酶学部分的练习题
第一部分填空
1、全酶由和组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中决定酶的专一性和高效率，起传递电子、原子或化学基团的作用。
2、酶是生物体活细胞产生的，具有催化活性的。
3、竞争性抑制剂使酶对底物的表观 Km _______________ ，而 Vmax_
____________ 。
4、酶是产生的，具有催化活性的。
5、如果一个酶对A、B、C三种底物的米氏常数分别为K
m a、K
m
b和K
m
c，且K
m
a﹥
K
m b﹥K
m
c，则此酶的最适底物是_________，与酶亲和力最小的底物是_________。
6、___________抑制剂不改变酶促反应V
max
， ___________抑制剂不改变酶促反
应K
m
。
7、全酶由__________和__________组成。
8、如果一个酶对A、B、C三种底物的米氏常数分别为K
m a、K
m
b和K
m
c，且K
m
a﹥
K
m b﹥K
m
c，则此酶的最适底物是_________，与酶亲和力最小的底物是_________。
9、辅酶和辅基的区别在于前者与酶蛋白结合，后者与酶蛋白结合。
10、当酶促反应速度为最大反应速度的80%时，底物浓度是Km值的倍。
11、酶活力是指，一般用
表示。
12、酶反应的温度系数Q10一般为。
13、在适当浓度的β-巯基乙醇和8M脲溶液中，RNase（牛）丧失原有活性。这主要是因为RNA酶的被破坏造成的。其中β-巯基乙醇可使RNA 酶分子中的键破坏。而8M脲可使键破坏。当用透析方法去除β-巯基乙醇和脲的情况下，RNA酶又恢复原有催化功能，这种现象称为。
14、T.Cech从自我剪切的RNA中发现了具有催化活性的，称之为这是对酶概念的重要发展。
15、酶的活性中心包括_________和_________两个功能部位。
16、1981年以前发现的酶化学本质是_________，均由活_________产生。
17、酶催化的机理是降低反应的_________，不改变反应的____________。
18、与化学催化剂相比，酶催化作用具有______、______、_____ 等特点。
19、酶的活性中心包括______和 _____两个功能部位，其中_______直接与底物结合，决定酶的专一性_______是发生化学变化的部位，决定催化反应的性质。
20、改变酶结构的快速调节，主要包括__________与__________。
21、酶的特异性包括． _____________ 特异性， ____________ 特异性与立体异构特异性。
22、Km 值等于酶促反应速度为最大速度 _______________ 时的 ___________ 浓度。
23、酶促反应速度（ν）是最大速度（ Vmax ）的 80 ％时，底物浓度（ [S] ）是 Km 的 _____倍；当ν达到 Vmax 的 90 ％时， [S] 是 Km 的
_____________倍。
24、___________抑制剂不改变酶促反应Vmax，___________抑制剂不改变酶促反应Km。
25、丙二酸和戊二酸都是琥珀酸脱氢酶的抑制剂。
第二部分单选题
1、米氏常数Km是一个用来度量( )
A、酶和底物亲和力大小的常数
B、酶促反应速度大小的常数
C、酶被底物饱和程度的常数
D、酶的稳定性的常数
2、根据米氏方程，有关[s]与Km之间关系的说法不正确的是( )
A、当[s]< < Km时，V与[s]成正比；
B、当[s]＝Km时，V＝1/2Vmax
C、当[s] > >Km时，反应速度与底物浓度无关。
D、当[s]=2/3Km时，V=25％Vmax
3、某酶今有4种底物(S)，其Km值如下，该酶的最适底物为（）
A、S1：Km＝5×10-5M
B、S2：Km＝1×10-5M
C、S3：Km＝10×10-5M
D、S4：Km＝0.1×10-5M
4、酶的非竞争性抑制剂对酶促反应的影响是：（）
A、Vmax不变，Km增大
B、Vmax不变，Km减小
C、Vmax增大，Km不变
D、Vmax减小，Km不变
5、目前公认的酶与底物结合的学说是（）
A、活性中心说
B、诱导契合学说
C、锁匙学说
D、中间产物学说
6、根据米氏方程，有关[s]与Km之间关系的说法不正确的是( )
A、当[s]< < Km时，V与[s]成正比；
B、当[s]＝Km时，V＝1/2Vmax
C、当[s] > >Km时，反应速度与底物浓度无关。
D、当[s]=2/3Km时，V=25％Vmax
7、酶能加速化学反应的进行是由于哪一种效应:( )
A、向反应体系提供能量
B、降低反应的自由能
C、降低反应的活化能
D、降低底物的能量水平
8、非竞争性抑制作用引起酶促反应动力学的变化是（）：
A、Vmax减小，Km减小
B、Vmax增加，Km增加
C、Vmax变小，Km不变
D、Vmax不变，Km增大
9、增加底物浓度可解除下列哪种抑制剂或抑制作用对酶活性的影响？( )
A、非竞争性抑制剂
B、竞争性抑制剂
C、可逆的抑制作用
D、反竞争性抑制剂
10、酶与一般催化剂的主要区别是（）。
A、当作用物浓度很低时，增加酶的浓度则酶促反应速度升高
B、只促进热力学上允许进行的化学反应
C、在化学反应前后，本身不发生变化
D、能加速化学反应速度，不能改变平衡点
E、专一性强，催化效率极高
11、下列关于酶活性中心的叙述，正确的是（）。
A、所有的酶都有活性中心
B、所有酶的活性中心都含有辅酶
C、酶的必需基团都位于活性中心之内
D、所有酶的活性中心都含有金属离子
E、所有抑制剂全都作用于酶的活性中心
12、下列关于酶活性中心的叙述哪一个是不正确的? （）
A、是酶分子中直接与酶的催化作用有关的部位
B、对简单酶类来说，活性中心一般有少数几个氨基酸组成
C、必需基团一定在活性中心内
D、活性中心一般只占酶分子很小一部分结构
13、非竞争性抑制作用引起酶促反应动力学的变化是（）：
A、Vmax减小，Km减小
B、Vmax增加，Km增加
C、Vmax变小，Km不变
D、Vmax不变，Km增大
14、增加底物浓度可解除下列哪种抑制剂或抑制作用对酶活性的影响？（）
A、非竞争性抑制剂
B、竞争性抑制剂
C、可逆的抑制作用
D、反竞争性抑制剂
15、增加底物浓度可解除下列哪种抑制剂或抑制作用对酶活性的影响？（）
A、非竞争性抑制剂
B、竞争性抑制剂
C、可逆的抑制作用
D、反竞争性抑制剂
16、下列不属于酶催化高效率的因素为：（）
A、对环境变化敏感
B、共价催化
C、靠近及定向
D、微环境影响
17、下列那一项符合“诱导契合”学说：（）
A、酶与底物的关系如锁钥关系
B、酶活性中心有可变性，在底物的影响下其空间构象发生一定的改变，才能与底物进行反应。
C、底物的结构朝着适应活性中心方向改变而酶的构象不发生改变。
