146种实验室常用培养基配方15页word
146种培养基配方
THE COMPOSITION OF MEDIA
培养基及成分
1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)
Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g
CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g
Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8
适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种
2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂)
Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30g
NaCl 5g Agar (琼脂) 15g
Distilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2
[Note]：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H2O may be added .
It is favorable to promote spore formation .
适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种（青虫菌）、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌
3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基)
KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8g
MgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O0.1ｇ
Ｎa2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5g
Mannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量)
Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15g
Adjust (调) pH to 7.2
适用范围：固氮菌、胶质芽孢杆菌
4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)
Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1g
Glucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml
[Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。15磅再次灭菌15小时。)
5. Lactic-bacteria Medium I (乳酸菌培养基I )
Yeast extract (酵母膏) 7.5g Peptone (蛋白胨) 7.5g
Glucose (葡萄糖) 10g KH2PO4 2g
Tomato juice (西红柿汁) 100ml Tween (吐温) 80 0.5ml
Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 7.0
适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）、嗜热乳酸链球菌
6. Lactic-bacteria Midium Ⅱ(乳酸菌培养基Ⅱ)
Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (蛋白胨) 10g
Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g
Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g
Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g
MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g
适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）
7. Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY （蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基）
Peptone（蛋白胨）10g Yeast extract （酵母膏）5g
Glucose （葡萄糖）1g Distilled water （蒸馏水）1L
8. Glycerol Agar （甘油琼脂）
Peptone （蛋白胨）5g Beef extract （酵母膏）3g
Glycerol （甘油）20g Top water （自来水）1000ml
Agar （琼脂）15g pH 7.0-7.2
9. Rhizobium medium （根瘤菌培养基）AS 9
Yeast eztract （酵母膏）1g Soil eztract （土壤浸提液）200ml
