葡萄糖测定方法

葡萄糖测定方法

原理

3,5-二硝基水杨酸（DNS）与还原性糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物，该物质在520 nm处有最大吸收峰，且在一定范围内吸收峰的强度（OD值）与还原糖浓度成线性关系，利用比色法可测得样品的含糖量。该方法是半微量定糖法，操作简便，快速，杂质干扰少。试剂

1）3, 5-二硝基水杨酸试剂（DNS试剂）

甲液：溶解6.9 g苯酚于 mL 10% NaOH中，并稀释至69 mL，在此溶液中加入6.9 g NaHSO3；

乙液：称取255 g酒石酸钾钠，加到300 mL 10% NaOH中，再加入880 mL 1%的3,5-二硝基水杨酸。

甲、乙液混合得黄色试剂，贮存于棕色瓶中，室温放置7-10天后备用。

2）%葡萄糖标准液（1 g/L）

准确称取100 mg分析纯的葡萄糖（预先在105℃干燥至恒重），加少量的蒸馏水溶解后定容至100 ml，冰箱中保存备用。

操作步骤

2 mL样品（稀释）+ mL DNS →沸水浴5 min →流水立即冷却至室温→定容至25 mL → 520 nm处检测OD值

浓度范围

0 ~ 0.5 g/L

标准曲线

葡萄糖母液1 g/L：称取 g葡萄糖，溶于1000 mL去离子水。

反应体系：

DNS（mL）

葡萄糖母液（mL）01

水（mL）21

注意事项

1）考虑葡萄糖的结晶水；

2）可以根据稀释倍数计算加入反应体系的样品量，不足的补水。

3）OD520在~之间时，葡萄糖的浓度基本上与吸光值呈线性关系，超过该范围，则应当适当稀释。

参考文献

[1] Miller G L. Use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of reducing

sugars [J]. Anal. Chem., 1959, 31: 426-428

食物中葡萄糖的测定

食物中葡萄糖的测定 葡萄糖氧化酶法 1.原理 葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下产生葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下使邻联甲苯胺生成蓝色物质，此有色物质在625nm 波长下与葡萄糖浓度成正比。通过测定蓝色物质的吸光度可计算样品中葡萄糖的含量。 2.适用范围 适用于谷类、乳类、饮料、酒类等食物样品和血液样品。检出量为0.02 mg。 3.仪器 722分光光度计。 4.试剂： 除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。 （1）乙醇。 （2） 40% 三氯乙酸：称取40g 三氯乙酸，用水溶解并稀释至100ml。 （3） 2 mol/L NaOH 溶液：称取8g NaOH，用水溶解并稀释至100ml。 （4） 1 % 邻联甲苯胺溶液：称取0.1 g 邻联甲苯胺溶解于10 ml无水乙醇中，倒入棕色瓶中，4 ℃冰箱保存。 （5）乙酸缓冲液（pH 5.0）：称取14.28 g 乙酸钠（CH3COONa?3H2O）溶于水中，加入2.7 ml 冰乙酸，并调节pH 5.0，用水定容至1 L。 （6）葡萄糖氧化酶溶液：称取一定量的葡萄糖氧化酶（Sigma 公司）用水溶解，使酶含量为100 U/ml。4 ℃冰箱保存一周。 （7）过氧化物酶溶液： 0.010 g 辣根过氧化物酶溶于10 ml 水中，4 ℃冰箱保存一周。（8）酶溶液：取100 ml 乙酸缓冲液，分别加入邻联甲苯胺溶液、葡萄糖氧化酶溶液、过氧化物酶溶液各1 ml，混匀。4℃冰箱可保存七周。 （9）酶空白液：取100 ml 乙酸缓冲液，分别加入邻联甲苯胺溶液、过氧化物酶溶液各1 ml，混匀。4℃冰箱保存一周。（注意酶空白液中不含葡萄糖氧化酶） （10）葡萄糖标准液：将葡萄糖标准品（纯度大于99%）于80 ℃干燥至恒量。精确称取0.050 g，用水移入100 ml 容量瓶中，定容至刻度线。相当于浓度为0.5 mg/ml。 5.操作步骤： 5.1样品处理： （1）固体样品：称取0.5～5g已粉碎的样品于锥形瓶中，加入50ml水后沸水浴15min。冷

葡萄糖耐量试验方法及临床意义

葡萄糖耐量试验方法及临床意义 口服葡萄糖耐量实验（oral glucose tolerance test, OGTT）是检查人体血糖调节功的一种方法。正常人服用一定量的葡萄糖后，血糖浓度暂时性升高（一般不超过8.9mmol/L）但在2小时内血糖浓度又可恢复至正常空腹水平。在服用一定量的葡萄糖后，间隔一定时间测定血糖和尿糖，观察血液葡萄糖水平及有无尿糖出现，称为耐糖试验。 一、葡糖耐量试验的方法 1．做OGTT试验前3天，停止胰岛素治疗，可正常饮食，每天饮食中碳水化合物含 不应低于150克（但要控制在250～300克范围），并且维持正常活动。 2．次日晨空腹抽取血液2ml，抗凝，测定血浆葡萄糖，此为空腹血糖。 3．在5分钟之内饮入300毫升含7医学教育网原创5克葡萄糖的糖水（对于儿童则中按每千克体重给1.75克葡萄糖，计算口服葡萄糖用量，直至达到75克葡萄糖时止），喝糖水后30分钟、1小时、2小时分别静脉取血一次，并留取尿液做尿糖定

性试验。整个 验中不可吸烟、喝咖啡、喝茶或进食，应安静地坐在椅子上。4．测定血糖浓度，并绘制耐糖曲线：将各次所测得的血糖浓与对应的时间作图，绘制 耐量曲线。 二临床意义 1．OGTT对隐性糖尿病诊断有帮助，在实际应用中亦可OGTT，即只取空腹和服糖2小时标本测定血糖值，一般认为2小时值是关键性的。 2．内分泌疾病，如肾上腺皮质机能亢进疾病(如柯兴综合征) 有70%~80%病人有糖耐量降低；反之肾上腺皮质功能减退垂体前叶功能不全等，都可呈现低平糖耐量曲线。 3．慢性胰腺炎患者常呈现糖尿病曲线。 4．肝脏疾病，慢性肝炎患者可出现糖耐量降低。 5．心肌梗塞的急性期可能出现糖耐量降低，这可能与病人处于应激状态有关。

