生物选修三专题一专题二大题

1. (2012·江苏高考)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题:

(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由连接。

(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是末端,其产物长度为。

(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有种不同长度的DNA片段。

(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶

是。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加的培养基进行培养。经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最可能的原因是：

2. (2013·靖江模拟)许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因,其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞,过程如图所示。请据图回答：

(1)基因工程中,构建基因表达载体的目的是。

(2)限制酶EcoRⅠ的识别序列和切割位点是-G↓AATTC-,SmaⅠ的识别序列和切割位点是-CCC↓GGG-。图中目的基因被切割下来和质粒连接之前,需在目的基因的右侧连接相应的末端,连接的末端序列是,连接过程中需要的基本工具是。

(3)转化过程中,大肠杆菌应先用处理,使其处于能吸收周围DNA的状态。

(4)菌落颜色为白色的是,原因是。

(5)菌落③中的目的基因是否表达,可采用的检测办法是。

3. 现代生物技术并不是各自独立的,而是相互联系、相互渗透的。如图表示利用乳腺生物反应器生产某种动物蛋白的流程示意图,请分析回答:

(1)该生产流程中应用到的现代生物技术有、。(写出其中两种)

(2)图中A、B分别表示、。

(3)为提高培育成功率,进行②过程之前,对早期胚胎的处理是取其部分细胞用目的基因探针进行检测,对受体动物的处理是用进行同期发情处理。

(4)蛋白质工程中,要对蛋白质结构进行设计改造,必须通过基因修饰或基因合成来完成,而不直接改造蛋白质,原因是。

4. 胰岛素可以用于治疗糖尿病,但是胰岛素被注射到人体后,会堆积在皮下,要经过较长的时间才能进入血液,而进入血液的胰岛素又容易分解,因此,治疗效果受到影响。如图是用蛋白质工程设计速效胰岛素的生产过程,请据图回答有关问题：

(1)构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键,图中构建新的胰岛素模型的主要依据是。

(2)通过DNA合成形成的新基因应与结合后转移到中才能得到准确表达。

(3)若要利用大肠杆菌生产速效胰岛素,需用到的生物工程有、和发酵工程。

(4)图中从新胰岛素模型到新的胰岛素基因合成的基本思路是什么?

。

5.(2012·新课标全国卷)根据基因工程的有关知识,回答下列问题:

(1)限制性核酸内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有和。

(2)质粒载体用Eco RⅠ切割后产生的片段如下:

AATTC……G

G……CTTAA

为使载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用Eco RⅠ切割外,还可用另一种限制性核酸内切酶切割,该酶必须具有的特点是。

(3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即DNA连接酶和DNA连接酶。

(4)反转录作用的模板是,产物是。若要在体外获得大量反转录产物,常采用技术。

(5)基因工程中除质粒外, 和也可作为载体。

(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因

是。

6. (2012·福建高考)肺细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1所示：

(1)进行过程①时,需用酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位,以驱动let-7基因转录,该部位称为。

(2)进行过程②时,需用酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于传代培养。

(3)研究发现,let-7基因能影响癌基因RAS的表达,其影响机理如图2所示。据图分析,可从细胞中提取进行分子杂交,以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中 (RAS mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。

7. .(2013·西安模拟)某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示,请回答下列问题：

(1)从基因文库中获得的抗盐基因可用技术进行扩增。将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐

性状,这种新性状的产生所依据的原理是。

(2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下,烟草不会具有抗盐特性,原因是抗盐基因在烟草细胞中不

能,也不能。

(3)在构建重组质粒时,应选用两种酶对进行切割,以保证重组DNA序列的惟一性。

(4)为了确定抗盐烟草培育成功,既要用放射性同位素标记的作探针进行分子杂交检测,又要用

的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。

8. 凝乳酶能将牛奶凝固成奶酪,传统上凝乳酶只能从小牛的胃中提取,价格昂贵。1990年,某公司生产出了食品产

业所需的第一个基因工程产品CHY-MAX牌凝乳酶,其化学组成与从小牛体内提取的完全相同,但其更加物美价廉。生产过程如图,据图回答问题：

(1)基因工程的操作程序主要包括四个步骤,其核心是图中过程

(填序号),在该过程中主要使用的工具酶是。

(2)过程④中理想的受体细胞是大肠杆菌,该类生物具有的特点是,要想把重组质粒导入大肠杆菌,首先必须

用处理大肠杆菌,使其转化为细胞,然后将重组质粒和大肠杆菌在缓冲液中混合培养完成转化过程。

(3)过程⑤将小牛凝乳酶基因转入大肠杆菌后,能够准确表达的主要原因是。

9. (能力挑战题)(2013·盐城模拟)我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛,如图是利用基因工程方法生产重组人

