全二维液相色谱串联质谱用于银杏叶提取物成分分析的研究_陈学国

收稿日期:2004-09-20

作者简介:陈学国,男,博士研究生.

通讯联系人:邹汉法,男,研究员,博士生导师,Tel:(0411)83693409,Fax:(0411)83693407,E -mai l:zouhfa@mai l.dlptt.l https://www.wendangku.net/doc/e713731321.html,.基金项目:国家自然科学基金资助项目(90209056).

全二维液相色谱串联质谱用于银杏叶提取物成分分析的研究

陈学国1

, 孔 亮1

, 盛亮洪2

, 厉 欣1

, 邹汉法

1

(1.中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心,辽宁大连116011;

2.中国药科大学生药学教研室,江苏南京210038)

摘要:建立了全二维液相色谱串联质谱分离分析模式,将质脂体色谱柱和ODS 反相色谱柱作为二维分析色谱柱,二者通过一个连有两个0 5mL 定量环的八通阀耦联。质脂体色谱柱上的馏分在反相色谱柱上分离后,直接进入紫外-检测器,然后经分流器分流后进入大气压电离质谱。将该体系用于银杏叶提取物的组成研究,共检测到至少41个组分,结合紫外-可见光谱和质谱信息,其中13个组分初步鉴定为银杏内酯B 、银杏内酯C 、白果内酯、槲皮素芸香糖苷、槲皮素、槲皮素-3-O - -D -葡萄糖基(1-2)- -L -鼠李糖苷、槲皮素-3-O - -D -葡萄糖苷、异鼠李素、山柰酚-3-O - -D -芸香糖基(1-2)- -L -鼠李糖苷、异鼠李素-3-O - -D -芸香糖苷、山柰酚-3-O - -D -葡萄糖苷、山柰酚和山柰酚-3-O - -D -芸香糖苷。

关键词:全二维液相色谱;质谱;银杏叶提取物;中药

中图分类号:O 658 文献标识码:A 文章编号:1000-8713(2005)01-0046-06

Applications of Two -Dime nsional Liquid Chromatography

Coupled to Mass Spe ctrometry for the Se paration and Identification of Compounds in Ginkgo bilo ba Extracts

CHEN Xueguo 1,KONG Liang 1,SHENG Lianghong 2,LI Xin 1,ZOU Hanfa 1

(1.Na tion al Chr oma togr aphic R .& A.Center ,Da lian In stitute of Chem ical Physics,T he Chinese

Aca dem y of Sciences ,Dalian 116011,China ;2.School of T r adition al C hinese Medicin es,

China Phar m aceutica l Univer sit y ,Nanjing 210038,China )

Abstract :A comprehensive two -dimensional liquid chromatographic separation system based on the combination of an immobilized liposome chromatographic (ILC)column and an ODS column was developed for the separation of components in Ginkgo biloba ,a traditional Chinese medicine.Two columns were coupled by a two -position,eight -port valve equipped with two storage loops,and the system was controlled by a computer.The effluent was detected both by a diode array detector and by an atmospheric pressure chemical ionization (APCI)mass spectrometer.Under the optimization separation conditions with the separation system,more than 41components in the methanol extract of Gin kgo biloba were resolved.According to their UV and mass spectra,13of them were prelim -inarily identified as ginkgolide B,ginkgolide C,bilobalide,rutin,quercetin,quercetin -3-O - -D -glucosyl (1-2)- -L -rhamnoside,quercetin -3-O - -D -glucoside,isorhamnetin,kaempfero-l 3-O - -D -glucosyl (1-2)- -L -rhamnoside,isohamnetin -3-O - -D -rutinoside,kaempfero -l 3-O - -D -glucoside,kaempferol,kaempfero-l 3-O - -D -rutinoside.

Ke y words :comprehensive two -dimensional liquid chromatography;mass spectrometry;Gin kgo

biloba extracts;traditional Chinese medicines

复杂体系的分离分析一直是分析化学的重要研究方向。近几年来,尽管色谱填料粒径的降低和固定相表面理化特性的改进极大地提高了液相色谱柱的分辨能力[1],但液相色谱真正的分离能力却没有

能够随之显著提高。Davis 等[2]指出,用一维分离方法对含有100个随机分布组分的样品进行分离,完全分离其中82个组分需要大约400万理论塔板数。显然,单纯从液相色谱柱技术的改进和设计出

2005年1月January 2005

色谱

Chinese Journal of Chromatography

Vol.23No.1

46~51

发不足以解决复杂体系中的样品组分完全分离的问题[3]。

与一维色谱相比,多维色谱能够提供更高的峰容量,更适合于复杂样品的分离分析。全二维液相色谱将分离机理不同而又相互独立的两根色谱柱通过一个切换阀耦联在一起,是一种最常用的多维分离模式[4,5]。与传统的一维液相色谱相比,全二维液相色谱不仅能够提供更高的峰容量,而且具有较高的分辨率和分离能力[6,7]。随着质谱的发展和液-质联用技术的实现,全二维液相色谱串联质谱得以实现。借助于质谱检测的优越性,结合二维体系的优势,全二维液相色谱串联质谱已成为复杂样品分离分析中一种非常有效的工具。迄今为止,各种不同分离模式耦联的全二维液相色谱体系已经被应用于蛋白质组学研究[7~10]、聚合物的分离分析[11]和生物分子的分析鉴定[6,12]等领域。

中药是祖国医药学的宝贵遗产,迄今已有数千年的临床实践,并形成了系统的传统中医理论体系,在我国有着极其广泛的应用[13]。然而,中药是一个非常复杂的体系,常常含有从无机物到有机物、从极性到非极性、从小分子到生物大分子的各种成分。因此,对于中药组分的分离分析,建立一种切实可行的方法至关重要。全二维液相色谱串联质谱应用于中药成分分析的研究鲜有报道。张祥民等[14]利用全二维毛细管液相色谱和毛细管电泳串联对中药复方承气汤中的中性组分进行了分离,系统的峰容量高达2000。我们已经建立了常规色谱柱的全二维液相色谱-质谱联用技术[15]。本文主要探讨该二维分离模式应用于银杏叶提取物的组成研究。

1 实验部分

1.1 仪器和操作条件

本文所采用的全二维液相色谱串联质谱分离模式的基本原理见文献[15]。高效液相色谱泵为岛津LC-10ADvp。第一维色谱柱为150mm 2 0mm i d 不锈钢柱,填充质脂体固定相(中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心),流动相为50mmol/L的H3PO4-NaH2PO4缓冲溶液(pH=

3 0),流速0 07mL/min。第二维色谱柱为100mm

4 6mm i d 不锈钢柱,填充

5 m Kromasi-l ODS (中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心),流动相A液为0 1%(体积分数,以下同此)醋酸溶液,B液为乙腈。每个周期流动相梯度洗脱条件:0~

6 2min以15%B液~73%B液线性梯度洗脱,6 2~

7 0min以15%B液洗脱,流速2 00 mL/min。紫外检测器为岛津SPD-10Avp,检测波长350nm。质谱仪为岛津LCMS-2010。质谱条件:大气压电离方式(APCI),正负离子模式扫描,雾化氮气流速2 5L/min,电离电压1800V,APCI探头温度400 ,脱溶剂管(CDL)温度250 ,加热管温度200 ,扫描范围m/z50~1000,扫描间隔0 5s。

1.2 数据处理

全二维色谱体系由色谱工作站TDLC(中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心)控制及进行数据采集与处理。质谱数据由质谱工作站LCMS solution(version2.02,Shimadzu,Japan)采集并处理。二维数据借助自编软件和软件Fort-ner Transform(version3.4,Fortner Inc.,Savoy, IL,USA)处理。

1.3 试剂

甲醇(色谱纯,山东禹王实业总公司);乙腈(色谱纯,上海陆都化学试剂厂);醋酸(分析纯,沈阳联邦试剂厂);磷酸(分析纯,沈阳联邦试剂厂);磷酸二氢钠(分析纯,沈阳联邦试剂厂);水为Mill-i Q超纯

图1 银杏叶提取物在一维色谱柱上的分离色谱图

Fig.1 O ne-dimensional liquid chromatograms

of Ginkgo bilo ba extracts

Mo bile phases: a.50mmol/L pho sphate buffer(p H3.0);b. 50%(v/v)acetonitrile in w ater.Columns: a.150mm 4.6mm

i d packed with5 m immobilized liposo me chr o mato gr aphic (ILC)stationar y phase;b.150mm 4.6mm i.d.packed with5 m Kr o masil ODS.Flo w rate:0.8mL/min.Injection volume:5 L;detection wavelength:350nm.

