(完整word版)电转染标准步骤

电转染标准步骤

1.清洗电转杯，将电转杯置于75%酒精中浸泡2小时，然后在紫外灯下照射后即可使用。

2.电穿孔前一天，以合适密度传代细胞，使细胞在转染前出于对数生长期。对于原代培养细胞，一般培养2-3天后，细胞单层融合度可以达到70-80%，即可开始试验。

3.PBS洗细胞2次后，胰酶消化细胞2min，待细胞变圆后，用完全培养基终止消化。

4.轻轻吹下细胞成单细胞悬液后，1200rpm室温离心5min。

5.完全弃去上清，根据细胞数量，加入适量的电转缓冲液重悬细胞（一般为0.5-0.6ml左右），并上下吹打均匀。

6.加入适量相应浓度的待转染核酸至相应的终浓度（质粒为20ug/ml，SiRNA的终浓度为100nM），上下吹打均匀。若以0.5ml计算，所需质粒为0.5×20=10ug。

7.将含有相应浓度核酸的细胞悬液转移入相应规格的电转杯中，按照预定条件设置参数，进行电击操作。（不同细胞电转前，需要进行预试验摸索电转的最佳条件，既要保证较高的转染效率，又要保证较高的细胞存活率。经过实践摸索后得出，相应的最佳参数为：质粒：250V，10ms，1（最多2），0，4mm cuvette；SiRNA: 250V，5ms，1（最多2），0，4mm cuvette。

8.电击完成后，将电转杯置于恒温培养箱中8-12min，以使核酸充分进入细胞。

9.将电击杯从恒温培养箱中取出，接种细胞悬液于预热的培养基中，上下吹打均匀后，置于培养箱中正常培养。

10.正常培养4h，待细胞贴壁后，给细胞换新鲜的完全培养基，以去除上层的死细胞。

11.培养24h后，即可进行细胞转染效率的检测或是进行细胞的实验处理。

WORD试题含答案

试题WORD 的启用（一）Word2000 ）1、下面说法中不正确的是（C 、工具栏主要包括常用工具栏和格式工具栏 A 、标尺分为水平标尺和垂直标尺 B 、状态栏可以显示文本的输入方式 C 、滚动条是白色的条子 D ）为底色”是以（C 2、“标题栏、黑色 A 、白色 B 、蓝色 C D、灰色（C）3、选择下面的哪一项可以打开word 2000 Microsoft Outlook A、 Microsoft Powerpoint B、Microsoft Word C、Microsoft Frontpage D、B）、4word 2000是哪个公司的产品（IBM A、Microsoft B、Adobe C、SONY D、C）5、下面说法中不正确的是（、状态栏位于文档的底部，可以显示页号、节号、页数、光标所在的列号等内容A B、滚动条是位于文档窗口右侧和底边的灰色条 、菜单栏中有8个下拉菜单 C D、标题栏可以显示软件名称和文档名称 A）、视图方式按钮位于（ 6 A、水平滚动条的左边 B、水平滚动条的右边 C、垂直滚动条的上面 、垂直滚动条的下面 D ）7、Word 2000中的标题栏的右边有几个控制按钮（C 4 C、3 D、A、1 B、2 A 8、标尺分为水平标尺和垂直标尺（） B、错A、对选项开始“”菜单的（B）下有Microsoft Word 9、在D、运行、设置 B A、文档、程序 C ） C 10、鼠标指针指向某个工具栏上的一个按钮时，显示按钮名称的黄色矩形是（、帮助信息 C、菜单A、标记 B 、工具提示信息 D 1 （二）新建文档 、新建文档的快捷键是（B）1 D、Ctrl+s 、Ctrl+N C、Shift+N A、Alt+N B 对话框中的选项卡（AC）2、下列哪些选项是“新建”、文档C、报告D A、常用B、Web页）3、下面哪些选项不是新建对话框中常用选项卡的选项（C D、电子邮件正文页C、公文向导A、空白文档B、WEB ）图标4、新建文档时，单击新建对话框的常用选项卡中的（B 、电子邮件正文C、公文向导 D A、WEB页B、空白文档 ）5、新建命令位于菜单栏的哪个菜单下（A 、插入D、格式A、文件B、编辑C 6、下列关于新建一个空白文档的操作正确的是（A）A、从文件菜单中选择新建命令，单击新建对话框常用选项中的空白文档，然后按确定B、从文件菜单中选择新建命令，单击新建对话框常用选项中的电子邮件然后按确定、从文件菜单中选择新建命令，单击新建对话框常用选项中的WEB页然后按确定 C D、以上说法都不对、下列哪些选项是新建对话框中常用选项卡中的选项（ABC）7 、公文向导、电子邮件正文 D B、WEB 页CA、空白文档 、下面关于新建文档的说法中不正确的是（C）8 A、新建文档可以直接点击文件菜单