生长激素的示意图。图中质粒表示基因工程中经常选用的载体——pBR322质粒,Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr

表示四环素抗性基因。据图回答下列问题(限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同)：

(1)过程②所必需的酶是,过程④所必需的酶

是。⑤过程中为提高成功率,常用溶液

处理大肠杆菌。

(2)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒

pBR322进行切割,用1种酶、2种酶和3种酶分别切割

时,则形成的DNA片段共

种,其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段

的比例是。

(3)如果只用限制酶PstⅠ切割目的基因和质粒pBR322,

完成过程④⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌(不含Amp r、

Tet r抗性质粒)先接种到甲培养基上,形成菌落后用无菌

牙签挑取甲上的单个菌落,分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如图所示。接种到甲培养基上的目的是筛选的大肠杆菌,含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态是。

10. 科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛,如果要加速转基因奶牛的繁育,可以对此转基因奶牛进行克隆(如图所示)。请结合图示回答下列问题：

(1)在进行细胞培养时,要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理,形成单个细胞,这个过程中需要利用

酶处理。

(2)用于核移植的供体细胞,一般都选用传代10代以内的细胞,原因是。

(3)在进行原代培养时,细胞增殖的方式是,此外,细胞增殖还表现出和接触抑制等特点。

(4)将进行培养的供体细胞注入去核的卵母细胞中,去除卵母细胞细胞核的目的是

(5)将重组细胞在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛后,该母牛就会生出与供体奶牛遗传物质相同的牛犊,但也不是100%地复制,原因最可能是。

(6)上述动物细胞工程中涉及的技术有。转基因奶牛的克隆成功,说明了动物的

具有全能性。

11. 科学家已分离出H1N1病毒(一种RNA病毒)。某制药厂根据下面流程图生产预防和治疗甲流的抗体,请据图回答有关问题：

(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自感染病毒的人体内的细胞,促进d过程的常用诱导剂是。

(2)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成种类型的C细胞,因此需用培养基筛选出 (填特点)的D细胞用于培养。D细胞的名称是。

(3)理论上,注射了该抗体的人群不能长期对甲流免疫,试分析原因: 。

(4)不同种动物的体细胞融合,相比诱变育种和杂交育种方法,具有等突出的特点。

(5)请说明单克隆抗体的主要作用: 。

12. （能力挑战题)运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现:用人体细胞与小鼠体细胞进行杂交得到

的杂种细胞含有双方的染色体。杂种细胞在持续分裂过程中仅保留小鼠的染色体而人的染色体则逐渐丢失,最后

只剩一条或几条染色体。如图是人的缺乏HGPRT酶的突变细胞株(HGPRT-)和小鼠的缺乏TK酶的细胞株(TK-)融

合后在HAT培养液中培养的过程,结果表明,最终人的染色体在融合细胞中仅存有3号染色体或17号染色体或两

者都有。已知只有同时具有HGPRT酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与繁殖。

(1)体细胞杂交克服了的障碍,过程①常用的生物方法是。

(2)过程②中,为了防止细菌的污染,所用培养液应该添加一定量的,此外,还要定期用处理

细胞,使贴壁生长的细胞脱落,形成细胞悬液。

(3)从培养过程看,HAT培养液不仅能提供养料,还起作用。

(4)从图示结果看,可以确定人的基因位于号染色体上。

13.(2013·南昌模拟)回答下列与细胞工程有关的问题:

(1)细胞工程是指应用和分子生物学的原理和方法,通过细胞水平或水平上的操作,按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。

(2)植物体的根、茎、叶细胞一般都具有全能性,在一定的营养和激素等条件下,可以形成愈伤组织。将愈伤组织转接到的培养基上,就可以诱导其再分化生成胚状体或丛芽,进而发育成完整的小植株。

(3)动物细胞工程中技术是其他动物细胞工程技术的基础。目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为

代以内,以保持细胞正常的二倍体核型。在培养动物细胞时,从健康动物体内取出组织块剪碎后,用胰蛋白酶处理

的原因是: 。

(4)动物细胞核移植是将动物的一个体细胞的细胞核,移入一个中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为动物。动物体细胞