水。银杏叶提取物由大连瑞芳生化物品有限公司提供。

2 结果与讨论

2.1 银杏叶提取物的分离分析

图1是银杏叶提取物在相同规格质脂体柱和ODS柱上的分离色谱图。由图1可看出,基于不同的分离机理,银杏叶提取物得到了不同的分离结果。鉴于银杏叶提取物中所含成分性质差别较大,结合其在质脂体柱和ODS柱上的不同分离效果,选择质脂体柱和ODS柱作为全二维液相色谱串联质谱体系中所使用的二维分析色谱柱。在二维分离模式下,第二维色谱柱的分析时间不仅决定着样品的整

47

第1期陈学国等:全二维液相色谱串联质谱用于银杏叶提取物成分分析的研究

个分析时间,而且对整个体系的选择性也有至关重要的影响:其分析时间越短,整个体系的选择性越高[4,7]。为了获得更高的选择性,第二维色谱柱填料要求适合快速分析,具有高效、高分辨率等特点。而O DS 填料可在较高流速下保持较好的分离效果,同时从图1可看出,样品在ODS 柱上的分离效果比在质脂体柱上更好,而且更便于与质谱串联,因此选择O DS 柱作为二维体系中的第二维色谱柱,质脂体柱作为第一维色谱柱。通过实验条件优化,ODS 柱中流动相的流速设定为2 00mL/min 。为了尽量提高系统的选择性,第二维分离分析时间设定为7min,即在全二维液相色谱串联质谱体系中7min 为一个切换周期。在此基础上,利用基于遗传算法和

均匀设计的优化策略,优化得到了第二维色谱分离时的流动相洗脱条件[16]。

在发展的全二维分离模式下,定量环的体积是由第一维色谱中的流动相流速和第二维色谱的分析时间决定的,所以第一维色谱中的流动相流速可以根据定量环的体积和第二维色谱的分析时间计算得到。在这里,两个定量环的体积均为0 5mL,所以第一维色谱中的流动相流速应设定为0 07mL/min 。

将所有ODS 柱上的分离色谱图按顺序并排罗列得到全二维分离模式下银杏叶提取物的三维色谱图(如图2所示)

。

图2 银杏叶提取物的三维色谱图

Fig.2 Two -dime nsional chromatograms of G inkgo bilo ba e xtracts

Exp erimental conditions:ILC co lumn ,150mm 2 0mm i d packed with 5 m ILC stationary p hase;flo w r ate,0 07mL/min.ODS co-l

umn,100mm 4.6mm i.d.packed with 5 m Kr o masil ODS;flow rate,2 00mL/min;injectio n vo lume,5 L;detection w avelength,350nm.T he heights of the two -dimensional plot determined by:the r elative UV absorbance (a),the counts p er seco nd using APC I positive io n mo de (b ),the counts per second using negativ e ion mode (c).

48 色谱第23卷

图3 质脂体色谱柱上第8个周期(49~56min)的

馏分在ODS 柱上的分离谱图

Fig.3 Chromatograms on the ODS column of the

fraction e luted betw een 49and 56min

from the ILC column Detection w ith: a.UV ab so r p tion;b.APCI p ositive io n mo de;c.APC I neg ative ion mo de.

图2中,样品在质脂体色谱柱上的保留时间为第一横坐标,在ODS 柱上的保留时间为第二横坐标,紫外吸收信号为纵坐标,色谱峰的强度与样品组分的紫外吸收强度成正比,色谱峰的形状根据质脂体色谱柱上的所有馏分在ODS 柱上的分离结果拟合得到。图3为质脂体色谱柱上第8个周期(第49~56min)的馏分在ODS 柱上的单个分离谱图。从图3-a 中可以看出:采用紫外检测至少得到10个组分,但在图2中,只有8个组分被观测到。这是因为虽然大多数组分在质谱检测中都有响应,但是因为一些组分的质谱响应比较弱,被质谱噪声所掩盖,所

以没有在图中显示出来。同样原因,图3-c 中也只有6个组分被检测到。值得注意的是,除了与图3-a 相同的8个组分外,在图3-b 中还检测到了另外3个组分(峰 、 和 )。由此可见,全二维液相色谱

串联质谱体系中的质谱不仅可以用来进一步检测已经被紫外检测器检测到的组分,而且可以用来检测那些在紫外检测中没有响应的组分。2.2 银杏叶提取物中成分的鉴定

银杏叶提取物在全二维液相色谱串联质谱体系中得到了较好的分离,参考检测到的组分的紫外光谱图和结构信息可知,在该提取物中至少有41个组分得到了分离(见图2-a);通过与文献[17~25]所报道的结果对照,对其中的13个组分,即图2中组分7,8,10,16,21,22,23,25,26,27,28,30和31进行了初步鉴定。

图4所示为对上述13个组分进行初步鉴定的紫外光谱图和质谱图。从图4-a,b,c 和d 中可以看出,图2中的组分7有m /z 423(M -

)的分子离子峰,组分8,10和16分别有m /z 439(M -),m /z 325(M -)和m /z 609(M -)的分子离子峰,参考文献[14~17]报道,上述4个组分初步鉴定为银杏内酯B 、银杏内酯C 、白果内酯和槲皮素芸香糖苷。再看图2中组分21的质谱图(见图4-e),它有m /z 301(M -)的分子离子峰,最大紫外吸收峰在波长255nm 左右,与文献[20,24]中报道的有关槲皮素的信息基本一致,因此初步鉴定组分21为槲皮素。图2中组分25的紫外最大吸收波长为253nm,有m /z 315(M -)的分子离子峰(见图4-h),结构信息及紫外光谱图与异鼠李素[21,22]

的相符,鉴定其为异鼠李素。文献[23,24]中报道,山柰酚有m /z 285(M -)的分子离子峰,紫外最大吸收波长为265nm,这与图2中组分30的检测结果(见图4-l)基本一致,初步定性其为山柰酚。同样,从图4-f,g,i,j,k 和m 中可以看出,图2中组分22,23,26,27,28和31的紫外最大吸收波长分别为257,257,267,253,266和266nm,而且分别有m /z 609(M -),m /z 463(M -),m /z 593(M -),m /z 623(M -),m /z 447(M -)和m /z 593(M -)的分子离子峰,所以参考文献[25]中报道的相关数据,它们分别被初步鉴定为槲皮素-3-O - -D -葡萄糖基(1-2)- -L -鼠李糖苷、槲皮素-3-O - -D -葡萄糖苷、山柰酚-3-O - -D -芸香糖基(1-2)- -L -鼠李糖苷、异鼠李素-3-O - -D -芸香糖苷、山柰酚-3-O - -D -葡萄糖苷和山柰酚-3-O - -D -芸香糖苷。

49 第1期陈学国等:全二维液相色谱串联质谱用于银杏叶提取物成分分析的研究

图4 银杏叶提取物中初步鉴定出的13个组分(见图2-a)的紫外吸收图和质谱图

Fig.4 UV spectra and mass spe ctra using negative ion mode for de tection of components

(se e Fig.2-a)in G inkg o biloba extracts

a.peak 7;b .peak 8;c.peak 10;d.peak 16;e.peak 21;f.peak 22;g.peak 23;h.peak 25;i.peak 26;j.peak 27;k.peak 28;l.peak 30;

m.peak 31.

