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Southern blot(自总结2)

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Southern blot (J 版)

1. 提取植物总DNA (CTAB法)

试剂:

1) 2×CTAB提取缓冲液(低于15℃会析出,加入材料前先65℃预热)

0.1 mol/L Tris-Cl (pH 8.0)

1.4 mol/L NaCl

20 mmol/L EDTA (pH 8.0)

20 g/L CTAB (2%)

20g/L PVP-40(2%)

使用前加入2% (体积比) 的巯基乙醇。

步骤:

1)提取前将植物材料在暗处放置24小时,以降低材料的淀粉含量。

2)剪取大约1g 叶片,置于研钵中,倒入液氮研成粉末(一定研磨细致,非常重要),分装

入2ml离心管中(样品约占0.5ml的体积),每管加入900ul CTAB提取缓冲液,温和彻底的混匀,静置,使裂解彻底。

3)65℃水浴保温1-1.5小时。

4)冷至室温后加900ul 酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),充分温和混匀直到叶片粉末由绿

转白(水相,酚相混匀成乳状液)。

5)室温下13,000 rpm离心10 min,吸取上层水相。

6)取上清(约900ul)再用等体积的氯仿:异戊醇 (24:1)再抽提一次。 13,000 rpm离

心10min。

7)取上层水相(约700ul),加入2倍体积无水乙醇沉淀DNA。小心倒出每管中液体,将

絮状DNA沉淀收集到一个新的1.5ml EP管中(同一个样品)。

8)用70%乙醇洗涤沉淀3-5次,每次将沉淀适当浸泡以充分洗涤,最后一次稍加离心,将

洗涤液尽量去除干净,通风橱中晾干约10min左右(不要过分干燥)。

9)加200ul灭菌的去离子水(或者TE),并加入2ul Rnase A(10mg/ml),37℃保温30-

60min溶解沉淀,充分混匀,并消化RNA。(可直接到第11步)

10)(可省步骤)如需做此步骤,则上步中需用700ul ddH2O溶解沉淀,37℃保温消化RNA

后再用等体积氯仿:异戊醇 (24:1)抽提,并离心,取上清。

加入1/10体积的NaAC(3M,pH5.2)和2-2.5倍体积的无水乙醇,-20℃沉淀30min-1hr,10000rpm离心10分钟。

70%乙醇洗涤沉淀3-5次,干燥,用200ulTE溶解沉淀,4℃溶解过夜。

11)取2ul走0.7%的琼脂糖凝胶,检测所提DNA的质量。(上样DNA需要充分混匀)

12)电泳同时可用紫外分光光度计测量DNA的纯度,浓度(仅参考)。

13)选取有代表性的2-3个DNA样品(即电泳显示浓度最大和最小的样品),稀释10倍后

用精定量marker进行电泳定量。

A260/A280=1.8

A260/A230=2-2.5

2. 制备地高辛标记探针(详见kitII P9)

试剂:

double distilled water(ddH2O):稀释DNA

EDTA(0.2M, pH8.0 ):终止标记反应

DIG-High Prime (kit):瓶1,防止反复冻融(-20℃保存)

A.目的基因探针标记(随机引物法):20ul体系

(1)1ug (至少300ng)模板DNA,用无菌ddH2O稀释到16ul。

(2)沸水浴煮10min,立即放入冰中。

(3)混匀DIG-High Prime (瓶1),加4ul到变性DNA中,混匀,稍加离心。

(4)37 ℃反应过夜(约20小时)。

(5)加入2ul 0.2M EDTA(Ph8.0)或65℃ 10min 终止反应。

B.Marker探针标记 (随机引物法):

取3ug λDNA/Hin dIII Marker,用无菌水将体积补到16ul,沸水浴中煮10min,立即放入冰中。其他同上。

探针标记效率的评估(对探针定量):(Kit P12)

试剂:

●Washing buffer:洗去未杂交的抗体

●马来酸 buffer:稀释封闭液

●检测buffer(pH9.5):调节pH值

●10×Blocking solution(kit ,瓶6):用马来酸 buffer稀释到1×。(现配现用)

●Antibody solution(kit):每次使用前需要将anti-digoxigenin-AP(瓶4)以

10000rpm离心5min,然后小心从上层取需要量,用blocking solution以1:10000

的比例稀释。

eg.可取1ul稀释到10ml。

直接检测方法估计探针标记效率:

一系列稀释度的DIG标记探针直接点在膜上,同时一系列已知稀释度的DIG标记的对照探针也点在膜上,通过标准检测过程显示出来。(具体操作步骤见Kit)

3. 酶切

植物总DNA的用量一般为5-15 μg (例如水稻约为5ug, 兰花和烟草约为12-15ug),选用在目的基因内无切点或有单一切点的酶进行酶切。同时切质粒作为正对照,切未转基因的植物材料的总DNA作为负对照。

1)酶切体系(以EcoR I切为例):切200ul体系

总DNA 150ul (5-15ug)

H2O 22ul

buffer H 20ul

EcoR I 8ul

37℃酶切过夜(8-12h)。

2) 取2ul电泳检测酶切结果。酶切完全的DNA应呈均匀的弥散状。(切记!!)

3) 酶切完全后加水,将体积补充到600ul,加600ul 24:1的氯仿:异戊醇抽提,13,000 rpm 离

心5 min,取上层水相。

4) 加入1/25体积的5M NaCl,2倍体积无水乙醇,-20℃沉淀两小时以上(或者过夜)。

5) 13,000 rpm (最好4℃)离心10 min,70% 乙醇洗涤沉淀,抽干。

6) 用30ul水溶解沉淀。

4. 电泳、转膜

试剂:

步骤:

1) 用30 μl 水溶解酶切后沉淀的DNA,65℃水浴保温10min,立即放到冰上。

2)冷却后上样品,走0.8% 琼脂糖凝胶(进口琼脂糖),恒压60V电泳3-4小时,电泳槽

周围加冰。

样品λDNA/Hin dIII Marker 质粒正对照未转基因负对照转基因材料

上样量35ng 5ng 5-15ug 5-15ug

3)溴酚兰距加样孔6-8 cm左右时停止电泳。切掉加样孔及多余的胶,切掉左下角作标记。4)将凝胶浸入200ml, 0.25 M HCl中进行脱嘌呤处理约5-10 min (若检测条带都小于10kb,可省此步) 。

5)将凝胶取出在去离子水中漂洗一下后,浸入变性液中, 2×15 min

6)将凝胶取出,在去离子水中漂洗一下,然后浸入中和液中, 2×15min。

7)将凝胶取出在去离子水中漂洗一下后,进行毛细转移。

8)DNA的毛细转移:大培养皿中盛20×SSC →上架玻璃板→玻璃板上铺厚滤纸→赶气泡→将凝胶加样孔朝下放在滤纸桥上→周围用Parafilm膜盖住→胶上放等大的尼龙膜→赶气泡→膜上放四层与膜等大的滤纸→赶气泡→上放10 cm厚的纸巾→放玻璃板→上压500 g重物。

9)毛细转移24 h,取出膜在2×SSC中洗一下,夹于滤纸中,80℃烤膜2 h。

试剂:

步骤:

