运动训练对SHR／SP大鼠VD模型认知功能及海马ChAT、AchE活性的影响

论著?基础研究

运动训练对ＳＨＲ／ＳＰ大鼠ＶＤ模型认知功能及海马

ＣｈＡＴ、ＡｃｈＥ活性的影响倡

曾贵刚１，张　申１，顾坚忠２，陈国强３，魏品康１△

（１．第二军医大学附属上海长征医院中医理疗科，上海２００００３；２．中国科学院上海实验动物中心，

上海２０１６１５；３．上海西普尔‐必凯实验动物有限公司，上海２０１２０３）

摘　要：目的　观察运动训练对自发性高血压脑卒中倾向大鼠（ＳＨＲ／ＳＰ）血管性痴呆（ＶＤ）模型认知能力及ＣｈＡＴ、ＡｃｈＥ活性的影响。方法　将雄性ＳＨＲ／ＳＰ大鼠３０只，分为假手术组、模型组、运动组，每组各１０只，采用分次结扎２‐ＶＯ法制作ＶＤ模型，假手术组、模型组术后正常饲养不做干预；运动组术后采用跑台训练（ＤＳＰＴ‐１）８周，训练完成后采用Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫检测各组大鼠认知功能，最后处死大鼠取材检测海马胆碱乙酰转移酶（ＣｈＡＴ）及乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）活性。结果　在定位航行训练中，假手术组大鼠潜伏期明显少于运动组和模型组大鼠，但运动组大鼠潜伏期明显短于模型组大鼠（Ｐ＜０．０５）；在空间探索实验中，假手术组大鼠跨越原平台次数明显多于其他两组大鼠，运动组大鼠跨越原平台次数明显多于模型组（Ｐ＜０．０５）；运动训练可增加海马ＣｈＡＴ活性及降低ＡｃｈＥ活性。结论　运动训练可改善ＳＨＲ／ＳＰ大鼠ＶＤ模型海马胆碱能系统的功能，进而提高认知能力。

关键词：痴呆，血管性；卒中；大鼠，近交ＳＨＲ；运动；胆碱乙酰转移酶；乙酰胆碱酯酶

ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１‐８３４８．２０１４．１１．０１９文献标识码：Ａ文章编号：１６７１‐８３４８（２０１４）１１‐１３３５‐０３Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｘｅｒｃｉｓｅｔｒａｉｎｉｎｇｏｎｃｏｇｎｉｔｉｖｅｆｕｎｃｔｉｏｎ，ＣｈＡＴａｎｄＡｃｈＥａｃｔｉｖｉｔｙｉｎＳＨＲ／ＳＰｒａｔｖａｓｃｕｌａｒｄｅｍｅｎｔｉａｍｏｄｅｌ倡

ＺｅｎｇＧｕｉｇａｎｇ１，ＺｈａｎｇＳｈｅｎ１，ＧｕＪｉａｎｚｈｏｎｇ２，ＣｈｅｎＧｕｏｑｉａｎｇ３，ＷｅｉＰｉｎｋａｎｇ１△

（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＰｈｙｓｉｏｔｈｅｒａｐｙ，ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＣｈａｎｇｚｈｅｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ，

