凝聚胺法测定孕妇血清IgG抗_A_抗_B_效价的方法学评价
2018年重庆第一次感染性疾病血清学标志物系列B室间质评活动小结
2018年重庆市第一次感染性疾病血清学标志物 系列B室间质评活动小结 2018年重庆市第一次感染性疾病血清学标志物系列B室间质评活动共有219家实验室参加，本次有216家参评实验室按时回报了结果。请各实验室注意回报时间，不要迟报和漏报。 表1. 样本的预期结果 项目编号201811 201812 201813 201814 201815 抗HCV R(约2 NCU/ml) R (1 NCU/ml) N N R (约1 NCU/ml) 抗HIV R (约>4 NCU/ml) N R (约>4 NCU/ml) N R (约2 NCU/ml) 梅毒（非特异）N R(1:1/1:2/1:4) N N N 梅毒（特异）N R (约>24 mIU/ml) R (4 mIU/ml) R (12 mIU/ml) N 表2. 各项目的检测情况 项目样本编号总实验室数正确实验室数错误实验室数正确率% 错误率% 抗HCV 201811 213 212 1 99.5 0.5 201812 213 210 3 98.6 1.4 201813 213 211 2 99.1 0.9 201814 213 213 0 100 0 201815 212 207 5 97.6 2.4 抗HIV 201811 209 208 1 99.5 0.5 201812 209207 2 99 1 201813 209206 3 98.6 1.4 201814 209208 1 99.5 0.5 201815 209202 7 96.7 3.3 梅毒（非特异）201811 169 169 0 100 0 201812 173 170 3 98.3 1.7 201813 173171 2 98.8 1.2 201814 173 167 6 96.5 3.5 201815 169 169 0 100 0 梅毒 （非特异凝 集效价） 201812 162 151 11 93.2 6.8 梅毒（特异）201811 208 208 0 100 0 201812 208 208 0 100 0 201813 208 200 8 96.2 3.8
新生儿溶血病血清学检查标准操作规程
新生儿溶血病血清学检查标准操作规程 (一)检验目的 检测孕妇产前与其丈夫ABO及Rh血型相容性、孕妇IgG 抗体效价、产后新生儿体内不相容抗体存在情况、新生儿与产妇之间血型相容性，为新生儿溶血病的预防、诊断及治疗提供可靠的实验室依据。 (二)检验原理 新生儿溶血病是由母婴血型不合，母亲体内与新生儿红细胞抗原不配合的IgG性质的血型抗体进入新生儿体内，破坏新生儿或胎儿红细胞而引起，可发生在胎儿期和新生儿早期，溶血严重者可出现死胎而流产，存活者则有不同程度的新生儿黄疸。新生儿溶血病产前诊断方法主要包括检测胎儿父母的ABO及Rh血型、孕妇不规则抗体筛查、外周血抗A ／抗B或Rh抗体效价来判断新生儿溶血病发生的可能性及严重程度；新生儿溶血病产后诊断主要包括母子ABO及RhD 血型鉴定试验、新生儿标本三项试验，为临床诊断及进一步采取治疗手段提供可靠的依据。 (三)适用范围 适用于新生儿溶血病产前、产后血型血清学试验。 (四)设备性能参数 参见血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、强生Ortho BioVue离心机及各全自动血型／配血系
统使用说明书。 (五)器材与试剂 1.器材血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、强生Or-tho BioVue离心机、塑料软试管、塑料硬质试管(75mmXl2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、移液枪、一次性移液枪头。 2.试剂DiaMed ABO／RhD血型卡、OrthoBioVueABO ／RhD血型卡、抗A、抗B血清、Rh分，型血清、生理盐水、抗球蛋白试剂(市售单克隆)、抗体筛查试剂红细胞、抗体鉴定试剂红细胞、致敏的阳性对照细胞(自制)。 (六)标本要求 1.夫妇标本EDTA-K2或EDTA-K3抗凝全血≥3ml(手工操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在 1 760g条件下，离心5分钟，离心后无溶血及明显乳糜。 2.患儿标本EDTA-K2或EDTA-K3抗凝全血≥3ml(手工操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在 1 760g条件下，离心5分钟，离心后无明显乳糜。 (七)校准步骤 参照血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、OrthoBioVue离心机及各全自动血型／配血系统使用说明书中的校准要求执行。 ’ (八)操作程序
医疗机构输血科(血库)基本标准
医疗机构输血科（血库）基本要求（试行）为规范医疗机构输血科（血库）的建设，加强临床用血管理，保证临床用血的质量和安全，根据《中华人民共和国献血法》、《医疗机构临床用血管理办法》、《临床输血技术规范》和有关管理规定，制定本基本要求。 一、总则 （一）申请临床用血的医疗机构，必须取得《医疗机构执业许可证》，未设住院部的门诊部及卫生所不得开展输血。临床用血统一由取得执业许可证的合法血站供给，医疗机构不得擅自采集血液（对患者进行自身输血除外）。 （二）医疗机构应当严格遵守卫生部《医疗机构临床用血管理办法》的有关规定，严格执行《临床输血技术规范》，健全工作制度，遵循合理、科学原则，制定用血计划，严格掌握输血适应证，避免浪费，杜绝不必要的输血。 （三）三级医院应设立输血科，二级医院设立输血科或血库，一级医院根据本单位的实际情况设立血库或贮血室。 （四）输血科（血库）的主要职能：负责本单位临床用血计划的申报，临床用血的技术指导和技术实施，确保贮血、配血和科学合理用血措施的执行。 二、布局和设施 （一）布局要求 1、输血科（血库）应有独立的业务用房，选址应远离污染源，并尽可能临近手术室、病房，以便于取血。 2、房屋建筑设施应达到卫生学标准，布局合理，按工作流程分室分区，应有清洁区、半清洁区和污染区，各室或各区域有明显的标识。血液贮存、发放处和输血治疗室设在清洁区，血液检验和处置室设在污染区，办公室设在半清洁区。 （二）用房面积 1、科室用房面积应能满足其任务和功能的需要，原则上三级医院不少于80m2，二级医院不少于50m2，贮血室不少于30m2。 2、使用面积与床位数参考比例推荐标准： 1、有通风、防潮设施，通讯、给排水、消防等设施应符合有关规定。 2、具备双路供电或应急发电设施。 3、应有与用血任务相适应的取血箱。
TD-3A血型血清学用离心机操作规程
