HPLC法测定雷公藤片中雷公藤甲素的含量

HPLC法测定雷公藤片中雷公藤甲素的含量

王艳芝

【摘要】[摘要]目的：建立高效液相法测定雷公藤片中雷公藤甲素的方法。方法：采用Diamonsil-C18（4.6 mm×200 mm，5 μm）色谱柱；流动相：甲醇-水（60∶40）；检测波长：218 nm；流速：1.3 ml/min。结果：雷公藤甲素在 0.047 6～0.476 0 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 1），平均回收率为99.08%，RSD=0.75%。结论：本方法简便、准确、重现性好，可用于雷公藤片中雷公藤甲素的质量控制。

【期刊名称】中国医药导报

【年(卷),期】2010(007)004

【总页数】2

【关键词】[关键词]高效液相法；雷公藤甲素；雷公藤片；含量测定

雷公藤提取物为雷公藤根的醋酸乙酯提取物。本品为棕色的块状物或粉末；气微香，味微苦。取本品约10 mg，加乙醇15ml使溶解；加碱性二硝基苯甲酸试液0.5 ml，即显红色。雷公藤片含雷公藤甲素，有抗感染和免疫抑制作用，适用于类风湿性关节炎活动期。每次10～20 mg，3次/d，1个月为1个疗程。病情控制后减量、停药，采用间歇治疗。笔者采用HPLC法测定雷公藤片中雷公藤甲素的含量，研究结果表明，雷公藤甲素在此条件下分离较好，检测灵敏度高，测定专属性强。现报道如下：

1 仪器与试药

1.1 仪器

HP1100高效液相色谱仪；在线脱气机；四元泵；二极管阵列检测器；

穿心莲内酯的提取分离及鉴定

穿心莲内酯的提取 分离及鉴定 2011级16班 摘要：穿心莲为解毒消炎类临床常用药，穿心莲内酯是中药穿心莲的主要有效成分，分子式C20H30O5，白色方形或长方形结晶，味极苦，难溶于水易溶于乙醇、甲醇等。利用乙醇提取方法、超声、回流、旋转蒸发浓缩方法对穿心莲内酯进行提取分离以及纯化，使用TLC法对其鉴别，可得到纯度较高的穿心莲内酯。 关键词：穿心莲、穿心莲内酯、超声提取法、乙醇提取法、TLC鉴别 Isolation & Identification of Andrographolide ABSTRACT:Clinical commonly used medicines, creat for detoxification counter Andrographolide is the main effective component, Traditional Chinese medicine (TCM) andrographis formula C20H30O5, white square or rectangle crystal, taste bitter, soluble in water, soluble in ethanol，methanol, https://www.wendangku.net/doc/f26471806.html,ing the ethanol extract method, ultrasound, reflux, rotary evaporation enrichment method to extraction separation and purification of Andrographolide, using TLC method for the identification, can get high purity Andrographolide. KEY WORDS:Andrographis paniculata；Ultrasonic extraction；Andrographolide；alcohol extraction；Thin layer chromatography (TLC) 穿心莲为常用中药，来源于爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata（Burm. f.）Nees.的干燥地上部分。收载于《中国药典》2000 年版一部。具有清热解毒，凉血，消肿的功能，临床用于感冒发热、咽喉肿痛、口舌生疮、顿咳劳嗽、泄泻痢疾、热淋涩痛、痈肿疮疡、毒蛇咬伤等。其主要活性成分为穿心莲内酯（andrographoiide）、新穿心莲内酯（neoandrographoiide）脱水穿心莲内酯（dehydroandrographoiide）[4]。 穿心莲内酯为天然植物穿心莲的主要有效成份，具有祛热解毒，消炎止痛之功效，对细菌性与病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊疗效，被誉为天然抗生素药物。本品为二萜类内酯化合物，均难溶于水，通常仅能口服给药。主要药理作用：抗菌作用、抗病毒作用、利胆保