Mannitol （甘露醇）10g Agar （琼脂）15g
Distilled water （蒸馏水）800ml pH 7.2
[Note]：Soil extract：Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap water. Autoclave at 121℃for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resterilize for 20 minutes at 121℃, then mixed with othringredients and distributed. (土壤浸提液的制法：取土壤50克，加水200毫升，15磅蒸煮1小时，经滤纸过滤后加水补足到200毫升。)
适用范围：大豆根瘤菌（慢生型）、豇豆慢生根瘤菌、花生根瘤菌、紫云英根瘤菌、
大豆根瘤菌（快生型）、大豆根瘤菌、豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌、田菁根瘤菌
10. Mannitol Agar (甘露醇琼脂)
Yeast extract (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 3g
Mannitol (甘露醇) 25g Agar (琼脂) 15g
Distilled water (蒸馏水) 1000ml
11. Glucose Asparagine （葡萄糖、天门冬素琼脂）
Glucose （葡萄糖）10g Asparagine （天门冬素）0.5g
K2HPO4 0.5g Water （水）1000ml
pH 7.2-7.4
适用范围：刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌）
12. Gause′s Synthetic Agar （高氏合成一号琼脂）
KNO3 1g Soluble starch（可溶性淀粉）20g
K2HPO4 0.5g MgSO4.7H2O 0.5g
NaCl 0.5g FeSO4 0.01g
Agar （琼脂）20g water （水）1000ml
pH 7.2-7.4
适用范围：刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌（绛红小单孢菌）、白黄链霉菌、白色链霉菌、抗生链霉菌、双重轮丝链霉菌、产色链霉菌、烬灰链霉菌、天蓝色链霉菌、灭蚊链霉菌、红霉素链霉菌、青色链霉菌、球孢链霉菌、浅灰链霉菌、灰色链霉菌、吸水链霉菌、淡紫灰链霉菌、黄色长孢链霉菌、藤黄色链霉菌、细黄链霉菌、黑化链霉菌、玫瑰色链霉菌、华美链霉菌、嗜热链霉菌、委内瑞拉链霉菌、紫色直丝链霉菌、紫色链霉菌、绿色链霉菌
13. Wort Agar （麦芽汁琼脂）
Dilute the world (without hop) to 12 Brix. Add 15g agar into 1000ml of the diluted word..Melt the agar by heating, then distribute the medium into tubes. Autoclave at 110 for 30 minutes. (将发酵啤酒的原料（未加酒花），稀释至12柏林，加琼脂15克，溶化后分装。15磅灭菌30分钟。)
适用范围：克鲁斯假丝酵母、郎比可假丝酵母、解脂假丝酵母、马其顿假丝酵母、拟热带假丝酵母、粗壮假丝酵母、皱褶假丝酵母、热带假丝酵母、产朊假丝酵母、阿舒假囊酵母、白地霉、果香地霉、地霉属、异常汉逊酵母、异常汉逊酵母变种、阿拉伯糖醇汉逊酵母、施氏汉逊酵母、菅囊酵母、伯顿毕赤酵母、膜醭毕赤酵母、粘红酵母、小红酵母、胶红酵母、深红酵母、卡尔斯伯酵母、酿酒酵母、椰园酿酒酵母、发酵性酵母、洛格酵母、罗斯酵母、鲁氏酵母多形鲁氏酵母、威尔酵母、酵母、路德类酵母、栗酒裂殖酵母、掷抱酵母、
菌
14. Potato Dextrose Agar PDA (马铃薯、葡萄糖琼脂)
Potato extract (马铃薯汁) 1000ml Dextrose(glucose) (葡萄糖) 20g
Agar (琼脂) 20g
[Note]: Potato extract: Slice potatoes thin. Add 1000ml of water, immediately to prevent Oxidtion of juice and boil until soft. (approximately 30min.). Filter through cotton-cloth. Autoclave at 115℃for 20 minutes.（注：取去皮马铃薯200克，切成小块，加水1000毫升煮沸30分钟，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000毫升，加葡萄糖20克，琼脂15克，溶化后分装，15磅灭菌30分钟。）
适用范围：酵米面假单胞菌（酵米面黄杆菌）、白色链霉菌、烬灰链霉菌、青色链霉
菌、球孢链霉菌、灰色链霉菌、龟裂链霉菌、伞枝梨头霉、雅致放射毛霉、棒曲霉、
米曲霉、出芽短梗霉、白僵霉、灰葡萄孢、顶头孢霉、巴西毛壳、长刺毛壳、橄榄包
毛壳、反曲毛壳、琥珀毛壳、圆酵毛壳、束状刺盘孢、新月弯孢霉、奇异翅孢壳、地
生翅孢壳、串珠镰孢、尖镰孢、盘长孢菌（鲁保一号）、银白杨盘长孢、玉蜀黍长蠕
孢、深黄被孢霉、小被孢霉、多头被孢、拉曼被孢霉、葡萄色被孢霉、生香毛霉、卷
枝毛霉、两型孢毛霉、直立毛霉、球孢毛霉、丝球毛霉、大毛霉、多型孢毛霉、总状