1)预杂交:将膜浸入预热到杂交温度的(65℃)DIG Easy Hyb中(10ml /100cm2膜),在杂交箱中65℃,60 rpm,预杂交至少30min(可延长到1h)。

2) 将DNA探针(约25ng/ml DIG Easy Hyb)在100℃变性5 min后,立即放到冰上,冷却2

min。

4)将变性的DNA探针加到预热的(65℃)DIG Easy Hyb中(3.5ml /100cm2膜),轻柔混

匀,避免泡沫。

5)倒掉预杂交液,将杂交液倒入杂交瓶中,65℃,60 rpm,杂交12-16小时。

6)杂交结束,回收杂交液,-20℃可保存1年,再用时68℃加热10min重新变性探针。

1)低严谨性(高盐,低温):充足的2×SSC+0.1% SDS,室温 60 rpm 洗涤2×5 min。2)高严谨性(低盐,高温):0.5×SSC+0.1% SDS(预热到洗涤温度),60 rpm 洗涤2×

15 min。

注:如果探针>150 bp 且G/C% 较高,应当在68℃洗膜;短于100bp时,洗涤温度同杂交温度。

7. 检测:应用化学发光检测法,所有操作都在室温进行

步骤:

1)杂交结束并洗膜后,在Washing buffer中短暂冲洗膜约1-5 min。

2)在80ml Blocking solution 中封闭30 min。(轻摇)

3)在20ml Antibody solution 中反应30 min。

4) 转移膜入新容器,用Washing buffer洗两次,每次15min。

5)在20ml Detection buffer中平衡2-5min。

6)将膜DNA面朝上小心放入杂交袋中,吸取1ml CSPD ready-to-use(Kit瓶5)均匀应用到膜上,立即将杂交袋的上层盖在膜上,使底物均匀布满膜表面,并且避免气泡产生。

室温反应5min 。

7)挤出多余液体,将杂交袋的边缘封住。(防止膜干燥)

8)将膜放在37℃,10 min ,以强化发光反应。

9)曝光X-胶片15-25min,观察结果。

7. 检测:应用化学发光检测法,所有操作都在室温进行试剂:

《毕业个人总结》 毕业个人总结(一): 时间过得真快,不经意间我即将和大学挥手告别。回首这四年的校园生涯和社会实践生活,有太多的回忆。大学的第一个学期在憧憬与新奇中飞快的度过了,这是一个崭新的世界,是一座通向社会的桥梁,那时的我们刚刚迈上。 大学是挑战自我,充实自我,为实现人生价值打下基础的平台。我们总能一次又一次更加深刻的了解自己,反省自己,找到更适合自己的道路。回忆起刚刚入学的情景,同学间初次见面的扭捏与欣喜似乎还在眼前;军训时,操场上的飒爽英姿和病榻前的关怀问候随处可见;大学城的日子里,每一天清晨结伴从宿舍走到教学楼,午后结伴去食堂用餐,夜幕中结伴在校园漫步,处处都洋溢着青春的笑脸,就连浓雾中的晨练也成为一道不可多得的风景线,至今令人无法忘怀。 进入大学,首先是一次思想的进步,我告诉自己,我已经是一个大学生,在心智上就应逐渐成熟起来,凡事要首先自己独立进行思考,沉着冷静得出结论。我能做到用心要求进步,用心靠近党组织,并在第一学期就向党组织提交了入党申请书,坚决拥护中国共产党。关心国家大事,让自己的思想紧紧跟上时代的步伐,时刻听从党的召唤,始终拥护党的纲领。我一向在追求人格的升华,注重自己的品行。 在大学生活中,我坚持着自我反省且努力的完善自己的人格。利用课余时间阅读《菜根谭》等书籍,这对自己有所帮忙,越来越认识到品行对一个人来说是多么的重要,关系到是否能构成正确的人生观世界观。所以无论在什么状况下,我都以品德至上来要求自己。无论何时何地我都奉行严于律己的信条,尊崇诚实做人的宗旨,并切实的遵行它。 作为一名大学生,首先,最重要的任务必须是完成自己的此阶段的学业。大学是一个培养具有科学文化素质青年的殿堂,踏过高考的千军万马,走过人生第一座险隘的独木桥,成功的迈进大学的校门,无论是怀着怎样的情绪,我想我没有理由不好好学习。但那不得不承认的是,大学的课程的确和以前大不相同,难度的加深、数量的增加、学习方法的巨大改变,带来了一些问题,例如有一段时间,听课听不懂,做也不会做,想请教被人却不明白从何做起,这样除了刻苦的学习之外,还要摸索适合自己的学习方法,一切都是全新的挑战,但是还好,我顺利的完成了第一学期的学习任务。 回顾自己走过的路,从中学到大学,是人生的重大转折,大学生活的重要特点表此刻:生活上要自理,管理上要自治,思想上要自我教育,学习上要求高度自觉。尤其是学习的资料、方法和要求上,比起中学的学习发生了很大的变化。要想真正学到知识和本领,除了继续发扬勤奋刻苦的学习精神外,还要适应大学的教学规律,掌握大学的学习特点,选取适合自己的学习方法。 大学的学习既要求掌握比较深厚的基础理论和专业知识,还要求重视各种潜

2020生产部门安全生产工作总结 生产部可以说是一个公司最重要的地方,毕竟要先有产品才能产生效益,下面就是小编给大家带来的2020生产部门安全生产工作总结,希望能帮助到大家! 2020生产部门安全生产工作总结一 20xx年,在公司的正确领导下,在各兄弟部门的支持下,我根据公司的工作精神与工作部署,结合生产部经理的岗位职责与工作实际,创新工作思路、转变工作作风,认真踏实努力工作,较好地完成了各项生产工作任务,取得一定成绩。现将20xx年工作情况具体总结如下: 一、生产任务完成情况 20xx年,我带领生产部干部员工团结协作,齐心协力,认真努力工作,较好地完成了生产任务,生产运行正常,无生产安全事故,全年完成xxx台柴油发电机组生产任务。 二、全年采取的主要工作措施 (一)加强思想教育,提高员工凝聚力 20xx年,我切实加强对员工的思想工作,开展国情、厂情教育,培养员工的感恩心。通过开展思想教育工作,使生产部每个员工树立正确的世界观、人生观和价值观,提高思想政治觉悟,热爱企业,热爱工作岗位,做到心往一处想,劲往一处使,增强执行力,提高工作效率,确保完成公司下达的生产任务。 (二)加强设备管理,确保生产正常进行 设备是重要的生产工具,对于完成生产任务,提高柴油发电机组质量具有极其重要作用。我切实加强设备管理,一是教育员工要爱惜设备,按操作要领使用设备,精心维护设备,保持设备的完好率和正常运行。二是开展设备使用、保养辅导,利用晨会、班会等方式对员工进行辅导,使他们懂设备结构,懂设备检查的作用及方法,懂设备的维护保养,懂设备操作规程。在工作中,使用好设备,保养好设备,稳定设备功能,确保设备正常运行,满足生产需要。 (三)加强质量管理,确保产品质量合格 我知道我们企业技术力量比较薄弱,产品质量上不去,返工较多。所以,我作为生产部

