Catalysis by Gold Nanoparticles,Grisel_2_35

Catalysis by Gold Nanoparticles

Ruud Grisel, Kees-Jan Weststrate, Andrea Gluhoi and Bernard E Nieuwenhuys* Leiden Institute of Chemistry, Leiden University

PO Box 9502, 2300 RA Leiden The Netherlands

E-mail: b.nieuwe@chem.leidenuniv.nl

Received: 4 March 2002

Gold catalysts have superior activity in CO and other oxidations at low temperatures. Both a small (~5nm) particle size and the presence of a partly reducible oxide (ceria or a transition metal oxide) have a beneficial effect on the catalyst performance. The present paper reviews our recent studies focused on understanding the specific role of the Au particle size and that of the oxide (MO). Our personal viewpoint on gold catalysis is outlined. The effects of Au particle size and of the oxidic additive are distinguished by using several alumina-supported gold catalysts having different gold particle sizes and various oxidic additives. The most active catalyst in CO oxidation is the multicomponent catalyst Au/MgO/MnO x/Al2O3with MgO being a stabilizer for the Au particle size and MnO x being the cocatalyst. This catalyst also exhibits good performance in selective oxidation of CO in a hydrogen atmosphere, a reaction relevant for the development of polymer electrolyte fuel cell technology.In its bulk form, gold has been regarded to be chemically inert towards chemisorption of reactive molecules such as oxygen and hydrogen. Consequently, pure gold was considered to be an uninteresting metal from the point of view of catalysis. The most noticeable exception to this was its use as a ‘diluent’ for an active metal: the addition of the inert gold to an active metal such as platinum affects to a significant extent the selectivity of the catalyst (1). However, recently, gold catalysts have attracted a dramatic growth of interest, since gold was reported to be extremely active in the oxidation of carbon monoxide if deposited as nanoparticles on partly reducible oxides. It is in particular the pioneering work of Haruta et al, which has stimulated research in this area (2). Early work performed with gold catalysts has been reviewed by Bond (3) and by Hutchings (4). For recent reviews on gold catalysis see references 2 and 5 - 7.

A large range of chemical reactions are now known to be catalysed by gold catalysts including total and selective oxidation, and reduction of nitrogen oxides. Based on the growth of the number of papers and patents dealing with gold-based catalysts for a range of potential applications in pollution control, chemical processes and development of fuel cells, it can be concluded that there may be a bright future for gold-based catalysis.

In the present paper we discuss some of our research on catalysis by gold (8 - 14), and in particular, the following topics will be discussed:

a)the effect of the gold particle size and the role of the

oxidic additive;

b)the selective oxidation of CO in the presence of hydrogen,

a reaction relevant to hydrogen fuel cell applications. Experimental

All the catalysts discussed in this paper are supported on γ-alumina, the gold loading is 5.0 wt%. The gold catalysts were prepared by homogeneous deposition precipitation using urea as precipitating agent. The advantage of the use of alumina as support is the high stability of the catalysts up to relatively high temperatures (10, 11). The following techniques were used for characterization of the catalysts: X-ray diffraction, high resolution transmission electron microscopy with facilities for chemical analysis by EDX, atomic absorption spectroscopy and 197Au-M?ssbauer effect spectroscopy. For details of catalyst preparation and characterization, the experimental set-up and the activity measurements, see references 10 - 14. The flow rate used was 40 ml min-1, GHSV 2500h-1. The gold and metal oxide (MO) phases are well dispersed on the alumina support and the HRTEM/EDX results point to close contact between the gold and MO phases.

Results and Discussion

1 Synergistic and Particle Size Effects

New regulations in the United States, Japan and Europe will make it mandatory that automotive emissions decrease substantially from current levels. Consequently, there is a strong incentive to develop improved catalysts with better oxidation activity at low temperatures, since most of the hydrocarbons and CO are emitted immediately following the cold start of engines (15).

A possible option may be the application of gold catalysts, making use of their superior activity in oxidation of CO and hydrocarbons at low temperatures. This is clearly illustrated in Figure 1 which indicates the conversion of propene over three types of alumina supported catalysts, viz CeO x/Al2O3, Au/Al2O3and the multicomponent catalyst consisting of both Au and CeO x, Au/CeO x/Al2O3(16):

2C3H6+ 9O2→6CO2+ 6H2O (1) For all of the gold catalysts the average particle size is 3.0 nm. Clearly, the multicomponent catalyst is much more active at low temperatures than the monocomponent ones. It should be noted that the ?-Al2O3support itself is not active under the conditions used in the experiments shown in the Figure 1. The presence of such a synergistic effect has been reported before for highly dispersed gold catalysts supported on reducible and catalytically active supports such as FeO x, CoO x, TiO x and MnO x for a number of reactions (2 - 14). Hence, the interesting observation is that gold-based catalysts are more active if:

a)the gold particle is nanosized, ie of the order of ca

5 nm, and

b)the gold particles are combined with an oxidic catalyst

(MO x).

In order to distinguish the effects of gold particle size and the presence of MO, a comparative study was performed on the behaviour of several gold-based catalysts in CO oxidation:

2CO + O2→2CO2(2) Some of the results are shown in Figure 2. All the catalysts examined had ?-Al2O3as the support. The pure MO x/Al2O3 catalysts are not very active in low-temperature CO oxidation. No significant CO conversion was found below 150°C, a temperature at which full conversion is reached over a Au/Al2O3catalyst with 4nm Au particles (not shown in the figure). The CO oxidation activity of the alumina-supported metal oxides decreases in the order: CoO x> FeO x> MnO x> NiO x>CrO x>> MgO and ZnO. Addition of MOx to Au/Al2O3 greatly influences the CO conversion in the low temperature region. Since none of the selected MOx was found to be active at these low temperatures, the activity enhancement must be due to either changes in the gold phase or to synergistic effects between gold and the MO x. To illustrate the large beneficial effect of MO x addition, the temperatures

Figure 1

Synergistic effect - oxidation of propene over γ-Al2O3, CeO x/Al2O3, Au/Al2O3and Au/CeO x/Al2O3(16)

Figure 2

CO oxidation over gold-based catalysts:

Au/MgO/Al2O3and MgO/Al2O3

Au/CrO x/Al2O3and CrO x/Al2O3

Au/MnO x/Al2O3and MnO x/Al2O3

Au/FeO x/Al2O3and FeO x/Al2O3

Au/CoO x/Al2O3and CoO x/Al2O3

Au/NiO x/Al2O3and NiO x/Al2O3

Au/ZnO x/Al2O3and ZnO x/Al2O3

The CO conversion over Au/MgO/Al2O3and Au/MnO x/Al2O3is 100% in the whole temperature range studied

Gold loading = 5%

Atomic ratio Au: M (= Mg, Cr, Mn, Fe, Co, Ni and Zn) = 1 : 1

needed for 95% CO conversion (T 95%) are plotted versus the average gold particle size as determined from XRD line broadening. Figure 3 summarizes the results obtained for seven multicomponent Au/MO x/Al2O3and three monocomponent Au/Al2O3catalysts with an average gold particle size between 4 and 11nm. The gold particle size of the three Au/Al2O3catalysts was varied by heating a standard Au/Al2O3catalyst in an oxygen atmosphere at 300, 400 and 600°C. In this way the average particle size increases from 3.6nm via 9 to 11nm.

The results clearly demonstrate that small gold particles (< 5nm) are required for high activity. This observation is in line with literature data (2, 5 - 7, 17 - 19). The addition of MO x has a large beneficial effect on the activity at low temperatures. This effect is larger than can be expected from the presence of stable small Au particles alone. For example, the Au/MnO x/Al2O3catalyst with an average particle size of 4.2 ± 1.4 nm has a T 95% that is 100 degrees lower than that found for Au/Al2O3with an average particle size of 3.6 ± 1.4 nm. In fact, the CO conversion over Au/MnO x/Al2O3is higher at ambient temperature than the CO conversion over the Au/Al2O3catalyst at 150°C. Most probably, the role of MO x is twofold. Firstly, the oxide (in particular, MgO) may stabilize the small size of the gold particles throughout preparation and activity measurements (promoter effect). Secondly, the oxide may actively take part in one of the steps involved in the catalytic cycle (ie it acts as a co-catalyst).

