生理实验
血红蛋白吸管清洗步骤；蒸馏水→乙醇→乙醚……蒸馏水
二、蛙心收缩的记录——期前收缩与代偿间歇
目的
1、了解心肌的某些特性，学习和掌握蛙类手术的操作过程和在体蛙心搏曲线的记录方法；
2、观察电刺激在体蛙心室引起的期前收缩与代偿间歇和同步记录心电图中的期前收缩与代偿间歇；
3、观察蛙心正常起搏点和潜在起搏点的自动节律性高低。
原理
1. 心脏的活动具有自动节律性。静脉窦→心房→心室。用生物信号处理系统来对记录心搏曲线，以便对心脏活动进行分析研究。
2. 心肌的特征之一具有较长的不应期，绝对不应期占据了整个收缩期，因此给心脏以连续刺激并不能形成强直收缩。在相对不应期给予单个阈上刺激，可引起一次额外
收缩，其后便产生一个较长的间歇?a代偿间歇。
实验动物与器材
蛙或蟾蜍、蛙板、蛙钉、探针、外科剪、解剖刀、眼科镊、外科镊、蛙心夹、支架台、线、任氏液、眼科剪、玻璃分针、双极刺激电极、张力换能器、多功能生理信号采集处理系统
实验内容及步骤
1、破坏蛙脑及脊髓（破坏脑和脊髓成功后，蟾蜍出现四肢（尤其是后肢）瘫软，并常有尿失
禁现象。）2.固定于蛙板3.暴露心脏4.观察心脏的各部分结构5.连接实验装置6.记录心搏曲线7.观察并记录期前收缩和代偿间歇8.观察心脏活动的收缩顺序，记录心脏每分钟跳动的次数。在整个观察过程中随时要以任氏液湿润蛙心脏，以防干燥。
注意事项
?张力换能器受力较小，勿用外来牵拉；实验中保证心脏、蛙心夹及线在一条直线上，且与张力换能器臂保持垂直；在心室舒张末期(即心室充血期）夹蛙心夹，且夹好后蛙线松紧度适宜；
离体和脱离神经支配的动物心脏，保持在适当的环境中，在一定的时间内，仍能够产生节律性兴奋和收缩。心肌细胞的自律性来源于心内特殊的传导组织中的自律细胞。包括窦房结（静脉窦）、房室结、房室交界、房室束和普肯野氏细胞等。
蛙心起搏点的观察
?窦房结（静脉窦）→房室交界→末梢浦肯野氏纤维
（100次/分）（50次/分）（25次/分）
?正常起搏点：主导心脏兴奋和跳动的正常部位。（窦房结）→窦性心律
?潜在起搏点：正常情况下不表现出本身自律性的自律组织。
?异位起搏点：异常情况下控制心脏兴奋和跳动的潜在起搏点。（异位心律）
斯氏第一结扎分离主动脉两分支的基部，用眼科镊在主动脉干下引一细线。将蛙心心尖翻向头端，暴露心脏背面,在静脉窦和心房交界处的半月形白线（即窦房沟）处将预先穿入的线作一结扎以阻断静脉窦和心房之间的传导。观察蛙心各部分的搏动节律有何变化，并记录各自的跳动频率(次?¤min-1)。待心房、心室复跳后，再分别记录心房心室的复跳时间和蛙心各部分的搏动频率(次?¤min-1) ，比较结扎前后有何变化？
斯氏第二结扎第一结扎实验项目完成后，再在心房与心室之间即房室沟用线作第二结扎。结扎后，心室停止跳动，而静脉窦和心房继续跳动，记录其各自的跳动频率(次?¤min-1)。经过较长时间的间歇后，心室又开始跳动，记录心室复跳时间，及蛙心各部分的跳动频率(次/?¤min-1)。
注意事项
结扎前要认真识别心脏的结构；
?结扎部位要准确地落在相邻部位的交界处，结扎时用力逐渐增加，直到心房或心室搏动停止；?斯氏第一结扎后，若心室长时间不恢复跳动，施实斯氏第二结扎则可能使心室恢复跳动。思考
?1．心肌的绝对不应期长和不发生强直收缩有何生理意义？
?2．有时心脏发生期前收缩后，并无代偿间歇，而是出现所谓“三连跳”，如何解释？?3．正常起搏点和潜在起搏点是怎样的关系？
三、动脉血压的测定及其影响因素
血压升高：动脉阻塞对血压的影响，肾上腺素对血压的影响
血压降低：刺激减压神经，切断并刺激右侧迷走神经外周端，乙酰胆碱对血压的影响
麻醉效果：动物呼吸平稳、角膜反射迟钝或消失、肢体肌肉松弛、皮肤夹捏反射消失
颈总动脉伴行的神经中最细的为减压神经，最粗的为迷走神经，交感神经居中
原理
动脉血压的形成，决定于心输出量和外周阻力两个方面因素，这些因素的改变会引起动脉血压的变化。在神经体液调节下，心脏活动和血管舒缩进行调整，使动脉血压经常维持在一定水平。
动物与器材
家兔、计算机生物信号采集系统、压力传感器、外科手术器械、气管插管、动脉插管或经过拉制的聚乙烯管、动脉夹、电子刺激器、注射器，20%氨基甲酸乙酯溶液等。
实验内容及步骤
1.连接仪器装置
2.家兔麻醉，剪毛，剖解
3.气管插管安装、分离神经（减压、迷走及交感）
4.插取动脉血管
5.记录血压变化曲线
6.以动脉夹夹住未插管一侧动脉，观察血压变化；
7.将左侧减压神经结扎、剪断，以中等强度电流连续刺激其中枢端，观察对血压的影响；
8.结扎、剪断右迷走神经，刺激其中枢端。血压变化如何？
9.将左侧迷走神经也剪断，观察剪断双侧迷走神经后，血压发生了什么变化？
10.自耳缘静脉注射0.01%肾上腺素0.5 mL（肾上腺素注入后，应再补充数毫升生理盐水，以使药物全部进入血液循环）。
11.注入0.2 mL 0.01%乙酰胆碱。仔细观察，血压出现变化即停止注射。
注意事项
1、麻醉时，从耳缘静脉注射远端开始选择进针，注射期间注意观察动物肌张力、呼吸频率和角膜反射的变化,防止麻醉过深。千万不可过量。以动物麻醉后的表现为主要用量依据（动物麻醉后表现为呼吸缓慢，肌张力下降，角膜反射消失）。
2、血压换能器排空，用注射器通过三通阀向血压传感器内注入灌以200 U/mL的肝素钠溶液，聚乙烯管向上以排除内部气体。
3、减压神经寻找和分离，在气管一侧找到颈部血管神经束，与颈总动脉伴行的神经中最细的为减压神经，最粗的为迷走神经，交感神经居中。辨认清楚后，宜先以玻璃分针将减压神经分离出来，再分离其他神经和血管；并应随即在其下各穿粗细颜色不同的丝线备用。
4、颈总动脉插管，用棉线缚紧，再固定在侧管(或聚乙烯管膨大部分)上以免滑脱。
5、进行每一项目后，须待血压恢复正常或平稳后方可进行下一项观察。
思考
1．正常血压的波动情况如何？何以会有各种波动？每心搏一次是否血压应波动一次？能否从所描曲线上看出来？若看不出，请说明原因。
2．未插管一侧的颈总动脉短时夹闭对全身血压有何影响？为什么？
3．刺激减压神经中枢端与外周端对血压的影响有何不同？为什么？
四、呼吸运动的调节
原理
呼吸运动是呼吸中枢节律性活动的反映。
呼吸运动节律性活动主要来源于延髓与脑桥，呼吸的深度和频率随机休活动水平而变化，受神经和体液因素的调节。体内、外各种刺激有的作用于呼吸中枢，有的则作用于不同的感受器，反射性地影响呼吸运动。
平静呼吸时，胸膜腔内压力虽然随着呼气和吸气而升降，随着呼吸深度的变化而变化，但始终低于大气压力而为负值，故胸膜腔内压也称为胸内负压。
动物与器材
家兔、20％氨基甲酸乙酯、3%乳酸溶液、生理盐水、生物信号采集处理系统、、压力换能器、胸内插管（或粗穿刺针头）、手术台、兔用手术器械一套、气管插管、50 cm橡皮管、注射器（20 mL）、空气球胆、纱布、棉线等。
实验内容及步骤
（一）手术操作
1、固定、麻醉家兔
2、插气管插管
3、安装胸内套管
（二）仪器连接（生物信号采集系统）
（三）观察记录项目
1、平静呼吸：记录呼吸运动曲线及吸气、呼气时胸腔内压
2、用力呼吸：记录呼吸运动曲线及吸气、呼气时胸腔内压
3、增加吸入气中CO2浓度：记录呼吸运动曲线及吸气、呼气时
胸腔内压
4、增大无效腔：记录呼吸运动曲线及吸气、呼气时胸腔内压
5、切断一侧迷走神经：记录呼吸运动曲线及吸气、呼气时胸腔内压；再将另一侧迷走神经结扎后在离中端剪断，呼吸运动和胸膜腔内压又有何变化?