脂质体转染的实验原理与操作步骤大全

脂质体转染的实验原理与操作步骤大全 细胞转染的方法主要包括：电穿孔法、显微注射、基因枪、磷酸钙共沉淀法、脂质体转染法、多种阳离子物质介导、病毒介导的转染等，理想的细胞转染方法是具有高转染效率、对细胞的毒性作用小等，本文主要介绍细胞转染常用的方法-脂质体转染的原理和操作步骤等。 脂质体(lipofectin regeant，LR)试剂是阳离子脂质体N-[1-2，3-Dioleyoxy，Propyl]-n， n，n-Trimethylammonium Chloride(DOTMA)和Dioleoyl photidye-thanolamine(DOPE)的混合物[1：1(w/w)]。它适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前条件下最方便的转染方法之一。转染率高，优于磷酸钙法，比它高5~100倍，能把DNA和RNA转染到各种细胞。 用LR进行转染时，首先需优化转染条件，应找出该批LR对转染某一特定细胞适合的用量、作用时间等，对每批LR都要做：第一，先要固定一个DNA的量和DNA/LR混合物与细胞相互作用的时间，DNA可从1~5μg和孵育时间6小时开始，按这两个参数绘出相应LR需用量的曲线，再选用LR和DNA两者最佳的剂量，确定出转染时间(2~24小时)。因LR对细胞有一定的毒性，转染时间以不超过24小时为宜。 细胞种类：COS-7、BHK、NIH3T3、Hela和Jurkat等任何一种细胞均可作为受体细胞。 一、脂质体(liposome)转染方法原理 脂质体(liposome)转染方法原理：脂质体((Iiposome)作为体内和体外输送载体的工具，已经研究的十分广泛，用合成的阳离子脂类包裹DNA，同样可以通过融合而进人细胞。使用脂质体将DNA带人不同类型的真核细胞，与其它方法相比，有较高的效率和较好的重复性。 中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA，借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体，DNA并没有预先包埋在脂质体中，而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上，形成DNA-阳离子脂质体复合物，从而吸附到带负电的细胞膜表面，经过内吞被导入细胞。 二、脂质体转染操作步骤 1、操作步骤[方法一]： (1)细胞培养：取6孔培养板(或用35mm培养皿)，向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液，37℃CO2培养至40%~60%汇合时(汇合过分，转染后不利筛选细胞)。 (2) 转染液制备：在聚苯乙稀管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)A液：用不含血清培养基稀释1-10μg DNA，终量100μL，B液：用不含血清培养基稀释2-50μgLR，终量100μL，轻轻混合A、B液，室温中置10-15分钟，稍后会出现微浊现象，但并不妨碍转染(如出现沉淀可能因LR或DNA浓度过高所致，应酌情减量)。 (3)转染准备：用2mL不含血清培养液漂洗两次，再加入1mL不含血清培养液。

最全的word使用方法

最全的word使用方法 快速学习WORD和OFFICE系列 插入日期和时间的快捷键：? Alt+Shift+D：当前日期? Alt+Shift+T：当前时间 把文字替换成图片：? ?????首先把图片复制到?剪贴板中，然后打开替换对话框，在“查找内容”框中输入将被替换的文字，接着在?“替换为”框中输入“^c”（注意：输入的一定要是半角字符，c要小写），单击替换?即可。 批量转换全角字符为半角字符? 首先全选。然后“格式”→“更改大小写”，在对话框中先选中“半角”，确定即可。 格式刷的使用? 1、设定好文本1的格式。? 2、将游标放在文本1处。?

3、单击格式刷按钮。? 4、选定其它文字(文本2)，则文本2的格式与文本1?一样。? 若在第3步中单击改为双击，则格式刷可无限次使用，直到再次单击格式刷(或按Esc键)为止。 如何输入分数 在“插入”菜单上，单击“对象”，然后单击“新建”选项卡。 单击“对象类型”框中的“Microsoft 公式”选项。 单击“确定”按钮。 输入循环小数（3循环）时，方法如下 1. 在Word文档中输入“”，选中数字“3”。 2. 在“格式”菜单中，指向“中文版式”，单击“拼音指南”。 3. 单击“3”后面的“拼音文字”下的方框，然后切换到你习惯使用的中文输入法，右键单击输入法状态条右端的软键盘按钮，单

击“标点符号”，打开标点符号软键盘。 4. 在标点符号软键盘，单击数字9键，输入间隔符“·”，然后单击软键盘按钮，关闭软键盘。?（或按SHIFT+2） 5. 在“字号”框中选择一个合适的字号，注意字号过小在文档中将看不到添加的间隔符，单击〔确定〕按钮。 word里的空白页怎么删除 重新插入分页符,在插入的时候选择下一页..插入之后会有个空白页,按DEL键删除一下,就OK. 分页的话,可以按CTRL+ENTER,。 自动生成文章目录的操作： 一、设置标题格式 1.选中文章中的所有一级标题； 2.在“格式”工具栏的左端，“样式”列表中单击“标题1”。 仿照步骤1、2设置二、三级标题格式为标题2、标题3。 二、自动生成目录

转染步骤及经验(精华)

转染步骤及经验（精华） 一、基础理论 转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。分类：物理介导方法：电穿孔法、显微注射和基因枪；化学介导方法：如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术；生物介导方法：有较为原始的原生质体转染，和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。理想细胞转染方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术，是目前转染效率最高的方法，同时具有细胞毒性很低的优势。但是，病毒转染方法的准备程序复杂，常常对细胞类型有很强的选择性，在一般实验室中很难普及。其它物理和化学介导的转染方法，则各有其特点。需要指出的一点，无论采用哪种转染技术，要获得最优的转染结果，可能都需要对转染条件进行优化。影响转染效率的因素很多，从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态到转染方法的操作细节（见后文）。 二、转染操作流程（以常用的6孔板为例） (1) 细胞培养： 取6孔培养板，以3x104/cm2密度铺板，37℃5%CO2培养箱中培养至70%～90%汇合。(不同细胞略有不同，根据实验室优化的条件进行，汇合过分，转染后不利筛选细胞)。 (2) 转染液制备： 在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量) A液：用不含血清培养基稀释1-10μg DNA，终量100μL， B液：用不含血清培养基稀释对应量的转染试剂，终量100μL； 轻轻混合A、B液（1:1混匀），室温中置15分钟，稍后会出现微浊现象，但并不妨碍转染。 (3) 转染准备：用2mL不含血清培养液漂洗两次，再加入2mL不含血清及PS的培养液。 (4) 转染：把A/B复合物缓缓加入培养液中（缓慢滴加），轻轻摇匀，37℃温箱置6～8小时，吸除无血清转染液，换入正常培养液继续培养。 三、转染注意事项 1. 血清 A. DNA-阳离子脂质体复合物形成时不能含血清，因为血清会影响复合物的形成。 B．一般细胞对无血清培养可以耐受几个小时没问题，转染用的培养液可以含血清也可以不加，但血清一度曾被认为会降低转染效率，转染培养基中加入血清需要对条件进行优化。 C. 对于对血清缺乏比较敏感的细胞，可以使用一种营养丰富的无血清培养基OPTI-MEMⅠ培养基， 或者在转染培养基中使用血清。对血清缺乏比较敏感的贴壁细胞，建议使用LIPOFECTAMINE 2000。无血清培养基OPTI-MEM(GIBICO)很好用，有条件的话，就用它代替PBS洗细胞两遍，注意洗的时候要轻，靠边缘缓缓加入液体，然后不要吹吸细胞，而是转动培养板让液体滚动在细胞表面。如果洗的太厉害，细胞又损失一部分，加了脂质体后，细胞受影响就更大了，死亡细胞会增多。 2.抗生素（PS） 抗生素，比如青霉素和链霉素，是影响转染的培养基添加物。这些抗生素一般对于真核细胞无毒，但阳离子脂质体试剂增加了细胞的通透性，使抗生素可以进入细胞。这降低了细胞的活性，导致转染效率低。所以，在转染培养基中不能使用抗生素，甚至在准备转染前进行细胞铺板时也要避免使用抗生素。这样，在转染前也不必润洗细胞。对于稳定转染，不要在选择性培养基中使用青霉素和链霉素，因为这些抗生素是GENETICIN选择性抗生素的竞争性抑制剂。另外，为了保证无血