单位安全工作总结各位读友大家好,此文档由网络收集而来,欢迎您下载,谢谢 是XX最新发布的《单位安全工作总结》的详细范文参考文章,觉得应该跟大家分享,看完如果觉得有帮助请记得收藏。篇一:公司安全生产工作总结xxxxxxx有限公司在2013年度中认真贯彻《安全生产法》和上级关于安全生产工作的指示精神,牢固树立并贯彻落实“安全第一、预防为主”的方针,切实做好防火灾、防盗窃、防破坏、防爆炸、防事故、保安全的“五防一保”工作,建立健全了安全生产责任制,实行“谁主管,谁负责”的原则,严格落实各项规章制度,加强安全生产组织领导,完善安全生产管理体系、严格安全生产制度,加强安全劳动保护,建立健全安全生产责任制,有力地促进了公司生产的安全、平稳运行。 一、抓领导,落实安全生产责任制

公司成立了由总经理xxx任安全生产领导小组组长,xxx副总、xxx主席、xxx副总为副组长的公司安全领导小组,成员由各部、中心经理组成,具体负责公司的安全生产领导工作,做到责任到人,措施到位。 抓责任制的落实,公司与各部、中心经理签订安全生产责任书,将安全生产责任制的签订工作逐级延伸,逐级落实,形成一级抓一级、一级对一级负责,安全生产工作齐抓共管的局面。要求各部、中心把安全生产工作落到实处。实行安全事故行政责任追究制。我们把安全生产工作列入责任制考核范围。要求各部门、范文写作中心具体负责,按照“谁主管,谁负责”的原则,对由于发生重大事故而处理不当的,追究责任。在全体员工的共同努力下,一年来,由于领导到位,责任落实, 措施得力,没有发生任何安全生产事故。 二、抓检查,消除安全事故隐患

抓好安全生产工作,检查是保障。公司把安全生产检查常态化、标准化,在安全生产检查中,做到“三个结合”:一是检查与整改隐患相结合;二是检查与责任追究相结合;三是检查与建立长效机制相结合。 抓企业安全工作,实现企业生产与安全双赢。安全是企业生存发展的保障,关系到国家、集体财产和人民生命安全。通过不断进行检查督促、严格处理存在的安全隐患,做到隐患不排除坚决不过。做到了安全生产设备设施合格、齐全,电线线路整齐、过关,安全通道畅通无阻,人员安全生产综合素质合格。做到安全第一,生产第一,使企业在安全稳定中取得的发展。 三、抓制度落实 建立健全规章制度,是加强企业基础治理,尤其是安全生产治理的重要环节。 俗话说“没有规矩,不成方圆”,规章制度是企业治理的重要依据。为了使

毕业生个人总结-个人工作总结 第一篇:最新毕业生个人总结 四年的大学生活似弹指一挥间,从刚跨入中专时的失落和迷茫,到现在即将走上工作岗位的从容、坦然。我知道,这又是我们人生中的一大挑战,角色的转换。这除了有较强的适应力和乐观的生活态度外,更重要的是得益于大学四年的学习积累和技能的培养。时间如此的短暂,四年的大学学习生活就要告别了,毕业之即,对自已四年来的大学校园生涯作一个总结。 一、在思想品德上,本人有良好的道德修养,坚定的政治方向。品行关系到能否形成正确的人生观和世界观,所以我很注重自己的品行,坚持着自我反省且努力完善自己的人格,所以无论在什么情况下,都一品德至上来要求自己,严于律己,友爱同学,乐于助人。 二、在学习方面上,能按照学校的有关规定,利用业余时间自学各门课程,积极参加集中串讲,按时完成各项作业。通过四年学习,现已掌握了所学知识,并通过了有关课程考核。在学习期间,我能自觉将所学知识用于实践当中,以“独立思考”作为自己的座右铭,时刻不忘警戒。勤俭朴素,热爱集体,以诚待人,关心同学,乐于助人,有较强的时间观念。性格乐观开朗,并始终保持良好的心态。 三、在工作上,我积极参加学校学生工作和社会实践工作。工作计划详细分明,协助老师和同学。做好班集体工作。积极参与学校勤工俭学等活动,还有自己到校外投身相关专业兼职工作。在这些过程中我认真负责,极大地锻炼了我的工作能力和积累了许多宝贵的实践经验。这是我四年学习以来的个人总结,毕业了,我会更加迫切要求自己充实再充实,完善自我的未来目标,我将以饱满的热情、坚定的信心、高度的责任感投入到新的生活环境中,去迎接新的挑战,攀登新的高峰,更好地实现自身人生价值。 第二篇:大学毕业生个人总结 个人总结 进入高等学府深造,成为一名跨世纪大学生,这是我儿时以来的愿望和梦想。在跨入绍兴文理学院校门的那一刻,我儿时的理想终于实现了,也圆了我的大学梦。大学里浓厚的文化气息和广阔的自由天地让我有了更好的发展机会和空间。我就像一块渴水的海绵,贪婪地吸收着知识;就像一只久困的鸽子,在广阔的天空中自由飞翔。正是从那时起,我便立志要成为一名思想上进,政治合格,素质过硬,在德智体诸方面全面发展的合格大学生。四年来,我不断朝着这个目标努力学习,踏实工作,努力提高自身素质,争当一名德、智、体全面发展的合格大学生。 在政治思想上,我拥护中国共产党的领导,积极向党组织靠拢,参加入党积极分子培训班,深入学习了党的基本知识、邓小平理论以及三个代表重要思想。在平时的学习中,我深深地体会到,共产主义人生观、世界观、价值观的确立和坚持不是一朝一夕的事情,也不是一劳永逸的事情,而是一个长期坚持不懈的艰苦努力的过程。惟有不断地学习,用理论来武装头脑,努力在掌握理论科学体系上下功夫,在用理论来指导实际上下功夫,在改造客观世界的同时注意改造自己的主观世界。我遵纪守法,爱护公共财产,关心和帮助他人,并以务实求真的精神热心参与学校的公益宣传和爱国活动。我关注时事,定期向党组织汇报自己的思想看法,及时与党员和其他入党积极分子沟通交流。在这个过程中,我树立了正确的入党动机,规范自己的思想和言行,努力向一名合格的共产党员靠拢。经党组织严格审查,我被批准于

部门安全生产工作总结 部门安全生产的工作总结 总结一 一、领导重视,措施得力 我局党组和领导班子,非常重视安全生产工作,把此项工作作为重中之重。一个月召开一次局领导班子成员会议,研究部署安全生 产工作,及时分析排查安全隐患,采取有效措施消除隐患,并及时 上报安全生产形势登记表。对二级机构实行局长负责制,谁主管谁 负责,深入基层调查研究,掌握第一手资料。每半年大检查一次, 每逢重大节假日,抽调人员认真细致检查,保证各项工作正常开展。 二、加强学习,提高认识 经常组织,全系统干部职工搞好安全生产法规,条例及有关知识学习,全年共组织规模较大学习5次,每位职工都有学习笔记。撰 写心得体会等文章80余篇,办安全生产学习园地,板报36期。积 极参加县安全工作会议及市、县学习班。通过认真学习,提高全系 统职工的安全生产意识,增强了安全生产责任,为创造安全生产年 打下了坚实的基础。 三、搞好隐患排查,积极落实整改 我局因工作性质,主要的安全隐患有以下几个方面:1、文物安全;2、文化娱乐场所安全;3、交通车辆安全;4、节假日期间机关办 公安全。针对上述问题,主要采取以下措施:一是文管所职工每天 24小时值班,主要领导带班,值班有考勤,有记录,出现什么问题 及时向县、市有关部门汇报,保证文物安全。二是加大对文化娱乐 场所检查力度,对无证违规超时经营网吧及相关娱乐场所,该关停 的关停,该整顿的整顿,该处罚的严厉处罚。对县电影院因存在消 防安全隐患,实行封闭。确保文化娱乐场所安全。三是所有交通车 辆晚上一律停在可靠安全场所,规定司机在开车期间一律不准喝酒,