D、底物类似物不能诱导酶分子构象的改变
18、关于米氏常数Km的说法，哪个是正确的？（）
A、饱和底物浓度时的速度
B、在一定酶浓度下，最大速度的一半
C、饱和底物浓度的一半
D、速度达最大速度一半时的底物浓度
19、胰蛋白酶原经肠激酶作用后切下六肽，使其形成有活性的酶，这一步骤是: （）
A、诱导契合
B、酶原激活
C、反馈调节
D、同促效应
20、下列哪一项不能加速酶促反应速度：（）
A、底物浓集在酶活性中心
B、使底物的化学键有适当方向
C、升高反应的活化能
D、提供酸性或碱性侧链基团作为质子供体或受体
21、下面关于共价修饰调节酶的说法哪个是错误的？（）
A、共价修饰调节酶以活性和无活性两种形式存在
B、两种形式之间由酶催化共价修饰反应相互转化
C、经常受激素调节、伴有级联放大效应
D、是高等生物独有的调节形式
22、哪一种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度？（）
A 不可逆抑制作用
B 竞争性可逆抑制作用
C 非竞争性可逆抑制作用
D 反竞争性可逆抑制作用
23、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响属于（）
A 反馈抑制
B 底物抑制
C 竞争性可逆抑制
D 非竞争性可逆抑制
24、测定酶活性时，通常以底物浓度变化小于多少时测得的速度为反应的初速度？（）
A 0.1%
B 1%
C 2%
D 5%
25、酶催化作用对能量的影响在于( )：
A．增加产物能量水平 B．降低活化能 C．降低反应物能量水平D．降低反应的自由能 E．增加活化能
26、酶的竞争性可逆抑制剂可以使( )：
A．V
max 减小，K
m
减小 B．V
max
增加，K
m
增加
C．V
max 不变，K
m
增加 D．V
max
不变，K
m
减小
E．V
max 减小，K
m
增加
27、下列哪一项不是辅酶的功能（）：
A、传递氢
B、转移基团
C、决定酶的专一性
D、某些物质分解代谢时的载体
28、酶的比活力是指（）：
A、任何纯酶的活力与其粗酶的活力比
B、每毫克蛋白的酶活力单位数
C、每毫升反应混合液的活力单位
D、以某种酶的活力作为1来表示其他酶的相对活力
29、酶的活性中心是指（）。
A、酶分子上含有必需基团的肽段
B、酶分子与底物结合的部位
C、酶分子发挥催化作用的关键性结构区
D、酶分子与辅酶结合的部位
30、酶催化作用对能量的影响在于（）。
A、降低活化能
B、增加活化能
C、增加产物能量水平
D、上述3项都错
31、竞争性抑制剂作用特点是。（）
A、与酶的底物竞争激活剂
B、与酶的底物竞争酶的活性中心
C、与酶的底物竞争酶的辅基
D、与酶的底物竞争酶的变构剂
32、别构酶通常是（）。
A、由两种以上酶缔合而成
B、单体酶
C、由两个或两个以上亚基缔合而成
D、上述三项都不对
33、酶蛋白变性后其活性丧失，这是因为（）
A、酶蛋白被完全降解为氨基酸
B、酶蛋白的一级结构受破坏
C、酶蛋白的空间结构受到破坏
D、酶蛋白不再溶于水
E、失去了激活剂
34、酶促反应中，决定反应专一性的是（）
A、酶蛋白
B、辅酶或辅基
C、底物
D、金属离子
E、变构剂
35、酶分子中能使底物转变成产物的基团是（）
A、调节基团
B、结合基团
C、催化基团
D、亲水基团
E、酸性基团
36、全酶的叙述正确的是（）
A、全酶是酶与底物的复合物
B、酶与抑制剂的复合物
C、酶与辅助因
子的复合物 D、酶的无活性前体 E、酶与变构剂的复合物
37、影响酶促反应速度的因素不包括（）
A、底物浓度
B、酶的浓度
C、反应环境的pH
D、反应温度
E、
酶原的浓度
38、酶原激活的生理意义是（）
A、加速代谢
B、恢复酶活性
C、生物自我保护的方式
D、保护酶的方
式
39、酶的特异性是指（）
A、酶与辅酶特异的结合
B、酶对其所催化的底物有特异的选
择性 C、酶在细胞中的定位是特异性的 D、酶催化反应的机制各不相同 E、在酶的分类中各属不同的类别
40、酶原所以没有活性是因为（）
A、酶蛋白肽链合成不完全
B、活性中心未形成或未暴露
C、酶原是普通的蛋白质
D、缺乏辅酶或辅基
E、是已经变性的蛋白质
41、有关PH对酶促反应速度的影响错误的是（）
A、pH改变可影响酶的解离状态
B、pH改变可影响底物的解离状态
C、pH改变可影响酶与底物的结合
D、酶促反应速度最高时的pH为最适
pH E、最适pH是酶的特征性常数
42、Km值是指（）
A、是达到最大反应速度一半时的底物浓度
B、与底物的浓度无关
C、在
一般情况下是酶-底物符合物的解离常数 D、同一酶的各种同工酶具有相同的Km值 E、是达到最大速度时所必需的底物浓度的一半
43、关于酶的叙述哪项是正确的（）？
A、所有的酶都含有辅基或辅酶
B、只能在体内起催化作用
C、大多数酶的化学本质是蛋白质
D、能改变化学反应的平衡点加速反应的进行
E、都具有立体异构专一性（特异性）
44、酶的活性中心是指( )
A、酶分子上含有必需基团的肽段
B、酶分子与底物结合的部位
C、酶分子与辅酶结合的部位
D、酶分子发挥催化作用的关键性结构区
E、酶分子有丝氨酸残基、二硫键存在的区域
45、Km值的概念是( )
A、与酶对底物的亲和力无关
B、是达到Vm所必须的底物浓度
C、同一种酶的各种同工酶的Km值相同
D、是达到1/2Vm的底物浓竞争性
抑制剂对酶促反应速度影响是（）
A、Km↑，Vmax不变
B、Km↓，Vmax↓
C、Km不变，Vmax↓
D、Km↓，Vrnax↑
度 E、与底物的性质无关
46、关于Km值的意义，不正确的是（）
A、Km是酶的特性常数
B、Km值与酶的结构有关
C、Km值与酶所催化的底物有关
D、Km值等于反应速度为最大速度一半时的酶的浓度
47、竞争性抑制剂对酶促反应速度影响是（）
A、Km↑，Vmax不变
B、Km↓，Vmax↓
C、Km不变，Vmax↓
D、Km↓，Vrnax↑
48、米氏常数Km是一个用来度量( )
A、酶和底物亲和力大小的常数
B、酶促反应速度大小的常数
C、酶对底物饱和程度的常数
D、酶的稳定性常数
49、酶促反应中决定酶专一性的部分是( )
A、酶蛋白
B、底物
C、辅酶或辅基
D、催化基团
50、具有生物催化剂特征的核酶(ribozyme)其化学本质是（）
A、蛋白质
B、RNA
C、DNA
D、糖蛋白
51、酶促反应速度为其最大反应速度的80％时，Km等于( )
A、[S]
B、1/2[S]
C、1/4[S]
D、0.4[S]
52、下列关于辅酶和辅基功能的叙述，哪一项是不正确的？（）
A、起转移电子的作用
B、决定酶所催化的反应类型
C、起转移氢的作用
D、可转移特定的化学基团
53、乳酸脱氢酶(LDH)是一个由两种不同的多肽链组成的四聚体。假定这些链随机结合成酶，这种酶有多少种同工酶（）?