实数(word版有答案)

2017年七下数学期中复习专题-实数 一、基础知识 1．如果一个正数x 的平方等于a ，即x ＞0，x 2＝a ，那么这个正数x 叫做a 的___________，a 的算术平方根记作_______，读作“根号a ”，a 叫做______________．规定：0的算术平方根是______． 2．如果一个数的平方等于a ，那么这个数叫做a 的______或________．这就是说，如果x 2 ＝a ，那么x 叫做a 的________．求一个数a 的平方根的运算，叫做_________． 3．如果一个数的立方等于a ，那么这个数叫做a 的_______或________．这就是说，如果x 3 ＝a ，那么x 叫做a 的________．求一个数的立方根的运算，叫做___________． 4. ____________________________ 叫做无理数. 5. ___________________________统称实数. 6.一个正实数的绝对值是 ，一个负实数的绝对值是它的 ，0的绝对值是 . 7.一个数的平方等于它本身，这个数是 ； 一个数的平方根等于它本身，这个数是 ； 一个数的算术平方根等于它本身，这个数是 。 8.一个数的立方方等于它本身，这个数是 ； 一个数的立方根等于它本身，这个数是 。 7．下列说法正确的是（ ） A ．－5是25的平方根 B ．25的平方根是－5 C ．125的立方根是±5 D ．±5是(－5)2的算数平方根 8．下列说法正确的是（ ） A ．－5是25的平方根 B ．25的平方根是－5 C ．125的立方根是±5 D ．±5是(－5)2的算数平方根 9.估算 11的值在( ) A ．1和2之间 B ．2和3之间 C ．5和6之间 D ． 3和4之间 10．已知700.153≈，不用计算器可直接求值的式子是（ ） A ．350 B ．3500 C ．35.0 D ．3005.0 11．比较大小：43_______7，3； 21-5 0.5 ；33 2 3 12. =3-2 ；2-1= ； 13．求一个正数的立方根，有些数可以直接求得，如38＝2，有些数则不能直接求得，如39，但可以利用计算器求得，还可以通过一组数的内在联系，运用规律求得，请同学们观察下表： 已知316.2≈1.293，36.21≈2.785，3216≈6运用你发现的规律求321600000＝

套word操作过程

字处理 北京明华中学学生发展中心的小刘老师负责向校本部及相关分校的学生家长传达有关学生儿童医保扣款方式更新的通知。该通知需要下发至每位学生，并请家长填写回执。参照“结果示例～结果示例”、按下列要求帮助小刘老师编排家长信及回执： 1.在考生文件夹下，将“Word素材.docx”文件另存为“”（“.docx”为扩展名），后续操作均基于此文件，否则不得分。 [解析]打开Word素材.xlsx-文件-另存为-文件名框中输入Word-保存类型框中选择（Word文档.docx）-保存。 2.进行页面设置：纸张方向横向、纸张大小A3（宽42厘米×高厘米），上、下边距均为厘米、左、右边距均为厘米，页眉、页脚分别距边界厘米。要求每张A3纸上从左到右按顺序打印两页内容，左右两页均于页面底部中间位置显示格式为“-1-、-2-”类型的页码，页码自1开始。 [解析]页面布局-页面设置-页边距-横向-上、下左、右纸张-宽度42 -高度版式-距边界页边距-多页-框中选择拼页-双击页脚位置-设计-页眉和页脚-页码-设置页码格式-编号格式- “-1-、-2-”-页码编号-起始页-1-确定-页码-页面底端-普通数字2。 3.插入“空白（三栏）”型页眉，在左侧的内容控件中输入学校名称“北京明华中学”，删除中间的内容控件，在右侧插入考生文件夹下的图片代替原来的内容控件，适当缩小图片，使其与学校名称高度匹配。将页眉下方的分隔线设为标准红色、磅、上宽下细的双线型。[解析]插入-页眉和页脚-页眉-内置-空白（三栏）-最左边输入“北京明华中学”-右击中间- 删除控制内容-光标定位到右边-插入-找到图片插入-调整图片大小-开始-样式对话框打开-右击页眉-修改-格式-边框-边框-上宽下细-红色磅-确定。 4.将文中所有的空白段落删除，然后按下列要求为指定段落应用相应格式： 段落样样式或格式 文章标题“致学生儿童家长的一封信”标题 “一、二、三、四、五、”所示标题段落标题1 “附件1、附件2、附件3、附件4”所示标题段落标题2 除上述标题行及蓝色的信件抬头段外，其他正文格式仿宋、小四号，首行缩进2字符，段前间距行，行间距倍,信件的落款（三行）居右显示。 [解析]光标定位到最前面-开始-编辑-替换-查找内容-^p^p-替换为-^p-全部替换-选定文章标题-开始-样式-标题-相同方法设置“一、二、三、四、五、”和“附件1、附件2、附件3、附件4”为标题1和标题2-选定一段正文内容-开始-编辑-选择-选择所有格式类似的文本-右击样式框中的正文样式-修改-仿宋、小四号-格式-段落-间距-段前行-行距-多倍行距缩进-特殊格式-框中选中首行缩进-2字符-确定-确定。 5.利用“附件1：学校、托幼机构“一小”缴费经办流程图”下面用灰色底纹标出的文字、参考样例图绘制相关的流程图，要求：除右侧的两个图形之外其他各个图形之间使用连接线，连接线将会随图形的移动而自动伸缩，中间的图形应沿垂直方向左右居中。 [解析]把附件1下面的文字内容复制到一个文本文件中-设置字号为小五号-打开PowerPoint-新建一张幻灯片-设计-页面设置-幻灯片大小-A4纸张-纵向-显示比例为100%-插入-形状-流程图-准备-按住鼠标左键拖动-形状-流程图-右击过程-锁定为绘图模式-按样例分别画好后面的所有形状-选定所有形状-格式-形状样式-彩色轮廓-蓝色，强调颜色1-右击-大小和位置-文本框-自动调整-溢出时缩排文字-内部边距-左、右上、下-0-确定-选定除并排的两个及右边两个形状的其它形状-格式-排列-对齐-左右居中-并排的两个形状设置为上下居中-选定第一个形 状-格式-插入形状-右击箭头连接符-锁定绘图模式-从上一个形状下边的红色点开始按住鼠标左键拖到下一个形状上边的红色点-相同的方法完成其它形状之间的连接箭头-选定并排的 两个中的左边一个-格式-插入形状-右击肘形箭头连接符-锁定绘图模式-完成连接符的绘制-