违者停职罚款。节假日期间车辆不经允许一律封存,禁止外出。四 是我局机关及二级机构办公场所,全部配有消防器材,每天都有专 人24小时值班,主要领导带班,保证办公场所安全。 四、依法行政,加大文化市场管理力度 我局文化市场管理执法人员经常深入街道、乡镇文化市场,进行宣传教育、监管督查,全年出动车辆100余台(次),组织检查人员300多人(次);查处各类违法案件40余起,其中大案要案5起;没收 非法出版物3万余册;打击游商书贩10余人;收缴有害卡通读物 1000册;查处超时经营网吧7家,取缔黑网吧5家;收缴具有赌博功 能的游戏机15台;销毁盗版影碟800余盘,查处无证经营音像点3个;查封盗版图书经营点4个。有力打击了违法犯罪活动,进一步净 化了我县新闻出版文化市场。 总之,一年来,文化局领导班子及文化系统全体职工,团结一致,努力工作,圆满完成了全年安全生产工作目标任务,取得了可喜的 成绩,但与县安委会、安监局的要求还有一定差距,我们决心,在 新的一年,以xx届六中全会精神为动力,深入践行“xxxx”重要思想,与时俱进,开拓创新,使我局的安全生产工作再上一个新台阶。 总结二 本社区安全生产消防工作在上级部门的直接指导和社区党委的领导下,按照上级有关文件精神,结合本社区实际情况扎实地开展工作,贯彻落实“安全第一、预防为主、综合治理”方针,树立安全发展 理念,围绕上级工作部署和安全生产工作任务,致力消除安全隐患,将事故苗头消灭在萌芽之中,进一步落实了安全生产责任制。所以 这一年来我社区安全生产态势平稳。没有发生重大伤亡安全生产事故。基本做了以下几方面工作: 一、明晰安全生产办公室人员分工和责任,强调日常巡查制度,消除安全隐患。 1)加强监管人员的工作责任感。监管人员一定要十分清楚自己背负的责任。有责任才有压力和动力,干好干错一个样绝对调动不了 积极性。

企业安全工作总结范文3篇 企业安全工作总结范文3篇 时时想安全,处处要安全,安全人人抓,幸福千万家,所以企业的安全一定要重视。下面是关于企业安全工作总结范文,欢迎阅读借鉴! 企业安全工作总结1 我公司在上级主管部门的领导及社会各界人士的帮助支持下,全体员工共同努力,扎实工作,取得了较好的社会效益和经济效益,全年实现总产值XXX万余元。全面完成了各项经济指标,同时全年没有发生一起安全责任事故,安全生产局面进一步稳定,现将一年来的工作回顾作工作总结如下。 一、执行合同方面 对于每个承包的工程项目我们企业都依法与建设单位签订工程承包合同,并含有明确的双方对安全管理的责任,合同并经县工商局鉴证。对于应办理施工备案登记的工程项目在开工前即办理备案登记手续,遵守合同承诺,公司与项目经理同时签订安全管理目标责任书,及时为参加施工的员工办理意外伤害险。保证工程项目按合同规定的目标管理要求顺利竣工。 二、工程质量方面 一直以来我们企业对所施工的工程项目质量相当重视,在工程质量监督机构的监督检查下,我们依据设计文件和技术标准进行精心施工,对于工程使用的设备和主要建筑材料、构件必须具有产品质量出厂检验合格证明和技术标准规定必要的进场试验报告。对于每个完成的工程项目都签署工程质量保修证书。20XX年我们主要重视工程管理,对于符合条件的施工班组继续签订协议,各施工班组长在质量、安全和施工进度上全面向公司负责,公司定期召集各班组长开会,交流通报一些工程管理上的进展和问题,对于施工中发现的问题进行解决,这样使得班组长们的工程质量管理意识得到了增强。在材料、施工上加强管理,公司工程部人员经常到工地进行监督检查,发现问题及时处理。 材料部严格把好材料的质量关和价格关,及时组织工程施工所需的物资材料。对每个工程项目,首先进行成本核算,根据预算,承包到施工班组,实行奖赔制度,凡工程中所需的材料,必须由工程部根据预算列出工程材料清单,仓库按单发料,这样一来杜绝了浪费和外流现象,提高了工程的效益,同时把责任制落实到每一个施工人员身上,广大员工责任性普遍得到加强,基本杜绝了由于质量引起返工而浪费材料的现象。面对市场建筑装饰的激烈竞争,我公司认识到提高服务质量和保证施工工程质量同等重要。我们认真做好工程的保养维修工作,专门设立了维修班组,由专人负责,做到了有求必应,及时为用户排扰解难。 三、安全生产方面

优秀大学毕业生个人自我总结 本文是优秀大学毕业生个人自我总结,仅供参考,希望对您有所帮助,感谢阅读。 四年的大学生活似弹指一挥间,从刚跨入中专时的失落和迷茫,到现在即将走上工作岗位的从容、坦然。我知道,这又是我们人生中的一大挑战,角色的转换。这除了有较强的适应力和乐观的生活态度外,更重要的是得益于大学四年的学习积累和技能的培养。时间如此的短暂,四年的大学学习生活就要告别了,毕业之即,对自已四年来的大学校园生涯作一个鉴定。 一、在思想品德上,本人有良好的道德修养,坚定的政治方向。品行关系到能否形成正确的人生观和世界观,所以我很注重自己的品行,坚持着自我反省且努力完善自己的人格,所以无论在什么情况下,都一品德至上来要求自己,严于律己,友爱同学,乐于助人。 二、在学习方面上,能按照学校的有关规定,利用业余时间自学各门课程,积极参加集中串讲,按时完成各项作业。通过四年学习,现已掌握了所学知识,并通过了有关课程考核。在学习期间,我能自觉将所学知识用于实践当中,以“独立思考”作为自己的座右铭,时刻不忘警戒。勤俭朴素,热爱集体,以诚待人,关心同学,乐于助人,有较强的时间观念。性格乐观开朗,并始终保持良好的心态。 三、在工作上,我积极参加学校学生工作和社会实践工作。工作计划详细分明,协助老师和同学。做好班集体工作。积极参与学校勤工俭学等活动,还有自己到校外投身相关专业兼职工作。在这些过程中我认真负责,极大地锻炼了我的工作能力和积累了许多宝贵的实践经验。 这是我四年学习以来的个人总结,毕业了,我会更加迫切要求自己充实再充实,完善自我的未来目标,我将以饱满的热情、坚定的信心、高度的责任感投入到新的生活环境中,去迎接新的挑战,攀登新的高峰,更好地实现自身人生价值。