50 色谱第23卷

3 结论

建立了以质脂体色谱柱为第一维色谱柱,ODS 柱为第二维色谱柱的全二维液相色谱串联质谱分离模式,并将此分离模式用于银杏叶提取物的分离分析中。与传统的一维色谱相比,全二维液相色谱体系在分离分析未知复杂样品时,不仅能提高液相色谱的峰容量与选择性,而且由于引入了质谱技术,不仅提高了分离体系的检测能力,而且可以得到样品组分的结构信息,从而为化合物的定性提供更多的依据。将建立起来的全二维液相色谱串联质谱分离体系应用于银杏叶提取物的组分研究,在175min 内分离检测到了至少41个组分,根据检测得到的各组分紫外色谱图和结构信息,参考文献报道,其中的13个组分得到了初步的定性。实验结果初步显示出全二维液相色谱串联质谱分离分析体系的高峰容量、高灵敏度和自动化等特点,这为中药等复杂体系的分离分析又提供了一种可靠的方法。

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第1期陈学国等:全二维液相色谱串联质谱用于银杏叶提取物成分分析的研究

液相色谱-串联质谱法

消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星测定?液相色谱-串联质谱法 Determination of clobetasol propionate and levofloxacin hydrochloride in disinfection product - LC-MS-MS method 1 范围 本方法规定了膏霜类消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星残留量液相色谱-串联质谱测定方法。 本方法适用于膏霜类消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星残留量的测定。 取样量为0.1g时，本方法对丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星的检出限见表1。 表1 丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星的检出限、保留时间和特征离子 中文名称英文名称 检出限 （μg/g） 保留时 间（min） 特征离子(m/z) 丙酸氯倍他索Clobetasol propionate 0.009 7.83 467.0/355.2/373.4 盐酸左氧氟沙星Levofloxacin hydrochloride 0.06 1.11 362.0/260.9/318.2 2 规范性引用文件 3 原理 试样中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星用甲醇提取，提取液经0.45μm滤膜过滤，用C18柱分离后，用液相色谱-串联质谱仪测定，正离子扫描，离子对定性，峰面积定量。 4 试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为不含有机物的纯水，纯水中干扰物的浓度需低于方法中待测物的检出限。 4.1甲醇：农药残留级。 4.2乙腈：农药残留级。 4.3甲酸：分析纯。

4.4标准品：丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星均购自中国药品生物制品检定所，纯度≥99.8%。 4.5标准溶液：准确称取丙酸氯倍他索适量，用乙腈－水（1：1）配制成100μg/mL 的标准贮备液。准确称取盐酸左氧氟沙星适量，用纯水配制成100μg/mL的标准贮备液。准确量取上述标准贮备溶液适量，用乙腈稀释配制成浓度为10.0μg/mL 的混合标准中间溶液，将标准中间溶液转移到安瓿瓶中于4 C保存。临用前，再根据需要用甲醇配制成不同浓度的标准使用溶液。 4.6甲酸溶液(0.2%，v/v)：量取2mL甲酸，用纯水定容至1000mL。 4.7 0.45μm滤膜。 5 仪器 5.1 液相色谱-串联质谱联用仪：HP1100高效液相色谱仪(Agilent) - API 4000质谱仪(Applied Biosystems) ，电喷雾离子化源(ESIMS，NI/PI模式)。 5.2 分析天平：感量0.1mg和0.001g。 5.3实验室纯水机：Barnstead纯水机。 5.4涡旋振荡器：Scientific Industries 涡旋振荡器。 5.5 具塞试管：10mL。 6 试样的制备与保存 6.1 试样的制备 取有代表性样品5g，搅拌均匀，制成实验室样品。 6.2 试样保存 制备好的试样置于室温保存。 7 测定步骤 7.1样品前处理 称取0.1g~0.2g样品(精确到0.001 g) ，置于10mL试管中，加入3.00mL甲醇溶液，涡旋振摇使样品分散后，超声振荡10min。静置，吸取上清液经滤膜（4.7）过滤后，供液相色谱-串联质谱测定。

银杏叶中的主要成分

银杏叶中的主要成分、分离方法及药理作用 的研究 摘要 银杏叶提取物中的主要成分为萜类内酯化合物，具有强大的抗氧化与自由基能力，因此在临床上具有很好的应用。随着对银杏叶成分、药理作用、制剂、临床应用范围的研究领域进一步扩大、加深,银杏叶在传统治疗的作用越来越重要。其对心血管疾病、神经系统疾病、高脂血症以及感染、损伤等都有很好的疗效。本文主要研究了银杏叶提取物的主要成分和分离方法，并通过实验得出其药理作用。 关键词：银杏叶提取物分离药理作用 前言 银杏叶中的类黄酮物质对动物的循环系统、脑功能有改善作用，从此展开了对银杏叶药理及应用的广泛研究。现研究表明，银杏叶提取物具有广泛的药理作用，如肝脏保护作用、抗毒作用、抗肿瘤作用、抗辐射作用、肾脏保护等作用以及抗氧化、促智作用、抗焦虑及镇静作用、调节血脂和减轻缺血再灌注损伤作用等，其中心血管系统和血液系统的保护作用尤为当前的研究热点。银杏叶提取物能降低心血管系统疾病发生率，药理机制有:①增加人血浆抗氧化能力;②减少血检的形成;③降低血清TG;④扩张血管，增加血流量，改善缺血组织代谢;⑤在心肌缺血再灌注中清除氧自由基。 正文 1银杏叶的主要成分简述 银杏叶中的成分比较复杂，化学成分主要有黄酮苷类（flavonoidglycosides）、萜内酯类（terpenes）、聚异戊烯醇类（polyprenols）、6-羟基犬尿喹啉酸（6-hydroxykynurenic acid ,6HKA）、有机酸、银杏酚酸类（phenolic acids）及烷基酚、烷基酚酸、又称银杏酸（ginkgolic acids）、4’-甲氧基吡哆醇（4’-O-methypyridoxine）等。