葡萄糖耐量试验

葡萄糖耐量试验 临床上做糖尿病的诊断试验时，通常是测定静脉空腹血糖。当静脉空腹血糖＜5.0mmol／L，可排除糖尿病；当静脉空腹血糖＞ 7.0mmol／L并且有临床症状时，则可以诊断为糖尿病；而当静脉空腹血糖在5.5～7.0mmol／L之间并且怀疑糖尿病时，就应该进一步做葡萄糖耐量试验———OGTT。OGTT试验是一种口服葡萄糖负荷试验，用以了解人体对进食葡萄糖后的血糖调节能力。通过OGTT试验，可以早期发现糖代谢异常，早期诊断糖尿病。 如何进行试验呢？ 1.做OGTT试验前3天，不应该控制饮食，每天饮食中碳水化合物含量不应低于150克，并且维持正常活动。 2.影响本试验的药物（引起血糖升高或降低的药物）应停用。 3.试验前病人应10～14个小时不进食。 4.试验当日早晨空腹静脉取血后在5分钟之内饮入300毫升含75克葡萄糖的糖水，喝糖水后30分钟、1小时、2小时分别静脉取血一次，并留取尿液做尿糖定性试验。整个试验中不可吸烟、喝咖啡、喝茶或进食，应安静地坐在椅子上。 试验结果如何判定呢？ 1.当静脉空腹血糖＜6.1mmol／L，OGTT两小时血糖＜7.8mmol／L，说明人体对进食葡萄糖后的血糖调节能力正常，为糖耐量正常。 2.当静脉空腹血糖≥7.0mmol／L或OGTT两小时血糖≥11.1mmol ／L，尿糖＋～＋＋＋＋，说明人体处理进食后葡萄糖的能力明显降低，

已达到糖尿病的诊断标准。 3.当静脉空腹血糖＜7.0mmol／L并且OGTT两小时血糖介于7.8～11.1mmol／L之间，说明人体对葡萄糖的调节能力轻度下降，已达到糖耐量低减的诊断标准。 4.当静脉空腹血糖介于6.1～7.0mmol／L之间，且OGTT两小时血糖≤7.8mmol／L，说明人体对进食葡萄糖后的血糖调节能力尚好，但对空腹血糖调节能力轻度减退，已达到空腹血糖受损的诊断标准。

氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖

葡萄糖氧化酶法测定操作规程 1实验原理葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并成成过氧化氢。过氧化物酶在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解喂水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林（4-AAP）和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。在500nm处测得的吸光度与葡萄糖含量成正比。GOD 葡萄糖+O2→葡萄糖酸+H2O2 POD H2O2+4-AAP+酚→红色醌类化合物+H2O 2临床意义1.生理性高血糖可见于餐后或高糖饮食.情绪紧张肾上腺分泌增加等。 2.病理性高血糖（1）糖尿病患者。（2）内分泌腺功能障碍：甲状腺功能亢进，肾上腺皮质及髓质功能亢进等。升高血糖的激素增多引起的高血糖，现已归入特异性糖尿病中。（3）颅内压增高：颅内压增高刺激血糖中枢，如颅外伤.颅内出血.脑膜炎等。（4）脱水引起的高血糖：如呕吐.腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。 3.生理性低血糖见于长期饥饿和剧烈运动后。 4.病理性低血糖（特发性功能性低血糖最多见，依次是药源性.肝源性.胰岛素瘤等）。（1）胰岛β细胞增生或胰岛β细胞瘤等，使胰岛素分泌过多。（2）对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶功能减退.肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使相应的激素分泌减少。（3）严重肝病患者，由于肝脏存储糖原及糖异生等功能低下，肝脏不能有效地调节血糖。 3实用仪器蓝韵200（L Y-C200） 4储存条件及有效期试剂盒应避光密封储存在2--8℃环境中，有效期为12个月。开封后，上机在2--8℃避光保存其有效期为28天。

5操作步骤 5.1、全自动生化分析仪操作步骤：参数设置→试剂装载→校准→质控→样品加载→测定→结果审核→报告。 5.2、校准：采用纯化水或生理盐水和校准品两点校准。当试剂更换批号、出现质控漂移、仪器做完保养后及重要零件更换时，须重新校准。 5.3、结果计算：全自动生化分析仪会自动给出检测结果。 5.4、质控程序：建立质控体系，选用适当的质控品进行质量控制。测定结果在质控范围内，方可进行样本测定。 6参考范围 3.89—6.11 mmol∕L 7方法评价本法线性范围0.10 mmol∕L—25.00mmol∕L，精密度批内CV ≤3.00%，批间CV≤4.00%。准确度相对偏差在±10.0%。 8注意事项1.葡萄糖氧化酶对β-D葡萄糖高度特异，溶液中的葡萄糖约36%为α型，64%为β型。葡萄糖的完全氧化需要α型到β型的变旋反应。葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄糖含量，但不能直接测定尿液葡萄糖含量，这是因为尿液中尿酸等干扰物质浓度过高，可干扰过氧化物酶反应，造成结果假性偏低。 2.严重黄疸.溶血及乳糜烂血清应先制备无蛋白血滤液，然后再进行测定。

葡萄糖含量测定——碘量法

实验十三 葡萄糖含量的测定——碘量法 一、实验目的 1、 学会间接碘量法测定葡萄糖含量的方法原理，进一步掌握返滴定法技能。 2、 进一步熟悉酸滴定管的操作，掌握有色溶液滴定时体积的正确读法。 二、实验原理 I 2与NaOH 作用可生成次碘酸钠(NaIO)，次碘酸钠可将葡萄糖(C 6H 12O 6)分子中的醛基定量地氧化为羧基。未与葡萄糖作用的次碘酸钠在碱性溶液中歧化生成NaI 和NaIO 3，当酸化时NaIO 3又恢复成I 2析出，用Na 2S 2O 3标准溶液滴定析出的I 2，从而可计算出葡萄糖的含量。涉及到的反应如下： 1、I 2与NaOH 作用： I 2+2NaOH=NaIO+NaI+H 2O 2、C 6H 12O 6和NaIO 定量作用： C 6H 12O 6+ NaIO=C 6H 12O 7+NaI 3、总反应式： I 2+C 6H 12O 6+2NaOH=C 6H 12O 7+2NaI+H 2O 4、C 6H 12O 6作用完后，过量的NaIO 发生歧化反应： 3NaIO=NaIO 3+2NaI 5、在酸性条件下NaIO 3和NaI 作用： NaIO 3+5NaI+6HCl=3I 2+6NaCl+3H 2O 6、析出过量的碘用Na 2S 2O 3标准溶液滴定： I 2+2Na 2S 2O 3=Na 2S 4O 6+2NaI 实验还涉及到Na 2S 2O 3和 I 2溶液的标定 1、Na 2S 2O 3的标定 Cr 2O 72-+6I -+14H +=2Cr 3++3I 2+7H 2O I 2+2S 2O 32-=S 4O 62-+2I - Cr 2O 72-~3I 2~6S 2O 32- 32232272232200.256)(6O S Na O S Na O Cr K O S Na V c V cV c ??=?= 2、碘的标定 I 2+2S 2O 32-=S 4O 62-+2I - V V c 322322O S Na O S Na c 2/1= 3、葡萄糖注射液中葡萄糖的含量 计算式：%100506126?=L g O H C W 标示量葡萄糖含量 三、实验仪器及材料 1、 仪器 称量瓶、电子台秤、分析天平、容量瓶（250ml ）、移液管（25ml ）、量筒（10ml ）、锥形瓶（25ml ，3个）、酸式滴定管（50ml ）、烧杯（50ml ）、玻璃棒、碘量瓶 2、 药品 K 2Cr 2O 7（S ）、盐酸（6mol/L ）、KI 溶液（100g/L)、淀粉（5g/L)、Na 2S 2O 3溶液（0.1mol/L ）、I 2溶液（0.05mol/L ）、NaOH 溶液（1mol/L ）、葡萄糖注射液（5%） 四、 实验步骤 1、 0.1mol/L Na 2S 2O 3标准溶液的标定 ()()()()())(100000.25100021101612632232222-??????????-?L g O H C M O S Na v O S Na c I v I c 葡萄糖含量＝

