genetech公司研究中心开发的一个新的抗肿瘤化合物，为EGFR受体酪氨酸激酶强力的抑制剂。研究表明Erloti nib对EGFR受体酪氨酸激酶抑制的IC50值为2nM，为一可逆性的ATP竞争性抑制剂。用Sr c、Abl、胰岛素、胰岛素样的酪氨酸激酶作对照，发现该抑制剂对EGFR受体酪氨酸激酶的选择性超过1000倍。Erlotinib在体外对EGFR过表达的肿瘤细胞受体的自身磷酸化有明显抑制作用，其IC50值为20nM。同时，发现该抑制剂在体内外对EGFR过表达的上皮细胞肿瘤HN5和A431肿瘤具有明显抑制作用，其对肿瘤生长的抑制与对EGFR磷酸化抑制相符。I I期和III期临床试验表明OSI774在150mg/d治疗化疗耐受的非小细胞肺癌，卵巢癌，头颈癌，抗瘤活性中等。主要的毒性是皮肤红疹和腹泻。57例化疗耐受的非小细胞肺癌的完全缓解率为1.8%， 14%部分缓解， 26%病情稳定。中位生存期为37周，1年生存率为48%。124例化疗耐受的头颈癌，6%部分缓解，40%病情稳定。34例化疗耐受的卵巢癌，6%部分缓解，50%病情稳定。
PD0169414是由Parke-Davis医药研究所开发的一个不可逆性EGFR受体酪氨酸激酶抑制剂，IC50为0.42nM。抑制细胞中EGFR受体自身磷酸化的IC50值为4.7nM。体内研究结果[9]显示口服260mg/kg每天一次共15天，A431肿瘤生长延迟28.2天，6个肿瘤中3个完成缓解，3
个部分缓解。此剂量下，小鼠体重减轻在6%以下。同时还发现该抑制剂对H125，MCF-7、U ISO-BCRA1、SKOV3等肿瘤均有明显的抑制作用。临床试验正在进行中。
PKI-166是由Novartis公司开发的一个可逆性EGFR酪氨酸激酶小分子抑制剂，生化检测分析可见其对EGFR酪氨酸激酶抑制的IC50为1nM。PKI-166体外实验证明其能抑制EGFR磷酸化和细胞增殖。体内实验证明其能抑制EGFR高表达的肿瘤生长，抑制肿瘤转移，延长荷瘤小鼠的生存期。
CI-1033是由辉瑞公司开发的针对HER受体家族的不可逆性口服抑制剂。CI-1033能抑制EG FR和HER2受体酪氨酸激酶，阻断其下游PI3K和MAPK途径。临床前试验表明对许多HER受体表达的肿瘤具有明显的抑制作用。临床试验表明毒性主要是腹泻和皮疹，病人耐受性好，初步可见部分缓解和病情稳定率达到30%。
ST2325是本课题组根据HER2受体的三维空间结构设计、合成、筛选得到的HER2/neu酪氨酸激酶的选择性小分子抑制剂。体外实验表明对HER2/neu酪氨酸激酶有明显的抑制作用，选择性抑制HER2过表达的肿瘤细胞的生长。诱导细胞周期停止于G1期，且与P27上调，C yclinD1下调相关。在裸鼠体内同样具有抑制HER2酪氨酸激酶作用。根据ST2325的结构，本课题组设计合成了一系列化合物，发现其中NBYM和BYM对HER2/neu受体酪氨酸激酶有明显的抑制作用，对HER2/enu过表达细胞生长抑制IC50分别为1.54ug/mL和1.28ug/mL。
鱼腥草素，是本研究组发现的HER2/neu酪氨酸激酶不可逆性抑制剂。在20ug/ml浓度以下，对HER2/neu受体酪氨酸激酶磷酸化有明显的抑制作用，并能阻断其下游Ras/MAPK、PI3K/A KT信号途径。与抗癌药物紫杉醇合用对HER2/neu过表达的MDA453细胞协同生长抑制作用。在裸鼠体内对HER2/neu过表达的肿瘤细胞生长有明显抑制作用与抑制肿瘤组织中HER2/neu 受体的磷酸化相关。机理研究表明，鱼腥草素能诱导HER2/neu过表达的乳腺癌细胞停止于G1期，且与P27上调，Rb磷酸化减少，CyclinD1表达下调等相关。
2.2 VEGFR的抑制剂
SU6668[11]是一种KDR、PDGFR、FGFR酪氨酸激酶小分子抑制剂，其化学名为3-[2,4-二甲基-5-(2-氧-1,2-二氢-吲哚-3-炔甲基)- 1H-吡咯-3-]-丙酸。在小鼠体内中，SU6668处理导致肿瘤生长的缓解或生长停止。SU6668处理在治疗开始的6小时内诱导肿瘤血管内皮细胞凋亡。肿瘤血管密度剂量依赖性减少被观察在开始治疗的3天内。这些改变伴随着肿瘤细胞增殖减少和凋亡的增加。SU6668与ATP结合位点竞争从而抑制酪氨酸激酶的活性。SU6668口服或腹腔注射抑制胶质瘤，黑色素瘤，肺癌，结肠癌、卵巢癌等裸鼠移植瘤生长。
ZD6474是一种强效的口服有活性的，低分子量的VEGFR酪氨酸激酶抑制剂，其化学名为[N-4-溴-2-氟苯基]-6-甲氧基-7-[1-甲基哌啶-4-]甲氧基喹唑啉-4-氨］。对VEGFR酪氨酸激酶的IC50值为40nM。Fms样的酪氨酸激酶4的IC50为110nM，对EGFR的IC50值为500nM。Z D6474明显抑制VEGF－A刺激的血管内皮细胞HUVEC的生长（IC50值为60nM）。VEGF信号的选择性抑制在体内已被证明。ZD6474在2.5mg/kg下静脉注射能逆转VEGF诱导的低压改变（63%），但对FGF诱导的改变无影响。口服每天一次ZD6474（共14天）产生剂量依赖性增加，与VEGF信号和血管生成抑制相一致。ZD6474在50mg/kg/d剂量下在裸鼠体内也能抑制A549肿瘤新生血管生成。
PTK787/ZK222584是另一种VEGFR酪氨酸激酶抑制剂，其化学名为1-[4-氯苯氨基]-4-[4-吡啶甲基]丁二酸酞嗪。PTK787能直接作用于多发性骨髓瘤细胞，PTK787在1－5umol/L浓度下抑制多发性骨髓瘤细胞增殖达50%。PTK787增强地塞米松对多发性骨髓瘤细胞的抑制作用，并克服IL－6对地塞米松诱导凋亡的保护作用。PTK787也阻断VEGF诱导的多发性骨髓瘤细胞迁移通过细胞外基质。这些发现证明了PTK787直接作用于多发性骨髓瘤细胞和抑制旁分泌的IL－6中介的多发性骨髓瘤细胞生长。PTK787抗多发性骨髓瘤细胞活性结合于的抗血管效应提供框架（这种药物克服药物的耐药和改善治疗效果的临床试验。
ON-III是本课题组从中药水翁花蕾中分离的一种单体查尔酮类化合物，实验证明其明显抑制VEGF刺激的血管内皮生长因子受体磷酸化及其下游Ras/MAPK, PI3K/AKT信号途径。急性毒性实验，在剂量用到100mg/kg体重下，无一只小鼠死亡且无可见的毒性反应。体内抗瘤实验表明，在剂量为5mg/kg, 10.mg/kg和20mg/kg下，对人肝癌细胞Bel7402裸鼠移植瘤生长有明显的抑制作用，抑制率分别为42.4%, 59.6%和65.7%。免疫组化研究发现与对照组相比ON-III处理组移植瘤血管密度明显降低。