The dominant mechanism of CO-oxidation at low temperatures over the platinum group metals (PGMs) is that of a Langmuir-Hinshelwood type between adsorbed CO and adsorbed O (15):

CO→CO ads(3)

O2→2O ads(4)

O ads+ CO ads→CO2(5) The mechanism of the CO oxidation reaction on gold catalysts is not fully understood. In the opinion of the present authors the mechanism on Au/Al2O3may be similar to that on the platinum group metal (PGM) catalysts. If this is so, the difficult step is the dissociative adsorption of O2on gold, step 4. Gold is not very active in the O-O bond scission. However, O adatoms are stable on gold at room temperature. The beneficial effect of the addition of a transition metal oxide may be that the MO x supplies the O needed for the reaction. The reaction may occur at the Au-MO x interface with CO adsorbed on Au reacting with O on MnO x. The O-vacancies on MO x will then react with O2and the catalytic cycle is completed. An alternative explanation is that O atoms spill over to the gold surface and then react with adsorbed CO according to step 5.

Large synergistic effects have been reported earlier for combinations of Pt or Pd with reactive metal oxides (15, 20, 21). An example is shown in Table 1 for CO oxidation over Pt catalysts. Pt/CoO x/SiO2and Pt/CoO x/Al2O3belong to the most active Pt catalysts investigated in our laboratories. Even at room temperature CO is oxidized. The high activity of Pt/CoO x/SiO2in CO oxidation is related to the absence of CO inhibition effects at low temperatures (22). At temperatures up to about 200°C Pt surfaces are almost inactive for CO oxidation because the whole Pt surface is covered with CO. Oxygen cannot adsorb and dissociate on a CO-covered Pt surface. At higher temperatures this CO-inhibition disappears because some of the CO desorbs, resulting in oxygen adsorption and reaction. On the multicomponent Pt catalysts CO inhibition does not occur, the transition metal oxide

Figure 3

Temperature needed for 95% CO conversion versus the average gold

particle size of Au/Al2O3calcined at 300°C (g), Au/Al2O3calcined at

600°C (e), Au/Al2O3calcined at 900°C (c) and Au/MO x/ Al2O3(a)

catalysts. The three Au/Al2O3catalysts have been calcined at 300, 400

and 600°C in order to change the average Au particle size

CO conversion starts between 300 and 350°C over CoO x/SiO2and

MnO x/SiO2catalysts. However, 50% conversion was not reached over

these catalysts at 400°C, the maximum temperature used in these

series of experiments

* Conversion of O2for reducing and stoichiometric gas mixtures, and

conversion of CO for oxidizing gas mixtures.

supplies the O needed for the reaction. It is likely that the reaction takes place at the Pt-MO x interface (22).

Some of the gold-based catalysts are clearly superior to the Pt-based catalysts. For example, full conversion of CO is reached over Au/MnO x/Al2O3below room temperature, whereas a temperature of 100°C is needed for complete conversion over Pt/CoO x/SiO2. In the opinion of the present authors the superior activity of the Au-based catalysts is related to the low Au-O and Au-CO bond strengths.

The gold catalysts could be used as a start-up automotive catalyst because of the short warm-up period required to heat the catalyst to the temperature at which it becomes effective. Alternatively, new generations of automotive three-way catalysts based on gold might be feasible, since Au-based catalysts are also able to reduce nitrogen oxides (8, 9, 23).

2 Selective Oxidation of CO in the Presence of Hydrogen

The hydrogen-air PEM (Polymer Electrolyte Membrane) fuel cell is potentially an attractive and clean energy source for vehicle propulsion and auxiliary power units. However, it is not practical to store hydrogen in large quantities aboard a vehicle. Hydrogen storage and distribution can be avoided by producing hydrogen locally (on-board) from gasoline, methanol or natural gas via steam-reforming, or partial oxidation combined with water-gas shift reaction processes.

A major problem is the presence of a few per cent of CO in the hydrogen product stream. It decreases the efficiency of the fuel cell by CO-poisoning of the Pt-based electrode at the operating temperature of the fuel cell, typically 60-100°C. The most promising approach to reduce the CO concentration to acceptable levels is by selective catalytic oxidation (SCO) of CO, ie reaction (2). Hence, an efficient catalyst must be highly active in CO oxidation at temperatures compatible with the operation of the PEM fuel cell and very selective to CO2formation. The selectivity is defined as the ratio of oxygen used for CO oxidation over the total oxygen concentration which includes the oxygen loss due to H2O formation:

2H2+ O2→2H2O (6) For a number of reasons these catalyst requirements - high activity in CO oxidation at 60-100°C and almost no hydrogen oxidation - are hard to meet:

a)reaction (6) is faster than reaction (2) on most of the

noble metal catalysts;

b)in the relevant temperature range CO oxidation is very

slow on Pt and Pd due to CO inhibition (15).

Results reported in the literature show that CO can be oxidized in preference to hydrogen in the temperature range of 100-200°C over Al2O3supported Ru, Rh, and Pt catalysts (24 - 27). The interesting observation is that CO oxidation is enhanced by the presence of hydrogen. Possible mechanisms include the effect of hydrogen on the heat of adsorption of CO and interaction of the hydroxylated Al2O3 support with CO adsorbed on Pt (25). For Pt catalysts an optimum in activity and selectivity was found at 200-250°C (24, 25). At lower temperatures (desired temperature ~70°C) CO oxidation was rather slow due to CO inhibition of

oxygen adsorption. At a higher temperature the selectivity decreased because CO desorption enables hydrogen adsorption and oxidation.

We have studied SCO of CO over various multicomponent Au-Pt-, Rh-, Pd- and Ru-based catalysts. Some of the results obtained over gold-based catalysts are summarized in the present paper. For more details see references 13 and 14.

Gold catalysts are promising candidates for SCO for two reasons:

1)They exhibit an extraordinarily high activity in CO oxidation

in the low temperature range relevant for fuel cell applications.

2)The catalysts have another unique property: the rate of

CO oxidation exceeds that of hydrogen oxidation in the relevant temperature range (13, 14, 28).

Results obtained for four alumina-supported Au-based catalysts will be discussed here: Au, Au/MnO x, Au/MgO with very small gold particles and the multicomponent Au/MgO/MnO x catalyst. All these catalysts are able to oxidize CO at room temperature with the multicomponent catalyst being the most active: 100% conversion at 20°C. Hydrogen is also oxidized over these catalysts. However, as shown in Table 2, significantly higher temperatures are needed for hydrogen oxidation compared to CO oxidation. When hydrogen is present in the feed, the behaviour of the catalysts towards CO oxidation changes. Figure 4 shows the conversion of CO, hydrogen and oxygen for a mixture H2: CO : O2= 4 : 2 : 1. This composition was chosen because it contains just enough oxygen to oxidize all the CO, if hydrogen does not participate in any oxidation reaction. Up to 50°C relatively high CO conversions are obtained as was the case for measurements without hydrogen in the feed. However, at higher temperatures hydrogen oxidation starts at the expense of CO oxidation. Over the most active catalysts, Au/MgO and Au/MgO/MnO x all the oxygen is consumed, even at 20°C. Depending on the composition of the catalyst, hydrogen conversion exceeds that of CO at temperatures between 150 and 250°C. At temperatures higher than 300°C CO oxidation increases again.

The presence of CO distinctly suppresses the oxidation of hydrogen at low temperatures over all four of the catalysts. For example, over Au/MgO the hydrogen conversion at 20°C

in the absence of CO in the feed is 0.45 (see Table 2) and in the presence of CO it is zero. The CO 2selectivity of Au/MgO and Au/MgO/MnO x is higher than 90% in the temperature range of interest for fuel cell applications (up to 100°C).However at temperatures higher than 100°C the CO 2selectivity of Au/MgO decreases rapidly with increasing temperature. This decrease of selectivity is much slower using the multicomponent Au/MgO/MnO x catalyst.

Conversion αat 20°C and temperature needed for a conversion of 25% hydrogen and 50% (CO). Ratio CO/O 2= 1 and H 2/O 2= 4.

Reactant flow 40 ml/min -1, GHSV = 2500 h -1with a mixture of H 2, CO and O 2in helium (96 vol%)

Figure 4

Conversion of CO (a ), H 2(g ) and O 2(c ) versus temperature over (a) Au/Al 2O 3, (b) Au/MnOx/Al 2O 3, (c) Au/MgO/Al 2O 3and (d) Au/MgO/MnOx/Al 2O 3.