Southern Blot原理及实验方法 Southern Blot原理及实验方法原理: 将待检测的DNA分子用/不用限制性内切酶消化后,通过琼脂糖凝胶电泳进行分离,继而将其变性并按其在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上,固定后再与同位素或其它标记物标记的DNA或RNA探针进行反应。如果待检物中含有与探针互补的序列,则二者通过碱基互补的原理进行结合,游离探针洗涤后用自显影或其它合适的技术进行检测,从而显示出待检的片段及其相对大小。 用途:检测样品中的DNA及其含量,了解基因的状态, 如是否有点突变、扩增重排等。 试剂和器材 一、试剂 变性液:1.5mol/L NaCl,0.5mol/L NaOH。 中和液:0.5mol/L Tris-HCl (pH=7.5),1.5mol/L NaCl。 20×SSC:3mol/L NaCl,0.3mol/L 柠檬酸钠。 以上溶液均在100Kpa灭菌20分钟。 2×SSC:用无菌移液管吸取20×SSC溶液5mL,加无菌水45mL。 6×SSC:用无菌移液管吸取20×SSC溶液15mL,加无菌水75mL。 二、器材 22cm×15cm瓷盘 操作方法 1. 在琼脂糖凝胶上电泳分离DNA。取出凝胶,切去边缘多于部分,EB染色,在紫外灯下照相(放一标尺,可从像片中读出DNA迁移的距离)。 2. 将凝胶置于200mL变性液中,浸泡45分钟,并温和地不断振荡,使凝胶上的ds-DNA转变为ss-DNA,然后用重蒸水冲洗凝胶几次。 3. 用中和液浸泡凝胶并不断地振荡45分钟,将凝胶中和至中性。防止凝胶的碱性破坏硝酸纤维膜。 4. 取一个瓷盘,在底部放一块玻璃板(或一块海绵)使盛器内的20倍SSC转移滤液低于玻板表面,在玻板表面盖一张3mm的二号滤纸,滤纸两边浸没于20倍SSC溶液中,在玻璃和滤纸之间,赶掉所有的气泡。

公司安全生产工作总结 公司安全生产工作总结 一、安全生产工作回顾 ,公司安全生产工作在集团公司的正确领导下,在相关部门的大力支持下,始终贯彻“安全第一,预防为主”的方针,紧紧围绕年初制定的安全生产目标,以安全为基础,落实各级安全生产责任制,完善各项规章制度,加强安全基础管理,把安全生产工作贯穿到各项工作中,全年安全生产无轻伤及以上人身事故,未发生火灾火险事故,未发生食物中毒事故、未发生同等责任以上的交通事故,实现了三个百日无事故的记录,顺利完成了年初制订的安全生产目标。 回顾,我们主要做了以下几方面的工作: (一)、加强安全生产组织机构,认真落实安全生产责任制,积极推进制度建设。 今年6月份以来,公司设立了主管安全生产的副总经理,成立了质量安全部,重新对安全生产委员会及安全网络人员进行了调整,明确安全职责。公司进一步加强安全管理,夯实安全生产基础,努力把安全工作做好、做细。 公司严格按规定召开安全生产委员会会议和安全网络会议。每月一次的安全生产委员会会议总结前一阶段安全工作情况,对存在的问题进行分析和研究,制订并采取相应的措施。每月一次的安全网络会议检查各分(子)公司前一阶段安全生产情况,布置下一阶段安全生产,使公司安全工作作为一个整体有效运作起来。 针对公司机构调整和生产经营的要求,,公司不断完善安全管理制度,重新修订了《公司各级人员安全生产责任制》,编写了《公司消防管理制度》、《公司安全生产管理制度》、《公司安全生产考核制度》、《公司事故、不安全事件调查制度》、《公司消防管理制度》、《安全工器具管理制度》等一系列管理制度,目前这些制度部分已正式实施,部分正在讨论定稿阶段。安全生产网络体系初具规模。 (二)认真开展安全检查,及时落实今年以来历次安全检查中发现问题的整改工作。 今年以来,集团公司对公司进行了三次安全检查,共提出问题32项,截止11月30日,已完成整改的有30项,办理延期2项,完成率为93.75%。 10月15日至30日,公司开展了秋季安全大检查活动。通过这次安全大检查,发现存在问题及安全隐患共53项,其中列入公司安全整改计划共9项。到目前为止,各项整改工作均按整改计划进行中。 (三)、做好安全管理例行工作,夯实安全生产基础。 公司下属企业管理模式多,涉及行业多,要管理好整个公司的安全工作,必须要认真做好安全基础工作,把安全工作的每一方面进行细分,并在管理上予以加强。,公司着重在以下几个方面加强了个管理: 1、逐步完善和建立安全台帐。今年以来,公司在安全工器具管理、工安全教育管理、安全检查及安全整改管理、特种设备管理、安全统计等方面逐步建立了台帐。 2、完善安全闭环管理。针对集团公司春检中提出的公司安全闭环管理不够好的问题,9月份,公司加强了安全生产的闭环管理,特别是在安全整改方面,做到安全整改布置有记录,完成后有反馈。 3、公司质量安全部从8月份开始,制定并严格执行对下属部门、分(子)公司每月至少进行一次安全检查的规定,通过检查,不仅使总公司对下属每一单位的安全生产情况有了了解,便于发现安全工作中存在的问题,而且,能及时反馈到职工对安全工作的建议和意见,便于改进安全工作的方法和程序。 4、规范外包队伍的安全管理工作。9月份,公司针对外包队伍安全管理比较薄弱的情况,制订和实施了《公司外包队伍违章扣奖暂行办法》,并加强了对外包工程的现场安全监督、检查、

建筑企业安全工作总结报告 建筑企业安全工作总结报告 我公司在上级主管部门的领导及社会各界人士的帮助支持下,全体员工共同努力,扎实工作,取得了较好的社会效益和经济效益,全年实现总产值万余元。全面完成了各项经济指标,同时全年没有发生一起安全责任事故,安全生产局面进一步稳定,现将一年来的工作回顾总结如下。 一、市场行为方面 对于每个承包的工程项目我企业都依法与建设单位签订工程承包合同,明确双方责任,合同并经市工商局鉴证。对于应办理施工备案登记的工程项目在开工前即办理备案登记手续,遵守合同承诺,决不搞任何欺诈行为,保证工程项目按合同规定的要求如期竣工。 二、工程质量方面 一直以来我们企业对所施工的工程项目质量相当重视,在工程质量监督机构的监督检查下,我们依据设计文件和技术标准进行精心施工,对于工程使用的设备和主要建筑材料、构件必须具有产品质量出厂检验合格证明和技术标准规

