佐剂的研究现状

佐剂的研究现状

【摘要】随着免疫学研究的不断深入和基因工程技术的迅速发展,对佐剂的研究显得越来越重要，本文通过查阅近几年相关文献，综合免疫佐剂研究多方面资料和最新观点，就免疫佐剂研究概况作一综述，着重介绍几种新型的佐剂的特点，并就其发展趋势提出自己的见解，为开发研制高效、低毒、结构新颖的免疫佐剂提供参考。

【关键字】免疫佐剂研究

佐剂是先于抗原或同时注射于动物体内，能非特异性地改变机体对抗原的特异性免疫应答，能增强相应抗原的免疫原性或改变免疫反应类型，而本身并无抗原性的物质，又称免疫佐剂。从巴斯德至今近百年来已开发了许多菌苗和疫苗，但传统的菌疫苗一般多为全菌或全病毒制成，其中含有大量非免疫原性物质，这些物质除具有毒副作用外也有佐剂作用，所以一般不需要外加佐剂。因此,在这段时间里免疫佐剂并未引起人们广泛的注意，直到1925年，法国免疫学家兼兽医Gaston Ramon发现在疫苗中加入某些与之无关的物质可以特异地增强机体对白喉和破伤风毒素的抵抗反应[1]，从此许多国家都不同程度的开展了这方面的研究。现在,由于高度纯化的新型疫苗的生产技术不断取得突破，而常规的佐剂由于其自身的缺陷使之很难适应新型疫苗的发展，因此新的研究工作已经逐渐引起科研工作者的注意。

20世纪60年代，原苏联喀山医学院就对蜂胶影响动物机体免疫活性方面进行了观察，通过对小鼠、豚鼠、家兔等实验证明应用蜂胶或配合抗原进入机体，能促进机体免疫过程。1981年Kreuter首次将纳米材料应用于疫苗佐剂，证明纳米粒子佐剂既能提高细胞免疫，又能提高体液免疫。1998年Moldoveanu 等最早报道CpG ODN 联合灭活流感病毒免疫小鼠能诱导产生比常规佐剂更高的血清特异性抗体。这些新型佐剂能克服常规佐剂的一些缺陷，因而受到国内外学者越来越多的关注。目前我国常用的佐剂有铝盐、油乳、蜂胶、多糖、微生物、氟氏（FA）佐剂、γ- 干扰素（IFN-γ）、白细胞介素(Interleuki-ns，ILs)、免疫刺激复合物（ISCOMs）、糖苷及复方中药佐剂等，新型免疫佐剂有核酸、CpG、补体、纳米、脂质体（LIP）等。下面就几种免疫佐剂的研究现状和应用前景进行简要的综述。

1 佐剂作用机理

Cox[2]等提出了佐剂增强免疫应答5种可能的机制:

1.1 免疫调节作用

众多佐剂具有调节细胞因子网络的能力。不同的佐剂诱导抗原提呈细胞分泌不同的细胞因子，促使Th前体细胞向Th1或Th2不同的亚型分化。

1.2 抗原提呈作用

某些佐剂能保持抗原构象的完整性，并将其呈递给合适的免疫效应因子。当佐剂与抗原以更有效的维护构象表位的方式结合时，可提高抗原的体内作用,延长抗原屏蔽时间.

1.3 诱导CD8+细胞毒性T细胞(CTL)

应答通过与细胞膜融合或保护抗原肽，佐剂可促进相应肽掺入MHC类分子并维持二者结合，同时期望通过诱导IFN-γ和TNF-α来提高肽MHC类分子的表达。

1.4 靶向作用

指佐剂通过激发APC摄取和传递抗原，进而向免疫效应细胞提呈免疫原的能力。此种调节有助于免疫系统获得足量免疫原以达到预期的免疫效果。

1.5 抗原贮存作用

以铝佐剂和油包水佐剂为代表的短期贮存，可将抗原捕获在注射部位免受肝脏清除，像合成多聚体微球等长期贮存的佐剂，可贮存抗原以提供持续和脉冲式释。而纳米佐剂增强疫苗免疫应答的作用机制尚未清楚,可能与以下机制有关：纳米粒子与疫苗抗原的结合方式、结合比例等对疫苗抗原有保护性作用，保护抗原免受机体各种酶的降解；抗原物质与纳米粒子结合后更有利于被APC靶向摄取(纳米佐剂和抗原组成的超小体积的微粒是巨噬细胞、树突状细胞的首选吞噬目标；长效缓释，随着纳米佐剂粒子的降解,抗原可持续释放。对于纳米佐剂的作用机制需进一步研究，因为只有弄清作用机制后，才能根据其机制找到佐剂最大免疫刺激作用和最小不良反应的平衡点，将纳米佐剂安全有效地应用于人体。

2·几种新型佐剂的特点

2.1 脂质体（LIP）

LIP 是人工合成的双分子层的单层磷脂或多层可溶性物质隔开的呈同心圆的微环体脂质小囊，可包裹各种物质及疫苗，该载体主要由磷酸类脂、胆固醇、硬脂胺等组成的单层或多层双分子夹水结构，在体内趋向于沉积在肝、脾、淋巴结等网状内皮巨噬系统中，它既是抗原也是免疫佐剂，由于其膜结构致密，抗原不易漏出，能长久的将抗原传递给适免疫细胞，促进抗原对抗原提呈细胞的定向作用。LIP 既无毒性，又无免疫原性以及在体内的可降解性，不会在体内引起类似弗氏佐剂所引起的损伤，是一种优良佐剂[3]。刘湘涛等报道用LIP 与禽多杀性巴氏杆菌的主要保护性抗原荚膜多糖（CPS）配制的疫苗比用油乳剂、明矾及金黄色葡萄球菌免疫复合物为佐剂的效果好。Novasomes 是目前研制的一种新型脂质体样系统用于黏膜免疫，该系统为非磷脂亲水脂分子，在体内稳定性比常规LIP 好，而且价廉、易制备，是一种很好的免疫佐剂。

2.2 纳米粒子佐剂

纳米粒子能穿透组织间隙，也可通过机体最小的毛细血管，且分布面极广，易被消化和吸收，从而可最大限度的提高利用率。而且包裹或表面结合抗原的纳米粒子能使蛋白抗原的表面充分暴露，同时使抗原结构更稳定，能促进淋巴集结的摄取，在体内能引起强烈的特异性免疫反应。大量的实验都表明，纳米粒子佐剂可有效提高细胞免疫、体液免疫和粘膜免疫。美国密歇根州大学生物纳米科技中心，将小鼠免疫流感病毒A和纳米乳剂的混合物免疫小鼠，20 d 后用致死剂量的流感病毒感染小鼠，结果免疫动物受到了完全的保护，而接种了甲醛灭活病毒或纳米乳剂的小鼠，则发展为病毒性肺炎，6 d后死亡[4]。Stieneker 等发现聚甲基丙烯酸甲酯纳米粒子对大鼠体内的AIDS疫苗起辅助作用时，与氢氧化铝辅助作用相比，抗体的滴度要高出100～1 000倍[5]。

在国内，何萍,吕凤林等人通过自制纳米铝佐剂，研究其对乙型肝炎病毒和狂犬病毒体液免疫应答的影响。结果纳米铝佐剂在诱导HBsAg 和Rabies疫苗体液免疫应答的早期优于常规铝佐剂, 能够快速地激活和提高小鼠和豚鼠的免疫应答和应答水平[6]。钟石根等将钙纳米粒子

与NP30 制备成Ca-NP30 结合物, 免疫小鼠后发现钙纳米粒子可增强NP30对宿主的保护性作用，减虫率明显提高[7]。柴家前等通过专门技术制备纳米蜂胶颗粒(NPP)，发现NPP使雏鸡血液中的T 淋巴细胞比率和RBC2C3bR花环率都极显著增加, 而RBC2IC花环率显著降低[8]。纳米佐剂是目前研究的热点，它可避免传统疫苗的载体效应发生，还可提高生物利用度，提高制剂的均匀性、分散性和吸收性，具有较理想的免疫增强作用。