office2010 WORD-题库(含答案)

一、选择题 1.WORD 是一种（）。 A．操作系统 B．文字处理软件 C．多媒体制作软件 D．网络浏览器 2.Word 2010 文档扩展名的默认类 型是（）。 A．DOCX B．DOC C．DOTX D．DAT 3.Word 2010软件处理的主要对象是 （）。 A．表格 B．文档 C．图片 D．数据 4.Word 2010 窗口界面的组成部分 中，除常见的组成元素外，还新增 加的元素是（）。 A．标题栏 B．快速访问工具栏 C．状态栏 D．滚动条5.按快捷键+的功能是（）。 A．删除文字 B．粘贴文字 C．保存文件 D．复制文字 6.在Word2010中，快速工具栏上标 有“软磁盘”图形按钮的作用是 （）文档。 A．打开 B．保存 C．新建 D．打印 7.在Word 2010中“打开”文档的作用是（）。 A．将指定的文档从内存中读入、 并显示出来 B．为指定的文档打开一个空白窗 口 C．将指定的文档从外存中读入、 并显示出来 D．显示并打印指定文档的内容 8.Word 2010 有记录最近使用过的 文档功能。如果用户处于保护隐私 的要求需要将文档使用记录删除， 可以在打开的“文件”面板中单击 “选项”按钮中的( )进行操 作。 A．常规

B．保存 C．显示 D．高级 9.在WORD中页眉和页脚的默任作用 范围是( )： A. 全文 B. 节 C. 页 D. 段 10.关闭当前文件的快捷键是（）。 A．Ctrl+F6 B．Ctrl+F4 C．Alt+F6 D．Alt+F4 11.（）标记包含前面段落格式信 息。 A．行结束 B．段落结束 C．分页符 D．分节符 12.在Word2000中，当建立一个新文 档时，默认的文档格式为 （）。 A．居中 B．左对齐 C．两端对齐 D．右对齐 13.Word 2010 的视图模式中新增加 的模式是（）。 A．普通视图 B．页面视图 C．大纲视图 D．阅读版式视图 14.在Word的编辑状态，单击"还原" 按钮的操作是指：（）。 A. 将指定的文档打开 B. 为指定的文档打开一个空白窗 口 C. 使当前窗口缩小 D. 使当前窗口扩大 15.在Word 2010的编辑状态，执行编 辑菜单中“复制”命令后（）。 A．被选择的内容将复制到插入点 处 B．被选择的内容将复制到剪贴板 C．被选择的内容出现在复制内容

word综合操作步骤

正文内容已输入,按要求对该文档进行以下设置:章样式及自动编号、节样式及自动编号、新建样式并应用、对图表添加题注并设置交叉引用、自动生成目录及图表索引、分别添加奇偶页页眉页脚等。 按下列要求对文档“DWord、ｄocx”进行设置。(注意:以题目要求为准,注意及时保存。) 首先“cｔｒl+Ａ”选中全文,将全文样式修改为“正文”样式。 １、对正文(指得就是除了目录索引等外得内容)进行排版,其中: 1)使用多级符号对章名、小节名进行自动编号,代替原始得编号。要求: ?章号得自动编号格式为:第X章(例:第1章),其中:X为自动排序。阿拉伯数字序号。对应级别１。居中显示。 ?小节名自动编号格式为:X、Y,X为章数字序号,Ｙ为节数字序号(例：１、1）。 X,Y均为阿拉伯数字序号,对应级别2,左对齐显示。 【操作步骤】： a)先定义新得多级列表:单击段落组中得“多级列表”→“定义新得多级列表”。 图１定义新得多级列表 b)如图1所示,在“定义新多级列表”对话框中进行以下操作: ★设置章名得样式:?①先删除“编号格式”中原有内容 ②“级别”选择“１”,“编号样式”选择“1，2, 3,…”,“起始编号”选择“1” ?③在“编号格式”得“１”前输入“第”,后输入“章” (此时“编号格式”内容为“第1章”，注意此处得“1”就是域结果,灰色底纹显示) ④“对齐位置”值设为“０”?⑤“将级别链接到样式”选择“标题1”?(若没有显 示“将级别链接到样式”，请先单击对话框右上角得“高级”按钮)?如图2所示。 ????