液相色谱串联质谱的小知识

一、开机 water 2695/micromass zq4000: 开机步骤 1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源，此时质谱主机内置的CPU会通过网线与计算机主机建立通讯联系，这个时间大约需要1至2分钟。 2. 等液相色谱通过自检后，进入Idle状态，依照液相色谱操作程序，依次进行操作。（具体根据液相色谱不同型号来执行，下面以2695为例）。 a.打开脱气机 (Degasser On)。 b.湿灌注(Wet Prime)。 c.Purge Injector。 d.平衡色谱柱。 3.双击桌面上的 MassLynx 4.0图标进入质谱软件。 4.检查机械泵的油的状态（每星期），如果发现浑浊、缺油等状况，或者已经累积运行超过3000小时，请及时更换机械泵油。 5.点击质谱调谐图标（MS Tune）进入质谱调谐窗口。 6.选择菜单“Options –Pump”，这时机械泵将开始工作，同时分子涡轮泵会开始抽真空。几分钟后，ZQ就会达到真空要求，ZQ前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。 7.点击真空状态图标，检查真空规的状态，以确认真空达到要求。 8. 确认氮气气源输出已经打开，气体输出压力为90 psi。 9.设置源温度（Source Temp）到目标温度。 关机 1．点击质谱调谐图标进入调谐窗口。 2.点击Standby 让MS 进入待机状态时，这时状态灯会由绿变红，这一过程是关质谱高电压的过程。 3．停止液相色谱流速，如果还需要冲洗色谱柱，可以将液相色谱管路从质谱移开到废液瓶。4．等脱溶剂气温度（ESI）或APCI探头温度降到常温，点击气体图标关闭氮气。 5．逆时针方向拧开机械泵上的Gas Ballast 阀，运行20分钟后关闭（镇气）。 a) 对于ESI源，至少每星期做一次。 b) 对于APCI源，每天做一次。 6．再次确认机械泵的Ballast阀是否已经关闭。 7．选择Option / Vent，这时质谱开始泄真空，ZQ 前面板的状态灯“Vacuum”开始闪烁，几分钟后机械泵会停止运行，这时可以关闭质谱电源。 FINNIGEN DECA 开关机及校正流程—— 1开机前准备事项 （1）确保质谱总电源开关（白色开关）及主板电源开关（黑色开关）处于关闭状态（O）； （2）检查真空泵油液面，确保泵内油页面处于标定的上下两线之间； （3）查看离子源洁净程度，ESI源查看喷口是否有固体析出，毛细管口是否完好；APCI喷口是否有积液； （4）气体压力，打开高纯氮气钢瓶总阀，调节出口压力调至0.65MPa，打开高纯氦气钢瓶总阀,调节出口压力调至0.25Mpa; （5）检查壳气及辅助气接口连接紧固，松开液相管路与离子源的接口； （6）开启动力电源，电压稳定，正常；

银杏叶提取物治疗脑供血不足临床疗效

由此说明单用雌激素是不够的。 盐酸氟西汀(百忧解)是一种选择性52羟色胺回收抑制剂,可选择性抑制中枢神经元系统突触前52羟色胺释放后的回收再摄取,从而提高突触间隙52羟色胺的浓度,产生明显的抗抑郁效应[7];而雌激素可促进52 H T等神经递质合成[2];二者合用既可改善潮热等症状又可改善抑郁症状。本文结果显示,盐酸氟西汀联合HR T治疗围绝经期抑郁症,效果显著优于单用HR T。 参考文献 [1]　王爱铃,鞠雪涛,石紫云,等.超声在绝经后激素补充治疗 评估中的临床价值.陕西医学杂志,2006,35(10):11672 1168. [2]　张惜阴,戴钟英,于传鑫,等.实用妇产科学.第2版.北京: 人民卫生出版社,2003:846. [3]　孙　静.抗抑郁药的临床应用.临床精神医学杂志,2008, 18(3):216.[4]　Soares CN,A l m eida O P,Joffe H,et al.Effcacy of esteadi o l fo r the teratm ent of deperssive diso rders in peri m enopausal w om en:a doubieblind,random ized, p lacebo2contro lled trial.A rch Gen P sych iatry,2001,58: 5292534. [5]　Saletu B,B randstatter N,M etka M,et al.Double2blind, p lacebo2con2tro lled ho r monal,syndrom al and EEG m app ing studies w ith transdder m al oestradi o l therapy in m enopausal dep ressi on.P sychopar m co logy(Berl),1995, 122:3212329. [6]　Joffe H,Groninger H,Soares C,et al.A n open trial of m irtazap ine in m enopausal w om en w ith dep ressi on unresponsive to estrogen rep lace2m ent therapy.W om ens H ealth Gend Based M ed,2001,10:99921004. [7]　石　玉,王汝娟.百优解治疗抑郁症的双盲对照研究.陕 西医学杂志,2002,31(8):9052908. (收稿:2009203223) 银杏叶提取物治疗脑供血不足临床疗效 西电集团医院(西安710077)　陈风慧　徐　璐 摘　要　目的:探讨银杏叶提取物治疗脑供血不足临床疗效。方法:100例脑供血不足患者,银杏叶和对照组(丹参注射液)各50例,每天静滴1次治疗15d。结果:银杏叶组起效快总有效率94%,对照组起效慢,总有效率70%,两组比较差异有非常显著意义(P<0.01)。结论:银杏叶提取物治疗脑供血不足疗效明显。 主题词　脑缺血 药物疗法　银杏叶　对比研究 脑供血不足是临床常见的急性脑血管病,具有高致残率高致死率,且复发率高,治疗上有一定的难度。我院从2003年7月至2007年12月应用银杏叶提取物治疗脑供血不足50例,取得良好效果,现报告如下。 资料与方法 1　一般资料　本组100例患者均系我院急诊科留观和神经内科住院患者,所有病例均有脑供血不足的症状,全部患者治疗前后均行血常规、尿常规、肝肾功能、血糖、心电图、TCD、CT检查并排除心、肝、肾、内分泌及代谢疾病,随机将患者分为银杏叶提取物组和对照组。银杏叶提取物组50例,男28例,女22例,年龄28～78岁,视物旋转31例,合并高血压34例,冠心病30例,颈椎病23例,糖尿病10例。对照组50例,男27例,女23例,年龄30～72岁,头昏35例,合并高血压25例,冠心病22例,高血压15例,颈椎病26例。两组年龄、性别、病情程度、既往史均无显著性差异(P>0. 05),具有可比性。 　2　给药方法　银杏叶提取物组:银杏叶提取物10m l,溶于0.9%氯化钠注射液或5%葡萄糖注射液静 脉滴注,每日1次,共15d。对照组:复方丹参注射液溶于0.9%氯化钠注射液或5%葡萄糖注射液静脉滴注,每日1次,共15d。 3　疗效评定标准　显效:治疗后临床症状、体症完全消失或起效时间≤3d。有效:眩晕等症状减轻,可正常工作或生活,或起效时间3～7d。无效:治疗前后无变化;或起效时间大于7d。 4　统计学处理　采用?2检验。 结　果 两种临床疗效比较见表1,两种药物起效时间见表2。从表1、表2可见银杏叶提取物组疗效优于对照组;在起效时间上银杏叶提取物组也先于对照组。两组比较有非常显著意义。 表1　两组治疗疗效比较[例(%)]组　别n显效有效无效总有效率%银杏叶提取物组504163994对照组5010251570 注:与对照组比较,P<0.01

液相色谱串联质谱联用专业技术实验指导(许煊炜)

液相色谱串联质谱联用仪检测技术 实验指导 （2014、2015级） 课程内容（一个实验8学时）： （1）AB Sciex Qtrap 4500 三重四级杆/离子阱液相色谱串联质谱联用仪的结构原理、操作及定性定量应用。 （2）利用液相色谱串联质谱联用仪快速测定水果中7种农药的残留量。 吉林农业大学农业部参茸质检中心 2017.03