2.3 复合佐剂

研究表明，单独使用抗原或仅应用某一种佐剂，对改善抗原的反应强度、免疫力维持时间、免疫耐受等作用有限，而使用复合佐剂的疫苗比使用单一佐剂的疫苗，可以诱导更强的免疫反应，因此，将不同类型佐剂配合研制复合免疫佐剂成为佐剂发展的新趋势。目前已开发的多种复合佐剂，如中西药复合佐剂，CpG-ODN 和氢氧化铝复合佐剂等，且其中有相当一部分通过动物试验，证明复方佐剂比单一佐剂的免疫增强效果更好。[9]

大量研究资料证明，中药复方可作为佐剂，具有调节各种免疫细胞活性、细胞因子和抗体水平的作用，能促进特异性免疫活性细胞产生、免疫器官发育、红细胞免疫作用等功能，从而增强疫苗的免疫效果。复方中药作为免疫增强剂，无论是单独使用或与疫苗的联合使用，都能够显著提高抗体效价。曹国文等[10]以枸杞子、菟丝子等多味中药研制而成的免疫增强剂中药复方，拌料饲喂鸡传染性法氏囊强毒（IBDV）攻毒后的鸡，试验证明，复方中药能显著增强机体的免疫抵抗力；陈德坤等[11]以黄芪、党参及淫羊藿等中药的提取物制成为复合佐剂，研究其对新城疫Ⅱ系疫苗的佐剂效应，结果表明，疫苗与复合佐剂的联合应用可显著提高免疫鸡的抗体效价及维持时间。

西药复合佐剂，氢氧化锌和低分子量透明质酸均可作为免疫刺激剂。施建东等[12]在甲肝、乙肝混合抗原中加入不同配比的氢氧化锌和低分子量透明质酸制成复合佐剂，经皮下免疫ICR 小鼠，结果表明LHA 与氢氧化锌按一定剂量配比混合后，甲肝、乙肝混合抗原能诱导体液免疫应答，且在一定剂量、范围和时间内，诱导的免疫增强效应及抗体持续时间优于铝盐佐剂。也有相关的研究表明硫酸乙酰肝素与氢氧化锌联合佐剂能有效诱导小鼠增强对HBsAg 的特异性反应，诱导小鼠增强对重组HCV 抗原多肽表位疫苗的体液免疫。

中西药复合佐剂，在吕殿红等的研究中，以具有补益功能的黄芪等结合维生素 E 和左旋咪唑(Levamisol，LMS）配制成两组复方免疫增强剂，研究其对鸡免疫抗体的影响。结果表明中西药联合使用具有免疫促进作用，可充分发挥各自的优势应答。[13]

复合黏膜免疫佐剂，南京农业大学以CpG DNA 和胆酸钠按质量比为5∶2 混合或配合制成复合佐剂，用于禽流感灭活抗原的鼻腔免疫，实验证明复合佐剂配合禽流感灭活抗原能够有效提高黏膜局部免疫和全身体液免疫力，为禽流感的预防提供了一条较理想的免疫途径[14]。

2.4 CpG序列

CpG序列是指一类以非甲基化的胞嘧啶和鸟嘌呤核苷酸(CpG)为核心的寡聚脱氧核糖核苷酸).CpG序列可激活T细胞、B细胞NK细胞等免疫活性细胞,产生大量的多种细胞因子,增强机体的特异性和非特异性免疫效应.CpG序列作为免疫佐剂有如下特点: (1)与常用的氢氧化铝佐剂具有协同作用; (2)一些能与铝混合的减毒活疫苗或多价疫苗则可单独使用CpG-ODN增强

其免疫原性; (3)应用范围广.其表现有两方面,一方面, CpG作为疫苗佐剂,能增强鸡蛋溶菌酶、卵白蛋白、肿瘤抗原、传染性乙肝疫苗和流感疫苗等抗原的免疫效果,能加强不同DNA疫苗免疫反应;另一方面, CpG的免疫佐剂作用在小鼠和灵长类中均已得到证实。许洪林[14]等人通过体外试验确定了研究人CpG-ODN的动物模型,评价了人CpG-ODN在动物模型中对HbsA疫苗佐剂活性;据报道,目前CpG作为人乙肝疫苗佐剂已进入临床试验.虽然CpG-ODN具有安全、有效等优点,但是还是有许多的问题有待于解决,如它的免疫激活机制、免疫剂量(实验表明,高剂量CpG-ODN及重复给药能导致毒性效应)和最适免疫途径还需要进一步研究.

2.5补体分子佐剂

补体C3分子是连接机体天然免疫和获得性免疫的桥梁之一。最近有人用C3d 分子作为佐剂来增强DNA免疫应答。C3d与特异性受体CR2结合后, 能提供共刺激信号,促进B细胞活化,促进抗体的亲和性成熟,维持免疫记忆,对机体的免疫反应有很强的正调控作用。

Suradhat等将1~2个C3d编码基因与2种不同抗原编码基因———牛轮状病毒VP7或牛1型疱疹病毒糖蛋白(gD)基因重组，免疫小鼠后发现1个拷贝C3d抑制了特异性抗体水平，2个拷贝的C3d分子效果更加明显，脾细胞中抗原特异性IFN-r、IL-4分泌细胞的频率也有明显的降低。Ross等将禽流感病毒HA的胞外段与3个C3d融合起来构建成sHA23C3d,免疫小鼠后发现抗体滴度和抗体亲和力增加, 用病毒攻击后,肺部的病毒量比单独注射HA减少了10倍。将麻疹病毒血凝素基因H和3个C3d基因融合构建成质粒sH23C3d,免疫小鼠后,发现抗体滴度提高,明显的抑制了麻疹病毒噬斑的形成。李大金等对分子佐剂C32d3的研究表明C32d3与hCG β基因融合后能显著增强hCGβ基因避孕疫苗的免疫原性、体液免疫应答及抗体类型转换。Dempsey等将鸡卵溶菌酶(HEL)与小鼠C3d分子串联在一起,以此免疫小鼠。结果显示,C3d分子偶连的HEL的免疫原性比单纯HEL增强1 000倍,大大降低了B细胞激活的活化阈,而且明显强于弗氏佐剂。

3问题和展望

免疫佐剂是研究其免疫佐剂性与毒性的最佳平衡。也就是说，免疫佐剂是生物反应调节剂中的免疫调节剂,非特异性免疫刺激作用是使机体产生保护性免疫应答所必需的基本条件,但如果这种作用过度或过强，则必然呈现毒副作用。另外，免疫佐剂要很好地付诸应用，必须进行药代动力学及生理生化等全方位研究。因此，疫苗佐剂的研究强调多元化。譬如：诱导黏膜免疫的口服佐剂的研究，因为口服免疫是一种简单易接受的产生全身性免疫的方式，并且黏膜免疫在保护肠道和呼吸道黏膜表面的疾病方面有很重要的作用; 纳米佐剂的研究,纳米佐剂可以避免传统疫苗的载体效应发生，还可提高生物利用度，提高制剂的均匀性、分散性和吸收性，具有较理想的免疫增强作用; 天然佐剂的研究如中草药佐剂的研究，中草药毒副作用小，价格低廉，取材广泛。多糖类佐剂的研究，多糖类物质是一类十分重要的生物活性物质，具有调节淋巴细胞、吞噬细胞、白细胞介素、抗体水平的功能。多糖经化学修饰形成多孔微颗粒，具有浓缩和贮存抗原的作用。可见，佐剂的发展趋向于低毒、高效，佐剂的研究价值不仅在于最终的实际应用，而且在于此过程中揭示免疫系统的机理。

主要参考文献

[1] 周慧，盛贤,平文祥.佐剂的研究进展.生物技术,2004，14（4）

[2] Cox JC,Coulter AR.Adjuvants aclassification and review of their modes ofaction .V accine, 1997, 15 (3) : 248-256

[3] 肖琅，孙铭，林芳，2.3 纳米粒子佐剂

[4] Myc A, Kukowska - Latallo JF,Bielinska AU, et al.Development of immuneresponse that protects mice from viralpneumonitis after a single intranasalimmunization with influenza A virus andnanoemulsion . Vaccine,2003, 21 (25 ～26):3801～3814

[5] Stieneker F, Kreuter J, Lower J. Highantibody titers in mice with polymethylmethacry late nanoparticles asadjuvantfor HIV vaccines. AIDS, 1991, 5(4):431～435

[6] 何萍,吕凤林,陈月，等.合成纳米铝佐剂及其对乙型肝炎、狂犬病毒辅佐效应的研究.免疫学杂志,2006，22（1）

[7] 钟石根，冯振卿，仇镇宁，等.钙纳米颗粒作为血吸虫病抗独特型抗体疫苗佐剂的研究.中国血吸虫病防治杂志,2001,13(6)

[8] 柴家前,王玲,庞昕，等.沈志强纳米蜂胶颗粒对鸡免疫功能的影响. 畜牧兽医学报2002,33(4)：412～416

[9]肖建雄，罗满林，复合佐剂的研究进展（A），广东畜牧兽医科技.2013.38.I

[10] 曹国文,陈春林,戴荣国,等.中药免疫增强剂抗鸡传染性法氏囊病毒感染试验[J].中兽医医药杂志,2007,26（6）:39-40.