葡萄糖含量测定

葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定 摘要 运用氧化还原滴定的原理设计葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定方案并具体实施。从而进一步掌握Na 2S 2O 3及I 2标准溶液的配制和标定方法，巩固氧化还原滴定的操作技能。学会间接碘量法测定葡萄糖含量的方法和原理，进一步掌握返滴定法技能。其中，葡萄糖分子中含有醛基，能被IO -定量地氧化为羧基。故可将一定量过量的I 2在碱性条件下加入葡萄糖溶液中，使醛基完全转化为羧基。再将其酸化，用Na 2S 2O 3标准溶液滴定析出的I 2。所用指示剂为淀粉。根据所加I 2标准溶液的量及滴定所耗Na 2S 2O 3标准溶液的量结合反应式中各物质之间的计量关系，便可计算葡萄糖的含量。该方法简便易行且准确度高，基本符合实验要求。 关键词 葡萄糖注射液 间接碘量法 返滴定法 1引言 葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定目前有以下几种方法 方案一：旋光测定法 根据葡萄糖分子结构中的五个碳都是手性碳原子，具有旋光性，可采用旋光法测定含量。取出旋光计的测定管，先用蒸馏水为空白对仪器进行校正。用供试液体（5％葡萄糖注射液）冲洗数次，缓缓注入供试液体适量（注意勿使发生气泡）。置于旋光计内，读取旋光度，连续测定3次，取平均值。 方案二：间接碘量法。 碘与NaOH 作用能生成NaIO ，而C 6H 12O 6能定量地被NaIO 氧化。在酸性条件下，未与C 6H 12O 6作用的NaIO 可转变为I 2析出，只要用标准Na 2S 2O 3溶液滴定析出的I 2，便可计算C 6H 12O 6的含量。 本实验采用第二种方案进行葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定。 2实验原理 在碱性溶液中，碘与氢氧化钠作用可生成次碘酸钠（NaIO),葡萄糖能定量的被次碘酸钠氧化成葡萄糖酸（C 6H 12O 7）。过量的NaIO 可以转化为NaIO 3和NaI 。在酸性条件下，NaIO 3和NaI 作用析出I 2，然后用Na 2S 2O 3标准溶液滴定析出的I 2，便可计算出葡萄糖的含量。其反应如下： 1、I 2与NaOH 作用： I 2+2NaOH=NaIO+NaI+H 2O 2、C 6H 12O 6和NaIO 定量作用： C 6H 12O 6+ NaIO=C 6H 12O 7+NaI 3、总反应式： I 2+C 6H 12O 6+2NaOH=C 6H 12O 7+2NaI+H 2O

高效液相色谱法测定复方氨基葡萄糖咀嚼片中氨基葡萄糖的含量

高效液相色谱法测定复方氨基葡萄糖咀嚼片中氨基葡萄糖的含量[摘要] 目的建立高效液相色谱法,测定氨基葡萄糖咀嚼片中氨基葡萄糖的 含量。方法以Hypersil C18(50mm×4.6mm,5μm)为色谱柱;以0.05mol·L-1乙酸钠水溶液甲醇(90∶10)为流动相;UV检测波长340nm;流速1.0ml·min-1。结果氨基葡萄糖在200～1600mg·L-l范围内具有良好线性关系(r=0.9996),平均加样回收率为100.4%,(RSD)为1.0%(n=9);3批样品的标示含量分别为99.5%、100.1%、99.4%。结论高效液相色谱法准确、灵敏,重现性好,可用于氨基葡萄糖咀嚼片的含量测定。 [关键词] 氨基葡萄糖;咀嚼片;色谱法,高压液相;含量 氨基葡萄糖[1]是蛋白多糖合成的前体物质,可刺激软骨细胞产生有正常多聚体结构的蛋白多糖,提高软骨细胞的修复能力,抑制可损害关节软骨的酶,并可防止损伤细胞的超氧化物自由基的产生,促进软骨基质的修复和重建,从而可缓解骨关节疼痛,改善关节功能,并延缓关节病变的发展;硫酸软骨素在关节中具有润滑和支撑功能,还具有抗动脉粥样硬化与抗粥样斑块作用;两者复方在临床上主要用于骨性关节炎的防治,减慢软骨退化和缓解疼痛。目前国内仅有氨基葡萄糖常规口服片剂和胶囊的生产与销售,尚无复方氨基葡萄糖制剂(氨基葡萄糖和硫酸软骨素)。为此我们开发了复方氨基葡萄糖咀嚼片,为控制其质量,建立了测定氨基葡萄糖咀嚼片含量的高效液相色谱法。 1 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 试药与试剂硫酸氨基葡萄糖氯化钠复盐(浙江海正药业股份有限公司);氨基葡萄糖对照品(中国药品生物制品鉴定所;批号:649200001);复方氨基葡萄糖咀嚼片(规格:氨基葡萄糖∶硫酸软骨素=250mg∶200mg),甲醇色谱纯,乙酸钠、醋酸及邻苯二甲醛等为分析纯。 1.1.2仪器高效液相色谱仪(Waters 600E泵控系统),WatersTM 486紫外检测器,Rheodge 7125进样器,HW色谱工作站。 1.2 色谱条件 色谱柱:Hypersil C18(50mm×4.6mm);流动相:以0.05mol·L-1乙酸钠水溶液(取6.80g三水合乙酸钠,加入700ml水使其溶解,用醋酸调pH至5.9,加水至1000ml)甲醇(900∶100)为流动相;UV检测波长340nm;流速1.0ml·min-1;进样量为20μl。 1.3 溶液制备 1.3.1 衍生化试剂的制备称取50mg邻苯二甲醛置14ml聚丙烯试管中,加入