TD-3A型血型血清学用离心机操作规程 1．主要内容与适用范围 本规程规定了TD-3A型血型血清学用离心机操作程序及注意事项 本仪器适用于TD-3A型血型血清学用离心机的日常使用 2．参考文件：TD-3A型血型血清学用离心机使用说明书 3．操作程序 3.1打开电源开关，液晶显示屏显示ChangChun Bo Yan，几秒钟后显示“1 0900 02:00”。 3.2触按橘红色键（停止键），门锁打开，液晶屏显示“Lid is open”； 3.3打开离心机上盖，将微柱凝胶卡对称插到卡架内，盖上盖，轻压盖板锁紧门 锁； 3.4此时液晶屏显示“1 0900 02:00”，触按蓝色的“”键（运行键）开始 运行，离心结束，门锁自动打开并伴有提示音。 a. 如果盖锁没有锁紧，即开机运行，液晶屏会显示“Close The Lid”，这时 必须盖好上盖并锁紧，才能开始运行； b. 运行中需要停止，触按“停止”键，即可停止工作，盖锁自动打开并伴有 提示音，液晶屏显示“Lid is open”； c.未运行时，需要打开上盖时，触按“停止”键，盖锁即开，上盖打开。 3.5将离心机上盖打开，取出微柱凝胶卡，轻轻盖上离心机上盖。 4.维护保养注意事项： 4.1安放离心机的台面应坚实平整，四只橡胶底脚都应与台面接触和均匀受力， 以免产生振动； 4.2离心前应检查离心机转子有无松动。微柱凝胶卡必须对称放入； 4.3离心机在工作时，不得移动离心机，不得打开上盖； 4.4有时程序显示不正确字符，这时请关闭电源，几秒钟之后再开机，即可清除。 4.5当日工作结束后，盖上上盖，锁紧盖锁后关闭电源开关。 桐妇保院检验科制
血型血清学单选题
单选题： 1、血液由血浆和不同的血细胞组成，血细胞有： A、红细胞、白细胞、血小板、单核细胞 B、红细胞、淋巴细胞、单核细胞 C、红细胞、白细胞、血小板 D、红细胞、单核细胞、中性粒细胞 E、红细胞、淋巴细胞、中性粒细胞 2、白细胞是一组有核细胞，包括： A、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞 B、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞 C、淋巴细胞、粒细胞、单核细胞、嗜碱性粒细胞 D、中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞 E、粒细胞、淋巴细胞、单核细胞 3、输血有以下几个原因： A、纠正贫血 B、补充在手术中流失的血液 C、补充在意外中流失的血液 D、补充其他血液成分，如凝血因子 E、以上全部 4、红细胞是血细胞中数量最多的一种细胞，它的主要功能是： A、含有大量的血红蛋白 B、能在体内生存120天 C、能可逆性的结合氧及二氧化碳 D、为全身各组织携带氧 E、分布在全身各组织 5、抗体是血浆中的免疫球蛋白，它是： A、IgM、IgG B、IgE、IgD C、IgA D、它是r-球蛋白 E、以上全部 6、IgM和IgG的区别是： A、IgG分子量比IgM大 B、IgG和IgM均能通过胎盘 C、IgG的最适反应温度与IgM一样 D、IgG抗体与红细胞在盐水中大多数不能发生凝集反应，只能致敏或包被红细胞 E、只有IgM能激活补体，IgG绝对不能 7、影响红细胞抗原-抗体反应的因素： A、温度 B、PH C、抗原和抗体比例 D、离子强度 E、以上全部 8、何谓补体：
A、补体可致凝集反应 B、抗原可激活补体 C、抗体可激化补体 D、补体成分不稳定，可在37℃被灭活 E、补体是正常人血清中的一组蛋白，常涉及血型反应和免疫异常。 9、免疫应答： A、免疫应答分为初次免疫应答和再次免疫应答 B、初次免疫应答主要产生少量的IgM C、再次免疫应答主要产生IgG D、免疫应答分抗体免疫应答和细胞免疫应答 E、以上全部 10、抗球蛋白试验： A、抗球蛋白试验分为直接和间接两种 B、直接抗球蛋白试验是检测红细胞致敏的人球蛋白 C、间接试验是检测血清中的游离抗体 D、常见抗蛋白试剂为广谱抗人球蛋白，单特异抗人IgG、抗C3d。 E、以上全部 11、一个AB型的人，他的遗传基因可能是： A、A或O B、B或O C、A、B D、A、B、O E、O、O 12、父亲为A型，母亲为B型，他们的子女血型可能是： A、A型 B、B型 C、O型 D、AB型 E、以上都有可能 13、父亲的基因型为A、O，母亲的基因型A、B，他们的子女的表型可能是： A、A、O、B B、A、A、AB C、A、B D、B、O、AB E、以上都不是 14、ABO血型鉴定试验： A、ABO血型鉴定不仅需要做正定型（测抗原），还需做反定型（测抗体） B、抗A可与A抗原，AB抗原反应 C、抗-B可与B抗原、AB抗原反应 D、O型人血清中有抗-A、抗-B，A型人血清中有抗-B，B型人血清中有抗-A E、以上都是 15、A和B抗原的发育： A、在胚胎早期A和B抗原就开始产生 B、刚出生的婴儿A、B抗原强度与成人一样
血型检定检测卡标准操作程序
ABO、RHD血型检定试剂卡标准操作程序（微柱凝胶免疫检测法） 深圳市宝安区松岗人民医院检验科 操作规程文件号：SGYYJ-3-XK-007 第三版 共3页 2014年10月01日起实施 有效期至2017年09月30日 本规程每3年复审一次 复审日期：2017年9月30日 复审人：钟青 规程编写者：钟青 审批者：曾宪威 批准日期：2014年10月1日 文件分发部门和/或个人： 检验科；主任：曾宪威 血库：钟青
ABO、RHD血型检定试剂卡标准操作程序 （微柱凝胶免疫检测法） 1．目的：保证检测结果准确、可靠。 2．适用范围：血型血清学检测，标本类型为血清。 3．负责人：曾宪威操作人：授权检验人员。 4．原理：微柱凝胶免疫技术应用于血清学检测，阳性结果红细胞在上层，阴性结果红细胞在低层。 5．性能参数：灵敏度比试管法，玻片法有数十倍以上提高。 6．标本要求： （1）标本类型：全血。 （2）标本采集：见标本采集手册。 （3）标本储存和运输：室温放置不超过2小时，4-8℃不超过72小时，-20℃保存期6个月，应避免反复冻融，室温运输。 （4）标本拒收状态：细菌污染、溶血或严重脂血标本不能用作测定。 7．容器和添加剂类型：血常规管或凝血管。 8．所需设备：离心机。 9．试剂：标准抗A血清，标准抗B血清，标准A型红细胞，标准B型红细胞，标准抗D血清。 10．校准程序（计量学溯源性）： 11．程序步骤:： 11．1 微柱凝胶试验卡的6个凝胶微管标号； 11．2 将待检者0.5%红细胞悬液分别加入第1至第3管或第4至第6管中，每管50ul。 11．3 即刻使用专用离心机离心5分钟，900rpm2分钟，1500rpm3分钟，取出肉眼判定结果。 11．4 结果判定：阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合
《临床输血检验技术》课程标准.