Au loading 5wt%Au: M (M = Mg and Mn). Atomic ratio = 1 : 5. The Au : Mg : Mn atomic ratio was 1 : 5 : 5 in the case of Au/MgO/MnO x /Al 2O 3. (Adapted from (13))

CO 2selectivity (24 - 27). The addition of MnO x to Au/Mg/Al 2O 3improves the CO conversion and CO 2selectivity over the whole temperature range studied for all values of λused.Based on the results discussed, the following model is proposed for the oxidation of CO in a hydrogen atmosphere.In our opinion gold nanoparticles have an intrinsic activity in CO oxidation and in hydrogen oxidation according to the same mechanism that has been established for PGMs (15).For CO oxidation the relevant steps are 3, 4 and 5 and for H 2oxidation (6) steps 8, 9 and 10:

H 2 →2H ads (8)O 2→2O ads

(9)2H ads + O ads →H 2O (via OH ads )

(10)

In this view gold nanoparticles have the ability to dissociate O 2(step 9) and H 2(step 8). Some recent results obtained in our laboratory support this proposal. It was found that the rate of the hydrogen-deuterium exchange reaction (11) is much faster over Au/Al 2O 3catalysts, active in H 2and CO oxidation, than over Al 2O 3(29):

H 2

+ D 2

2HD

(11)

The significant differences between Au and the PGM catalysts are the lower heat of CO adsorption and the lower binding energies of H and O on Au combined with the slower rate of dissociative adsorption of oxygen and hydrogen on gold.

The mechanism proposed includes adsorption of CO on the small, mainly metallic, gold particles. At low temperatures hydrogen adsorption is blocked by CO (T <100°C). At higher temperatures the CO coverage becomes small, allowing more hydrogen to dissociate and react with oxygen resulting in a decrease in the selectivity towards CO 2. An

→←Table 3 CO Conversion at 70°C for Three Values of λ(see text) in 70

vol% Hydrogen.

Feed composition: H 2(70 vol%) and CO+O 2(1.2 vol%) in helium (29 vol%)

Figure 5

CO conversion in hydrogen rich feed: over: A] Au/MgO/Al 2O 3B] Au/MgO/MnO x /Al 2O 3

70 vol% H 2and CO + O 2(1.2 vol%) in helium (~29 vol%) Au loading 5 wt%; Au : Mg atomic ratio 1 : 5; Au : Mg : Mn atomic ratio 1 : 5 : 5; a) λ= 4, b) λ= 2 and c) λ= 1

increase in λ, ie upon lowering the CO partial pressure, may induce a similar effect. At low temperatures most of the O may originate from the lattice of MnO x. At these temperatures the reaction most likely occurs at the Au-MnO x interface. The multicomponent Au/MgO/MnO x/Al2O3catalyst has the best performance in SCO of CO. The presence of MgO enables the formation of small, highly dispersed, and thermally stable gold particles on γ-Al2O3which are highly active in CO and H2 oxidation. The CO oxidation activity is improved by adding MnO x. In addition, the hydrogen oxidation on these multicomponent catalysts is suppressed, leading to an overall increase of CO2selectivity in the temperature range relevant for fuel cell applications (~70°C).

Acknowledgement

The authors acknowledge financial support from the Netherlands Organization for Scientific Research (NWO). The work was also supported by INTAS (project nr 99-01882). The work has been performed under the auspices of NIOK (Netherlands Institute for Catalysis Research). NIOK report nr UL UL02-2-01.

About the Authors

Ben Nieuwenhuys is the principal investigator and supervisor of the research group at Leiden Institute of Chemistry, Leiden University in The Netherlands, where the investigations described here were undertaken. He has more than 170 publications on various surface chemistry topics and heterogeneous catalysis. The research progamme of the group focuses on the understanding of heterogeneous catalysis on the atomic level; and, in particular, the relationship between activity, selectivity of the catalyst and the structure/composition of sites present on the surface. These goals are achieved by correlating results of experiments on model systems using the surface science approach with those obtained on high surface area (‘real’) catalysts.

Ruud Grisel was a PhD student at the Leiden University before he moved to ASM (Advanced Semiconductor Materials) in 2001. He will defend his PhD thesis entitled ‘Supported Gold Catalysts for Environmental Applications’ in June 2002.

Kees-Jan Weststrate investigated the activity of gold and other noble metal catalysts in the selective oxidation of CO in the presence of H2for his MSc thesis. From April 2002 he has been working on his PhD. His research involves the study of carbon species on noble metal surfaces during different reactions, such as partial oxidation of methane to syn-gas.

Andrea Gluhoi joined the Heterogeneous Catalysis and Surface Science Group in 2000 as a PhD student. Before 2000 she worked as a researcher at the National Institute for Research and Development of Isotopic and Molecular Technologies at the Cluj Napoca, Romania for three years. Her main research interest is in the influence of support and additives on the catalytic activity and selectivity of gold-based catalysts in oxidation and reduction reactions. References

1 V. Ponec and G.C. Bond, in ‘Catalysis by Metals and Alloys’, eds. B.

Delmon and J. T. Yates, Stud.Surf,Sci.& Catal., Elsevier Sci./Amsterdam, 1995, 95

2 M. Haruta, Catal. Toda y, 1997, 36, 153

3 G.C. Bond, Catal. Today, 2002, 72, 5; G.C. Bond, Gold Bull., 2001, 34,

117

4 G.J. Hutchings, Gold Bull., 1996, 29, 123

5 D.T. Thompson, Gold Bull., 1998, 31, 111

6G.C. Bond and D.T. Thompson, Catal. Rev. - Sci. Eng., 1999, 41, 319

7 M. Haruta and M. Date, Appl. Catal. A, 2001, 222, 427

8 M.A.P. Dekkers, M.J. Lippits and B.E. Nieuwenhuys, Catal. Lett., 1998,

56, 195

9 M.A.P. Dekkers, M.J. Lippits and B.E. Nieuwenhuys, Catal. Today, 1999,

54, 381

10 R.J.H. Grisel, P.J. Kooyman and B.E. Nieuwenhuys, J. Catal., 2000, 191,

430

11 R.J.H. Grisel and B.E. Nieuwenhuys, Catal. Today, 2001, 64, 69

12 R.J.H. Grisel, J.J. Slyconish and B.E. Nieuwenhuys, Topics in Catal., 2001,

16/17, 425

13 R.J.H. Grisel and B.E. Nieuwenhuys, J. Catal., 2001, 199, 48

14R.J.H. Grisel, C.J. Weststrate, A. Goossens, M.W.J. Crajé, A.M. van der Kraan, and B.E. Nieuwenhuys, Catal. Today, 2002, 72, 123