定必要的进场试验报告。对于每个完成的工程项目都签署工程质量保修证书。 年我们主要重视工程管理,对于符合条件的施工班组继续签订协议,各施工班组长在质量、安全和施工进度上全面向公司负责,公司定期召集各班组长开会,交流通报一些工程管理上的进展和问题,对于施工中发现的问题进行解决,这样使得班组长们的工程质量管理意识得到了增强。 在材料、施工上加强管理,公司工程部人员经常到工地进行监督检查,发现问题及时处理。材料部严格把好材料的质量关和价格关,及时组织工程施工所需的物资材料。对每个工程项目,首先进行成本核算,根据预算,承包到施工班组,实行奖赔制度,凡工程中所需的材料,必须由工程部根据预算列出工程材料清单,仓库按单发料,这样一来杜绝了浪费和外流现象,提高了工程的效益,同时把责任制落实到每一个施工人员身上,广大员工责任性普遍得到加强,基本杜绝了由于质量引起返工而浪费材料的现象。 面对市场建筑装饰的激烈竞争,我公司认识到提高服务质量和保证施工工程质量同等重要。我们认真做好工程的保养维修工作,专门设立了维修班组,由专人负责,做到了有求必应,及时为用户排扰解难。 三、安全生产方面 安全对于每个企业来说都显得尤为重要,它不仅关系到

编号:_____ 2018年大学毕业生个人思想工作总结范文 学校:_________ 教师:_________ ____年___月___日 (此文内容仅供参考,可自行修改) 第1 页共4 页

2018年大学毕业生个人思想工作总结范文 即将走上工作岗位,成为一名合格的老师,这是我儿时以来的愿望和梦想。在通过统一考试和合格体检那一刻,我想儿时的理想终于实现了,也圆满完成了我九月份能走上正式的工作岗位的梦想。我心中万分欣喜,在欣喜之余,我将对我个人近期以来做一个总结! 第一:个人基本情况。我是一个性格外向,活泼开朗的女生,喜欢结交朋友,待人真诚,因此在生活中有很多知心朋友。我对生活总持一种积极向上的态度,我想无论多么艰难的困难,只要自己能用顽强的毅力,最终困难会被克服得!因此在这次教师公招考试准备中,我每天很早起床背书到晚上十一二点还在题海中拼搏。最终我过关斩将进入了考察阶段,成为了一名准老师! 第二:学习情况。在老师眼里,我一直是他们的佼佼者。我在德智体美劳各方面都取得过优异的成绩。从小学一年级到初中,我都是班上的班干部,曾在XX年获得四川省资阳市乐至县优秀班干部。在高中和 大学学习中,我积极参加学校组织的各项活动,在人际关系,为人处 世方面得到了很好的锻炼与提升,在这里我要感谢含辛茹苦培养我的各位老师们,在这一点上,我要向我的老师们学习,努力成为一名好老师! 第三:工作情况。从大学一年级开始我就参加了很多社会实践活动,曾担任过成都摩奇兼职卡的校园代理,联通公司话务员,万家乐电器促销。特别是大三下学期,我在绵阳青义小学担任小学英语代课老师。我觉得在短短几个月的时间里,我在工作能力和与学生沟通方面得到了很好的提升。在监考了XX年高考的工作中,我对责任有了更深层次的理解,因为老师一丝不苟的工作是学生成长的一个重要条件!因此在我以 第 2 页共 4 页

Southern 杂交实验 Southern 杂交的原理是将待检测的DNA分子用限制性内切酶消化,通过琼脂糖凝胶电泳进行分离,继而将其变性并按照其在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上,固定后再与同位素或其他标记物标记的DNA探针进行反应。如果待测物中含有与探针互补的序列,则二者通过碱基互补原理进行结合,游离的探针洗涤后用显影或其他合适的技术进行检测,从而显示出待检的片段及其相对大小。 一、溶液配制 (1)20 X SSC(1000 mL) : 组分浓度 3.0M的Nacl,0.3M的柠檬酸钠 NaCl 175.32g 柠檬酸钠88.26g NaOH调PH值到7.0,高温高压灭 (2)洗涤缓冲液Washing buffer 200ml 组分浓度:0.1M Maleic acid, 0.15M Nacl; pH 7.5(20℃); 0.3%(v/v) Tween20. Maleic acid:2.32g Nacl: 1.75g Tween20 0.6ml NaOH固体约1.7g调Ph值7.5 (3)马来酸缓冲液Maleic acid buffer 200ml 组分浓度:0.1M Maleic acid, 0.15M Nacl; pH 7.5 (20oC) Maleic acid:2.32g Nacl: 1.75g Tween20 0.6ml NaOH固体约1.7g调Ph值7.5 (4)检测缓冲液Detection buffer 100ml 组分浓度:0.1M Tris-HCl, 0.1M Nacl, pH 9.5(20oC) Tris 1.21g, NaCl 0.584g

3月安全生产工作总结 3月安全生产工作总结篇一一、今年的重要工作 今年以来建发公司重视抓好交通、防火、维稳和安全生产工作。按照广州市和开发区的部署,认真贯彻落实上级有关各项文件精神,把工作重点落实到基层,抓安全到车间、库房、小区、场馆和工地。特别是年初开展的安全生产大检查,6月份开展的安全生产及公众聚集场所消防安全专项整治和第四季度开展的“百日安全无事故”活动,都紧密联系建发公司及属下各企业的实际情况,有针对性地抓好工作。在维稳方面,坚持妥善处理劳资矛盾纠纷,注意做好矛盾化解工作,建发公司上下和谐融洽,保证了各项安全。归纳起来主要有以下几点: 突出抓好“两个落实”,明确权责,分级管理,切切实实把安全生产管理工作落到实处。 建发公司高度重视安全,自觉维护稳定,明确认识到:“遵章守法、关爱生命”的核心就是引导和启发全社会重视人的生命价值,是全面落实、科学安全观,贯彻“以人为本”,构建和谐社会的重大问题,而安全与生产,和谐与纠纷又是矛盾的统一体。必须明确在生产经营与安全工作出现矛盾时,应优先解决安全问题,企业发生矛盾纠纷时,作为管理者应首先考虑化解矛盾纠纷。企业是安全生产的主体,作为企业的管理者,经营者就是要考虑在生产经营中如何减少和杜绝不安全的问题。要研究如何有效地发现和防范事故隐患,积极广泛地

树立“保证安全,人人有责”的社会责任感和法律意识。建发公司上下认真抓好“两个落实”。 1、组织落实。建发公司党委和经营班子定期倾听工作汇报,研究处理相关问题。并调整了综治工作领导小组,充实了领导力量,并将交通、防火、安全生产及维稳等工作统一领导,并下设综治办公室,负责各项工作的协调、督办和落实,各直属企业也都按要求配备和充实了相关的人员,加强领导,建全了组织。 2、责任落实。年初建发公司与属下企业签订了安全生产、消防和交通安全责任书,在6月份开展的安全生产月活动中又与建发公司本部各部门签订了责任书。为了加强工作的计划性,年初就制订了全年工作计划,还坚持每次大的活动都明确主题,做到有方案、有动员、有检查讲评。如在安全生产月活动刚开始,就召开了集团各级管理人员参加的动员会,传达和贯彻安全月活动的文件和方案。为搞好集团办公大楼的消防演练,又召开了本部全体员工、大楼保安、服务人员参加的动员会,请区公安消防处的干警和建发公司领导宣讲有关消防灭火及逃生的知识和程序。为及时交流和总结安全月活动的经验做法,又分别在下属企业召开现场会加强交流和沟通。各直属企业领导注重抓好安全生产责任制的落实。物业公司领导明确分工,及时抓好所管辖区域内消防设施维修,并召开现场会,组织义务消防队进行消防演练。监理公司把安全生产目标分解到工地,责任落实到个人,公司领导和现场安全管理人员分别下工地抓落实。岭头公司针对9家未能交出去的在安全生产管理中存在问题的企业,与区安监局有关领导