A．两种 B.三种 C.四种 D.五种 E.六种
54、L-氨基酸的氧化酶只能催化L-氨基酸氧化，这种专一性属于（）
A、几何异构专一性
B、旋光异构专一性
C、结构专一性
D、键专一性
E、绝对专一性
第三部分判断（对的打“√”，错的打“×”）
1、米氏常数（Km）是与反应系统的酶浓度无关的一个常数。（）
2、酶的最适温度是酶的特征性常数。（）
3、Km等于v=1/2 Vmax时的底物浓度，是酶的特征性常数。（）
4、酶有几种底物时，其Km值也不相同。（）
5、某些调节酶的V---S的S形曲线表明，酶与少量底物的结合增加了酶对后续底物的亲和力。（）
6、酶可以促成化学反应向正反应方向转移。（）
7、酶活性中心一般由在一级结构中相邻的若干氨基酸残基组成。（）
8、Km是酶的特征性常数，只与酶的性质有关，与酶的底物无关。
9、辅基与辅酶的区别在于它们与酶蛋白结合的牢固程度不同，并无严格的界限( )
10、别构酶都是寡聚酶( )
11、当底物处于饱和水平时，酶促反应的速度与酶浓度成正比（）。
12、酶有几种底物时，其Km值也不相同（）。
13、所有酶只可以促成化学反应向正反应方向转移。( )
14、酶可以改变化学反应的平衡常数。( )
15、如果没有维生素的参与，所有酶都没有催化活性。( )
16、酶只能改变化学反应的活化能而不能改变化学反应的平衡常数。( )
17、别构酶除有与底物结合的活性部位外，还有与别构效应物结合的别构中心。( )
18、酶的最适 pH 值是一个常数，每一种酶只有一个确定的最适 pH 值。（）
19、蛋白质和酶原的激活过程说明蛋白质的一级结构变化与蛋白质的功能无关。（）
20、辅酶与酶蛋白的结合不紧密，可以用透析的方法除去。（）
21、酶之所以有高的催化效率是因为它可提高反应活化能。( )
22、酶活性中心一般由在一级结构中相邻的若干氨基酸残基组成。（）
23、变构剂与酶的催化部位结合后使酶的构象改变，从而改变酶的活性，称为酶的变构作用。（）
24、酶原激活过程实际就是酶活性中心形成或暴露的过程。（）
25、酶促反应的速度随温度的升高而增加。（）
26、在反竞争性抑制物存在的条件下，酶反应动力学的特点是Vmax↓，Km不变。（）
27、酶辅基一般不能用透析或超滤的方法与酶蛋白分离。（）
28、一个酶作用于多种底物时，其最适底物的Km值应该是最小。（）
第四部分名词解释
1、同工酶
2、酶原
3、米氏常数
4、竞争性抑制作用
5、酶的活性中心
6、K
m
7、别构效应
8、酶的抑制剂
9、酶的专一性
10、核酶
第五部分问答题
1、酶的活性中心有何特点？
2、简述酶具有高效催化的因素。
3、酶为何有高效的催化效率，其机制如何？
4、举例说明竞争性抑制的特点和实际意义。
5、很多酶的活性中心均有组氨酸残基参与，请解释原因。
6、酶作为生物催化剂与一般化学催化剂比较有何共性及其个性？
7、简述竞争性抑制剂与非竞争性抑制剂的区别
8、简述酶作为生物催化剂与一般化学催化剂的共性及其个性
9、举例说明酶的三种特异性。
10、影响酶活性的主要因素。
第六部分论述题
1、论述Km值和Vmax的意义。
2、论述影响酶促反应速度的主要因素及机理。
3、可逆性抑制作用有哪些类型？试比较它们的特点。
4、试比较不同酶的专一性并解析之。
5、在很多酶的活性中心均有His残基参与，为什么？请解释。
酶工程 试题及答案
共三套 《酶工程》试题一： 一、是非题（每题1分，共10分） 1、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。（） 2、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。（） 3、酶活力是指在一定条件下酶所催化的反应速度，反应速度越大，意味着酶活力越高。（） 4、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。（） 5、培养基中的碳源，其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。（） 6、膜分离过程中，膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过，而把大于其孔径的颗粒截留。（） 7、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对，在酶的亲和层析分离中，可把分子对中的任何一方作为固定相。（） 8、角叉菜胶也是一种凝胶，在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。（） 9、α－淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化，但不称为糊精化酶。（） 10、酶法产生饴糖使用α－淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。（） 二、填空题（每空1分，共28分） 1、日本称为“酵素”的东西，中文称为__________,英文则为__________,是库尼（Kuhne）于1878年首先使用的。其实它存在于生物体的__________与__________。 2、1926年，萨姆纳（Sumner）首先制得__________酶结晶，并指出__________是蛋白质。他因这一杰出贡献，获1947年度诺贝尔化学奖。
3、目前我国广泛使用的高产糖比酶优良菌株菌号为__________,高产液化酶优良菌株菌号为___________。在微生物分类上，前者属于__________菌，后者属于__________菌。 4、1960年，查柯柏（Jacob）和莫洛德（Monod）提出了操纵子学说，认为DNA分子中，与酶生物合成有关的基因有四种，即操纵基因、调节基因、__________基因和__________基因。 5、1961年，国际酶委会规定的酶活力单位为：在特定的条件下（25oC，PH及底物浓度为最适宜）__________,催化__________的底物转化为产物的__________为一个国际单位，即1IU。 6、酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能，即提高酶的__________、减少__________，增加__________。 7、酶的生产方法有___________，___________和____________。 8、借助__________使__________发生交联作用，制成网状结构的固定化酶的方法称为交联法。 9、酶的分离纯化方法中，根据目的酶与杂质分子大小差别有__________法，__________法和__________法三种。 10、由于各种分子形成结晶条件的不同，也由于变性的蛋白质和酶不能形成结晶，因此酶结晶既是__________，也是__________。 三、名词术语的解释与区别（每组6分，共30分） 1、酶生物合成中的转录与翻译 2、诱导与阻遏 3、酶回收率与酶纯化比（纯度提高比） 4、酶的变性与酶的失活
最新生物化学测试题及答案——诊断酶学.docx
生物化学测试题及答案——诊断酶学 一、 A 型题 1. 转氨酶的作用需下列哪一种维生素（） A.烟酸 B.泛酸 C.硫胺素 D.磷酸吡哆醛 E.四氢叶酸 2. 酶促反应进程曲线通常可用于确定（） A. 酶反应线性范围 B. 适宜的 pH C. 适宜的酶量范围 D. 反应线性的时间范围 E. 底物的浓度 3. SI制中酶活性单位为（ ） A.U/L B.Katal C.g/L D.ml/L E.pmol 4. 下列哪一种辅因子的生成可通过测定340nm处吸光度的降低数来表示（） A.FADH2 B.NAD+ C.NADH+ D.FMN E.NADPH 5. 人体含 ALT 最丰富的组织是（） A.肝细胞 B.心肌 C.骨骼肌 D.红细胞 E.肾脏 6. 用 ACP诊断前列腺疾病时，为防止红细胞干扰，应加入何种抑制剂（） A.苯丙氨酸 B.L- 酒石酸
C.尿酸 D.EDTA E.L- 半胱氨酸 7. 为保证酶动力学分析，要求底物浓度必须是（） A.>Km值 10 倍以上 B. 与 Km值相同 C. 等于 1/2Km 值 D.<1/2Km 值 E.<1/10Km 值 8.LD 测定的全部方法中，所必需的物质是（） A.丙酮酸 B.2 ， 4- 二硝基苯肼 C.乳酸 D.NAD+或 NADH E.氢氧化钠 9. 急性心肌梗死时，最先恢复正常的酶是（） A.ALT B.LD C.CK D.AST E.ALP 10.血清肌酸激酶比色法，即利用磷酸肌酸 +ADP→肌酸 +ATP反应测定肌酸生成量，在试剂中加入半胱氨酸，其目的是（） A.激活剂 B.调整缓冲液的 pH C.维持缓冲液的 pH 稳定 D.提供 -SH E.提供高能磷酸基团 二、 B 型题 A.AST B.LD C.α - HBD D.CK E.ACP 1.急性心肌梗死时，最先恢复正常的血清酶是（） 2.对前列腺癌诊断价值最大的血清酶是（） A.LD2>LD1>LD3>LD4>LD5 B.LD5>LD1>LD2>LD3>LD4
食品酶学论文
凝乳酶在干酪加工中的应用 摘要：凝乳酶对干酪的品质具有重要影响。本文介绍了凝乳酶的种类，以及其在干酪生产中的作用和机理，论述了凝乳酶对干酪品质影响研究进展，并对其研究前景进行了展望。 关键词：凝乳酶；干酪；品质 干酪是一种营养价值较高的食品，它含有丰富的营养成分，蛋白质和脂肪的含量相当于原料乳含量的l0倍左右。研究表明，多吃干酪可促进儿童和青少年生长发育，抗龋齿，防止妇女和老人骨质疏松，保护视力，养颜护肤，并有利于维持人体肠道内正常菌群的平衡和稳定，增进消化功能，防止腹泻和便秘。干酪加工过程受很多因素的影响，其中凝乳酶对干酪的品质具有重要影响。 1 凝乳酶的种类 传统干酪生产中将来源于犊牛皱胃(第四胃)的皱胃酶(Rennin)用作凝乳酶。但由于皱胃酶的来源及成本等原因，其代用酶也被应用于干酪的实际生产当中。目前凝乳酶的种类包括动物性凝乳酶、植物性凝乳酶、微生物性凝乳酶和利用基因工程技术生产的凝乳酶。动物性凝乳酶主要是胃蛋白酶，其性质在很多方面与皱胃酶相似。但由于胃蛋白酶的蛋白分解力强，且以其制作的干酪成品略带苦味，如果单独使用，会使产品产生一定的缺陷。植物性凝乳酶包括无花果蛋白分解酶、木瓜蛋白分解酶、风梨酶等。微生物凝乳酶主要来源于霉菌和细菌。在生产中得到应用的主要是霉菌性凝乳酶，其主要代表是从微小毛霉菌(Mucorpusillus)中分离出的凝乳酶。微生物来源的凝乳酶生产干酪时的缺陷主要是蛋白分解力比皱胃酶高，干酪的产率较皱胃酶生产的干酪低，成熟后产生苦味。美国和日本等国利用遗传工程技术，将控制犊牛皱胃酶合成的DNA分离出来，导入微生物细胞内，利用微生物来合成皱胃酶获得成功，并得到美国食品医药局(FDA)的认定和批准(1990)。美国Pfizer公司和Gist Brocades公司生产的生物合成皱胃酶制剂在美国、瑞士、英国、澳大利亚等国广泛应用。 2 凝乳酶的作用机理 干酪加工中添加凝乳酶的主要目的是促使牛乳凝结，为排除乳清提供条件。凝乳酶是干酪制造过程中起凝乳作用的关键性酶，同时凝乳酶对干酪的质构形成