6、增加血液中H+浓度：经耳缘静脉快速注入3％乳酸1～2mL，观察呼吸运动和胸膜腔内压的变化情况。
注意事项
1. 气管插管时应注意止血，内壁分泌物必须清理干净后才能进行插管。
2. 水减压计一侧乳胶管必须夹闭，防止气胸发生。
3. 胸内插管时，切勿用力过猛，穿进胸腔后慢慢前行(进针1～1.5 cm），以防气胸。
4. 胸套管应垂直进入胸腔。
5. 每项观察出现效应后，观察时间不宜太长，及时去除施加因素，待呼吸正常后进行下一项观察。
6. 经耳缘静脉注射乳酸要避免外漏，引起动物燥动。
思考
1．增加吸入气中CO2浓度、缺O2刺激和血液pH下降均使呼吸运动加强，机制有何不同？2．在平静呼吸时，胸膜腔内压为何始终低于大气压？在什么情况下胸膜腔内压可高于大气压。3．迷走神经在节律性呼吸运动中起何作用？
五、离体肠段运动的描记
原理
消化道平滑肌的特点：
兴奋性——较低；收缩性——微弱持续收缩，即具一定紧张性
伸展性；自律性——缓慢而不规则的自动节律性；对化学、温度及机械牵拉刺激较为敏感
将离体组织器官至于模拟体内环境的溶液中，可以在一定时间内保持其功能
动物与器材
兔子、离体器官测定仪、张力换能器、麦氏浴皿、计算机生物信号采集系统、手术线、0.1%肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、台氏生理盐溶液、手术器械一套
实验内容及步骤
1、用木椎猛击家兔的头枕部使其昏迷剖开腹部，找出胃与十二指肠交界处，用线结扎，在结扎线近胃侧剪断小肠，将肠管的肠系膜沿肠缘剪开，分离出长约20～30cm的肠管。把离体的肠管置于台氏液中，剪成数段，每段长2～3cm，然后用注射器向肠腔内注入台氏液，冲洗肠腔，待肠腔内容物基本洗净后，放入台氏液中备用。
2、标本与张力传感器连接：取一段长2～3cm的肠段，一端固定于浴管底部的小钩上，另一端用手术线连接固定于肌张力传感器的应变簧片上。将标本浸置于含38℃台氏液的浴管中。
、通过调整使肠管及其连线有一定的紧张度，但要适度，勿牵拉过紧或过松。肠段勿与周围管壁接触，以免磨擦而影响实验记录；
4、连接仪器，打开实验软件选择消化道平滑肌生理特性实验项目，记录家兔离体肠段正常的收缩曲线；
5、将浴管内37℃台氏液放掉，降低台氏液温度至30℃（或向浴管内加入室温台氏液），观察在低温台氏液中的肠段平滑肌收缩情况，描记收缩曲线；
向浴管内台氏液中加入肾上腺素(1:1000)溶液2滴，描记观察肠段活动有何变化。待作用效果明显后，冲洗肠段，即放掉浴管中的台氏液，加入预先准备好的38℃新鲜台氏液，重复更换2～3次台氏液，使肠段活动恢复正常，再进行下一个实验；
7、向浴管内台氏液中加入乙酰胆碱(1:10000)溶液1-2滴，描记观察肠段运动，待作用出现后，同上法冲洗肠段。
观察项目
1、正常小肠运动曲线5 min
2、逐渐降低台氏液的温度至30℃,描记肠段运动
3、加入肾上腺素两滴(0.1%)，描记肠段活动
4、加入乙酰胆碱两滴(0.01%)，描记肠段运动
注意事项
加药前，准备好更换用的预热台氏液。保持浴槽内温度在38℃，温度勿过高或过低。
上述药液加入量为参考剂量，效果不明显时，可以增补，但防止一次加药量过多。
每次实验项目效果明显后，立即更换台氏液，冲洗肠段，待肠段恢复稳定活动后，再观察下一实验项目。
思考
1.离体小肠的运动有何特点？
2.影响小肠运动的因素有哪些？
六、反射弧的分析
蛙或蟾蜍、蛙类手术器械，0.5%及1%硫酸，铁支架，烧杯，滤纸片，纱布等
1、制备脊蛙悬于支架上；
（1）探针捣毁脑部法
用毁髓针垂直插入枕骨大孔，先左右横断大脑和脊髓的联系，然后针尖向前从枕骨大孔进入颅骨腔内，搅动毁髓针，彻底破坏大脑。然后等10分钟左右，使蛙度过脊休克，脊髓功能即可恢复。
（2）断头法
左手持蟾蜍，用食指分开其上下颌，右手用粗剪刀由两侧口裂沿口角至眼后方剪去蟾蜍脑部，保留下颌和脊髓。
2、观察项目
（1）正常反射的观察
用0.5％硫酸溶液分别浸沾蟾蜍左右后肢的足趾尖，观察双侧后肢的反应。酸对皮肤的刺激将引起屈腿的反射动作（当反射出现后，迅速以清水将该后腿皮肤上的硫酸洗净)。
（2）去除感受器对反射的影响
围绕左侧小腿将皮肤作一环形切口，并将皮肤剥除，再以上述方法刺激，结果如何? 3）搔扒反射
用浸有1%硫酸溶液的小滤纸片贴在蟾蜍下腹部，观察其后肢反应。
（4）分离坐骨神经及离断
在右侧后肢股部的背侧，沿坐骨神经的方向将皮肤作一切口，将坐骨神经(此神经包括传出和传入神经纤维)分出，并在下面穿一根线，以便将神经提起。
剪断坐骨神经，再重复上述实验，比较2次结果有何不同。
（5）破坏中枢
用探针将脊髓破坏，再刺激身体任何部位，观察有无反射出现?