15 B.E. Nieuwenhuys. Adv. Catal., 1999, 44, 49

16 A. Gluhoi and B.E. Nieuwenhuys, to be published

17 S.K. Tanielyan and R.L. Augustine, Appl. Catal., 1992, A85, 73

18 M. Valden, S. Pak, X. Lai and D.W. Goodman, Catal. Lett., 1998, 56, 7

19 S. Tsubota, T. Nakamura, K. Tanaka and M. Haruta, Catal. Lett., 1998,

56, 131

20 Y.J. Mergler, A. van Aalst, J. van Delft and B.E. Nieuwenhuys, Appl. Catal.,

1996, B10, 245

21 G.C. Bond, M.J. Fuller and L.R. Mulloy, Proc.6th Int. Congr. Catal., 1976,

A26

22 Y.J. Mergler, J. Hoebink and B.E. Nieuwenhuys, J. Catal., 1997, 167, 305

23 A. Ueda and M. Haruta, Gold Bull., 1999, 32, 3

24 M. Watanabe, H. Uchida, H. Igarashi and M. Suzuki, Chem. Lett., 1995,

21

25 M.J. Kahlich, H.A. Gasteiger and R.J. Behm, J. Catal., 1997, 171, 93

26 S.H. Oh and R.M. Sinkevitch, J. Catal., 1993, 142, 254

27 M.L. Brown, A.W. Green, G. Cohn and H.C. Anderssen, Ind. Eng. Chem.

Res., 1960, 52, 841

28 R.H. Torres Sanchez, A. Ueda, K. Tanaka and M. Haruta, J. Catal., 1997,

168, 125

29 H.S. Vreeburg, J.W. Bakker and B.E. Nieuwenhuys, unpublished results.

酵母双杂交技术

酵母双杂交系统 1．原理 酵母双杂交系统的建立得力于对真核细胞调控转录起始过程的认识。研究发现，许多真核生物的转录激活因子都是由两个可以分开的、功能上相互独立的 结构域(domain)组成的。例如，酵母的转录激活因子GAL4，在N端有一个由147个氨基酸组成的DNA结合域(DNA binding domain,BD)，C端有一个由113 个氨基酸组成的转录激活域(transcription activation domain,AD)。GAL4分子的DNA结合域可以和上游激活序列(upstream activating sequence，UAS)结合，而 转录激活域则能激活UAS下游的基因进行转录。但是，单独的DNA结合域不 能激活基因转录，单独的转录激活域也不能激活UAS的下游基因，它们之间只 有通过某种方式结合在一起才具有完整的转录激活因子的功能。 2．试验流程 酵母双杂交系统正是利用了GAL4的功能特点，通过两个杂交蛋白在酵母细 胞中的相互结合及对报告基因的转录激活来捕获新的蛋白质，其大致步骤为: 2．1、视已知蛋白的cDNA序列为诱饵(bait)，将其与DNA结合域融合，构建 成诱饵质粒。 2．2、将待筛选蛋白的cDNA序列与转录激活域融合，构建成文库质粒。2．3、将这两个质粒共转化于酵母细胞中。 2．4、酵母细胞中，已分离的DNA结合域和转录激活域不会相互作用，但诱 饵蛋白若能与待筛选的未知蛋白特异性地相互作用，则可激活报告基因的转录；反之，则不能。利用4种报告基因的表达，便可捕捉到新的蛋白质。 3．特点 优点 蛋白--蛋白相互作用是细胞进行一切代谢活动的基础。酵母双杂交系统的建立 为研究这一问题提供了有利的手段和方法。 缺点 尽管该系统己被证实为一种非常有效的方法，但它也有自身的缺点和问题。1、它并非对所有蛋白质都适用，这是由其原理所决定的。双杂交系统要求两种杂 交体蛋白都是融合蛋白，都必须能进入细胞核内。因为融合蛋白相互作用激活 报告基因转录是在细胞核内发生的。2、假阳性的发生较为频繁。所谓假阳性，即指未能与诱饵蛋白发生作用而被误认为是阳性反应的蛋白。而且部分假阳性 原因不清，可能与酵母中其他蛋白质的作用有关。3、在酵母菌株中大量表达外源蛋白将产生毒性作用，从而影响菌株生长和报告基因的表达。 使用酵母双杂交技术应注意的问题 真正明了酵母双杂交技术的主要原理及筛选方法是进行酵母双杂交实验的前提，构建成功的诱饵质粒及大量的材料准备是进行酵母双杂交实验的保证。只 有明了双杂交的原理，才有可能设计实验进程、才能有目的的进行材料准备， 并能对实验结果作出预测与分析，尤其要对具体实验中各种选择性压力培养基 的使用目的要十分清楚。大量的材料准备、较长的实验流程是酵母双杂交有别

企业经营情况调研报告

企业经营情况调研报告 篇一：公司经营情况调查报告201410 关于***有限公司经营情况的调查报告 被调查企业：**有限公司 被调查人：** 调查日期：2014年10月 调查人：** 报告人：** 一、企业概况 **公司前身是武鸣县乡镇企业——**县**淀粉厂，原建设单位为**，于1994年经**批准立项、**环评批复而建设淀粉生产线和酒精生产线，2007年8月**公司整体收购了该厂的全部资产。 **公司成立于2006年2月，注册资本人民币1000万元，地址位于**镇**村，是一家专业生产食用酒精和淀粉制品的

企业。法定代表人: **,股东**占公司60%的股份，股东**占公司36%的股份，股东**占公司4%的股份。公司下设人力资源部、财务部、市场部、车间等内部管理机构，总经理**，现有职工**人，其中大中专学历以上占30%。 2009年公司被评为**市农业产业化重点龙头企业，2010年被评为安全生产标准化三级企业，2009年和2010年连续两年被评为纳税超百万元企业；并经**市工信委、**酿酒协会、**局进行产能核定，**号文件《关于**公司食用酒精生产线符合产业政策的函》批准生产。 2013年末公司总资产15137万元，其中固定资产10768万元，占地面积77亩。公司成立之初至2012年期间依靠**镇丰富的木薯资源，引进国内外的工艺技术进行食用淀粉和酒精生产，所产“**”牌食用淀粉及酒精，应用于造纸、粘合剂、纺织、食品、医药、化工等行业，主要销往**、**等地。 几年来，先后投入了大量资金，对

生产工艺、环保设施进行了全面的升级改造，完成了年产3万吨酒精生产线技改项目建设、年处理108万立方废液量的环保处理站项目建设、年产1200万Nm3/a生物 质燃气的厌氧系统项目建设，25T/h 混烧甲烷的生物质节能锅炉项目建设、年发电量1080万度的蒸汽发电站项目建设、年产1万吨生物有机肥项目建设、1万亩农业示范园项目建设等。但自2012年以后，当地木薯种植锐减，公司木薯淀粉生产线停工。公司于2013年至2014年投入资金八千多万元对食用酒精生产项目进行了技术改造。目前，项目已竣工投入生产。 二、财务及经营状况分析 **公司提供了2012年度、2013年度审计年报（审计意见为无保留意见）和2014年9月份财务报表，财务状况反映见下表： **公司近期财务状况表 （一）财务指标说明

gstreamer手册(简体中文版)

第1章. 序言 本章将从技术的角度来描述本手册的总体结构。 1.1. GStreamer是什么? GStreamer是一个创建流媒体应用程序的框架。其基本设计思想来自于俄勒冈(Oregon)研究生学院有关视频管道的创意, 同时也借鉴了DirectShow的设计思想。 GStreamer的程序开发框架使得编写任意类型的流媒体应用程序成为了可能。在编写处理音频、视频或者两者皆有的应用程序时, GStreamer可以让你的工作变得简单。GStreamer并不受限于音频和视频处理, 它能够处理任意类型的数据流。管道设计的方法对于实际应用的滤波器几乎没有负荷, 它甚至可以用来设计出对延时有很高要求的高端音频应用程序。 GStreamer最显著的用途是在构建一个播放器上。GStreamer已经支持很多格式的档了, 包括: MP3、Ogg/Vorbis、MPEG-1/2、AVI、Quicktime、mod等等。从这个角度看, GStreamer更像是一个播放器。但是它主要的优点却是在于: 它的可插入组件能够很方便的接入到任意的管道当中。这个优点使得利用GStreamer编写一个万能的可编辑音视频应用程序成为可能。 GStreamer框架是基于插件的, 有些插件中提供了各种各样的多媒体数字信号编译码器,也有些提供了其它的功能。所有的插件都能够被链接到任意的已经定义了的数据流管道中。GStreamer的管道能够被GUI编辑器编辑, 能够以XML档来保存。这样的设计使得管道链接库的消耗变得非常少。 GStreamer核心库函数是一个处理插件、数据流和媒体操作的框架。GStreamer核心库还提供了一个API, 这个API是开放给程序员使用的---当程序员需要使用其它的插件来编写他所需要的应用程序的时候可以使用它。 1.2. 谁需要读这个手册? 本手册是从一个程序开发人员的角度来描述GStreamer的: 它叙述了如何利用GStreamer的开发库以及工具来编写一个基于GStreamer的应用程序。对于想学习"如何编写插件"的朋友们, 我们建议你去参考<<插件编写指南(Plugin Writers Guide)>>。

公司运营情况报告

公司运营情况报告 篇一：企业经营情况报告 企业经营情况报告 (本文来自：小草范文网:公司运营情况报告)武候区国税局： 我公司成都####有限公司经武候工商行政管理局批准于XX年#月#日正式成立，税务登记时间XX年#月#日。本公司法人代表：#。主要经营范围：#。经我公司申请，贵局于XX年5月25日书面批准认定我公司从XX年#月#日进入（辅导期）增值税一般纳税人。 我公司注册资本100万元，主要供应商为###限公司，客户零散，目前已经成交的客户有###有限公司等。从09年#月份开始营运，#月份做为小规模企业实现销售收入为#元，其中不含税销售收入为#元，缴纳增值税额为#元。实际#月份有意向和我们交易的金额###多万元，但这些客户都是一般纳税人，必须要求我公司开具税率17％增值税专用发票抵扣，从而致使很多业务暂时没有做成，预计XX年实现销售收入100万元。 成都###有限公司 XX年#月#日 篇二：公司经营情况总结报告