哈工大酶工程试题答案
年级2001 专业生物技术 一名词解释（每题3分，共计30分） 1.酶工程 2.自杀性底物 3.别构酶 4.诱导酶 5.Mol催化活性 6.离子交换层析 7.固定化酶 8.修饰酶 9.非水酶学 10.模拟酶 二填空题(每空1分,共计30分) 1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是，二是 。 2.求Km最常用的方法是。 3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是，另一类是 。 4.可逆抑制作用可分为，，， 。 5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是，二是能够利用廉价原料，发酵周期，产酶量，三是菌种不易，四是最好选用能产生酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。 6.酶活力的测定方法可用反应法和反应法。 7.酶制剂有四种类型即酶制剂，酶制剂，酶制剂和 酶制剂。 8.通常酶的固定化方法有法，法，法， 法。 9.酶分子的体外改造包括酶的修饰和修饰。 10.模拟酶的两种类型是酶和酶。 11.抗体酶的制备方法有法和法。 三问答题(每题10分,共计40分) 1.固定化酶和游离酶相比，有何优缺点 2.写出三种分离纯化酶蛋白的方法，并简述其原理。 3.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料 4.下面是某人对酶测定的一些数据，据此求出该酶的最大反应速度和米氏常数。
10-6 10-6 10-5 10-5 10-5 10-4 10-4 10-2 酶工程试题（B） 一名词解释 1.抗体酶 2.酶反应器 3.模拟酶 4.产物抑制 5.稳定pH 6.产酶动力学 7.凝胶过滤 8.固定化酶 9.非水酶学 10.液体发酵法 二填空题(每空1分,共计30分) 值增加，其抑制剂属于抑制剂，Km不变，其抑制剂属于抑制剂，Km 减小，其抑制剂属于抑制剂。 2.菌种培养一般采用的方法有培养法和培养法。 3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括，，，， 和等。 4.打破酶合成调节机制限制的方有，，。 5.酶生物合成的模式分是，，， 。 6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有法，法和 法 7. 通常酶的固定化方法有法，法，法， 法。 8. 酶分子的体外改造包括酶的修饰和修饰。 9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的，从而降低了底物分子的，而抗体结合的抗原只是一个态分子，所以没有催化能力 三问答题(每题10分,共计40分) 1.在生产实践中，对产酶菌有何要求 2.对酶进行化学修饰时，应考虑哪些因素 3.列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团 4.某酶的初提取液经过一次纯化后，经测定得到下列数据，试计算比活力，回收率及纯化 倍数。
酶学实验
实验一、木瓜蛋白酶活性测定实验(明胶法) (一)实验原理 木瓜蛋白酶从明胶中分解出氨基酸和肽，其氨基型氮可用甲醛复分解，产生氢离子，浓度可用氢氧化钠溶液滴定。 (二)定义 一个木瓜蛋白酶单位相当于在规定条件下分解1ug分子量的肽键时所需的酶量。 (三)试剂 1. 底物明胶 2. 柠檬酸盐缓冲液(pH5.0) 取70.000g一水柠檬酸溶于720mL 1mol/L氢氧化钠溶液中。用1mol/L氢氧化钠溶液将pH调至5.0，用蒸馏水定容至1000mL。 3. 37%甲醛溶液 4. 酚酞溶液取0.5g酚酞溶于95%的乙醇中，并定容至50mL。 5. 0.1mol/L氢氧化钠溶液取4.0克氢氧化钠置于洁净干燥的烧杯中，加纯水稀释、搅拌溶解，将溶液移入1000ml洁净容量瓶中定容至刻度。 6. 酶溶液用蒸馏水溶解酶，每毫升配制溶液应含有40U左右。酶的称量一定得按以下原则确定：用于主值和空白值试验的耗量之差应在1.8～2.2mL这一范围内。此外需用一个合适的称量重复测定几次。 (四)操作步骤 称取500mg明胶放入一只100mL锥形烧瓶内，加8mL蒸馏水，加热后明胶溶解。待明胶完全溶解加2.0mL柠檬酸盐缓冲液，置于水浴中冷却至40℃。加5.00mL已预热至40℃的酶溶液，于40℃下保温60min，加10.0mL甲醛溶液终止反应。加0.5mL酚酞溶液后用0.1mol/L氢氧化钠溶液滴定，直至第一次出现明显的粉红色为终点。 用同样方法测定空白值，只是这里在添加酶溶液之前先添加甲醛溶液。在空白值测定方面耗去大约5mL 0.1mol/L氢氧化钠溶液。
(五)计算 用以下公式计算酶活性： 酶活力(U/mg)=(H-B)/E W×100 式中：H-用于主值的滴定耗量(mL)； B-用于空白值的滴定耗量(mL)； 100-相当于1mL0.1mol/L氢氧化钠溶液； E W-每5.0mL所用酶液中含有酶的重量(mg)。 举例： 测定一个木瓜蛋白酶样品。从样品中称取68.2mg，定容100mL。5 mL此溶液中含有3.41mg样品。8.52mL滴定耗于空白值试验，10.57mL耗于主值试验。则酶活性为：(10.57-8.52)×100/3.41=60.1 U/mg
生物化学检验中的诊断酶学课件ptConvertor
诊断酶学 目的要求：熟悉酶在体内的病生变化机制； 掌握酶促反应动力学的基本原理及酶活性测定方法; 掌握肝胆疾病的酶学指标应用与评价； 第一节概述 临床酶学：指临床实验室应用酶作为多种疾病的诊断、预防、治疗及预后评估的学科。包括基础酶学、诊断酶学、治疗酶学 基础酶学：注重酶的动力学研究； 诊断酶学：应用酶、酶试剂对疾病进行诊断； 治疗酶学：利用酶制剂进行疾病治疗； 一、复习酶的概念、结构与功能 1.基本概念酶是活细胞的产物，是生物催化剂； 生物催化剂的特性：（1）高度不稳定性；（2）催化效率极高； （3）高度特异性；（4）催化作用的可调节性； 2.结构与功能 （1）酶的化学组成 单纯酶 结合酶酶蛋白 + 辅助因子＝全酶 辅基结合紧密 辅酶结合疏松 （2）酶的活性中心 指酶分子表面的能与底物结合并起催化反应的特定区域，该区域由酶的必需基团所组成。 酶的活性中心被占据或构象发生改变均可导致酶的催化效率下降或消失。 二、血浆（清）酶分类 1.血浆特异酶在血浆中发挥作用，其降低表示合成该酶的组织受损。 2.非血浆特异酶在血浆中含量较低且无任何功能 （1）外分泌酶来源于外分泌腺，其浓度与分泌的腺体功能有关 （2）代谢酶存在于各种组织细胞，参与物质代谢； 血清中大量出现时提示细胞受损； 代谢酶分为：一般代谢酶器官特异性酶 四、血清酶变化的病生机制 过多 细胞内酶生成过少 变异 K2 K1 K3 组织间隙血管内 K4 K8 抑制抑制 酶激活酶激活 变化变化 K7 K5 K6 图示说明：不同组织或器官中的酶进入血中的途径不同；
不同的酶其清除方式不同； 控制血清酶水平的因素： 1.酶在细胞内的合成速度 2.酶从细胞释入血清的速度 取决于三个方面：细胞内外酶浓度差； 酶蛋白分子量的大小； 酶在细胞内的定位及存在形式； 3.酶在细胞外间隙的分布和运送 酶从胞内进入血液的途径： （1）直接进入血液 （2）部分直接入血，部分进入组织间隙 （3）经淋巴系统入血 4.酶从血中清除的速度 可用酶的半衰期表示 *血清酶从血清中消失的速率因人不同，因酶而异，随疾病过程的不同时间而变化。 5.其它 注意激活剂或抑制剂对酶活性的影响 五、其它影响血清酶的因素 1. 生理因素的影响性别、年龄、进食、运动、妊娠等 2.测定方法的影响方法的不同（速率法、终点法） 测定条件的不同 单位的差异 3.标本的影响 （1）最好用血清（2）溶血的影响 （3）尽快、及时分离（4）样品的存放 4.其它因素对酶活性测定的影响 （1）温度的影响（2）抑制剂的影响 （3）样品中酶浓度的影响（4）反应体系中其它物质的影响 其它酶和物质；工具酶的污染；非酶反应；容器的污染等。 第二节酶活性测定的基本知识 一、酶活性的概念酶活性即酶促反应速度（v）： 指在规定的条件下，单位时间（t）内底物（s）的减少量或产物（p）的增加量。 v ＝ - d[s] / dt v ＝ d[p] / dt 注意：强调单位时间的变化量 二、酶促反应进程
哈工大酶工程试题(A)答案
酶工程试题(A) 年级2001 专业生物技术 一名词解释（每题3分，共计30分） 1.酶工程 2.自杀性底物 3.别构酶 4.诱导酶 5.Mol催化活性 6.离子交换层析 7.固定化酶 8.修饰酶 9.非水酶学 10.模拟酶 二填空题(每空1分,共计30分) 1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是，二是 。 2.求Km最常用的方法是。 3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是，另一类是 。 4.可逆抑制作用可分为，，， 。 5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是，二是能够利用廉价原料，发酵周期，产酶量，三是菌种不易，四是最好选用能产生酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。 6.酶活力的测定方法可用反应法和反应法。 7.酶制剂有四种类型即酶制剂，酶制剂，酶制剂和 酶制剂。 8.通常酶的固定化方法有法，法，法， 法。 9.酶分子的体外改造包括酶的修饰和修饰。 10.模拟酶的两种类型是酶和酶。 11.抗体酶的制备方法有法和法。 三问答题(每题10分,共计40分) 1.固定化酶和游离酶相比，有何优缺点？ 2.写出三种分离纯化酶蛋白的方法，并简述其原理。 3.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料？ 4.