《临床输血检验技术》课程标准 课程名称临床输血检验技术课程代码YLCSXY 课程类型B类课程总课时72 理论课时50 实践课时22 教学场地要求多媒体教室，中心血站、医院输血科 任课教师要求具备扎实的临床输血理论知识，并具有临床输供血检验的工作经历。 一、课程定位 本课程是高职高专医学检验技术专业的临床输血方向的专业限选课程。本课程系统的讲述了安全献血、血型检测技术、输血相关感染病原学标志物检测、血液成分制备技术、血液及成分制品的管理与运输、临床输血流程、血液成分的临床应用、自体输血技术、输血不良反应、新生儿溶血病的实验室检查、临床输血管理等临床输血学检验的基础理论和基本技术。通过本课程的学习使学生掌握输、供血的基本理论及基本技术。本课程开设在第四学期，前导专业核心课程为《临床检验基础》、《微生物检验技术》、《免疫检验技术》，与本学期的《血液学检验技术》、《生物化学及检验技术》、《寄生虫检验技术》专业核心课程密切联系，为后续顶岗实习打下坚实基础。 二、课程目标 1.能力目标 （1）能正确进行献血者的招募、教育和动员，并能采集血液。 （2）能正确进行献血者血液标本的检测； （3）能正确制备血液制品的。 （4）能够正确进行输血前血容性相关检测、新生儿溶血病的相关实验室检查、自体输血。 （5）能够指导临床合理用血。 2.知识目标 （1）具有采血、输血技术规范的基本知识； （2）知道采供血机构及其职责，输血安全的技术和管理保障； （3）知道临床输血基本条件的控制、室内质控与室间质评要求与操作。 3.态度目标 （1）具有高高尚的医德医风和团队合作精神； （1）树立实事求是、精益求精的职业意识； （2）培养分析问题、解决问题的能力。 三、课程设计 1.设计思想 本课程以以工作过程为导向，按照献血员的教育、动员、招募→献血员体检→血液采集→血型及输血相关感染病原学标志物检测→血液成分制备→临床输血整个流程进行编排，在此基础上，对医疗卫生单位输血科（库）和中心血站工作环节与流程、工作任务进行了解构与重构，在强化现代输血的基本理论知识、相关的检测技术的同时，也介绍了血液辐照等输血新技术的应用，力求使课程内容与岗位工作任务对接，突出应用性、实践性和实用性的特点。注重高职学生的个性发展；实现医教结合的工学结合教学模式。本门课程为医学检验技术专业临床输血方向的专业限选课之一，本门课程以理论讲授为主，适时以实例进行分析。学期中以学生见习为实践，使学生能真正将理论实践融会贯通。
2020版《原发性肝癌诊疗指南》血清学标志物应用解读
2020版《原发性肝癌诊疗指南》血清学标志物应用解读 全球范围内，肝癌的新发病例在所有癌症中居于第6位，死亡病例位居第4位，已成为全球重大公共卫生问题。据2015年中国肿瘤年报数据统计，中国每年有约37万例新发肝癌患者，32.6万例患者因此失去生命，肝癌的防治刻不容缓。 为了进一步提高肝癌规范化诊疗水平，改善中国肝癌患者的生存质量，2020年《中国临床肿瘤学会（CSCO）原发性肝癌诊疗指南》(以下简称《指南》)正式发布。这是继2018年发布上版指南后，CSCO发布的最新版指南。 在新版《指南》中，早期肝细胞肝癌的筛查，晚期肝细胞肝癌的一线治疗格局发生较大改变，靶向疗法、免疫疗法以及联合疗法成为主旋律。 早期诊疗是公认的肝癌救命“良方”。关于肝癌血清标志物，大家最先想到的便是甲胎蛋白（AFP），随着筛查检测技术的发展，甲胎蛋白异质体比率（AFP-L3%）和异常凝血酶原（DCP/PIVKA-II）等指标出现，在肝癌筛查中也发挥着重要作用。 本文将针对2020版《指南》中血清学标志物AFP、AFP-L3%、DCP或PIVKA-II 在肝癌筛查、诊断及治疗中的作用进行解读。
肝癌的筛查 在我国，肝细胞肝癌的高危人群主要有乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）和/或丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）感染、长期酗酒（酒精性肝病）、非酒精性脂肪性肝炎、食用黄曲霉毒素污染的食物、血吸虫病等多种原因引起的肝硬化以及有肝癌家族史的人群。同时，年龄40岁以上的男性风险较大。 近年的研究提示糖尿病、肥胖、吸烟和药物性肝损等也是肝细胞肝癌的危险因素，值得关注。因此，对于男性35岁以上、女性45岁以上的肝癌高危人群，应定期进行筛查。应用最为广泛的实验室指标便是血清AFP。 AFP阳性是指AFP≥400ng/ml，且排除慢性或活动性肝炎、肝硬化、睾丸或卵巢胚胎源性肿瘤以及妊娠等，高度怀疑肝癌。 对于AFP水平低度升高者，也应进行动态观察，并与肝功能变化对比分析。约30%的肝癌患者AFP水平正常，应检测甲胎蛋白异质体，还可联合α-L-岩藻苷酶、异常凝血酶原和微小核糖核酸等。 解读一
临床输血标本采集要求和流程
