细胞工程复习题
细胞工程复习题
1、说出五种以上细胞转染外源基因的途径
物理方法：电穿孔法；显微注射法；裸露DNA直接注射法
化学方法：DEAE-葡聚糖法；磷酸钙-DNA共沉淀法；脂质体载体包埋法
2、细胞重组的类型主要有
脂质体育完整细胞重组形成胞质杂种
微细胞与完整细胞重组形成微细胞异核体
胞质体与合体重新组合形成重组细胞
3、细胞破碎方法有
超声波破碎法；反复冻融法；化学裂解法；组织捣碎法
4、细胞核移植根据核移植的对象不同可分为?
胚胎细胞核移植，体细胞核移植等，胚胎干细胞核移植，胎儿成纤维细胞核移植5、多倍体育种的技术方法有
生物学方法：胚乳培养，体细胞杂交
物理学方法：温度休克法，机械创伤，电离辐射，离心，水静压法，高盐高碱法化学方法：细胞松弛素B，秋水仙素，聚乙二醇
6、多倍体倍性鉴定的方法有
核体积测量法，DNA含量测定，染色体计数法
7、染色体分离方法有
流式细胞分类器法（染料对A-T喝G-C特异性染色）
8、人工诱导单倍体的方法有
远缘杂交，延迟授粉，核置换，射线照射，花药培养
9、染色体转移技术包括
微细胞介导的基因转移法；染色体介导转移法；细胞核融合转移法
10、胚胎干细胞的鉴定方法
碱性磷酸酶（AKP）活性：未分化则活性很高
特异性表面抗原（SSEA-1）免疫荧光标记
11、获得原生质体的方法有
机械阀；酶解法（琼脂酶，果胶酶，纤维素酶）
12、原生质体活力的鉴定方法有
染色法；胞质环流法；渗透压变化；氧电极法
13、体外培养的动物细胞按其生长特性可分为
贴附型细胞；非贴附型细胞
14、贴附型细胞分为
成纤维细胞型细胞；上皮型细胞；游走型细胞；多形型细胞
15、按培养系统不同，植物细胞培养可分为
悬浮培养；液体培养；固体培养；固定化培养
16、细胞保存方法有
继代培养保存法；低温保存法；冰冻保存
17、植物细胞的两相培养技术的优点是
促进细胞内部产物分泌，增加次生代谢产物的产量，有利于产物的分离提取
18、植物细胞的固定化培养技术的优点是
①细胞生长较缓慢，利于次生代谢产物的积累
②易于控制化学环境、收获此生代谢产物
③细胞经包埋后使所受剪切力损伤减少
④有利于进行连续培养和生物转化
19、植物细胞与组织培养的培养基的组成包括
无机盐类，碳源，植物生长激素，有机氮源，有机酸，复合物质
20、胚状体的类型有
体细胞胚：二倍体胚
生殖细胞胚：单倍体胚
三倍体胚
21、常用的植物激素种类有
生长素类、细胞分裂素类、赤霉素类、乙烯和脱落酸
22、影响植物组织培养的因素有
温度；光照；湿度；渗透压；PH值；氧气
23、植物细胞工程实验室的组成包括
洗涤室；灭菌室；配制室；无菌操作室；培养室；鉴定室；驯化移植室
24、无菌操作的灭菌方法有？各适用于？
①干热灭菌法：使用烘干箱，适用于各种洗净的玻璃器皿及器械的灭菌。
150摄氏度40min或120摄氏度120min。
②湿热灭菌法：高压蒸汽灭菌。适用于各种培养基、蒸馏水、各种器械、棉塞、包头纸等。一般压力1.2kg/cm2，20－30min。
③熏蒸灭菌法：用药物熏蒸，以达到灭菌目的。适用于接种室、培养室等的消毒灭菌。无培养材料时，2ml甲醛＋1g高锰酸钾/m3。有培养材料时，6ml乙二醛/ m3
④过滤灭菌法：细菌过滤器。适用于含高温、高压易失效或分解的化学物质的液体培养基。滤膜孔径：0.3－0.45微米范围。
⑤灼烧灭菌法：适用于接种过程中，器械、培养瓶口、包头纸等的灭菌。
⑥药剂灭菌法：适用于培养材料的表面消毒灭菌。
⑦照射灭菌法：用紫外线照射灭菌15－20min。适用于接种室空气、台面的灭菌，试管受精的花粉灭菌等。
25、从来源来分，干细胞可分为？从分化潜能来分，干细胞可分为？
根据分化潜能的大小分为：
单能干细胞：如表皮干细胞，表皮细胞
多能干细胞：造血干细胞，多种血细胞
全能干细胞：胚胎干细胞
按来源不同分为：
成体干细胞：造血干细胞、皮肤干细胞、生殖干细胞、神经干细胞等
胚胎干细胞（ES细胞）
26、诱导细胞融合的方法有？
①物理法；显微操作，电场刺激
②化学法；聚乙二醇PEG结合高PH，高钙离子法
③生物法：仙台病毒法
27、体细胞杂种的选择方法有？
28、转基因生物反应器的类型有？
微生物生物反应器；植物反应器；动物反应器
29、植物细胞培养按培养对象的不同，培养方法可分为
单细胞培养；单倍体培养；原生质体培养
30、植物细胞与组织培养的培养基的基本组成有哪些？
31、植物单细胞培养过程中，单细胞的制备方法有哪些？
机械法；酶解法；愈伤组织诱导法
32、培养细胞的保存方法有哪些？
培养细胞，特别是筛选得到的细胞株需要很好地保存。
①继代培养保存法：1－2周
②低温保存法：5－10摄氏度
③冷冻保存法：－20摄氏度
④液氮保存
33、干细胞分化潜能评价的具体方法有？
34、杂种细胞的筛选方法？
遗传互补筛选法；抗性互补筛选法；生长特性筛选法；物理特性筛选法；其他方法
名词解释
1、细胞重组（细胞拆合）
指从活细胞中分离出细胞器及其组分，然后再体外一定条件下将不同细胞来源细胞器及其组分进行重组，使其重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器的一种实验技术。
2、胞质体
是除去细胞核后由膜包裹的无核细胞
3、核体
与胞质分离得到的核，或是带有膜和一点点细胞质
4、微细胞
是指有一条或几条染色体，外有一薄层细胞质和一个完整质膜的核质体。
5、细胞核移植技术
是利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵内的精细技术。
6、胚胎工程：
胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。
7、胚胎移植技术：
是将良种雌性动物配种后的受精卵或早期胚胎取出，移植到同种的生理状态相同的其他雌性动物体内，使之继续发育成为新个体的技术。
8、胚胎分割：
是指借助显微操作技术或徒手操作方法，切割早期胚胎成2、4等多等分，再一直给受体母畜，从而制造同卵多仔后代的技术。
9、胚胎融合（胚胎嵌合）：
是将两枚或两枚以上的胚胎的部分或全部细胞融合在一起，使之发育成一个胚胎，然后移植到受体母畜体内让其继续发育形成一种嵌合体后代的技术。
10、染色体工程：
按人们的需要有计划的添加、消减或替换生物的染色体，从而达到定向改变遗传性和选育新品种的一种技术。
11、雌核发育：
俗称假受精，指精子虽然正常地钻入和激活卵子，但精子的细胞核并为参与卵秋的发育，精子在染色体中很快消失，胚胎的发育仅在母体遗传控制下进行的一种发育方式。
12、人工诱导雌核发育：
是指进过紫外线、X射线、γ射线等处理后的失活精子来“受精”，再在适当时间施以冷、热、高压等物理处理，以抑制第二极体的排出，使卵子发育为正常的二倍体动物。
13、细胞融合（又称体细胞杂交）：
是指不同来源的原生质体（除去细胞壁的细胞）相融合并使之分化再生，形成新物种或新品种的技术
14、组织工程：
就是组织的生产或再造，也就是通过应用正常有活性的组织细胞与生物材料相结合，在体外或体内构建组织和器官，以维持、修复、再生或改善损伤组织和器官功能，其最终用途是治疗临床组织与器官缺损。
15、细胞系：
原代培养物经过首次传代成功即为细胞系
16、细胞株：
是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群，在整个培养期间始终存在特殊性质或标志。
17、植物细胞的两相培养技术
指在培养体系中加入水溶性或脂溶性的有机物或者具有吸附作用的多聚化合物，使培养体系形成上、下两相，细胞在水相中生长，合成的次生代谢产物分泌出来后转移至有机相中。
18、植物细胞的固定化培养技术
指将游离的细胞包埋在多糖或多聚化合物制备成的网状支持物中，培养液呈流动状态进行无菌培养的一门技术。
19、脱分化
已分化的失去分化能力的细胞恢复分化能力，分化为其他类型的细胞的过程
20、愈伤组织：
是由外植体组织增生的细胞产生的一团不定型的疏散排列的薄壁细胞。
21、胚状体
在离体植物细胞、组织或器官培养过程中，由一个或一些体细胞，经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。
22、外植体：
是指植物组织培养中用来进行立体无菌培养的离体材料，可以是器官、组织、细胞核原生质体。
23、继代培养（传代培养）
是指愈伤组织在培养基上生长一段时间后，营养物枯竭，水分散失，并已经积累了一些代谢产物，此时需要将这些组织转移到新的培养基上，这种转移称为继代培养。
24、看护培养：
是指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，使其持续分离和增殖的一种培养方法
25、植物试管受精：
从花粉萌发到受精形成种子，从种子萌发到幼苗形成的整个过程，均在试管内完成，称植物的离体受精，或试管受精。
26、干细胞：
具有自我更新和分化潜能的细胞
27、人工种子：
就是最外面包裹一层有机薄膜的植物胚状体。