实验一AB Sciex Qtrap 4500 三重四级杆/离子阱液相色谱串联质谱联用仪的结构原理、操作及定性定量应用 一.实验目的和意义 通过学习液质联用仪的构成和使用方法，及其在定性、定量分析中的应用，培养学生使用液质联用仪进行仪器分析的能力，并培养学生严谨的科学态度、细致的工作作风、实事求是的数据报告和良好的实验习惯（准备充分、操作规范，记录简明，台面整洁、实验有序，良好的环保和公德意识）。培养培养学生的动手能力、理论联系实际的能力、统筹思维能力、创新能力、独立分析解决实际问题的能力、查阅手册资料并运用其数据资料的能力以及归纳总结的能力等。 （一）检测仪器 1、仪器名称高效液相色谱串联质谱联用仪（简称LC-MS-MS）。型号：4500 QTRAP（美国Applied Biosystems公司）。 2、仪器组成液相色谱部分：岛津LC-30A，配有在线脱气机、超高压二元泵、自动进样器；串联质谱部分：QTRAP4500，配有ESI离子源、串联四级杆/线性离子阱。 3、主要性能指标离子化方式：ESI电离质量范围：（5 ~ 1700）amu 分辨率：> 6900 质量稳定性：0.1 amu/12h 灵敏度：1pg reserpine, ESI+, MRM扫描（m/z : 609/195），信噪比S/N > 120:1 扫描速度：4000 amu/sec 质量准确度：< 0.01%（全质量数范围） 4、方法原理高效液相色谱二元泵将流动相泵人系统并混合，自动进样器将待测样品注入流动相中，随流动相进入色谱柱，由于样品不同组分在色谱柱中保留时间不同，各组分被分开，依次进入离子源。在离子源中，各组分以ESI或APCI方式电离，被加速后进入质量分析器。4500QTRAP 的质量分析器主要由Q1、Q2、Q3三组四级杆串联组成。Q1可将分子离子按质荷比（m/z）大小分开；Q2是碰撞室，可将母离子进一步破碎为碎片离子；Q3具有四级杆和线性离子阱两种功能，作为四级杆时可将分子离子或碎片离子按质荷比大小分开，作为离子阱还可富集离子从而提高检测灵敏度。各组分的不同离子在质量分析器中被破碎、分离，并按质荷比大小依次抵达监测器，经记录即得到按不同质荷比排列的离子质谱图。4500QTRAP通过串联四级杆/线性离子阱两种不同质谱技术的结合，可以在单次分析中对复杂样本中的单个成分同时进行定性和定量，也可以对多个化合物进行定量分析。整台仪器的控制、数据采集、数据处理、结果输出均由PC计算机Windows操作系统支持下的Analyst软件控制完成。

高效液相色谱-串联质谱法

附件 面膜类化妆品中氟轻松检测方法 （高效液相色谱-串联质谱法） 1范围 本方法规定了面膜类化妆品中氟轻松的高效液相色谱-串联质谱测定方法。 本方法适用于面膜类化妆品中氟轻松的定性定量测定。 2方法提要 面膜类化妆品用饱和氯化钠溶液分散，用乙腈从分散液中提取氟轻松，用亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀提取液中大分子基质，经固相萃取小柱净化，用高效液相色谱仪分离，质谱检测器检测，采用保留时间和特征离子对丰度比定性，以待测物质相对应离子峰面积定量，以标准曲线法计算含量。 本方法的检出限为0.03 μg/g，定量限为0.05 μg/g。 3试剂和材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为纯化水。 3.1甲醇：色谱纯。 3.2乙腈：色谱纯。 3.3冰醋酸：优级纯。 3.4饱和氯化钠溶液。 3.5 10%亚铁氰化钾溶液：称取115 g亚铁氰化钾K4Fe(CN)6·3H2O固体，

用水溶解定容至1000 mL。 3.6 20%乙酸锌溶液：称取239 g乙酸锌C4H6O4Zn·2H2O固体，用水溶解定容至1000 mL。 3.7Oasis HLB固相萃取小柱或相当者：60 mg，3 mL。 3.8 标准物质：氟轻松，纯度不小于99.0%；标准物质的分子式、相对分子质量、CAS登录号、化学结构图参见附录A。 3.9 标准储备液（ρ=1g/L）：准确称取氟轻松标准物质（3.8）10mg，精确到0.01 mg，置于10 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，于－18℃下冷冻保存。 3.10 标准工作溶液：临用时，取标准储备液（3.9）适量，用乙腈稀释成0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.40μg/mL、0.80μg/mL系列浓度的标准工作溶液。 4仪器和设备 4.1 高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪（ESI源）。 4.2 分析天平：感量0.0001g；0.00001g。 4.3 涡旋混合器。 4.4离心机：转速5000r/min，容量10mL；50mL。 4.5 固相萃取装置。 5分析步骤 5.1样品处理 5.1.1提取 称取样品（带有载体的面膜，去除载体后取样）0.2 g，精确至0.0001 g，置15 mL具塞离心管中，加入3 mL饱和氯化钠溶液（3.4），于涡旋混合器上混合使样品分散，准确加入2 mL乙腈，充分涡旋提取2 min，以

银杏叶提取物产品知识的名词

Platelet-Activating Factor 即血小板活化因子。 一种强效生物活性磷脂，由白细胞、血小板、内皮细胞、肺、肝和肾等多种细胞和器官产生。PAF通过与靶细胞膜上的PAF受体结合而发挥作用。可引起血小板聚集，中性粒细胞聚集和释放；产生大量活性氧、白三烯等炎性介质。PAF阻断药 PAF通过与细胞膜受体结合发挥作用， PAF受体阻断药能阻止PAF与受体结合，因此对与PAF生成过量有关的疾病如哮喘、败血性休克等应当具有治疗意义。 银杏黄酮 银杏黄酮亦称银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E. [本品来源]本品为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L.的干燥叶提取物。 [植物分布]全国大部分地区有产，主产湖北、江苏、广西、四川、河南、山东、辽宁等地。. [产品性状]银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E为浅黄棕色可流动性棕黄色粉末，略有银杏叶香味。 [产品含量]总黄酮甙含量：24-26%（HPLC法）,总萜内酯含量8-10%（HPLC法）白果内酯≥2.5% 银杏内酯A≥1.4% 银杏内酯B≥1.2%，银杏内酯C≥0.9% ，银杏酸≤1-5ppm重金属含量≤20ppm AS≤1PPM 干燥失重≤3%，炽灼残渣≤1.5%，溶济残留≤1% 。 [产品用途]适用于制药、保健品、日用品、化妆品等各个领域 [适用范围]增加脑血管流量，降低脑血管阻力，改善脑血管循环功能，保护脑细胞，免受缺血损害，扩张冠状动脉，防止心绞痛及心肌梗塞，抑制血小板聚集，防止血栓形成，清除有害的氧化自由基，提高免疫能力，具有防癌抗衰功能。对治疗冠心病、心绞痛、脑动脉硬化、老年性痴呆、高血压等病有神奇疗效。 1. 促进循环 银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E.能同时促进大脑和身体肢体的循环。银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E.的一个主要保健功能就是抑制一种称为血小板活化因子（PAF）的物质，PAF是一种从细胞中释放的介质，其会导致血小板聚集（堆积在一起）。高含量的PAF会导致神经细胞损伤，中枢神经系统血流量降低，发炎，和支气管收缩。与自由基非常相似，高PAF水平也会导致衰老。银杏内酯和白果内酯可在缺血（体内组织缺少氧气）时期内保护中枢神经系统的神经细胞不受损伤。该功能可能能对苦于中风的患者有辅助治疗的作用。除了抑制血小板粘着外，银杏提取物调节血管张力和弹力。换句话说，其可令血管循环更加有效率。该提升循环效率作用对循环系统中的大血管（动脉）和较小血管（毛细血管）都有同样作用。 2. 抗氧化作用 银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E.可能在大脑，眼球视网膜和心血管系统中可发挥抗氧化特性。其在大脑和中枢神经系统中的抗氧化作用可能有助于防止因年龄导致的大脑功能衰落。银杏叶提取物在大脑中的抗氧化功能特别使人感兴趣。大脑和中枢神经系统特别易受自由基攻击。自由基导致大脑损伤被广泛认为是导致伴随衰老而来的多种疾病的影响因素，其中甚至包括阿兹海默症。 3. 抗衰老功能 银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E.提升大脑血流量并对神经系统有极好的滋补作用。包含上万患者的数百次科学研究证实了银杏叶提取物的功效对包括大脑血流不足和老年患者的智力衰退在内的诸多问题的效力。银杏对许多衰老的可能症状都有很好的效果，例如：焦虑和忧郁、记忆损伤、难以集中注意力，机敏度下降、智力下降、眩晕、头痛、耳鸣（耳中鸣响）、视网膜黄斑部退化（成人失明的最普遍原因）、内耳骚动（其会导致部分失聪）、末端循环不良、阴茎血流不良导致的阳痿。 4. 痴呆，阿兹海默症和记忆力提升 科学家回顾了所有已出版的对银杏和轻微记忆损伤的高质量研究，并得出结论：银杏在提升记忆力和感知功能方面较安慰剂明显更加有效。银杏在欧洲被广泛用于治疗痴呆。银杏被认为可有助于防止或治疗这些脑部紊乱的原因是其可增加脑部血流量及其抗氧化功能。尽管许多临床试验有科学上的缺陷，银杏可能增加阿兹海默症患者思考能力，学习能力和记忆力的证据仍被抱以很大期望。 5. 月经前不快症状 一次评价银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E.对有月经前不快症状妇女益处的双盲受控安慰剂研究，该试验包括143名年龄在 18-45岁的妇女，并跟踪她们两个月经周期。在第一个周期的第16天每个妇女都收到银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E.（每天

