两种检测乙型肝炎病毒DNA定量方法的比较与评价

两种检测乙型肝炎病毒DNA定量方法的比较与评价

目的评价两种检测乙型肝炎病毒（HBV）DNA方法的特点。方法用美国DIGENE公司生产的Hybrid Capture-II HBV DNA试剂（HC-II）和深圳匹基生物工程股份有限公司生产的HBV DNA定量荧光PCR检测试剂（PG），定量检测HBsAg阳性的慢性乙肝患者血清中的HBV DNA。结果HC-II试剂的HBV DNA 检测阳性率达98.6%，PG试剂达到94.6%，两者的符合率为93.2%。用系列稀释的患者血清，测定两种定量检测方法的灵敏度，PG试剂略高于GC-II试剂。HC-II 在HBV DNA浓度较高时的定量关系精度较好，而在HBV DNA低滴度时，两者的定量误差均加大。用两种方法检测HBV DNA 定量监测抗病毒药物治疗慢性乙型肝炎的疗效，所测定的HBV DNA 滴度呈相同变化趋势。结论两种HBV DNA 定量检测方法均较高的灵敏度，在抗病毒药物疗效观察方面有较高的应用价值。

标签：肝炎病毒；乙型；脱氧核糖核酸；定量检测

乙型肝炎病毒（HBV）DNA 是反映HBV复制的最直接、最可靠的指标，在评价治疗乙型肝炎药物的疗效与预后判定方面，HBV DNA 的检测具有至关重要的作用。检测HBV DNA 的方法有很多种。斑点杂交和聚合酶链反应方法（PCR）是常用方法，但两者均不能进行定量检测，因此其临床应用价值有限。近几年发展起来的定量核酸检测方法可以对病毒核酸进行相对的定量检测，对于药物治疗效果的评价和病毒复制活性的判定很有意义。目前为止，定量检测HBV DNA 的方法很多，但还没有统一的检测标准，各种方法之间难以进行横向比较。本研究采用美国DIGENG公司生产的HBV DNA 检测试剂盒HC-II和深圳匹基生物工程股份有限公司生产的HBV DNA 荧光定量检测试剂盒，对74份HBV 表面抗原（HBsAg）阳性血清进行HBV DNA 的定量检测，并对两种方法的特点进行评价。

1 资料与方法

1.1一般资料慢性乙型肝炎患者血清46份，均符合2000年西安会议修订的病毒性肝炎诊断标准。

1.2取已知HBV DNA 强阳性的血清1份，以10小牛血清按10倍梯度系列稀释，获得系列稀释血清为：10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7。用两种方法分别测定HBV DNA 滴度，以确定两种方法的灵敏度。

1.3 HBsAg、乙型肝炎e抗原和抗乙型肝炎的检测：用ORGANN TEKNIKA Reader2305酶标仪进行HBsAg、乙型肝炎e抗原（HBeAg）和抗乙型肝炎e抗原（抗- HBe）常规检测（HBsAg试剂为荷兰阿克苏公司产品。HBeAg和抗HBe 试剂为意大利澳斯邦公司产品）。

1.4 HC-方法美国DIGENE公司生产的第二代基因杂交信号放大系统