实验一葡萄糖含量测定

实验一、果蔬样品中葡萄糖含量的测定（碘量法） 一、目的要求 1、复习碘量法的原理及操作。 2、掌握还原糖的测定方法。 3、学习样品的前处理方法。 二、原理 果蔬中的葡萄糖可用水提取，除去干扰物质后，其中的葡萄糖可用碘量法测定。 碘与NaOH 作用能生成NaIO （次碘酸钠），而C 6H 12O 6（葡萄糖）能定量地被NaIO 氧化。在酸性条件下，未与C 6H 12O 6作用的NaIO 可转变成I 2析出，析出的I 2可用Na 2S 2O 3标准溶液滴定。反应示意如下： 46应用2: 碘量法测定葡萄糖含量 (返滴定法) 基本单元：1/2(葡萄糖） 三、试剂 I 2标准溶液（0.05 mol ·L -1） Na 2S 2O 3标准溶液(0.1 mol ·L -1) NaOH 溶液（2 mol ·L -1）； HCl 溶液（6 mol ·L -1）；淀粉指示剂(w 为0.01)。 四、实验步骤 1、样品准备 水果样品去皮、去核后搅碎、匀浆；称量适量的匀浆于250 mL 容量瓶中定容。于40~50 ℃ 的水浴中提取30 min 后用干滤纸抽滤，弃去前面的少量滤液，保留后面的滤液。 2、葡萄糖含量的测定 用移液管吸取25 mL 滤液置于碘量瓶中，准确加入25 mL I 2 标准溶液。一边摇动，一边慢慢滴加2 mol /L NaOH 溶液，直至溶液呈淡黄色（加碱速度不能过快，否则过量NaIO 来不及氧化C 6H 12O 6而歧化为不与葡萄糖反应的NaIO 3和NaI ，使测定结果偏低）。将碘量瓶加塞于暗处放置10~15 min 后，加2 mL 6 mol ·L -1 HCl 溶液酸化，立即用Na 2S 2O 3标准溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1 mL 淀粉指示剂，继续滴定到蓝色消失。记录读数。再重复测定二次。计算样品中葡萄糖的质量分数。

氨基葡萄糖的检测方法汇总

氨基葡萄糖的检测 葡萄糖的一个羟基被一个氨基取代的化合物。分子式C6H13O5N，俗称氨基糖，简称氨糖。又名葡萄糖胺，广泛存在于自然界；市面上氨糖主要分为盐酸氨糖与硫酸氨糖两种。目前，氨糖的分析方法主要有分光光度法、HPLC和HPIC等，最常用的分析方法为高效液相色谱法，近年来离子色谱技术在糖类化合物分析中的应用也越来越广泛。 分光光度法 （《中国药典》2010 年版二部附录IVA）测定。 1 对照品溶液的制备：精密称取经105干燥至恒重的盐酸氨基葡萄糖对照品适量，加水溶解制成每1ml约含25μ的溶液作为对照品溶液。 2 供试品溶液的制备：精密称取样品约25mg，置100ml 量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取10ml，置100ml 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，既得。 3 测定法：分别取对照品溶液及供试品溶液各 5ml 分别置具塞试管中，另取具塞试管蒸馏水5ml作为空白，各加乙酰丙酮试液（取乙酰丙酮2ml，加 0.5mol/L 碳酸钠溶液至50ml，临用前配置成1.0ml，摇匀，置沸水浴中（1分钟后密塞），准确加热25 分钟，取出，用冰水迅速冷却后，加无醛乙醇3.0ml，60水浴中保温10 分钟后，再加对二甲氨基苯甲醛试液（对二甲氨基苯甲醛0.8g，加无醛乙醇15ml 及盐酸15ml，摇匀)1.0ml，强力振摇，并继续在 60水浴中保温1 小时，立即用冷水冷却至室温。参照分光光度法（《中国药典》2010 年版二部附录IVA）在525nm 波长处分别测定吸光度，计算，既得。 HPLC-ELSD法（高效液相色谱法） 依据：GB/T20365-2006 1、主要使用仪器 高效液相色谱仪， ELSD蒸发光散射检测器，色谱柱 2、标准溶液的配制 准确称取硫酸软骨素和氨基葡萄糖标准品各约0.1g。分别加1mL乙腈，超声1min后，加纯水定容至10mL。吸取上述硫酸软骨素和氨基葡萄糖标准溶液各

葡萄糖检测方法

葡萄检测方法汇总 与葡萄糖检测相关的国家地方标准汇总： GB/T 30390-2013 油料种籽中果糖、葡萄糖、蔗糖含量的测定高效液相色谱法 DB41/T 321-2003 食品添加剂.?葡萄糖含量测定方法 NY/T 2279-2012 食用菌中岩藻糖、阿糖醇、海藻糖、甘露醇、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、核糖的测定离子色谱法 GB/T 淀粉水解产品还原力和葡萄糖当量测定 GB/T 20379-2006 淀粉衍生物葡萄糖浆、果糖浆和氢化葡萄糖浆成分的测定 GB/T 16285-2008 食品中葡萄糖的测定酶-比色法和酶-电极法 CNS 2874-N5083 葡萄糖浆及干葡萄糖浆 GB/蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的测定方法液相色谱示差折光检测法 GB/T22221-2008食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定高效液相色谱法 YC/T252-2008烟用料液?葡萄糖、果糖、蔗糖的测定?离子色谱法 国家地方标准检测方法汇总表

葡萄糖的应用范围 葡萄糖作为人体的基本元素和最基本的医药原料，其作用和用途十分广泛。尤其是随着广大人民生活水平的提高，葡萄糖作为蔗糖的替代用糖应用于食品行业，为葡萄糖的应用开拓了更广阔的领域。 （一）发酵工业 微生物的生长需要合适的碳氮比，葡萄糖作为微生物的碳源，是发酵培养基的主料，如抗生素、味精、维生素、氨基酸、有机酸、酶制剂等都需大量使用葡萄糖，同时也可用作微生物发酵多聚糖和有机溶剂的原料。 1.抗生素发酵 葡萄糖是医药工业的重要原料，尤其是抗生素发酵必不可少的原料，抗生素中最主要的品种是青、链霉素，而这两种抗生素发酵都是以葡萄糖或者高DE值的淀粉水解液(即葡萄糖液)为碳底物。链霉素发酵以结晶葡萄糖为主，也可用高DE值的淀粉水解液(即葡萄糖液)；其他如利福平也以葡萄糖或者高DE值的淀粉水解液(即葡萄糖液)为主要碳源；沽霉素、红霉索、麦迪霉