?? 图2 章节多级符号设置 c)★不要关闭图2“章节多级符合设置”对话框,继续设置小节名得样式: ⑥先删除“编号格式”中原有内容 ⑦“级别”选择“2”?⑧“前一级别编号”选择“级别１”;在“编号格式”得“1” 后输入“、”;“编号样式”选择“１, 2，3，…”,“起始编号”选择“1” (此时“编号格式”显示“1、1”，注意此处2个“1”都就是域结果,灰色底纹显示)? ⑨“对齐位置”值设为“0”;“将级别链接到样式”选择“标题2”;勾选“在其 后重新开始编号”,并选择“级别1” ⑩按“确定”按钮后,“样式与格式”对话框样式显示如图4所示。 图３小节名多级符号设置图４“样式与格式”对话框 d)按下列步骤将样式应用到章名：?①将光标置于第1章章名“第１章ＰowerPｏｉn ｔ简介”所在行?②单击“样式与格式”对话框中得样式“标题1”?③使用“格式刷”工具,将其余各章章名设置成相同样式。并删除章名中手动输入得编号。 e)按下列步骤将样式应用到各章得小节名:

Neon电转染操作步骤

Protocol for Neon transfection system (100 μl Tips) 电穿孔技术的原理 电穿孔技术是利用脉冲电场改变细胞膜的状态和通透性,达到将DNA导入细胞以及促使细胞发生融合的目的。该技术目前一方面应用于细菌、真菌、植物、昆虫和哺乳动物细胞的基因转移,另一方面应用于细胞融合,制备杂交细胞和动物克隆等 影响电穿孔效率的因素 电场强度:电压太低时,细胞膜的改变不足以允许DNA分子通过,而电压过高时又会造成细胞的不可逆损害。对于大多数哺乳动物细胞而言,250~2500V/cm的电压可获得有效转染[2,3]。电脉冲形状和长度:电脉冲形状主要有指数衰减式和方波两种,一般需20~100毫秒。缓冲液:通常使用甘露醇和蔗糖等非离子缓冲液,但有报道认为HEPES缓冲液的转染效率更高,血清也可以提高转染效率[4]。其它诸如转染温度、DNA浓度和构象等均会对转染效果产生影响。 1.Cultivate the required number of cells (5×105-2×106 adhere cell per each 100ul Neon Tip), the cells should be 70-90% confluent on the day of experiment. 实验前培养足够量的细胞（对于100ul的tip，每个tip需要5×105-2×106 贴壁细胞，可以根据实际情况调整），并使其在实验当天达到70%-90%的汇合度。 2.Pre-warm an aliquot of culture medium containing serum, DPBS and so on.预热实验所需的 culture medium，DPBS等。 3.Prepare 6-well plate by filling the wells with 2.0 ml of culture medium containing serum and supplements without antibiotics and pre-incubate plate in a humidified 37℃/5% CO2 incubator. 准备6孔板，在每孔中加入2.0 mL 不含抗生素的正常培养基，放到倒培养箱中预热。 4.Aspirate the media from cells and rinse the cells using DPBS, trypsinize the cells using Trypsin/EDTA, after neutralization, harvest the cells in growth medium with serum. 用DPBS漂洗细胞两次，加入Trypsin/EDTA消化细胞，再加入生长培养基终止消化，收集细胞。 5.Count cells to determine the cell density, transfer enough cells for Neon transfection into a 1.5 ml microcentrifuge tube or a 15 ml cornial tube and centrifuge the cells at 100-400 × g for 5 minutes at room temperature. 对消化的细胞进行计数，确定细胞的密度，取出足够转染用的细胞，转移到新的1.5 mL 或者15 mL的离心管中，100-400 × g，室温离心5min。 6.Wash the cells with DPBS by centrifugation at 100-400 ×g for 5 minutes at room temperature. 用DPBS漂洗一次，同上条件离心。 7.Aspirate the DPBS and resuspend the cell pellet in Resuspension Buffer R in a final density of 1.0 × 107 cells/mL. Gently pipette the cells to obtain a single cell suspension. 弃DPBS,用适量的Buffer R重悬细胞，使细胞密度达到1.0 ×107 cells/mL.（该密度仅适用于每个

(完整word版)Word练习题(含答案),推荐文档

Word练习题 一、单选题 1．选定整个文档可以用快捷键___A___。 A）Ctrl+A B）Shift+A C）Alt+A D）Ctrl+Shift+A 2．在Word的编辑状态，当前编辑的文档是C盘中的d1.doc文档，要将该文档拷贝到软盘，应当使用___A___。 A）“文件/另存为”菜单命令 B）“文件/保存”菜单命令 C）“文件/新建”菜单命令 D）“插入/文件”菜单命令 3．在Word的编辑状态，执行“编辑/粘贴”菜单命令后__D____。 A）被选择的内容移到插入点处 B）被选择的内容移到剪贴板处 C）剪贴板中的内容移到插入点处 D）剪贴板中的内容复制到插入点处 4．利用__B____功能可以对文档进行快速格式复制。 A）自动换行B）格式刷 C）自动更正D）自动图文集 5．在Word的编辑状态，文档窗口显示出水平标尺，则当前的视图方式___C___。 A）一定是普通视图方式 B）一定是页面视图方式 C）一定是普通视图方式或页面视图方式 D）一定是大纲视图方式 6．在Word的__C____视图方式下，可以显示分页效果。 A）普通B）大纲 C）页面D）Web版式视图 7．在Word的编辑状态，设置了标尺，可以同时显示水平标尺和垂直标尺的视图方式是___B___。 A）普通方式B）页面方式 C）大纲方式D）全屏显示方式 8．在Word主窗口中， D 。 A）可以在一个窗口里编辑多个文档 B）能打开多个窗口，但它们只能编辑同一个文档 C）能打开多个窗口编辑多个文档，但不能有两个窗口编辑同一个文档 D）可以多个窗口编辑多个文档，也可以多个窗口编辑同一个文档9．用Word编辑文件时，利用“插入”菜单中的命令可以__B____。 A）用一个文本块覆盖磁盘文件