毛霉、鲁氏毛霉、五通桥毛霉、黑球漆斑菌、露湿漆斑菌、玫烟色拟青霉、棉铃虫拟
青霉、拟青霉、球形阜孢、白腐菌、少根根霉、华根霉、科恩根霉、戴尔根霉、日本根霉、爪哇根霉、米根霉、点头根霉、绿穂霉、簇孢匍柄霉、雅致枝霉、康宁木霉、绿色木霉、黄萎轮枝孢、大丽花轮枝孢
15. Czapek′s Agar（察氏琼脂）
Sucrose （蔗糖）30g NaNO3 3g
MgSO4.7H2O 0.5g KCl 0.5g
FeSO4.7H2O 0.01g K2HPO4 1g
Agar (琼脂) 13g Distilled water (蒸馏水) 1000ml
pH 7.2
适用范围：红霉素链霉菌、洋葱曲霉、金头曲霉、泡盛曲霉、泡盛曲霉烟色变种、亮白曲霉、炭黑曲霉、鹿皮色曲霉、棒曲霉、无花果曲霉、黄柄曲霉、黄曲霉、烟曲霉、构巢曲霉、黑曲霉、赭曲霉、米曲霉、寄生曲霉、酱油曲霉、土曲霉、宇佐美曲霉、焦曲霉、杂色曲霉、温特曲霉、阿达青霉、产黄青霉、黄绿青霉、桔青霉、顶青霉、园弧青霉、绳状青霉、灰黄青霉、岛青霉、淡紫青霉、特异青霉、赭绿青霉、产紫青霉、娄地青霉、小刺青霉、荨麻青霉、
16. Concentrated S ucrose Czapek′s (浓糖察氏琼脂)
Sucrose (蔗糖) 200g NaNO3 3g
MgSO4.7H2O 0.5g KCl 0.5g
FeSO4.4H2O 0.01g K2HPO4 1g
Agar (琼脂) 13g Distilled water (蒸馏水) 1000ml
适用范围：谢瓦曲霉
17. Synthetic Potato Medium (综合马铃薯培养基)
20%Potato extract (马铃薯汁) 1L Glucose (葡萄糖) 20g
KH2PO4 3g MgSO4.7H2O 1.5g
Vitanib B1 (硫胺素) Trace (微量) Agar (琼脂) 15g
pH 6
适用范围：米曲霉、酱油曲霉、栖土曲霉、宇佐美曲霉、出芽短梗霉、白僵霉、灰葡萄孢、顶头孢霉、巴西毛客、长刺毛壳、球毛壳、橄榄包毛壳、反曲毛壳、琥珀毛壳、圆酵毛壳、多主枝孢、束状刺盘孢、葫芦科刺盘孢、新月弯孢霉、奇异翅孢壳、地生翅孢壳、串珠镰孢、蚀脉镰孢霉、盘长孢菌（鲁保一号）、银白杨盘长孢、瓶毛壳、金龟子绿僵菌、生香毛霉、卷枝毛霉、两型孢毛霉、直立毛霉、球孢毛霉、丝球毛霉、大毛霉、多型孢毛霉、总状毛霉、鲁氏毛霉、五通桥毛霉、黑球漆斑菌、露湿漆斑菌、玫烟色拟青霉、棉铃虫拟青霉、淡紫色拟青霉、拟青霉、白腐菌、少根根霉、根霉属的菌、华根霉、科恩根霉、戴尔根霉、台湾根霉、日本根霉、爪哇根霉、黑根霉、雪白根霉、少根根霉、米根霉、点头根霉、三宝垄根霉、根霉属的种、绿穂
菇、大肥菇、发光假蜜环菌、木耳、皱木耳、毛木耳、大秃马勃、长根菇、金针菇、棘托竹荪、短裙竹荪、短裙竹荪东北变种（暂定）、长裙竹荪、白鬼笔、无裙竹荪、宽鳞大孔菌、凸圆灵芝（白芝）、紫芝、灵芝（红芝，赤芝，日本灵芝，韩国灵芝）、灰树花、猴头菌、香菇、粗毛斗菇、洁丽香菇、豹皮菇、玉蕈、真姬菇、安络小皮伞菌、鬼毛针、黑柄皮伞菌、尖顶羊肚菌、圆锥羊肚菌、高羊肚菌、黑脉羊肚菌、羊肚菌、滑菇、光帽黄伞、尖鳞黄伞、金顶側耳、榆黄磨、金顶磨、白黄側耳、紫孢平菇、姬菇、裂皮側耳、拟囊体側耳（鲍鱼菇）、真线側耳短孢变种、真线側耳、扇形平菇、扁形平菇、佛罗里达无孢子側耳、佛罗里达側耳、蚝菇、糙皮側耳、平菇、贝形側耳、鹰翅菌、肺形側耳、柳树菌、树窝、扁柄側耳、美味側耳、紫孢側耳、粉褶側耳、粉红側耳、凤尾菇、漏斗状側耳、榆干側耳、大榆磨、側耳、茯苓、黑菇、烟色红菇、裂褶菌、鸡纵、金耳、黄木耳、银耳、白木耳、紫晶口磨、银丝菇、丝盖小包脚菇、草菇
18. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)
Mix corn meal with water [20:100(W/V)] well . Distribute the mixture into 100ml bottles , each bottle contains about 30ml of the mixture . Autoclave at 121℃for 30minutes . (20%玉米粉装瓶，15磅灭菌30分钟。)
19. Filter Paper Medium （滤纸培养基）
（NH4）2SO4 1g KH2PO4 1g
MgSO4.7H2O 0.7g NaCl 0.5g
Distilled water （蒸馏水）1000ml A strip of filter paper （滤纸条）6ⅹ1cm （厘米）
20. Soybean Cake Meal Agar (黄豆饼粉琼脂)
10% infusion of soybean cake meal (10%黄豆饼粉浸汁) 1000ml
Glucose (葡萄糖) 10g NaCl 2.5g
21. Sawdust，Wheat-bran Medium （木屑、麸皮培养基）
Sawdust of broad leaf tree 75g Wheat bran 25g
Preparation：Mix these two ingredients well . Add appropriate water and blend (the amount of water added may be becided by kneading with fingers ). Fill the mixture into broad mouth of bottles . Stick a hole on the filling, put the cotton pulg in bottle mouth .