核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植的原因是动物体细胞。

14.（08宁夏卷·38）（15分）（选修3----现代生物科技专题）回答下列有关动物细胞培养的问题：

⑴在动物细胞培养的过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的。此时，瓶壁上形成的细胞层数是，要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是

⑵随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现的现象；但极少数细胞可以连续增殖，

其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成细胞，该种细胞的黏着性，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量。

⑶现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是

⑷检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到期的细胞用显微镜进行观察。

⑸在细胞培养过程中，通常在条件下保存细胞，因为在这种条件下，细胞中的活性降低，细胞的速率降低。

⑹给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作进行攻击。

15. （08北京卷·29）白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18.以白菜为母本，甘蓝为父本，经人工授粉后，将雌蕊离体培养，可得到“白菜—甘蓝”杂种幼苗。请回答问题：

（1）白菜和甘蓝是两个不同的物种，存在隔离。自然条件下，这两个物种间不能通过的方式产生后代。雌蕊离体培养获得“白菜-甘蓝”杂种幼苗，所依据的理论基础的植物细胞具有：

。

（2）为观察“白菜—甘蓝”染色体的数目和形态，通常取幼苗的做临时装片，用染料染色。观察、计数染色体的最佳时期是。

（3）二倍体“白菜—甘蓝”的染色体数为。这种植株通常不育，原因是减数分裂过程中。为使其可育，可通过人工诱导产生四倍体“白菜-甘蓝”这种变异属于。

16. （08重庆卷·31）（21分）2007年我国科学家率先完成了家蚕基因组精细图谱的绘制，将13000多个基因定位于家蚕染色体DNA上．请回答以下有关家蚕遗传变异的问题：

(1)在家蚕的基因工程实验中，分离基因的做法包括用对DNA进行切割然后将DNA片段与

结合成重组DNA，再将重组DNA转入大肠杆菌进行扩增等．

(2）家蚕的体细胞共有56条染色体，对家蚕基因组进行分析（参照人类基因组计划要求），应测定家蚕条双链DNA分子的核苷酸序列．

(3）决定家蚕丝心蛋白H链的基因编码区有16000个碱基对，其中有1000个碱基对的序列不编码蛋白质，该序列叫；剩下的序列最多能编码个氨基酸（不考虑终止密码子），该序列叫．

(4）为了提高蚕丝的产量和品质，可以通过家蚕遗传物质改变引起变异和进一步的选育来完成．这些变异的来源有：．

(5)在家蚕遗传中，黑色（B)与淡赤色（b）是有关蚁蚕（刚孵化的蚕）体色的相对性状，黄茧(D）与白茧（d）是有关茧色的相对性状，假设这两对性状自由组合，杂交后得到的子代数量比如下表：

①请写出各组合中亲本可能的基因型

组合一

组合二

组合三

②让组合一杂交子代中的黑蚁白茧类型自由交配，其后代中黑蚁白茧的概率是

17.（08江苏卷·32）将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表

请根据以上图表回答下列问题。

（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，

其最主要的特点是。

（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？。

（3）图1步骤3所用的DNA连接酶对所连接的

DNA两端碱基序列是否有专一性要求？

（4）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤6转

基因所用的细菌B通常为。

（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，

假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据

图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，

对以下酶切结果作出判断。

①采用EcoRI和PstI酶切，得到种DNA片断。

②采用EcoRI和SmaI酶切，得到种DNA片

段。

18.从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转人酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：

（1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是，用将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子，以完成工程菌的构建。

（2）若要鉴定淀粉酶基因是否插人酿酒酵母菌，可采用的检测方法是；若要鉴定淀粉酶基因是否

翻译成淀粉酶，可采用检测。将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一定时间后，

加入碘液，工程菌周围出现透明圈，请解释该现象发生的原因。

（3）如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小?

（4）微生物在基因工程领域中有哪些重要作用?