脂质体转染实验原理与操作步骤总(精)

脂质体转染的实验原理与操作步骤大全 日期:2012-06-25 来源:互联网作者:青岚点击:3644次 摘要: 细胞转染的方法主要包括:电穿孔法、显微注射、基因枪、磷酸钙共沉淀法、脂质体转染法、多种阳离子物质介导、病毒介导的转染等, 理想的细胞转染方法是具有高转染效率、对细胞的毒性作用小等, 本文主要介绍细胞转染常用的方法 -脂质体转染的原理和操作步骤等。 找产品,上生物帮 >> >> 细胞转染的方法主要包括:电穿孔法、显微注射、基因枪、磷酸钙共沉淀法、脂质体转染法、多种阳离子物质介导、病毒介导的转染等, 理想的细胞转染方法是具有高转染效率、对细胞的毒性作用小等,本文主要介绍细胞转染常用的方法 -脂质体转染的原理和操作步骤等。 脂质体 (lipofectin regeant, LR 试剂是阳离子脂质体 N-[1-2, 3-Dioleyoxy , Propyl]-n, n , n-Trimethylammonium Chloride(DOTMA和 Dioleoyl photidye-thanolamine(DOPE的混合物 [1:1(w/w]。它适用于把 DNA 转染入悬浮或贴壁培养细胞中 ,是目前条件下最方便的转染方法之一。转染率高,优于磷酸钙法,比它高 5~100倍,能把 DNA 和 RNA 转染到各种细胞。 用 LR 进行转染时, 首先需优化转染条件, 应找出该批 LR 对转染某一特定细胞适合的用量、作用时间等,对每批 LR 都要做:第一,先要固定一个 DNA 的量和DNA/LR混合物与细胞相互作用的时间, DNA 可从1~5μg和孵育时间 6小时开始,按这两个参数绘出相应 LR 需用量的曲线,再选用 LR 和 DNA 两者最佳的剂量,确定出转染时间 (2~24小时。因 LR 对细胞有一定的毒性,转染时间以不超过 24小时为宜。

word综合操作步骤

正文内容已输入，按要求对该文档进行以下设置：章样式及自动编号、节样式及自动编号、新建样式并应用、对图表添加题注并设置交叉引用、自动生成目录及图表索引、分别添加奇偶页页眉页脚等。 按下列要求对文档“DWord.docx”进行设置。（注意：以题目要求为准，注意及时保存。） 首先“ctrl+A”选中全文，将全文样式修改为“正文”样式。 1、对正文（指的是除了目录索引等外的内容）进行排版，其中： 1)使用多级符号对章名、小节名进行自动编号，代替原始的编号。要求： ?章号的自动编号格式为：第X章（例：第1章），其中：X为自动排序。 阿拉伯数字序号。对应级别1。居中显示。 ?小节名自动编号格式为：X.Y，X为章数字序号，Y为节数字序号（例： 1.1）。X，Y均为阿拉伯数字序号，对应级别2，左对齐显示。

底纹显示） h)④“对齐位置”值设为“0” i)⑤“将级别链接到样式”选择“标题1” j)（若没有显示“将级别链接到样式”，请先单击对话框右上角的“高级”按钮）如图2所示。 图2 章节多级符号设置 k)★不要关闭图2“章节多级符合设置”对话框，继续设置小节名的样式：l)⑥先删除“编号格式”中原有内容 m)⑦“级别”选择“2” n)⑧“前一级别编号”选择“级别1”；在“编号格式”的“1”后输入“.”； “编号样式”选择“1, 2, 3, …”，“起始编号”选择“1” o)（此时“编号格式”显示“1.1”，注意此处2个“1”都是域结果，灰色底纹显示） p)⑨“对齐位置”值设为“0”；“将级别链接到样式”选择“标题2”；勾选“在其后重新开始编号”，并选择“级别1”

q)⑩按“确定”按钮后，“样式和格式”对话框样式显示如图4所示。 图3 小节名多级符号设置图4“样式和格式”对话框 r)按下列步骤将样式应用到章名： s)①将光标置于第1章章名“第1章PowerPoint简介”所在行 t)②单击“样式和格式”对话框中的样式“标题1” u)③使用“格式刷”工具，将其余各章章名设置成相同样式。并删除章名中手动输入的编号。 v)按下列步骤将样式应用到各章的小节名： w)①将光标置于第1章小节名“1.1 概述”所在行 x)②单击“样式和格式”对话框中的样式“标题2” y)③使用“格式刷”工具，将每章的小节名都设置成相同样式。并删除小节名中手动输入的编号。 z)修改标题1和标题2的样式：居中显示和左对齐显示，单击“标题1”右侧下拉列表中的“修改” aa) bb)图5 居中显示图6 左对齐显示 2)新建样式，样式名为：“样式”+准考证号后5位，其中： ?字体：中文字体为“楷体_GB2312”，西文字体“Times New Roman”，字号为“小四”。