公司经营情况总结报告 一、公司基本情况简介 长城宽带网络服务有限公司（Great Wall Broadband Network Service Co., Ltd.缩写为GWBN）成立于XX年4月，属国营企业，由中信集团全资控股。是投资近30亿元建立，辐射全国大中城市的高科技电信网络运营服务公司。 长城宽带总部设于北京，公司法定代表人王之。经过10年的发展，长城宽带已经成为全国最大的驻地网运营商。XX 年长城宽带荣获中国互联网协会授予的“企业信用AA+级”荣誉称号。长城宽带将向广大用户展示一个更加全面的“宽带专家”形象，引领用户走向更加美好的网络新生活。 伴随中国宽带产业的健康成长，长城宽带作为全国最大的驻地运营商，公司秉承“精诚服务，全网关怀”的经营理念，与 CISCO 、 IBM 、富士通、电信、联通、泰瑞比、新浪、新视野等多家国内外知名企业强强连手，不断地在网络设备、技术升级及宽带应用产品上为全国36个大中城市用户提供更新更好的服务。 重庆长城宽带网络服务有限公司为长城宽带网络服务有限公司在重庆的分公司。成立于XX年8月，主要负责长城宽带在重庆地区的网络建设维护和运营。目前公司的宽带网络主要分布渝中，南岸，九龙坡，江北，渝北，沙坪坝，

酵母双杂交H2Y和Y187系统protocol

目录 （一）介绍 4 （二）试剂盒物品清单 7 （三）额外附加物品列表9 （四）酵母菌株11 （五）酵母载体14 （六）方法简述：单杂交文库的构建和筛选16 方法简述：双杂交文库的构建和筛选17 （七）构建用于酵母单杂交的报告质粒载体18 （八）构建用于酵母双杂交的DNA-BD融合载体19 （九）构建生成cDNA文库21 （十）构建和筛选酵母单杂交和双杂交文库（简述）27 （十一）酵母单杂交文库的构建和筛选28 （十二）酵母双杂交文库的构建和筛选30 方法A:通过酵母配对（Yeast Mating）来筛选目的蛋白30 方法B:通过共转化的方法筛选目的蛋白35 （十三）分析阳性相互作用结果38 （十四）问题解决指南44 （十五）参考文献47 （十六）相关产品50 附录A: 双链 cDNA合成的典型结果51 附录B: 酵母感受态的制备—LiAc 法52 附录C：单杂交对照载体信息53 附录D：双杂对照载体信息54 表格列表 Table I． BD Matchmaker酵母菌株的基因型11 Table II． BD Matchmaker酵母菌株的表型11 Table III．单杂交系统的载体14 Table IV．双杂交系统的载体15 Table V．各BD-Matchmaker DNA-BD 载体的比较19 Table VI． RNA起始浓度和PCR扩增循环数之间的关系24 Table VII．单杂交共转化的对照实验的设置29 Table VIII．单杂共转化对照实验：期望的结果29 Table IX．双杂交转化的对照实验的设置33 Table X．双杂交配对筛选的对照实验的设置 Table XI．双杂交共转化的对照实验的设置 Table XII．双杂交共转化的对照实验：期望的结果 Table XIII．用于PCR筛选菌落的Assembling Master Mixs

酵母双杂交系统及其应用

酵母双杂交系统及其应用 Y east Two-hybrid System and Its Application 1.酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的生物学特性 （1）单细胞真核生物 尽管酵母细胞比较简单，但它们具有所有真核生物细胞的主要特征，如含有一个独立的细胞核、多条线性染色质包装成染色体、细胞质包含了全部的细胞器和细胞骨架结果（如肌动蛋白纤维）。 （2）与其它真核生物相比，它们的基因组较小，基因数目也较少； 1996年已完成酵母全基因组测序（ 1.5 x 107 bp），是第一个被测序的真核生物。大约有6000个基因。目前已经建立了一个6000个菌株的文库，每一个菌株中只删除了一个基因。其中5000多株在单倍体状态时能够存活，表明大多数酵母基因时非必需的。 （3）易于培养和操作,可以在实验室快速繁殖 在指数生长期每90分钟繁殖一代，从单个细胞可以繁殖称克隆群体。 （4）单倍体和双倍体的存在使酿酒酵母便于进行遗传分析 酿酒酵母可以以单倍体状态和双倍体状态生长。单倍体和双倍体之间的转换是通过交配和孢子形成来实现的。 有两种单倍体细胞类型，分别为a型和α型。在一起生长时，这些细胞因交配而形成a/α双倍体细胞。在营养匮乏时，a/α双倍体发生减数分裂，产生一个子囊的结构，每个子囊含有4个单倍体孢子（两个a－孢子和两个α－孢子）。但当生长条件改善时，这些孢子可以出芽并以单倍体细胞的形式生长或交配而重新形成双倍体。 一个酵母细胞可同时兼容几种不同质粒 bud，芽, 蓓蕾starvation，饥饿, 饿死 ascus，n.[微生物]子囊meiosis，n.减数分裂, 成熟分裂 haploid，n.[生物]单倍体, 仅有一组染色体的细胞adj.单一的 diploid，adj.双重的, 倍数的, 双倍的n.倍数染色体 ascospore，n.[植]囊孢子 rupture，v.破裂, 裂开, 断绝(关系等), 割裂。n.破裂, 决裂, 敌对, 割裂 spore，n.孢子vi.长孢子germinate，v.发芽, 发育, 使生长

UL1993简体中文版

1 范围 1 适用于日光自带镇流器灯及额定电压120V 的日光灯适配器(配用白炽光照明装置及手提式电灯的灯座). 产品专为符合国际电气代号ANSI/NFPA 70 要求而设计. 2这些装置集电阻,电抗,或电子(固态)型镇流器而成. 3 这些要求不涉及中型对中型底座(E26) 配件,诸如, 光电池,移动探测器,无线遥控或调光器等. 4 这类装置不宜用于紧急出口装置或紧急出口指示灯上. 5具有新的或有别于那些符合初始标准产品的属性,特征,组件,材料或系统的产品,以及具有火灾, 电击或伤人隐患的产品,应该用附加的组件/制成品要求对前述产品进行评估,以确定有必要保持标准初 衷的用户安全标准. 2 术语 1以下定义适用于本要求。2.3、2.4 和2.13 中的定义见图2.1 。 2术语“装置”用于表示本标准中覆盖的荧光灯自镇流器和荧光灯适配器。如仅对一个装置有要求，则可使用装置的名称。 3装置底座——螺纹底座将底座与照明固定装置或移动式电灯的螺纹灯座相连。 4装置灯座——提供可替换荧光灯照明电源。 5装置灯座栓——灯座的一种设计，仅用于与相应的灯底座相契合。 6电子镇流器——一种包含受纯功组件（晶体管、可控硅及类似组件）控制的高频转换装置，并且由串联容抗或感抗与灯一起，为适应高的转换频率而提供稳定阻抗的一种镇流器。 7镇流器适配器——有一可替换照明电源的适配器，可能带有一可替换的启动装置以及结合并永久封装操作所需的其它零件。 8灯连接器——黏附在软导线上的一套接触装置，可将软导线和灯管进行电气连接但无机械支撑。9带电零件——测得电压大于30V 或与地之间的峰值电压（在相反极性的零件之间）为 10的任何传导性零件。 2.10 位置——a）潮湿位置——电气装置内、外或邻近部经常受潮的位置，包括部分受罩壳、商标保护的位置和类似位置。b）干燥位置——不经常受潮的位置，但包括暂时受潮的位置（如未完工的建筑物）， 提供充分的通风系统以避免潮气的沉积。c）多雨位置——液体可能滴落、溅出或流到电器设备上的位置。 11功率电容器——与磁性镇流器一起使用电容器应：a）与一个或数个灯管串联且为灯管电流提供镇流器阻抗；或b）对于功率因子修正，通过镇流器的输入引线或通过主要线圈的扩展面。 12自镇流器灯管——结合有一灯座和不可替换灯源以及任何附加的零件（照明源的启动和稳定操作所必须的，如不永久性损坏则不可能拆除）。 13电源灯座——提供电源给自镇流器灯或灯适配器的、日光灯固定或移动式固定装置的螺口灯座。14型式试验——试验目的是确定按设计和生产要求进行生产装置是否满足本标准的要求。 3 概述 1零件 2除3.12 中所规定的，本标准内的产品零件应符合其它零件的要求。见附录A 中本标准产品中使用零件的标准清单。 3无须符合特殊要求的零件：a）在此应用中、无须满足产品特征或性能的零件；b）受本标准的要求而替换的零件。 4应依据零件的额定以便确认其使用条件。 5特殊的零件因其结构特征的不完全性或性能的限定进行识别。此零件仅在限定的条件下进行使用，如不超过规定的温度范围，且此零件应仅在他们可以识别的特殊条件下使用。 6测量单位： 7如在圆括号内标有其它单位的值后有一测量单位，第二个值可能仅为近似值。在国际单位系统中第一个规定值为要求。 8除非另有规定，电压和电流的值为方根值。 9参考 10应说明本标准的要求中出现的未标明日期的规则或标准，如给出规则或标准的最新修订版本。