雷公藤甲素的提取方法总结

雷公藤甲素的提取方法总结 1 雷公藤甲素简介 雷公藤甲素（Triptolide, TPL）又称雷公藤内酯、雷公藤内酯醇，是从卫矛 科植物雷公藤的根、叶、花及果实中提取的一种环氧二萜内酯化合物，与雷公 藤碱、雷公藤次碱、雷公藤晋碱、雷公藤春碱、雷公藤增碱和雷公藤明碱等生 物碱构成了雷公藤提取物的主要活性成分，白色针状晶体，难溶于水，易溶于 甲醇、二甲基亚砜、无水乙醇、乙酸乙酯、氯仿等。 CAS #38748-32-2 分子式：C20H24O6 分子量：360.4 保存: -20℃ 2 雷公藤及雷公藤甲素价格 雷公藤8-10元/kg； 雷公藤提取物5000-9000/g，雷公藤甲素含量不同价格不同； 雷公藤甲素对照品800元/20mg（国产） 2380元/10mg（进口） 3 雷公藤提取分离方法 3.1 回流法萃取 药材粉末加入95%乙醇或石油醚加热回流提取三次，提取液回收溶剂得浸膏，浸膏用氯仿或者乙酸乙酯萃取，雷公藤甲素提取率0.00099%。 3.2 水提醇沉 药材粉末加水回流提取，提取液加乙醇沉淀除杂质，回收乙醇得水溶液用 乙酸乙酯萃取，得到粗总萜提取物。 3.3 超临界萃取 雷公藤生药粉末，按1.0 mL /g 生药的比例加入乙醇作为夹带剂，混合均匀，将混合好的物料装入萃取釜中。通过往复泵把二氧化碳加入到萃取釜中，使萃 取釜的压力达到 30 MPa，温度40 ℃，维持 1 h。收集物在40?50℃条件下，除 去夹带剂乙醇溶液，并把得到的浸膏在真空干燥箱中充分干燥。使用超临界 CO2萃取技术提取雷公藤有效成分，甲素的得率为0.00115-0.00168 %。 3.4 液-液三相萃取柱层析 采用乙醇回流提取雷公藤粉末后，在乙醇和磷酸二氢钠水溶液刚好出现两 相时用乙酸乙酯/石油醚（V/V）为2∶8的体系做萃取剂来萃取雷公藤甲素。乙 酸乙酯萃取乳化很严重，且得到的浸膏杂质多，不利于后续处理。此法改善了 乙酸乙酯萃取的不足。粗提浸膏进行硅胶柱层析，采用乙酸乙酯及石油醚洗脱，

药理学试题

中药药理学复习试卷二（附答案） 一、单项选择题（每题1分，共15分） 1、大黄泻下作用的有效成分之一是（） A.大黄素 B.大黄酸 C.番泻苷 D.鞣质 E.大黄酚 2、不能扩张血管的中药是（） A.葛根 B.麻黄 C.三棱 D.丹参 E.去甲乌药碱 3、能增强机体免疫功能的中药是（） A.甘草甜素 B.秦艽 C.大黄素 D.人参 E.麻黄 4、哪项不是盐酸小檗碱对心血管系统的作用（） A.抗心律失常 B.正性传导作用 C.正性肌力作用 D.降血压 E.抗心肌缺血 5、下列中药哪味对肾脏毒性较大（） A.马钱子 B.乌头 C.木通 D.雷公藤 E.黄芪 6、不具有利胆保肝作用的中药是（） A.苍耳子 B.柴胡 C.茵陈 D.大黄 E.栀子 7、甘草、桔梗、远志祛痰的机制是因为都含有（）成分，通过（）而起作用的。 A.多糖，粘痰溶解 B.生物碱，中枢作用 C.黄酮类，促纤毛运动 D.皂苷，刺激性 E.挥发油，刺激性 8、辛味药所含的主要成分是（） A.氨基酸 B.有机酸 C.挥发油 D.生物碱 E.皂苷 9、下列泻下药有利尿作用的是（） A.芒硝 B.番泻叶 C.火麻仁 D.大黄 E.郁李仁 10、与黄连功效相关的药理作用不包括（） A.抗炎 B.解热 C.中枢兴奋 D.降低血压 E.抗溃疡 11、服用甘草流浸育，常发生血压增高、浮肿、血钾降低等，是因为甘草具有（） A.收缩血管，升高血压 B.拮抗醛固酮受体 C.升高肾素水平 D.盐皮质激素样作用 E.直接保钠排钾 12、银杏内酯抑制血小板聚集的作用机制是（） A.抑制磷酸二酯酶活性，升高血小板cAMP B.对抗血小板活化因子（PAF C.抑制环氧酶活性，减少TXA2合成 D.对抗ADP诱导的血小板聚集 E.促进PGI2生成 13、人参益智的作用机制不包含（）