注意事项
1、毁脑时不可伤及脊髓，以免破坏脊髓反射中枢。
2、离断颅脑部位要适当。太高可能保留部分脑组织而出现自主活动；太低，也会影响反射的引出。
3、分离坐骨神经应尽量向上，并尽量剪断与其相连的分支。
4、每次酸刺激后应立即用清水洗净脚趾，并用纱布揩干。
5、剥脱脚趾皮肤要完全，若剩留少量皮肤会影响实验结果。
思考
1、运用所得到的现象，通过严格的推理来分析后肢屈伸反射的反射弧构成。
2、屈伸反射和搔扒反射的皮肤感受器有何不同？
植物生理学实验指导
实验1 植物组织渗透势的测定（质壁分离法） 原理 当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。该溶液的浓度称为等渗浓度。 当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的深液浓度。代入公式即可计算出春渗透势。 仪器药品 显微镜载玻片及盖玻片 镊子刀片 配成0.5—0.1mol/L梯度浓度的蔗糖溶液各50ml。 称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml，其浓度为1m0le/L（母液）。再配制成下列各种浓度： 0.50mol/L：吸母液25ml+水25ml 0.45mol/L：吸母液22.5ml+水27.5ml 0.40mol/L：吸母液20.0ml+水30.0ml 0.35mol/L：吸母液17.5ml+水32.5ml 0.30mol/L：吸母液15.0ml+水35.0ml 0.25mol/L：吸母液12.5ml+水37.5ml 0.20mol/L：吸母液10.0ml+水40.0ml 0.15mol/L：吸母液7.5ml+水42.5ml 0.10mol/L：吸母液5.0ml+水45.0ml 操作步骤 将带有色素的植物组织（叶片），一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等水生植物，也可用蚕豆、玉米、小麦等作物叶的表皮。撕取下表皮，迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸入，5—10分钟后，从0.5mol/L开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上盖玻片，于低倍显微镜下观察，如
实验生理答案汇总
第一部分 1、实验与常用动物的选择，错误的是肿瘤实验研究———家兔(应该用小鼠大鼠) 心脏生理实验———蟾蜍 .半数致死量测定——小白鼠抗炎药物实验——大白 鼠D抗过敏药实验———豚鼠肿瘤实验研究———家兔 2、常用动物的给药方式中，操作简便而起效迅速的是静脉注射 灌胃皮下肌肉腹腔 3、在应用小白鼠的医学实验中，操作简便又快速起效的给药方法是腹腔注射 4、小鼠的给药途径多为腹腔注射 5、常用器械的用确的是止血钳———分离神经周围结缔组织 眼科剪--剪血管进行插管） 6、“传出神经系统药物对动物血压的影响”的实验结果，正确的是乙酰胆碱——导致动物血 压降低 7、实验设计分组时，阳性对照组是指典型同类药的组 8、下列哪种统计分析结果可认为差异有显著性意义？P≤0.0 5 9、在医学实验中用途广泛、经济的常用动物是小鼠 10、关于计算机实时记录分析系统（ＢＬ410）的描述，正确的是可进行记录信号的正确处理 11、一个可行的探索性实验选题不必强求的是有独立见解和创新性假说 12、压力换能器的使用，正确的是务必排尽压力腔空气 13、在实验设计中处理因素是指未知作用药物 在探索性实验中，最应该注意的事项是各种操作正确无误 14、关于坐骨神经-腓肠肌的实验，正确的是刺激频率逐步加快 15.实验项目与处理因素的描述，正确的是半数有效量ED50测定--实验药物 16.关于计算机实时记录分析系统（BL410）的描述正确的是可直接记录电（心电图）信号（P21） 17.在传出神经系统药物对血压的影响的实验中有协同作用毒扁豆碱与乙酰胆碱 18.从220页的LD50计算报告中可得到LD50 101.2 19.在本阶段的学习中实验实施中最应该注意的事熟练掌握实验操作 20.相对来说，难以说明问题的实验对照形式是自身对照 气胸引起呼吸功能不全的原因是限制性通气不足 21.动物实验中可使用的止血方法不包括：降温止血法。 22.破坏蛙脑时，探针的进针位置是：枕骨大孔。 23.做兔颈部手术时，打开颈总动脉鞘，可见哪条神经最细：减压神经。 24.在小鼠腹腔注射中，说法错误的是：进针时以45度角直接刺入腹腔。 25.正确抓兔子的方法，一只手抓住其颈背部皮肤，另一只手托其臀部，使其呈坐位姿态。 26.动物器官切开时，应作哪种切口：倒“T”型。 27.家兔耳缘静脉注射20%乌拉坦进行全身麻醉，常用剂量是：5mL/kg。（1%戊巴比妥钠是 2.5-3ml/kg）。 28.连续刺激时，刺激落在前一刺激引起的骨骼肌收缩期会引起：完全强直收缩。 29.关于止血钳使用的叙述不正确的是：可夹持神经、血管、脆弱组织。 30.半数致死量用以表示：药物的急性毒性。 31.家兔麻醉时乌拉坦用量是：20% 5ml/kg。
生理实验分析
生理实验分析 The manuscript was revised on the evening of 2021
实验一（1）反射弧的分析 实验目的：分析反射弧的组成，了解反射弧的完整性与反射活动的关系实验对象：蟾蜍实验方法： 1.制备脊蟾蜍。用刺蛙针于蟾蜍头部枕骨大孔处刺入颅腔将脑组织拆毁，保留脊髓，制成脊蟾蜍。 2.用铁夹夹住脊蟾蜍下颌，悬吊在铁支架上。 观察项目： 分析：对实验结果进行分析。 1、反射活动的实现需要感受器来感受外界刺激 2、反射活动的实现需要传入传出神经来传导兴奋 3、反射活动的实现需要反射中枢来信号分析并发出指令4是反射，5是反应
反射：是在中枢神经系统的参与下，机体对刺激的规律性反应。完成反射活动必须有完整的反射弧。如排尿反射、排便反射。反应：接受刺激后机体活动状态的改变。反应的表现形式：兴奋与抑制。如在除去脑、脊髓（及中枢神经系统）后刺激肌肉，肌肉依然有反应。 结论：在本实验中可得什么结论。 在中枢神经系统参与下机体对刺激发生的有适应意义的反应过程称为反射。反射活动的结构基础是反射弧。反射弧由感受器、传入神经纤维、反射中枢、传出神经纤维和效应器5个部分构成。反射弧的结构和功能的完整性是实现反射活动的必要条件。反射弧的任何环节发生障碍或受到破坏，这一反射活动就将发生紊乱或不能出现。 实验一（2）阈强度的测定 实验目的：掌握阈强度的测定方法，阈强度与兴奋性的关系实验方法：制备坐骨神经腓肠肌标本。 观察项目： 分析：什么是阈强度与兴奋性有何关系 阈强度：在实际测量时，把刺激持续时间和强度对时间的变化率固定，测量能使组织发生兴奋地最小刺激强度。它可以作为测量兴奋性大小的指标。阈强度与兴奋性成反比关系。阈强度小，表示组织兴奋性高；阈强度大，则兴奋性低。 实验一（3）刺激与反应 实验目的：了解各种组织的反应形式。实验对象：蟾蜍实验方法： 1.破坏蟾蜍的脑和脊髓，将蟾蜍仰卧在蟾蜍板上，暴露心脏。观察项目及结果 分析实验结果
生理实验