TR-069简体中文版

技术报告 DSL 论坛 TR - 069 CPE WAN 管理协议 2004年5月 作者： DSLHOME-Technical Working Group 编辑： Jeff Bernstein, 2Wire Time Spets, Westell 工作组召集人 Greg Bathrick, Texas Instruments George Pitsoulakis, Westell 内容摘要： 适用于CPE与自动配置服务器(ACS: Auto-Configuration Server)之间的通信协议，包括安全地自动配置及其它在公用框架下的CPE管理功能。

声明： The DSL Forum is a non-profit corporation organized to create guidelines for DSL network system development and deployment. This Technical Report has been approved by members of the Forum. This document is not binding on the DSL Forum, any of its members, or any developer or service provider involved in DSL. The document is subject to change, but only with approval of members of the Forum. ?2001 Digital Subscriber Line Forum. All Rights Reserved. DSL Forum technical reports may be copied, downloaded, stored on a server or otherwise re-distributed in their entirety only. Notwithstanding anything to the contrary, the DSL Forum makes no representation or warranty, expressed or implied, concerning this publication, its contents or the completeness, accuracy, or applicability of any information contained in this publication. No liability of any kind shall be assumed by the DSL Forum as a result of reliance upon any information contained in this publication. The DSL Forum does not assume any responsibility to update or correct any information in this publication. The receipt or any use of this document or its contents does not in any way create by implication or otherwise any express or implied license or right to or under any patent, copyright, trademark or trade secret rights which are or may be associated with the ideas, techniques, concepts or expressions contained herein. NOTE: The user's attention is called to the possibility that compliance with this report may require use of an invention covered by patent rights. By publication of this report, no position is taken with respect to the validity of the claim or of any patent rights in connection therewith. The patent holder has, however, filed a statement of willingness to grant a license under these rights on reasonable and nondiscriminatory terms and conditions to applicants desiring to obtain such a license. Details may be obtained from the publisher.

幻想战姬竞技场剑系4大战姬推荐

幻想战姬竞技场剑系4大战姬推荐 幻想战姬竞技场剑系4大战姬推荐，推荐幻想战姬竞技场剑系4大战姬。希望这篇幻想战姬竞技场剑系4大战姬推荐，能帮助到各位正在玩幻想战姬的玩家朋友们！ 剑系第一名：花嫁妲己 排第一的毫无疑问是花嫁妲己，从属性上来看，姬65的花嫁接近4W血，1600的攻击。从技能上来说，后排主动高倍率全体AOE，被动贯通回能量。从卡面来看，呆萌的新娘子，你还要啥自行车? 这么完美的卡你有什么不练她的理由? 我想很多人都有打死对面三个后被花嫁一个AOE清场的经历，所以，这卡的评价，中低端局有个作为核心卡的能力，高端局则绝对是目前最强辅助。 剑系第二名：孙悟空 首先，大圣的血量足以支撑其撑在前排。并且前排主动技能贯通伤害的倍率也不错，大圣在前排，对对面除妲己以外的盾系职业来说都是毁灭性的打击。唯一的不足就是，大圣的后排技能略逗，放后排没什么意义。

剑系第三名：哪吒 首先我说要，哪吒后排的技能相当不错。在PVE中对很多难啃的BOSS有奇效，许多人都是靠天女和大腿的哪吒过的老牛，而且哪吒的攻击力成长也非常不错。但哪吒这卡有几个不协调的 缺点，首先，作为前排，血过少，不是很能抗，而且作为前排，贯通技能的倍率略感人，作为后排，虽然技能的眩晕3回合对PVP来说十分不错，发动实在太慢，很可能在发动前就会被打飞。

剑系第四名：钟馗姬 说实话，馗姬更适合推图，血量一般，前排AOE技能的倍率也一般。攻击虽然不错，但站不住的话就意义不大了，JJC中用的人也不算多。 最后说几张福袋剑卡

狂欢卡莉： 就是弱化版的后排钟馗姬，PVP价值不大。 心愿土特产： 技能相当优秀，奈何本身属性实在不行，本来是唯一可以痛打盾妲己的存在，奈何从属性上来看却不能对盾妲己造成什么实质的威胁。 华阳： 只能说技能看上很美，但是有两点致命缺点一、横扫回能量只回后排二、和贯通回能量不叠加。所以，实际来说，华阳很鸡肋。 另外，推荐非洲战神之一的赵萌萌，首充即送，初始相阶，成长却意外的还不错，前排技能倍率也很不错，是各位非洲大草原人民最忠实的好朋友，萌萌大法，千秋万代，一统江湖。 责任编辑【威尔】

酵母双杂交系统的发展和应用

酵母双杂交系统的发展和应用 随着对多种重要生物的大规模基因组测序工作的完成，基因工程领域又迎来了一个新的时代---功能基因组时代。它的任务就是对基因组中包含的全部基因的功能加以认识。生物体系的运作与蛋白质之间的互相作用密不可分，例如：DNA合成、基因转录激活、蛋白质翻译、修饰和定位以及信息传导等重要的生物过程均涉及到蛋白质复合体的作用。能够发现和验证在生物体中相互作用的蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质是认识它们生物学功能的第一步。 酵母双杂交技术作为发现和研究在活细胞体内的蛋白质与蛋白质之间的相互作用的技术平台，在近几年来得到了广泛运用。酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的，研究活细胞内蛋白质相互作用，对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到，它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。大量的研究文献表明，酵母双杂交技术既可以用来研究哺乳动物基因组编码的蛋白质之间的互作，也可以用来研究高等植物基因组编码的蛋白质之间的互作。因此，它在许多的研究领域中有着广泛的应用。本文就酵母双杂交的技术平台和应用加以介绍。 酵母双杂交系统的建立是基于对真核生物调控转录起始过程的认识。细胞起始基因转录需要有反式转录激活因子的参与。反式转录激活因子，例如酵母转录因子GAL4在结构上是组件式的（modular），往往由两个或两个以上结构上可以分开，功能上相互独立的结构域（domain）构成，其中有DNA结合功能域(DNA binding domain,DNA-BD)和转录激活结构域（activation domain，DNA-AD）。这两个结合域将它们分开时仍分别具有功能，但不能激活转录，只有当被分开的两者通过适当的途径在空间上较为接近时，才能重新呈现完整的GAL4转录因子活性，并可激活上游激活序列（upstream activating sequence, UAS）的下游启动子，使启动子下游基因得到转录。 根据这个特性，将编码DNA-BD的基因与已知蛋白质Bait protein的基因构建在同一个表达载体上，在酵母中表达两者的融合蛋白BD-Bait protein。将编码AD的基因和cDNA文库的基因构建在AD-LIBRARY表达载体上。同时将上述两种载体转化改造后的酵母，这种改造后的酵母细胞的基因组中既不能产生GAL4，又不能合成LEU、TRP、HIS、ADE，因此，酵母在缺乏这些营养的培养基上无法正常生长。当上述两种载体所表达的融合蛋白能够相互作用时，功能重建的反式作用因子能够激活酵母基因组中的报告基因HIS、ADE、LACZ、MEL1，从而通过功能互补和显色反应筛选到阳性菌落。将阳性反应的酵母菌株中的AD-LIBRARY 载体提取分离出来，从而对载体中插入的文库基因进行测序和分析工作。在酵母双杂交的基础上，又发展出了 酵母单杂交、酵母三杂交和酵母的反向杂交技术。它们被分别用于核酸和文库蛋白之间的研究、三种不同蛋白之间的互作研究和两种蛋白相互作用的结构和位点。 基于酵母双杂交技术平台的特点，它已经被应用在许多研究工作当中。

公司经营状况总结报告

公司经营状况总结报告 公司经营状况，应该是所有股东最关心的问题。那么公司经营状况总结报告怎么写呢？以下是小编整理的公司经营状况总结报告，欢迎阅读。 公司经营状况总结报告1 现在，我代表中核苏阀蝶阀有限公司向董事会做20xx年经营总结报告，请董事会审议。 (一)承接任务方面 1、承接订单再创新高。20xx年订单承接指标6000万，我公司实际承接订单万元。其中苏阀科技下达订单万元，XX 年同期万元，增加万元；自营承接订单万元，XX年同期万元，增加万元。 2、销售收入再上新台阶。20xx年，我公司实现销售收入4426万元，与XX年同期3692万元相比增加734万元。其中苏阀科技销售收入1213万元(XX年同期1011万元，增加202万元)，占销售收入的27%；外销收入671万元(XX年同期488万元，增加183万元)，占销售收入的15%；自营部分2542万元(XX年同期2193万元，增加349万元)，占销售收入的58%。 (二)资金回笼方面 20xx年资金回笼：5229万元。其中苏阀科技1481万元；出口677万元；自营3071万元。