穿心莲内酯分析

穿心莲内酯分析 简介 穿心莲为爵床科植物穿心莲的干燥地上部分。原产十印度，我国华东、中南及西南等地有栽培。又名一见喜、苦草、榄核莲等，味苦，性寒，归心、肺、大肠、膀胧经。具有清热解毒，凉血消肿之功效。用十感冒发热，咽喉肿痛，口舌生疮，顿咳劳嗽，泻泄痢疾，热淋涩痛，痈肿疮疡，毒蛇咬伤。 结构 3-[2-[decahydro-6-hydroxy-5-(hydroxymethyl)-5,8a-dimethyl-2-methy lene-1-napthalenyl]ethylidene]dihydro-4-hydroxyl-2(3H)-Furanone 特点 穿心莲内酯属于二萜内酯类化合物，具有内酯环反应特征，对Legal 试剂、Kedde试剂或50%氢氧化钾显紫红色。 构效关系 穿心莲内酯由二萜双环和五元内酯环两部分通过两个碳原子连接构成。在二萜内酯基本结构上有羟基和双键官能团。 穿心莲内酯在醋酐作用下，得三乙酰化合物（32），证明存在三个羟基，羟基分别位于3α, 14α, 19-位，三乙酰化合物（32）在Al (Hg)的作用下发生氢解得化合物（33），证明了14-位是烯丙型羟基，同时14-位羟基又位于不饱和内酯羰基的β-位，所以较易失去，形成脱水穿心莲内酯。紫外光谱: λ223nm (lgε= 4.1)证明分子中有不饱和γ_内酯结构。红外光谱显示分子max 中除了γ-内酯环以外，尚有环外次甲基的存在。双键分别位于12（13), 8 （17)-位，双键均为环外双键，其中一个双键是五元内酯环的环外双键，同时也是烯丙醇的一部分，它与内酯环上的酯羰基共轭，构成了环外α,β-

不饱和-γ-内酯，由于环内张力，这种内酯结构较不稳定，极易在碱性条件下水解开环，穿心莲内酯在碱性条件下，生成化合物（34），化合物的开环，说明了穿心莲内酯存在有内酯的结构。环外双键也易发生重排，进入内酯环内形成更为稳定的α，β-不饱和-γ-内酯。另外一个双键位于二萜双环(反式十氢萘构型)上。这种结构类型决定了穿心莲内酯化学性质较不稳定和相对活泼的特点。 各种名称 穿心莲别名：一见喜、万病仙草、四支邦、槛核莲、苦胆草、斩龙剑、日行千里、四方莲、金香草、金耳钩、春莲夏柳、印度草、苦草等。 来源 穿心莲植物适于生长在亚热带，泰国、马来西亚、斯里兰卡、印度以及巴基斯坦也有穿心莲资源分布，我国广西、广东出产的穿心莲，内酯含量最高，达到4%左右。 理化性质 穿心莲内酯主要来源于爵床科植物穿心莲的全草或叶，是中药穿心莲的主要有效成分之一。穿心莲内酯又称穿心莲乙素，为二萜内酯类物质，无色方形或长方形结晶，口味极苦，分子式C20H30O5，分子量350.44，易溶于乙醇、丙酮、吡啶，微溶于水和氯仿，几乎不溶于乙醚。熔点230~231 ℃，UVλ(EtOH)max 225nm；IRγ(KBr)max cm-1：3400，3390~2979(0H)，1828，1647，979 (C=CH2)。 稳定性 以穿心莲超分子提取物为样品建立含量测定方法，主要测定其中含量