[11] 陈德坤,李俊生,党岩,等.中药佐剂对提高新城疫Ⅱ系疫苗免疫效果试验[J].中国兽医科技,1998,28(11):23-24.

[12] 施建东,胡凝珠,赵蕊蕊,等.氢氧化锌与低分子量透明质酸复合佐剂对甲肝乙肝联合抗原的体液免疫增强作用[J].中国生物制品学杂志,2012,25(1):29-31,35.

[13] 吕殿红,王刚.复方免疫增强剂对鸡新城疫和传染性腔上囊病疫苗免疫效果的影响[J].中国兽医科技,2000,30(10):21-22.

[14] 南京农业大学.用于禽流感灭活抗原的鼻腔免疫复合佐剂[P].中国:200710024385.5,2007-12-12.

佐剂的研究现状课稿

佐剂的研究现状 【摘要】随着免疫学研究的不断深入和基因工程技术的迅速发展,对佐剂的研究显得越来越重要，本文通过查阅近几年相关文献，综合免疫佐剂研究多方面资料和最新观点，就免疫佐剂研究概况作一综述，着重介绍几种新型的佐剂的特点，并就其发展趋势提出自己的见解，为开发研制高效、低毒、结构新颖的免疫佐剂提供参考。 【关键字】免疫佐剂研究 佐剂是先于抗原或同时注射于动物体内，能非特异性地改变机体对抗原的特异性免疫应答，能增强相应抗原的免疫原性或改变免疫反应类型，而本身并无抗原性的物质，又称免疫佐剂。从巴斯德至今近百年来已开发了许多菌苗和疫苗，但传统的菌疫苗一般多为全菌或全病毒制成，其中含有大量非免疫原性物质，这些物质除具有毒副作用外也有佐剂作用，所以一般不需要外加佐剂。因此,在这段时间里免疫佐剂并未引起人们广泛的注意，直到1925年，法国免疫学家兼兽医Gaston Ramon发现在疫苗中加入某些与之无关的物质可以特异地增强机体对白喉和破伤风毒素的抵抗反应[1]，从此许多国家都不同程度的开展了这方面的研究。现在,由于高度纯化的新型疫苗的生产技术不断取得突破，而常规的佐剂由于其自身的缺陷使之很难适应新型疫苗的发展，因此新的研究工作已经逐渐引起科研工作者的注意。 20世纪60年代，原苏联喀山医学院就对蜂胶影响动物机体免疫活性方面进行了观察，通过对小鼠、豚鼠、家兔等实验证明应用蜂胶或配合抗原进入机体，能促进机体免疫过程。1981年Kreuter首次将纳米材料应用于疫苗佐剂，证明纳米粒子佐剂既能提高细胞免疫，又能提高体液免疫。1998年Moldoveanu 等最早报道CpG ODN 联合灭活流感病毒免疫小鼠能诱导产生比常规佐剂更高的血清特异性抗体。这些新型佐剂能克服常规佐剂的一些缺陷，因而受到国内外学者越来越多的关注。目前我国常用的佐剂有铝盐、油乳、蜂胶、多糖、微生物、氟氏（FA）佐剂、γ- 干扰素（IFN-γ）、白细胞介素(Interleuki-ns，ILs)、免疫刺激复合物（ISCOMs）、糖苷及复方中药佐剂等，新型免疫佐剂有核酸、CpG、补体、纳米、脂质体（LIP）等。下面就几种免疫佐剂的研究现状和应用前景进行简要的综述。 1 佐剂作用机理 Cox[2]等提出了佐剂增强免疫应答5种可能的机制: 1.1 免疫调节作用 众多佐剂具有调节细胞因子网络的能力。不同的佐剂诱导抗原提呈细胞分泌不同的细胞因子，促使Th前体细胞向Th1或Th2不同的亚型分化。 1.2 抗原提呈作用 某些佐剂能保持抗原构象的完整性，并将其呈递给合适的免疫效应因子。当佐剂与抗原以更有效的维护构象表位的方式结合时，可提高抗原的体内作用,延长抗原屏蔽时间. 1.3 诱导CD8+细胞毒性T细胞(CTL) 应答通过与细胞膜融合或保护抗原肽，佐剂可促进相应肽掺入MHC类分子并维持二者结合，同时期望通过诱导IFN-γ和TNF-α来提高肽MHC类分子的表达。

甜味剂的应用现状及发展前景

甜味剂的应用现状及发展前景 摘要: 甜味剂对世界的食品有着重要的影响,从1900年产量的8百万吨到1970年的7千万吨[10].本文介绍了目前国内外常用的甜味剂基本性质和应用情况,概述了符合人体健康的功能性甜味剂的特点和好处。阐述了功能性甜味剂既能够满足人们对甜食的偏爱又不会引起副作用,并能增强人体的免疫力,对肝病、糖尿病具有一定的辅助治疗作用。因此功能性甜味剂将成为市场主要甜味剂品种之一。 关键词: 甜味剂; 应用现状; 发展前景 Abstract : Sweetness is one the most important taste sensation for humans and for many animal species as well .There is scarcely any area of food habits today tha does not in some way invole the sweet taste.The importance of sweetness is reflected in the world production of sugar,which rose from 8 million tons in 1900 to 70 million tons in 1970[10] .No other agricultural product has show a similar increase in production during the same period.The sweetness of individual sweetnener is usually measured in model systems and compared to that of sucrose.Some sweetening agents and their main application and characteristic are introduced at home and abroad. There is contain Cane suger , Sodium soccharin , Sodium cyclamate, Aspartame, Trichlorosucrose, Stevioside, Acesulfame k and so on.Features and advantages of functional sweetening agents conforming with human heath are summarized. Functional sweeteningagent can satisfy people’favor to sweet , but can’t result in side effect. Functional sweetening agent can strengthen immuneto disease and have supplementary treatment for disease of liver and diabetes. So functional sweetening agent will be one ofmain sweetening agents. Key words : Sweetening agents; application; c urrent situation; prospect; 1 前言 甜味剂[2] 是指能赋于食品甜味的调味剂,他的使用可以追溯到史前蜂蜜的发现。科学研究已经表明,人类对甜味剂的需求是先天的, 而不是后天对环境要求的一种客观反应。甜味剂对食品、饮料风格的调整起关键作用。甜味剂对世界的食品有重要的影响,从1900年产量的8百万吨到1970年的7千万吨[10].随着人们对健康的要求越来越高对甜味剂的要求也越来越苛刻,希望甜味剂的能量尽可能低甚至能量值为零,口感好,价位比较合适。五、六十年代以前的近一个世纪, 食品工业中所用的甜味剂多半是蔗糖和来自石油化工产品的糖精。五、六十年代以后, 在美国、欧洲及日本等国相继出现了甜蜜素、二肽甜味剂、甜蛋白、乙酰磺胺酸钾以及阿力甜等甜味剂[7]。由于人们对低热量减肥食品的需求日益高涨, 使得高甜度甜味剂在毒性、生产方法及应用研究等方面继续深入, 人们已经开始对能产生甜味的分子结构进行研究, 以期发现新的超高甜度甜味剂。甜味剂的种类很多, 本文就一些常用和新型的甜味剂的特点和应用情况以及甜味剂的发展趋势作一概述。 2 国内外常使用的甜味剂 2. 1 蔗糖( Cane suger) 蔗糖是从植物中提取的天然甜味剂,是一种非还原性二糖,由α2D2吡喃葡萄糖基和β2D 呋喃果糖及经分子内糖苷键连接而成,蔗糖安全性高、价格低廉、味质好且符合人们传统的饮食习惯,将长期是最主要的甜味剂品种之一。但由于受耕地的限制,蔗糖的产量不