4 结论与展望
酪氨酸激酶过度激活，从而导致其下游信号的激活，这在肿瘤的发生、发展、转移、治疗和转归等中起着重要的作用。因此，针对其信号转导途径寻找新的抗肿瘤药物具有重要意义。目前，针对Bcr-Abl的STI571、EGFR的ZD1839已被美国FDA批准在临床应用，分别用于治疗慢性粒细胞性白血病和非小细胞肺癌。从而使得科学工作者对研究针对肿瘤特异性癌基因的药物研究更具信心，并已有许多药物在临床试验阶段，如针对VEGFR的SU666，PTK787等。从目前的实验结果来看，这些抑制剂可能还不能将肿瘤完成治愈，但这些抑制剂与常规化疗相结合，会明显地提高肿瘤的治疗效果。肿瘤是一种多因素、多步骤、多基因改变的疾病，这些抑制剂均只针对一种或二种靶分子，因此，将多种抑制剂联合(如鸡尾酒法)可能会起更好的效果。但无论如何，这些针对肿瘤特异性基因改变的药物是消除肿瘤而又无系统毒性的希望。
酪氨酸激酶抑制剂类抗肿瘤药物研究方法进展
现代生物医学进展https://www.wendangku.net/doc/ec13324003.html, Progress in Modern Biomedicine Vol.10NO.16AUG.2010 酪氨酸激酶抑制剂类抗肿瘤药物研究方法进展* 刘振凯1艾 菁2耿美玉1,2△ （1中国海洋大学医药学院山东青岛266003；2中国科学院上海药物研究所上海201203） 摘要：酪氨酸激酶（protein tyrosine kinases,PTKs ）在肿瘤细胞的增殖、分化、迁移、侵袭等相关信号通路中起到了关键的调控作用，已经成为肿瘤靶向性治疗的重要靶点。本文对靶向酪氨酸激酶的小分子抑制剂的筛选和评价方法进行综述，以期促进酪氨酸激酶抑制剂类抗肿瘤药物的研究。 关键词：酪氨酸激酶；抗肿瘤药物；小分子抑制剂；抑制剂筛选 中图分类号： R730.5，R915文献标识码：B 文章编号：1673-6273（2010）16-3134-04Advances in Research of Protein-tyrosine Kinases Inhibitors as Anticancer Drug* LIU Zhen-kai 1,AI Jing 2,GENG Mei-yu 1,2△ （1Marine drug and food Institute,Ocean university of China,Qingdao,266003,China;2Shanghai Institute of Materia Medica,Chinese Academy of Sciences,Shanghai,201203,China ） ABSTRACT:Protein tyrosine kinases (PTKs)have long been recognized as promosing therapeutic targets involved in a variety of human diseases and in particular several types of cancer.They play important roles in regulating intracellular signal transduction path-ways closely associated with the invasion,metastasis and angiogenesis of many tumors.An effort towards the development of new and more effective PTK inhibitors represents an attractive therapeutic strategy for cancer therapy.In this paper,we review the screening and evaluation methods of small-molecule inhibitors of PTKs with a view to promote the study of PTKs. Key words:Protein-tyrosine kinases;Antitumordrugs;Small-molecule inhibitors;Inhibitors screening Chinese Library Classification （CLC ）:R730.5R915Document code:B Article ID:1673-6273(2010)16-3134-04 *基金项目：国家杰出青年科学基金资助（No 30725046） 作者简介：刘振凯（1983-），男，硕士。研究方向：分子药理学。E-mail ：lzkai111@https://www.wendangku.net/doc/ec13324003.html, △通讯作者：耿美玉（1963-），研究员、博士生导师。E-mail ：mygeng@https://www.wendangku.net/doc/ec13324003.html, (收稿日期:2010-05-07接受日期：2010-06-01) 恶性肿瘤是严重威胁人类生命和健康的疾病。目前，临床上常用的抗肿瘤药物主要是细胞毒类药物，这类药物大多存在难以避免的选择性差、毒副作用强、易产生耐药等缺点[1]。近年来，随着生命科学研究的飞速发展，恶性肿瘤细胞内的信号转导、 细胞周期的调控、细胞凋亡的诱导、血管生成以及细胞与胞外基质的相互作用等各种基本过程正在被逐步阐明，给抗肿瘤药物的研发理念带来了巨大转变。以一些与肿瘤细胞分化增殖相关的细胞信号转导通路的关键酶/蛋白作为药物靶点，筛选发现选择性强、高效、低毒的新型抗癌药物已成为当今抗肿瘤药物研究开发的重要方向[2]。 蛋白酪氨酸激酶是一类具有酪氨酸激酶活性的蛋白质，它们能催化ATP 分子上的γ-磷酸基转移到底物蛋白的酪氨酸残基上，使其发生磷酸化。酪氨酸激酶分为受体型和非受体型两种。受体酪氨酸激酶是一种单次跨膜蛋白，目前至少已有近六十种分属20个家族的受体酪氨酸激酶被识别。不同的受体酪氨酸激酶和配体结合后，受体自身发生二聚化或结构重排，并进一步使受体胞内区特异的酪氨酸残基发生自身磷酸化或交叉磷酸化，从而激活下游的信号转导通路[3]。它们在信号由胞外转导至胞内的过程中发挥重要的作用。而非受体酪氨酸激酶是一种胞浆蛋白，现已经确认的有约30种，分为10大家族。