酶工程试题（B） 一名词解释 1.抗体酶 2.酶反应器 3.模拟酶 4.产物抑制 5.稳定pH 6.产酶动力学 7.凝胶过滤 8.固定化酶 9.非水酶学 10.液体发酵法 二填空题(每空1分,共计30分) 1.Km值增加，其抑制剂属于抑制剂，Km不变，其抑制剂属于抑制剂，Km减小，其抑制剂属于抑制剂。 2.菌种培养一般采用的方法有培养法和培养法。 3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括，，，， 和等。 4.打破酶合成调节机制限制的方有，，。 5.酶生物合成的模式分是，，， 。 6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有法，法和 法 7. 通常酶的固定化方法有法，法，法， 法。 8. 酶分子的体外改造包括酶的修饰和修饰。 9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的，从而降低了底物分子的，而抗体结合的抗原只是一个态分子，所以没有催化能力 三问答题(每题10分,共计40分) 1.在生产实践中，对产酶菌有何要求？ 2.对酶进行化学修饰时，应考虑哪些因素？ 3.列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团 4.某酶的初提取液经过一次纯化后，经测定得到下列数据，试计算比活力，回收率及纯化 倍数。 （A）答案及评分细则 一 1. 酶工程：又叫酶技术，是酶制剂的大规模生产和应用的技术。
临床化学之诊断酶学
诊断酶学 一、血清酶 （一）血清酶的分类 1.血浆特异酶：在血浆中发挥特定催化作用的酶。如胆碱酯酶、脂蛋白脂肪酶、铜氧化酶等。 大多数在肝内合成。 血浆特异酶活性的改变，除了反映血液功能外，还反映来源器官的功能。 2.非血浆特异酶：在血浆中浓度很低，且无功能。 （1）分泌酶：来源于外分泌腺的酶。如胰淀粉酶、胰脂肪酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶和前列腺酸性磷酸酶等。 血液中分泌酶以失活状态存在，不发生催化作用。 在血液中的浓度和其分泌腺体的功能活动和疾病有关，例如，急性胰腺炎时，血淀粉酶就会升高。 （2）代谢酶（细胞酶）：在细胞内发挥催化功能的酶。正常时这些酶存在于组织细胞中，血浆中酶活性很低。细胞内、外浓度差异悬殊。 当酶来源的组织细胞发生病变，细胞膜通透性增加或细胞坏死时，细胞内酶大量进入血浆，导致血浆酶活性显著增高。其下降的临床意义很少。 这一类酶较多，如转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶等，它们在肝病、心脏病时都可能出现变化。 （二）血清酶生理变异及其病理生理机制 1.血清酶生理变异 （1）性别：CK和GGT都是男性高于女性。 （2）年龄：碱性磷酸酶（与骨生长发育相关）。 （3）进食：酗酒可引起γ-GGT明显升高。 （4）运动：剧烈运动可引起血清中多种酶升高，如CK、LD、AST等。 （5）妊娠与分娩：妊娠时ALP升高，分娩时可能有CK、CK-BB、LD升高。 2.血清酶病理改变机制： （1）酶合成异常： 血浆特异酶大多数是在肝合成，当肝功能障碍时酶浓度常下降。如血清胆碱酯酶活性在有肝功能障碍时可能下降。 由于酶基因变异也可引起特定酶减少或消失，如肝-豆状核综合征患者血中铜氧化酶活性可明显下降。如有骨细胞增生时，血中ALP可上升。 （2）细胞酶的释放： 是疾病时大多数血清酶增高的主要机制，影响细胞酶释放的主要原因有： 1）细胞内、外酶浓度的差异； 2）酶在细胞内的定位和存在的形式； 3）酶蛋白分子量的大小：酶释放的速度和分子量成反比。例如LD分子量大于CK，而当有心肌梗死时，LD在血液中升高的时间就晚于CK。
酶工程试题及答案
一、名词解释（本题共8个小题，每小题2分，共16分）。 1、固定化酶： 2、原生质体： 3、超滤： 4、酶的催化特性： 5、生物酶工程： 6、酶的必需基团和活性中心： 7、诱导与阻遏： 8、酶反应器： 二、填空题（本题共5个小题，每空2分，共24分）. 1、酶的分类（）（）（）。（三种即可） 2、酶活力是（）的量度指标，酶的比活力是（）的量度指标，酶转换数是（）的量度指标。 3、微生物产酶模式可以分为同步合成型，（）中期合成型，（）四种。 4、酶的生产方法有（），生物合成法和化学合成法。 5、优良的产酶微生物所具备的条件：（1）（）（2）（）（3）（）（写出三种即可）。 三、判断题（本题共10个小题，每空1.5分，共15分）。 1、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。 2、酶活力是指在一定条件下酶所催化的反应速度，反应速度越大，意味着酶活力越高。 3、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。 4、培养基中的碳源，其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。 5、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对，在酶的亲和层析分离中，可把分子对中的任何一方作为固定相。 6、补料是指在发酵过程中补充添加一定量的营养物质，补料的时间一般以发酵前期为好。 7、酶固定化过程中，固定化的载体应是疏水的。 8、在酶的抽提过程，抽提液的 pH 应接近酶蛋白的等电点。 9、青霉素酰化酶不但能催化青霉素侧链的水解作用，而且也能催化逆反应。 10、亲和试剂又称活性部位指示试剂,这类修饰剂的结构类似于底物结构。 四、问答题（本题共5个小题，共45分）。 1、试述提高酶发酵产量的措施。（8 分，答出四点即可） 2、酶失活的因素？（8分） 3、酶的提取方法有哪些？（8分） 4、酶分子修饰的意义有哪些？（6分） 5、试简述酶分子的定向进化。（5分） 6、固定化酶和游离酶相比，有何优缺点？（10分，优缺点答五点即可） 答案 一、1、固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶固定在载体上，能使酶发挥催化作用的酶；2、原生质体：脱去细胞壁的植物、真菌或细菌细胞；3、超滤：超滤是采用中空纤维过滤新技术，配合三级预处理过滤清除自来水中杂质；4、酶的催化特性：①极高的催化效率②高度的专一性③酶活性的可调节性④酶的不稳定性5、生物酶工程：是指在基因水平上，对酶蛋白分子进行修饰、改造，改进酶蛋白的催化特性或酶蛋白的蛋白质特性等；6、酶的必需基团：指酶分子中与酶的活性密切相关的基团；活性中心：是与底物结合并催化反应的场所；7、酶合成的诱导是指加入某种物质使酶的合成开始或加速进行的过程；酶合成
食品酶学复习题1总结