38、饲养层培养法：
是用处理过的无活性的或分裂很慢、不具备分裂代谢能力的细胞来饲养所需培养的细胞，使其分离和生长。
问答题
1、简述制备转基因动物技术路线
①获取外源目的基因
②外源目的基因导入生殖细胞或胚胎干细胞
③选择携带目的基因的细胞，选择体外培养系统和宿主动物
④转基因胚胎的发育和鉴定
⑤筛选所得的转基因动物
2、简述核移植的生物学意义
3、胚胎工程的重要意义
①发挥优良母畜的繁殖能力
②促进家畜改良的速度
③作为胚胎操作的基础
④保持遗传资源
4、单倍体育种的意义
①可以克服杂种分离的困难，缩短杂交育种时间
②大大提高选育效率
③能克服原因杂交不孕性，创造出新物种
5、雌核发育的意义
①雌核发育为生产单性别种群提供了可能。
②雌核发育除能产生单性别群体外，还能迅速的产生同源型二倍体。
③在人工诱导雌核发育过程中，由于精子染色体失活的处理，往往会导致基因突变，因此雌核发育有可能为遗传学研究提供某些致死突变种的生物品种，成为个体发育研究和遗传育种实践的好材料。
④在农牧渔业生产中，通过雌核发育引入单性雌体子代，是一种具有实际应用价值的人工控制性别的繁殖方法，由此产生的雌核发育后代，可被用来筛选某些性状，从而获得优质高产品系。
⑤此外，通过雌核发育的研究有助于解决一系列遗传理论上的重要问题。
6、简述组织工程研究内容
①种子细胞研究（干细胞）
②细胞外基质的研究（生物材料）
③组织器官的构建
④组织工程的临床应用：血管组织工程（心脏搭桥手术），骨组织工程，心肌组织工程，皮肤组织工程
7、比较胚胎干细胞和成体干细胞
成体干细胞：造血干细胞、皮肤干细胞、生殖干细胞、神经干细胞等
胚胎干细胞（ES细胞）：干细胞培养可以实现组织修复与再生。
胚胎干细胞是全能干细胞，它可以分裂分化成所有种类和功能的细胞。成体干细胞是多能干细胞或单能干细胞，即它分化的方向是有限的，如骨髓干细胞只能分化成
血细胞而不能分化成为肌肉细胞等等。
胚胎干细胞优势：分化方向多，全能性好，可用于研究发育、分化等。不足：不容易得到某一种细胞（如只想得到血细胞是很困难的）
成体干细胞优势：可以特异性的得到某一种细胞而不需要特别的条件。不足：不是全能性的细胞，很难控制其发育成其他种类的细胞
8、图示动物细胞原代培养中的组织块培养和组织消化培养
9、植物细胞培养的意义
①建立单细胞无性系
②对培养的单细胞进行人工诱发突变是育种的一条新途径
③是良好的遗传转化受体
④离体培养的高等植物细胞具有合成并积累次生代谢产物的潜力。通过植物细胞的大规模培养生产植物产品是工业化生产植物产品的一条有效途径
10、培养基各组成成分母液的配制有何作用？
1、培养基的种类
(1)MS培养基
1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要。与其它培养基的基本成分相比，MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高，这是它的明显特点。广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好。
(2)B5培养基
是1968年由Gamborg等为培养大豆根细胞而设计的。其主要特点是含有较低的铵，这可能对不少培养物的生长有抑制作用。从实践得知有些植物在该培养基上生长更适宜，如双子叶植物特别是木本植物。
(3)White培养基
是1943年由White为培养番茄根尖而设计的。1963年又作了改良，称作White 改良培养基，提高了MgSO4的浓度和增加了硼素。其特点是无机盐数量较低，适于
生根培养。
(4)N6培养基
是1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。
无机营养对于植物的细胞与组织培养意义重大，可组成结构物质，也可是具有生理活性的物质，如酶、辅酶以及作为酶的活化剂，参与活跃的新陈代谢。此外，在维持离子浓度平衡、胶体稳定、电荷平衡等电化学方面起着重要作用。当某些营养元素供应不足时，愈伤组织表现出一定的缺素症状。如缺氮不能形成导管；缺铁，细胞停止分裂；缺硫，表现出非常明显的褪绿；缺锰或钼，则影响细胞的伸长。
各组成成分的作用：
(1)碳水化合物
最常用的碳源是蔗糖，葡萄糖和果糖也是较好的碳源，可支持许多组织很好的生长。麦芽糖、半乳糖、甘露糖和乳糖在组织培养中也有应用。蔗糖使用浓度在2％-3％，但在胚培养时采用4％-15％的高浓度，因蔗糖对胚状体的发育起重要作用。不同糖类对生长的影响不同。不同植物不同组织的糖类需要量也不同，实验时要根据配方规定按量称取，不能任意取量。高压灭菌时一部分糖发生分解、制定配方时要给予考虑。
(2)维生素(vitamin)
主要有VB1(盐酸硫胺素)、VB6 (盐酸吡哆醇)、Vpp(烟酸)、VC(抗坏血酸)、有时还使用生物素、叶酸、VB2等。维生素对植物的细胞与组织培养具有重要作用，如VB6能促进根的生长，Vpp与植物代谢和胚的发育有一定关系，Vc有防止组织变褐的作用。
(3)肌醇
在糖类的相互转化中起重要作用。适当使用肌醇，能促进愈伤组织的生长以及胚状体和芽的形成。对组织和细胞的繁殖、分化有促进作用，对细胞壁的形成也有作用。
(4)氨基酸
是很好的有机氮源，可直接被细胞吸收利用。培养基中最常用的氨基酸是甘氨酸，其他的如精氨酸、谷氨酸、谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等也常用。有时应用水解乳蛋白或水解酪蛋白，它们是牛乳用酶法等加工的水解产物，是含有约20种氨基酸的混合物，用量在10-1000mg／L之间。由于它们营养丰富，极易引起污染。如在培养中无特别需要，以不用为宜。
(1)天然复合物
成分比较复杂，大多含氨基酸、激素、酶等一些复杂化合物。对细胞和组织的增殖与分化有明显的促进作用，但对器官的分化作用不明显。成分大多不清楚，所以一般应尽量避免使用。如椰乳、马铃薯汁、酵母提取液、苹果和番茄的果汁、黄瓜的果实、未熟玉米的胚乳等。
（2）琼脂糖
改善细胞的供氧状况，用于液体培养。
（3）琼脂
在固体培养时琼脂是最好的固化剂。琼脂的用量在6-10g／L之间，若浓度太高，培养基就会变得很硬，营养物质难以扩散到培养的组织中去。若浓度过低，凝固性不好。
（4）抗生物质类
抗生物质有青霉素、链霉素、庆大霉素等，用量在5-20mg／L之间。添加抗生物质可防止菌类污染，减少培养中材料的损失。
（5）抗氧化物
防止褐变。如PVP，Vc，活性炭等
11、植物组织培养再生植株的途径有哪些？
12、植物离体受精有何重要意义？
概念：从花粉萌发到受精形成种子，从种子萌发到幼苗形成的整个过程，均在试管内完成，称植物的离体受精，或试管受精。
意义：克服植物受精不育障碍，特别是克服花粉在柱头上不萌发或萌发后花粉管不能伸入花柱，或在花柱中生长缓慢，使配子不能如期融合的障碍有着极其重要的意义。对于植物的远源杂交有着重要意义。
13、什么是人工种子，研制人工种子的意义何在？
概念：最外面包裹一层有机薄膜的植物胚状体，具有人工胚乳，可以发育成正常完整的植株。
意义：
①不受季节限制，大量、快速繁殖性状优良、遗传性稳定的植物种和品种。
②大量繁殖无病毒材料，以提高植物抗性、产量和商品品质。
③对于生育周期长的多年生植物，育性不良的、难以有性繁殖的植物可用人工种子技术进行繁殖。
④遗传性不稳定的杂种一代无需等待稳定，可用人工种子技术繁殖直接用于生产。
⑤体积小，储藏运输方便。
⑥类似天然种子，可机械化播种。
14、为什么说动植物细胞与组织培养是细胞工程其它各项技术顺利应用的基础。（举例说明）
细胞与组织培养技术是细胞工程的最基本技术，细胞融合、细胞核移植、染色体工程、转基因工程、胚胎工程等细胞工程技术都离不开细胞或组织培养，近年来发展起来的组织工程和生物反应器就是在细胞和组织培养技术上直接发展起来的。
16、设计一个实验方案，用3种细胞工程技术培育水稻（或其它动植物）新品种。
17、比较体细胞克隆动物与胚胎细胞克隆动物。
18、“辉夜姬”是世界上第一只由两只雌性老鼠提供的生殖细胞产生的老鼠，试述其产生过程的主要技术路线，并说明该过程应用了哪些细胞工程技术。
19、体细胞克隆动物技术的重要意义，以“多莉”羊为例，简述体细胞克隆动物的技术路线。
重要意义：
体细胞克隆非常重要，因为性细胞或胚胎细胞的形成都有时间限制、有数量限制；性细胞的形成要通过一个减数分裂过程，在这—过程中，遗传信息要发生分离和自由组合，从而造成每个性细胞中的遗传信息不尽相同，如果直接用性细胞进行克隆工作，就会造成每个克隆个体都不相同。
一个优良的个体，它的体细胞数量巨大，而且还可以利用细胞培养的方法进行离体的体细胞培养。因此，动物体细胞的获得不会受到时间和数量的限制。最重要的是同一个个体的所有体细胞都具有同样的遗传信息。
如果用体细胞来直接繁殖后代，不仅可以保证每个克隆个体具有相同的优良性状，而且可以使“复制”出的个体数量巨大。尽管动物体细胞的全能性已经丧失，但是科学家们仍然孜孜不倦寻求全能性恢复的条件，并且最终获得了成功。