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ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＡｎｉｍａｌＣｏ．，Ｌｔｄ．，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１２０３，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｅｘｅｒｃｉｓｅｔｒａｉｎｉｎｇｏｎｔｈｅｃｏｇｎｉｔｉｖｅｆｕｎｃｔｉｏｎ，ｃｈｏｌｉｎｅａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＣｈＡＴ）ａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ（ＡｃｈＥ）ａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｓｔｒｏｋｅｐｒｏｎｅｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｒａｔ（ＳＨＲ／ＳＰ）ｖａｓｃｕｌａｒｄｅ‐ｍｅｎｔｉａｍｏｄｅｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　３０ｍａｌｅＳＨＲ／ＳＰｒａｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｓｈａｍｏｐｅｒａｔｉｏｎｇｒｏｕｐ，ｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐａｎｄｅｘｅｒｃｉｓｅｇｒｏｕｐ（ｎ＝１０）．ＴｈｅＶＤｍｏｄｅｌｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂｙｔｈｅｆｒａｃｔｉｏｎａｌｌｉｇａｔｉｏｎｏｆｂｉｌａｔｅｒａｌｃａｒｏｔｉｄａｒｔｅｒｙ（２‐ＶＯ）．Ｔｈｅｓｈａｍｏｐｅｒａｔｉｏｎｇｒｏｕｐａｎｄｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｗｅｒｅｇｉｖｅｎｔｈｅｎｏｒｍａｌｆｅｅｄｉｎｇｗｉｔｈｏｕｔｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎａｆｔｅｒｏｐｅｒａｔｉｏｎ；ｔｈｅｅｘｅｒｃｉｓｅｇｒｏｕｐａｄｏｐｔｅｄｔｈｅｔｒｅａｄｍｉｌｌｅｘｅｒ‐ｃｉｓｅ（ＤＳＰＴ‐１）ｆｏｒ８ｗｅｅｋｓ．Ａｆｔｅｒｔｈｅｅｘｅｒｃｉｓｅ，ｔｈｅＭｏｒｒｉｓｍａｚｅｔｅｓｔｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄｆｏｒｅｖａｌｕａｔｉｎｇｔｈｅｃｏｇｎｉｔｉｖｅｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ．ＴｈｅｒａｔｓｗｅｒｅｆｉｎａｌｌｙｋｉｌｌｅｄｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｎｇｔｈｅＣｈＡＴａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄＡｃｈＥａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｉｎｔｈｅｐｏｓｉｔｉｏｎｉｎｇｎａｖｉｇａｔｉｏｎｔｒａｉｎｉｎｇ，ｔｈｅｌａｔｅｎｃｙｐｅｒｉｏｄｏｆｔｈｅｓｈａｍｏｐｅｒａｔｉｏｎｇｒｏｕｐｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｓｈｏｒｔｔｈａｎｔｈａｔｏｆｔｈｅｅｘｅｒｃｉｓｅｇｒｏｕｐａｎｄｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ，ｂｕｔｔｈｅｌａｔｅｎｃｙｐｅｒｉｏｄｏｆｔｈｅｅｘｅｒｃｉｓｅｇｒｏｕｐｗａｓｏｂｖｉｏｕｓｌｙｓｈｏｒｔｔｈａｎｔｈａｔｏｆｒａｔｓｉｎｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）；ｉｎｔｈｅｓｐａｔｉａｌｅｘｐｌｏｒａｔｉｏｎｔｅｓｔ，ｔｈｅｒａｔｓｉｎｔｈｅｓｈａｍｏｐｅｒａｔｉｏｎｇｒｏｕｐｈａｄｍｏｒｅｆｒｅｑｕｅｎｃｙｏｆｃｒｏｓｓｉｎｇｐｌａｔｆｏｒｍｔｈａｎｔｈｅｏｔｈｅｒｔｗｏｇｒｏｕｐｓ，ｔｈｅｅｘｅｒｃｉｓｅｇｒｏｕｐｈａｄｍｏｒｅｆｒｅｑｕｅｎｃｙｏｆｃｒｏｓｓｉｎｇｐｌａｔｆｏｒｍｉｎｐｌａｔｆｏｒｍｑｕａｄｒａｎｔｔｈａｎｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）；ｔｈｅｅｘｅｒｃｉｓｅｔｒａｉｎｉｎｇｃｏｕｌｄｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅＣｈＡＴａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｌｏｗｅｒｔｈｅＡｃｈＥａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　ＴｈｅｅｘｅｒｃｉｓｅｔｒａｉｎｉｎｇｃａｎｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌｃｈｏｌｉｎｅｒｇｉｃｓｙｓｔｅｍｉｎＳＨＲ／ＳＰａｎｄｔｈｅｎｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅｃｏｇｎｉｔｉｖｅａｂｉｌｉｔｙ．

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｄｅｍｅｎｔｉａ，ｖａｓｃｕｌａｒ；ｓｔｒｏｋｅ；ｒａｔｓ，ｉｎｂｒｅｄＳＨＲ；ｅｘｅｒｃｉｓｅ；ｃｈｏｌｉｎｅａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ；ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ

血管性痴呆（ｖａｓｃｕｌａｒｄｅｍｅｎｔｉａ，ＶＤ）是指由脑血管病引起的认知功能障碍，尤其是学习记忆功能的减退，不仅影响患者的生活质量，而且造成巨大的社会和家庭负担。相关流行病学报道指出，ＶＤ的危险因素主要有高血压、糖尿病、高脂血症等［１‐２］。因此，采用一种理想的、接近临床ＶＤ病因、病理的动物模型进行相关研究，将更加真实地模拟ＶＤ发病过程。本课题组前期采用自发性高血压脑卒中倾向大鼠（ｓｔｒｏｋｅｐｒｏｎｅ

ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｒａｔ，ＳＨＲ／ＳＰ）制作ＶＤ模型，较好地反映了持续高血压基础上产生的ＶＤ的特征［３］，本研究拟采用运动训练干预前期制作的ＳＨＲ／ＳＰ大鼠ＶＤ模型，观察其对认知功能、海马胆碱乙酰转移酶（ｃｈｏｌｉｎｅａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＣｈＡＴ）及乙酰胆碱酯酶（ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓ，ＡｃｈＥ）的影响，并探讨相关可能的机制。

１　材料与方法

１．１　材料　选用清洁级ＳＨＲ／ＳＰ大鼠３０只，鼠龄４个月，体质量３５０～４００ｇ，由上海中科院实验动物中心提供［ＳＣＸＫ（沪）２００７‐０００５］，采用尾套法测量备选剔除血压低于１８０ｍｍＨｇ的ＳＨＲ／ＳＰ大鼠。

１．２　方法

１．２．１　实验动物分组及手术方法　实验动物共分为３组，分

倡基金项目：上海市科学技术委员会科研计划资助项目（０９１４０９０２１００）。　作者简介：曾贵刚（１９８２－），主治医生，在读博士研究生，主要从事中西医结合康复研究。　△　通讯作者，Ｔｅｌ：（０２１）８１８８５４７６；Ｅ‐ｍａｉｌ：ｃｃｚｙｋ＠ｓｍｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ。

表１ 各组大鼠平均逃避潜伏期比较（ｘ±ｓ，ｎ＝１０，ｓ）

组别第１天第２天第３天第４天第５天

假手术组６９．４０±１５．８８２６．４７±１１．３２２０．１０±６．８９１７．５１±５．６９１７．４７±３．５６运动组６６．８０±１４．１７３９．４４±９．７３ａ２９．３９±６．３１ａ２４．０６±４．４９ａ２２．４０±４．３８ａ模型组６７．１９±１７．３９５２．２４±１６．３４ｂｃ４６．９０±１６．０４ｂｃ３５．９９±１５．０３ｂｃ３１．４１±１２．７３ｂｃ ａ：Ｐ＜０．０５，ｂ：Ｐ＜０．０１，与假手术组比较；ｃ：Ｐ＜０．０５，与运动组相比。