lipo2000转染操作步骤

Stealth? RNAi or siRNA Transfection 以24孔板为例，其余规格的转染见表1 1 中板，细胞密度为30-50%适宜。 注意：根据转染后细胞检测时间长短决定细胞中板密度，如果转染后需要长时间后检测，则细胞中板密度适当降低，已避免细胞过度生长导致存活降低。 2 第二天（24-36小时后）每个孔转染方式如下： A 将20pmol siRNA溶于50ul Opti-mem无血清培养基中。 B 将1ul lipo2000溶于50ul Opti-mem无血清培养基中，混匀室温放置5min。 C 将A B两管混合，放置20min。 3 转染期间，将24孔板培养基换成无血清培养基，每孔400ul。将C管mix加入24孔板对应孔中，4-6小时候换成有血清培养基。 Plasmid DNA Transfection DNA(ug):lipo 2000(ul)=1:2-3 转染时细胞密度越高，转染效率，表达效率也越高，并且可以降低细胞毒性。 1 中板。 贴壁细胞：0.5-2X105 cells/well，第二天待细胞密度达到90%以上时转染 悬浮细胞：4-8X105 cells/well，中板后随即转染。 2 转染。 A 将0.8ug DNA溶于50ul Opti-mem无血清培养基中。 B 将2ul lipo2000溶于50ul Opti-mem无血清培养基中，混匀室温放置5min。 C 将A B两管混合，放置20min。 转染期间，将24孔板培养基换成无血清培养基，每孔400ul。将C管mix加入24孔板对应孔中，4-6小时候换成有血清培养基。

Table 1. Culture Shared reagents DNA transfection RNAi transfection *：中板密度根据不同细胞不同实验有所不同，这里仅提的数据仅供参考 **：6孔板细胞质粒转染量1-2ug足以。 ***：6cm dish细胞质粒转染量4-6ug足以。

(完整版)officeWORD-题库(含答案)(可编辑修改word版)

一、选择题 D．滚动条 1.WORD 是一种（）。 A.操作系统 B．文字处理软件 C．多媒体制作软件 D．网络浏览器 2.Word 2010 文档扩展名的默认类 型是（）。 A．DOCX B．DOC C．DOTX D．DAT 3.Word 2010 软件处理的主要对象 是（）。 A.表格 B．文档 C．图片 D．数据 4.Word 2010 窗口界面的组成部分 中，除常见的组成元素外，还新 增加的元素是（）。 A.标题栏 B．快速访问工具栏 C．状态栏

5.按快捷键+的功能是（ ）。 A．删除 文字 B．粘贴 文字 C．保存 文件 D．复制 文字 6.在Word2010 中，快速工具 栏上标有“软磁盘”图形按 钮的作用是（）文档。 A.打 开 B． 保 存 C． 新 建 D． 打 印 7.在Word 2010 中“打开”文档的作用是（）。 A.将指定的文档从内存中读入、 并显示出来 B.为指定的文档打开一个空白窗 口 C.将指定的文档从外存中读入、 并显示出来 D.显示并打印指定文档的内容 8.Word 2010 有记录最近使用过的 文档功能。如果用户处于保护隐 私的要求需要将文档使用记录删 除，可以在打开的“文件”面板中 单击“选项”按钮中的( )进行 操作。

A.常规 B．保存 C．显示 D．高级 9.在WORD 中页眉和页脚的默任作用 范围是( )： A.全文 B.节 C.页 D.段 10.关闭当前文件的快捷键是（）。 A.Ctrl+F6 B．Ctrl+F4 C．Alt+F6 D．Alt+F4 11.（）标记包含前面段落格式信 息。 A.行结束 B．段落结束 C．分页符 D．分节符 12.在Word2000 中，当建立一个新 文档时，默认的文档格式为（ ）。 A．居中 B．左对齐 C．两端对齐 D．右对齐 13.Word 2010 的视图模式中新增加 的模式是（）。 A.普通视图 B．页面视图 C．大纲视图 D．阅读版式视图 14.在Word 的编辑状态，单击"还原" 按钮的操作是指：（）。 A.将指定的文档打开 B.为指定的文档打开一个空白窗 口 C.使当前窗口缩小 D.使当前窗口扩大 15.在Word 2010 的编辑状态，执行 编辑菜单中“复制”命令后（）。 A.被选择的内容将复制到插入点 处

细胞转染的操作步骤

细胞转染的操作步骤 转染，是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例；化学介导方法很多，如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术；生物介导方法，有较为原始的原生质体转染，和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。红外碳硫仪理想细胞转染方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术，是目前转染效率最高的方法，同时具有细胞毒性很低的优势。但是，病毒转染方法的准备程序复杂，常常对细胞类型有很强的选择性，在一般实验室中很难普及。其它物理和化学介导的转染方法，则各有其特点。 >需要指出的一点，无论采用哪种转染技术，要获得最优的转染结果，可能都需要对转染条件进行优化。影响转染效率的因素很多，从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态，到转染方法的操作细节，都需要考虑。 一、细胞传代 1. 试验准备：200ul/1mlTip头各一盒（以上物品均需高压灭菌），酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。 2. 弃掉培养皿中的培养基，用1ml的PBS溶液洗涤两次。 3. 用Tip头加入1ml Trypsin液，消化1分钟。用手轻拍培养瓶壁，观察到细胞完全从壁上脱落下来为止。 4. 加入1ml的含血清培养基终止反应。 5. 用Tip头多次吹吸，使细胞完全分散开。 6. 将培养液装入离心管中，1000rpm离心5min。 7. 用培养液重悬细胞，细胞计数后选择0.8X10⁶个细胞加入一个35mm培养皿。8. 将合适体积完全培养液加入离心管中，混匀细胞后轻轻加入培养皿中，使其均匀分布。 9. 将培养皿转入培养箱中培养，第二天转染。 二、细胞转染 1. 转染试剂的准备 ①将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。 ②震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。 2. 选择合适的混合比例（1：1－1：2/脂质体体积：DNA质量）来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。 3. 将混合液在室温放置10―15分钟。 4. 吸去培养板中的培养基，用PBS或者无血清培养基清洗一次。 5. 加入混合液，将细胞放回培养箱中培养一个小时。 6. 到时后，红外碳硫仪根据细胞种类决定是否移除混合液，之后加入完全培养基继续培养24－48小时。三、第二次细胞传代1. 在转染后24小时，观察实验结果并记录绿色荧光蛋白表达情况。 2. 再次进行细胞传代，按照免疫染色合适的密度0.8X10 个细胞/35mm培养皿将细胞重新转入培养皿中。 3. 在正常条件下培养24小时后按照染色要求条件固定。