19.图为人β-珠蛋白基因与其mRNA杂交的示意图，①～⑦表示基因的不同功能区。

据图回答：

⑴上述分子杂交的原理是；细胞中β-珠蛋白基因编码区不能翻译的序列是（填写图

中序号）。

⑵细胞中β-珠蛋白基因开始转录时，能识别和结合①中调控序列的酶是。

⑶若一个卵原细胞的一条染色体上，β-珠蛋白基因编码区中一个A替换成T，则由该卵原细胞产生的卵细胞携

带该突变基因的概率是。

⑷上述突变基因的两个携带者婚配，其后代中含该突变基因的概率是。

20.大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出

了耐盐水稻新品系。

（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的处，

DNA连接酶作用于处。（填“a”或“b”）

（2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和法。

（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植

株需要利用技术。该技术的核心

是和。

（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成

功，既要用放射性同位素标记的作

探针进行分子杂交检测，又要用方

法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

21.将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。

请根据以上图表回答下列问题。

（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，

其最主要的特点是。

（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？。

（3）图1步骤3所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？。

（4）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤6转基因所用的细菌B通常为。

（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。

①采用EcoRI和PstI酶切，得到种DNA片断。

②采用EcoRI和SmaI酶切，得到种DNA片段。

22.我国植物学家将名贵兰花的茎尖细胞放进培养基中进行培养，最终发育成完整的新植株。下图是细胞培养形

成兰花植株示意图，请据图回答：

(1)过程④和⑤要经过、和。

(2)在培养过程中，除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外，还需要在培养基中加入。同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程必须保证。

(3)从育种的角度来看。植物组织培养与有性繁殖相比，优势主要有(列举两条)

(4)与植物组织培养的培养基相比，用于动物细胞培养的培养液除含有水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸

等之外，通常还要添加。

23.植物细胞杂交过程示意图，请据图回答：

（1）植物体细胞杂交的第①步是去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体。目前此步聚最常用的方法是酶解法，

也就是在温和的条件下用等分解植物的细胞壁。

（2）②过程的发生，必须进行人工诱导。人工诱导原生质体融合的物理方法是：利用等（至少写出两种）促使原质体融合；化学方法是：用等试剂作为诱导剂诱导融合。动物细胞融合与植物生

质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法类似，动物细胞的融合还常用到作为诱导剂。

（3）③表示融合后的原生质体再产生样的细胞壁，新细胞壁的产生与细胞内________(细胞器)有密切关系。

（4）在④⑤过程中,细胞分裂的主要方式是有丝分裂,此种分裂方式的重要意义(或称特征)是

（5）植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值，其突出的优点是可以。目前，动物细胞

融合技术最重要的用途是。

24.下图表示水稻（体细胞有24条染色体）的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗的培养过程，已知水稻的基因型为AaBb。

（1）愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则的细胞团，在愈伤组织形成过程中，必须从培养基中获得

和小分子有机物等营养物质

（2）要促进花粉细胞分裂和生长，培养基中应有和两类激素。

（3）愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再发育成具根、茎和叶的植物体。这一过程必须给予光照，其原因是利用光能制造有机物，供试管苗生长发育。

（4）试管苗的细胞中含有条脱氧核苷酸链。

（5）培育出的试管苗可能出现的基因型有。

（6）这种利用花药离体培养成的试管苗属于，要使它繁殖后代必须采取的措施是。

（7）从细胞工程角度看这种育种方法叫。

25．紫茉莉的花色受核遗传物质控制,基因型为RR、rr的紫茉莉分别开红花与白花，而基因型为R、r同时存在开粉红色花。紫茉莉枝条的颜色是由细胞质中质体颜色决定的：绿色枝条叶肉细胞中含有叶绿体；白色枝条的叶肉细胞中只含白色体；花斑色枝条有的细胞只含叶绿体，有的只含白色体，有的既含有叶体又含白色体。从绿色白花紫茉莉的绿叶上取一些叶肉细胞，再从花斑色红花紫茉莉的白色枝条上取一些叶肉细胞，去掉细胞壁后，用诱导剂让其融合。