输血标本采集要求和流程 输血是临床救治危重病人的手段之一，为了受血者得到安全、有效、准确、无误的治疗，标本的正确采集是最为重要的环节，对临床各科送检的血型血清学检测标本（定血型、配血、备血）有如下要求： 1.医师确定输血后，病房护士应根据《输血申请单》的信息准备标本采集试管，到床边核对病人姓名、性别、床号、住院号并贴上标签。 2.抽静脉血2-4ml血（用EDTAK抗凝），随即在床旁注入贴有正确无误标签的试管内，不准离开床边后再贴标签。未查输血前相关传染病指标检验的，要同时抽一管不抗凝血，填写输血前检查申请单送检验科。 3.由专门人员（运送队）将受血者血标本与《输血申请单》一起送到输血科，在标本接收登记本上登记，双方逐项核对后验收并签字。 注意事项： 1.标本不能溶血，因溶血会掩盖配血不合的异常反应。不许抽取胸,腹腔等处积血作配血标本。严禁从正在输液的输液管内抽取血样。 2.因右旋糖酐对配血有干扰,故应在病员输注前进行采血。 3.配血标本必须是输血前3天之内的，超过3天的标本不能代表当前病人的免疫学状态。特殊情况下（如妊娠、病人血管条件差、采血困难者）也可例外，适当延长到5天。 4.输血科收到血样应逐项核对，如对血样与病人身份有怀疑，或血样质量不合格，应要求重抽，不允许随意修改错误的标签或错误的《输血申请单》或用不合格血样配血。 5.合格血样如不需配血，应按送检时间分别放入4℃冰箱内位置保存，输血标本至少保存7天。 不合格标本拒收的条件： 血量过少、溶血、非EDTA抗凝的血标本，标签模糊，字迹不清，标本与《输血申请单》信息不符或对患者身份有怀疑等有输血安全隐患的情形。
血型检测
5 血型检测 5.1 红细胞血型检测 5.1.1红细胞血型血清学检测技术规范 5.1.1.1对标本的一般要求 5.1.1.1.1实验室所检测标本须有清晰的惟一性标识。 5.1.1.1.2标本须和血液、血液成分制品来自于同一献血者。 5.1.1.1.3所检测的标本可为抗凝的或不抗凝的标本。抗凝剂推荐使用乙二胺四乙酸（EDTA）。 5.1.1.1.4须遵守试剂/仪器使用说明书中所限定的标本制备和保存步骤；当说明书内容不能涵盖相关要求时，可用经确认的标本制备和保存步骤。 5.1.1.1.5肉眼判定标本是否存在影响检测结果的因素,如溶血、脂血等。 5.1.1.2仪器设备的要求 5.1.1.2.1仪器设备在安装后，需校准方可使用，校准周期至少一年一次，仪器设备需有维护程序。所有的校准、维护须有记录。 5.1.1.2.2仪器设备所使用的软件和实验室的信息系统须经过确认。 5.1.1.3记录的要求 5.1.1.3.1所有检测标本具有可追溯性。 5.1.1.3.2核对当前ABO/RhD定型结果与既往的血型记录是否一致，结果不一致必须查找原因。 5.1.1.4 ABO/RhD定型 5.1.1.4.1原理 5.1.1.4.1.1根据红细胞上和血清（或血浆）中有或无A抗原或/和B抗原及其抗体，将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。正定型是用已知抗-A或抗-B定型试剂来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B 抗原；反定型是用已知A型细胞和B型细胞来测定血清中有无相应的抗-A或/和抗-B。 5.1.1.4.1.2利用红细胞凝集试验，通过抗-D定型试剂，测定红细胞上是否存在RhD抗原。红细胞上有RhD抗原称RhD阳性，无RhD抗原为RhD阴性。 5.1.1.4.2试剂与材料 5.1.1.4.2.1所有用于检测与确认的ABO血型定型试剂都必须符合国家相关规定。
血清标志物发现研究的一般流程
HuProt?人类全蛋白质组芯片用于全局性的 血清自身抗体标志物的发现研究 技术背景： 血清标志物的发现对于早期、及时、准确的疾病诊断至关重要。利用蛋白质组芯片进行全局性、系统性地筛查对于特定疾病的生物标志物是一项有着巨大价值的研究工作。HuProt TM人类蛋白质组芯片包含~20,000个人源重组蛋白质，是目前世界上通量最高的蛋白质芯片。该芯片适用于全局性地进行蛋白-蛋白互作、蛋白-核酸互作、蛋白-小分子互作以及翻译后修饰研究，同时适用于系统性地发现肿瘤相关抗原的研究，以发现可用于诊断或其它表征的标志物。 实验原理： 在血清标志物研究中，样本包括实验组和对照组，分别独立地与芯片反应，以检测实验组中针对某一种或几种抗原蛋白，具有普遍性的特异性的抗体（IgG或IgM），这些抗原蛋白可以作为诊断标志物来表征疾病状态。特异性的抗体（包括IgG、IgM或其它类型抗体）与固定于芯片上的蛋白进行结合，清洗去除未结合的抗体和其它蛋白质，再用抗人IgM荧光标记二抗（cy5标记，呈现红色）和抗人IgG荧光二抗（cy3标记，呈现绿色）检测，通过荧光扫描仪读取信号，信号的强弱与抗体的亲和力和数量呈正相关。