蛋白酪氨酸激酶在细胞信号转导通路中占据了十分重要的地位， 调节细胞生长、分化、死亡等一系列生理生化过程。蛋白酪氨酸激酶功能失调则引发生物体内一系列疾病。大量资料表明，超过50%的原癌基因和癌基因产物都具有蛋白酪氨酸激酶活性，它们的异常激活或过度表达将导致细胞无限增殖，周期紊乱，最终导致肿瘤的发生发展[4]。 同时，酪氨酸激酶调控异常还与肿瘤的侵袭、 转移，肿瘤新生血管生成，肿瘤化疗抗性等密切相关。事实上，以酪氨酸激酶为靶点进行抗肿瘤药物的开发已成为国际研究的前沿。 1酪氨酸激酶抑制剂的开发策略 目前酪氨酸激酶抑制剂的开发策略主要分为胞外、胞浆和核内三个层面：细胞外策略主要是针对于受体型，配体与受体的生物拮抗剂以及特异性抗体，通过拮抗配体和受体的相互作用，抑制酪氨酸激酶的激活[5]；胞浆内策略主要分为抑制激酶区的激酶活性和拮抗酪氨酸激酶与其下游信号分子的相互作用两个方面[6]；核内策略主要是利用miRNA 降解或者干扰酪氨酸激酶的mRNA ，抑制激酶的蛋白表达而达到抑制激酶活性的目的[7,8]。其中研究最多的是抑制激酶区激酶活性的小分子抑制剂，而本文也主要是针对这部分抑制剂的研究方法进行探讨。酪氨酸激酶的自磷酸化过程和催化下游信号分子磷酸化的过程都涉及到ATP 上磷酸基团的转移，这一反应过程是酪氨酸 3134··
CD30+间变性大细胞淋巴瘤研究进展
CD30+间变性大细胞淋巴瘤研究进展 关键词：淋巴瘤; 间变大细胞; CD30 CD30+间变性大细胞淋巴瘤（anaplastic large cell lymphoma,ALCL）是非霍奇金淋巴瘤中的一个特殊类型，其特征为淋巴结副皮质区和窦状隙内有表达CD30的间变性大淋巴细胞浸润，临床进展较迅速，常伴有B症状和结外病变，尤其多见皮肤和骨的累及。ALCL的免疫表型主要为T细胞型，部分为裸细胞型，少数具有B细胞表型的间变大细胞淋巴瘤在REAL 及新的WHO分型中已划入弥漫性大B细胞淋巴瘤。还有部分ALCL在形态学和免疫表型上与霍奇金病有重叠。自1985年Stein等首次提出以来，ALCL在形态学、遗传学、临床特征及治疗等方面均得以较为深入的研究，现将有关进展作一总结。 1.形态学特征及分类： ALCL病理表现主要是淋巴结副皮质区浸润和窦状隙内播散。由于肿瘤细胞形态变化较大并伴有反应性细胞，ALCL在形态学上主要分为普通型、小细胞型、淋巴组织细胞型、大细胞型、类霍奇金病型及一些少见类型，其中前三种较为常见。 1.1普通型[1]：可见成片的大淋巴细胞，胞核呈马蹄形，染色质较少，可见多个核仁。这类细胞在所有ALCL亚型中均可见到，为ALCL的特征性细胞。 1.2小细胞型[2]：具有大小不等的细胞，其中小、中细胞胞核不规则，而大细胞常分布于小血管的周围。该型具有一些普通型的特征（成片的CD30+大细胞）并可以转化为普通型。 1.3淋巴组织细胞型[3]：间变性肿瘤细胞被大量的组织细胞所掩盖，但可通过CD30免疫标记区分。组织细胞为反应性细胞，增殖活性低，Ki-67和CD30标记均阴性。由于肿瘤细胞较普通型小，在Kiel分型中被错划为周围T细胞淋巴瘤。 2.遗传学特征： 1994年Morris等[4]首次发现ALCL最常见的染色体异常为t(2;5)(p23;q35)，2号染色体上的ALK基因与5号染色体上的NPM基因融合。约60％的CD30+ALCL患者有涉及ALK 的基因重排，在儿童及年轻人中ALK阳性的比例更高。ALK阳性ALCL预后相对较ALK 阴性者好可能与前者发病年龄较轻有部分关联。 2.1 NPM(Nucleophosmin，核磷酸蛋白)：NPM基因由一个金属结合位点、两个氨基酸丛集区、两个核定位信号（NLS）组成。NPM蛋白是一个38kD的高度保守的核仁磷酸蛋白，能往返于胞浆和核仁，将新合成的蛋白运送到核仁内，其发挥功能依赖于N端的寡聚结构域和C端的核定位信号。NPM蛋白在有丝分裂中被高度磷酸化，参与前核糖体颗粒装配的晚期阶段。Okuda等[5]发现在有丝分裂中由CDK2/cyclin E介导的磷酸化作用启动中心体的复制时，NPM充当了CDK2/cyclin E的作用靶点。在淋巴瘤细胞中，普遍存在的NPM启动子能够使NPM-ALK融合基因处于高表达状态，并且由NPM片断介导的寡聚作用导致NPM-ALK蛋白的活化。 2.2 ALK(anaplastic lymphoma kinase)：ALK基因位于2号染色体p23，编码了一个含1620个氨基酸的受体型酪氨酸激酶[6]。ALK分子具有穿膜RTK的典型结构，包括一个较大的细胞外片断、亲脂性穿膜区以及胞浆内的酪氨酸激酶活化区。NPM-ALK蛋白中与NPM融合的仅是ALK分子的胞浆部分。ALK的细胞外区与白细胞酪氨酸激酶（LTK）的细胞外部分非常类似，故被归入胰岛素受体亚家族。ALK是一个在进化上保守的酪氨酸激酶，经Northern 杂交检测到其在鼠的大脑和脊髓中表达，并经免疫杂交发现在新生鼠的大脑中高表达，而成
酪氨酸激酶小分子抑制剂及其抗瘤作用研究进展
酪氨酸激酶小分子抑制剂抗瘤作用研究进展 小分子抑制剂作为生命科学领域和干细胞研究、药物研究等诸多领域的有效研究工具，其作用越来越被人们认可。现在介绍对抗肿瘤的络氨酸激酶小分子抑制剂的相关研究进展。 与肿瘤相关的酪氨酸激酶主要有位于细胞膜的受体酪氨酸激酶和位于胞浆的非受体酪氨酸激酶，酪氨酸激酶的过度激活与肿瘤发生、发展、预后与转归密切相关。其过度激活，导致其下游信号途径的激活，最终导致细胞的转化、增殖和抵抗细胞凋亡、促进细胞生存。因此，现在科研人员努力致力于酪氨酸激酶抑制剂尤其是从特异性酪氨酸激酶抑制剂角度来研究新的抗肿瘤药物，并且已取得了巨大的突破，如针对Bcr-Abl的Gleevec、针对EGFR 受体酪氨酸激酶Iressa，已被美国FDA批准分别用于慢性粒细胞性白血病和晚期非小细胞肺癌的治疗，效果显著。另外还有许多小分子抑制剂正在临床试验中，有些在HER2/neu和VEGFR受体酪氨酸激酶小分子抑制剂方面进行的一些研究，也取得一些有意义的结果。（在附件中我们已经为您整理出来相关的信息） 不断的反复的实验才能得到需要的结果，陶素生化现可提供诸多不同信号通路的抑制剂、调节剂以及小分子化合物，并附客户评价、产品相关参考文献、技术支持等助力您的实验研究，且保证产品的高纯度和高活性，交货及时并附带完整的谱图信息。 陶素生化能够提供的118种酪氨酸激酶抑制剂的独特集合，可用于高通量筛选和高内涵筛选 ? 通过前期临床研究和临床实验，生物活性和安全性得到验证 ? 其中一些抑制剂已经得到FDA批准 ? 