动物体细胞克隆可以复制出的数量巨大的优良个体，因此动物克隆技术可以首先应用于畜牧业育种上；其次，如果将个体克隆技术用于能够生产特殊医药蛋白的转基因动物，将会产生巨大的经济效益；在理论上直接利用个体克隆技术可以研究细胞发育过程中不同基因的表达规律和调节控制机理，这将对细胞发育生物学的发展产生重要的影响；建立起稳定的动物模型，利于研究人类疾病的发病机理，揭示基因结构和功能间的关系，揭示生命的本质；利用动物克隆技术可以获得足够量的动物器官用于人类器官移植，而不必再利用人的器官，这将拯救许多人的生命；动物克隆技术还可用于延缓珍稀濒危动物的灭绝。
技术路线：
母羊A----取乳腺细胞---取出细胞核
母羊B----取卵细胞----去核留胞质体
再核质重组---体外培养----卵细胞移植到受体母羊C---胚胎正常发育----A羊的复制品多利
20、比较单倍体育种与人工诱发雌、雄核发育。
21、试述制备单克隆抗体的技术路线。
抗原制备——免疫动物；—免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备——细胞融合——杂交瘤细胞的选择培养——杂交瘤细胞的筛选——杂交瘤细胞的克隆化——单克隆抗体的检定——分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立——单克隆抗体的大量制备。
22、试述植物组织培养的重要应用。
①植物快速无性系繁殖：
利用离体培养技术，将来自优良植株的茎尖、腋芽叶片等器官、组织和细胞进行离体培养，在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法。其不受季节限制，用才少，速度快，周期短，繁殖系数高，可保持原来品种的特性
②扩大繁殖珍稀植物资源和育种原始材料（如：果树的芽变）；扩大繁殖难于繁殖的植物（如：兰花，郁金香，百合等）；工业化生产试管苗。
③获得无病毒植株
④选育新品种：如用花药培养单倍体植株；用原生质体进行体细胞杂交和基因转移；用子房、胚和胚珠完成胚的试管发育和试管受精；以及种质资源的保存等利用组织培养可以进行突变体的筛选
⑤在遗传、生理生化和病理等研究上的应用
⑥种质资源的保存。种质保存:利用天然或人工创造的适宜环境，使个体中所含有的遗传物质保持其遗传完整性，高活力，能通过繁殖将遗传物质传递下去。
细胞工程复习题
第二章 2、简要说明MS培养基的基本组成。 1）大量元素母液配制 MS培养基的大量元素主要包括硝酸铵（NH4NO3）、硝酸钾(KNO3)、磷酸二氢钾（KH2PO4）、硫酸镁（MgSO4?7H2O）和氯化钾（CaCl2,CaCl2?2H2O）五种化合物。 2）微量元素母液配制 MS培养基的微量元素由7种化合物（除Fe外）组成MnSO4?4H2O、ZnSO4?7H2O、H3BO3、KI、NaMoO4?2H2O、CuSO4?5H2O、CoCl2?6H2O。 3）铁盐母液配制 MS培养基中的铁盐是硫酸亚铁（FeSO4?4H2O）和乙二胺四乙酸二钠（Na2?EDTA）的螯合物，必须单独配成母液。 4）有机母液的配制 MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、烟酸硫胺素和盐酸吡哆素。 5）激素母液配制 MS培养基中的激素有生长素类、细胞分裂素 6、初代培养时，接种的一般程序是什么？ 1）在接种前打开超净工作台紫外灯照射20~30min，关闭紫外灯后，打开超净工作台的风机10min以上，开始无菌操作。 2）接种人员先洗净，在缓冲室内换好经过消毒的工作服，带上口罩，并换上拖鞋等。 3）上超净工作台后，用酒精棉球认真擦拭双手，特别是指甲处，然后擦拭工作台面及四周，装有培养基的培养器皿和盛外植体的烧杯也要用酒精擦拭消毒后，再放进工作台。 4）先用酒精棉球擦拭接种工具，然后在酒精灯火焰上进行灼烧灭菌或放在接种器械灭菌器中灭菌，灭菌后放在器械架上使其自然冷却。 5）把植物材料放在75%乙醇中浸泡约30s，再用0.1%的升汞中浸泡5~10min，浸泡时刻进行搅动，使植物材料与消毒剂有良好的接触，然后用无菌水冲洗3~5次。 6）接种时培养瓶瓶口要在酒精灯火焰附近，并在接种前后灼烧瓶口。 7）接种结束后，清理和关闭超净工作台。 第三章 1.基本概念 细胞的全能性：是指细胞具有发育成完整个体的遗传潜能。 细胞分化：是指发育起始状态的合子沿个体发育方向不断分化出形态结构、生理功能不同的细胞、组织、器官而最终形成完整植株的过程。即由于细胞的分工而导致其结构和功能改变或发育方式改变的过程。 去分化：已有特定结构和功能的植物组织，在一定的条件下，其细胞被诱导改变原有的发育途径，逐步失去原有的分化状态，转变为具有分生能力的胚性细胞的过程叫脱分化或去分化。体细胞胚： (somatic embry)又称胚状体，是指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。 人工种子：（artificial seeds）又称合成种子（synthetic seeds）或体细胞种子（somatic seeds）。就是将离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。 7、离体培养条件下，茎、芽和根的再生方式有几种？ 答:在组织培养中，通过茎芽和根而再生植株的方式大致有3种：
细胞工程试题及答案
专题2细胞工程 一、选择题 1.运用下列各种细胞工程技术培育生物新品种,操作过程中能形成愈伤组织的是( )。 ①植物组织培养②植物体细胞杂交③动物细胞培养 ④转基因植物的培育 A.①②③ B.①②④ C.①③④ D.①②③④ 2.生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下较易成功“复生”野驴的方法是( )。 A.将野驴的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分化、再分化,培育成新个体 B.将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个体 C.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中,经孕育培育成新个体 D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中,培育成新个体 3.下列关于细胞工程的叙述,错误的是( )。 A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D.某种植物甲、乙两品种的体细胞杂种与甲、乙两品种杂交后代的染色体数目相同 4.用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织,下列叙述错误的是( )。 A.该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的 B.该愈伤组织的细胞没有全能性 C.该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成的 D.该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构 5.名为“我的皮肤”的生物活性绷带自从在英国诞生后,给皮肤烧伤病人带来了福音。该活性绷带的原理是先采集一些细胞样本,再让其在特殊的膜片上增殖。5~7天后,将膜片敷在患者的伤口上,膜片会将细胞逐渐“释放”到伤口,并促进新生皮肤层生长,达到加速伤口愈合的目的。下列有关叙述中,不正确的是( )。 A.“我的皮肤”的获得技术属于动物细胞工程 B.人的皮肤烧伤后会因人体第二道防线的破坏而导致免疫力下降 C.种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人 D.膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口,加速患者自身皮肤愈合与细胞膜上的糖蛋白有关 6.既可用于DNA重组技术又可用于细胞融合技术的是( )。 A.病毒 B.纤维素酶 C.聚乙二醇 D.质粒 7.培育农作物新品种的过程中,常利用植物组织培养技术。下列叙述正确的是( )。 A.培育转基因的外植体得到的新个体属于基因突变个体 B.在植物组织培养过程中用理化因素诱导可获得大量有益突变体 C.单倍体育种中经减数分裂和组织培养两个过程能获得纯合二倍体 D.植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性 8.下列与细胞工程技术相关的表述中,不正确的是( )。 A.植物体细胞杂交技术可以克服常规的远缘杂交不亲和障碍 B.动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分基本相同 C.动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同 D.植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性 9.经植物组织培养技术培养出来的植物一般很少有植物病毒危害,其原因在于( )。 A.在组织培养过程中经过了脱分化和再分化,进行的是快速分裂和分化