CpG_DNA疫苗佐剂研究进展及其应用前景

of survivin and it s splice variant s in endometriosis[J ].Mol Hum Reprod ,2006,12(6):3832388 [6]Kayaseleuk F ,Nursal TZ ,Polat A ,et al.Expression of survivin , bcl 22,P53and bax in breast carcinoma and ductal intraepit helial neoplasia (DIN 1a )[J ].J Exp Clin Cancer Res ,2004,23(1):1052112. [7]Beardmore VA ,Ahonen LJ ,G orbsky G J ,et al.Survivin dynamics increases at centromeres during G2/M phase transition and is reg 2ulated by microtubule 2attachment and Aurora B kinase activity [J ].J Cell Sci ,2004,117(Pt 18):403324042. [8]Wolanin K ,Magalska A ,Mosieniak G ,et al.Curcum in affect s component s of t he chromosomal passenger complex and induces mitotic catastrophe in apoptosisresistant Bcr 2Abl 2expressing cells [J ].Mol Cancer Res ,2006,4(7):4572469. [9]Ohashi H ,Takagi H.Phosphatidylinositol 32kinase/Akt regulates angiotensin II 2induced inhibition of apoptosis in microvascular en 2dot helial cells by governing survivin expression and suppression of caspase 23activity [J ].Circ Res ,2004,94(6):7852793. [10]Kwon K B ,K im EK ,Lim J G ,et al.Molecular mechanisms of ap 2 optosis induced by Scorpio water extract in human hepatoma Hep G2cells[J ].World J Gastroenterol ,2005,11(7):9432947.[11]Jing Z ,Nan K J ,Hu ML.Cell proliferation ,apoptosis and t he re 2 lated regulators p27,p53expression in hepatocellular carcinoma [J ].World J Gastroenterol ,2005,11(13):191021916. [12]Muo J D ,Wu P ,Xia XH ,et al.Correlation between expression of gastrin ,somatostatin and cell apoptosis regulation gene bcl 22/bax in large intestine carcinoma [J ].World J Gastroentero1,2005,11(5):7212725. [13]Marusawa H ,Mat suzawa S ,Welsh K ,et al.HBXIP functions as a cofactor of survivin in apoptosis suppression [J ].EMBO J , 2003,22(11):272922740. [14]K im J Y ,Chung J Y ,Lee SG ,et al.Nuclear interaction of Smac/ DIABLO wit h Survivin at G2/M arrest prompt s docetaxel 2in 2duced apoptosis in DU145prostate cancer cells[J ].Biochem Bio 2phys Res Commun ,2006,350(4):9492954. [15]Shiozaki A ,Kataoka K ,Fujimura M ,et al.Survivin inhibit s apop 2 tosis in cytotrophoblast s[J ].Placenta ,2003,24(1):65276.[16]冯苗,王自能,杨艳东.survivin (存活素)在早孕绒毛及妊娠滋养 细胞疾病中的表达[J ].暨南大学学报:医学版.2005,26(2): 1852189. [17]Zwert s F ,Lupu F ,De Vriese A ,et https://www.wendangku.net/doc/ec13508316.html,ck of endot helial cell survivin causes embryonic defect s in angiogenesis ,cardiogenesis ,and neural tube closure [J ].Blood ,2007,109(11):474224752.[18]韦枝红,龙淑芳,宁克勤.复发性自然流产患者妊娠组织中Sur 2 vivin 的异常表达[J ].临床和实验医学杂志,2006,5(7):8592860. [19]Chen J ,Wu W ,Tahir SK ,et al.Down 2regulation of survivin by antisense oligonucleotides increases apoptosis ,inhibit s cytokine 2sis and anchorage 2independent growt h [J ].Neoplasia ,2000,2(3):2352241. [20]陈彩蓉,王自能,郭晓燕.过期妊娠胎盘滋养细胞Survivin 表达 情况的研究[J ].右江医学,2008,36(3):2552256. [21]Allaire AD ,Ballenger KA ,Wells SR ,et al.Placental apoptosis in preeclampsia[J ].Obstet Gynecol ,2000,96(2):2712276.[22]孙丽洲,赵文英,洪蕾,等.妊娠高血压综合征患者胎盘滋养细胞 凋亡基因表达谱的研究[J ].中华妇产科杂志,2003,38(10): 6042607. 收稿日期:2009208217;修回日期:2009209221 (本文编辑:黄春燕) 第一作者简介:郑亮(1983— ),男,在读硕士,研究营养与食品卫生。作者单位:福建医科大学公共卫生学院营养与保健医学系,福州 350004。 3通讯作者:吴小南,男,教授,博士,从事营养与保健资源开发研究。 文章编号:100722705(2010)022*******　中图分类号:R 392233　文献标识码:A 【综述】 Cp G 2DNA 疫苗佐剂研究进展及其应用前景 郑亮,吴小南3 摘要:阐述疫苗佐剂的研究进展与传统佐剂的局限和缺点。介绍Cp G 2DNA 的发展历程、作用特点和机制等;并 展示其在传染病预防、疾病治疗及食品卫生、人群健康等领域的应用前景,为新型佐剂的研究和应用提供理论依据。 关键词:Cp G 2DNA ;免疫活性;佐剂;疫苗佐剂;toll 样受体 疫苗佐剂的发现至今不到100年,却在增强疫苗免疫活性方面起着重要作用。而随着新型疫苗的不断推出,新型疫苗佐剂的设计与开发已迫在眉睫,并已成为目前疫苗研究的热点。Cp G 2DNA 在新型佐剂中较有代表性,由于能与细胞膜上的Toll 样受体结合,诱导多种细胞因子产生,诱导Th2型免疫应答向Th1转换,从而激发细胞免疫,是连接天然和获得性免疫的重要纽带,被认为是有潜力的新型疫苗佐剂之一[1]。本文就疫苗佐剂的研究进展,特别是Cp G 2DNA 疫苗 佐剂的发展历程、作用特点和机制及应用前景进行综述。 1　疫苗佐剂的研究进展 佐剂(adjuvant )又称免疫调节剂或免疫增强剂,是指先于 抗原或与抗原混合或同时注入动物体内,能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答,发挥辅助作用的一类物质。111　常用疫苗佐剂及其缺点　常用的佐剂主要有不溶性铝盐类胶体、油水乳剂、微生物及其代谢产物、核酸及其类似物、细胞因子、免疫刺激复合物、蜂胶和脂质体等。这些佐剂主要通过免疫调节、参与抗原递呈、诱导CD8+T 细胞应答和抗原贮存等方式发挥作用。各种佐剂中,使用最早、最广泛的为铝盐佐剂。铝盐佐剂在提高抗体水平和安全方面已获得长期的

疫苗佐剂的研究进展

疫苗佐剂的研究进展 一、佐剂的定义 佐剂（Adjuvant）又称免疫调节剂（Immunomodulator）或免疫增强剂（Immunomodulator），是指先于抗原或与抗原混合或同时注入动物体内，能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答，发挥辅助作用的一类物质。佐剂的英文名adjuvant来源于拉丁文“adjuvare”,意思为“帮助”。药物佐剂，即某种可以加强药物疗效的物质。 二、佐剂的作用 佐剂可增强抗原的免疫原性、免疫应答速度及耐受性，可调节抗体对抗原的亲和性与专一性，可刺激细胞介导的免疫，可促进肠胃粘膜对疫苗的吸收。佐剂的作用机制当前了解的很少，阻碍了设计新的佐剂化合物，佐剂常激活多个免疫链，其中只有少数与抗原特异应答相关，要想确切地知道佐剂的作用很困难。 佐剂能增加对细胞的渗入性，防止抗原降解，能将抗原运输到特异的抗原呈递细(APC5)，增强抗原的呈递或诱导细胞因子的释放。在注射抗原后，抗原可直接被APC5吸收，与B细胞表面抗体结合或发生降解，抗原的吸收途径主要取决于抗原的特征，但也受佐剂影响。被APC5吸收的抗原通过两种途径MHCI或MHCII而呈递于CD8+或CD4+T细胞上。根据注射疫苗后分泌细胞因子方式的不同，可分为Th1应答与Th2应答。Th1应答主要通过诱导分泌IFN-γ, IL-2和IL-12，而Th2应答是通过诱导分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-12，不同的细胞因子分泌模式是相互拈抗的，促进一种