穿心莲内酯的提取分离和鉴定

穿心莲内酯的提取分离和鉴定 一、目的要求 学习中药中内酯类成分的提取分离及检识，通过实验要求： 1.掌握从穿心莲中提取、分离穿心莲内酯的操作方法。 2.熟悉穿心莲内酯类成分的性质和检识方法。 3.了解去除叶绿素的方法。 二、实验原理 穿心莲中的内酯类化合物易溶于甲醇、乙醇、丙酮等溶剂，故利用性质选用乙醇提取之；穿心莲中含有大量叶绿素，可用活性炭脱色除去叶绿素类杂质；利用穿心莲内酯与脱氧穿心莲内酯在乙酸乙酯中溶解度不同，初步讲两者分离；利用穿心莲内酯与脱氧穿心莲内酯结构上的差异，用氧化铝柱分离二者。 三、实验仪器与试剂 仪器：圆底烧瓶、旋转蒸发仪、冷凝管、烧杯、天平、胶头滴管、试管、量筒、薄层板等 试剂：穿心莲粗品、穿心莲对照品、乙醇、乙酸乙酯、活性炭、碳酸钠、水等 四、实验过程 （一）提取分离流程图

穿心莲粗粉20克 0.01%、8倍量的碳酸钠煎煮2次，每次2 h 合并提取液 提取液用25%HCl调节PH至6-7 10%活性炭脱色，蒸发(1/4-1/5) 中性氧化铝柱色谱 乙醇洗脱 95%乙醇溶解 精制穿心莲内酯 五、注意事项 1、穿心莲内酯类化合物为二萜类内酯，性质极不稳定，易氧化、聚合而树脂化。因此所提取的穿心莲应是当年产的新药材，并且要未受潮变质的茎叶部分，否则内酯含量明显下降至极低，难以提取得到。 2、水提取一般可将多糖等多种水溶性杂质提取出来，水提取出膏率较高，但穿心莲内酯水溶性较低，不适合穿心莲的提取。 3、穿心莲内酯的析晶宜在含乙醇量稍高的情况下进行，此时晶形与结晶的纯度都较好。当溶液的含水量较高，或粘稠度太大时，往往不易析出结晶。 4、加入的活性炭不能过多，否则会吸附穿心莲内酯，使产率降低。 六、思考题