别为假手术组、模型组和运动组，采用分次结扎２‐ＶＯ法制作ＶＤ模型［４］，具体操作如下：（１）模型组和运动组，１％戊巴比妥钠（３ｍＬ／ｋｇ）腹腔注射麻醉后将大鼠仰卧位固定于手术台，颈部皮肤剪毛备皮，聚维酮碘及乙醇常规消毒。切口位于颈正中线右侧旁开０．５ｃｍ处，长约１ｃｍ。钝性分离皮下组织后，于切口正下方的斜方肌与气管夹角处可见右侧颈总动脉搏动。分离出右侧颈总动脉后，以４号丝线双重结扎。术中动作轻柔，避免钳夹和过分牵拉迷走神经，注意无菌原则，结扎后分层缝合。术后１周，于颈正中线左侧旁开０．５ｃｍ处切开，分离并双重结扎左侧颈总动脉，其余操作同前。（２）假手术组，双侧颈总动脉不结扎，其余同上。造模后选取存活大鼠，每组各１０只。１．２．２　术后处理　假手术组、模型组术后正常饲养不做干预。运动组大鼠采用多通道电动跑台训练（ＤＳＰＴ‐１），大鼠在手术前均经过适应性训练３ｄ，每次１０ｍｉｎ，在术后２４ｈ开始予以正式训练，每天３０ｍｉｎ，每周５ｄ，连续８周。跑台参数设置如下：平板斜度为０度；履带传输速度术后第１～２天５ｍ／ｍｉｎ，术后第３～５天８ｍ／ｍｉｎ，第５天后１２ｍ／ｍｉｎ，连续训练８周。所有运动训练均在动物暗周期１８：００～２２：００完成。１．２．３　行为学检测方法　８周后采用Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫（上海吉量软件科技有限公司提供，Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫视频分析系统）对３组大鼠进行检测，实验过程中保持水温２５℃，保持环境安静及光线恒定，并于水迷宫４个象限设置不同参照物，实验者应避免经常变换位置。Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫检测分为两部分进行：（１）定位航行实验。实验前１ｄ让大鼠于迷宫内进行自由适应性游泳２ｍｉｎ，从第１天起，每天分上、下午各训练２次。训练时随机选择一个非平台所在象限入水点，将大鼠面向池壁放入水中，系统自动记录大鼠寻找并爬上平台时所需时间（逃避潜伏期）及运动轨迹，每次训练间隔为１２０ｓ。如果大鼠在１２０ｓ内未找到平台，须将其引至平台站立１０ｓ，潜伏期计为１２０ｓ，每天４次潜伏期的算术平均值作为这一时间段的学习成绩。每次训练后用毛巾擦干大鼠，单独置于鼠笼内５ｍｉｎ后再移入同组鼠笼。（２）空间搜索实验。于第５天最后１次训练后撤除水下平台，在同一入水点将大鼠面向池壁放入水中，系统自动记录其在１２０ｓ内跨过原平台相应位置的次数及运动轨迹，计算大鼠在水池目标象限区游泳时间占游泳总时间的百分比，并将其作为评价大鼠学习记忆成绩的指标。

１．２．４　ＣｈＡＴ和ＡＣｈＥ活性测定　Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫检测结束后将３组大鼠快速断头，取出全脑置于冰盒上迅速分离海马并称重，按照质量１∶９的比例加入４℃生理盐水制备１０％匀浆，将匀浆液置于离心机３０００ｒ／ｍｉｎ离心２０ｍｉｎ，取上清液，按ＣｈＡＴ检测试剂盒、ＡｃｈＥ检测试剂盒（南京建成生物工程研究所提供）说明书上具体步骤测定ＣｈＡＴ和ＡｃｈＥ活性。１．３　统计学处理　所有数据采用ＳＡＳ８．０统计软件进行分析，计量资料采用ｘ±ｓ表示，组间比较采用ｔ检验，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。２　结 果

２．１　各组大鼠定位航行实验结果比较　各组大鼠在水迷宫定位航行训练中，寻找平台的平均逃避潜伏期均有显著改善，一般随着训练次数的增加，其潜伏期均有不同程度的缩短。假手术组大鼠在训练后第３天趋于平稳，运动组、模型组大鼠在训练后第４天起趋于平稳。假手术组大鼠潜伏期明显少于运动组和模型组（Ｐ＜０．０５），运动组大鼠潜伏期明显短于模型组（Ｐ＜０．０５），见表１。

２．２　各组大鼠空间探索实验结果比较　定位航行训练完成后移除平台，各组大鼠依记忆寻找原平台，假手术组大鼠１２０ｓ跨越原平台次数明显多于其他两组大鼠（Ｐ＜０．０５），运动组大鼠１２０ｓ跨越原平台次数明显多于模型组大鼠（Ｐ＜０．０５）。各组大鼠在目标平台象限探索时间百分比和跨越原平台次数，见表２。各组大鼠在空间探索实验中的游泳轨迹，见图１。