(完整版)细胞工程练习题(附答案)
细胞工程练习题 一．选择题 1. 在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件 是不需要的 A．消毒灭菌B．适宜的温度C．充足的光照D．适宜的养料和激素 2. (08江苏生物)下列关于植物组织培养的叙述中，错误 ．．的是 A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织 D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同3．下列选项中能正确说明生物工程技术的是（） A．植物组织培养是指离体的植物器官或细胞进行脱分化形成新个体 B．动物克隆的技术的基础是动物的细胞培养 C．人工诱变、细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造 D．动物细胞融合技术目前的用途是培养具有双亲优良性状的经济动物 4．下图是“白菜 —甘蓝”杂种植 株的培育过程。 下列说法正确的 是 A．所得到的“白菜—甘蓝”植株不能结籽 B．愈伤组织是已高度分化的细胞 C．上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程 D．诱导原生质体融合时可用聚乙二醇 5．下面是将四倍体兰花的叶片通过植物组织培养形成植株的示意图，相关叙述中正确的是 A．②阶段会发生减数分裂过程B．①阶段需生长素而③阶段需细胞分裂素C．此过程体现植物细胞具有全能性D．此兰花的花药离体培养所得植株为二倍体6．右图为将胡萝卜的离体组织在一定条 件下培育形成试管苗的过程示意图。 有关叙述正确的是 A. 利用此过程获得的试管苗可能为杂合子 B．①②过程中都会发生细胞的增殖和分化 C. 多倍体植株的培育需经过如图所示过程 D．此过程依据的生物学原理是细胞膜具有流动性 7. 各项培育植物新品种的过程中，不经过愈伤组织阶段的是 A．通过植物体细胞杂交培育白菜——甘蓝杂种植株 B．通过多倍体育种培育无子西瓜 C．通过单倍体育种培育优质小麦 D．通过基因工程培育转基因抗虫水稻 8. （09浙江卷）用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 A．都需用CO2培养箱B．都须用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行D．都可体现细胞的全能性D．植物体细胞杂交过程中，需用不同浓度的细胞分裂素和生长素培养杂种体细胞 9. 动物细胞培养必需条件的是 A.无菌、无毒的环境 B.适宜的温度和pH C.O2等气体环境 D.适宜的光照条件 10. 物的肝肿瘤细胞进行细胞培养。下列说法错误的是 A．在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 B．细胞培养应在含5％CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 C．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素D．在合成培养基中，通常需加入血清、血浆等天然成分 11. (08上海生物)制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括 ①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植 A．①②B．①③C．②③D．③④12. 能有效打破物种界限，定向改造生物的遗传性状，培育新的优良品种的生物技术是A.基因工程技术B．诱变育种技术C．杂交育种技术D．组织培养技术13. 某小鼠生活过程中被多种病原体感染过，科学家却能够以该小鼠为实验材料， 通过细胞工程技术获得抗某种病原体的高纯度单克隆抗体，这是因为 A．小鼠体内只有一种抗体B．小鼠体内只有一种B淋巴细胞 C．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后只产生一种杂交瘤细胞 D．可以通过克隆培养法和抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞14. (08理综Ⅰ)下列关于细胞工程的叙述，错误 ．．的是 A．电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 ③ ② ① 四倍体兰花叶片愈伤组织胚状体植株
细胞工程复习题
细胞工程复习题 一、名词解释（每小题3分，共21分）1．酶工程： 2．继代培养 3．人工种子： 4．单倍体培养： 5．微细胞： 6．胚胎工程： 7．克隆： 8．蛋白质工程： 9．外植体： 10．动物细胞与组织培养： 11．组织工程： 12．雌核发育： 13．胚胎融合： 14．转基因动物： 15．生物化学工程： 16．愈伤组织： 17．看护培养： 18．细胞固定化： 19．染色体工程 20．细胞重组： 21．基因工程技术： 二、简答题 1．细胞工程的重要应用体现在哪些方面
2．何为植物细胞两相培养技术建立植物细胞的两相培养系统必须满足的条件是什么 3．动物细胞体外培养有哪些特点 4．动物器官培养技术中，传统的器官培养方法主要有哪些 5．什么是细胞核移植技术以鱼类细胞核移植为例，其技术要点有哪些方面6．植物组织培养与植物细胞培养有什么区别 7．何为细胞悬浮培养怎样做到悬浮培养细胞的同步化 8．动物细胞生物反应器培养生产的生物制品主要有哪些种类 9．什么是试管动物试管动物技术主要包括哪几个主要技术环节 10．何为体细胞克隆技术多莉羊是怎样培育出的 11．芦荟组织培养快速繁殖中，通过哪些途径可以得到完整的植株 12．人工种子利用有何优势 13．用于动物细胞与组织培养的生物反应器应具备哪些基本要求
14．何为胚胎移植主要包括哪些关键技术 15．转基因动物技术的应用主要体现在哪几个方面 三、论述题 1．请阐述单克隆抗体的制备过程 2．植物组织培养技术主要包括哪些环节各环节的主要工作内容有哪些 3．请阐述原生质的分离，纯化和活力鉴定的技术过程 四、计算题 μ和ppm浓度各是什么1．有一培养基的IAA浓度是1.5/ mg L，问其/ mol L （分子量） 2．培养基的配方是 2.0/0.5/ +++水解酪蛋白 MS BA mg L NAA mg L 500mg/L+3%蔗糖+%琼脂粉。MS母液的浓度分别是：大量元素10倍，微量元素100倍，铁盐100倍，有机物100倍；BA母液浓度ml，NAA母液浓度ml。要配制800ml 该培养基，需要吸取各种母液各多少ml分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克 3．要配制1mol/L的 NaOH100ml, 要称取98%的固体NaOH多少克要配制1mol/L的HCl1000 ml,要量取浓HCl多少ml（NaOH分子量40，HCl分子量，浓HCl含量38%，比重） 五、填空题 1．生物工程操作的对象是什么这是与化学工程等其他工程类学科最明显的不同
基因工程和细胞工程测试题(附答案,可用于考试)