操作部分： 输尿管插管穿线将输尿管近膀胱端结扎，然后穿线备用，在结扎处上端剪一斜切口，切口约为管径的一半，将充满肝素的输尿管插管向肾脏方向插入输尿管内，并结扎固定。 气管插管在气管上做一“┴”形切口(做一约为周长一半的横向切口，再向头端作纵向切口),插入“Y”型气管插管，用棉绳结扎切口处，绳尾固定于套管的分叉处。 动脉插管在左颈总动脉近心端夹一动脉夹，然后结扎远心端，（两者相距两厘米以上），结扎端下方用眼科剪做一“V”型切口（与管呈45度，约为管径的一半），向心脏方向插入动脉插管（管内装满抗凝剂），用已穿好的丝线结扎插入管尖嘴部分，并用同一丝线在插管的侧管上附近固定，以防插管从插入出滑开。 静脉插管动脉夹夹住近心端，结扎远心端，穿线备用 用眼科剪在远心端结扎出处呈45度剪一小口，约为管径的一半 插入导管套管，用已穿好的线打一个结 BL-420E生物机能实验系统开机—双击桌面上的“BL-420E”程序快捷图标—进入主页面—选试验项目和题目—根据实验要求设置刺激强度或者标记截图 口试部分: 第一节细胞的基本功能试验 神经干的传导速度能否代表所有纤维的传导速度？ 不能。因为神经干是由许多神经纤维组成的，这些神经纤维的传导速度各不相同，主要取决于神经纤维的直径、有无髓鞘、温度等因素，本实验各纤维的传导速度均不同，所以不能用神经干的传导速度来代表神经纤维的速度。 神经干兴奋时所记录的电位是“全或无”吗？为什么？ 神经干兴奋时的动作电位是所有兴奋的神经纤维产生的复合动作电位，他的幅度会随刺激强度的变化而变化。 神经干动作电位与单根神经纤维的动作电位有何不同？ 单根神经纤维的动作电位具有“全或无”的特性，即刺激达到阈值后产生一个动作电位，动作电位的大小和形状不随刺激强度的改变而改变。而神经干动作电位是由许多兴奋的神经纤维组成的复合动作电位，动作电位的幅度会随刺激强度的改变而改变。 绝对不应期是等于前后两个刺激的间隔时间还是等于电位的起点至第二个刺激波之间的间隔时间？ 后者。绝对不应期出现的原因是由于钠通道或者钙通道处于激活过程或者激活状态，不存在再次被激活的可能性，处于失活过程或者失活状态，也不可能再次被激活进入激活状态。刚开始刺激时尚有钠或者钙通道未被打开，不能算作绝对不应期。 第二节循环系统机能试验 某些因素对蟾蜍心脏的影响 1、用任氏液灌注心脏，可以保持较长时间的节律性收缩。 因为任氏液的主要离子成分、ph值、渗透压都与细胞外液相似，为蛙心提供了一个适宜的理化环境。 2、用0.65%的NaCl溶液灌流心脏，收缩力减弱 因为心肌的收缩活动是有Ca离子触发的，灌流液中缺乏Ca离子，使心肌动作电位2期内流的钙离子减少，细胞内钙离子浓度降低，兴奋-收缩耦联过程减弱，心肌收缩力减弱。3、用2%的cacl溶液灌流心脏，出现收缩力增强，舒张不完全。 因为用cacl溶液灌流心脏，使得细胞外ca离子浓度升高，内流增加，细胞内ca离子浓度升高，兴奋-收缩耦联过程增强，心肌收缩力增强。
生理学实验设计
生 理 实 验 设 计 实验课题:筒箭毒对神经—肌肉接头处得兴奋传递得影响 实验成员:星期五下午第四实验室第二组 筒箭毒对神经—肌肉接头处兴奋传递得影响 实验假设 筒箭毒能与乙酰胆碱竞争神经肌接头处得ｎm受体,使肌肉松弛。 实验原理与目得 神经肌肉接头处得兴奋传递过程有三个重要得环节: 一就是钙离子促进神经轴突中得囊泡膜与接头前膜发生融合而破裂; 二就是囊泡中得乙酰胆碱释放到神经肌肉接头间隙; 三就是乙酰胆碱与接头后膜上得受体结合,引发终板电位。 乙酰胆碱(Aｃetylｃholine,ACh)就是一种重要得神经递质,就是连接每个运动神经元与骨骼肌之间得信使。如果AＣh得传递受阻,肌肉就不能收缩。箭毒就是美印第安人在猎箭头部涂抹得一种毒药,它能够占用并阻塞ACh 受体得位置,能竞争性阻断AＣh得去极化作用致使神经递质不能影响肌肉、能与ＡCh 竞争神经肌接头处得nm胆碱能受体,但不激动受体,因而使骨骼肌松弛、抗胆碱酯酶药可拮抗其肌肉松弛作用,新斯得明就是胆碱酯酶抑制剂,可通过抑制胆碱酯酶增减乙酰胆碱在肌接头间隙得浓度。故筒箭毒过量可用适量新斯得明解救。筒箭毒与乙酰胆碱竞争性结合乙酰胆碱受体,注射新斯得明后使突触间隙内得乙酰胆碱浓度升高
而使竞争性增强,故乙酰胆碱与受体接触增多,从而使肌无力症状减弱。 本实验得目得就是探索筒箭毒对神经-－肌接头处兴奋传递得影响极其相关机制;观察筒箭 毒得肌松作用,分析其作用点;了解新斯得明对抗筒箭毒得作用。 实验对象 大白鼠,体重2５0g以上 实验器材与药品 Powerlaｂ一套(主机,刺激器,张力换能器),手术器械一套,小动物人工呼吸机,气管插管,棉线,大头针,铁架台,注射器0.０0１g％筒箭毒碱,０。005g％新斯得明,２5％乌拉坦,１。5％普鲁卡因,生理盐水 实验方法 1、大鼠称重,麻醉;25%乌拉坦腹腔注射０。５mｌ／100g麻醉。然后仰卧固定于鼠手术床上,分离气管及颈外静脉,分别插入气管插管与静脉插管,准备好人工呼吸机。数分钟后翻正反射消失,即可进行实验; 2、分离坐骨神经;在髋关节后,坐骨结节内凹陷处切开皮肤,钝性分离肌肉,暴露一段坐骨神经,用浸有1、5%普鲁卡因得棉线围绕坐骨神经打一个结,在坐骨神经干上做传导阻滞麻醉,排除下行干扰; 3、分离腓神经;在外侧剪开皮肤,钝性分离肌肉组织,分离腓神经,神经穿线备用; 4、分离胫前肌;将大鼠两前肢固定在手术台(仰卧),从后置踝关节正前方向剪开小腿皮肤,剪断踝关节前部韧带,分离胫前肌肌腱,沿胫骨分离胫前肌(注意不要损伤血管),在踝部得胫前肌肌腱处扎线,与结扎线远端切断肌腱; 5、安装并设定powｅrlab记录肌张力得cｈarｔ设定文件;调定刺肉毒碱对神经肌肉接头处处兴奋传递得影响 6、连接仪器;手术操作完成后,将胫前肌与pｏwerlab得张力换能器向连接,腓神经处安放刺激电极。最适负荷设定为１０ｇ左右。稳定一段时间后,于给药前记录一段正常得肌肉收缩曲线; 7. 缓慢静脉注射0。001%筒箭毒碱0.1ml／10０g,从仪器上观察肌肉收缩曲线得变化情况; 8。待肌肉收缩曲线再次稳定或完全消失后,停止刺激,同时缓慢静脉注射0。005%新斯得明0、１5mｌ／1０0g,观察肌肉收缩曲线得变化情况、 预期结果 注射筒箭毒后肌肉收缩曲线幅度变小甚至消失,即肌肉处于肌无力状态,注射新斯得明后肌肉收缩曲线又基本恢复正常,即肌肉恢复正常收缩状态; 结果分析 从神经传来得兴奋,通过神经－肌肉接头传递给肌纤维膜,就是以化学递质乙酰胆碱为中介进行得,其全过程可分为:(1)接头前过程、(2)神经递质在间隙得扩散。(3)接头后过程、 如果就是筒箭毒作用于突触前膜,即不能释放乙酰胆碱,那么无论就是否有新斯得明,后膜中均无乙酰胆碱,所以在注射新斯得明后仍然就是肌无力状态,即不会出现预期结果; 如果就是筒箭毒作用于突触间隙,即与突触前膜释放得乙酰胆碱结合,抑制其发挥作用,那么无论就是否有新斯得明,后膜中均无可发挥肉毒碱对神经肌肉接头处处兴奋传递得影响作用得乙酰胆碱,所以在注射新斯得明后仍然就是肌无力状态,即不会出现预期结果; 而如果就是筒箭毒作用于突触后膜,即与乙酰胆碱竞争性结合乙酰胆碱受体,注射新斯得明后使突触间隙内得乙酰胆碱浓度升高而使其竞争性增强,使乙酰胆碱与受体接触增多,从而使肌无力症状减弱,使肌肉收缩曲线幅度增强,即会出现预期结果; 综上所述,假设成立。 注意事项
兽医病理生理学实验指导
家畜病理生理学实验指导 兽医专业用 中国农业大学编
目录 绪论 (3) 实验一发热 (10) 实验二肺水肿 (12) 实验三乏氧性缺氧和中毒性缺氧 (13) 实验四应激对耗氧量的影响 (15) 实验五实验性休克 (17) 实验六急性心机能不全 (20) 实验七弥散性血管内凝血（DIC） (22)