实施方案举例： 第一步，初筛：低成本探索性实验 ——初步结果可以用来申请课题； 使用涵盖~20,000个人类重组蛋白的HuProt TM Proteome Microarray（组芯片）进行初步筛选，以发现具有一定差异的潜在的自身抗原。具体方案： 疾病组：10－30例；要求：典型的病例样本；明确的临床诊断结论；样本保存完好（－80度保存）；完善度临床信息（如用药或治疗情况等）； 健康对照组：各10-30例；要求：整体的性别、年龄同疾病组相当；样本保存完好。 数据分析： 因样本量较少，因此以较低的标准对潜在标志物进行选择：P值<0.05; 或阳性率在疾病组一致性或显著高于健康对照组。潜在标志物个数控制在200个蛋白以内。 第二步，验证：高效率，大样本，低单价验证 ——基本数据可以很快发篇文章，申请若干专利； 基于第一部分的数据，依照潜在标志物列表，定制芯片（focused Array）。然后用更大规模的样本进行统计学验证。具体： 疾病组：>100例； 健康组：>100 例； 疾病对照组：>100例； 以上各组整体的性别、年龄同疾病组相当；样本保存完好。
HDN产前血型血清学检验操作规程
HDN产前血型血清学检验操作规程 SXYJ-GZ-0218 1目的辅助临床诊断母婴血型不合而引发的新生儿溶血病的预测。 2适用范围既往患有新生儿溶血病病史、不明原因流产或死胎史的孕妇；夫妇ABO血型不相容的孕妇；Rh阴性并有过流产史、输血史的孕妇。 3职责检测者负责依据此程序进行HDN产前血型血清学检验操作。 4材料与设备抗-A、抗-B血清、反定型试剂红细胞、血型物质或二硫苏糖醇（DTT）；实验室常规应用的耗材备品准备充分、仪器设备运行状态正常 5操作方法 5.1ABO血型鉴定（方法参见SXYJ-GZ-0202） 5.1.1ABO血型不合可致ABO溶血：例如，孕妇O型，丈夫A型/B型/AB型； 5.1.2ABO系统以外溶血：孕妇可以是A、B、O、AB型，丈夫ABO血型可以是和孕妇同型， 也可以不同型。 5.2RhD抗原鉴定（方法参见SXYJ-GZ-0205）。 5.3免疫性抗体检查 5.3.1IgM抗A(B)破坏：夫妇ABO血型不合； 5.3.1.1血型物质中和法：以孕妇为O型，丈夫为A型为例：取孕妇血清0.15ml或0.05ml 加A型血型物质0.15ml，混匀→置室温15分钟→得到中和后血清、若孕妇为O 型，丈夫为AB型，可分别用A型、B型血型物质中和； 5.3.1.2二硫苏糖醇法(DTT)：取0.1ml孕妇血清加0.7ml DTT做1:8稀释， 37℃水浴30分 钟； 5.3.2ABO以内免疫性抗体（IgG性质的抗A或/和抗B）检测：用中和或处理后血清2d加 入相应的Ac或/和Bc（或用丈夫细胞）悬液1d，离心，检测是否中和彻底，若仍有 凝集，可加大中和液的比例至中和后血清为理想血清。 5.3.3检出免疫性抗体者同时报效价，抗-A（B）抗体效价参考值为8-64。ABO以外红细胞 血型抗体的筛选和鉴定：方法参见SXYJ-GZ-0216。 5.3.4效价的检测：IgG抗A（B）用中和或处理后血清、ABO以外抗体用女血清分别加相应 的红细胞悬液测定（方法参见SXYJ-GZ-0217）。 5.3.5溶血素检测：取4支小试管，标明序号，在每支管中加入0.2ml的生理盐水，再在 第一支管中加入孕妇0.2ml血清，依次向后做倍比稀释，最后一管中吸出0.2ml混 合液弃去，在每管中加入等量的丈夫3％红细胞悬液或含有相应抗原的试剂红细胞悬
常见血清肿瘤标志物检测的临床意义
常见血清肿瘤标志物检测的临床意义 发表于：2009-07-29 22:48 | 分类：个人日记阅读：(0) 评论：(0) 常见血清肿瘤标志物检测的临床意义 恶性肿瘤严重危害人民的健康，近年来多种恶性肿瘤的发病率及发病绝对人数皆有不断升高的趋势，并趋于年轻化。肿瘤的实验室检查方法多种多样，各有其优缺点。血清肿瘤标志物的检测是肿瘤诊断的常用方法之一，对于恶性肿瘤的诊断、疗效的观察、病情进展的判断和复发的监测等皆有一定的临床应用价值，并具有简便无创、测定结果定量客观、可重复测定以便动态监测、费用相对低廉等优点。 甲胎蛋白（AFP）：是诊断肝癌灵敏度高和特异性好的肿瘤标志物,是临床诊断原发性肝细胞癌的主要实验室指标，若AFP大于500μg/L持续4周，或大于200μg/L持续8周，或由低浓度逐渐升高不降，在排除妊娠和生殖腺胚胎瘤基础上，即可诊断为肝细胞癌。血清AFP异常升高可早于症状出现6—8个月，故血清AFP的检测非常适合于肝细胞癌的普查。应注意的是在生殖腺胚胎瘤、部分转移性肝癌，以及孕妇、肝炎和肝硬化，AFP的检测可呈假阳性结果，但AFP水平升高的程度和幅度往往不如肝细胞癌；另外，常规方法检测AFP，有少部分（约10%）的原发性肝癌患者AFP检测始终为阴性，或测定值升高不显著。 癌胚抗原（CEA）：主要用于消化系统恶性肿瘤如结肠直肠癌、胰腺癌、胆管癌、肝癌、胃癌等的诊断，阳性率为45-60%，其它肿瘤如肺癌、乳腺癌、甲状腺髓样癌、多种妇科恶性肿瘤等亦有一定的阳性检出率，与其它肿瘤标志物联检可提高对前述恶性肿瘤的阳性检出率。应注意消化系统的某些良性病变如慢性萎缩性胃炎、溃疡病、结肠息肉、阻塞性黄疸、慢性肝炎和肝硬化以及肾功能不全等可使CEA升高，但其升高的程度和幅度均不及恶性病变；另外，吸烟和妊娠者CEA也可呈阳性。 