5 高二生物《基因工程和细胞工程》测试题姓名班级 （时间：90分钟分数：100分） 一．选择题（本大题包括25题，每题2分，共50分。每题只有一个选项符合题意。） 1．以下说法正确的是（） A.所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B．质粒是基因工程中惟一的运载体 C．运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 2．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不．相符的是（） A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C．植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性 D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂 3．有关基因工程的叙述正确的是（） A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可作运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 4．能克服远缘杂交障碍培育农作物新品种的技术是（） A.基因工程 B.组织培养 C.诱变育种 D.杂交育种 5．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( ) A．培养人的效应T细胞能产生单克隆抗体 B．培养人的B细胞能够无限地增殖 C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞 6．PCR技术扩增DNA,需要的条件是( ) ①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体 A、①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥ 7．以下对DNA的描述，错误的是（） A.人的正常T淋巴细胞中含有人体全部遗传信息 B.同种生物个体间DNA完全相同 C.DNA的基本功能是遗传信息的复制与表达 D.一个DNA分子可以控制多个性状 8. 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（） A.氨基酸结构 B.蛋白质空间结构 C.肽链结构 D.基因结构 9．细胞工程的发展所依赖的理论基础是（） A.DNA双螺旋结构模型的建立 B.遗传密码的确立及其通用性的发现 C.生物体细胞全能性的证明 D.遗传信息传递的“中心法则”的发现 10．下列不是基因工程中的目的基因的检测手段的是：（） A.分子杂交技术 B.抗原—抗体杂交 C.抗虫或抗病的接种 D.基因枪法 11．在以下4种细胞工程技术中，培育出的新个体中，体内遗传物质均来自一个亲本的是（） A.植物组织培养 B. 单克隆抗体 C. 植物体细胞杂交 D.细胞核移植 12．动物细胞融合与植物细胞融合相比特有的是（） A.基本原理相同 B.诱导融合的方法类 C.原生质体融合 D.可用灭活的病毒作诱导剂 13．下列哪一项属于克隆（） A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C．将鼠骨髓细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞
高中生物《细胞工程》练习题(含答案解析)
高中生物《细胞工程》练习题 题号一二三四总分 得分 一、单选题（本大题共19小题，共19.0分） 1.下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是（） A. 为了提供营养和调节渗透压，培养基中应添加蔗糖 B. 培养基中的生长素和细胞分裂素会影响愈伤组织的生长和分化 C. 器官、组织的细胞在离体的情况下通过再分化形成愈伤组织 D. 同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的植株的基因型可能不同 2.如图表示四倍体兰花叶片植物组织培养的过程，下列相关叙述正确的是（） A. 此兰花的花药离体培养所得植株为二倍体 B. ①阶段体现了细胞的全能性，②阶段需要细胞分裂素 C. ①阶段有细胞增殖，但无细胞分化 D. ②过程为脱分化，③过程为再分化 3.利用植物体细胞杂交技术将白菜和甘蓝(均为二倍体)培育成“白菜—甘蓝”杂种植株(如下图所 示)。下列说法正确的是（） A. 图示“白菜—甘蓝”植株不能结子 B. 植物体细胞杂交技术的目的是获得杂种细胞 C. 上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程 D. “白菜—甘蓝”杂种植株所具有的性状是基因选择性表达的结果 4.某植物的基因型为AaBB,通过下列技术可以分别将其转变为以下基因型的植物:①AABB ②aB ③AaBBC ④AAaaBBBB。则以下排列正确的是( )
A. 诱变育种、转基因技术、花药离体培养、细胞融合 B. 杂交育种、单倍体育种、基因拼接技术、多倍体育种 C. 花药离体培养、诱变育种、多倍体育种、转基国技术 D. 单倍体育种、花药离体培养、基因工程育种、多倍体育种 5.下面为利用玉米(2N=20)的幼苗芽尖细胞(基因型BbTt)进行实验的流程示意图。下列有关分析不 正确的是( ) A. 基因重组发生在图中②过程，过程③中能够在显微镜下看到染色单体的时期是前期和中期 B. 秋水仙素用于培育多倍体的原理是其能够抑制纺锤体的形成，着丝点不能分裂 C. 植株a为二倍体，植株c属于单倍体，其发育起点为配子 D. 利用幼苗2进行育种的最大优点是明显缩短育种年限，植株b纯合的概率为100% 6.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是（） A. 纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B. 植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C. 植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性 D. 紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂 7.下列关于植物组织培养和动物克隆的说法不正确的是（） A. 植物组织培养获得的试管苗，可能为杂合子，也可能为纯合子；可能为单倍体，也可能为二 倍体 B. 同一株绿色开花植物不同部位的细胞经组织培养获得的愈伤组织基因型一定相同 C. 动物克隆的技术基础是动物细胞培养 D. 为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素 8.芦笋是雌雄异株植物，雄株性染色体为XY，雌株为XX；其幼茎可食用，雄株产量高。以下为 两种培育雄株的技术路线。有关叙述正确的是（）
细胞工程复习题 (2)
《细胞工程》复习题 一、选择题： 1．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（Ｂ）A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同 C．操作过程中酶的作用相同 D．诱导融合的手段相同 2. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在 这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ C ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A．②④ B．①③⑤ C．①②③④ D．②③ 3．动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的有（ D ）
A．诱导融合的方法完全相同B．所用的技术手段完全相同 C．所采用的原理完全相同D．都能形成杂种细胞 4.单克隆抗体是指（ C ） A．单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体 B．单个B淋巴细胞增殖产生的抗体 C．单个杂交瘤细胞增殖产生的抗体 D．单个抗体通过克隆化，产生大量抗体 5.将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（多选） （AC ） A．B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 B．B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体 C．骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体 D．骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 6.要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖，形成细胞群。其原因是（ D ） A．在体外培养条件下B淋巴细胞可以无限增殖 B．在动物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体 C．每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应