盐酸氨基葡萄糖片检测标准操作程序

1. 目的建立盐酸氨基葡萄糖片检测标准操作程序。 2. 范围本标准适用盐酸氨基葡萄糖片。 3. 职责质量保证部、QC负责本标准的实施。 4. 程序 4.1 性状 目测：本品为为绿色薄膜包衣片，除去包衣后显白色或类白色。 4.2 鉴别 4.2.1 葡萄糖基的鉴别反应 ⑴试剂与试液：碱性酒石酸铜试液（取硫酸铜结晶6.93g，加水使溶解成100ml；取酒石酸钾钠结晶34.6g与氢氧化钠10g，加水使溶解成100ml；将两试液等量混合，即得）。 ⑵仪器与用具：电子分析天平、量筒、量瓶、移液管、试管。 ⑶操作方法：取本品细粉适量（约相当于盐酸氨基葡萄糖0.1g），加水5ml，振摇使溶解后，过滤，滤液中加碱性酒石酸铜试液1ml，加热，即生成红色沉淀。 4.2.2 氨基的鉴别反应 ⑴试剂与试液：茚三酮。 ⑵仪器与用具：电子分析天平、量筒、量瓶、移液管、试管。 ⑶操作方法：取本品细粉适量（约相当于盐酸氨基葡萄糖75mg），加水10ml，振摇使溶解后，过滤，取滤液1ml，加入茚三酮约2mg，加热，溶液显紫红色。 4.2.3氯化物的鉴别反应 ⑴试剂与试液：硝酸银试液（取硝酸银17.5g，加水适量使溶解成1000ml，摇匀，即得。）、氨试液（取浓氨溶液400ml，加水使成1000ml，即得。）、碘化钾淀粉试纸、硫酸、稀硝酸、二氧化锰。 ⑵仪器与用具：电子分析天平、量筒、量瓶、移液管、试管。 ⑶操作方法： ①取供试品溶液，加稀硝酸使成酸性后，滴加硝酸银试液，即生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀复生成。 ②取供试品少量，置试管中，加等量的二氧化锰，混匀，加硫酸湿润，缓缓加热，即发生氯气，能使用水湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色。 4.2.4 盐酸氨基葡萄糖的鉴别 ⑴试剂与试液：水、磷酸、磷酸二氢钾、乙腈、盐酸氨基葡萄糖对照品。

口服葡萄糖耐量试验法

口服葡萄糖耐量试验法 (1)进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)之前每天碳水化合物摄入量不少于150g，有正常的体力活动至少三天。 (2)试验前过夜空腹10～16小时，可以饮水。 (3)试验过程中禁止吸烟。 (4)取得空腹血标本后，饮用含75g葡萄糖的水300mL，5分钟内饮完。 (5)分别于服糖后0.5、1.5、2小时抽取血标本。 (6)若血糖测定不能立即进行，血标本应放在含有氟化钠的试管中，每mL全血可用氟化钠6 mg。离心分离血浆，血浆可冰冻待测。 (7)正常的血糖水平。空腹不超过6.4mmol/L，服75g葡萄糖0.5、1.5小时都不超过11.1m mol/L，2小时不超过7.8mmol/L。 (8)葡萄糖耐量减低。应具备以下三条：即①空腹血糖＜7.8mmol/L；②OGTT中服糖2小时血糖＞7.8mmol/L，低于11.1mmol/L；③OGTT中，服糖后0.5、1、1.5小时三点中至少有一点血糖≥11.1mmol/L。 (9)空腹血糖＞7.8mmol/L，临床已诊断糖尿病，则不再作OGTT。 妊娠糖尿病的诊断标准 什么是妊娠糖尿病 原本并没有糖尿病的妇女，于怀孕期间发生葡萄糖耐受性异常时，就称为“妊娠糖尿病”，可能引起胎儿先天性畸形、新生儿血糖过低及呼吸窘迫症候群、死胎、羊水过多、早产、孕

妇泌尿道感染、头痛等，不但影响胎儿发育，也危害母亲健康，因此怀孕期间检查是否有糖尿病是很重要的。妊娠糖尿病之孕妇有可能在下次怀孕时再发生，如果再次怀孕应及早告知医生并作检验。曾罹患此症之孕妇，中老年后出现糖尿病的机率比正常妇女高，故产后应设法维持适当的理想体重及保持规律的饮食、运动习惯，并定期检验血糖值。 妊娠糖尿病怎么测 于妊娠24～28周时，经过口服50克的葡萄糖筛检及100克口服葡萄糖耐受试验，测出空腹、餐后1小时、2小时及3小时之血糖浓度，若发现其中至少有两项数值高于标准值时(空腹，105mg/dl；餐后1小时，190mg/dl；餐后2小时，165mg/dl；餐后3小时，145mg/dl)，则诊断为妊娠期糖尿病。

氨基葡萄糖检测方法

氨基葡萄糖检测方法 样品处理： 取1 mL反应液，离心去除反应中沉淀，用去离子水进行适当稀释后经孔径为0.22 μm的滤膜过滤。 检测方法1 分析方法：OPA 硼酸柱前衍生化 色谱条件：(1)色谱柱：色谱柱C18（250*4.6）mm （2）柱温：40℃ （3）流动相A：称取3.02 g无水乙酸钠于烧杯中，加去离子水溶解并定容至1 L，然后加入200 μL三乙胺，用5%的醋酸将PH调到7.20±0.05；抽滤后加入5毫升四氢呋喃，混合后备用。 流动相B：称取3.02 g无水乙酸钠于烧杯中；加去离子水溶解并定容至200 mL；用5%醋酸将PH调到7.20±0.05；抽滤后，再向此溶液加入400 mL乙腈和400 mL甲醇，混合后备用。 （4）流速：1.0 ml/min； （5）紫外检测器：338 nm （6）柱温：40℃ （7）梯度洗脱： 时间A% B% 流速（ml/min） 0 92 8 1.0 20.0 40 60 1.0 22.5 0 100 1.0 23.5 0 100 1.2 24.5 0 100 1.2 25.0 0 100 1.2 26.5 92 8 1.2 （8）进样程序： 试剂摆放位置：P1A1：OPA P1A3：水