企业公司安全管理工作总结 20××年已经结束了,在20××年的工作中,我们做到了最好,在不断的发展中,我们企业经受住了金融危机的考验,顺利的度过了企业发展的最困难的时刻,相信只要我们在明年的工作中继续不断的努力,我们企业就会得到更大的发展!企业的安全管理工作也很重要,一直以来我们都是很重视的,时刻也不曾放弃! 回顾一年来,在公司各级领导的关心和工作的指导下,在和谐的工作环境中,在全体员工的共同努力下,我部门在安全生产管理上认真贯彻落实了部门经理提出的安全管理十六字方针:“安全第一,预防为主,全员动手,综合治理”的工作指导思想,狠抓安全专项管理。下面就我今年安全工作情况汇报如下: (一)完善安全设施基本管理。 安全设施的管理是全厂安全管理的重点,我部门在9月份完成全厂消防系统的安装及防护用品的分配,并设置消防器材及防护用品记录台帐,将管理责任下发到以各班组为单位的生产车间负责人身上,监督《消防器材管理制度》、《防护用品管理制度》在全厂的执行情况,安全员主要对各车间的消防系统进行检查,保证消防管道内的通水,其中我部经理提出的生产岗位兼职安全员责任制是新的安全管理理念,既要求兼职安全员每天对消防器材、防护用品例行检查,并填制检查记录,以保证其物品能在平时保持最佳状态,关键时刻能马上使用。

(二)特种设备与特种作业的管理 特种设备在公司生产运营中具有一个特殊的地位,比如压力容器、行车、等等。今年对这些设备设施加强了管理,除了制定《特种容器设备管理制度》,还对特种设备设施专门进行检查,发现问题及时检修,杜绝带病作业导致的恶性后果,使全年保持了良好的运行状态,保证了生产的正常运行。同时我部门从严查着手,规范操作,加强特种容器的安全教育,采取教育与处罚相结合的方法,在很短时间里理顺了工作,使管理走向正轨,特种作业人员坚持持证上岗,登记特种设备使用台帐,从源头把关,在招聘时没有资格证不予录用,已经录用没有证件的限期办理,逾期取不到资格的按待岗处理,从而规范了作业队伍。 (三)与政府部门的协作,建立了重大危险源信息系统。 对危险化学品进行了申报。根据区安监部门要求,每月对工厂进行安全隐患排查,实行隐患自查自改,每月接受安监局来访人员的监督。12月份根据安监局的要求在厂区内各生产工序设置了危化品标志牌,在全国化工厂遭遇“黑色九月”的时候加大监督力度,积极与市区安监团配合,准备好资料,及时进行上报,当月全厂未发生一起安全事故,向政府部门树立了良好的企业形象。 (四)开展企业安全生产工作,落实企业安全生产工作基础。 落实预防企业安全生产是我今年安全管理一项十分重要且基本的 工作。公司在20××年内的安全管理可以分为两个阶段,第一阶段:建

毕业生就业个人工作总结 时间的脚步跑得挺快的,不知不觉自己离开学校已经有三个 多月了,在这三个多月的工作实践中自己的感慨也挺多的,同时也看到了自己在不断地进步,不断地成长,出来工作之 后自己真正感受到社会的现实和生活的压力。 在这三个多月里我在佛山市三水进欣制线有限公司业务部 里的实践包括业务文员和业务助理的工作。虽然我是一个读 会计专业的学生,我没有实践会计上的工作,但是在这两份 工作中让我学到的东西也挺丰富的,而且这两份工作让我有 不同的感想。对于刚出来工作的我对工作上接触到的事情都 觉得很好奇的,因为学到的东西对于我来说也是新鲜的。在 这三个多月里面每周自己都有写下自己的工作感想和记录 自己的思想变化,因此在工作周记上也看到自己努力的成果。 记得我是在20xx年2月1日来到佛山市三水进欣制线有限公司业务部上班,刚开始的时候我觉得最大的问题是人际关系的处理,也许自己刚从学校走出这个现实的社会,自己还 很难去适应工作的环境,很难与陌生的同事进行沟通,因为 觉得我们的想法和思想根本就不同,因此自己心里面很自然 地产生一种悲观的情绪,感觉理想与现实相差太远了。另外 还有一个感想就是,其实现在这个社会上的人都看不起大学

生,觉得大学生自高自大,自以为是,对工作的适应能力是比较弱。 其实刚开始的时候自己也有这么一个想法,我会觉得自己读完大学出来了,工作上的事情对于自己来说应该是不成问题的,但当自己真正出来工作的那一刻才知道原来自己什么也不懂,那一刻才知道当初自己在学校里面学到的东西在工作上根本就用不上,当自己第一次面对一件事情不懂去处理的时候,自己也发现原来这个社会很现实,别人不会因为你是刚出来工作什么都不懂而去体谅你和同情你。工作三个多月了,工作上的酸甜苦辣自己也尝过了,同时自己也承受过很多工作上的委屈,在最无助的时候也偷偷地哭过,从眼泪掉下的那一刻知道原来自己还没有适应这个社会,自己还不够坚强。 在这三个多月里面,我对自己的表现也是很满意,同时也看到自己是怎样鼓励自己熬过这段最难受的时期,工作上看到自己每天进步一点点自己心里面挺开心的。一进来工作的时候我是当业务部一名很普通的文员,我的工作就是key业务订单进我们公司的esop系统,每天工作的事情都是重重复复的,每天的生活都是很枯燥,而我是以一种很认真的态度去做好这份工作,其实我的工作量也蛮大的,一个人把订

Southern Blot 操作流程 1、哺乳动物基因组DNA 的提取(或用OMEGA 试剂盒E.Z.N.A.TM Tissue DNA Kit ) 1、 取约30mg 样品,加入600 ul SNET ,再加入12 ul (20.2mg/ml )的蛋白酶 K ,使蛋白酶K 的终浓度为400ug/ml ; 2、 55℃振荡过夜; 3、 加入0.6 ul RNaseA ,室温下孵育10 min ,后置于65℃ 10 min ; 4、 加入300 ul Tris 饱和酚,288 ul 氯仿和12 ul 异戊醇,室温下振荡30 min ; 5、 17,000 g 离心5min ,转移上层水相(600 ul )至一新的离心管; 6、 加入等体积(600 ul )的异丙醇沉淀DNA ,于4℃下13,250 g 离心15 min ; 7、 小心除去异丙醇,加入1 ml 70%的乙醇。离心5 min 后除去乙醇,室温下干 燥15~20 min ; 8、 加入100 ul TE ,使核酸沉淀溶解。 一、 酶切 1、 拷贝数的计算 哺乳动物基因组全长3.0×109个碱基对,按插入基因单拷贝计算如下: () g plasmid of mass bp bp DNA of Insertion μ10100.39 = ? 2、 酶切体系 基因组DNA 10 ug 10*Buffer 10 ul 酶(10U/ul) 10 ul Total 100 ul 3、 混合后置于适宜酶切温度进行酶切反应; 4、 对酶切产物进行纯化,用30 ul TE 洗脱; 5、 制备1%浓度的琼脂糖凝胶(不加EB ); 6、 将纯化后的酶切产物敞开盖子于70℃放置15 min ,以除尽残留乙醇和消除