表２ 各组大鼠空间探索实验结果比较（ｘ±ｓ，ｎ＝１０）

组别时间百分比（％）穿越次数（次）

假手术组３７．０５±４．６３３．１８±１．９４

运动组３４．３８±７．５０ａ２．６３±０．７３ａ

模型组２５．１７±６．１８ｂｃ１．１１±０．７６ｂｃ

ａ：Ｐ＜０．０５，ｂ：Ｐ＜０．０１，与假手术组比较；ｃ：Ｐ＜０．０５，

与运动组比较。

Ａ：假手术组；Ｂ：运动组；Ｃ：模型组。

图１ 各组大鼠在空间探索实验中的游泳轨迹２．３　各组大鼠ＣｈＡＴ和ＡｃｈＥ水平比较　模型组大鼠海马ＣｈＡＴ活性较假手术组大鼠低，而ＡｃｈＥ活性较假手术组大鼠高（Ｐ＜０．０１），运动组大鼠较模型组海马中ＣｈＡＴ活性升高、ＡｃｈＥ活性降低（Ｐ＜０．０５），见表３。

表３ 各组大鼠ＣｈＡＴ和ＡｃｈＥ水平比较（ｘ±ｓ，ｎ＝１０）组别ＣｈＡＴ（Ｕ／ｇ）ＡｃｈＥ（Ｕ／ｍｇ）

假手术组１４８．８４±７．３３０．５５±０．０５

运动组１０４．９６±９．７５ａ０．７０±０．０４ａ

模型组９４．９０±７．６０ａｂ０．８１±０．０５ａｃ

ａ：Ｐ＜０．０１，与假手术组比较；ｂ：Ｐ＜０．０５，ｃ：Ｐ＜０．０１，与运动组比较。

３　讨 论

ＳＨＲ／ＳＰ大鼠作为研究原发性高血压的重要动物模型，在

出生后几个月内能够自行发展成为稳定的高血压，同时伴有脑组织等高血压相关靶器官的损伤［５］。脑组织损伤涉及不同层次的多个脑区，如脑血管、血脑屏障、海马ＣＡ１区、纹状体、齿状回等均可出现多种病理改变，且随高血压程度的不断加深而加重，最终表现为认知功能损伤。脑血管因素与长期高血压常常合并产生ＶＤ，共同导致认知功能缺损。以往研究多以正常大鼠为基础制作ＶＤ模型，反映了持续低灌流对大脑的损害，但不能模拟在长期高血压基础上大脑持续低灌流所产生的

ＶＤ，ＳＨＲ／ＳＰ大鼠可以很好地模拟长期高血压与持续低灌流两种因素共同导致的ＶＤ，与临床长期高血压后卒中导致的ＶＤ病例有很高的相似度［６］。

海马是学习、记忆的高级神经活动中枢，海马胆碱能神经元损伤是认知功能受损的形态学基础，海马乙酰胆碱（ａｃｅｔｙｌ‐ｃｈｏｌｉｎｅ，Ａｃｈ）的水平与记忆功能密切相关［７‐８］。海马组织中的Ａｃｈ存在于胆碱能神经元囊泡中，Ａｃｈ由胆碱在ＣｈＡＴ的催化下合成，由囊泡释放后立刻被ＡｃｈＥ水解。ＣｈＡＴ与ＡｃｈＥ共同维持着Ａｃｈ的动态平衡。海马组织对缺血极为敏感，缺血会损坏海马组织中的胆碱能神经元，释放Ａｃｈ并被ＡｃｈＥ分解，脑内Ａｃｈ水平降低，大鼠的学习记忆能力随之下降。由于Ａｃｈ性质不稳定容易水解，直接准确测定其水平比较困难，而ＣｈＡＴ与ＡｃｈＥ便于检测，且与Ａｃｈ代谢密切相关。因此，通过检测ＣｈＡＴ与ＡｃｈＥ即可判断脑内Ａｃｈ水平的变化［９］。