血清铁蛋白（SF）：正常人SF浓度相对稳定，它反映体内铁的贮存量，多种恶性肿瘤SF合成和释放增多，SF异常增高多见于血液系统和淋巴系统肿瘤，如急性白血病、何杰金氏病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤等，肺癌、胃癌、食道癌、结肠癌、妇科恶性肿瘤等亦有一定的阳性检出率，SF测定的另一临床应用是用于检测AFP阴性的原发性肝癌，对AFP阴性的原发性肝癌的检出率达80%以上。SF影响因素较多，与年龄、性别有关，男性高于育龄女性，老年妇女高于年轻妇女，妊娠期SF减少，Hb的下降与SF的下降呈正相关，故SF同时是诊断隐性缺铁性贫血的灵敏指标。伴肝脏疾病如急、慢性肝炎、肝硬化患者有不同程度的升高，各种非特异性炎症亦可使SF增高。 β2-微球蛋白（β2-MG）：恶性肿瘤细胞能分泌和和合成β2-MG，故恶性肿瘤患者血清β2-MG往往异常升高，如淋巴瘤、多发性骨髓瘤、滋养细胞肿瘤、肝癌、肺癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、甲状腺癌、鼻咽癌等均可见到血清β2-MG增高，伴有肾功能不良则同时有尿β2-MG增高。肿瘤患者血清β2-MG水平与肿瘤的分期、疗效、病程和预后有明显的相关性，对疗效估计和预后判断有较大的应用价值。
乙肝病毒HBV血清学标志物检测的临床意义
乙肝病毒HBV血清学标志物检测的临床意义 HBV是一种小的有包膜病毒它被分类为嗜肝DNA病毒科中的一员。虽然HBV在动物病毒中有若干近亲，但人类病毒中没有与HBV相似者,HBV的DNA基因组只含四个编码病毒蛋白的基因：编码三种形式的表面抗原的表面基因S，编码HBeAg和HBcAg的前核心/核心基因C，编码x抗原的基因X和编码HBVDNA聚合酶的聚合酶基因P。 HBV的复制 HBV利用一种与逆转录病毒如人类免疫缺陷病毒Human 1mmunodeficiency Virus,HlV,复制方式相关的新复制策略.在这一过程中，将RNA逆转录为DNA是复制周期中极其重要的一步。然而与逆转录病毒不同的是HBVDNA在复制时并不整合到宿主细胞的DNA中去。当一个有感染性的HBV颗粒结合并进入肝细胞时，HBVDNA进入肝细胞并变为共价闭合环状DNA,cccDNA,CoValent Closed C yc1ic DNA。这种cccDNA是高度稳定的，而且是HBV复制过珵中重要的中间产物,其作用是作为RNA拷贝的模板。这些RNA拷贝中最大者被称为HBV前基因组mRNA，它被转运到细胞浆中,它有双重功能,一方面作为合成新的HBVDNA的模板;另方面又携带遗传信息指导病毒某些蛋白质合成,较小的HBVmRNA则参与其他病毒蛋白质的合成。病毒蛋白质合成开始之后，前基因组mRNA、HBV核心蛋白和HBVDNA聚合酶装配在起形成新的病毒颗粒。每个颗粒中的前基因组mRNA被HBVDNA聚合酶转录为DNA 负链,minus sense, 同时此RNA模板被降解。而负链DNA再作为模板合成正链DNA。当HBVDNA的合成正在进行时，病毒颗粒在内质网中获得包膜并从细胞中输出到细胞外.少量新的HBV颗粒仍在细胞内,并以其DNA补充细胞核内cccDNA的储备。 慢性乙型肝炎自然病史
新生儿溶血病HDN血型血清学检查标准操作规程
新生儿溶血病HDN血型血清学检查标准操作规程 1、目的 为规范输血科HDN血型血清实验诊断的技术操作，确保检测结果准确，明确HDN诊断及其原因，依据《输血实验室管理程序》4.1.9条款的要求制定本规程。 2、适用范围 本文件适用于本院输血科对HDN进行血型血清学实验诊断及其实验操作技术的规范化管理。 3、职责：输血科技术人员负责本实验的技术操作。 4、试验方法及原理 4.1试验方法：微柱凝胶卡式法 4.2原理：本微量定型系统凝胶测试法基于生物化学凝胶过滤技术和离心技术及免疫化学抗原抗体特异反应。当抗原抗体反应，抗人球试验时，血细胞发生凝集。离心时凝集块不能通过凝胶间隙而留在凝胶上层，呈阳性反应，未凝集细胞离心时可通过凝胶间隙而沉积在凝胶管底部，呈阴性反应。 5、样本采集和处理 取患儿不抗凝血1-2ml及EDTA-K2抗凝血3～4ml,24小时内送检。将不抗凝血离心分离出血清备用。 6、试剂： 5.1 0.9%的生理盐水；
5.2戴安娜合血卡； 5.3血清抗A（市售）、抗B（市售）、抗A+B（健康O型人血清）、抗D标准血清； 5.4 5%A、B及0型试剂红细胞盐水悬液； 5.5长春博迅公司的血型定型试剂卡； 7、仪器： 1)XTL-4.7细胞洗涤离心机； 2)DiaMed-ID Incubator 37 SⅠ温育器； 3)DiaMed-ID Centrifuge 12 SⅡ 7.5操作程序： 7.5.1婴儿及母亲ABO血型鉴定是检查第一步，以便考虑以后进一步检查程序。 7.5.2如母子ABO不合（母O子A、B，母A子B、AB，母B子A、AB）则按下列步骤进行患儿血液三项试验： ⑴直接抗人球蛋白试验（DAT）（微柱凝胶卡式法） 1)取患儿不抗凝血离心后，用0.9%的生理盐水配成0.8%的红细 胞悬液。 2)在戴安娜LISS/Coombs卡上标明患儿的姓名或编号，撕开卡 上的铝箔，加入配好的患儿红细胞悬液50μl。 3)将卡放入戴安娜离心机离心10分钟后判读结果。 4)结果观察： 5)阳性：红细胞凝集，在凝胶柱中或表面形成红线。