(三)年度利润方面 20xx年实现营业利润478万元，利润总额467万元，净利润341万元。较XX年净利润234万元同比增加107万元。 通过对上述数据的分析，我公司20xx年度在承接订单方面完成良好，销售收入方面还需要加强；在优化产品结构和控制成本与费用方面取得了极大的进步，公司盈利能力在本期获得了提高。 (一)20xx年度主要经济指标任务情况 订货：6000万元； 销售：4500万元 利润：300万元 (二)主要应对策略 1.订货目标： 20xx年蝶阀公司订货目标为6000万元人民币。其中船用阀门3100万，石油石化行业1300万，其他市场900万,出口700万。 船用阀门 我公司严格执行董事会制定的方针，积极拓展业务，与江苏很多船厂取得了联系，在技术和业务上进行良好的沟通。我公司已接到扬子江船厂、道达重工、韩通重工、南通中远船务等船厂的小批量订单。为提高公司产品在船舶市场的占有率，我公司积极开拓出口市场，与制做船舶压载系统

Windows XP SP3 简体中文版

Windows XP SP3 简体中文版(官方正版认证)不会黑屏 这是朋友的朋友开的电脑店的正版系统盘拿来分享 文件大小:625.8MB 注：本系统为微软正版系统，但是使用了破解，无需激活，请放心使用。 Windows XP Professional在系统可靠性与性能表现方面提出了最新标准。该操作系统的设计思想主要体现为，满足由各种规模的商务企业和希望充分发掘计算体验的广大用户所提出的相关需求。 Windows XP是基于Windows 2000代码的产品，同时拥有一个新的用户图形界面（叫做月神Luna）。 Windows XP拥有一个叫做“月神”Luna的豪华亮丽的用户图形界面。Windows XP的视窗标志也改为较清晰亮丽的四色视窗标志。Windows XP带有用户图形的登陆界面；全新的XP亮丽桌面，用户若怀旧以前桌面可以换成传统桌面。此外，Windows XP还引入了一个“选择任务”的用户界面，使得工具条可以访问任务的具体细节。然而，批评家认为这个基于任务的设计指示增加了视觉上的混乱，因为它除了提供比其它操作系统更简单的工具栏以外并没有添加新的特性。而额外进程的耗费又是可见的。 它包括了简化了的Windows 2000的用户安全特性，并整合了防火墙，以用来确保长期以来以着困扰微软的安全问题。 由于微软把很多以前是由第三方提供的软件整合到操作系统中，XP受到了猛烈的批评。这些软件包括防火墙、媒体播放器（Windows Media Player），即时通讯软件（Windows Messenger），以及它与Microsoft Passport网络服务的紧密结合，这都被很多计算机专家认为是安全风险以及对个人隐私的潜在威胁。这些特性的增加被认为是微软继续其传统的垄断行为的持续。 另外受到强烈批评的是它的产品激活技术。这使得主机的部件受到监听，并在软件可以永久使用前（每30天一个激活周期）在微软的记录上添加一个唯一的参考序列号（reference number）。在其它计算机上安装系统，将因为硬件的不同而无法激活。如果是在同一台计算机上更换了太多硬件，则会因为硬件改动太大而导致需要重新激活。 补充了MD5和序列号。 MD5：B4BC9F0CA73BBA0DF22FC2715C5C64DA 序列号： MRX3F-47B9T-2487J-KWKMF-RPWBY 备选序列号：

企业经营现状调研报告

呈阅件 榕物协综【2009】012号 福州市物业管理协会2009年11月20日 关于福州物业企业经营状况的紧急报告 一、我市物业管理发展的基本状况 随着城市化进程的提速和住房商品化不断推进，福州市从上世纪90年代中期，物业管理行业开始起步并不断发展壮大。 根据初步统计，截至今年上半年，全市已有1690个物业管理项目实施物业管理，总建筑面积达4000多万平方米，占房屋面积的55%左右，其中实施物业管理的住宅小区1186个、办公楼360多个、工业仓储用房80个、其他64个。新建住宅小区物业管理覆盖面达到100%。受益住户100多万家。全市共有435家企业依法取得物业管理企业资质，其中一级资质2家，二级资质13家，三级资质303家，暂定三级资质117家。全市物业管理从业人员近4万人。迄今为止，全市共有物业管理“市优”项目282个，“省优”项目55个，“国优”项目22个，行业产值接近10亿元。据统计，在物业行业基层员工中，农村进城务工人员占52%，复员转业人员占17.8%，下岗职工占6.7%，大中专毕业生占3.8%。物业行业是低端产业，但这个行业的发展，不仅有利于改善人居和工作环境，维护社会和谐稳定，提高城市管理的总体水平，同时对促进第三产业发展，吸收消化城乡剩余劳动力，解决社会就业问题，以及扩大居民住房消费，拉动经济发展等方面都产生着积极的影响和作用。 二、福州物业企业目前的经营状况似乎已经到了“最危险的时候” 十几年来，尽管我市物业管理行业发展迅猛，但行业总体发展前景却令人担忧。今年七月，市物协第三届理事会曾到厦、漳、泉三市考察，发现我市物业行业虽然发展最早，规模也最大，但这两年的状况表明，我们无论在高端企业数量，还是在政府支持方面都已经明显落后。最近俩个月市物协召开八次与三级资质企业共100多位负责人的座谈会，发现这些企业的运营状况十分不妙。 物业管理行业是劳动密集型行业，正常人工成本占了主营收入的70%以上，按一个劳动或管理人员服务2000平方米、收费标准平均为0.80元/平方米.月计（相当部分的旧小区，拆迁安置小区的收费标准只在0、43/平方米·月，有的

酵母双杂交系统

酵母双杂交技术的研究与应用 摘要：酵母双杂交系统是在20世纪90年代初发展起来的利用遗传学方法在酵母真核细胞体内研究蛋白质之间相互作用的一种高度灵敏的分子生物学技术，它可以有效分离新基因或新的能与一种已知蛋白相互作用的蛋白质及其编码基因，被广泛应用于蛋白质组学、细胞信号转导和功能基因组学等领域，已成为分子生物学研究领域的重要实验手段之一，获得了许多有价值的重要发现。 关键词：酵母双杂交系统；蛋白质组学；功能基因组学Abstract:Yeast two-hybrid system is a highly sensitive molecular biology technique,which uses genetic methods to study protein-protein interaction in eukaryotic yeast cells,developed in the early 1990s.It can effectively separate new genes or new protein which has interaction with a known protein and protein-coding genes, is widely used in the field of proteomics, cellular signal transduction and functional genomics, has become one of the important experimental methods in the molecular biology areas, gained a lot of valuable important discovery. Key words:Yeast two-hybrid system;Proteomics;Functional Genomics.