在本研究中，模型组大鼠较假手术组大鼠海马ＡｃｈＥ活性升高，而ＣｈＡＴ活性降低，提示胆碱能神经元损伤，这与以往研究证实ＳＨＲ／ＳＰ大鼠ＶＤ模型大脑皮质、海马和脑脊液中的Ａｃｈ水平明显下降一致［１０］。运动训练与中枢神经系统内胆碱能系统密切相关：踏板跑能使大鼠海马Ａｃｈ释放增加；长期适量运动能提高海马与皮质内胆碱能纤维密度［１１］；运动训练可促使大鼠海马ＣｈＡＴｍＲＮＡ表达的上调和ＡｃｈＥｍＲＮＡ表达的下调［１２］。本实验结果也证实通过运动训练可以抑制ＳＨＲ／ＳＰ大鼠ＶＤ模型海马ＡｃｈＥ活性，提高ＣｈＡＴ活性，改善胆碱能系统的功能，进而增加海马Ａｃｈ水平，从而改善ＳＨＲ／ＳＰ大鼠ＶＤ模型的认知能力。

目前尚无治疗和预防ＶＤ的特效药物，临床用药也以减缓认知功能减退的进程，提高患者生存质量等对症治疗为主。胆碱酯酶抑制剂近年来成为ＶＤ治疗的主要用药之一［１３］，但患者需长期服药，容易出现恶心、食欲下降等胃肠道反应，导致耐受性较差［１４］，药物治疗ＶＤ仅能在一定程度上延缓认知功能的减退，不能改变痴呆的进程，因而对ＶＤ血管性危险因素的预防，仍然是ＶＤ根本的防治措施［１５］。

运动训练可对抗ＶＤ认知功能缺损，增加大脑的“认知功能储备”［１６］，且作为一种积极主动的治疗方法，几乎无不良反应，因而成为近年来ＶＤ治疗的热点。适宜的运动训练能够协助改善海马胆碱能系统的功能，调节Ａｃｈ的生理代谢，进而提高ＶＤ认知能力，与相应的药物协同治疗ＶＤ，可减少药物用量及相关不良反应。同时，运动训练可通过改变ＳＨＲ大鼠的血流动力学、血管的弹性、降低交感神经的活性、改善内皮功能、改善血管顺应性等机制降低血压［１７‐２０］，不仅能降低高血压危险因素，而且能直接降低血压，尤其适宜作为长期高血压基础上所产生ＶＤ的非药物治疗手段。

综上所述，运动训练可通过改善ＳＨＲ／ＳＰ大鼠ＶＤ模型胆碱能系统的功能，提高海马Ａｃｈ水平，促进认知能力恢复，为高血压基础上产生的ＶＤ治疗提供了一种新的思路，但由于高血压基础上产生ＶＤ是一个长期复杂的过程，运动训练的最佳强度、最佳方式及其对海马ＣｈＡＴ、ＡｃｈＥ活性的影响规律还有待进一步研究。

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３　讨 论

建立ＢＰＨ模型必须具备睾丸存在和年龄增长两个重要条件［４］。花生根乙醇提取物高、中剂量治疗组的前列腺指数较模型组减少，显示花生根乙醇提取物能抑制ＴＰ所致大鼠前列腺增生；但花生根乙醇提取物低剂量治疗组其前列腺指数与模型组比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），未见有抑制前列腺增生作用。花生根乙醇提取物抑制前列腺增生作用具有量效关系。花生根乙醇提取物各剂量治疗组、模型组和对照组大鼠的精囊腺、睾丸湿质量和指数比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），说明花生根乙醇提取物和ＴＰ对大鼠精囊腺、睾丸生长无明显影响。花生根乙醇提取物各剂量治疗组大鼠体质量增长正常，与模型组、对照组比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），说明花生根乙醇提取物对大鼠体质量无明显影响。

Ｂｃｌ‐２及Ｂａｘ基因在Ｂｃｌ‐２基因家族中是极重要的成员。通过转基因动物和基因转染实验研究发现，Ｂｃｌ‐２基因对细胞凋亡具有明显的抑制作用［５］。张学军等［６］运用转基因技术培育出Ｂｃｌ‐２前列腺组织特异性转基因小鼠，该小鼠前列腺组织过量表达Ｂｃｌ‐２蛋白，并伴有前列腺增生的病理学改变。Ｂｃｌ‐２蛋白在转基因鼠的前列腺体内的过量表达，能够引发前列腺良性增生［６］。Ｋｙｐｒｉａｎｏｕ等［７］也发现Ｂｃｌ‐２蛋白在前列腺增生组织中表达较前列腺正常组织中明显升高。Ｂｃｌ‐２是程序性细胞凋亡的抑制基因，有研究表明，人ＢＰＨ的组织标本中Ｂｃｌ‐２蛋白的表达明显增加［８］。