应答形式常会抑制另一种应答形式，产生I g G2a抗体被认为是Th1应答，然而诱导产生I g G1常与Th2应答有关。不同的佐剂虽然可诱导相似的抗体水平，但是细胞因子应答的方式可能不同，Th1或Th2应答方式对于疫苗的功效有显著的影响。 评价佐剂质量的优劣或能否适用于人用疫苗疫苗的主要因素为： ①能使弱抗原产生满意的免疫效果； ②不得引起中等强度以上的全身反应和严重的局部反应，在局部贮留的硬结必须逐渐被吸收； ③不得因其对佐剂本身的超敏反应，不应与自然发生的血清抗体结合而形成有害的免疫复合物； ④不得引起自身免疫性疾病； ⑤既不能有致癌性，也不得有致畸型性； ⑥佐剂的化学组成应明确，物理和化学性质稳定； ⑦在一定的保存期内的疫苗佐剂,应该稳定有效。 这些因素必须权衡考虑，但是副作用是其中最重要的一个因素，应考虑是局部反应还是全身反应，以及副反应的程度是否能被使用者接受；免疫促进作用可能刺激体液免疫和细胞免疫，或者两者均有，并且与不同疫苗的抗原成分和免疫途径有关；经济方面应考虑佐剂的来源，材料及制造工艺的价格。还应考虑到使用佐剂后是否能减少疫苗的免疫剂量及次数，以及免疫力持续的时间长短等。 在疫苗中应用免疫佐剂的潜在优点包括： 1.能优化免疫应答；

疫苗佐剂综述汇编

疫苗佐剂综述 近三十年来，人用疫苗佐剂发展迅速，已经研发出了能诱发更强，更持久的人用疫苗佐剂。但是还存在一些不足之处，理想的疫苗佐剂应该更适于临床应用，毒副作用更小。本文总结了当前疫苗佐剂的发展状况，其中包括疫苗佐剂的监管建议，理想佐剂的标准，以及详细介绍了诸如矿物盐类佐剂，毒素类佐剂，微生物衍生物类佐剂，油乳剂，细胞因子佐剂，多糖类佐剂，以及核酸佐剂。同时本文还讨论了最近新发现的Toll样受体的生物学作用以及在免疫激活中发挥的作用。 关键词：疫苗；佐剂；Toll样受体； 1 引言 免疫接种的目的就是要获得对疾病持久的免疫保护反应。与弱毒疫苗不同，灭活疫苗或亚单位疫苗通需要疫苗佐剂的参与才能更好的发挥作用【1】。“佐剂”一次来自于拉丁语“Adjuvare”一词，为“帮助”或“辅助”之意【2】。免疫佐剂的生物作用包括：（1）抗原物质混合佐剂注入机体后，改变了抗原的物理性状，可使抗原物质缓慢地释放，延长了抗原的作用时间；（2）佐剂吸附了抗原后，增加了抗原的表面积，使抗原易于被巨噬细胞吞噬；（3）佐剂能刺激吞噬细胞对抗原的处理；（4）佐剂可促进淋巴细胞之间的接触，增强辅助T细胞的作用；（5）可刺激致敏淋巴细胞的分裂和浆细胞产生抗体。故免疫佐剂的作用可使无免疫原性物质变成有效的免疫原；（6）可提高机体初次和再次免疫应答的抗体滴变；（7）改变抗体的产生类型以及产生迟发型变态反应，并使其增强。人们正是因为观察到疫苗接种位点处形成的脓肿协助机体产生了针对特异性抗原更强的免疫反应，从而形成了疫苗佐剂的理念。更有甚，与接种抗原不相关的物质形成的脓肿坏死也能增强疫苗的特异性免疫反应【3,4】。 1926年，通过吸附于铝盐类化合物的白喉类毒素首次证明了铝盐类佐剂的免疫增强作用。至今，铝盐类佐剂（主要指氢氧化铝和磷酸铝）依然是唯一人用疫苗佐剂。其原因是什么呢？尽管大量事实证明，弗氏完全佐剂和脂多糖类佐剂具有更强的佐剂活性，但由于其能引发局部和全身性的毒副作用而不适于人用。这也正是铝盐类佐剂作为人用疫苗佐剂80余年的原因所在。在今后的80年中，铝盐是否依然是人用的唯一疫苗佐剂？答案是肯定的。自批准铝盐作为人用疫苗佐剂以后，管理部门对人用疫苗佐剂的要求提高了很多。而且，用于评价疫苗佐剂安全性的后期临床试验花费日益昂贵。一旦通过200至500人安全性和效用性实验后，在疫苗佐剂审批注册之前还需要进行5000至25000人数的临床试验。正因为如此，在接下来的10至20年之间，几乎没有哪种佐剂能通过疫苗佐剂审批。 2 理想的疫苗佐剂 免疫接种时需要考虑以下几点：抗原种类，接种动物种类，免疫途径，以及可能产生的免疫副作用【10,11】。理想的佐剂半衰期长，生物体内可以降解，生产成本低，能诱导产生合适的免疫反应（也就是根据感染病原的不

高倍甜味剂分类与发展现状

高倍甜味剂分类与发展现状 近二十年来，肥胖症、糖尿病和龋齿等人群高发病的产生都被认为与饮食习惯及膳食结构尤其是与蔗糖摄入过多有密切关系。因此，甜味剂发展重点之一就是安全性高，无营养价值、无热量或极低热量的功能性高倍甜味剂。 功能性高倍甜味剂的特点是应用的安全性高，用量少，甜度高，使用成本一般都远低于蔗糖，这些也都是食品科学家不断开发新型高倍甜味剂的动力所在。到目前为止，世界各国已获批准的高倍甜味剂约20种，其中得到多数国家批准允许使用的品种主要有糖精钠、甜蜜素、AK糖、阿斯巴甜、三氯蔗糖、阿力甜、纽甜、甘草甜素、甜菊苷、罗汉果甜苷和索马甜等。 一、高倍甜味剂分类 高倍甜味剂主要分成两大类，即高倍甜味剂和填充型甜味剂。高倍甜味剂的甜度通常为蔗糖的10倍以上。填充型甜味剂的甜度通常为蔗糖的0.2～2倍，兼有甜味剂和填充剂的作用，可赋予食品结构和体积。填充型甜味剂又分为功能性单糖、功能性低聚糖和多元糖醇3大类。功能性单糖主要包括结晶果糖等，功能性低聚糖包括大豆低聚糖、低聚果糖、低聚异麦芽糖和低聚木糖等，多元糖醇包括赤藓糖醇、木糖醇和麦芽糖醇等。 依来源的不同高倍甜味剂分为天然提取物和化学合成产品两大类。天然提取物目前主要包括甜叶菊提取物、罗汉果提取物和索马甜等；化学合成产品主要包括阿斯巴甜、纽甜、三氯蔗糖、安赛蜜、阿力甜等。目前我国批准使用的合成类高倍甜味剂主要有糖精、甜蜜素、阿斯巴甜、安赛蜜、三氯蔗糖、阿力甜和纽甜等。当前人工合成高倍甜味剂能够占据较大的市场份额主要因为具备诸多优点：如合成高倍甜味剂甜度高，体积小，使用量少，能量值为0或几乎为0，有利于厂家降低成本，提高效益。