P1A4：硼酸P1A5：水 抽取：使用默认值补偿值从含200ul/min的位置P1A4上抽取7 ul 清洗：在位置P1A3清洗针一次 抽取：使用默认补偿值从含200ul/min的样品位置抽取1 ul 清洗：在位置P1A3清洗针一次 混合：将来自空气中的8 ul与最大速度混合3次 抽取：使用默认补偿值从含200ul/min的位置P1A1上抽取2 ul 清洗：在位置P1A3清洗针一次 混合：将来自空气中的10 ul与最大速度混合15次 抽取：使用默认补偿值从含200ul/min的位置P1A5上抽取30 ul 混合：将来自空气中的20 ul与300ul/min混合3次 进样：进样 （9）定量方法：采用外标法定量 检测结果如图1所示

葡萄糖注射液的含量测定

葡萄糖注射液的含量测定 一、目的要求 ? 1.掌握旋光法测定葡萄糖注射液含量的原理、方法及计算。 ? 2.学会使用自动旋光仪。 二、仪器与试剂 ? 仪器 自动旋光仪，旋光管，移液管（50ml ），容量瓶(100ml)。 ? 试剂 葡萄糖注射液（含量在16%以上）， 氨试液（取浓氨溶液400ml ，加水使成1000ml ）。 三、方法原理 ? 葡萄糖分子结构中有多个不对称碳原子，具有旋光性，为右旋体。一定条件下的旋光度是旋光性物质的特性常数，测定葡萄糖的比旋度，可以鉴别药物，也可以反映药物的纯杂程度。 ? 旋光度（α）与溶液的浓度（c ）和偏振光透过溶液的厚度（L ）成正比。当偏振光通过厚1dm 且每1ml 中含有旋光性物质1g 的溶液，使用光线波长为钠光D 线（589.3nm ），测定温度为t ℃时，测得的旋光度称为该物质的比旋度，以[α]Dt=α/Lc 。 ? 2.0852的由来：+52.75为无水葡萄糖的比旋度，按下式计算无水葡萄糖的浓度： ? 无水葡萄糖浓度（c ）=100 α /[α]D20l ? 如果换算成一水葡萄糖浓度（c ˊ）时，则应为： ? c ˊ = c × = α× × =α×2.0852 ? 所以，测定葡萄糖溶液的旋光度可以求得其含量。 四、旋光仪的工作原理 1.光源 2.小孔光栏 3.物镜 4.滤光片 5.偏振镜 6.磁旋线圈 7.样品室8.偏振镜9.光电倍增管10.前置放大器 11.自动高压12.选频放大器13.功率放大器 14.伺服电机15.蜗轮蜗杆16.计数器 ? 使用方法 （1）将仪器电源插头插入220V 交流电源，并将接地脚可靠接地。 （2）打开电源开关，这时钠光灯应启亮，需经5min 钠光灯预热，使之发光稳定。 （3）打开电源开关（若光源开关打开后，钠光灯熄灭，则再将光源开关上下重复打开1到2次，使钠光灯在直流下点亮，为正常）。 （4）打开测量开关，这时数码管应有数字显示。 （5）将装有蒸馏水或其他空白溶剂的试管放入样品室，盖上箱盖，待示数稳定后，按清零按钮。试管中若有气泡，应先让气泡浮在凸颈处。通光面两端的雾状水滴，应用软布揩干。试管螺帽不宜旋得过紧，以免产生应为，影响读数。试管安放时应注意标记的位置和方向。 （6）取出试管，将待测样品注入试管，按相同的位置和方向放入样品室内，盖好箱盖。仪器数显窗将显示出该样品的旋光度。 （7）逐次按下复测按钮，重复读几次数，取平均值作为样品的测定结果。 （8）如样品超过测量范围，仪器在±45 处来回振荡。此时，取出试管，打开箱盖按箱内回零按钮，仪器即自动)(16.180)(17.198无水葡萄糖的分子量一水葡萄糖的分子量175.52100 16.18017.198

口服葡萄糖耐量实验(OGTT)复习进程

口服葡萄糖耐量实验 (O G T T)

精品文档 口服葡萄糖耐量实验（OGTT） （一）概述 1.糖耐量：指人体对摄入的葡萄糖具有很大耐受能力的现象。 口服葡萄糖耐量试验：口服一定量葡萄糖后，每间隔一定时间测定血糖水平称之。 是一种葡萄糖负荷试验。利用这一试验可了解胰岛β细胞功能和机体对糖的调节能力。 2.OGTT的主要适应证 ①无糖尿病症状，随机或空腹血糖异常者；②无糖尿病症状，有一过性或持续性糖尿；③无糖尿病症状，但有明显糖尿病家族史；④有糖尿病症状，但随机或空腹血糖不够诊断标准；⑤妊娠期、甲状腺功能亢进、肝病、感染，出现糖尿者；⑥分娩巨大胎儿的妇女或有巨大胎儿史的个体；⑦不明原因的肾病或视网膜病。 （二）方法 WHO标准化的OGTT： WHO推荐成人75g葡萄糖，孕妇100g，儿童每公斤体重1.75g，总量≤75g 用250ml水溶解，5分钟内口服。服糖前抽空腹血，服糖后每隔30分钟取血，共四次。采血同时每隔1小时留尿测尿糖。根据各次血糖水平绘制糖耐量曲线。 试验前三天每日食物中糖含量应不低于150 g，维持正常活动，影响试验的药物应在三天前停用。整个试验期间不可吸烟、喝咖啡、喝茶或进食。 （三）OGTT结果： 1.正常糖耐量： 空腹血糖<6.1mmol／L（110mg／dl），口服葡萄糖30min～60min达高峰，峰值<11.1mmol／L（200mg／dl）；2小时恢复到正常水平，即<7.8mmol ／L（140mg／dl），尿糖均为（—）。此种糖耐量曲线说明机体糖负荷的能力好。 2.糖尿病性糖耐量： 空腹血糖浓度≥7.0mmol/L； 服糖后血糖急剧升高，峰时后延峰值超过11.1mmol/L，2小时后仍高于正常水平，尿糖常为阳性。 其中服糖后2h的血糖水平是最重要的判断指标。 许多早期糖尿病病人，可只表现为2小时血糖水平的升高。 收集于网络，如有侵权请联系管理员删除