. D．每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 7.关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（D ） A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断 B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产，不能体外生产 8. 以下不属于生长素的是(D) A IAA B NAA C 2,4- D D 6-BA 9.植物细胞有而动物细胞没有的结构是(D) A细胞质 B线粒体 C内质网 D叶绿体 10.拥有接触抑制的是(B) A原核细胞 B动物细胞 C植物细胞 D真核细胞 11.产生自胸腺的淋巴细胞是(A) A T淋巴细胞 B B淋巴细胞 C C淋 巴细胞 D G淋巴细胞
细胞工程学复习题
细胞工程学习题 1．诱导试管苗生根时，培养基的调整应 A．加大盐的浓度B．加活性炭 C．加大分裂素的浓度D．加大生长素的浓度 2．下列实验中可能获得三倍体植株的是 A．小麦的茎尖培养B．番茄花药培养 C．玉米胚乳培养D．玉米花粉培养 3．动物体内各种类型的细胞中，具有最高全能性的细胞是 A．体细胞B．生殖细胞C．受精卵D．干细胞 4．下列哪个是植物离体培养常用的主要糖类 A．葡萄糖B．果糖C．麦芽糖D．蔗糖 5．农杆菌介导的转化方法主要适用于 A．草本植物B．木本植物C．单子叶植物D．双子叶植物 6．原生质体纯化步骤大致有如下几步： ①将收集到的滤液离心，转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准，一般以500r／min离心15min。用吸管谨慎地吸去上清液。
②将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液相同)，再次离心，去上清液，如此重复三次。 ③将原生质体混合液经筛孔大小为40～100um的滤网过滤，以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质，收集滤液。 ④用培养基清洗一次，最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生质体的培养密度为104～106／ml。 正确的操作步骤是：（） A ①②③④B②③①④C③①②④D③②①④ 7．常用的细胞融合剂是 A．刀豆球蛋白B．聚乙二醇（PEG）C．细胞松弛素B D．脂质体 8．利用细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体过程中，HAT培养基用来进行 A．细胞融合B．杂交瘤选择C．检测抗体D．动物免疫 9．下列过程中，没有发生膜融合的是 A．植物体细胞杂交B．受精过程 C．氧进入细胞中的线粒体D．单克隆抗体的产生 10．科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生 大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的是 A．经过免疫的B细胞B．没经过免疫的T细胞
细胞工程 期末考试复习题目
细胞工程期末考试复习题目 细胞工程填空：20个ⅹ分=10分选择：10个ⅹ2分=20分名词：10个ⅹ6分=30分简答：5个ⅹ6分=30分论述: 1个ⅹ10分=10分第一章绪论1、细胞工程的定义及特点？细胞工程：是指主要以细胞为对象，应用生命科学的理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞，组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。细胞工程的特点：前沿性：现代生物技术的热点争议性：新技术给伦理道德带来的冲击综合性：多学科交叉应用性：工程类课程，重在产品与技术第二章细胞培养的设施与基本条件：1、什么是细胞及组织培养？组织工程：习惯上繁殖所有的体外培养，即器官培养，组织培养和细胞培养的总称。其本
意是指从活的机体中去取出器官、组织或细胞，模拟机体内生理条件，在体外建立无菌、室温和一定营养条件等，使之生长和生存，并维持其结构和功能能的技术称为组织培养。细胞培养：将组织块用机械方法或酶解法分离成单个细胞，做成细胞悬液，再培养于固体基质上，成单层细胞生长，活在培养液中呈悬浮转肽培养的技术称为细胞培养。2、了解细胞培养实验室的基本规划及相关注意事项？实验室规划：⑴准备室：培养用具清洗、消毒和做实验准备的场所，一般建在通风和光线充足的地方。⑵缓冲间：保护操作室的无菌环境，避免空气对流。 ⑶操作间：要求无菌。最好设在阴面，防止室温过高；天花板高度不超过2米，保证紫外线有效杀菌效应；门用拉门，避免空气流动。室内天花板、地板和四周墙壁要光滑无死角，要镶瓷砖或涂油漆，便于清洗与消毒，不易在墙角推挤灰尘。3、细胞培养的设备有
哪些？有何基本作用⑴超净工作台①最好安装在无尘室内，最好在无菌间，避免过多灰尘使滤器阻塞，降低净化效果，缩短使用寿命。②新安装的或长期未使用的工作台，工作前必须对工作台和其周围环境用真空吸尘器或不产生纤维的工具进行清洁工作，在采用药物灭菌法或紫外线灭菌法进行灭菌处理。③每次使用时，应先用75%酒精擦洗台面，并进行30~50min紫外线灭菌灯处理净化工作区内累积的微生物，在关闭紫外灯后，应启动送风机使之转运2min后在进行培养操作。④净化工作区内不应存放不必要的物品，以保持洁净气流不受干扰⑤高效过滤器3年更换一次。请专业人员操作，以保持密封良好。定期将粗过滤器中的过布拆下清洗。⑥每次使用净化台要即使清楚工作台面上的物品，并用酒精擦洗台面使之始终保持洁净。⑵CO2培养箱：①一定浓度的CO2生长，尤其是原代培养和单
高中生物细胞工程试题
阶段质量检测(二) 细胞工程 (时间:45分钟,满分:100分) 一、选择题(每小题3分,共45分) 1.下列生物工程技术中,不属于细胞工程得就是( ) A.通过试管动物大量繁殖优良动物 B.利用含有人胰岛素基因得大肠杆菌生产胰岛素 C.通过体细胞克隆技术培养出克隆羊 D.将某人得肝癌细胞在实验室中繁殖成一个细胞系 2.下列关于植物体细胞杂交技术得叙述,错误得就是( ) A.获得原生质体得过程需要用到纤维素酶与果胶酶 B.利用植物体细胞杂交可以获得某种多倍体植株 C.植物体细胞杂交过程就就是原生质体融合得过程 D.可根据细胞中染色体数目与形态得差异来鉴定杂种细胞 3.植物体细胞杂交制备原生质体与动物细胞培养配制一定浓度得细胞悬浮液,所需要得酶依次就是( ) A.淀粉酶与磷脂酶 B.纤维素酶与胰蛋白酶 C.脂肪酶与二肽酶 D.过氧化氢酶与半乳糖苷酶 4.下列有关单克隆抗体制备得叙述,正确得就是( ) A.先利用特定得抗原蛋白饲喂小鼠,再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞 B.为避免病毒感染,只能用聚乙二醇、电激等处理来诱导骨髓瘤细胞与已免疫得B淋巴细胞融合 C.体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清与抗生素 D.经过选择培养基初次筛选得杂交瘤细胞即可进行体内或体外培养 5.(全国高考)关于动物细胞培养与植物组织培养得叙述,错误得就是( ) A.动物细胞培养与植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养与植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C.烟草叶片离体培养能产生新个体,小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖 D.动物细胞培养可用于检测有毒物质,茎尖培养可用于植物脱除病毒 6.细胞工程中,选择合适得生物材料就是成功得关键。下列选择不合理得就是( ) A.选择高度分化得动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞 B.选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物得成功率 C.选择一定大小得植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗
专题2-细胞工程练习题(含答案解析)