作用于酪氨酸激酶，如EGFR，VEGFR，SRC，c-Met和JAK ? 结构多样，药效显著，可渗透细胞 ? 具有充分详细的结构说明，IC50值，及客户反馈资料 ? NMR和HPLC技术保证产品高纯度 酪氨酸激酶过度激活，从而导致其下游信号的激活，这在肿瘤的发生、发展、转移、治疗和转归等中起着重要的作用。因此，针对其信号转导途径寻找新的抗肿瘤药物具有重要意义。目前，针对Bcr-Abl的STI571、EGFR的ZD1839已被美国FDA批准在临床应用，分别用于治疗慢性粒细胞性白血病和非小细胞肺癌。从而使得科学工作者对研究针对肿瘤特异性癌基因的药物研究更具信心，并已有许多药物在临床试验阶段，如针对VEGFR的SU666，PTK787等。从目前的各方面收集的科研结果来看，这些抑制剂可能还不能将肿瘤完成治愈，但这些抑制剂与常规化疗相结合，会明显地提高肿瘤的治疗效果。以受体酪氨酸激酶信号通路为靶点的抗肿瘤药物，通常只有在该信号通路发生异常的肿瘤细胞上才能取得较好的疗效。但在肿瘤的治疗过程中，仅仅抑制了某些发生异常的信号转导，则其他一些信号通路仍可能会产生代偿而上调，从而影响治疗效果。因此，抑制信号转导的抗肿瘤治疗还应联合其他作用途径的药物以取得更好的疗效。无论如何，这些针对肿瘤特异性基因改变的药物是消除肿瘤而又无系统毒性的希望。 关键词：酪氨酸激酶；抗肿瘤药物；信号通路；小分子抑制剂库 下面整理了络氨酸酶小分子抑制剂的药物研发最热门靶点相关信息供您参考 2000年后肿瘤信号网络被逐渐阐释、完善，大量的分子靶向药物进入临床研究、走上市场，近年针对受体酪氨酸激酶靶点如Bcr-Abl(见1.1)、VEGF/VEGFRs(见1.2)、PDGF/PDGFRs(见1.3)、EGFR/HER2(见1.4)、ALk(见1.5)已有多个药物上市，me-too品种的研发逐渐放缓，但扩展适应症、克服耐药性、优化治疗方案的研究还没有结束。 1.1.Bcr-Abl抑制剂
间变性淋巴瘤激酶抑制剂的研究进展
2016年第35卷第12期 CHEMICAL INDUSTRY AND ENGINEERING PROGRESS ·3985· 化工进展 间变性淋巴瘤激酶抑制剂的研究进展 陈雅琳1，2，3，李巍1，2，3，汪天洋1，2，3，周雪琴1，2，3，刘东志1，2，3 （1天津大学化工学院，天津 300072；2天津化学化工协同创新中心，天津 300072；3天津市功能精细化学品 技术工程中心，天津 300072） 摘要：研究发现非小细胞肺癌的形成与多种致癌突变密切相关，其中间变性淋巴瘤激酶重排备受关注，针对棘皮动物微管相关蛋白质4-间变性淋巴瘤激酶融合基因的抑制剂克唑替尼对于治疗晚期ALK阳性非小细胞肺癌患者是有效的，2011年获得美国食品药品监督管理局批准上市，但出现了耐药性，第二代间变性淋巴瘤激酶抑制剂的出现，克服了耐药机制，并显示出治疗非小细胞肺癌患者的活性。本论文按化学结构的不同介绍了克唑替尼、Ceritinib、Alectinib 、Brigatinib、RXDX-101、PF-06463922、ASP3026、X-396、CEP-37440等间变性淋巴瘤激酶抑制剂及临床研究等，为非小细胞肺癌的靶向治疗药物的开发提供了参考。 关键词：非小细胞肺癌；EML4-ALK基因重排；克唑替尼 中图分类号：TN 41 文献标志码：A 文章编号：1000–6613（2016）12–3985–06 DOI：10.16085/j.issn.1000-6613.2016.12.035 Advances in research on anaplastic lympgoma kinase inhibitors CHEN Yalin1，2，3，LI Wei1，2，3，WANG Tianyang1，2，3，ZHOU Xueqin1，2，3，LIU Dongzhi1，2，3 （1School of Chemical Engineering and Technology，Tianjin University，Tianjin 300072，China；2Collaborative Innovation Center of Chemical Science and Engineering，Tianjin 300072，China；3Tianjin Engineering Research Center of Functional Fine Chemicals，Tianjin 300072，China） Abstract：Researchers have found that multiple oncogenic driver multations are closely related with the progression and prognosis of NSCLC.In the era of molecular targeted treatment，rearrangements in anaplastic lymphoma kinase（ALK）gene and echinoderm microtubule-associated protein-like 4（EML4）gene were applied in patients with non-small cell lung cancer（NSCLC）. Crizotinib，an ALK inhibitor，is effective in treating advanced ALK-positive NSCLC，and the US Food and Drug Administration（FDA）approved it for treating ALK-positive NSCLC. Several mechanisms of acquired resistance to crizotinib have recently been reported. Second-generation ALK inhibitors were developed to overcome these resistance mechanisms and showed activity again st ALK positive NSCLC. The latest development of crizotinib，ceritinib，alectinib etc. were reviewed. Key words：non small cell lung cancer；echinoderm microtubule-associated protein-like 4-anaplastic lymphoma kinase rearrangement；crizotinib 肺癌是恶性肿瘤中致死率最高的肿瘤，每年约有130万人死于肺癌[1]。