免疫佐剂研究进展

免疫佐剂研究进展 字号: 小中大| 打印发布: 2007-11-05 00:00 作者: 沈克飞，曹兰来源: 《动物医学进展》 |吉林大学人兽共患病研究所 （1.，人兽共患病教育部重点实验室，吉林长春130062；2.重庆市畜牧研究 院检测中心，重庆402460） 摘要：佐剂的主要作用是提高抗原(免疫原)的免疫原性和免疫反应的可持续性，它能引导机体的免疫系统对抗原产生体液免疫或细胞免疫反应。对佐剂的选择取决于免疫的目的，从用途上分，佐剂可分为试验用佐剂和疫苗用佐剂。前者主要用于特异性抗体的制备，而后者则作为疫苗的必要成分。文章主要介绍目前常用的几种佐剂包括铝盐佐剂、弗氏佐剂、免疫刺激复合物(ISCOM)、脂质体和CpG及其在科研和疫苗中的应用。 关键词：佐剂；免疫应答反应；疫苗 佐剂(免疫佐剂或免疫调节剂)在免疫中的作用主要是提升机体免疫系统(体液或细胞免疫系统)对抗原或免疫原的免疫应答反应，包括增强免疫反应强度和反应的持久性。随着人们对各种病原的抗原成分及免疫机理的深入了解和越来越多的亚单位疫苗成分被纳入免疫学研究过程，对佐剂的研究和应用将会越来越深入和广泛。佐剂的作用原理主要包括3个方面：①激活先天性免疫应答反应，如弗氏佐剂、免疫刺激复合物和CpG佐剂等；②提高抗原对免疫系统的递呈和刺激作用，如脂质体类佐剂和免疫刺激复合物(ISCOM)；③延长抗原(免疫原)在机体内的存在时间和保持对免疫系统的持续激活作用。很多佐剂中的矿物油成分主要是起到缓释作用。除了弗氏佐剂兼具这3种特性以外，大多数佐剂在功能上都存在一定的缺陷。根据来源不同，佐剂分为化学合成类佐剂和生物成分类佐剂。很多病原生物的组成成分本身就是天然的佐剂，如弗氏完全佐剂中的结核分支杆菌，乙型肝炎病毒表面膜蛋白及细菌的LPS和CpG序列等。传统的佐剂多与抗原混合成乳胶(emulsion)的形式注射使用。乳胶有“油包水”和“水包油”两种形式。前者有利于延长抗原在体内的存在时间和提高抗原的免疫原性，但对局部组织具有很强的刺激反应。后者有利于抗原的快速吸收，副作用小，但免疫反应可能弱且持续的时间短。

疫苗佐剂的现状和未来

疫苗佐剂的现状和未来发展趋势 当今使用的单纯重组和人工合成抗原制成的疫苗存在一些不足，这些抗原的免疫原性远不及传统活疫苗或灭活疫苗。因此，这类疫苗的使用就需要功能强大的疫苗佐剂的辅助。毫无疑问，目前在世界范围内大部分国家铝佐剂依然是唯一可用于人的疫苗佐剂。虽然铝佐剂能诱导产生体液免疫反应，但是对细胞免疫的刺激几乎不起任何作用，而细胞免疫对许多病原体的免疫保护至关重要。另外，铝佐剂引起剧烈的局部和全身性副作用，能引起肉芽肿、嗜伊红血球过多和肌筋膜炎，但是这些剧烈副作用很少发生。也有人担心铝佐剂能引起诸如老年痴呆症之类的神经退化性疾病。因此，当前急需安全、高效，适合人类使用的疫苗佐剂，特别是能激发细胞免疫的安全无毒佐剂。鉴于当前的新型疫苗技术，需要适合黏膜递呈类疫苗、DNA疫苗、癌症和自身免疫类疫苗的佐剂。这些领域中，每一种疫苗的发展都与之相应的佐剂技术密切相关。本文回顾了疫苗佐剂的当前现状，探求未来的发展方向，最后提出人类疫苗佐剂发展和审批的障碍和阻力。 关键词：佐剂，免疫反应，黏膜免疫，疫苗 佐剂起源 免疫接种的目的是诱发机体产生对接种抗原强大的免疫反应，以保护机体免受相应病原体的侵袭。为了达到此目的，和减毒疫苗相比，灭活疫苗需要佐剂的协助。佐剂是一类能增强针对一同接种的抗原特异性免疫反应的物质。“佐剂”一词来源于拉丁语“adjuvare”，是协助和增强之意。佐剂概念最早起源于二十世纪二十年代，Ramon等人发现接种白喉类毒素疫苗部位形成脓肿的马产生更高的特异性抗体。随后他们发现，脓肿的形成能增强机体对类毒素的免疫反应，脓肿则是接种时引入与白喉类毒素不相关的物质引起。1926年Glenny等人通过吸附于铝佐剂的白喉类毒素证明了铝佐剂的佐剂活性。至今，铝盐类复合物（主要是磷酸铝和氢氧化铝胶）依然是人用疫苗的只主要佐剂。1936年，Freund开发出含有分枝杆菌的水和矿物油乳剂，从而研制出目前所知佐剂中效力最最强的佐剂——弗氏完全佐剂。尽管复试弗氏完全佐剂作为佐剂的黄金标准，但是此种佐剂能引起剧烈的局部反应，不能作为人用疫苗佐剂。不含分分枝杆菌的水包油乳

食品填加剂的现状和发展趋势

食品填加剂的现状和发展趋势食品添加剂是指在食品或食品加工中使用的各种微量的物质，通常其添加量不超过食品质量的2％。添加目的为：①改进和保持食品的营养价值；②延长食品的货架期；③方便食品的加工；④增强食品的风味，改变食品的色泽； ⑤确保微生物的安全性；⑥保持食品品质的连续性和统一性。 1、食品添加剂市场 据统计，目前全球开发的食品添加剂总数已达1．4万多种，其中直接使用的品种有300o余种，常的有680余种。美国是世界上食品添加剂便用量最大、使用品种最多的国家．目前允许直接使用的有230o种以上，消费量已超过14o万吨（不包括淀粉及其衍生物、香精/香料和调味料）；西欧消费量已近50075~，其中淀粉及其衍生物的数量高达40万吨。 食品添加剂已．成为医药、农用化学品及饲料添加剂之后的第四类倍受人们关注的精细化工行业。目前食品添加剂的世界市场价值为200亿美元，其中，调味品占30~，4、氢化胶体占17％、酸化剂占13％、调味增强剂占12％、甜味剂占6％、色素占5％、乳化剂占5％、维生素和矿物质占5％、酶占4％、化学防腐剂占2％、抗氧化剂占1％。j负计禾来5年内冥年增长率为2％-3％。全球调味品和香料的市场价值为12o亿美，其中调味品约占49％（59亿美元）。调味品市场中，饮料占31％、佐料占23％、奶制品占14％、其他占32％。需求增长最强劲的食品添加剂将是维生素、矿物质、调味增强剂和脂肪代用品。 罗氏（R.h）和巴斯夫公司是世界上重要的食品添加剂和精细化学品生产商。维生素是罗氏公司维生素和精细化学品部最大的业务部门，几乎占全

球销售额的50％，其次是精细化学品占30％、类胡萝卜素占20％。罗氏新上市的营养药品包括用于眼科保健的玉米黄质、番茄红素和叶黄素，以及供功能饮料用的水溶性维生素E制品等。罗氏公司也加快投资中国市场，与上海新亚药业公司合资兴建了1000吨／年维生素B工厂，还有罗氏泰山（上海）维生素A新厂，以及在无锡兴建4万吨／年柠檬酸工厂。巴斯夫公司在全球维生素市场上约占25％的份额，该公司在韩国Gunsan建成3000吨／年维生素B工厂和世界规模的维生素C及维生素B的工厂。 我国食品添加剂的生产随食品加工业的发展而不断发展壮大，目前已批准使用的添加剂共有21类1474种，产品门类齐全，基本可以满足食品工业的需要。我国各类食品添加剂的年产品量已超过200万吨，其中味精达60万吨以上，柠檬酸的产量近20万吨。表1列出我国主要的食品添加剂生产企业和产量。我国食品添加剂的总量已可以满足市场需求，但由于我国多数食品添加剂企业生产规模小，技术水平低，因此产品质量方面尚存在一些差距。因此少数用量少、档次高的食品添加剂仍依赖进El。一些合资的食品加工企业和引进的食品加工生产线为了保证其产品的质量，仍以较高的价格购买国外的同类产品。 2、营养添加剂 牛磺酸近年来，国内外研究表明，牛磺酸是一种具有多种生理功能的氨基酸，在人体内起着重要的作用，在医药、食品等方面具有重要的作用。作为食品添加剂牛磺酸是人和动物必需的一种氨基酸，儿童体内一旦缺乏，可能导致发育不良、视力损害和增加癫痫的易感性，甚至引起fl，肌病等疾患；成年人体内缺乏牛磺酸，同样危及他们的身体健康。作为一种优良的食品添