一、填充题 1、酶分子修饰生物法是通过基因工程的手段改变蛋白质，即基于核酸水平对 蛋白质进行改造，利用基因操作技术对DNA或mRNA进行改造和修饰以期获得化学结构更为合理的蛋白质。 2酶的固定化方法主要可分为四类分别为：吸附法、包埋法、 共价键结合法、和交联法。 3、吸附法是通过载体表面和酶分子表面间的次级键相互作用而达到固定目的的方法，是固定化 中最简单的方法。吸附法又可分为物理吸附法 和离子吸附法。 4、重氮法是将酶蛋白与水不溶性载体的重氮基团通过共价键相连接而固定化的 方法，是共价键法中使用最多的一种。 5、酶反应器有两种类型：一类是直接用游离酶进行反应，即均相酶反应器；另一类是应用固定化 酶进行的非均相酶反应器。 6、酶联免疫测定（即ELISA）的基本原理包括以下两点：（1）利用抗原与抗体的特异反应将待测 物与酶连接；（2）通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。 二、名词解释 1、同工酶：同工酶的命名： 同工酶是指在生物体内或组织中催化相同反应而具有不同分子形式（包括不同的氨基酸序列、空间结构等）的酶，这种分子形式差异是由于酶蛋白的编码基因不同，或者虽然基因相同，但基因转录产物mRNA 或者其翻译产物是经过不同的加工过程产生的。 2、产酶促进剂：产酶促进剂是指在培养基中添加某种少量物质，能显著提高酶的产率，这类物质称为产酶促进剂。 3、酶活力：酶活力是指酶催化反应的能力，它表示样品中酶的含量。1961 年国际酶学会规定，l min 催化lμmol 分子底物转化的酶量为该酶的一个活力单位 ( 国际单位 ) ，温度为25 ℃，其它条件(pH 、离子强度) 采用最适条件。 4、溶菌酶:溶菌酶又称为胞壁质酶，是一种专门作用于微生物细胞壁的水解酶。溶菌酶是由129个氨基酸构成的单纯碱性球蛋白，化学性质非常稳定。 三、简答题 1、酶学对食品科学有哪些重要性? 答：（1）酶对食品加工和保藏的重要性（2）酶对食品安全的重要性（3）酶对食品营养的重要性（4）酶对食品分析的重要性（5）酶与食品生物技术 2、在酶的纯化方法中，酶和杂蛋白根据它们的性质差异有哪些分离方法？ 答：酶和杂蛋白的性质差异大体有以下几个方面，它们的分离方法根据这个基础分为： (1) 根据分子大小而设计的方法。如离心分离法、筛膜分离法、凝胶过滤法等。 (2) 根据溶解度大小分离的方法、如盐析法、有机溶剂沉淀法、共沉淀法、选择性沉淀法、等电点沉淀法等。 (3) 按分子所带正负电荷多少分离的方法，如离子交换分离法、电泳分离法、聚焦层析法等。 (4) 按稳定性差异建立的分离方法，如选择性热变性法、选择性酸碱变性法、选择性表面变性法等。 (5) 按亲和作用的差异建立的分离方法，如亲和层析法、亲和电泳法等。 3、固定化酶有哪些优点？ 答：固定化酶的优点： （1 ）同一批固定化酶能在工艺流程中重复多次地使用； （2 ）固定化后，和反应物分开，有利于控制生产过程，同时也省去了热处理使酶失活的步骤；
临床化学--诊断酶学练习题
临床化学--诊断酶学练习题 一、A1 1、血清ALP活性升高最常见于 A、急性肾炎 B、骨肿瘤 C、恶性贫血 D、甲状腺功能低下 E、梗阻性黄疸 2、肌酸激酶组织含量最高的是 A、肺脏 B、骨骼肌 C、肾脏 D、红细胞 E、肝脏 3、有助于诊断骨骼和肝脏疾病的血清酶是 A、AST B、CK C、ALP D、ACP E、LPS 4、急性肝炎时AST/ALT比值 A、小于1 B、大于1 C、等于1 D、大于3 E、大于2 5、在人体组织中ACP含量最多的是 A、肝脏 B、心肌 C、红细胞 D、血小板 E、前列腺 6、酒精中毒时血清酶活力升高最明显的时 A、GGT B、ALP C、CK D、LD
E、ALT 7、急性心肌梗死时，下列血清酶最早升高的是 A、ALT B、LD C、CK D、AST E、ALP 8、肝病时血清LD同工酶升高最明显的是 A、LD1 B、LD2 C、LD3 D、LD4 E、LD5 9、ALT在人体各组织中含量最多的是 A、肺脏 B、心肌 C、脑组织 D、红细胞 E、肝脏 10、孕妇血清中酶活性增高最明显的是 A、LD B、ALP C、CK D、AMY E、LPS 11、LD5主要组织来源是 A、心脏 B、肺 C、肝脏 D、脾脏 E、肾脏 12、心肌酶谱不包括 A、ALT B、AST C、CK D、α-HBD E、LD
13、肌钙蛋白由几个亚单位组成 A、2 B、3 C、4 D、5 E、6 14、LD由H和M亚基组成几种同工酶 A、2 B、3 C、4 D、5 E、6 15、胞质中CK的同工酶有几种 A、2 B、3 C、4 D、5 E、6 16、CK同工酶由几个亚基组成 A、2 B、3 C、4 D、5 E、6 17、心肌中主要含有的CK同工酶是 A、CK-BB B、CK-MB C、CK-MM D、CK-BB和CK-MB E、CK-MM和CK-MB 18、关于乳酸脱氢酶性质的叙述错误的是 A、由两种亚单位组成 B、有5种同工酶 C、在肝脏中含量最高 D、具有“冷变性”的特点 E、血清中LD的增高对任何单一组织或器官都是非特异性的 19、转氨酶的辅酶是 A、烟酸
食品酶学_样卷
福建农林大学考试试卷（A）卷 课程名称：食品酶学考试时间：120分钟 食品科学与工程专业年级班学号姓名 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 1.下列哪种剂型的酶最方便于在食品生产中使用： A．液体 B．粉剂 C．颗粒 D．纯酶结晶 2.酶制剂的生产主要来源于： A.动物组织提取法； B.植物组织提取法； C.化学或生物合成法； D.微生物发酵法； 3.蛋白酶按其活性部位分为： A．胰蛋白酶、胃蛋白酶、凝乳酶 B．肽链端解酶、肽链内切酶C．丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶、酸性蛋白酶 D．水解酶、裂合酶4.酶委员会根据酶所催化的反应的性质将酶分为六大类，包括氧化还原酶、转移酶、 裂合酶等，不包括以下哪种类型： A.水解酶 B.裂解酶 C.异构酶 D.连接酶 5.以吸附法固定化酶，酶与载体之间的结合力不包括： A．范德华力 B．疏水相互作用 C．双键 D．离子键
6.根据酶的电荷性质进行酶的分离纯化方法不包括： A．离子交换 B．电泳 C．等电聚焦D．离心沉淀 7.有关米氏常数Km叙述不正确的是： A．Km是酶的一个特征性常数：也就是说Km的大小只与酶本身的性质有关，而与酶浓度无关。 B．Km值还可以用于判断酶的专一性和天然底物，Km值最小的底物往往被称为该酶的最适底物或天然底物。 C．Km可以作为酶和底物结合紧密程度的—个度量指标，用来表示酶与底物结合的亲和力大小。 D．某个酶的Km值已知时，无法计算出在某一底物浓度条件下，其反应速度相当于Vmax的百分比。 8.下图表示的是可逆抑制剂与不可逆抑制剂的区别，叙述正确的是： A．曲线1为无抑制剂；曲线2为不可逆抑 制剂；曲线3为可逆抑制剂 B．曲线1为无抑制剂；曲线2为可逆抑制剂； 曲线3为不可逆抑制剂 C．曲线1为不可逆抑制剂；曲线2为无抑制 剂；曲线3为可逆抑制剂 D．曲线1为不可逆抑制剂；曲线2为可逆抑 制剂；曲线3为无抑制剂 9.在一些用发酵方法加工的鱼制品中，由于鱼和细菌中什么酶的作用，会使这些食品 缺少维生素B。 A．硫胺素酶 B．蛋白酶 C．胃蛋白酶 D．胰蛋白酶 10.在科技文献中，当一种酶作为主要研究对象时，在文中第一次出现时可以不标明酶 的： A．系统名 B．数字编号 C．酶的来源 D．生产商 11.下列有关SOD叙述不正确的是： A．SOD是一类含金属的酶； B．SOD存在于几乎所有靠有氧呼吸的生物体内，从细菌、真菌、高等植物、高等动物直至人体均有存在； C．SOD分子中不含赖氨酸，芳香氨酸也很少，能抗胃蛋白酶水解； D．SOD是氧自由基专一清除剂，在照射前供给外源性SOD，可有抗辐射效果。
分子生物学实验技术