其中，最常见的是非小细胞肺癌（NSCLC），其患者比例高达85%[2-3]。分子靶向治疗以特异性高、副反应少的优势成为目前非小细胞肺癌的首选治疗方案。这种有的放矢的治疗方法为NSCLC的治疗指明了方向。目前NSCLC最主要的靶点是表皮生长因子受体（EGFR），科研人员针对此靶点研究开发了表皮生长因子受体酪氨酸激 收稿日期：2016-05-10；修改稿日期：2016-05-24。 基金项目：天津市科技创新平台计划（14TXGCCX00017）项目。第一作者：陈雅琳（1990—），女，硕士研究生。联系人：刘东志，教授，博士生导师，研究方向为精细化工产品，E-mail dzliu@https://www.wendangku.net/doc/ec13324003.html,。 万方数据
非小细胞肺癌酪氨酸激酶抑制剂的耐药
非小细胞肺癌酪氨酸激酶抑制剂的耐药 肺癌的靶向治疗耐药主要有两大类，上皮生长因子受体（EGFR）酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）耐药和间变性淋巴瘤激酶（ALK）酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）耐药。 1. EGFR 酪氨酸激酶抑制剂 埃罗替尼（Erlotinib）、吉非替尼（Gefitinib）、阿法替尼（Afatinib）是首批进入非小细胞肺癌临床治疗的EGFR 酪氨酸激酶抑制剂，EGFR 突变表型患者对这类药物的响应很好。但是，获得性耐药是EGFR 酪氨酸激酶抑制剂所面临的一大难题，什么措施可以延迟或克服这种耐药。 EGFR 酪氨酸激酶抑制剂的耐药的一个原因是EGFR 靶点修饰，EGFR 酪氨酸激酶结构域出现二点突变（T790M）。接近60% 的埃罗替尼、吉非替尼、阿法替尼耐药肺癌患者样本均有这种突变，该突变是第一代和第二代EGFR 酪氨酸激酶抑制剂耐药的主要原因。 突变特异性EGFR 酪氨酸激酶抑制剂是一类新型的针对EGFR 突变的不可逆抑制剂。埃罗替尼、吉非替尼、阿法替尼主要靶向野生型EGFR，突变特异性EGFR 酪氨酸激酶抑制剂主要靶向激活性突变，例如T790M 突变。目前已经有两种突变特异性抑制剂已经接近进入临床，分别是CO-1686（Rociletinib）和AZD9291。 近期NEJM 刊登了一项研究，该临床试验纳入了46 位埃罗替尼、吉非替尼、阿法替尼耐药的肺癌患者。研究结果显示，T790M 阳性患者对Rociletinib的响应率为59%。有趣的是，对接受过一线治疗的肺癌患者来说，用靶向T790M 的药物进行二线治疗，其响应率接近60%、疾病控制率高达90%。相反，如果肺癌患者在一线治疗中没有出现T790M 突变，其响应率非常低。 AZD9291 是另一种第三代不可逆突变特异性EGFR 抑制剂。有研究报道，T790M 阳性癌症患者对AZD9291 的响应率接近60%，而T790M 阴性癌症患者对AZD9291 的响应率非常低，这与上述Rociletinib的效果相同。 2014 年有团队评估了不可逆二代抑制剂联合阿法替尼（野生型EGFR 靶向抑制剂）和西妥昔单抗（EGFR 单克隆抗体）对肺癌患者的治疗效果。该研究患者均为EGFR 突变肺癌患者，在对第一代EGFR 抑制剂产生获得性耐药后，开始接受阿法替尼和西妥昔单抗治疗。 结果显示，肺癌患者的总体响应率为29%，包括T790M 阳性和阴性患者。该研究表明突变特异性EGFR 抑制剂有希望成为EGFR 突变肺癌患者的一线治疗药物，但是它们对进展期的T790M 阴性患者并无效果。然而，将突变特异性EGFR 抑制剂与阿法替尼与西妥昔单抗联合可能是该难题的解决方案之一。 如果第三代EGFR 酪氨酸激酶抑制剂失败了，该怎么办？通常认为靶向治疗是有效的，但是即使是第三代EGFR 酪氨酸激酶抑制剂，也要考虑耐药问题。
关于淋巴瘤病理分类的一些新认识
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关于淋巴瘤病理分类的一些新认识 作者：李小秋 作者单位：200032,复旦大学附属肿瘤医院病理科复旦大学上海医学院肿瘤学系 刊名： 中华病理学杂志 英文刊名：Chinese Journal of Pathology 年，卷(期)：2013,42(9) 参考文献(10条) 1.Mamessier E.Song JY.Eberle FE In situ follicular lymphoma:a genetic viewpoint 2013(Suppl 1) 2.Roulland S.Sungalee S.Morgado E Interative germinal centre re-entries of memory B cells with t (14;18) translocation and early steps of follicular lymphoma progression 2013(Suppl 1) 3.Gibson SE.Swerdlow SH.Ferry JA Reassessment of small lymphocytic lymphoma in the era of monoclonal B-cell lymphocytosis 2011(08) 4.Petrella T.Maubec E.Cornillet-Lefebvre P Indolent CD8positive lymphoid proliferation of the ear:a distinct primary cutaneous T-cell lymphoma 2007(12) 5.Takeuchi K.Yokoyama M.Ishizawa S Lymphomatoid gastropathy:a distinct clinicopathologic entity of self-limited pseudomalignant NK-cell proliferation 2010(25) 6.Mansoor A.Pittaluga S.Beck PL NK-cell