（1）细胞融合过程中，去掉细胞壁用酶和酶。

（2）两两融合后，可出现种融合细胞，若用融合细胞进行组织培养，理论上讲发育成的后代的枝条颜色是，控制花色的基因型依次是。

26.美国科学家将分离得到的成熟的胡萝卜根的韧皮部细胞进行培养，由单个细胞发育成了完整的新植株。过程图解如下，回答与之有关的问题：

（1）科学家所用的这种生物技术叫做。依据的理论基础是植物细胞具有性。B过程称

为_____________，C过程称为

（2）通过B过程产生的愈伤组织的细胞与根的韧皮部细胞在染色体的数目上是否相同？；染色体上所含的遗传物质是否相同？；细胞的形态结构是否相同？

27.下图甲、乙分别表示高等植物细胞和高等动物细胞的亚显微结构，请据图回答：

⑴图中[2]、[5]、[6]、[10]、[11]等结构共同构成了细胞的__________

系统，其中结构[2]在细胞与环境之间进行

____________________________的过程中起着决定性作用。细胞内表面

积最大的膜结构是______________(填编号)。

⑵与自然界中碳循环直接相关的细胞器是____________(填编号)。图

乙中的[15]中心体与该细胞的____________密切相关。能发生碱基互

补配对的细胞器有______________(填编号)。

⑶在细胞工程中，植物体细胞杂交的第一步是用____________法除去

________(填编号)；动物细胞融合采用的诱导方法与植物细胞不同的

是常常用到_____________作为诱导剂。

⑷在分泌抗体的过程中，核糖体上合成的有关蛋白质分子，在有关

细胞结构间移动的顺序是_____________(用编号和箭头表示)。

28.禽流感疫情有逐渐蔓延的趋势，有些国家还出现了人感染的病例。现在，科学家们已陆续从病死的家禽和候鸟体内分离到了H5N1亚型禽流感病毒(一种RNA病毒)。若生产可以用于预防和治疗禽流感的抗体，请根据下面的单克隆抗体制备过程示意图回答有关问题：

(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自体内的细胞，促进d过程的常用诱导剂是或。

(2)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成种类型的C细胞，因此需用培养基筛选出 (填特点)的D 细胞用于培养。D细胞的名称是。

(3)目前注射禽流感疫苗是预防禽流感的一种措施。我们已经知道，决定禽流感病毒在人体细胞中增殖变化的物质是，而决定其抗原特异性的基因位于。据此分析制备禽流感疫苗的主要思路：

_______________________________________。

(4)理论上，以上措施并不能使人类彻底摆脱禽流感，试分析原因

29.肺癌在全国的发病率居肿瘤之首，小细胞肺癌是恶性程度最高的一种，上海肺瘤研究所细胞与分子免疫研究

室在国内率先研制出一种名叫“2F7”的靶向生物导弹。这种生物导弹是一种专门对小细胞肺癌产生特定靶向性的

特异性单克隆抗体。注入静脉后，会“直扑”小细胞肺癌病灶，使其携带的肿瘤化疗药物能“集中火力”抑制、杀灭

肿瘤细胞。这预示着化疗药物有望弥补“良莠不分”、损害全身免疫力的缺陷。

（1）制备单克隆抗体的原理是。

（2）制备单克隆抗体用到的动物细胞工程技术手段有。

（3）单克隆抗体是由细胞产生的。

（4）静脉注入而不是口服单克隆抗体的原因是。

（5）单克隆抗体与肿瘤细胞结合并发挥作用的过程属于免疫的阶段。

30.两场筹备了10年的“太空结合”首次在神舟八号飞船上举行了,“新人”之一是小白鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,

新人在“产房”——电融合仪内孕育新生命。160min后,中国首批“太空娃娃”终于顺利诞生。“太空娃娃”诞生和地

面实验如图所示。

请回答下列问题：

(1)小白鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞能融合在一起,体现了细

胞膜具有________的特点。

(2)若用于SARS的预防上,则宜采用_______细胞。科学工作者

正在研究治疗癌症使用的生物导弹是_______

(3)B淋巴细胞和T淋巴细胞都是由________________细胞形成

的。这种相同细胞的后代,在形态、结构和

生理功能上产生稳定差异的过程,叫做__________

_____。

(4)鼠的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,在培养时通过

_______________（有丝/减数）分裂方式大量繁殖。细胞中染

色体数目与淋巴细胞相比有何特点？；要观察融

合后的细胞中的染色体形态、数目,可用一定浓度的

处理。

(5)融合的细胞具有两种细胞的特性,即_________________和____________________。

31.某医院病理室为确诊一患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养。请回答下列问题：

①培养之前，肿瘤组织必须先用等处理成单个细胞。

②若开始培养时取一滴培养液观察有100个肿瘤细胞，经24h培养后，取一滴稀释100倍后再取一滴(设三次的

“一滴”等量)观察，发现有64个肿瘤细胞，此肿瘤的细胞周期约为 h。

③与正常细胞相比，在显微镜下可见明显增多的细胞器是(两项) 。（2分）

④某科研单位研制出一种新型药物X，据说对此类肿瘤有较好的疗效，请你设计一个方案加以验证。写出你所设计的实验步骤：

a．；

b．；

c．。

答案

第一题：

【解析】(1)两条脱氧核苷酸链之间的碱基通过氢键相连,一条脱氧核苷酸链中相邻的碱基通过脱氧核糖-磷酸-脱氧核糖连接。

(2)根据限制酶SmaⅠ识别的碱基序列可知,限制酶SmaⅠ切割产生的末端为平末端。在图1序列中共有2个SmaⅠ的切割位点,切割后形成3种不同长度的产物,分别为537 bp、790 bp、661 bp。