氨基葡萄糖盐酸盐分析方法比较

氨基葡萄糖盐酸盐分析方法比较 摘要：分别采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD）、高效液相色谱-示差折光检测法（HPLC-RID）和高效离子色谱-脉冲安培检测法（HPIC-PAD）检测氨基葡萄糖盐酸盐，确定了几种方法的检测限和线性范围，考察了方法的精密度，测定了氨基葡萄糖盐酸盐的加标回收率。结果显示，在三种方法中HPIC-PAD方法能测定到最低浓度的氨基葡萄糖盐酸盐，且具有最高的精密度；HPLC-RID方法检测限最高，精密度最差。 关键词：高效液相色谱，高效离子色谱，蒸发光散射，示差折光，脉冲安培检测 前言： 氨基葡萄糖类物质具有重要的生理活性，Elson-Morgan法[1]是此类物质测定的经典方法，由于其只能测定总的糖类而使其应用受到限制。多种色谱方法在糖类的分析中发挥着重要作用，如气相色谱法[2]（GC）、凝胶色谱法[3]（GPC）、高效毛细管电泳法[4]（HPCE）、高效液相色谱法[5,,,678]（HPLC）、高效离子色谱法[9,10]（HPIC）等。这些检测方法对不同糖类化合物的检测分析各有不同的优势。最常用的糖类化合物的分析方法为高效液相色谱法，近年来离子色谱技术在糖类化合物分析中的应用也越来越广泛。 本文对几种糖类物质测定方法在氨基葡萄糖盐酸盐分析中的应用进行了比较，为氨基葡萄糖类物质分析的方法选择提供指导。 1、实验仪器和材料 1.1试剂和样品 乙腈（TEDIA，HPLC级），超纯水（Milli-Q），氨水（西陇化工，分析纯） 氨基葡萄糖盐酸盐标准样品（国家海洋局第三海洋研究所），氨基葡萄糖盐酸盐对照品（中国药品生物制品检定所），硫酸氨基葡萄糖胶囊（由厦门蓝湾科技有限公司提供） 准确称取、精确定容的浓度为40.00mg/mL和1.00mg/mL的氨基葡萄糖盐酸盐标准储备液。 1.2仪器和条件 电子天平（Sartorius BP211D），Milli-Q Biocel A10超纯水机（Millipore） HPLC-ELSD法：Waters-Alliance 2695型高效液相色谱仪，Alltech ELSD800蒸发光散射检测器，Waters Carbohydrate柱（250 mm×4.6 mm，4μm）；流动相为乙腈：水=70：30；流速：1.0 mL/min；柱温：28oC；ELSD参数：载气流速为3.00L/min，蒸发管温度为80oC。 HPLC-RID法：高效液相色谱仪（Waters），K-2401 RI 检测器（诺尔KNAUER），氨基

糖耐量实验

口服葡萄糖耐量实验是检查人体血糖调节功能的一种方法。正常人服用一定量的葡萄糖后，血糖浓度暂时性升高（一般不超过8.9mmol/L），但在2小时内血糖浓度又可恢复至正常空腹水平。在服用一定量的葡萄糖后，间隔一定时间测定血糖和尿糖，观察血液葡萄糖水平及有无尿糖出现，称为耐糖试验。若因内分泌功能失调等因素引起糖代谢失常时，食入一定量的葡萄糖后，血糖浓度可急剧升高，而且短时间内不能恢复到原来的浓度水平，称为糖耐量失常。临床上对症状不明显的患者，可采用口服葡萄糖耐量试验来判断有无糖代谢异常。 葡萄糖耐量试验的方法如下： 1．做OGTT试验前3天，停止胰岛素治疗，可正常饮食，每天饮食中碳水化合物含量不应低于150克（但要控制在250～300克范围），并且维持正常活动。 2．次日晨空腹抽取血液2ml，抗凝，测定血浆葡萄糖，此为空腹血糖。 3．在5分钟之内饮入300毫升含75克葡萄糖的糖水（对于儿童则中按每千克体重给1.75克葡萄糖，计算口服葡萄糖用量，直至达到75克葡萄糖时止），喝糖水后30分钟、1小时、2小时分别静脉取血一次，并留取尿液做尿糖定性试验。整个试验中不可吸烟、喝咖啡、喝茶或进食，应安静地坐在椅子上。 4．测定血糖浓度，并绘制耐糖曲线：将各次所测得的血糖浓度与对应 结果分析 （1）正常糖耐量：空腹血糖<6.1mmol/L（110mg/dl）；口服葡萄糖30min～60min达高峰，峰值<11.1mmol/L（200mg/dl）；120min时基本恢复到正常

水平，即<7.8mmol/L（140mg/dl），尿糖均为（一）。此种糖耐量曲线说明机体糖负荷的能力好。 （2）糖尿病性糖耐量：空腹血糖≥7.0mmol/L（126mg/dl）；峰时后延，常在1小时后出现，峰值≥11.1mmol/L（200mg/dl）；120min不能回复到正常水平，即>7.8mmol/L（140mg/dl）其中服糖后2h的血糖水平是最重要的判断指标。许多早期糖尿病病人，可只表现为2小时血糖水平的升高，且尿糖常为阳性。 糖尿病人如合并肥胖、妊娠、甲状腺功能亢进，使用糖皮质醇激素治疗或甾体避孕药时，可使糖耐量减低加重。 （3）糖耐量受损（IGT）：此为轻度的耐糖能力下降。在非妊娠的成年人，空腹血糖在6.11～7.Ommol/L（110～126mg/dl），120min血糖水平在7.8～11.1mmol/L（140～200mg/dl）之间。IGT病人长期随诊，最终约有1/3的人能恢复正常，1/3的人仍为糖耐量受损，1/3的人最终转为糖尿病。而且这些病人不易发生糖尿病所特有的微血管病变，如视网膜或肾小球的微血管病变，出现失明或肾病，而容易发生小血管合并症，如冠状动脉或脑血管病（冠心病或脑卒中）。 （4）其他糖耐量异常 1）平坦型耐糖曲线：其曲线特征是：①空腹血糖水平正常；②糖负荷后不见血糖以正常形式升高。不出现血糖高峰，曲线低平；③较短时间内（一般1小时内）血糖即可恢复原值。可由于胃排空延迟，小肠吸收不良引起。或脑垂体、肾上腺皮质功能减退、甲状腺功能减退及胰岛素分泌过多等引起。此时由于糖异生作用降低，组织对糖的氧化利用加强而表现为糖耐量增加。 2）储存延迟型耐糖曲线：特点是服糖后血糖水平急剧升高，峰值出现早，且超过11.1mmol/L，而2h值又低于空腹水平。这是由于胃切除病人于肠道迅速吸收葡萄糖或严重肝损害的病人肝脏不能迅速摄取和处理葡萄糖而使血糖升高，引起反应性胰岛素分泌增多，进一步致肝外组织利用葡萄糖加快，使2h血糖明显降低。 结果判断 服葡萄糖后各时限血糖或空腹血糖、高峰值与2小时血糖值大于相应年龄的正常上限者可诊断为糖尿病。如一点或一点以上血糖值超过正常上限，而未达到糖尿病标准，则为糖耐量异常。各时限血糖均在正常上限内，属正常。 临床意义 1．OGTT对隐性糖尿病诊断有帮助，在实际应用中亦可简化OGTT，即只取空腹和服糖后2小时标本测定血糖值，一般认为2小时值是关键性的。