壳斗科植物或阔叶树的木屑75克麸皮25克
制法：加水适量充分混匀，水量以手捏时指间有水珠为宜，装瓶并压紧，在中心处扎一小洞，堵上棉塞，20磅灭菌1小时。
22. Pine Block or Pine Sowdust Medium （松木条或松木屑培养基）
1. Cut 1021 cm pine biocks and immerse them in 1-2% sucrose solution . Alow the biocks fully absorbing suger solution .Fill the biocks into broad month of bottle . Park the bottle with paper . Autoclave at 20 lbs for 1 hr . (将10ⅹ2ⅹ1厘米的松木条浸泡在1-2%的蔗糖水中。使木条吸足糖水，装瓶不宜过紧，用纸包好，20磅灭菌1小时。)
2. Pine Sawdust Medium
Pine Sawdust (松木屑) 75% Rice bran (米糠) 23-24%
Socrose (蔗糖) 1-2% Water (appropriate)水（适量）
Autoclave at 20 lbs for 1 hr.(20磅灭菌1小时）
23. Rice Straw. Dung Medium (稻草、马粪培养基)
Dried horse dung (or cow dung) （干马粪或牛粪）65%
Died straw （干稻草）35% Urea （尿素）0.5%
Calcium superhosphate （过磷酸钙）0.7% Gypsum powder（石膏粉）1%
Ammonium sulphate （硫酸铵）0.3%
[Note]: Add appropriate water, pile them up and cause them fermentation. （水适量进行堆积发酵）
24. Straw Rice Bran Medium （稻草、米糠培养基）
Dried straw （干稻草）75-80% Rice bran （米糠）20-25%
[Note]：Select no mouldy straw and cut them about 3 cm in length. Immerse them in fresh water for 12 hr. Allow the straw fully (the amount of water added may be decided by kneading with fingers. It is right when
小时，使充分吸水，然后倾去水，加米糠和水，水量以用手捏时指间有水珠为宜。)
25. Rice Medium (米饭培养基)
Fill 10g of rice into a 50ml of Erlenmeyer flask. Add 20-30ml water. Autoclave at 121℃for 30 minutes (or fill 2g of rice into a 15ⅹ150mm tube). Add 6 ml of water. Autoclave at 121℃for 30 minutes. (取大米10克，入50毫升椎形瓶中，水20-30毫升于15磅灭菌30分钟即成，或取大米2克，装入15ⅹ150毫米试管中，加水6毫升，于15磅灭菌30分钟。)
26. Filter Paper Medium (滤纸条培养基)
(NH4)2SO4 1g KH2PO4 1g
MgSO4.7H2O 0.5g Yeast Extract (酵母膏) 0.1g
Distilled Water (蒸馏水) 1000ml
Strip of filter paper 1ⅹ7 cm (滤纸条1ⅹ7 厘米)
[Note]：Siddolve the above ingredients. Distribute the liqid medium into tubes (each tube contains 1ml of the broth). Autoclave at 121℃for 30 minutes. Then put one or two sterilized strips of filter paper into a tube aseptically. (将上述溶液分配成溶液后分装入试管，每管1毫升，15磅灭菌30分钟。再将灭菌的滤纸条（1条或2条）投入试管中即好使用。)
27. Yeast Extract-Medium Extract Agar I (酵母膏、麦芽膏琼脂)
Yeast extract (酵母膏) 10g Mall extract (麦芽膏) 10g
Glucose (葡萄糖) 4g Distilled water (蒸馏水) 1000ml
Agar (琼脂) 20g pH 7.0
适用范围：红霉素链霉菌
28. Yeast Extract Peptone （酵母膏、蛋白胨琼脂）