免疫佐剂

不完全福氏佐剂是指羊毛脂和石蜡油的混合物，一般常规使用的比例是：2.5份羊毛脂：7.5份石蜡油，加热混合均匀即可。 完全福氏佐剂在不完全福氏佐剂中加入终浓度为6mg/ml的灭活卡介苗。 免疫佐剂（immunoadjuvant）又称非特异性免疫增生剂。本身不具抗原性，但同抗原一起或预先注射到机体内能增强免疫原性（见抗原）或改变免疫反应类型。种类很多，目前尚无统一的分类方法，常用的佐剂可分为4类：无机佐剂，如氢氧化铝，明矾等；有机佐剂，微生物及其产物如分枝杆菌（结核杆菌、卡介苗）、短小杆菌、百日咳杆菌、内毒素、细菌提取物（胞壁酰二肽）等；合成佐剂，如人工合成的双链多聚核苷酸（双链多聚腺苷酸、尿苷酸）、左旋咪唑、异丙肌苷等；油剂，如费氏佐剂、花生油乳化佐剂、矿物油、植物油等。费氏佐剂目前在实验动物中最常用，又可分为费氏不完全佐剂和完全佐剂两种。不完全佐剂是油剂（石蜡油或植物油）与乳化剂（羊毛脂或吐温（Tween）80）相混合而成，当其再与抗原混合，即成油包水乳剂，可用于免疫注射。在不完全佐剂中加入死的分枝杆菌，即成为费氏完全佐剂。完全佐剂的免疫强度大于不完全佐剂。该佐剂主要用于动物实验，不适宜于人类使用。而且动物多次注射后也常会发生佐剂病。免疫佐剂的生物作用包括：（1）抗原物质混合佐剂注入机体后，改变了抗原的物理性状，可使抗原物质缓慢地释放，延长了抗原的作用时间；（2）佐剂吸附了抗原后，增加了抗原的表面积，使抗原易于被巨噬细胞吞噬；（3）佐剂能刺激吞噬细胞对抗原的处理；（4）佐剂可促进淋巴细胞之间的接触，增强辅助T细胞的作用；（5）可刺激致敏淋巴细胞的分裂和浆细胞产生抗体。故免疫佐剂的作用可使无免疫原性物质变成有效的免疫原；（6）可提高机体初次和再次免疫应答的抗体滴变；（7）改变抗体的产生类型以及产生迟发型变态反应，并使其增强。

佐剂的研究进展

佐剂的研究进展 “Adjuvant”,即佐剂,最早来源于希腊语“adjuvare”,也就是帮助的意思[1]。随着DNA重组疫苗、合成肽疫苗等新型疫苗不断涌现,免疫佐剂研究越来越受到人们的关注.近年来佐剂的发展迅猛,多种新型佐剂层出不穷,人们对佐剂的作用机理亦有更深入的认识. 佐剂的概念及发展简史 佐剂（Adjuvants）是先于抗原或与抗原同时应用，能非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答，能增强相应抗原的免疫原性或改变免疫反应类型，而本身并无抗原性的物质，又称免疫佐剂或抗原佐剂。佐剂被用来增强疫苗的免疫反应已有近80年的历史，1925年，法国兽医免疫学家Ranmon发现疫苗中某些物质的佐剂作用，1926年Glenny证明明矾具有佐剂作用，1951年Freund研制成弗氏佐剂。目前我国对蜂胶佐剂、油乳佐剂、核酸佐剂、细胞因子佐剂等新型佐剂的研究也有迅速发展。 1免疫佐剂的功能 佐剂可选择性地改变免疫应答的类型，产生体液和\或细胞免疫。如：弗氏完全佐剂（FCA）是细胞免疫的强刺激剂，也能刺激体液免疫；弗氏不完全佐剂（FIA）仅能刺激体液免疫。改变体液抗体的种类IgG 亚类和抗体的亲和性，如壳聚糖、氧化甘露聚糖。佐剂还可改变抗原的构型，使疫苗诱导T辅助细胞和细胞毒T淋巴细胞(CHL)反应。如免疫刺激复合物。佐剂可改变免疫反应为MHCⅠ型或MHCⅡ型。如：白细胞介素4（IL-4）能上调MHCⅠ类抗原,IL-1可诱导MHCⅡ类反

应。佐剂还能改变T辅助细胞(Th1和Th2)的免疫反应。FCA可诱导Th1型细胞因子，IL-18、IL-12也可强烈诱导Th1型细胞因子产生;FIA则是典型的只诱导Th2型细胞因子。 2免疫佐剂的分类 目前,经动物实验证实有佐剂作用的物质多达百种以上,按佐剂作用可将其分为2类:①贮存型佐剂,即能以吸附成其他方式粘着抗原物质,注入机体后,可使抗原存留在一定的接种部位,并逐渐往周围释放,以延长抗原的作用时间,如铝佐剂。②中枢作用型佐剂,即能与抗原一起直接对免疫细胞呈现刺激或激活作用,如细菌内毒素、卡介苗等。按佐剂性质也可将其分为2类:(1)微生物及其亚细胞成分。(2)非微生物类成分:①不溶性铝盐胶体;②油脂类包括福氏完全佐剂(CFA)和不完全佐剂(IFA);③植物提取物;④生化佐剂和细胞因子。 3免疫佐剂作用机理 佐剂增强免疫应答的机制尚未完全阐明，其作用机制包括：①在接种部位形成抗原贮存库，使抗原缓慢释放，延长抗原在局部组织内的滞留时间，较长时间使抗原与免疫细胞接触并激发对抗原的应答。 ②增加抗原表面积，提高抗原的免疫原性，辅助抗原暴露并将能刺激特异性免疫应答的抗原表位递呈给免疫细胞。③促进局部的炎症反应，增强吞噬细胞的活性，促进免疫细胞的增殖与分化，诱导细胞因子的分泌。 4几种常用的佐剂 4. 1铝佐剂铝佐剂[2]（aluminum-containing adjuvants）包括：氢