NAG N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测试剂盒(速率法)

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测试剂盒（速率法）说明书 【产品名称】通用名称：N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测试剂盒（速率法） 英文名称： N-acetyl-β-D-glucosaminidase Assay Kit （NAG ） 【包装规格】R 1：2?40ml R 2：2?10ml 、R 1：2?60ml R 2：2?15ml 、R 1：2?20ml R 2：2?5ml ，校准 品（选配）：1?1ml 、质控品（选配）：1?1ml 。 【预期用途】用于临床实验体外定量分析人尿液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的活力。临床上主要用于辅助评价肾小管损害。 【检验原理】采用6-甲基-2-巯基吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷（MPT-NAG ）为基质。此基质在样品中的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG ）的作用下，分解生成6-甲基-2-巯基吡啶（MPT ）。通过测定MPT 在340nm 处吸光度的增加速度可求得NAG 的活力。 NAG MPT-NAG+ H 2 O MPT+ N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖（NAG 糖苷） 【主要组成成份】由试剂R 1、试剂R 2和校准品、质控品组成。试剂R 1：磷酸氢二钠缓冲液；试剂R 2：磷酸氢二钠缓冲液，6-甲基-2-巯基吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷（MPT-NAG ）。校准品:N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（ NAG ）、磷酸氢二钠；质控品：磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 注：校准品浓度具体见每批瓶标签，校准品可溯源至Roche 参考品；质控品浓度具有批特异性，见瓶标签；不同批号试剂盒中各组分不可以互换。 【储存条件及有效期】试剂和校准品、质控品在2℃～8℃无腐蚀性气体中避光储存，若无污染，可稳定至失效期，有效期为365天。试剂开瓶后2℃～8℃可稳定15天。质控品复溶后在2～8℃条件下可稳定1周。 【适用仪器】日立7170、奥林巴斯AU640、贝克曼LX-20全自动生化分析仪。 【样本要求】 1、新鲜随机尿液。 2、如尿液标本不能及时测定，4℃冷藏不应超过7天，避免冷冻。有菌尿时（如泌尿系统感染），应及时检测，避免细菌繁殖，影响测定值。 3、当样品中的抗坏血酸、葡萄糖、血红蛋白超过一定浓度时影响NAG 的测定。 4、样品应在低温条件下运输保存， 【检验方法】 （1）双试剂无需配制，直接使用。 （2）试验条件：样本（S ）：15 μl 试剂1(R 1) ：200 μl 试剂2（R 2）：50 μl 温度：37 ℃ 测定类型：速率法 主波长：340 nm 副波长：700 nm 反应方向：上升 方法：先将样本与R 1混合，37 ℃5分钟后加入R 2试剂，然后测定加入R 2后3分钟至5分钟之△A/min 。 测定空白吸光度（A 1） 测定反应吸光度（A 2） 0 5 8 10 （反应时间：10min ） 37℃ R 12（3）校准程序：使用校准品进行校准，每次更换试剂批次时都应进行校准。校准后，各实验室要用质 控品验证。如果质控结果不在可接受范围值内，则需要进行重新校准。 （4）质量控制程序：选用适当的质控品进行质量控制。各实验室建立各自的质控频率和可接受范围值。 当测定结果超出可接受范围时，有必要采取相应措施。 （5）计算 （A 2 - A 1）样品

血清中葡萄糖含量检测的方法研究进展

血清中葡萄糖含量检测的方法研究进展 【摘要】血清葡萄糖含量是临床生化检验中重要的指标，其的准确测定对糖尿病等疾病的诊断、治疗都有重大意义。本文介绍了近几年血清中葡萄糖含量检测的主要方法以及这些方法的一些研究结果。 【关键词】血清；葡萄糖；检测方法 血清中葡萄糖是人体内各组织细胞活动所需的物质。人体内的血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。正常人在空腹血糖浓度为3.9～6.0mmol/L。空腹血糖浓度超过6.0mmol/L称为高血糖而血糖浓度低于3.9mmol/L 称为低血糖。血清中葡萄糖是临床生化检验中的重要指标，可以为糖尿病、高血压以及心脑血管系统等疾病的诊断、治疗用药、病情监测以及疾病预防等方面提供客观依据。因此，对其进行准确的测定具有极其重要的意义。 1血清中葡萄糖的主要检测方法 目前，血清中葡萄糖的检测方法主要有：葡萄糖氧化酶（GOD-POD）法、己糖激酶法（HK法）、葡萄糖脱氢酶法（GDH法）、气相色谱-同位素稀释质谱法（GC-IDMS法）以及无创血糖测量法等。下面就对以上方法进行简要的介绍。 1.1葡萄糖氧化酶（GOD-POD）法 葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，同时释放过氧化氢。过氧化物酶(peroxidase，POD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。通过测定吸光度就能计算出血液中葡萄糖的含量。 该法的优点有：操作简便，用血量少，成本低，多见于便携式血糖仪，是我国卫生部推荐的血糖测定的常规方法。但缺点是：过氧化酶的特异性较差，尿酸、维生素C、胆红素等可与色原性物质竞争过氧化氢而抑制反应，引起结果偏低。且该法线性范围较窄（0.1~20.0mmol/L）。同时，葡萄糖氧化酶对β-D-葡萄糖高度敏感，而新配制的葡萄糖标准溶液主要为α-D-葡萄糖，为使检测结果准确，需静置溶液2h以上（最好过夜）待其完全转化为β-D-葡萄糖再使用。 1.2己糖激酶法（HK法） 己糖激酶是六碳糖的磷酸化酶，可催化使葡萄糖从稳定状态变为活跃状态，使葡萄糖和ATP发生磷酸化反应，生成葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)与ADP。前者在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)催化下脱氢，生成6-磷酸葡萄糖酸(6-GP)，同时使NADP还原成NADPH。反应式如下： 葡萄糖+ATP■G-6-P+ADP G-6-P+NADP+■6-GP+NADPH+H+ 根据反应方程式，NADPH的生成速率与葡萄糖浓度呈正比，在波长340nm 监测吸光度升高速率，可计算出血清中葡萄糖浓度。 该法的优点有：对含有轻度溶血、脂血、黄疸、维生素C、氟化钠、肝素、EDTA和草酸盐等的样本也能够进行准确的测定，因此该法多见于自动生化分析仪，是目前国际上公认的血糖测定参考方法。但缺点是：从红细胞中释放出的有机磷酸酯和一些酶会消耗NADP，因此会使结果产生偏差。 1.3葡萄糖脱氢酶法（GDH法） 葡萄糖脱氢酶是一种以NAD+或NADP+为受体、作用于供体CH-OH基团