DNA Replication and Repair_Lei Shi 1、DNA损伤修复的类型、来源。 ⑴细胞内源性的损伤—复制错误,碱基脱氨氧化； ⑵外源型-环境因素造成的损伤—辐射（TT）致癌物质（烷化剂、EB亚硝酸等）如碱基的损伤、 错配,碱基的缺失,碱基的交联等. 2、男性谱系和女性谱系鉴定的机理。 ⑴男性谱系：Y染色体，Y-STR（short tandem repeat）是Y染色体上的短串联重复序列。Y-STR经常用于法医学，亲子鉴定和家谱DNA测试。Y-STR特异性地从雄性Y染色体获得。Y染色体上的基因只能由亲代中的雄性传递给子代中的雄性（即由父亲传递给儿子），因此在Y染色体上留下了基因的族谱，Y-DNA 分析现在已应用于家族历史的研究。 ⑵女性谱系：线粒体DNA。线粒体DNA（mtDNA）是DNA的一部分，是母系遗传的，通过卵子传递，且一般很难发生改变。mtDNA存在于双膜细胞器内。每个细胞中有许多线粒体DNA拷贝。?如果样本有限，mtDNA可以获得更多的DNA, ?可以从高度降解的来源获得DNA 3、基因操作的载体必须具备的特征是什么？常用的载体有哪些？ ⑴克隆载体应具备的主要特点： 至少有一个复制起点（origin of replication, ori） 至少有一个选择性标志（selection marker） 有适宜的限制性内切酶的单一切点：称为多克隆位点（multiple cloning sites，MCS）应有较高的拷贝数。 ⑵表达载体：原核表达载体：除了具备克隆载体的一般特点外，还需有调控外源基因有效转录和翻译的序列，如启动子、核糖体结合位点、转录终止序列等。 ⑶真核表达载体包括在大肠杆菌中起作用的复制起始位点、抗生素抗性基因、多克隆位点等。真核表达载体中还具有： ①真核表达调控元件：包括启动子、增强子、转录终止序列、poly A 加尾信号等 ②真核细胞复制起始序列 ③真核细胞药物抗性基因 目前应用最广泛的原核表达载体是大肠杆菌表达载体。 常用载体：质粒载体：pBR322质粒 噬菌体载体：λ噬菌体、M13噬菌体 病毒载体：反转录病毒、慢病毒、腺病毒、腺相关病毒等 4、如何分离蛋白质（分离方法及步骤） 蛋白质分离主要根据五种原理：分子大小、溶解度、电荷、吸附性质、对配体分子的生物学亲和力等。分离方法有透析与超滤、凝胶过滤法、离子交换层析法、低温有机溶剂沉淀法等。
酶工程-期末试题
酶工程期末考试试题(A) 一名词解释：( 每小题3分共30分) 1 酶催化的专一性：绝对专一性和相对专一性； 2 酶催化的邻近效应、定向效应：底物彼此靠近、活性中心浓度增大、底物与结合部位按有利于催化反应的方向定位； 3 Kcat：催化常数，即在最适条件下，没摩尔酶每分钟所转化的底物摩尔数； 4 酶活力：酶催化活力，用酶催化反应速度表示； 5 酶催化周期：每mole酶蛋白催化每mole底物所需要的时间； 6 Ks盐析和β盐析 Ks盐析：即蛋白质溶液的pH值和温度固定不变，改变溶液的盐浓度（离子强度），以达到沉淀蛋白的作用；此法常用的盐是硫酸铵。 β盐析法：是在一定的离子强度下，改变溶液的pH值和温度，以达到蛋白沉淀的目的。 7 离子交换剂：离子交换剂是借酯化、氧化或醚化等化学反应，在琼脂糖、纤维素或凝胶分子上某些极性基团，通过极性基团的静电吸附作用，对极性大分子进行分离。按离子交换剂上的活性基团的性质不同，可分为阳离子交换剂和阴离子交换剂两种。 8 生物酶工程：是指在基因水平上，对酶蛋白分子进行修饰、改造，改进酶蛋白的催化特性或酶蛋白的蛋白质特性等。 本章主要介绍核酶、进化酶、杂合酶和抗体酶的有关基本概念和基本知识。 9 酶分子的定向进化： 是指在分子水平上，人为地创造特殊的进化条件，模拟自然进化机制（随机突变、基因重组和自然选择），对酶基因进行改造，并进行定向选择，筛选出所需性质的酶蛋白。10 核酶：化学本质是核酸的酶，包括核酶和脱氧核酶 二填空题：（每空1分共 20分） ⑴按催化反应类型分，将酶分成6个大类，它们的名称及其代码分别是氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构酶、连接酶； ⑵根据葡聚糖凝胶的交联度不同，软胶包括 G75 、 G100 、 G150 、 G200 ； ⑶酶固定化方法有吸附法、交联法、吸附交联法、共价结合法、微胶囊法； ⑷酶蛋白化学修饰的方法包括金属离子置换、大分子结合、肽链有限水解、 氨基酸置换、侧链基团修饰；
酶工程习题及答案
酶工程试题(A) 一名词解释（每题3分，共计30分） 1. 酶工程：又叫酶技术，是酶制剂的大规模生产和应用的技术。 2.自杀性底物：底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露，再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂，这种底物叫自杀性底物。 3.别构酶；调节物与酶分子的调节中心结合后，引起酶分子的构象发生变化，从而改变催化中心对底物的亲和力，这种影响被称为别构效应，具有别构效应的酶叫别构酶 4.诱导酶：有些酶在通常的情况下不合成或很少合成，当加入诱导物后就会大量合成，这样的酶叫诱导酶 5.Mol催化活性：表示在单位时间内，酶分子中每个活性中心转换的分子数目 6.离子交换层析：利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷，当带相反电荷的分子通过时，由于静电引力就会被载体吸附，这种分离方法叫离子交换层析。 7.固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶 8.修饰酶：在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶 9.非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学 10模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。 二填空题(每空1分,共计30分) 1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是反应条件。 2.求Km最常用的方法是双倒数作图法。 3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是序列机制，另一类是乒乓机制。 4.可逆抑制作用可分为竞争性，反竞争性，非竞争性，混合性； 5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是致病菌，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高，三是菌种不易退化，四是最好选用能产生胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。 6.酶活力的测定方法可用终止反应法和连续反应法。 7.酶制剂有四种类型即液体酶制剂，固体酶制剂，纯酶制剂和固定化酶制剂。 8.通常酶的固定化方法有吸附法，包埋法，交联法， 共价键结合法。 9.酶分子的体外改造包括酶的表面修饰和内部修饰。 10.模拟酶的两种类型是半合成酶和全合成酶。 11.抗体酶的制备方法有拷贝法和引入法。 三问答题(每题10分,共计40分) 1.固定化酶和游离酶相比，有何优缺点？ 解：优点（1）易将固定化酶和底物，产物分开产物溶液中没有酶的残留简化了提纯工艺 （2）可以在较长的时间内连续使用（3）反应过程可以严格控制，有利于工艺自动化（4）提高了酶的稳定性 （5）较能适于多酶反应 （6）酶的使用效率高产率高成本低 缺点 （1）固定化时酶的活力有损失 （2）比较适应于水溶性底物 （3）与完整的细胞相比，不适于多酶反应。 2.写出三种分离纯化酶蛋白的方法，并简述其原理。 解：.方法:透析与超虑离心分离凝胶过滤盐析等电点沉淀共沉淀吸附层析电泳亲和层析热变性酸碱变性表面变性等（原理略） 3.为什么酶制剂的生产主要以微生物为材料？ 