细胞的增殖和死亡保持动态平衡是保证器官细胞总数目衡定的前提。正常前列腺的大小得以保持衡定也是由增殖的细胞数目和凋亡的细胞数目相当所决定。ＢＰＨ时各种因子的表达水平发生改变，使这一平衡被打破，表现为细胞的复制增加或细胞的凋亡数目减少，从而引起总的细胞数目增加，导致前列腺体积的增大［９］。

Ｂａｘ和Ｂｃｌ‐２蛋白的作用完全相反，Ｂａｘ蛋白具有对抗Ｂｃｌ‐２蛋白抑制凋亡的作用。有研究发现，Ｂｃｌ‐２／Ｂａｘ蛋白之间比例是决定对细胞凋亡抑制作用强弱的关键因素，因此Ｂａｘ是极重要的促细胞凋亡基因［９］。细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）亦称为细胞程序死亡（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ）是一种选择性的生理死亡，在正常组织中，细胞增殖速率和细胞死亡速率间存在着平衡，一旦不平衡发生，无论是通过细胞复制速率的增加还是细胞死亡速率的减少，其结果都是前列腺细胞的大量堆积及与之相应的前列腺的生长［１０］。细胞的增殖与凋亡在前列腺的发生、发展中均有重要的地位，抑制细胞凋亡因子Ｂｃｌ‐２是内源性抑制剂，能防止细胞凋亡，该因子的过量表达可促使前列腺增生组织中细胞凋亡减少。增殖速率增加与凋亡速率减缓最终的结果都是造成前列腺内细胞绝对数目的增加，从而形成ＢＰＨ。因此，ＢＰＨ的产生与Ｂａｘ和Ｂｃｌ‐２蛋白有很重要的关系。

综上所述，花生根乙醇提取物对前列腺增生有明显的治疗作用，治疗组睾丸、精囊及体质量与对照组相比无明显影响。免疫组织化学结果检测显示，模型组Ｂｃｌ‐２表达率显著高于对照组，Ｂａｘ表达率显著低于对照组，表明前列腺增生是由前列腺组织中Ｂｃｌ‐２和Ｂａｘ调控失衡所致，灌服花生根乙醇提取物后，Ｂｃｌ‐２和Ｂａｘ恢复到正常水平，使Ｂｃｌ‐２／Ｂａｘ比值恢复至平衡状态，说明花生根乙醇提取物可通过调节凋亡基因的平衡而抑制前列腺的增生。

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（收稿日期：２０１３‐１０‐２３　修回日期：２０１３‐１２‐１０）

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（收稿日期：２０１３‐０９‐１４　修回日期：２０１４‐０１‐０２）

运动训练对SHR／SP大鼠VD模型认知功能及海马ChAT、AchE活性

的影响

作者：曾贵刚， 张申， 顾坚忠， 陈国强， 魏品康， Zeng Guigang， Zhang Shen， Gu

Jianzhong， Chen Guoqiang， Wei Pinkang

作者单位：曾贵刚,张申,魏品康,Zeng Guigang,Zhang Shen,Wei Pinkang(第二军医大学附属上海长征医院中医理疗科,上海,200003)， 顾坚忠,Gu Jianzhong(中国科学院上海实验动物中心,上海

,201615)， 陈国强,Chen Guoqiang(上海西普尔-必凯实验动物有限公司,上海,201203)

刊名：

重庆医学

英文刊名：Chongqing Medicine

年，卷(期)：2014(11)

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引用本文格式：曾贵刚.张申.顾坚忠.陈国强.魏品康.Zeng Guigang.Zhang Shen.Gu Jianzhong.Chen Guoqiang.Wei

Pinkang运动训练对SHR／SP大鼠VD模型认知功能及海马ChAT、AchE活性的影响[期刊论文]-重庆医学 2014(11)