穿心莲内酯提取工艺

穿心莲内酯提取工艺 1 设备与仪器 I．I 设备多功能提取罐 1．2 仪器：Agilent-1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)； Hypersil ODS 色谱柱250×4.6mm，5 7 m ；TV-1221型紫外-可见分光光度计，北京普析制造；Sartorius BS210S电子天平(德国塞多利斯股份公司)；ZF-2型三用紫外仪(上海安亭电子仪器厂)；超声波清洗器 (上海科导超声仪器有限公司) 2 提取工艺 2．1 工艺： ① 粉碎：取穿心莲叶，粉碎机上安装孔径为8ram的筛网粉碎成粗粉。 ②提取：穿心莲粗粉用4倍量95 乙醇回流提取两次，第 -次2小时，第二次1．5小时。合并回流液，滤过，回收乙醇浓缩至每 lml含2g药材．冷却10℃-20℃，静止12小时析出结晶，滤取结晶物。 ③ 重结晶：结晶物加入lO-15倍量的95%乙醇(以结晶物重量计)，搅拌溶解，加0.5 活性炭(以结晶物重量计)加热回流3O分钟，过滤，滤液回收乙醇，静止l2小时以上，滤取结晶物。 ④ 干燥：结晶物在50-70℃ 减压干燥6-8小时。 ⑤ 粉碎：干燥物经100目筛粉成细粉。 ⑥ 检测水份，含量合格后包装入库。 2．2 工艺研究：根据穿心莲内酯L2]的化学性质，在沸乙醇中溶解，在甲醇、乙醇中略溶，在水或乙醚中不溶。我们选择用不同浓度的乙醇做溶媒回流提取穿心莲内酯考察对回流提取时间、提取次数对产品收率的影响。 2．2．1 提取次数的考察：穿心莲粗粉(检测含量)。称取六份，每份 lkg，分成三组，分别加入4倍量(以药材重量计)95 乙醇，第-组回流提取-次，第二组回流提取两次，第三组回流提取三次。每次提取时间 2小时，分别合并提取液，回收乙醇，浓缩至500ml，测定体积做为储备液。 ① 出膏率的测定精密吸取储备液10ml于恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105℃干燥至恒重，移置干燥器中冷却0.5小时，称重，计算即得。 ② 含量测定将上述储备液冷却至l0-20℃ ，静止12小时以上，有结晶析出，滤取结晶物于6O-7O℃ 减压干燥6-8小时，干燥物称重，按照WS-10001-(HD-0971)-2002穿心莲内酯含量测定项下的方法测定含量，并计算药材中穿心莲内酯的转移率。由上表可知，提取次数的增加，出膏率、转移率呈上升趋势，1组出膏率和转移率较低，原因是提取次数少，提取不完全。二组和三组的出膏率和转移率比较接近，从能源消耗和乙醇消耗等经济方面考虑，选择二组即提取两次比较合理。 2．2．2 提取时间的考察：见表2。穿心莲粗粉(检测含量)，称取六份(每个实验平行操作两份)，每份lkg，分成三组，分别加入4倍量(以药材重量计)95 乙醇，回流提取两次。第-组回流提取两次，每次时间为1小时。第二组回流提取

HPLC法测定穿心莲注射液中穿心莲内酯的含量

HPLC法测定穿心莲注射液中穿心莲内酯的含量 目的建立穿心莲注射液中穿心莲内酯的高效液相色谱法含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定含量，色谱柱：Agilent TC-C18柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相：甲醇-水（50∶50）；检测波长：224 nm；流速：1.0 ml/min。结果穿心莲内酯在0.02 022～0.1011 mg/ml（r=0.9999）内呈良好的线性关系，平均回收率（n=6）为99.1%（RSD=1.1%）。结论建立的测定穿心莲内酯的方法准确有效，有助于进一步完成穿心莲注射液的质量控制方法。 [Abstract]Objective To establish the HPLC method for determination of Andrographolide content in Chuanxinlian Injection.Methods HPLC was used in content determination，the chromatographic column was Agilent TC-C18 （4.6 mm×150 mm，5 μm），the mobile phase consisted of methanol-water （50：50），the detection wavelength was 224 nm and the flow rate was 1.0 ml/min.Results The good linear relation was maintained when Andrographolide was from 0.02 022 to 0.1011 mg/ml （r=0.9999）.The average recovery was 99.1% （n=6，RSD=1.1%）.Conclusion The method of determination of Andrographolide is accurate and effective，which can help to complete the quality control method of Andrographolide Injection. [Key words]HPLC method；Chuanxinlian Injection；Andrographolide；Content 穿心莲注射液是由穿心莲的乙醇提取物制成的注射液，收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第十九册，具有清热解毒的功效，主要用于咽喉肿痛、肺热咳嗽、热痢，亦可用于上呼吸道感染、细菌性痢疾等。穿心莲注射液中的主要有效成分穿心莲内酯（Andrographolide），是爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata （Burm.f.）Nees的有效成分之一，具有抗菌、消炎、止咳平喘、清热解毒、凉血消肿等作用，广泛用于上呼吸道、消化道细菌感染所引起的各种疾病[1-6]。现行质量标准采用紫外分光光度法测定穿心莲内酯含量，操作繁琐，且显色时间的长短对测定结果影响较大。本实验采用HPLC法对穿心莲注射液中有效成分穿心莲内酯的含量进行测定，通过大量实验研究，建立了穿心莲内酯的HPLC分析方法，方法准确有效，现报道如下。 1仪器与试药 Agilent1100型高效液相色谱仪含真空脫气机、低压四元泵、自动进样器和VWD检测器（美国安捷伦公司）；AUW120D型电子天平（日本岛津公司）；SK8200LH型超声仪（昆山超声仪器有限公司）；穿心莲内酯对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110797-201509）；穿心莲注射液（海南制药厂有限公司，批号：150104、150201、150914）。甲醇（色谱纯），水（超纯水）。 2方法与结果

穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定

天然药物化学设计试验 题目：穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定 学生： 学号： 院（系）：生命科学与工程学院 专业：药物制剂 指导教师： 2011年12月30日

天然药物化学课程实验任务书 一、题目：穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定 二、实验任务 1.查阅文献资料并写出所选药材化学研究进展的文献综述 2.设计实验方案并进行可行性分析（方案应包括目的意义，设计原理、 流程、实验方法、时间安排、需要的仪器与试剂） 3.对实验材料进行性状、显微和理化鉴定 4.完成穿心莲内酯单体化合物的分离及结构鉴定，鉴定数据应包括熔 点、旋光度、紫外图谱。 5.对所得数据进行分析 6.完成实验报告并提交少量穿心莲内酯样品。 三、实验要求 1.实验中要求学生不完全依赖现成条件，能在教师指导下自己创造一 些条件完成实验。 2.实验方法力求创新。 3.目的物的纯度要求用薄层层析法和熔点的测定数据说明； 4.本题目要求2-3名学生配合完成。 四、实验报告内容 1.题目 2.实验目的 3.基本原理 4.实验所用试剂、仪器的型号及生产厂家 5.分离方法创新之处 6.自制或创造了那些实验条件条件 7.实验流程及操作方法 8.结果与分析 9.结论 10.在所完成实验的基础上提出一个新的研究课题 11.合理化建议

穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定 一、文献综述 1、成分来源：为爵床科植物穿心功Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees的地上部分，主产广东、福建。 结构及化学成分： 穿心莲内酯的结构式 [中文名称] 穿心莲内酯 [别名] 穿心莲乙素、熊耳内酯 [分子式] C 20H 30 O 5 [分子量] Mw＝350.45 [ 熔点 ] 229-232℃ [物理性质] 斜方棱形或片状结晶（乙醇或甲醇），无臭, 味极苦,穿心莲内酯在水中的溶解度非常小（几乎不容），易溶于丙酮、甲醇、乙醇。比旋度[A]2 126. 6? 2b( 冰醋酸) [药理作用] 穿心莲内酯为天然植物穿心莲的主要有效成份，具有祛热解毒，消炎止痛之功效，对细菌性与病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊疗效，被誉为天然抗生素药物。本品为二萜类内酯化合物，均难溶于水，通常仅能口服给药。 ○1抗菌作用○2抗病毒作用○3利胆保肝作用○4抗心脑血管疾病作用○5抗肿瘤 作用 2、药材介绍 穿心莲内酯又称穿心莲乙素，清热解毒，凉血，消肿。用于感冒发热、咽喉肿痛、口舌生疮、顿咳劳嗽、泄泻痢疾、热淋涩痛、痈肿疮疡、毒蛇咬伤。 二、实验部分 总内酯的提取：