world操作方法

1. 问：WORD 里边怎样设置每页不同的页眉？如何使不同的章节显示的页眉不同？ 答：分节，每节可以设置不同的页眉。文件――页面设置――版式――页眉和页脚――首页不同。 2. 问：请问word 中怎样让每一章用不同的页眉？怎么我现在只能用一个页眉，一改就全部改了？ 答：在插入分隔符里，选插入分节符，可以选连续的那个，然后下一页改页眉前，按一下“同前”钮，再做的改动就不影响前面的了。简言之，分节符使得它们独立了。这个工具栏上的“同前”按钮就显示在工具栏上，不过是图标的形式，把光标移到上面就显示出”同前“两个字来。 3. 问：如何合并两个WORD 文档，不同的页眉需要先写两个文件，然后合并，如何做？ 答：页眉设置中，选择奇偶页不同/与前不同等选项。 4. 问：WORD 编辑页眉设置，如何实现奇偶页不同? 比如：单页浙江大学学位论文，这一个容易设；双页：（每章标题），这一个有什么技巧啊？

答：插入节分隔符，与前节设置相同去掉，再设置奇偶页不同。 5. 问：怎样使WORD 文档只有第一页没有页眉，页脚？ 答：页面设置－页眉和页脚，选首页不同，然后选中首页页眉中的小箭头，格式－边框和底纹，选择无，这个只要在“视图”――“页眉页脚”，其中的页面设置里，不要整个文档，就可以看到一个“同前”的标志，不选，前后的设置情况就不同了。 6. 问：如何从第三页起设置页眉？ 答：在第二页末插入分节符，在第三页的页眉格式中去掉同前节，如果第一、二页还有页眉，把它设置成正文就可以了 ●在新建文档中，菜单―视图―页脚―插入页码―页码格式―起始页码为0，确定；●菜单―文件―页面设置―版式―首页不同，确定；●将光标放到第一页末，菜单―文件―页面设置―版式―首页不同―应用于插入点之后，确定。第2 步与第三步差别在于第2 步应用于整篇文档，第3 步应用于插入点之后。这样，做两次首页不同以后，页码从第三页开始从1 编号，完成。 7. 问：WORD 页眉自动出现一根直线，请问怎么处理？

细胞转染的详细过程

细胞转染的详细过程 1、准备工作如下： 1)从pFastBacTM construct中纯化重组的bacmind DNA(500ng/μl溶于TE中) 从相应的pFastBacTM construct对照中纯化bacmind DNA(500ng/μl溶于TE中)。 细胞培养在适合的培养基中。 细胞转染剂Cellfectin（4℃储存）无任何添加物（例如：FBS，抗生素等）的细胞培养基。用于细胞培养的完全生长培养基（例如：Sf-900ⅡSFM TNMFH 或其他适合的培养基）。2)在6孔板或是35毫米dish上，每孔培养9*105Sf9细胞，细胞培养于2ml含抗生素的生长培养基中。 3)细胞在27℃孵育至少一小时。 4)对于每一个转染的样品，准备bacmid DNA：与细胞转染剂在12*75mm消毒管中进行如下混合： 用100μl无血清培养基稀释1μl纯化的bacmid DNA。 用100μl无血清培养基稀释6μl 细胞转染剂。 将bacmind DNA与细胞转染剂进行混合，动作要轻柔，混合物在室温下孵育45分钟。 5)当DNA与脂质体进行孵育时，移去细胞原有的培养基并用2ml无血清培养基洗一次，移去用来清洗的无血清培养基。 6)在每一个含有DNA与脂质体混合物的管子中加入0.8ml无血清培养基，轻柔混合，分别把DNA与脂质体混合物加入含有细胞的孔中。 7)细胞在27℃孵育5小时。 8)从细胞中移去DNA与脂质体混合物加入2ml完全生长培养基。 9)将细胞在27℃进行孵育，实验人员必须每日观察，记录转染细胞的生长状态，细胞在转染后48小时长势应该比较良好，但72小时后直至可以看到明显的病毒感染的细胞病变。 2、第一代代病毒的收集与保存 1)当转染的细胞呈现出感染后期的形态时，收集每孔含有病毒的上清，转移到灭菌的15ml 压盖管中。 2)以500*g离心5分钟，从而移去上清中所含有的细胞及大的碎片。 3)将离心后的上清移到新的15ml压盖管中，用来保存第一代病毒，存放于4℃避光保存。 3、病毒的保存 1)病毒存放于4℃避光保存。 2)如果用的是无血清培养基，则加入终浓度为2%的FBS 。血清蛋白可以作为蛋白酶的底物。 3)长期保存时将一部分病毒储存在-80℃用于病毒的重新扩增。 4)病毒的常规储存不要低于4 ℃.病毒经过反复冻融会使其滴度下降10 到100倍。 4、杆状病毒的扩增 1)准备sf9细胞，2*106/孔，在室温孵育1小时。 2)在孵育1小时以后，用倒置显微镜观察昆虫细胞的贴壁情况。 3)在每孔中加入适量的P1代病毒。 4)在27℃进行孵育48小时。 5)在感染后48小时，收集每孔含有病毒的上清，转移到灭菌的15ml压盖管中。以1000*g 离心5分钟，从而移去上清中所含有的细胞及大的碎片。 5、病毒空斑分析 1)准备工作如下： 澄清的杆状病毒保存于4℃ 培养在适当培养基中的sf9细胞（30ml 5*105/ml对数生长期的细胞用于每一个滴度的杆状