绪论 一、概述 家畜病理生理学是一门研究家畜患病时机能变化的实验性科学。为了研究患病机体机能变化和确定其病理过程的发生原因、发生机理、经过和转归的一般规律性，广泛地应用着动物实验的研究方法，此外也应用临床观察及实验治疗的方法。动物实验是在动物身上人工造成各种生命活动障碍，各种病理过程，并控制及改变其持续和经过，仔细观察记录其变化，以求更深刻地分析疾病现象的因果关系及其发生、发展、经过和转归规律的可能性。今日病理生理学的重大成就，大多是从动物实验中获得的，因而说病理生理学是一门实验性科学。疾病是很复杂的，为了要阐明疾病过程的基本规律，在实验中又常常把疾病简化，分出其主要和次要方面，前者常常受到人们的重视。 动物实验有急性和慢性的区分。急性实验是动物经过麻醉后，进行一般实验外科手术，找出血管或神经，打开腹腔或胸腔，再以病原因子作用于机体，这时使用一定的仪器记录各脏器的机能活动，如描记血压、呼吸、脏器的体积变化、腺体的分泌滴数等。实验完毕后动物即死去。慢性实验则是先给动物施行一定的无菌外科手术，以创造实验条件，待其手术完全恢复健康后再进行实验和观察。这样就避免了因急性实验时使动物处在将死亡的，不合乎正常生活条件的或者因麻醉而改变了神经机能活动和器官机能活动状态的缺点，而获得较近似正常生活条件下的机能活动的规律，使其所得到的实验成果更富有临床医学的实践意义。然而，也必须说明，慢性实验是属于综合性研究方法，而急性实验是分析性研究方法，若当须综合某些材料时，常须事先掌握足够的已分析研究好了的局部性材料，故慢性实验常需要急性实验的配合。 病理生理学的研究常采取慢性实验及临床观察的方法，但在教学实验中，由于时间及设备条件的限制，以及学生所掌握的知识不足，通常较多地运用急性实验方法。 （一）病理生理教学实验目的和任务 除了验证课堂讲授的部分理论，加深理解外，更主要的是培养学生初步具有研究实验性疾病的技能，为今后临床医学研究打下基础。此外还可以为人类疾病提供动物模型：（1）使学生初步掌握复制家畜疾病小动物模型、人类疾病动物模型的基本方法，观察、记录、分析实验结果，书写实验报告；（2）训练学生作实验设计的技能；（3）培养学生严谨的科学态度。 （二）病理生理学实验课的要求 1．实验前 （1）认真预习实验指导，了解实验的目的、方法和操作步骤。 （2）复习实验都分有关理论。 （3）检查实验器材和药品是否齐全。 （4）小组成员应有明确分工，但同时应重视合作，使每人都能得到应有的技能
《人体生理实验》牛蛙
人体生理学实验 一、实验目的： 1：学习蛙类动物双毁髓的实验方法； 2：掌握生理学实验手术常用器械的使用和基本操作方法； 3：学习制备具有正常兴奋收缩功能的蛙类坐骨神经腓肠肌标本的操作； 二、实验原理： 1：生理学实验中常利用蛙的坐骨神经—腓肠肌标本研究神经、肌肉的兴奋、 兴奋性、刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征； 2：蛙的离体组织、器官保持活性所需的条件比较简单，易于控制盒掌握； 3：任氏液是比较接近两栖动物内环境的液体，可以用来延长蛙心脏在体外 跳动时间，保持其它离体组织器官生理活性等； 三、实验设备及材料： 对 象：牛蛙 设 备：常用手术器械（手术剪、手术镊、眼科镊、毁髓针、玻璃分针）、 玻璃板、锌铜弓、培养皿、滴管、任氏液、粗剪刀、蛙板、蛙 钉、粗棉线 药品与试剂：任氏液 四、实验方法： 1.制备离体蛙心 (1)取一只蛙，捣毁脑和脊髓，将蛙仰卧固定于蛙板上。从剑突下将腹部 皮肤向上剪开，然后剪开胸骨，打开心包，暴露心脏，分离左、右主 动脉。 (2)在左主动脉下方穿一根线，此头端结扎作插管时牵引用，在主动脉干 班 级 11应用心理 姓 名 张红 学 号 2011326670130 实验日期 2012.10.12 指导教师 胡信奎 实 验名称 坐骨神经腓肠肌标本 制作
下方穿一根线，在动脉圆锥上系以松结用于结扎固定蛙心管。 (3)左手持左主动脉上方的结扎线，用眼科剪在松结上方左主动脉根部剪 一小口，右手将盛有少许任氏液的大小适宜的蛙心管由此切口处插入 动脉圆锥。插管头到达动脉圆锥时，用镊子夹住动脉圆锥少许，将插 管拔出后退，并转向心室中方向，镊子向插管的平行方向提拉， 心室收缩期时将插管插入心室。蛙心插管进入心室后管内任氏液的 液面会随心室的收缩而上下波动。蛙心插管进入心室后，用预先准备 好的松结扎紧，扎线系在蛙心插管的侧钩上打结并固定。剪断主动脉 左右分支。 注意：勿扎住静窦脉，插管不可插入过深，以免心室壁堵住下口。 （画心室图，见26页） (4)轻轻提起蛙心插管以略高心脏，用一线在动脉干与腔脉交界处作一 结扎，结扎线应尽量下压，以防伤及动脉干，在结扎处外侧剪断所有 组织，将蛙心游离出来。 (5)用新制任氏液反复换洗蛙心插管内有血的任氏液，直至蛙心插管内无 血液残留为止。此时离体蛙心插管制备成功，可供实验。 (6)将蛙心插管固定在铁支架上，用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，并将 蛙心夹的线头通过滑轮连至张力换能器的应变梁上，调节此线张力至 1g，插管内加灌流液约1—1.5m,并在插管上标记灌流液的高度。在 此实验以后过程中，灌流液稳定于该高度。 2：制作坐骨神经腓肠肌标本： （1）剥制后肢标本： 法一：将双毁髓的牛蛙背面向上放入蜡盘中。左手持手术镊轻轻提起 两前肢之间背部的皮肤，右手持手术剪横向剪开皮肤，暴露耳后腺后 缘水平的脊柱。用手术剪横向剪断脊柱。左手持手术镊提起断开的脊 柱后端，右手用手术剪沿脊柱两侧剪开体壁，再剪断下腹壁肌肉，自 基部剪断内脏。然后用蘸有任氏液的左手捏住断开的脊柱后端，右手
运动生理学实验指导
运动生理学实验指导 实验一血红蛋白测定及血型测定 A..血红蛋白的定量测定 【目的】掌握用比色法来测定血红蛋白量。（3分） 【原理】血红蛋白量测定方法有光电比色法、分光光度法和沙里氏比色计比色法。本实验采用沙里氏比色法。血液中血红蛋白的颜色随其结合的氧量多少而有一定的变化。为提高测定的标准，可向血液中加稀盐酸，使亚铁血红蛋白酸化成高铁血红蛋白而显稳定的棕黄色，加蒸馏水稀释并与标准色比较，既可求出100mL血液中所含的血红蛋白的克数。血红蛋白的含量受年龄、性别、营养状况、体育锻炼以及居住条件的影响。（5分） 我国正常成年男子约含12～15g·dL-1；女子约为11～14 g·dL-1。 【器材】沙里氏比色计（含比色管、比色架、吸血管）、采血针、75℅酒精、棉球、95℅酒精、0.1mol盐酸、乙醚、蒸馏水、小玻棒、小滴管。（6分）【步骤】 1.向比色管内加入0.1mol盐酸10滴（约达到比色管的10℅的刻度线）。（3 分） 2. 采血。以75℅的酒精消毒无名指及采血针（2分）； 3．用采血针刺破无名指指腹一侧皮肤，让血液自然流出，用消毒干棉球擦去一滴后，用右手平持吸血管使管口接触自然流出的一滴血管，准备吸取20μl 的血液（血柱液面平20μl刻度线）。（6分） 4．用干棉球拭檫管外的血液，然后迅速将吸血管移入比色管，徐徐将血液吹入盐酸深层，并用上层清夜多次洗涤吸血管，轻轻振荡，置室温中10～15min,充分到使亚铁血红蛋白变成高铁血红蛋白。（6分） 5.比色。将比色管放入血红蛋白比色架中，向比色管逐滴加入蒸馏水并且边滴边搅拌边竖起对光观察，将比色管的颜色与比色计上的标准颜色做比较，直至比色管溶液颜色与标准颜色一致为止。正确读出并记录比色管内溶液弯月面下缘最底点对应的比色管刻度数值，此数值即为每100mL血液中所含血红蛋白的克数。（9分） 【注意事项】 1.要准确配制0.1mol的盐酸。血液被酸化的时间不得少于10min。 2.吸取的血量应准确，并将吸血管外的血液抹去。 3.吹入血液和洗净吸血管时，切勿将空气吹入盐酸中，以免形成气泡影响 比色。 4.稀释时要耐心地逐滴加蒸馏水，并应边滴边搅边竖起比色，当颜色接近时，只能半滴半滴地稀释。
生理实验