注射用银杏叶提取物的工艺研究

注射用银杏叶提取物的工艺研究 更新时间：2005-7-20 银杏叶中含多种生理活性成分，如黄酮类化合物、萜内酯等，预防和治疗心、脑血管疾病和老年性痴呆具有良好的效果。银杏叶黄酮多为黄酮糖苷。已从银杏叶中分离出二萜内酯有5种，即银杏内酯 A,B,C, J和M,倍半萜内酯1种，即白果内酯（gink- golide）。 国内已开发上市的含银杏叶提取物的品种有固体制剂和注射液，目前市场上作者未见有供注射用的银杏叶提取物原料药，本试验针对其工艺进行了中式规模的研究，该工艺简便，适合于工业生产。 试药与仪器 银杳叶为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L.的干燥叶，购于山东郑城，经检定，本品符合中华人民共和国药典2000年版一部银杏叶项下有关规定。槲皮素、白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C 均由中国药品生物制品检定所提供。 岛津LC-l0ATVP双泵，岛津SPD-10AVP 紫外-可见检测器。CLASS-VP色谱工作站。试剂：乙腈为色谱纯，乙醇为医用酒精，其他试剂为分析纯，水为重蒸水。ZFQ-971型旋转薄膜蒸发器。 方法与结果 1 工艺过程 1.1 粗品制备 已经粉碎至0.3～0.5cm碎块的银杏叶以70％乙醇60℃温浸提取，提取2次，每次2h，合并提取液，回收乙醇至相对密度（1.03～1.09，50℃测），加 4倍叶重量的水，1～4℃冷藏放置8h，过滤。滤液上DM130大孔吸附树脂柱，分别以3～4倍柱体积水、 3倍柱体积15％乙醇、70%乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液，在温度为50～60℃，真空度-0.08～- 0.09MPa条件下，减压浓缩，真空干燥，得粗品。 1.2 精制过程

液相色谱-质谱联用(LC-MS)

液相色谱-质谱联用(LC-MS) LCMS分别的含义是：L液相C色谱M质谱S分离（友情赠送：G是气相^_^） LC-MS/MS就是液相色谱质谱/质谱联用 MS/MS是质谱-质谱联用（通常我们称为串联质谱，二维质谱法，序贯质谱等） LC-MS/MS与LC-MS比较，M（质谱）分离的步骤是串联的，不是单一的。 色谱法也叫层析法，它是一种高效能的物理分离技术，将它用于分析化学并配合适当的检测手段，就成为色谱分析法。 色谱法的最早应用是用于分离植物色素，其方法是这样的：在一玻璃管中放入碳酸钙，将含有植物色素（植物叶的提取液）的石油醚倒入管中。此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入，谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带，继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴定。色谱法也由此而得名。 现在的色谱法早已不局限于色素的分离，其方法也早已得到了极大的发展，但其分离的原理仍然是一样的。我们仍然叫它色谱分析。 一、色谱分离基本原理： 由以上方法可知，在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。 色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。 使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。 由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。 二、色谱分类方法： 色谱分析法有很多种类，从不同的角度出发可以有不同的分类方法。 从两相的状态分类：

银杏提取物标准

中国药典银杏叶提取物质量标准 我要投稿作者：不详出处：不详时间：2010-11-23类别：银杏叶提取物人气：432 中国药典银杏叶提取物质量标准： 制法：乙醇（不是甲醇）回流提取，大孔树脂吸附，喷干，粉碎。 性状：浅棕黄色至棕褐色粉末；味微苦。 检查：水分小于5.0%； 炽灼残渣小于0.8%； 重金属不得过百万分之二十，即20ppm以下。 黄酮苷元峰面积比，槲皮素与山奈素的峰面积比应为0.8至1.5。（如果超过1.5，则应怀疑被人为添加了槲皮素或者芦丁。） 总银杏酸不得过百万分之十，即10ppm。 含量测定高效液相色谱法。 总黄酮醇苷不得少于24.0%； 总黄酮醇苷含量=槲皮素含量+山奈素含量+异鼠李素含量

萜类内脂总量不得少于6.0%； 萜类内脂总量=白果内脂+银杏内脂A+银杏内脂B+银杏内脂C。 银杏叶提取物 Ginkgo Biloba Extract （1）原料级标准（不可直接用于制剂）（1）Routine 银杏黄酮≥24% Total Ginkgo flavone glycosides ≥ 24% 槲皮素与山奈酚峰比0.8--1.5之间 Quercatin: kaemperol 0.8--1.5 银杏总内酯≥6% Total terpene lactones ≥ 6% （2）中国药典2005版标准（2）CP2005 银杏黄酮≥24% Total Ginkgo flavone glycosides ≥ 24% 槲皮素与山奈酚峰比0.8--1.5之间 Quercatin: kaemperol 0.8--1.5 银杏总内酯≥6% Total terpene lactones ≥ 6% 银杏酸＜10ppm Ginkgolic acid ＜ 10ppm (3) 低酸银杏叶提取物 EGB761 (3) EGB761 银杏黄酮≥24% Total Ginkgo flavone glycosides ≥ 24% 槲皮素与山奈酚峰比0.8--1.5之间 Quercatin: kaemperol 0.8--1.5 银杏总内酯≥6% Total terpene lactones ≥ 6% 银杏酸＜5ppm Ginkgolic acid ＜ 5ppm （4）超低酸银杏叶提取物（4）Minimal acid