甲状腺癌血清标志物临床应用专家共识(2017 版)
甲状腺癌血清标志物临床应用专家共识（2017 版） 针对于此，中国抗癌协会甲状腺癌专业委员会组织编写《甲状腺癌血清标志物临床应用专家共识》，旨在帮助和推进各相关临床机构及专业人员在甲状腺癌临床诊疗和长期 管理方面的规范化建设，合理应用甲状腺癌血清标志物，科学辅助甲状腺癌术前、术后的临床诊断和评估。 本专家共识就甲状腺癌血清标志物检测共提出14 条推荐 条款，鉴于目前国内外可供参考的资料尤其是前瞻性资料有限，疏漏在所难免，也希望专业人士多提宝贵意见，以便今后定期修订（推荐分级见表1，推荐条款见表2）。 推荐级别的设定标准 本《专家共识》根据循证医学证据和专家意见对甲状腺癌血清标志物临床应用提出推荐意见，推荐级别如下： 表1 推荐分级 表2 推荐条款 甲状腺癌血清标志物的临床实验室检测目前多采用免疫学 检测方法，包括甲状腺球蛋白（thyroglobulin，Tg）和降钙素（calcitonin，Ctn）。Ctn 为甲状腺髓样癌（medullary thyroid carcinoma，MTC）血清检测标志物，Tg可成为分化型甲状腺癌（differentiated thyroid carcinoma，DTC）血清检测标志物。抗甲状腺球蛋白抗体（anti- thyroglobulin antibody，TgAb）
是针对Tg 产生的自身免疫性抗体，血清TgAb 的存在和量化改变对血清Tg 值测定有直接影响。癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）与部分甲状腺髓样癌患者的诊断及临床进展存在相关性，可与Ctn 一同应用于甲状腺髓样癌的血清测定。 分化型甲状腺癌（DTC） 1. DTC 术前血清学检测评估 推荐1：所有考虑行手术治疗的甲状腺肿瘤患者，术前均应检测甲状腺功能且包括血清TSH 水平（推荐等级：A）需采取手术治疗的甲状腺肿瘤患者均应检测甲状腺功能包括血清促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone，TSH)水平。评估甲状腺功能有助于帮助外科及麻醉医生判断患者行手术治疗的安全性，术前甲状腺功能的检测应该作为常规检查。对于甲状腺功能不合格的患者，应酌情进行内科治疗，将甲状腺功能调整至可手术的范围内。有研究显示［1］，甲状腺肿瘤患者如TSH 水平低于正常，其结节为恶性的比例低于TSH 水平正常或升高者。因此，TSH 水平在一定程度上对于恶性肿瘤的评估有参考意义，建议常规检测。 推荐2：Tg 不推荐用于甲状腺肿瘤良恶性的诊断鉴别（推荐等级：E）Tg 是甲状腺产生的特异性蛋白，由甲状腺滤泡上皮细胞分泌。多种甲状腺疾病均可引起血清Tg 水平升高，包括DTC、甲状腺肿、甲状腺炎症或损伤、甲状腺功
甲状腺癌血清标志物临床应用专家共识(2017-版)
甲状腺癌血清标志物临床应用专家共识( 2017 版) 针对于此，中国抗癌协会甲状腺癌专业委员会组织编写《甲状腺癌血清标志物临床应用专家共识》，旨在帮助和推进各相关临床机构及专业人员在甲状腺癌临床诊疗和长期管理方面的规范化建设，合理应用甲状腺癌血清标志物，科学辅助甲状腺癌术前、术后的临床诊断和评估。本专家共识就甲状腺癌血清标志物检测共提出 14 条推荐条款，鉴于目前国内外可供参考的资料尤其是前瞻性资料有限，疏漏在所难免，也希望专业人士多提宝贵意见，以便今后定期修订(推荐分级见表 1 ，推荐条款见表 2 )。 推荐级别的设定标准本《专家共识》根据循证医学证据和专家意见对甲状腺癌血清标志物临床应用提出推荐意见，推荐级别如下： 表 1 推荐分级表 2 推荐条款甲状腺癌血清标志物的临床实验室检测目前多采用免疫学检测方法，包括甲状腺球蛋白(thyroglobulin , Tg)和降钙素(calcitonin , Ctn )。Ctn 为甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma ， MTC )血清检测标志物， Tg 可成为分化型甲状腺癌( differentiated thyroid carcinoma ， DTC ) 血清检测标志物。抗甲状腺球蛋白抗体 ( anti- thyroglobulin antibody ， TgAb ）是针对 Tg 产生的自身免疫性抗体，血清TgAb 的存在和量化改变对血清 Tg 值测定有直接影响。癌胚抗原（ carcinoembryonic antigen ，CEA ）与部分