实验三反射时测定、反射弧分析、中枢抑制现象观察 损伤小脑动物的运动观察 1. 反射是机体在中枢神经系统参与下，对内外环境刺激所产生的规律性反应 2. 反射活动的结构基础称为反射弧，包括感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器。从皮肤接受刺激至机体出现反应的时间为反射时。 3. 反射时是反射通过反射弧所用的时间。反射弧的任何一部分缺损，原有的反射不再出现。由于脊髓的机能比较简单，所以常选用只毁脑的动物（如脊蛙，脊蟾蜍）为实验材料，以利于观察和分析。 4. 中枢的兴奋和抑制同时存在又相互影响。在脊髓反射的中枢之间或高位脑和脊髓对低位脊髓反射中枢均存在抑制作用。这些抑制作用保证了机体活动的协调性。 5. 小脑具有维持身体平衡，调节肌紧张和协调肌肉运动等机能。当小脑损伤后，随着破坏程度的不同，可表现出不同程度的肌紧张失调及平衡失调，一侧小脑损伤后的动物，躯体表现异常 实验四家兔大脑皮层运动区的刺激效应及去大脑僵直的观察 1. 能够引起躯体运动的皮层部位称运动皮层。大脑皮层运动区是躯体运动机能的高级中枢,在运动皮层中,一定的部位与躯体一定部位的运动机能有关,称之为运动皮层机能定位。刺激大脑运动皮层的某一区域,可引起躯体特定部位的骨骼肌收缩。 2.中枢神经系统对伸肌的紧张度具有易化和抑制作用。正常情况下,通过这两种作用使骨骼肌保持适当的紧张度,以维持躯体的正常姿势。从中脑四叠体的前后丘切断脑干的动物,称为去大脑动物, 由于神经系统内,中脑以上水平的高级中枢对肌紧张的抑制作用被阻断,而中脑以下各级中枢对肌紧张的易化作用相对加强,因此出现伸肌紧张亢进的现象。动物表现为四肢僵直,头向后仰,尾向上翘的角弓反张状态,称为去大脑僵直。 实验五视力（视敏度）、视野和盲点的测定；动物一侧迷路破坏的效应 1. 视力 视力又称视敏度，是指眼辨别物体细节或精细结构的能力（分辨物体细微结构的能力），视力即检测视网膜中央凹（黄斑区，直径为0.3mm,只有视锥细胞分布）精细视觉的分辨能力。 视力测定：国际标准视力表, 对数视力表 2.视野 视野是单眼固定注视正前方时所能看到的空间范围,此范围又称为周边视力,也就是黄斑中央凹以外的视力。借助此种视力检查可以了解整个视网膜的感光功能,并有助于判断视力传导通路及视觉中枢的机能。正常人的视野范围在鼻侧和额侧的较窄，在颞侧和下侧的较宽。在相同的亮度下，白光的亮度最大，红光
生理学实验必考题点
3. 静脉注射乳酸对循环、呼吸及泌尿的影响 实验中静脉注射乳酸后血压、呼吸及尿量与对照组相比均无明显差异（P>）。静脉注乳酸后，理论上可使呼吸运动加深加快。因为乳酸改变了血液PH，提高了血中H+浓度。H+是化学感受器的有效刺激物H+可通过刺激外周化学感受器来调节呼吸运动，也可直接刺激中枢化学感受器，但因血中H+不容易透过血脑屏障直接作用于中枢化学感受器，因此，血中H+对中枢化学感受器的直接刺激作用不大，也较缓慢。但本次实验注射乳酸对循环、呼吸及泌尿的影响并不明显。注射乳酸时，可见家兔有强烈的抽搐，故可认为乳酸发挥效果较快，测量指标时应及时迅速。本次实验过程中可能并未掌控好测量时间，使各项指标均已接近正常后方进行测定，最终导致各项指标测量值变化不明显。 4.夹闭右颈总动脉对循环、呼吸及泌尿的影响 实验中夹闭右颈总动脉血后血压与对照组相比显著升高（P<），呼吸、尿量与对照组相比差异不明显（P>）。那是因为当夹闭右颈总动脉时，心室射出的血液不能流经该侧颈动脉窦，使窦内压力降低，压力感受器受到刺激减弱，经窦神经上传中枢的冲动减少，降压反射活动减弱，因而心率加快、心缩力加强、回心血量增加、心输出量增加，阻力血管收缩，外周阻力增加。导致动脉血压升高。 5. 刺激减压神经对循环、呼吸及泌尿的影响 实验中刺激减压神经后平均动脉血压明显下降（P<），呼吸、尿量与对照组相比差异不明显（P>）。这是因为减压神经是单纯的传入神经，具有稳定动脉血压的作用。当动脉血压升高或降低时，压力感受器的传入冲动也随之增多或减少，使减压反射相应地增加或减弱，以保持动脉血压相对稳定。当电刺激减压神经时，减压神经传入冲动增多，使心迷走中枢兴奋、心交感中枢抑制、缩血管中枢抑制，使迷走神经传出冲动增加，交感神经传出冲动减少，而至心率减慢、心缩力减弱、小静脉舒张回心血量减少，心输出量减少，小动脉舒张，外周阻力降低，最终导致血压下降。 6. 刺激迷走神经对循环、呼吸及泌尿的影响 实验中刺激迷走神经后平均动脉血压明显下降（P<），呼吸、尿量与对照组相比差异不明显（P>）。迷走神经含有感觉、运动和副交感神经纤维。这些纤维末梢释放的递质是乙酰胆碱(ACh)，ACh与心肌细胞膜上的M胆碱受体结合，可导致心率减慢，心房肌收缩力减弱，心房肌不应期缩短，房室传导速度减慢，甚至出现房室传导阻滞，即负性变时、变力和变传导效应。一般说，右侧迷走神经以支配窦房结为主，而左侧迷走神经则主要支配房室传导系统。在实验中，刺激外右侧迷走神经，其末梢释放的ACh，一方面使窦房结细胞在复极过程中K+外流增加，结果使最大复极电位绝对值增大；另一方面，使自动去极速度减慢。这两种因素均使窦房结自律性降低，心率因而减慢，血压降低。刺激强度加大时，甚至可出现窦性停搏，使血压迅速下降的情况。 7. 注射NE对循环、呼吸及泌尿的影响 实验中注射NE后血压、呼吸及尿量与对照组相比均无明显差异（P>）。理论上去甲肾上腺素对α受体具有强大激动作用，对心脏β1受体作用较弱，对β2受体无作用。首先，它可以激动血管的α1受体，使血管收缩。皮肤粘膜血管收缩最明显，其次是肾脏血管。此外，脑、肝、肠系膜，甚至骨骼肌的血管也都呈收缩反应，从而增大外周血管阻力，使舒张压增大。另外，它可以激动心脏的β1受体，使心肌收缩性加强，心率加快，传导加速，心排出量增加，导致收缩压增大。实验中未出现此现象可能与测量方法误差较大有关。 8.注射ACh对循环、呼吸及泌尿的影响 实验中注射ACh后血压、呼吸及尿量与对照组相比均无明显差异（P>）。理论上乙酰胆碱主要与心脏的M受体结合，产生负性变时，变力，变传导作用，使心输出量明显减少，故血压下降，继而使肾小球毛细血管血压降低，有效滤过压降低，肾小球滤过率减小，尿的生成减少，尿量减少。实验中未出现此现象可能与测量方法误差较大有关。9.注射呋塞米对循环、呼吸及泌尿的影响 注射呋塞米后尿量与对照组相比明显增多（P<），血压、呼吸与对照组相比无明显差异（P>）。呋塞米是高效利尿药，主要作用于肾脏的髓袢升支粗段，特异性抑制分布在髓袢升支管腔膜侧的Na-K-2Cl转运子，因而抑制NaCl的重吸收，降低肾的稀释与浓缩功能，排出大量接近于等渗的尿液。 2.实验中夹闭兔一侧颈总动脉，动物的血液心率有何变化为什么 答：血压升高，心率加快。 因为夹闭颈总动脉使血流阻断，对颈动脉窦压力感受器的刺激消失，由窦神经传入的冲动减小，对心血管交感神经中枢的抑制作用和对心迷走神经中枢的兴奋作用减弱，因此，心交感和交感缩血管神经紧张加强，心迷走神经紧张减弱，从而心率加快，心肌收缩增大，心输出量增加，同时，血管收缩外周阻力增大，血压升高。 3.给动物静脉注射去甲肾上腺素后，动物血压、心率有何变化，为什么
生理实验设计
实验设计：激素对血糖浓度的影响 ——以家兔为例的实验设计实验目的： 学习对家兔采血和注射方法，了解血糖浓度测定方法，验证激素对血糖浓度的调节。 实验原理： 对血糖产生影响的激素有很多，其中使血糖浓度降低的激素为胰岛素; 使血糖浓度升高的激素有胰高血糖素、肾上腺素、肾上腺皮质激素、生长素、甲状腺素。它们对血糖的调节主要是通过对糖代谢各主要途径的影响来实现的。 本实验将家兔作为实验对象，对其进行空腹采血后分别注射各激素，作用一段时间后再分别采血，同时观察注射激素前后的家兔血糖浓度的变化，以验证激素的调节作用。 萄糖氧化酶（GOD）将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶（POD）和色素原性氧受体存在下，将过氧化氢分解为水和氧，同时使色素原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，其色泽深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。其反应式如下：葡萄糖+ O2（GOD）—→葡萄糖酸 + H2O2 实验对象： 家兔 实验试剂： 胰岛素注射液（40单位/ml）、胰高血糖素注射液、肾上腺素注射