解：（1）微生物种类多，酶种丰富，且菌株易诱变，菌种多样 （2）微生物生长繁殖快，酶易提取，特别是胞外酶 （3）来源广泛，价格便宜 （4）微生物易得，生长周期短 （5）可以利用微电脑技术控制酶的发酵生产，可进行连续化，自动化，经济效益高 （6）可以利用以基因工程为主的分子生物学技术，选育和改造菌种，增加产酶率和开发新酶种 4 下面是某人对酶测定的一些数据，据此求出该酶的最大反应速度和米氏常数 [S](mol/L) V0(umol/min) 0.5?10-628 4.0?10-640 1.0?10-570 2.0?10-595 4.0?10-5112 1.0?10-4128 2.0?10-4139 1.0?10-2140 解：最大反应速度140 ，Km: 1.0?10-5 酶工程试题（B） 一名词解释 1抗体酶：是一种具有催化作用的免疫球蛋白，属于化学人工酶 2酶反应器：是利用生物化学原理使酶完成催化作用的装置，他为酶促反应提供合适的场所和最佳的反应条件，使底物最大限度的转化为物。 3模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。 4底物抑制：在酶促反应中，高底物浓度使反应速度降低的现象。 5稳定pH：酶在一定的pH范围之内是稳定的，超过这个限度易变性失活，这样的pH范围为此酶的稳定pH 6产酶动力学：主要研究细胞产酶速率及各种因素对产酶速率的影响，包括宏观产酶动力学和微观产酶动力学。 7凝胶过滤：又叫分子排阻层析，分子筛层析，在层析柱中填充分子筛，加入待纯化样品再用适当缓冲液淋洗，样品中的分子经过一定距离的层析柱后，按分子大小先后顺序流出的，彼此分开的层析方法。 8固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶 9非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学 10液体发酵法：以液体培养基为原料进行微生物的繁殖和产酶的方法，根据通风方法不同又分为液体表层发酵法和液体深层发酵法。 二填空题(每空1分,共计30分) 1.Km值增加，其抑制剂属于竞争性抑制剂，Km不变，其抑制剂属于非竞争性抑制剂，Km减小，其抑制剂属于反竞争性抑制剂。 2.菌种培养一般采用的方法有固体培养法和液体培养法。 3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括温度，PH ，氧气，搅拌，湿度和泡沫等。 4.打破酶合成调节机制限制的方有控制条件，遗传控制，其它方法。 5.酶生物合成的模式分是同步合成型，延续合成型，中期合成型，滞后合成型。 6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有热变性法，酸碱变性法和表面变性法 7. 通常酶的固定化方法有交联法、包埋法，吸附法、共价结合法 8. 酶分子的体外改造包括酶的表面修饰和内部修饰。 9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的过滤态，从而降低了底物分子的能障，而抗体结合的抗原只是一个基态分子，所以没有催化能力 三问答题(每题10分,共计40分) 1.在生产实践中，对产酶菌有何要求？ 一般必须符合下列条件： a)不应当是致病菌，在系统发育上最好是与病原菌无关 b)能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高 c)菌种不易变异退化，不易感染噬菌体 d)最好选用产胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高 在食品和医药工业上应用，安全问题更显得重要 2.对酶进行化学修饰时，应考虑哪些因素？ 解：（1）被修饰酶的性质，包括酶的稳定性，酶活性中心的状况，侧链基团的性质及反应性 （2）修饰反应的条件，包括PH与离子强度，修饰反应时间和温度，反应体系中酶与修饰剂的比例等 3.列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团 解：（1）酶蛋白N端的α氨基或赖氨酸的∑氨基 （2）酶蛋白C端的羧基及天冬氨酸的β羧基或谷氨酸的γ羧基 （3）半胱氨酸的巯基1分 （7）丝氨酸骆氨酸苏氨酸上的羟基 （8）苯丙氨酸和骆氨酸上的苯环 （9）组氨酸上的咪唑基 色氨酸上的吲哚基 4.某酶的初提取液经过一次纯化后，经测定得到下列数据，试计算比活力，回收率及纯化倍数。 体积（ml）活力单位（u/ml）蛋白氮（mg/ml） 初提取液120 200 2.5 硫酸铵沉淀 5 810 1.5 解：（1）起始总活力：200?120＝24000（单位） （2）起始比活力：200÷2.5＝80（单位/毫克蛋白氮） （3）纯化后总活力810?5＝4050（单位）2 （4）纯化后比活力810÷1.5＝540（单位/毫克蛋白氮） （5）产率（百分产量）：4050÷24000＝17％ （6）纯化倍数：540÷80=6.75
1.2.3食品化学与分析习题与答案
第一章 一、名词解释 1、食品化学 食品化学是从化学角度和分子水平上研究食品的化学组成、结构、理化性质、营养和安全性质以及它们在生产、加工、贮藏和运销过程中发生的变化和这些变化对食品品质和安全性影响的科学。 2、食品分析 是对食品中的化学组成及可能存在的不安全因素的研究和探讨食品品质和食品卫生及其变化的一门学科。 二、问答题 1、食品化学可分为哪些不同的类别 按研究内容的主要范围：食品营养成分化学，食品色素化学，食品风味化学，食品工艺化学，食品物理化学和食品有害成分。 ☆按研究对象和物质分类：食品碳水化合物化学，食品脂类化学，食品色素化学，食品风味化学，食品毒物化学，食品蛋白质化学，食品酶学，食品添加剂科学等等。 2、食品化学的研究内容有哪些 ①确定食品的组成、营养价值、安 全性和品质等重要性质； ②食品贮藏加工中可能发生的各种 化学、生物化学变化； ⑧上述变化中影响食品和其安全性 的主要因素； ④研究化学反应的动力学和环境因 素的影响。 3、食品分析检验的内容包括哪些 （一）食品营养成分的检验 （二）食品添加剂的检验 （三）食品中有害、有毒物质的检验 （四）食品新鲜度的检验 （五）掺假食品的检验 4、食品分析的方法有哪些 （一）感官分析法 （二）理化分析法 （三）微生物分析法 （四）酶分析法 5、感官分析法包括哪些方法 视觉鉴定、嗅觉鉴定、味觉鉴定、听觉鉴定、触觉鉴定 第二章 一、名称解释 1、自由水p8 2、结合水p9 3、水分活度 食品在密闭容器内的水蒸汽压与在相同温度下的纯水的水蒸汽压的比值。水分活度表示食品中水分的有效浓度。 4、等温吸湿线： 指在恒定温度下，使食品吸湿或干燥（解吸），所得到的水分活度与含水量关系的曲线。 5、糖类 糖类的分子组成可用C n (H 2 O) m 通式表示，也称为碳水化合物，是多羟基醛或酮及其衍生物和缩合物的总称。 6、焦糖化 7、淀粉的糊化p24 8、淀粉的老化p26 脂类p28、烟点p33、闪点p33、着火点p33、同质多晶p33、必需脂肪酸p31、脂肪的塑性p34、稠度p34、脂肪的起酥性p35、油脂的油性p35、油脂的粘性p35、 油脂的氢化p42 是通过催化加氢的过程使油脂分子中的不饱和脂肪酸变为饱和脂肪酸，从而提高油脂熔点的方法。 酯交换p42 酯和酸（酸解）、酯和醇（醇解）或酯和酯间进行的酰基交换作用， 蛋白质p43 蛋白质系数p44 氨基酸的等电点P46 蛋白质的功能性质p49 在食品加工、贮藏、销售过程中蛋白质对食品需要特征作出贡献的那些物理和化学性质。 蛋白质的变性p58 维生素p61 是活细胞为了维持正常生理功能所必需的、但需要极微量的天然有机物质的总称。