REACH 简体中文版

欧洲议会与欧洲理事会法规(EC)No1907/2006 2006年12月18日 化学物质注册、评估、授权和管制(Evaluation, Authorisation and Restriction of Chemicals，REACH)，成立欧洲化学品管理署(European Chemicals Agency)，修正法规「Directive 1999/45/EC」，并废除下列各法规：「Council Regulation (EEC) No 793/93」和「Commission Regulation (EC) No 1488/94」，以及「Council Directive 76/769/EEC」和「Commission Directive 91/155/EEC」、「Commission Directive 93/67/EEC」、「Commission Directive 93/105/EC」和「Commission Directive 2000/21/EC」。 欧洲联盟所属欧洲议会和理事会，考虑到「成立欧洲共同体条约」，尤其是其中之第95条，考虑到欧洲委员会(Commission)的提案 考虑到欧洲经济暨社会委员会(European Economic and Social Committee) 的意見 考虑到欧洲区域委员会(Committee of the Regions)的意見依照「成立欧洲共同体条约」第251条所规定之程序执行鉴于： (1)本法应高度保护人体健康和环境，以及物质(自用、在制备和成品中)的自由流通，并增进竞争力和创新。本法也应推动新的物质危害性评估方法之开发。 (2)物质内需市场的有效运作只有在对物质的相关规定不因会员国而有明显差異的状况下达成。 (3)人体健康和环境的高度保护应在化学物质的立法中被确保，并以永续发展为目标。本立法应以无差别待遇的形式适用，无论物质是在国内交易或依照共同体国际承諾在国际市场流通。 (4)依照2002年9月4日约翰内斯堡高峰会(the Johannesburg Summit) 针对永续发展采行的执行计划，欧洲联盟预定于2020年前达成化学物质对人体健康的危害降到最低的目标。 (5)本法之实施应不可与共同体之工作场所和环境立法冲突。 (6)本法应致力达到2006年2月6日于杜拜达成之「国际化学管理之策略方法」(Strategic Approach to International Chemical Management，SAICM)。 (7)为保内需市场之健全以及确保人身健康之高度保护，特别是劳工的健康，以及环境，必须确保共同体内的物质制造符合共同体的法律规范，包括出口之物质。 (8)应特别评估本法对中小企业的潜在影响，以及避免对中小企业有所不公。 (9)共同体内实施的四项化学物质管制法规为：1967年6月27日之「Council Directive 67/548/EEC」，针对有害化学物质之分级、包装和标示之法律规范和管理条例；1976年7月27号之「Council Directive 76/769/EEC」，是用于会员国间针对特定有害化学物质和原料的买卖管制、使用之法律规范和管理条例；1999年5月31日欧洲议会和委员会之「Directive 1999/45/EC」，是用于会员国间针对有害化学物质之分级、包装和标示之法律规范和管理条例；以及1993年3月23日之「Council Regulation (EEC) No 793/93」针对现有化学物质风险的评估与管制。对此四项法规的评估发现共同

企业经营的自查报告

企业经营的自查报告 本文是企业经营的自查报告，仅供参考，希望对您有所帮助，感谢阅读。 一、公司基本情况 生产经营状况：我公司成立于1952年3月，是老牌的集体企业，主要是依托铁路，承接铁路部门的货物装卸业务，依靠人工进行作业，靠人力进行肩挑背负比较原始的作业方式，形式单一，生产效率低，经济效益差，职工工资水平低。自公司成立至今，都是在艰难维持生产经营当中，特别是在2008年国家颁布新的《劳动合同》后，用工成本增加，公司又是劳动力密集性企业，致使公司的生产成本大幅增加，再加上2008年受到世界金融危机、吉首融资风暴和公路运输越来越便捷的影响，我公司的业务一落千丈，年年处于亏损状态，生存更加艰难，职工的生活也更加困难。 我公司现有职工66人，其中在职职工36人，退休职工30人，困难职工15人。困难职工当中有普通困难职工13人，特困职工2人，主要困难原因是：工资收入低，爱人无工作无收入，家中有大病病人，小孩上学和赡养老人，家庭负担重。 职工的主要诉求是：努力搞好公司的生产经营，增加公司业务，提高经济效益，增加职工工资收入和提高福利待遇。 困难职工的需求： 一是增加工资收入； 二是提高福利待遇； 三是积极帮助其家庭成员就业，增加家庭经济收入； 四是帮助其子女上学； 五是对困难家庭施于经济求助。 二、帮扶工作情况。 对公司的困难职工情况，公司认真进行了研究，积极采取相关办法解除部分困难职工问题。 一是对特别困难的职工施于经济救助，同时积极向上级汇报，争取困难资金；二是安排其能够就业的子弟到公司就业或请求上级部门为其子弟帮助就业；三是

积极争取助学资金，帮助其子女上学；四是和上级相关部门结成帮扶对子，对口进行帮扶；五是对有灾难和有重大疾病的家庭进行捐款，帮助他们渡过难关。 三、企业存在的主要困难 1、装卸业务量过低； 2、装卸价格偏低； 3、装卸工人留不住，劳动力欠缺； 4、公司内外矛盾问题较多。 四、解决困难问题的主要办法。 1、努力提高服务质量，积极奔走联系货源，增加业务量； 2、积极联系铁路沿线装卸兄弟单位，联名向铁路业务主管部门反映装卸价格偏低问题，请求提高装卸价格。 3、提高对装卸工人的劳动条件和工资福利待遇，争取留住现有工人，同时，积极联系新工人进来。 4、规范公司内部管理，依法依规解决公司内外部矛盾，最好通过司法途径解决公司的外部矛盾。 5、上级主管部门积极为企业出谋划策，搞好公司现有的业务工作，同时积极为企业寻找其他门路，为企业发展第二产业，增加公司收入。

(完整版)酵母双杂交原理

酵母双杂交系统原理 酵母双杂交系统(Yeast Two-hybrid System)由Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立。典型的真核生长转录因子，如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA 结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating domain)。前者可识别DNA上的特异序列，并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上游，转录激活结构域可同转录复合体的其他成分作用，启动它所调节的基因的转录。二个结构域不但可在其连接区适当部位打开，仍具有各自的功能。而且不同两结构域可重建发挥转录激活作用。酵母双杂交系统利用杂交基因通过激活报道基因的表达探测蛋白－蛋白的相互作用。主要有二类载体: a 含DNA -binding domain的载体; b 含DNA-activating domain的载体。上述二类载体在构建融合基因时，测试蛋白基因与结构域基因必须在阅读框内融合。融合基因在报告株中表达，其表达产物只有定位于核内才能驱动报告基因的转录。例如GAL4-bd具有核定位序列(nuclear-localization sequence)，而GAL4-ad没有。因此，在GAL4-ad氨基端或羧基端应克隆来自SV40的T-抗原的一段序列作为核定位的序列。 双杂交系统的另一个重要的元件是报道株。报道株指经改造的、含报道基因(reporter gene)的重组质粒的宿主细胞。最常用的是酵母细胞，酵母细胞作为报道株的酵母双杂交系统具有许多优点: 〈1〉易于转化、便于回收扩增质粒。〈2〉具有可直接进行选择的标记基因和特征性报道基因。〈3〉酵母的内源性蛋白不易同来源于哺乳动物的蛋白结合。一般编码一个蛋白的基因融合到明确的转录调控因子的DNA－结合结构域(如GAL4-bd，LexA-bd)；另一个基因融合到转录激活结构域(如GAL4-ad，VP16)。激活结构域融合基因转入表达结合结构域融合基因的酵母细胞系中，蛋白间的作用使得转录因子重建导致相邻的报道基因表达(如lacZ)，从而可分析蛋白间的结合作用。 酵母双杂交系统能在体内测定蛋白质的结合作用，具有高度敏感性。主要是由于：①采用高拷贝和强启动子的表达载体使杂合蛋白过量表达。②信号测定是在自然平衡浓度条件下进行，而如免疫共沉淀等物理方法为达到此条件需进行多次洗涤，降低了信号强度。③杂交蛋白间稳定度可被激活结构域和结合结构域结合形成转录起始复合物而增强，后者又与启动子DNA结合，此三元复合体使其中各组分的结合趋于稳定。④通过mRNA产生多种稳定的酶使信号放大。同时，酵母表型，X-Gal及HIS3蛋白表达等检测方法均很敏感。 酵母双杂交筛选原理 双杂交系统的建立得力于对真核生物调控转录起始过程的认识。细胞起始基因转录需要有反式转录激活因子的参与。80年代的工作表明, 转录激活因子在结构上是组件式的(modular), 即这些因子往往由两个或两个以上相互独立的结构域构成, 其中有DNA结合结构域(DNA binding domain, 简称为DB，？BD)和转录激活结构域(activation domain, 简称为AD), 它们是转录激活因子发挥功能所必需的。单独的DB虽然能和启动子结合, 但是不能激活转录。而不同转录激活因子的DB和AD形成的杂合蛋白仍然具有正常的激活转录的功能。如酵母细胞的Gal4蛋白的DB与大肠杆菌的一个酸性激活结构域B42融合得到的杂合蛋白仍然可结合到Gal4结合位点并激活转录。 Fields等人的工作标志双杂交系统的正式建立。他们以与调控SUC2基因有关的两个蛋白质Snf1和Snf2为模型, 将前者与Gal4的DB结构域融合, 另外一个与Gal4的AD结构域的酸性区域融合。由DB和AD形成的融合蛋白现在一般分别称之为“诱饵”(bait)和“猎物”或靶蛋白(prey or target protein)。如果在Snf1和Snf2之间存在相互作用, 那么分别位于这两个融合蛋白上的DB和AD就能重新形成有活性的转录激活因子, 从而激活相应基因的转