(3)图1中有SmaⅠ的两个识别序列,完全切割后产生3个不同长度的DNA片段,若虚框中的碱基被T-A替换,则产生2个DNA片段,其中1个DNA片段与上次切割的相同,因此经完全切割后共产生4种不同长度的DNA片段。

(4)切割目的基因可选用限制酶BamHⅠ和限制酶MboⅠ,但限制酶MboⅠ可将质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因都破坏,而限制酶BamHⅠ只破坏抗生素A抗性基因,因此只能选用限制酶BamHⅠ;重组质粒中含有抗生素B抗性基因,因此可在含抗生素B的培养基上培养。

答案：(1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖

(2)平537 bp、790 bp、661 bp

(3)4

(4)BamHⅠ抗生素B 同种限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因D与质粒反向连接

第二题

答案：（1）使目的基因在受体细胞中稳定存在,能遗传给后代,并表达和发挥作用

（2）-TTAA，DNA连接酶

（3）Ca2+

（4）菌落③，lacZ标记基因区插入外源基因后被破坏,不能表达出β-半乳糖苷酶,故菌落为白色

（5）抗原-抗体杂交

第三题

【解析】(1)由图分析知该生产流程中应用到的现代生物技术有蛋白质工程、基因工程、胚胎移植技术等。

(2)图中A、B分别表示推测应有的氨基酸序列、基因表达载体。

(3)为提高培育成功率,进行②过程之前,对早期胚胎的处理是取其部分细胞用目的基因探针进行DNA分子杂交,对受体动物的处理是用促性腺激素进行同期发情处理。

(4)由于改造后的基因能够遗传(且改造基因易于操作),因此蛋白质工程中,要对蛋白质结构进行设计改造,必须通过基因修饰或基因合成来完成,而不直接改造蛋白质。

答案：(1)蛋白质工程基因工程胚胎移植技术(任写两种)

(2)推测应有的氨基酸序列基因表达载体

(3)DNA(核酸)分子杂交促性腺激素

(4)改造后的基因能够遗传(且改造基因易于操作)

第四题

【解析】(1)蛋白质工程首先要根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行分子设计,因此,图中构建新的胰岛素模型的主要依据是预期胰岛素的功能,即速效胰岛素的功能。

(2)合成的目的基因应与载体结合,构建基因表达载体后导入受体细胞中才能表达。

(3)利用蛋白质工程生产速效胰岛素,需合成新的胰岛素基因,改造好的目的基因需要通过基因工程转入受体细胞,并在生产中要借助工程菌,所以还需要发酵过程,因此,此过程涉及蛋白质工程、基因工程和发酵工程。

(4)由新的蛋白质模型到构建新的基因,其基本思路是:根据新的胰岛素模型中氨基酸的序列,推测出其基因中的脱氧核苷酸序列,然后利用DNA合成仪来合成出新的胰岛素基因。

答案：(1)预期胰岛素的功能

(2)载体受体细胞

(3)蛋白质工程基因工程

(4)根据新的胰岛素模型中氨基酸的序列,推测出其基因中的脱氧核苷酸序列,然后利用DNA合成仪来合成出新的胰岛素基因

第五题

【解析】(1)当限制性核酸内切酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端,而当限制性核酸内切酶在它识别序列的中心轴线处切开时,产生的是平末端。

(2)为使载体与目的基因相连,不同的限制性核酸内切酶应该切出相同的黏性末端。

(3)DNA连接酶根据其来源的不同可分为两类,一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为E·coliDNA连接酶,另一类是从T4噬菌体中分离出来的,称为T4DNA连接酶。