银杏叶提取物相关资料

一、银杏叶提取物的主要成分 目前银杏叶提取物质量控制标准主要在两种有效成分（黄酮和内酯）和一种毒性成分（银杏酸）上。中国药典对银杏叶提取物质量标准如下：总黄酮含量≥24%,内酯含量≥6%，银杏酸含量＜10ppm。这是提取物在每次临床试验中提取物显示实质功效的等级。 二、银杏叶提取物市场需求分析 2013年中国银杏叶提取物产量达到348.6吨，下图为2009-2014年中国银杏叶提取物产量统计。 国际市场上银杏叶提取物制剂总销售额估计达20亿～25亿美元，而我国每年出口银杏叶粗提取物金额在2000万美元左右。2012年，国内银杏叶提取物的市场表现出供应稳定的态势，辽宁产含量为100%黄酮的银杏叶提取物出口报价为46美元/公斤。 三、银杏在全国的分布量 中国的银杏资源主要分布在山东、浙江、安徽、福建、江西、河北、河南、湖北、江苏、湖南、四川、贵州、广西、广东、云南等省的60多个县市，另外台湾也有少量分布。从资源分布量来看，以山东、浙江、江西、安徽、广西、湖北、四川、江苏、贵州等省最多，而各省资源分布也不均衡，主要集中在一些县或市，详见下表。 省份市（县） 江苏泰兴、邳州、吴县、泰县、泰州 山东郯城、海阳、文登 广西灵川、兴安、临贵、桂林 湖北随州、安陆、南潭、孝感、京山 河南新县、光山、信阳、峡县、嵩县 浙江长兴、诸暨、临安、富阳、安吉 贵州盘县、正安、务川、道真 安徽金寨、霍山、舒城、歙县、宁国、广德

湖南祁阳、宁远、道县、资兴、新化、洞口、桑植 四川安县、北川、彭州、都江堰 广东南雄 福建浦城、崇安、龙溪、建阳、上杭 江西婺源、德兴、上饶、分宜 河北遵化、易县 辽宁丹东 我国五大银杏基地： 1、邳州是全国五大银杏基地最大种植基地。现有银杏树成片园21万亩，银杏果年产量900吨，占全国的十分之一；银杏士青叶产量1.2万吨，约占全国部产量的60％。银杏酮生产能力250吨，占全国总量的80％。 2、“天下银杏第一乡”的山东省郯城县新村乡。 3、宋店银杏基地为全国五大银杏基地之一。曾被林业部、国家科委誉以“银杏第一园”，“优质高产银杏示范基地”、等各种称号。 4、泰兴，古银杏、银杏定植数、银杏产量、银杏品质均居全国之冠，享有华夏“银杏第一市”美誉。目前泰兴银杏产量约占全国三分之一。 5、中国银杏之乡：广东韶关南雄市。 四、银杏叶提取物的功效 1、促进循环 银杏叶提取物能同时促进大脑和身体肢体的循环。除了抑制血小板粘着外，银杏提取物调节血管张力和弹力，可令血管循环更加有效率。 2、抗氧化 银杏叶提取物可能在大脑、眼球视网膜和心血管系统中可发挥抗氧化特性。其在大脑和中枢神经系统中的抗氧化作用可能有助于防止因年龄导致的大脑功能衰落。 3、抗衰老 银杏叶提取物提升大脑血流量并对神经系统有极好的滋补作用。银杏对许多衰老的可能症状都有很好的效果，例如：焦虑和忧郁、记忆损伤、难以集中注意力、机敏度下降、智力下降、眩晕、头痛耳鸣、视网膜黄斑部退化（成人失明的最普遍原因）、内耳骚动（其会导致部分失聪）、末端循环不良、阴茎血流不良导致的阳痿。 4、抵抗痴呆、阿兹海默症和记忆力提升 银杏在提升记忆力和感知功能方面较安慰剂明显更加有效。银杏在欧洲被广泛用于治疗痴呆。银杏被认为可有助于防止或治疗这些脑部紊乱的原因是其可增加脑部血流量及其抗氧化功能。 5、调解经前不快 银杏明显地减轻月经前不快症状的主要征候，特别是乳房疼痛和情绪不稳。 6、改善性功能 尽管目前没有关于此功能的双盲试验根据，但病例报告和开放研究提出银杏能使因扑洛扎克类药物及其它抗抑郁药物而来的性功能不良好转。 7、眼部问题

液相色谱串联质谱的小知识知识讲解

液相色谱串联质谱的 小知识

一、开机 water 2695/micromass zq4000: 开机步骤 1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源，此时质谱主机内置的CPU会通过网线与计算机主机建立通讯联系，这个时间大约需要1至2分钟。 2. 等液相色谱通过自检后，进入Idle状态，依照液相色谱操作程序，依次进行操作。（具体根据液相色谱不同型号来执行，下面以2695为例）。 a.打开脱气机 (Degasser On)。 b.湿灌注(Wet Prime)。 c.Purge Injector。 d.平衡色谱柱。 3.双击桌面上的 MassLynx 4.0图标进入质谱软件。 4.检查机械泵的油的状态（每星期），如果发现浑浊、缺油等状况，或者已经累积运行超过3000小时，请及时更换机械泵油。 5.点击质谱调谐图标（MS Tune）进入质谱调谐窗口。 6.选择菜单“Options –Pump”，这时机械泵将开始工作，同时分子涡轮泵会开始抽真空。几分钟后，ZQ就会达到真空要求，ZQ前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。 7.点击真空状态图标，检查真空规的状态，以确认真空达到要求。 8. 确认氮气气源输出已经打开，气体输出压力为90 psi。 9.设置源温度（Source Temp）到目标温度。 关机 1．点击质谱调谐图标进入调谐窗口。 2.点击Standby 让MS 进入待机状态时，这时状态灯会由绿变红，这一过程是关质谱高电压的过程。 3．停止液相色谱流速，如果还需要冲洗色谱柱，可以将液相色谱管路从质谱移开到废液瓶。 4．等脱溶剂气温度（ESI）或APCI探头温度降到常温，点击气体图标关闭氮气。 5．逆时针方向拧开机械泵上的Gas Ballast 阀，运行20分钟后关闭（镇气）。 a) 对于ESI源，至少每星期做一次。 b) 对于APCI源，每天做一次。 6．再次确认机械泵的Ballast阀是否已经关闭。 7．选择Option / Vent，这时质谱开始泄真空，ZQ 前面板的状态灯“Vacuum”开始闪烁，几分钟后机械泵会停止运行，这时可以关闭质谱电源。 FINNIGEN DECA 开关机及校正流程—— 1开机前准备事项 （1）确保质谱总电源开关（白色开关）及主板电源开关（黑色开关）处于关闭状态（O）； （2）检查真空泵油液面，确保泵内油页面处于标定的上下两线之间； （3）查看离子源洁净程度，ESI源查看喷口是否有固体析出，毛细管口是否完好；APCI喷口是否有积液； （4）气体压力，打开高纯氮气钢瓶总阀，调节出口压力调至0.65MPa，打开高纯氦气钢瓶总阀,调节出口压力调至0.25Mpa;