液（1︰1000）、生理盐水、肝素抗凝剂（配成2500单位/ml）、凡士林、二甲苯、葡萄糖标准应用液（5.55mmol/L）、0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0) 、酶试剂、酚溶液、酶酚混合试剂、12mmol/L苯甲酸溶液、100mmol/L葡萄糖标准贮存液 实验器材： 适量规格注射器、台式磅秤、兔手术台、刀片、干棉球、纱布、试管、试管架、沸水浴 实验操作： 1.动物准备及空腹采血 取试管8支，编号1-8，分别加入肝素抗凝剂0.0l ml。取空腹16小时以上的正常家兔四只，分别编号a、b、c、d，称体重（一般是 2-3kg）并记录。 用耳静脉采血法：先拔去兔耳缘静脉处的毛，再用二甲苯擦拭兔耳部静脉，使其充血，在其周围抹上凡士林(防止污染、润滑），用刀片轻轻挑破边缘耳静脉，放血入含抗凝剂的试管1～4，约需2-3ml，边滴边摇，以防凝固。取血完毕，用干棉球压迫血管止血 2．注射激素并再采血 注射液生理盐水胰岛素胰高血糖素肾上腺素取血时间 a 0.4mg/kg——————30min b ——4单位/kg ————1h c ————0.4mg/kg ——30min d ——————0.4mg/kg30min
生理学实验报告
生理学实验报告 坐骨神经-腓肠肌标本的制备 一、实验目的及要求 学习蛙类动物双毁髓的方法 掌握制备坐骨神经-腓肠肌标本的操作技术，为此后有关的神经肌肉实验打下基础。 二、实验原理 蛙或两栖类动物的一些基本生命活动及生理功能与温血动物近似，而且其离体组织需要的生活条件非常简单，易于控制和掌握。因
此在生理学实验中，坐骨神经-腓肠肌标本是研究神经肌肉生理最常用的对象，经常用来研究神经肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律、肌肉收缩的特点、兴奋性的周期性变化等。 三、实验对象 蟾蜍或蛙。 四、实验器材及药品 蛙类手术器械一套（金属探针1根，粗剪刀、眼科剪刀各1把，圆头镊子、眼科镊子各1把，玻璃分针2根），蛙板和玻璃板各1块，培养皿，滴管，废物缸、锌铜弓，丝线，棉花；任氏液。 五、实验方法及步骤 1、双毁髓：左手握蟾蜍，背部向上。用食指按压其头部前端，拇指压住躯干的背部，使头向前俯；右手持毁髓针，由两眼之间中线向后方划触，触及两耳后腺之间的凹陷处即是枕骨大孔的位置。将毁髓针由凹陷处垂直刺入枕骨大孔，然后针尖向前刺入颅腔，在颅腔内搅动，以毁脑组织。再将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管，以捣毁脊髓。脊髓彻底捣毁时，可看到蟾蜍后肢突然蹬直，然后瘫软，此时的动物为双毁髓动物。 2、剥制后肢标本：左手持手术镊提起两前肢之间背部的皮肤，右手持手术剪横向剪断皮肤，然后往后肢方向撕剥皮肤。剪开腹壁肌肉，用手术镊提起内脏，翻向头部，在看清支配后肢的脊神经发出部位后，于其前方剪断脊柱。 3、分离两后肢：将去皮的后肢腹面向上置于解剖盘上，右手持
金冠剪纵向剪开脊柱，再剪开耻骨联合，使两后肢完全分离。 4、分离坐骨神经：将一侧后肢的脊柱端腹面向上，用玻璃分针沿脊神经向后分离坐骨神经，股部沿腓肠肌正前方的股二头肌和半膜肌之间的裂缝，找出坐骨神经，剪断盖在上方的梨状肌，完全暴露坐骨神经，剪去支配腓肠肌之外的分支，再剪去脊柱及肌肉，只保留坐骨神经发出部位的一小块脊柱骨。 5、分离股骨头：沿膝关节剪去股骨周围的肌肉，保留股骨的后2/3，剪断股骨。 6、游离腓肠肌：在腓肠肌跟腱下穿线并结扎，提起结扎线，剪断肌腱与胫腓骨的联系，游离腓肠肌，剪去膝关节下部的后肢，保留腓肠肌与股骨的联系，制备出完整的坐骨神经-腓肠肌标本。标本应包括：坐骨神经、腓肠肌、股骨头和一段脊柱骨四部分。 7、检验标本：用任氏液沾湿的锌铜弓的两极接触神经，如腓肠肌发生收缩，则标本机能正常，把标本固定在肌槽上。 8、连接好装置，调节适宜的灵敏度及刺激强度，开动记录仪，走纸速度为10mm/s,用手控触发开关，以单脉冲刺激神经，记录肌肉的单收缩曲线。 9、分别用1 Hz、2 Hz、3 Hz、4 Hz、6 Hz、12 Hz、24 Hz、30Hz 等频率去刺激坐骨神经，记录肌肉的收缩曲线。 六、分析及讨论 七、思考题 ?1．剥去皮肤的后肢，能用自来水冲洗吗？为什么？
鱼类生理学实验指导2013
鱼类生理学实验指导 动物科学与营养工程学院 2013年10月
实验一、坐骨神经-腓肠肌标本制备 目的学习生理学实验基本的组织分离技术；学习和掌握制备蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的方法；了解刺激的种类。 原理蛙类的一些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似，若将蛙的神经-肌肉标本放在任氏液中，其兴奋性在几个小时内可保持不变。若给神经或肌肉一次适宜刺激，可在神经和肌肉上产生一个动作电位，肉眼可看到肌肉收缩和舒张一次，表明神经和肌肉产生了一次兴奋。在生理学实验中常利用蛙的坐骨神经-腓肠肌标本研究神经、肌肉的兴奋、兴奋性；刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征等，制备坐骨神经腓肠肌标本是生理学实验的一项基本操作技术。 实验动物与用品蟾蜍或蛙、任氏液、食盐、1% H 2SO 4 滤纸、普通剪刀、手术剪、 眼科镊（或尖头无齿镊）、金属探针（解剖针）、玻璃分针、蛙板（或玻璃板）、蛙钉、细线、培养皿、滴管、锌铜弓（或电子刺激器）、酒精灯。 实验步骤与项目破坏脑、脊髓取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净（勿用手搓）。左手握住蟾蜍，使其背部向上，用大拇指或食指使头前俯(以头颅后缘稍稍拱起为宜)。右手持探针由头颅后缘的枕骨大孔处垂直刺入椎管（图）。然后将探针改向前刺入颅腔内，左右搅动探针2～3次，捣毁脑组织。如果探针在颅腔内，应有碰及颅底骨的感觉。 再将探针退回至枕骨大孔，使针尖转向尾端，捻动探针使其刺入椎管，捣毁脊髓。此时应注意将脊柱保持平直。针进入椎管的感觉是，进针时有一定的阻力，而且随着进针蟾蜍出现下肢僵直或尿失禁现象。若脑和脊髓破坏完全，蟾蜍下颌呼吸运动消失,四肢完全松软，失去一切反射活动。此时可将探针反向捻动，退出椎管。如蟾蜍仍有反射活动，表示脑和脊髓破坏不彻底，应重新破坏。
生理实验复习资料