enteropathy:a benign NK-cell lymphoproliferative disease mimicking intestinal lymphoma:clinicopathologic features and follow-up in a unique case series 2011(05) 7.Hu S.Xu-Monette ZY.Tzankov A MYC/BCL2 protein coexpression contributes to the inferior survival of activated B-cell subtype of diffuse large B-cell lymphoma and demonstrates highrisk gene expression signatures:a report from the International DLBCL Rituximab-CHOP Consortium Program Study 2013(20) 8.Eberle FC.Rodriguez-Canales J.Wei L Methylation profiling of mediastinal gray zone lymphoma reveals a distinctive signature with elements shared by classical Hodgkin's lymphoma and primary mediastinal large B-cell lymphoma 2011(04) 9.Fernàndez V.Salamero O.Espinet B Genomic and gene expression profiling defines indolent forms of mantle cell lymphoma 2010(04) 10.Cairns RA.Iqbal J.Lemonnier F IDH2 mutations are frequent in angioimmunoblastic T-cell lymphoma 2012(08) 本文链接：https://www.wendangku.net/doc/ec13324003.html,/Periodical_zhblx201309001.aspx
中国表皮生长因子受体基因敏感性突变和间变淋巴瘤激酶融合基因阳性非小细胞肺癌诊断治疗指南(2015版)
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．０２５３?３７６６．２０１５．１０．０１８ 基金项目：国家高技术研究发展计划（８６３计划）（２０１１ＡＡ０２Ａ１１０）；国家重大新药创制科技重大专项（２０１２ＺＸ０９３０３０１２二２０１３ＺＸ０９１０１００２?００１?００１二２０１４ＺＸ０９３０４００３?００３?００２）；卫生部卫生公益性行业科研专项（２００９０２００２?１）；抗肿瘤分子靶向药物临床研究北京市重点实验室２０１２年度阶梯计划项目（Ｚ１２１１０２００９２１２０５５）；中央保健专项资金（Ｗ２０１３ＢＪ４０）；北京市科技计划肺癌早期发现和规范化治疗关键技术研究项目（Ｄ１４１１０００００２１４００３二Ｄ１４１１０００００２１４００５）；国家科技支撑计划（２０１４ＢＡＩ０９Ｂ０１） 通信作者：石远凯，Ｅｍａｉｌ：ｓｙｕａｎｋａｉ＠ｃｉｃａｍｓ．ａｃ．ｃｎ四指南与规范四 中国表皮生长因子受体基因敏感性突变 和间变淋巴瘤激酶融合基因阳性非小细胞 肺癌诊断治疗指南（２０１５版） 中国医师协会肿瘤医师分会中国抗癌协会肿瘤临床化疗专业委员会 ?主题词?一癌，非小细胞肺；一表皮生长因子受体；一间变淋巴瘤激酶；一诊断；一治疗 ?Ｓｕｂｊｅｃｔｗｏｒｄｓ?一Ｃａｒｃｉｎｏｍａ，ｎｏｎ?ｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇ；一Ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒ；一Ａｎａｐｌａｓｔｉｃｌｙｍｐｈｏｍａｋｉｎａｓｅ；一Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ；一Ｔｈｅｒａｐｙ 一一肺癌的发病率和死亡率均居我国恶性肿瘤第１位［１］，其中非小细胞肺癌（ｎｏｎ?ｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ，ＮＳＣＬＣ）约占８５％三大多数ＮＳＣＬＣ患者确诊时即为晚期，治疗以化疗等全身性治疗为主三近年来，随着一系列肿瘤驱动基因的发现，ＮＳＣＬＣ的分型由过去单纯的病理组织学分型，进一步细分为含不同驱动基因的分子亚型三而针对驱动基因的个体化分子靶向治疗因其显著的疗效和良好的安全性，已成为晚期ＮＳＣＬＣ的标准治疗三特别是表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ＥＧＦＲ?ＴＫＩ）和间变淋巴瘤激酶酪氨酸激酶抑制剂（ａｎａｐｌａｓｔｉｃｌｙｍｐｈｏｍａｋｉｎａｓｅｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ＡＬＫ?ＴＫＩ）的发现，在ＮＳＣＬＣ个体化分子靶向治疗的发展历程中具有里程碑式的意义［２?３］三 ＥＧＦＲ是一种跨膜受体，与细胞增殖二转移二凋亡等多种信号传导通路有关三ＥＧＦＲ突变主要包括４种类型：１９外显子缺失突变二２１外显子点突变二１８外显子点突变和２０外显子插入突变［４］三最常见的ＥＧＦＲ突变为１９外显子缺失和２１外显子Ｌ８５８Ｒ突变，二者均会导致酪氨酸激酶结构域活化，且均为ＥＧＦＲ?ＴＫＩ的敏感性突变，１８外显子Ｇ７１９Ｘ二２０外显子Ｓ７６８Ｉ和２１外显子Ｌ８６１Ｑ突变亦均为敏感性突变，２０外显子的Ｔ７９０Ｍ突变与ＥＧＦＲ?ＴＫＩ获得性耐药有关，还有许多类型的突变临床意义尚不明确［５?６］三肺腺癌患者ＥＧＦＲ基因敏感性突变阳性率在高加索人群约为１０％，在亚裔人群和我国均为５０％左右［７］三 ＡＬＫ最早在间变性大细胞淋巴瘤的一个亚型中被发现，并因此得名三继２００７年Ｓｏｄａ等［８］首次报道了在ＮＳＣＬＣ中发现染色体２ｐ的易位，造成棘皮动物微管相关类蛋白４（ｅｃｈｉｎｏｄｅｒｍｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ?ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ?ｌｉｋｅ４，ＥＭＬ４）的Ｎ?端与ＡＬＫ的激酶区融合产生一个融合基因之后，一系列研究显示，ＥＭＬ４?ＡＬＫ易位有多种变异，且均可导致具有催化活性的激酶融合蛋白变异体的表达，而动物实验证实该激酶具有致癌性三ＥＭＬ４?ＡＬＫ融合基因阳性的ＮＳＣＬＣ患者已经被定义为ＮＳＣＬＣ的一种特殊亚型，主要出现在不吸烟或少吸烟的肺腺癌患者三ＡＬＫ也与其他基因融合而实现活化，如与ＰＴＰＮ３二ＴＦＧ二ＫＩＦ５Ｂ二ＫＬＣ１二ＳＴＲＮ二ＴＰＲ及ＨＩＰ１基因等三西方ＮＳＣＬＣ患者ＡＬＫ融合基因阳性率约为３％ ７％，中国ＮＳＣＬＣ患者阳性率约为３％ １１％［９］，而在ＥＧＦＲ二Ｋ?ｒａｓ二人表皮生长因子受体２或ＴＰ５３等基因无突变的ＮＳＣＬＣ患者中，ＡＬＫ融合基因阳性率达２５％；我国ＥＧＦＲ和Ｋ?ｒａｓ均为野生型的腺癌患者，ＡＬＫ融合基因的阳性率高达３０％ ４２％［１０?１１］三已有多项临床研究证明，ＥＧＦＲ?ＴＫＩ和ＡＬＫ?ＴＫＩ能分别使ＥＧＦＲ基因敏感性突变和ＡＬＫ融合基因阳性的ＮＳＣＬＣ患者显著获益［１２?１８］三ＥＧＦＲ?ＴＫＩ
2020 CSCO儿童及青少年淋巴瘤诊疗指南解读 间变大细胞淋巴瘤
2020 CSCO儿童及青少年淋巴瘤诊疗指南解读| 间变大细胞淋巴瘤 2020年6月21日，“2020中国临床肿瘤学会（CSCO）儿童及青少年淋巴瘤诊疗指南发布会”以线上直播的形式顺利召开。全国血液肿瘤及儿科领域的专家和学者齐聚线上，交流并分享研究成果，共同关注第一版儿童及青少年淋巴瘤诊疗指南的发布。会议期间，上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心高怡瑾教授对儿童及青少年间变大细胞淋巴瘤诊疗指南进行详细解读，医脉通整理如下。 间变大细胞淋巴瘤（ALCL）是成熟T/NK细胞淋巴瘤，约占儿童非霍奇金淋巴瘤的10-15%。 治疗前评估 ALCL临床特征
?全身症状常见～50%（发烧和体重减轻） ?结外病变常见（皮肤、软组织、骨、肺、胸膜和胃肠病变） ?骨髓（BM）受累～5%；CNS受累少见 ?特殊表现 ①噬血细胞综合征（HLH） ②外周血白血病细胞（表现为严重的呼吸衰竭） ALCL临床分期 目前根据国际儿童非霍奇金淋巴瘤分期系统对ALCL患者进行分期：
?传统形态学仍是目前BM、CSF肿瘤残留的评价方法；更为敏感的分子生物学结果作为支持资料，加以记录。 ?MRI/CT是主要的评估手段；PET/CT结果作为支持资料，加以记录。 ?PET的阴性价值＞阳性价值 病理诊断 ?90%可检测到累及ALK（间变淋巴瘤激酶）的易位基因 ?t(2;5)(p23;q35)占85%，致形成NPM/ALK融合蛋白；其余15%病例为累及A LK的其他异位 ?罕见病例可涉及DUSP22、P63等其他基因重排 治疗
?NHL-BFM90方案 NHL-BFM90方案的5年无事件生存率约为76%。用药累积数据如下图： ?ALCL99方案 多中心随机研究数据如下（试验共涉及12个国家的10个国家组或合作组）： 图患者分组
酪氨酸激酶抑制剂在抗肿瘤治疗中的应用
第24卷第2期菏泽医学专科学校学报VOL.24NO.2 2012年JOURNAL OF HEZE MEDICAL COLLEGE2012 oi:10.3969/j.issn.1008-4118.2012.02.41 酪氨酸激酶抑制剂在抗肿瘤治疗中的应用 刘聪,纪晓 (莒南县人民医院,山东莒南276600) 关键词:酪氨酸激酶抑制；分子靶向；药物疗法 中图分类号：R730.54文献标识码：A文章编号：1008-4118（2012）02-0072-02 酪氨酸激酶抑制剂以肿瘤细胞生长因子为靶点，有针对性的阻断这些因子的信号转导通路，从而达到抑制肿瘤生长、转移的目的，已在胃肠间质瘤、慢性粒细胞性白血病（CML）、乳腺癌、非小细胞肺癌（NSCLC）等治疗中显示出高效、低毒等特点[1]。本文旨在对近年来应用较频繁且疗效确切的酪氨酸激酶抑制剂从理论到临床应用综述如下。 蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)是一类催化ATP上γ-磷酸转移到蛋白酪氨酸残基上的激酶，能催化多种底物蛋白质酪氨酸残基磷酸化，在细胞生长、增殖、分化中具有重要作用。酪氨酸激酶抑制剂，抑制细胞内与靶点相关联的酪氨酸激酶的磷酸化作用，从而阻止靶点功能。常见的有生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂、Bcr-Abl酪氨酸激酶抑制剂。 1生长因子受体 表皮生长因子受体（EGFR），是一种糖蛋白的跨膜受体，也称HER,共四个，分别叫HER-1、HER-2、HER-3、HER-4、一旦特异性配体（EGF）结合上去，就能通过相应的酪氨酸激酶的自身磷酸化作用而激活受体，从而激发了细胞内的信号转导连锁反应使DNA合成、细胞生长和存活。EGFR在相当一部分肿瘤中都有不同程度表达，其中HER-2为人类表皮生长因子受体，其过度表达见于20%~30%乳腺癌[2]，还可见于卵巢癌、肺腺癌[3]、胰腺癌、胃癌[4]、大肠癌。其他如血管内皮生长因子（VEGF）、血小板源性生长因子（PDGF）等。 2Bcr-Abl染色体 慢性粒细胞白血病患者95%左右均有第9号染色体ab1和22号染色体bcr长臂的异位，被称之为Ph1染色体。两种染色体的基因重组在一起，产生融合蛋白p-210,定位于细胞膜，为具有较高酪氨酸激酶活性的致癌蛋白，从而刺激白细胞增值，导致白血病的形成，而这一改变早于血液和骨髓的改变。所以Ph1染色体已经是慢性粒细胞白血病诊断和治疗的重要指标[5]。 3主要几种酪氨酸激酶抑制剂 1)伊马替尼是酪氨酸激酶抑制剂，靶向治疗最成功的范例，还可抑制血小板衍化生长因子（PDGF）和干细胞因子（SCF）受体的酪氨酸激酶，用于CML的慢性期、进展期、急变期。慢性期疗效优于进展期及急变期[6]。另外用于表达c-kit阳性的晚期、转移性胃肠间质瘤（GIST）[7]。2)吉非替尼Gefinib-易瑞沙-IR-ESSA-为强有力EGFR酪氨酸激酶抑制剂，用于晚期NSCLC一线或铂类失败后二、三线治疗，疗效确切[8]。本品在女性、亚洲、非吸烟、腺癌及肺泡癌患者中由于EGFR基因突变较多，因此疗效也较好[9]。本品联合化疗，优势明显[10]。3)埃罗(厄洛）替尼erlotinib-特罗凯-TARCEVA-（HER1/EGFR）受体酪氨酸激酶抑制剂，在EGFR阳性和不吸烟的患者中疗效明显。