答案：(1)黏性末端平末端

(2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同

(3)E·coli T4

(4)mRNA(或RNA) cDNA(或DNA) PCR

(5)λ噬菌体的衍生物动植物病毒

(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱

第六题

【解析】(1)基因工程中目的基因和载体需要同一种限制性核酸内切酶切割产生相同的黏性末端,使目的基因与载体结合,载体中与RNA聚合酶识别和结合的部位是启动子。

(2)原代培养产生的细胞需用胰蛋白酶处理,分散成单个细胞,以利于传代培养。

(3)检测目的基因是否转录需提取受体细胞中的RNA进行分子杂交;由图2可知let-7基因翻译抑制则不能产生RAS蛋白,因此RAS蛋白减少,肺癌细胞的增殖就受到抑制。

答案：(1)限制性核酸内切(或限制) 启动子

(2)胰蛋白

(3)RNA RAS蛋白

第七题

【解析】(1)从基因文库中获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增。依据基因重组的原理将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状。

(2)由于单独的抗盐基因在烟草细胞中不能复制,也不能合成抗盐基因的mRNA,因此如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下,烟草不会具有抗盐特性。

(3)在构建重组质粒时,为了保证重组DNA序列的惟一性,据图分析知应选用SalⅠ和HindⅢ两种酶对质粒和抗盐基因的DNA进行切割,因为质粒和抗盐基因的DNA均含有这两种酶的切割位点,可以形成相同的黏性末端。

(4)为了确定抗盐烟草培育成功,既要用放射性同位素标记的抗盐基因作探针进行分子杂交检测,又要用一定浓度的盐水浇灌(移栽到盐碱地中)的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。

答案：(1)PCR 基因重组

(2)复制合成抗盐基因的mRNA

(3)SalⅠ和HindⅢ质粒和抗盐基因的DNA

(4)抗盐基因一定浓度的盐水浇灌(移栽到盐碱地中)

第八题：

【解析】(1)基因工程操作程序的核心是基因表达载体的构建,即图中的过程③,在该过程中使用的工具酶是限制性核酸内切酶(或限制酶)和DNA连接酶。

(2)大肠杆菌具有繁殖快、遗传物质相对较少、单细胞等特点,要想把重组质粒导入大肠杆菌,首先必须用

Ca2+处理大肠杆菌,使其转化为感受态细胞,然后完成转化过程。

(3)由于所有生物共用一套遗传密码,所以过程⑤将小牛凝乳酶基因转入大肠杆菌后,能够准确表达

答案：(1)③限制性核酸内切酶(或限制酶)和DNA连接酶

(2)繁殖快、遗传物质相对较少、单细胞Ca2+ 感受态

(3)所有生物共用一套遗传密码达。

第九题

【解析】(1)过程②是以RNA为模板合成DNA,此过程是逆转录,需要逆转录酶。过程④是形成重组质粒的过程,需要DNA连接酶。过程⑤是将目的基因导入受体细胞,要提高成功率常用CaCl2溶液处理大肠杆菌。

(2)用1种酶切割时会各形成1种DNA片段;用2种酶切割时会有3种组合方式,各形成2种DNA片段;用3种酶同时切割时,会形成3种DNA片段,但与前面重复,因此形成的DNA片段共9种。其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段的比例是1/3。

(3)筛选的目的是获取含四环素抗性基因的大肠杆菌,含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态是在丙中存活,在乙中不能存活。

答案：(1)逆转录酶DNA连接酶CaCl2

(2)9 1/3

(3)含四环素抗性基因在丙中存活,在乙中不能存活

第十题

【解析】(1)实践中常用胰蛋白酶处理动物组织细胞使其分离开来。

(2)传代10代以内的细胞代谢旺盛、分裂能力强,遗传物质没有发生改变,适于作为核移植的供体细胞。

(3)在进行原代培养时,细胞以有丝分裂的方式进行增殖,同时表现出贴壁生长和接触抑制的现象。

(4)去除卵母细胞细胞核的目的是使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞。

(5)生物的性状是细胞核基因和细胞质基因共同作用的结果,同时,生物的性状还受环境因素的影响,因此,克隆动物不可能是供体奶牛100%的复制品。

(6)该克隆动物的培育过程中涉及核移植、细胞培养和胚胎移植等技术,说明了高度分化的哺乳动物体细胞的细胞核仍具有全能性。

答案：(1)胰蛋白

(2)该种细胞代谢旺盛、分裂能力强,且遗传物质没有发生改变

(3)有丝分裂贴壁生长

(4)使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞

(5)①生物的性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制;②生物的性状还受环境因素的影响

(6)核移植、细胞培养、胚胎移植技术

体细胞的细胞核

第十一题

【解析】(1)由于本题的目的是制备用于预防和治疗甲流的单克隆抗体,所以B细胞只能是取自感染H1N1病毒的动物或人体内的B淋巴细胞,经诱导剂聚乙二醇(PEG)或灭活的病毒等诱导融合,得到的杂交瘤细胞才能用于生产预防和治疗甲流的单克隆抗体。