功能性高倍甜味剂研究现状及复配注意事项

功能性高倍甜味剂研究现状及复配注意事项 1 甜味剂 1.1 什么是甜味剂 甜味剂是指能使食品呈现甜味的食品添加剂，其在食品中主要有三方面的作用：①使食品具有适合的口感；②风味的调节和增强；③风味的形成。 1.2 什么是功能性高倍甜味剂 功能性高倍甜味剂的甜度很高，热值很低，有些功能性高倍甜味剂不参加代谢，通常为非营养性、低热值或功能性甜味剂，适合于包括糖尿病患者在内的所有人群。其具有良好的口感，较低的价格，因此可以代替蔗糖作为甜味补充剂。目前，功能性甜味剂主要分为两大类，即功能性高倍甜味剂和功能性填充型甜味剂。功能性高倍甜味剂的甜度通常为蔗糖甜度的10倍以上，根据来源不同可分为天然提取物和化学合成产品两大类，其中，化学合成品主要包括糖精钠、甜蜜素、安赛蜜、阿斯巴甜、纽甜、三氯蔗糖等[1]。此外，功能性高倍甜味剂又称为非能量型甜味剂或无热量型甜味剂，也叫非营养性甜味剂。 2 功能性高倍甜味剂的优势 功能性高倍甜味剂的甜度很高，热值很低，体积小，使用量少，有利于厂家降低成本，提高效益。有些功能性高倍甜味剂不参加代谢，不会被人体消化和吸收，对牙齿无伤害，不会导致龋齿，不引起血糖波动，不存在导致肥胖症和高血脂的风险，糖尿病患者和体重超标的特殊人群可安全使用。近年来，人们对食品添加剂越来越敏感，甜味剂也不例外。生活中，人们每天都会接触到食品添加剂，但是合理合法正常使用食品添加剂是无毒无害的，因此功能性高倍甜味剂得到了越来越多的关注。 3 功能性高倍甜味剂研究现状及复配注意事项 3.1 甜蜜素 甜蜜素又称环己基氨基磺酸钠，是1937年由美国人发明的一种白色针状或薄片状的结晶物，易溶于水，化学性质稳定；1945年申请到美国专利22 75 125，其甜度约为蔗糖的40倍[2]，保存过程中甜度不会降低，入口就能感觉到甜味，这就是人们常说的前甜。甜蜜素本身风味良好，不带异味，还能掩盖其他甜味剂带来的苦涩味，在复配时主要与前甜、后甜较长的高倍甜味剂配合使用，同时甜蜜素与糖精钠按10:1的比例使用会使产品的口感变好，两者之间能够互相掩盖对方的不良风味。 甜蜜素虽具有无糖低热的特性，但根据我国《食品添加剂使用标准》规定，“甜蜜素”在冷冻饮品（03.04食用冰除外）中的最大使用量为0.65g/kg，果酱中最大使用量1.0g/kg，面包、糕点中最大使用量为1.6g/kg，膨化食品、小油炸食品在生产中不得使用甜蜜素[3]。世界上包括中国在内承认甜蜜素甜味剂地位的国家和地区超过55个，但具体毒害机理研究未见报道。中国是全球最大的甜蜜素生产国和出口国，今后若将甜蜜素对人体的毒害机理研究透彻，有助于增加在国内外市场上的份额。 3.2 糖精钠 糖精学名为邻苯甲酰磺酰亚胺，分子式为：C7H5O3NS，是最古老的甜味剂之一，其于1878年在美国被科学家发现，为白色结晶固体。糖精其甜度为蔗糖的350~450倍，易溶于水，价格相对较低，性质较稳定，口感有轻微的苦味和金属味残留，其安全性问题一直没有得到很好的解决，所以使其应用受到一定限制[4]。糖精钠不被人体代谢吸收，不含卡路里，在各种食品生产过程中都很稳定。但有报道称，糖精遭高温时分解，会产生有毒物质；在酸性条件下加热其甜味会受影响，并可以转化成有苦味的邻氨基磺酰苯甲酸，其浓度过高或者单独使用会有令人讨厌的味道。现由于《食品添加剂使用标准》中已经限制了糖精钠的使用，故而取消其在饮料中的使用[5]。糖精钠的含水量高，在使用时易结块，即把混合物料结在

免疫 佐剂详细介绍--修改版

免疫佐剂： 基本描述：--见到客户时可以背诵下来从而吸引感兴趣的客户 与常规使用的弗氏佐剂相比，QuickAntibody免疫佐剂具有极大的优势：（1）无需乳化；（2）免疫周期短，与常规免疫相比可以节省3-5周免疫时间；（3）抗原用量少，仅为弗式佐剂的1/10；（4）不破坏抗原天然构象，易获得针对天然构象的抗体；（5）不含任何蛋白成分，佐剂本身不刺激机体产生抗体；（6）肌肉免疫；（6）无毒。 展开描述--针对客户就上述几个问题的提问，基本可以从以下几方面回答 为什么无需乳化？QuickAntibody系列佐剂为水溶性佐剂，抗原与佐剂仅需用移液器吹打几下，即可混匀；弗式佐剂为油性佐剂，需要繁琐的乳化，形成油包水的稳定结构。因此与弗式佐剂繁琐的乳化相比，QuickAntibody佐剂可节省大量时间与精力。现在的学生事情比较多，不喜欢乳化，因此这条可以吸引他们的注意，工业客户因为免疫动物多，乳化（即使使用乳化仪）需要大量的时间，因此对这点也会有极大的兴趣。 免疫周期短？QuickAntibody佐剂有二周快速小鼠多抗制备佐剂、三周快速小鼠单多抗制备佐剂以及五周标准小鼠单多抗制备佐剂三种。若多抗即可满足客户需求，可以建议客户制备小鼠多抗，使用我们的佐剂最快仅需2周即可制备高滴度的小鼠多抗，最慢也只需5周即可制备成功，比常规弗式佐剂8周的制备时间相比，可节省3-6周的时间，从而大大提升了客户实验效率；若客户制备单抗，可以使用我们三周佐剂或五周佐剂，与常规使用弗式佐剂免疫时间8周相比，可以节省3-5周时间，也大大提升了客户实验效率。尤其对于实验进度要求比较着急的客户，在这一点上会产生浓烈的兴趣！另外，很多客户的动物为外包饲养，饲养成本较高，也会感兴趣！ 抗原用量少？QuickAntibody免疫佐剂通过减少免疫针次（常规弗式佐剂免疫需要至少4针，QuickAntibody佐剂仅需免疫2针）以及每针次抗原用量，降低抗原使用量。每针次抗原用量真核细胞表达仅需1-10ug每针，原核细胞表达仅需10-20ug，病毒源颗粒仅需1-5ug每针。若客户抗原为直接购买抗原、真核表达抗原（真核表达量低）、抗原表达量极低、或抗原为天然组织纯化（如从植物组织或动物组织中纯化的天然抗原），因抗原贵重或产量较低，此处会极大吸引客户。 不破坏抗原天然构象？弗式佐剂为油性佐剂，在与抗原乳化时，需要形成油包水的稳定结构，而蛋白一般亲水基团暴露在外侧，疏水基团在内侧未暴漏，形成油包水的稳定结构，必然伴随着疏水基团的外翻，从而导致抗原天然构象的改变。QuickAntibody佐剂为水溶性佐剂，不会导致疏水基团外翻，保留抗原的天然构象，因此可以获得针对构象性表位的抗体。若客户需要针对构象性表位的抗体，此优点会很感兴趣！对于诊断试剂公司，因为检测的蛋白基本为天然抗原，需要针对构象性表位的抗体，具有极大的吸引力。

新型佐剂疫苗商业策划书2014

新型佐剂疫苗商业策划书2014 导读：本文新型佐剂疫苗商业策划书2014，仅供参考，如果能帮助到您，欢迎点评和分享。 第一章摘要 一、项目背景 二、项目简介 三、项目竞争优势 第二章项目公司概况 一、公司基本信息 二、公司治理与管理团队 (一)组织结构 (二)管理团队 三、公司主营业务 四、公司财务简析 第三章产品与技术 一、新型佐剂疫苗主要产品介绍 (一)主要产品 (二)产品系列 (三)产品功能 (四)产品的竞争优势 二、新型佐剂疫苗产品的市场定位

(一)市场定位 (二)产品应用案例 三、新型佐剂疫苗产品制造 (一)产品生产制造方式 (二)生产工艺流程 (三)质量控制 四、技术与研发 (一)技术背景 (二)关键技术介绍 (三)产品应用推广情况 (四)研发实力 (五)公司现有的和正在申请的知识权 (六)公司持续创新安排 第四章企业管理 一、内部控制制度情况 二、企业文化 第五章新型佐剂疫苗行业及市场分析 行业历史与前景，市场规模及增长趋势，行业竞争对手及本公司竞争优势，未来市场销售预测 一、新型佐剂疫苗行业概况 二、新型佐剂疫苗行业相关政策法规 1、国家政策

2、地方支持鼓励性政策 三、新型佐剂疫苗市场及需求分析新型佐剂疫苗市场规模增长趋势第六章发展规划 一、盈利/商业模式 二、发展战略和总体目标 三、业务发展计划 第七章市场营销 一、新型佐剂疫苗营销战略 1、营销战略目标 2、4P’S营销组合 3、4C营销组合 二、新型佐剂疫苗市场推广方式第八章融资说明 一、资金需求 二、资金使用规划 三、投资者权利 四、投资退出设想 五、公司价格评估 第九章项目财务评价 一、基本财务数据假设 二、销售收入预测与成本费用估算