第I卷（选择题） 1．利用植物组织培养技术将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，培育的过程中不需要 A. 导入外源基因 B.离体状态 C. 具有完整细胞核的细胞 D.一定的营养物质和激素 2．通过植物体细胞杂交可以获得“烟草—菠菜”——一种新型的烟草品种。下图为培育杂种植株过程的示意图,下列操作不是必需的是( ) A.在融合之前除去两种细胞的细胞壁 B.原生质体先进行脱分化处理再融合 C.原生质体融合后筛选杂种细胞继续培养 D.诱导杂种细胞形成愈伤组织再分化成植株 3．能克服远缘杂交不亲和技术的是( ) A．组织培养 B．细胞融合 C．动物胚胎移植 D．单倍体育种 4．下列有关现代生物科技的叙述中，错误的是（） A．植物体细胞杂交技术克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍 B．动物细胞融合技术开辟了制备单克隆抗体的新途径 C．利用基因工程技术可以使哺乳动物生产人类所需的药品 D．胚胎移植技术的优势是可以充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力 5．关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是 A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C.给予适宜的条件，有的植物可在愈伤组织的基础上直接发育出花器官 D.细胞培养产生出变异的新植株，为选择有益性状的新作物创造了条件 6．利用生物工程技术能够实现对良种种畜的快速大量繁殖，以下哪项技术不具备此优点？ A．基因工程技术 B．细胞核移植技术 C．胚胎分割技术 D．试管动物技术 7．在细胞工程——植物体细胞杂交中，需要将营养细胞的细胞壁除去，通常是采用纤维素酶和果胶酶的酶解破壁法处理。如将去掉了细胞壁的成熟植物细胞置于清水中，细胞将（） A．皱缩 B．胀破 C．呈球形 D．保持原状 8．在生物体内，细胞没有表现出全能性而是分化为不同的器官，其原因是 A. 细胞丧失了全能性 B. 不同细胞中遗传信息的执行情况不同 C. 不同的细胞中遗传信息不完全相同 D. 在个体发育的不同时期，细胞内的遗传物质发生了变化 9．下列有关植物组织培养的叙述，正确的是（） A．植物组织培养没有体现植物细胞的全能性 B．二倍体植株的花药经植物组织培养后得到稳定遗传的植株 C．用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子 D．植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得
细胞生物学试题整理(含答案)
细胞生物学与细胞工程试题 一：填空题（共40小题，每小题0.5分，共20分） 1：现在生物学“三大基石”是：＿，＿＿。 2：细胞的物质组成中，＿，＿，＿，＿四种。 3：膜脂主要包括：＿，＿，＿三种类型。 4：膜蛋白的分子流动主要有＿扩散和＿扩散两种运动方式。 5：细菌视紫红质蛋白结构的中部有几个能够吸光的＿基因，又称发色基因。6：受体是位于膜上的能够石碑和选择性结合某种配体的＿。 7：信号肽一般位于新合成肽链的＿端，有的可位于中部。 8：次级溶酶体是正在进行或完成消化作用的溶酶体，可分为＿，＿，及＿。 9狭义的细胞骨架（指细胞质骨架）包括＿，＿，＿，＿及＿。 10：高等动物中，根据等电点分为3类：α肌动蛋白分布于＿；β和γ肌动蛋白分布于所有的＿和＿。 11：染色质的化学组成＿，＿，＿，少量＿。 12：随体是指位于染色体末端的球形染色体节段，通过＿与＿相连。 13：弹性蛋白的结构肽链可分为两个区域：富含＿，＿，＿区段。 14：细胞周期可分为G1期，S期，G2期，G2期主要合成＿，＿，＿等。 二：名词解释（每个1分，共20小题） 1：支原体 2：组成型胞吐作用 3：多肽核糖体 4：信号斑 5：溶酶体 6：微管 7：染色单体 8：细胞表面 9：锚定连接 10：信号分子 11：荧光漂白技术
12：离子载体 13：受体 14：细胞凋亡 15：全能性 16：常染色质 17：联会复合体 18组织干细胞 19：分子伴侣 20：E位点 三：选择题（每题一分，共20小题） 1：细胞中含有DNA的细胞器有（） A：线粒体B叶绿体C细胞核D质粒 2：细细胞核主要由（）组成 A：核纤层与核骨架B：核小体C：染色质和核仁 3：在内质网上合成的蛋白质主要有（） A：需要与其他细胞组分严格分开的蛋白B：膜蛋白C：分泌性蛋白 D：需要进行修饰的pro 4:细胞内进行蛋白修饰和分选的细胞器有（） A：线粒体 B：叶绿体 C：内质网 D：高尔基体5微体中含有（） A：氧化酶 B：酸性磷酸酶 C：琥珀酸脱氢酶 D：过氧化氢酶6：各种水解酶之所以能够选择性的进入溶酶体是因为它们具有（）A：M6P标志 B：导肽 C：信号肽 D：特殊氨基序列7：溶酶体的功能有（） A：细胞内消化 B：细胞自溶 C：细胞防御 D：自体吞噬8：线粒体内膜的标志酶是（） A：苹果酸脱氢酶 B：细胞色素 C：氧化酶 D：单胺氧化酶9：染色质由以下成分构成（） A：组蛋白 B：非组蛋白 C：DNA D：少量RNA
细胞工程复习题
细胞工程复习题 一、名词解释 1、细胞工程（cell engineering） 2、细胞培养（cell culture） 3、细胞核移植(nuclear transplantation) 4、染色体工程(chromosome engineering ) 5、胚胎工程(embryonic engineering) 6、干细胞（stem cell） 7、组织工程 8、植物细胞工程 9、脱分化 10、再分化 11、细胞全能性 12、外植体 13、愈伤组织 14、细胞分化 15、极性 16、决定 17、体细胞遗传与变异 18、外遗传变异（epigenetic variation） 19、生理适应（physiologic adaptation） 20、不定根 22、不定芽 23、离体无性繁殖(propagation in vitro) 24、单株无性系或单芽无性系 25、植物脱毒（virus elimination） 26、体细胞胚或胚状体 27、初代培养 29、指示植物 30、酶连免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA） 31、花药培养(anther culture) 32、花粉培养(pollen culture) 33、胚胎培养 34、胚培养 35、早熟萌发(early mature sprouting) 36、胚性发育(embryonal development) 37、植物离体受精 38、污染 39、褐变 40、玻璃化 41、细胞悬浮培养(cell suspension culture) 42、最低有效密度 43、细胞同步化 44、细胞平板培养 45、看护培养 46、微室培养
(完整版)细胞工程测试题(1)
绝密★启用前 2015-2016学年度???学校3月月考卷 试卷副标题 xxx 注意事项： 1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息 2．请将答案正确填写在答题卡上 第I 卷（选择题） 请点击修改第I 卷的文字说明 一、选择题（题型注释） 1．下列关于植物组织培养的叙述，正确的是 A 、愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞 B 、二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 C. 用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子 D. 植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl 的培养基培养筛选而获得 2．动物细胞融合技术最重要的应用是（ ） A ．制备单克隆抗体 B ．制备大量的动物细胞 C ．制备胚胎 D ．进行细胞核移植 3．运用下列各种细胞工程技术培育生物新品种，操作过程中能形成愈伤组织的是（ ）。 ①植物组织培养 ②植物体细胞杂交 ③动物细胞培养 ④转基因植物的培育 A ．①②③ B ．①②④ C ．①③④ D ．①②③④ 4．在现代生物科技的应用中，不需要进行检测与筛选的是（ ）。 A ．对植物的离体组织进行培养，大规模培育优良品种 B ．将鼠的骨髓瘤细胞与已免疫的B 淋巴细胞融合，制备单克隆抗体 C ．利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜—甘蓝” D ．将抗虫基因导入植物细胞，培育具有抗虫特性的新植株 5．关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（ ） A ．可以制成诊断盒，用于疾病的诊断 B ．可以在生物体内生产，不能体外生产 C ．制备过程中一个重要的环节是细胞融合。 D ．可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 6．植物组培与动物细胞培养的相同点是 A.都需要一定的气体环境 B.都存在脱分化现象 C.都存在细胞的接触抑制现象 D.都需要对培养材料进行细胞分散处理 7．单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是（ ）
细胞工程试题