用于局部晚期或转移的非小细胞肺癌的二、三线治疗[11]，同时治疗吉非替尼失败后晚期非小细胞肺癌[12]，和吉西他滨健择联合作为晚期胰腺癌一线治疗标准方案[13]。4)索拉非尼-多吉美-Nexevar具有双重抗肿瘤作用：一方面通过抑制RAF/MEK/ERK信号传导通路直接抑制肿瘤生长，另一方面通过抑制VEGF和PDGF受体而阻断肿瘤新生血管的形成，间接抑制肿瘤细胞生长。用于治疗晚期肾细胞癌、晚期肝癌可获益[14]。5)舒尼替尼Sunitinib-sutent-多靶点酪氨酸激酶抑制剂，抑制VEGF-R1,-R2,-R3及血小板衍生生长因子(PDGFR-β)、KIT、FLT-3和RET的酪氨酸激酶活性，通过特异性阻断这些信号PDGFR、VEGF 传导途径达到抗肿瘤效应。用于肾细胞癌，与干扰素相比能显著提高PFS（11>6月）及OS[15]。用于格列卫治疗失败的GIST，能显著延长PFS(27.3>6.4周) [16]。6)拉帕替尼（Lapatinib）-Tykerb是一种能同时抑制EGFR（ErbB-1）和HER-2（ErbB-2）酪氨酸激酶活性的小分子酶抑制剂。Lapatinib可同时作用于 72
ALK基因突变与对应的靶向药物
间变性淋巴瘤激酶（ALK）突变的形式有过量表达、与其他基因形成融合基因，发生点突变等等。ALK基因融合突变是非小细胞肺癌（NSCLC）常见的一种驱动基因，中国非小细胞肺腺癌中ALK融合突变阳性的比例为5.3%，在非小细胞肺腺癌、年轻患者（小于60岁）以及不吸烟的人群中发生率较高，ALK阳性的非小细胞肺癌被认为是一种分子亚型，相对应的靶向药物与EGFR分子亚型完全不同。 ALK融合基因突变主要在肺腺癌里常见，一般肺鳞癌患者ALK融合基因突变概率很低，有报道说1400个肺鳞癌患者里ALK融合基因的发生率为1.3%。考虑到ALK总体突变频率仅有5%，所以对于鳞癌患者也是可以做一下ALK检测的。由于非小细胞肺癌里的驱动基因突变一般是互相排斥的，或者说一山不容二虎，癌细胞也没有必要搞两个驱动突变。有研究说亚裔的EGFR、KRAS野生型的腺癌患者，ALK阳性比例高达30%-42%，因此如果发现EGFR和KRAS是野生型，是更有必要测下ALK基因的。 一、ALK融合突变的检测 图1：非小细胞肺癌中ALK的重排形式 据报道，目前已发现21种EML4-ALK的融合形式，另外ALK还可能与TFG、KIF5B、KLC1、PTPN3、STRN等基因发生融合，因此ALK融合突变的诊断是存在一定难度的。下表是关于ALK融合突变的诊断方法，及其相应的特点。
表1：ALK基因检测的方法 需要注意，临床常用的三种方法是FISH、Ventana IHC及RT-PCR，三种方法FISH 的灵敏度最低。因此，如果是胸腔积液、细针穿刺取到的细胞学样本做成的蜡块，不建议使用FISH，避免假阴性。另外通过抽血检测循环肿瘤DNA（ctDNA），循环肿瘤细胞（CTC）也正在发展起来。总之在面对ALK检测结果模棱两可的时候，一定要换一个检测方法去验证，也没有哪一种方法灵敏度和特异性都是100%。
非小细胞肺癌EGFR酪氨酸激酶抑制剂的耐药机制及逆转
【摘要】晚期非小细胞肺癌（non-small-cell lung carcinoma，NSCLC）的治疗以含铂双药联合化疗为标准治疗方案，多项研究表明，化疗药物对于NSCLC的疗效已经进入平台期，因此，寻求新的治疗方式已迫在眉睫。表皮生长因子受体（EGFR）在40% 80%的NSCLC中过表达，通过干预EGFR酪氨酸激酶信号转导已成为治疗NSCLC的主要方式。临床应用的EGFR抑制剂主要有EGFR单克隆抗体（mon-oclonal antibody，MAb）及特异性小分子酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor，TKI）。目前已证实EGFR-TKI的疗效肯定，但其原发性及继发性耐药是一个不容忽视的问题，且耐药机制复杂。文章对EGFR-TKI在临床中的应用，EGFR突变与TKI敏感性的关系，EGFR-TKI的耐药机制及逆转耐药的方法进行综述。 【关键词】非小细胞肺癌；EGFR；EGFR酪氨酸激酶抑制剂；耐药；耐药逆转 doi：10．3969/j．issn．1674－4136．2012．03．012 文章编号：1674P4136（2012）03－0164－05 表皮生长因子受体（EGFR）信号通路参与控制细胞的存活、增殖、血管生成、细胞迁移、细胞侵袭及转移等过程［1］，因此通过干预EGFR酪氨酸激酶信号转导已成为近年来肿瘤治疗的研究热点。EGFR 特异性小分子酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase in-hibitor，TKI）吉非替尼和厄洛替尼是治疗非小细胞肺癌（non-small-cell lung carcinoma，NSCLC）的小分子靶向药物。2004年，多个权威期刊发表了关于EGFR突变与TKI药物敏感性关系的研究，发现EGFR突变的患者对TKI药物有很好的反应性［2-3］，特别是具有19外显子密码子746 750的缺失突变，21外显子密码子858替代突变（L858）的患者对TKI高度敏感。尽管如此，原发性及继发性耐药仍是亟待解决的问题。到目前为止，很多关于耐药的机制被报道，如EGFR基因20外显子的插入突变及KRAS基因突变与原发性耐药有关；EGFR基因的二次突变，MET基因的扩增以及HGF基因的过表达与继发性耐药有关等。本文就EGFR靶向治疗药物的临床应用，耐药机制及相关解决方法进行综述。 1EGFR-TKI在NSCLC临床治疗中的应用 EGFR-TKI通过与细胞内酪氨酸激酶结构域上ATP位点竞争性结合，可逆性、选择性抑制与EGFR 相关的酪氨酸激酶活性及细胞内磷酸化过程，进而抑制EGFR下游的信号转导，从而阻断EGFR诱导的体外肿瘤细胞的生长，加速细胞凋亡、拮抗血管生成、抑制肿瘤转移、阻断肿瘤生长。 1．1吉非替尼 吉非替尼是最早用于治疗NSCLC的靶向药物之一，已有多项国际多中心临床研究证实吉非替尼治疗肺腺癌有效。IPASS研究是在东亚，对非吸烟或很少吸烟的患者进行吉非替尼与卡铂+紫杉醇联合化疗的对照实验，结果显示在所有患者中吉非替尼组比卡铂－紫杉醇组有更长的无疾病进展 · 461 ·中国肿瘤外科杂志2012年6月第4卷第3期Chin J Surg Onco，Jun．2012，Vol．4，No．3