银杏叶提取物检测

第一章引言 第一章引言 术语和定义：总黄酮醇苷：包括槲皮素(Quercetin)、山奈素(Kaempferel)、异鼠李素(Isorhamnetin)的糖苷类。 银杏叶提取物(EGB)因其具有抗氧化，拮抗血小板活化因子，改善血液流变学特性等药理活动，因而引起了广大研究者的兴趣，不论是衡量提取工艺的优劣和控制EGB的质量，还是为后续药理药效的实验研究提供可靠数据，一种能稳定，可靠的定量分析其主要药效物质黄酮类化合物的方法是十分必要的。国内主要以铝盐显色然后比色的方法或直接进行比色的方法测定黄酮含量，但因此法受酚类物质干扰比较大，准确性和专属性比较差，只能做定性或半定量分析。样品经酸水解后，通过高效液相色谱法测定槲皮素，山奈素，异鼠李素3种苷元的含量，在乘以一定的因子换算成总黄酮醇苷的方法，因其准确，快速等优点一逐渐被广泛接受，也是国际上公认的分析银杏叶总黄酮含量的方法。应用范围：本方法采用高效液相色谱法测定银杏叶提取物中总黄酮醇苷的含量，本方法适用于银杏叶经加工制成的提取物[1]。 1.1银杏叶提取物简介[2] [本品来源] 本品为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L.的干燥叶提取物。 [植物性状] 落叶乔木，可高达40m。树干直立，树皮灰白。枝有长短两种，叶在短枝上簇生，在长枝上互生。叶片扇形，长4-8cm，宽5-10cm，先端中间2浅裂，基部楔形，叶脉平行，叉形分歧；叶柄长2.5-7cm。花期4-5月，果期7-10月。9-10月间采收，晒干。 [植物分布] 全国大部分地区有产，主产广西、四川、河南、山东、湖北、辽宁、江苏等地。 [产品性状] 银杏叶提取物Ginkgo biloba P.E为浅黄棕色可流动性粉末，有本品固有的香气，味苦。 [产品含量] 按干燥品计，银杏总黄酮含量≥24.0%。 1.2银杏叶提取物的功效[3] [药理作用] 银杏叶目前仍被中国医药用于治疗记忆丢失，胃部疼痛，痢疾，高血压、精神紧张和呼吸道问题如哮喘，支气管炎和循环不良及其引起的焦虑。银杏的活性成分是萜烯部分，其中包括银杏内酯和白果内酯。这些银杏黄酮－糖甙成分具有强大的抗氧化与自由基能力。

银杏叶的药理

研究发现银杏叶可治“经济舱综合症” 英国纽卡斯尔大学药用植特研究中心的化学病理博士戴维-曼特勒近日表示，中国的一种传统药用植物银杏树叶可以有助于减少被称为“经济舱综合症”的致命性血栓疾病的发病率，这种疾病经常侵扰长时间乘飞机出行的旅客，尤其是旅客长时间坐在拥挤的经济舱的情况下，这种疾病的发病率更高。 这位资深研究人员称，银杏树叶中含有的一种成份可以改善人体的血液循环，从而降低长时间乘飞机出行的旅客患上“经济舱综合症”、又名深度静脉血栓(DVT)这一疾病。就在上个月，一名28岁的英国女乘客在刚刚坐了20个小时飞机后走出机场不久就瘫软在地，最终抢救无效死亡，病因就是DVT。 研究人员表示，这种疾病与身体长时间不活动有密切的关系，如果患者再坐在拥挤的经济舱里就会加重病情。由于血液循环受阻而导致的血液粘稠症状有可能使静脉血管内出现血栓，这种情况最容易在大腿部位出现。血栓会继续扩大至心脏或肺部，从而引发突然死亡。此前有医生指出，如果病人能够及时服用阿斯匹林药片可以减缓病情，因为这种药剂能起到稀释血液的作用。但是，曼特勒博士表示，阿斯匹林也会产生副作用，包括容易引起流产、胃部出血以及胃溃疡等。此外，12岁以下的儿童最好不要服用阿斯匹林，因为其容易引发脑和肝疾病。 曼特勒博士指出，银杏树叶却是一种“极具创意的”治疗药物，与阿斯匹林一样，它有助于血液的稀释，而且其近几千年来一直作为一种传统的中国药物成份，几乎没有任何副作用，主要医药用途就是治疗血栓、血管曲张以及血液循环不畅等疾病。因此，将银杏树叶应用于治疗DVT应该是一个明智的选择。 转载自https://www.wendangku.net/doc/e713731321.html, 2000/11/06 银杏叶黄酮(Ginkgo Leaf Flavonoid,GF)，其分子中含有还原性羟基(-OH)功能基团、可直接发 挥抗氧化作用。黄酮类可直接捕捉和清除超氧阴离子自由基等自由基和过氧化氢，通过对其 起一种氢原子供体的作用而阻断和终止自由基连锁反应链，而阻止和抑制氧自由基反应和脂 质过氧化反应病理性加剧，抑制LPO及其代谢产物MDA和共轭二烯等毒副物质的生成。 同时，黄酮类还参与调节和提高体内抗氧化酶的活性。 实验结果提示，GF具有较强的抗氧化损伤作用，有益于心绞痛的预防和治疗。 小鼠肝细胞接受不同剂量的紫外线照射后，线粒体的结构和功能受到不同程度 的损伤，而且具有明显的剂量效应，这种损伤主要表现在脂质过氧化程度增大以 及由此导致的线粒体膜流动性下降和细胞色素C氧化酶(CCO)活力的降低。从银 杏叶中提取的槲皮素黄酮苷类可以显著抑制线粒体的这种变化，从而保护紫外线 引起的线粒体的结构和功能的损伤。

固相萃取-高效液相色谱串联质谱法

固相萃取-高效液相色谱串联质谱法 测定原料奶中5种环境雌激素残留量的研究 李雪1,2，牟光庆1，陈历俊1,2,*，姜铁民2 （1.大连工业大学食品学院，辽宁大连116034； 2.北京三元食品股份有限公司，北京100076） 摘要：建立固相萃取-高效液相色谱串联质谱法测定原料乳中环境雌激素（雌酮、雌二醇、雌三醇、己烯雌酚、双酚A）的方法。原料乳用NH2-SPE固相萃取小柱进行富集，旋转蒸发浓缩后，采用高效液相色谱串联质谱法测定。实验结果表明：各待测物在0.01 ~0.5μg/mL 范围内具有良好的线性关系，相关系数均大于0.9978，加标回收率为68.5%~105.6%，RSD 为2.56%~7.59%，最低检出限为0.22 ~0.56μg/L（S/N=3）。本方法操作简便，快速灵敏，适合于牛奶中痕量环境雌激素的残留分析检测。 关键词：高效液相色谱串联质谱，固相萃取，环境雌激素，原料奶，残留检测Research of the determination of 5 kinds of environmental estrogens residues in raw milk by solid phase extraction-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry LI Xue1,2,MU Guang-qing1,CHEN Li-jun1,2,*,JIANG Tie-min2 （1.College of Food Science and Technology,Dalian Polytechnic University , Dalian 116034,China; 2.Beijing Sanyuan Foods Co., Ltd, Beijing 100076,China） Abstract: A solid phase extraction-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry method for simultaneous determination of environmental estrogens including estrone,estradiol,estriol,diethylstilbestrol and bisphenol A in raw milk was established. 5 kinds of environmental estrogens were extracted from the raw milk sample by a NH2-SPE column, and concentrated with a rotary evaporator. The extract was analyzed by high performance liquid chromatography tandem mass spectrometric.Results showed that:a good linear range from 0.01~0.5μg/mL with correlation coefficient of above 0.9978 was obtained.The extraction recovery were 68.5%~105.6% and the relative standard deviation were 2.56%~7.59%.The limit of detection was 0.22~0.56μg/L(S/N=3).The descri bed method was simple,sensitive and accurate. *通讯作者：陈历俊，chlj@https://www.wendangku.net/doc/e713731321.html,。 作者简介：李雪(1986-)，女，硕士研究生，研究方向：食品安全。 基金资助：奶牛产业技术体系北京市创新团队建设项目；国家科技部“863”计划(2011AA100903) 。