甲状腺髓样癌患者的诊断及临床进展存在相关性，可与 Ctn 一同应用于甲状腺髓样癌的血清测定。 分化型甲状腺癌（ DTC ） 1. DTC 术前血清学检测评估 推荐 1 ：所有考虑行手术治疗的甲状腺肿瘤患者，术前均应检测甲状腺功能且包括血清 TSH 水平（推荐等级： A ）需采取手术治疗的甲状腺肿瘤患者均应检测甲状腺功能包括血清促甲状腺激素（thyroid stimulating hormone ， TSH） 水平。评估甲状腺功能有助于帮助外科及麻醉医生判断患者行手术治疗的安全性，术前甲状腺功能的检测应该作为常规检查。对于甲状腺功能不合格的患者，应酌情进行内科治疗，将甲状腺功能调整至可手术的范围内。有研究显示 [ 1 ]，甲状腺肿瘤患者如 TSH 水平低于正常，其结节为恶性的比例低于 TSH 水平正常或升高者。因此， TSH 水平在一定程度上对于恶性肿瘤的评估有参考意义，建议常规检测。推荐 2 ：Tg 不推荐用于甲状腺肿瘤良恶性的诊断鉴别（推荐等级： E） Tg 是甲状腺产生的特异性蛋白，由甲状腺滤泡上皮细胞分泌。多种甲状腺疾病均可引起血清 Tg 水平升高，包括DTC、甲状腺肿、甲状腺炎症或损伤、甲状腺功能亢进等，目前检测试剂无法区分「正常组织源性」和「肿瘤源性」的Tg，因此血清 Tg不能鉴别甲状腺肿瘤的良恶性［2-4 ］。关于术前血清 Tg 检测对甲状腺癌诊断及预后影响的价值有待更多研究。推荐 3：Tg 与 TgAb 可作为甲状腺癌术前常规检测，且建议两者
(检验科)临床输血标本采集要求和流程
晋江市医院晋南分院 输血标本采集要求和流程 输血是临床救治危重病人的手段之一，为了受血者得到安全、有效、准确、无误的治疗，标本的正确采集是最为重要的环节，对临床各科送检的血型血清学检测标本（定血型、配血、备血）有如下要求： 1.医师确定输血后，病房护士应根据《输血申请单》的信息准备标本采集试管，到床边核对病人姓名、性别、床号、住院号并贴上标签。 2.抽静脉血2-4ml血（用EDTAK抗凝），随即在床旁注入贴有正确无误标签的试管内，不准离开床边后再贴标签。未查输血前相关传染病指标检验的，要同时抽一管不抗凝血，填写输血前检查申请单送检验科。 3.由专门人员将受血者血标本与《输血申请单》、《输血记录单》、《领血单》一起送到输血科，在标本接收登记本上登记，双方逐项核对后验收并签字。 注意事项： 1.标本不能溶血，因溶血会掩盖配血不合的异常反应。不许抽取胸,腹腔等处积血作配血标本。严禁从正在输液的输液管内抽取血样。 2.因右旋糖酐对配血有干扰,故应在病员输注前进行采血。 3.配血标本必须是输血前3天之内的，超过3天的标本不能代表当前病人的免疫学状态。特殊情况下（如妊娠、病人血管条件差、采
血困难者）也可例外，适当延长到5天。 4.输血科收到血样应逐项核对，如对血样与病人身份有怀疑，或血样质量不合格，应要求重抽，不允许随意修改错误的标签或错误的《输血申请单》或用不合格血样配血。 5.合格血样如不需配血，应按送检时间分别放入4℃冰箱内位置保存，输血标本至少保存7天。 不合格标本拒收的条件： 血量过少、溶血、非EDTA抗凝的血标本，标签模糊，字迹不清，标本与《输血申请单》信息不符或对患者身份有怀疑等有输血安全隐患的情形。
新生儿溶血病血清学检查操作规程
新生儿溶血病血清学检查操作规程 原理 新生儿溶血病是由母婴血型不合引起，可见于ABO、Rh及MN等血型系统。胎儿和新生儿红细胞被来自母亲的IgG抗体包被，并在婴儿的单核-巨噬细胞系统（网状内皮系统）受到免疫性破坏，出现溶血，表现出相应的症状。病情严重程度因个体差异、抗体类型、抗体效价等不同而异。 目的 规范新生儿溶血病血清学检查操作；查找新生儿溶血病发生的原因，协助临床进行实验室诊断及治疗；保证临床用血的安全性和有效性。 职责 输血科技术人员负责新生儿溶血病血清学检查。 适用范围 母婴血型不合引起的新生儿溶血病的血标本。 支持文件 《中国输血技术操作规程》（血站部分）.天津：天津科学技术出版社1997 《输血技术学》第2版.北京：人民卫生出版社，2002 《输血科（血库）工作手册》莞市中心血站2006 材料或设备 1、材料抗-A、抗-D定型试剂、抗球蛋白试剂、ABO反定型试剂红细胞、筛选细胞、谱 细胞、生理盐水、新生儿静脉血、产妇及患儿父亲血标本 2、设备血清雪专用离心机、电热恒温水浴箱、水浴振荡仪、显微镜、小试管、滴管、小 玻棒 操作步骤 一、血标本采集及处理 采集患儿及其父亲与母亲血标本各3-5ml，分离出血清，配制3%-5%红细胞盐水悬液。 如果患儿血标本为不抗凝血，则在一小玻璃漏斗颈部置一适当大小的棉球上，一边加生理盐水，一边用玻棒挤压血块，收集漏斗下面的红细胞悬液。 二、患儿血标本 具体操作执行《ABO和Rh血型鉴定操作规程》。ABO血型测定只做正定型。 1、直接抗球蛋白试验 具体操作执行《抗球蛋白操作试验规程》中的直接抗球蛋白试验部分。 2、游离抗体检测 ⑴、取小试管3支，分别标明A、B、O细胞，每管加患儿血清2滴，再分别加入3%-5% 的A、B、O、反定型试剂红细胞悬液1滴。 ⑵、37℃致敏1h后取出，若发生凝集，不必继续往下做。 ⑶、若不凝集，用盐水充分洗涤3次反应物后加入抗球蛋白血清1滴。1300g离心15s，轻 轻悬浮细胞，肉眼观察凝集反应，记录结果。若肉眼不见凝集，以显微镜检查。按表一析结果。