细胞工程试题1 一.选择题（所给选项只有一个最符合题意） 1. 下列关于动物细胞培养的叙述中，正确的是（） A.动物细胞培养选用的培养材料大多是动物的受精卵细胞 B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等 C.动物细胞培养过程中要用胰蛋白酶处理使细胞分散 D.“海拉”细胞系在实验室中被广泛传代使用是因为其遗传物质保持了长时间的稳定 2. 关于细胞工程的说法不正确的是（） A.培养动物细胞和植物细胞的重要区别在于培养基的不同 B.单克隆抗体与血清抗体相比，前者特异性强、灵敏度高，产量大 C.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行，而植物细胞培养则需要在无菌条件下进行 D.在生物体内细胞没有表现出全能性，与基因表达的选择性密切相关 3. 小鼠骨髓瘤细胞与某一种B淋巴细胞融合成为杂交瘤细胞，这种杂交瘤细胞（） A.发生了基因突变 B.只能在体外大量增殖 C.只能在体内大量增殖 D.能产生特定的抗体 4. 下列关于细胞工程的叙述中，正确的是（） A.克隆羊“多莉”的培育技术主要包括核移植和胚胎移植两方面 B.植物细胞工程中，融合叶肉细胞时，应先去掉细胞膜，制备原生质体 C.植物细胞工程中，叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 D.单克隆抗体制备过程中，采用不经免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合从而获得杂交瘤细胞 5. 生产单克隆抗体时，在培养基中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞，该试剂的作用是（） A.能选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制 B.能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活 C.能抑制淋巴细胞的DNA复制 D.能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的合成 6. 对比植物体细胞杂交和动物细胞融合，以下论述完全正确的是（） A.两者都必须经过人工诱导，但方式不同 B.两者细胞融合的基本原理都是细胞的全能性 C.两者都必须用灭活的病毒进行诱导 D.两者的用途都是为了培养新品种 二. 解释下列概念 愈伤组织转分化非对称融合人工种子干细胞 三. 简答题 1. 离体繁殖中，为避免变异，你会选择芽增殖还是愈伤组织增殖？ 2. 细胞脱分化在细胞学上的标志性变化是什么？ 3. 就一般规律而言，离体培养中光照的使用有什么规律？ 4. 理论上讲，裸子植物胚乳培养所获得的植株是三倍体还是单倍体？ 5. 如果希望扩大体细胞变异，你认为何种培养方式最有效？ 四. 问答题 1. 花药培养中植株再生途径对植株染色体倍性有何影响？ 2. 人工种子繁殖体有哪些类型？ 3. 原生质体分离前基础材料预处理的作用是什么？ 4. 细胞同步化主要有那些措施？ 5. 体细胞杂种与有性杂种比较有何异同？
细胞工程复习题
细胞工程复习资料(答案版） 姓名： 整理者：12生物技术江山 2015年5月28日星期四
第一章 1. 细胞工程：是指以生物细胞或组织为研究对象，按照人们的意愿进行工程操 作，从而改变生物性状，以获得生物产品，为人类生产和生活服务的科学。 2. 细胞工程主要研究的内容？ 答：细胞工程研究内容可分七大类： （1）器官组织和细胞培养 （2）原生质体培养 （3）植物胚胎培养 （4）动物胚胎培养 （5）动物胚胎工程 （6）转基因动植物 （7）胚胎干细胞 （8）染色体工程 植物激素控制器官形成理论： 第二章： 1. 植物生长调节剂的种类 答：指由人工合成的，能够调控植物生长发育的化学物质， 其化学结构类似于植物激素的结构，它们在植物生产中可以起到促进扦插生根、调控开花时间、塑造理想株型的作用。
（1）生长素（分裂，生长）（2）细胞分裂素（分裂，分化） （3）赤霉素（细胞生长，发芽） 2. Ms培养基的主要特点？ 答：无机盐和离子浓度高，是较稳定的平衡溶液 3.铁盐母液的主要成分及配制过程； 答：过程：分别溶解FeSO4﹒7H2O和NaEDTA,加热并不断搅拌，使之完全溶解，冷却。将两种溶液混合，调节pH至5.5，室温冷却后在冷藏。 4. 激素母液配制时应注意的问题. 答：成分：生长素用少量的95%乙醇或1M的NaOH溶解 细胞分裂素用1M HCl水浴加热 都应保存在0-4摄氏度冰箱中，若母液出现沉淀或污染则不能继续使用。配制好的母液分别贴上标签，注明名称倍数日期以及配制1L培养基时应取得量。 5.外植体表面灭菌过程： 答：（1）选材，选择无病斑、虫害的植株作为母材。将植物去掉多余的部分后，置于自来水下流水冲洗几分钟只几小时，冲洗时间视材料清洁程度而定。 （2）乙醇消毒，将上述材料置于超净工作台上金星表面侵润消毒。一般先用70%乙醇侵泡10—30S，由于70%乙醇穿透力强，也很容易杀死植物细胞，所以侵润时间不可过长。 （3）消毒剂消毒处理表面消毒剂种类较多， 次氯酸钙饱和溶液 5——20分钟，效果很好 次氯酸钠 0.3——0.5% 5——20min 效果很好 氯化氢 10——12 % 5——15min 好 氯化汞 0.1——0.5% 5——10min 非常好 消毒剂临时配制，消毒后用无菌水冲洗3次或4次即可。
大学细胞工程试题及答案
大学细胞工程试题及答 案 TTA standardization office【TTA 5AB- TTAK 08- TTA 2C】
细胞模拟试题及答案 一、填空（每空一分，共25分） 1.实验室的物理防护是由隔离的设备、实验室的设计、实验实施等三个方面组成， 根据其密封程度的不同，分为P1、P2、P3、P4四个生物安全等级。典型的P4实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。 2.细胞系是原代培养经初步纯化获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不 均一细胞群体。 3.细胞株是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方 法，由单细胞增殖形成的细胞群。 4.干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。干细胞的增殖特性为缓慢性和自 稳性。 5.培养细胞的生长特点为贴附、接触抑制和密度抑制。 6.植物细胞培养的原理是基于动物细胞的全能性。 7.植物细胞悬浮培养的方法为分批培养法、连续培养法和半连续培养。 8.植物组织培养中培养材料的消毒过程中，消毒的基本原则是既要杀死附着其上的 微生物又不损伤材料。 9.细胞生长测定的一般方法为：细胞计数、测定细胞密实体积、细胞鲜重或干重。 10.体外培养的细胞根据其生长方式主要分为贴附型细胞和非贴附型细胞。 11.人工种子的组分包括胚状体、人工胚乳和人工种皮。 12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、细胞核 融合几个步骤。其中细胞桥形成是最关键的一步。
13.花粉单倍体植株的鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、杂交鉴定、分子标记鉴定。 14.胚胎工程主要是对哺乳类动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作，然后让它继续 发育，获得人们所需要的成体动物。 15.人工诱导单倍体形成的方法包括：远缘杂交、延迟授粉、核置换、射线照射、花药 培养等。 二、单项选择题（每题1分，共10分） 1.人参皂甙粉是人参中重要的药用成分，以前只能从人参中提取产量极低，因而价 格昂贵。目前人参皂甙粉可以通过下列哪项技术迅速大量获取（B） A．基因工程 B．植物组织培养 C．植物体细胞杂交 D．发酵工程 2.下列有关动物细胞培养的叙述不正确的是（C） A．通过动物细胞培养可获得大量的细胞分泌蛋白 B．动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理，以使细胞分散 C．细胞癌变都发生于原代培养过程中 D．目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的，以保持其正常核型3. 尽管各种合成培养基给动物细胞培养带来极大方便，但许多实验表明，单纯使用 合成培养基细胞的贴壁增殖效果常常不理想。因此，在使用时通常仍然需要加入一定量的(C) A．平衡盐溶液B. 琼脂糖 C. 动物血清 D. 甘露醇 4.制备人工种子的关键是控制(A) A.胚状体的同步发育 B.人工种皮的同步发育 C.胚状体的单独发育 D.人工种皮的单独发育