2020企业安全生产工作总结 一年来,公司实现了“安全、和谐、平稳”过渡,杜绝了重大人身伤亡、设备、环境污染等事故的发生,基本完成了今年工作目标。回顾我们的安全工作主要作了以下几个方面: 一、建立健全各项安全规章制度,形成无死角的安全管理网络 安全环保工作在国家是靠法制管理,在企业是靠制度管理,安全环保责任制是一切制度的中心。结合公司实际情况,我们制定了各级各岗位安全环保责任制,成立了安全环保委员会,形成了横向到边、纵向到底、上下配套连动的安全生产管理网络。围绕责任制公司制定了一系列配套管理制度,比如安全教育培训制度、安全生产检查制度、岗位交接班制度、爆破物品管理制度、采场安全管理规定、提升系统安全管理制度、施工队安全管理规定、安全人员跟班检查制度、重大工程安全措施审批制度、危险化学品管理制度、消防安全管理制度和提升系统日常检查标准、竖井和斜井提升系统安全检查表、采场安全作业要求、安全工作考核标准,安全处罚细则等多项规章制度和安全标准,依照制度和标准严格企业安全管理。 二、增强安全管理力量,充实基层管理人员,建立有效的安全 管理体制,严抓施工队伍的安全管理 安全问题,生命至上。公司组建以来,经营层始终把关乎职工生命健康的安全工作放在压倒一切的重要地位,在企业管理构架上充分体现“安全是企业第一效益,安全是领导第一责任,安全是职工第一福利”的企业安全管理理念,公司经营层一名副总经理专门负责安全环

保工作,成立安环科,配备专职安全管理人员,增设两个坑口车间,每个车间配备矿井主任一名,专职安全管理人员4名,具体负责矿井安全管理;每个施工队必须配备中段带班长和三八班安全管理人员。公司安全科安全员对矿井实行责任区管理,矿井安全员和施工队安全员实行跟班作业,确保24小时井下有安全管理人员带班作业。全公司专职安全管理人员21人,兼职安全管理人员11人。同时为加强对施工队的安全管理力度,将原有多个施工队伍进行资质确认、淘汰整合,并签订《安全环保管理协议》、《相邻施工安全协议》等,对施工队的管理由粗放管理向精细管理转变,实行一体化管理工作,实行同等标准、同等考核、同等奖惩,避免以包代管的现象。 三、加强现场检查力度,抓好生产现场管理 我矿矿岩稳固性较差,随着作业面不断变化,不安全因素也随之变化。据此,我们将现场管理纳入安全工作重点,加大力度,常抓不懈。 1、加大安全检查、处罚力度,彻底消除事故隐患。要求各车间做好安全自查自纠工作,及时发现事故隐患,并进行彻底整改;严肃处理各种违章、违制行为。公司在每月x日、x日和x日、x日组织安全大检查,并及时通报检查情况,对隐患较多,整改不力的给予严厉处罚。自1月份至今,共处理违章、违制行为65起,事故隐患整改不力的28起,罚款金额64000元。使井下违章、违制行为大为减低。 2、加强井下的文明生产,从1月1日开始到春节期间,各矿井、施工队安排人员对大巷的水沟进行清理并改为混凝土水沟;主巷两侧所有的淤泥、杂物全部清理干净;川脉内存在的杂物、废石全部清理;

某建筑施工企业2013年度安全生产工作总结 安全生产与环境保护,关系到社会的改革、经济的发展和国家的稳定,同时也直接关系到南通六建公司的生存与发展。本年度,公司在安全生产与环境管理工作方面做了大量的工作,全年未发生安全生产事故,取得了一定成绩,也存在一些薄弱环节,现总结如下:第一部分年度目标完成情况 一、年初制定的目标 1、杜绝死亡事故,重伤率控制在0.1‰以内; 2、职业病发生率控制在0.1‰以内; 3、杜绝环境污染事故; 4、施工现场临时道路硬化率100%,噪声达标排放,污水排入市政管网前必须设置沉淀池、隔油池、化粪池等; 5、施工现场安全达标合格率100%,其中优良率达80%以上,创省级安全文明工地18项,争创国家级安全文明工地1项(根据工程承接情况进行适当调整。 二、目标完成情况 1、未发生重大伤亡事故; 2、未接到有关职工重伤、轻伤的信息; 3、未发生职业病现象; 4、从区域公司上报的情况看,施工现场安全达标合格率100%,其中优良率达85%以上; 5、中国移动华东大区物流中心仓库、2、3、4#房获得国家aaa级安全文明标准化工地, 21项工程已通过(申报了省级安全/文明工地的验收。

第二部分安全生产管理工作开展情况 一、以人为本,主动识别危险源 按公司三合一体系文件规定,年初由安全管理部组织各区域/专业公司及项目部开展危险源、环境因素调查、评价活动,建立了危险源、环境因素调查评价材料,作为制定年度管理目标与工作计划的依据。公司危险源、环境因素调查评价小组对全公司资质范围内的危险源和环境因素进行调查与评价,确定了公司2013年度重大危险源为:基坑支护及降水工程(土方开挖工程、模板工程、起重吊装工程、脚手架工程,大型机械(包括塔吊、人货电梯、井架装、拆过程,施工用电过程(带电作业、动火作业过程、“四口、五临边”等八个。每季度,区域公司对所辖在建工程项目,对照《危险性较大分部项工程安全管理办法》识别施工危险源,汇总形成施工危险源台帐。 二、策划全年,措施得力 根据公司历年安全与环境管理体系运行状况、公司年初向主管部门递交安全生产责任状中的承诺内容,并考虑到相关法律法规的规定及满足持续改进的要求,公司下发了《二〇一三年度安全生产工作计划》,确定了2013年度职业健康安全与环境管理工作指导思想、管理目标,并制定了15项主要措施和要求:提高对安全生产重要性的认识、健全安全生产管理网络、落实安全生产管理责任、加强对危险性较大的分部分项工程安全管理开展建筑安全专项整治工作、规范施工现场消防安全管理工作、加强现场施工机械安全管理工作、强化培训提高安全生产意识与技能、认真执行领导带班检查制度积极开展安全隐患排查治理工作、落实措施保证安全投入的有效实施、积极创优大力提升公司品牌形象、开展“安全生产月”等专项活动、强化安全物资采购管理工作、组织危险源环境因素辨识与评价工作实施应急救援预案制度、全面推动绿色施工管理和环境保护工作严格控制污染物排放、加强安全生产信息化管理工作。

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