(2)仅考虑两个细胞的融合,则可形成A细胞—A细胞、B细胞—B细胞、A细胞—B细胞3种类型的C细胞,为了从中筛选出A细胞—B细胞,必须用特定的选择培养基进行筛选,筛选出的D细胞(杂交瘤细胞)既能无限增殖又能产生特异性抗体。

(3)因为单链RNA容易发生变异,一旦变异后体内的记忆细胞和抗体就不能对其发挥作用。

(4)不同种动物的体细胞融合,相比诱变育种和杂交育种方法,具有目的性强,克服远缘杂交不亲和性(能有效地打破物种的生殖隔离界限)等突出特点。

(5)单克隆抗体可用于诊断疾病、药物导向治疗等方面。

答案：(1)B淋巴聚乙二醇(PEG)(灭活的病毒)

(2)3 既能无限增殖又能产生特异性抗体

杂交瘤细胞(杂交细胞)

(3)引起甲流的病毒不断发生变异(意思相同即可)

(4)目的性强,克服远缘杂交不亲和性(能有效地打破物种的生殖隔离界限)(意思相同即可)

(5)作为诊断试剂;用于治疗疾病和运载药物(意思相同即可)

第十二题

答案：（1）远缘杂交不亲和(或生殖隔离)；用灭活的(仙台)病毒诱导融合

（2）抗生素；胰蛋白酶

（3）选择（筛选）

（4）TK酶；17

第十三题

答案：（1）细胞生物学；细胞器

（2）脱分化；含有不同激素成分

（3）动物细胞培养；10；为了使组织分散成单个细胞

（4）已经去掉细胞核的卵母细胞；克隆；分化程度高,恢复其全能性困难

第十四题

解析：本题考查了《现代生物科技专题》中的有关动物细胞培养的基础知识。在动物细胞的培养过程中，细胞因相互接触而出现接触抑制并有贴壁现象，可用胰蛋白酶将贴壁细胞分离下来。随着细胞培养传代次数的增多，大多数细胞失去分裂能力而衰老死亡，只有少数细胞仍保留有分裂能力，这少数的细胞具有癌细胞的特征，其细胞膜上的糖蛋白减少，细胞的黏罩性下降。细胞膜具有选择透过性，故染料分子不能使活细胞着色。温度能影响细胞内酶的活性而影响细胞的新陈代谢，故可低温保存培养的细胞。

答案：⑴相互接触接触抑制单层（或一层）胰蛋白酶

⑵衰老甚至死亡不死性降低减少

⑶由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）

⑷中

⑸冷冻（或超低温、液氮）酶新陈代谢⑹抗原

第十五题

答案：（1）生殖杂交（有性生殖）全能性

（2）根尖（茎尖）醋酸洋红（龙胆紫、碱性）有丝分裂中期（3）19 没有同源染色体配对现象染色体变异

解析：本题综合性强。涉及的知识点多而简单，包括生殖隔离、植物组织培养、细胞的全能性、细胞的有丝分裂、减数分裂、染色体变异及多倍体育种等知识。组织答案是要以课本基础知识为依据，紧扣生物学的基本术语或课本中的结论性语句等。相关知识如下：

白菜与甘蓝是两个物种，两物种之间一定存在生殖隔离，不能进行杂交，植物离体细胞或组织培养获得新个体，其理论基础是植物细胞的全能性。将受精后的白菜雌蕊培养成的“白菜－甘蓝”，其染色体数目为１０＋９即１９，细胞内不存在同源染色体、减数分裂时染色体不会联会、不能产生正常的生殖细胞，故不可育。若诱导使其染色体数目变异。

在植物有丝分裂实验中常采用植物的分生组织，如根的分生区、芽的顶端分生组织等做实验材料，常用龙胆紫或醋酸洋红（碱性燃料）来使染色体着色，有利于观察。在有丝分裂中期，染色体的着丝点在赤道板上排列整齐，染色体形态、数目清晰可见，是观察染色体的最佳时期。