生理实验复习资料2（蓝林） 1．为何肌肉收缩在一定范围内可随刺激强度的增加而增强？ 从阈刺激起始，随着刺激强度的增加，肌肉收缩也相应地增大。当刺激强度增加到一定限度时，肌肉收缩也达到最大限度，如再增大刺激强度，肌肉收缩力就不再增大。其原因同上一题。 2．用阈强度和阈上刺激分别刺激单根神经纤维与神经干时，其记录的电变化有何不同？为什么？ 用阈强度和阈上刺激分别刺激单根神经纤维与神经干时，动作电位幅度不相同。①用不同的刺激强度刺激神经干时，动作电位的幅度将随刺激强度的增大而呈等级性反应。神经干是由许多条兴奋性不同的神经纤维组成，即兴奋性高的纤维先兴奋，随着刺激强度的增大，兴奋的纤维越来越多。当刺激达到某一最适强度时，可使神经干中所有的纤维都兴奋，此时动作电位的幅度就先到最大值，再增大刺激强度，动作电位幅度不再增大。在神经干上记录的是许多神经纤维兴奋所形成的复合动作电位。②单根神经纤维的动作电位呈“全或无”现象。刺激强度未达到阈值不产生动作电位。一旦达到阈值，就产生固定幅度的动作电位。再给予阈上刺激，动作电位幅值也不随之增大。 3．电刺激坐骨神经－腓肠肌标本的神经后，从电刺激神经到引起肌肉收缩的整个过程中依次发生了哪些生理活动？ 从坐骨神经接受刺激到发生肌肉收缩历经下列变化过程：①刺激引起坐骨神经产生动作电位；②动作电位沿坐骨神经以跳跃式传导至末梢；③兴奋在神经-肌肉接头处的传递，即：突触前膜去极化引起Ca2+内流→Ca2+内流触发神经递质Ach释放→Ach经扩散与接头后膜上的N2型Ach受体结合，出现Na+内流为主的离子跨膜流动，形成终板电位→终板电位电紧张传播，引起周围肌膜产生动作电位；④骨骼肌兴奋收缩－耦联，肌细胞胞质内Ca2+浓度迅速增高；⑤胞质内Ca2+与肌钙蛋白结合，诱发肌丝滑行，肌肉收缩；⑥肌质网膜上Ca2+泵活动的结果，使胞质内Ca2+浓度恢复，肌肉出现舒张。 4．在蛙心灌注实验中，逐级升高任氏液K＋浓度时，心肌的兴奋性和传导性有何变化？为什么？有何意义？制备离体蛙心灌流模型。用蛙心夹连接心尖和张力传感器，调节放大倍数，进行下列实验项目： （1）描记一段蛙心正常收缩曲线。 （2）向套管中加入1%KCl 1～2滴，观察蛙心活动有何变化？然后继续加入1%KCl 1～2滴，观察蛙心活动有何变化？ 结果发现，心肌的兴奋性出现双向变化。当细胞外液K＋浓度轻度升高时，心肌细胞膜内外K＋浓度差减小，K＋外流减少，心肌细胞静息电位或最大复极电位轻度减小，与阈电位之间差距减小，心肌兴奋性升高。当细胞外液K＋过度升高时，心肌细胞静息电位或最大复极电位绝对值显著减小，心肌膜上的Na+通道部分或大量失活，心肌兴奋性减低，甚至丧失。 心肌兴奋性传导速度将逐渐减慢。其机制是当细胞外液K＋浓度逐渐升高时，心肌细胞静息电位或最大复极化电位绝对值显著减小，Na+（或Ca2+）内流的驱动减小，并且Na+（或Ca2+）通道部分失活，心肌动作电位0期Na+（或Ca2+）内流的速度和量减小，0期去极化的速度和幅度减小，局部电流形成减慢，强度减小，局部电流影响范围小，故兴奋传导减慢。严重的高血钾可引起房室交界和心房肌传导阻滞，严重时引起心室内传导阻滞，心脏停跳。 5．试述影响动脉血压的因素。 影响动脉血压的因素有： （1）搏出量：在心率与外周阻力恒定的情况下，搏出量可以增加动脉内血容量，升高收缩压；虽然舒张压也升高，但不如收缩压，脉压也有轻度增加。因此，收缩压的高低主要反映心脏搏出量的多少。 （2）心率：如心率加快则使心舒期缩短，心舒期末主动脉内存留血量增加。因此心率加快时，舒张压的升高大于收缩压的升高，故脉压减小。当心率减慢时，结果相反。可见，心率主要影响舒张压。 （3）外周阻力：外周阻力增加时，阻止动脉血液流向外周，使心舒期末动脉内存留的血量增加。因此，以舒张压增加为主。同理，外周阻力降低时，血压降低也以舒张压为明显。可见，舒张压的高低主要反应外周阻力的大小。 （4）主动脉和大动脉的顺应性：大动脉弹性扩张主要是缓冲血压，使收缩压降低，舒张压升高。故当大动脉硬化时，顺应性变小，缓冲能力减弱，收缩压升高而舒张压降低，脉压增大。 （5）循环血量和血管系统容量的比例：失血时，循环血量减少，而血管容量改变不大，体循环平均压下降，使回心血量减少，心输出量减少，动脉血压下降。如循环血量不变，血管容量增加，也可使回心血量减少，动脉血压下降。 6．在严重缺O2、CO2潴留、酸中毒、窒息情况下，机体是如何维持动脉血压的？ 在严重缺O2、CO2潴留、酸中毒、窒息对体循环血管的直接作用是扩张血管，降低动脉血压。但机体可通过颈动脉体和主动脉体化学感受性反射维持动脉血压，维持心脑等重要生命器官血液供应。正常情况下，化学感受器反射主要是调节呼吸运动，对心血管活动不起明显调节作用。但血液中O2分压降低，CO2分压升高及pH值降低，可激活颈动脉体及主动脉体内的化学感受器。传入冲动分别沿窦神经和主动脉神经上传到延髓的心血管中枢及呼吸中枢，引起呼吸加深加快，并因此使心率加快，心肌收缩增强，心输出量增多；同时使交感缩血管紧张增强，使外周血管收缩，外周阻力加大，动脉血压升高，皮肤、骨骼肌、腹腔内脏和肾脏的血流量减少，心、脑血流量增加，从而维持了动脉血压和心脑的血液供应。 7．在动物实验中，夹闭一侧颈总动脉后，动脉血压有何变化？为什么 夹闭一侧颈总动脉后，动脉血压会出现升高。 心脏射出的血液经主动脉弓、颈总动脉而到达颈总动脉窦。当血压升高时，该处动脉管壁受到机械牵张而扩张，从而使主动脉弓和颈动脉窦血管壁外膜上作为压力感受器的感觉神经末梢兴奋，引起减压反射，使血压下降。当血压下降使窦内压降低，减压反射减弱，使血压升高。在实验中夹闭一侧颈总动脉后，心脏射出的血液不能流经该侧颈动脉窦，使窦内压力降低，压力感受器受到刺激减弱，经窦神经上传中枢的冲动减少，减压反射活动减弱，因而心率加快、心缩力加强、回心血量增加、心输出量增加；阻力血管收缩，外周阻力增加，导致动脉血压升高。 8．电刺激家兔完整的减压神经时动脉血压有何变化？若再分别刺激减压神经向中端及向心端又会引起什么结果？为什么？ 主动脉弓压力感受器的传入纤维一般均在迷走神经中上传到中枢，但家兔主动脉弓压力感受器的传入纤维却自成一束，在颈部与迷走神经及颈交感神经伴行，称之为减压神经。电刺激家兔完整的减压神经或切断后的减压神经向中端，其传入冲动相当于压力感受器的传入兴奋，传入延髓心血管中枢将引起减压反射的
生理学模拟实验
生理学模拟实验题目 姓名：余娜学号：201412201801013 14级制药1班 P.94神经肌肉实验 1.毁脑髓后的蟾蜍应有何种表现？ 答：进针时有一定的阻力，而且随着进针蛙出现下肢僵直或尿失禁现象。若脑和脊髓破坏完全，蛙下颌呼吸运动消失，四肢完全松软，失去一切反射活动。 2.制备好的神经肌肉标本为何要放在任试液中？ 答：任氏液是一种生理盐溶液，其电解质、晶体渗透压、PH和缓冲能力与两栖类动物的组织液相近。能够防止标本干燥，丧失正常生理活性。 3.如何判断神经肌肉标本的兴奋性？ 答：用沾有任氏液的锌铜弓触及一下（或电刺激刺激）坐骨神经或用镊子夹持坐骨神经中枢端，如腓肠肌发生迅速而明显的收缩，说明标本的兴奋性良好。 4.锌铜弓刺激坐骨神经引起坐骨神经—腓肠肌标本的肌肉收缩是否是一种反射？ 答：不是，因为反射需具备完整的反射弧,而此实验中蟾蜍的脑和脊髓都被破坏,显然不具备反射中枢,不具备完整的反射弧. P.97不同强度和频率的刺激对肌肉收缩的影响 1.实验中观察到的阈刺激是神经纤维的阈刺激，还是肌肉的阈刺激？如此测出的阈刺激的可靠程度如何？还有什么更好的办法？ 答：神经纤维的阈刺激；肌肉收缩实验时的力学表现常受负荷、关节角度、初长度的影响，所以与人体有差别。用小鼠代替离体蟾蜍实验。 2.在一定的刺激强度范围内，为什么肌肉收缩会随刺激强度的增大而增大? 答：因为坐骨神经干中含有数十条粗细不等的神经纤维，其兴奋性也不相同。弱刺激只能使其中少量兴奋性高的神经纤维先兴奋，并引起它所支配的少量肌纤维收缩。随着刺激强度增大，发生兴奋的神经纤维数目增多，结果肌肉收缩幅度随刺激强度的增加而增加。当刺激达到一定程度，神经干中全部神经纤维兴奋，其所支配的全部肌纤维也都发生兴奋和收缩，从而引起肌肉的最大收缩。 3.不完全强直收缩与完全强直收缩是如何引起的？