Yeast extract （酵母膏）1g Multi-peptone（多蛋白胨）2g
Beef extract （牛肉膏）1g Glucose （葡萄糖）10g
Agar （琼脂）20g Distilled water （蒸馏水）1L
pH 7.0
29. Glucose Yeast Extract Starch Agar （葡萄糖、酵母、淀粉琼脂）
Glucose （葡萄糖）10g Yeast extract （酵母膏）10g
Starch （淀粉）10g NaCl 5g
CaCO3 3g Agar （琼脂）20g
Distilled water （蒸馏水）1L pH 7.0
30. Wheat Bran Medium （麸皮培养基）
Wheat bran （麸皮）36g （NH4）2HPO4 10g
K2HPO4 0.2g MgSO4。7H2O 0.1g
Agar （琼脂）20g Distilled water （蒸馏水）1L
pH 7.0
31. Yeast Sporulation Medium (酵母菌产生子囊孢子培养基)
(1) Kleyn Medium
KH2PO4 0.012% K2HPO4 0.02%
Sodium acetate (醋酸钠) 0.5% Glucose (葡萄糖) 0.062%
NaCl 0.062% Peptone (蛋白胨) 0.25%
Biotin (生物素) 2μg% Agar (琼脂) 2%
Trace element solution (混合盐类) 1ml/100ml
[Note]: Trace element solution （混合盐类溶液）：MgSO4.7H2O 0.4%, NaCl 0.4%, CuSO4.5H2O 0.002%, MnSO4.4H2O 0.2%, FeSO4.4H2O 0.2%
(2) Gorodkowa Medium
NaCl 0.5% Agar (琼脂) 2%
(3) McClary Medium
Glucose (葡萄糖) 0.1% KCl 0.18%
Yeast juice (酵母汁) 0.25% Sodium actate (醋酸钠) 0.82%
Agar (琼脂) 1.5%
32. BPY Medium (BPY 培养基)
Beef extract (牛肉膏) 5g Prptone (蛋白胨) 10g
NaCl 5g Yeast extract (酵母膏) 5g
Glucose (葡萄糖) 5g Agar (琼脂) 1-2%
Distilled (蒸馏水) 1000ml pH 7.0
适用范围：大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、恶臭假单胞菌
33. LB Medium (LB 培养基)
Yeast extact (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 10g
NaCl 10g Agar (琼脂) 1-2%
Distilled water (蒸馏水) 1000ml pH 7.0
适用范围：大肠埃希氏菌（大肠杆菌）
34. Penssay Broth (Penssay 肉汤)
Beef extract (牛肉膏) 1.5g Yeast extract (酵母膏) 1.5g
Tryptone (胰蛋白胨) 5g NaCl 3.5g
Glucose (葡萄糖) 1g K2HPO4.3H2O 4.8g
Distilled water (蒸馏水) 1000ml pH 7.2
35. Blond Agar (血琼脂培养基)
Peptone (蛋白胨) 10g Glucose (葡萄糖) 2g
NaCl 5g NaH2PO4 2.5g
Sodium citrate (柠檬酸钠) 5g Brain infusion (脑浸汁) 800ml
Pig heart infusion (猪心浸) 200ml Sleep Blood (羊血) 10%
pH 7.2
[Note]：Preparation of pig brain and pig heart infusion：
（1）Smash up 100g fresh pig heart （without fat and blood vessel）.Add distilled water up to 1000ml; （2）Cut 200g fresh pig brain (without blood vessel). Add distilled water up to 1000ml;
（3）Keep the two infusions at 50℃for 1 hr , then boil for 15 minutes;
（4）Cool and filtrate through gauze . [注]猪心和猪脑浸汁法：（1）新鲜猪心除去心头和脂肪，搅碎100克加蒸馏水至1000毫升；（2）新鲜猪脑除去血管，取200克加蒸馏水至1000毫升；（3）50℃保温1小时，然后煮开15分钟；（4）冷却后用纱布过滤备用。
36. Cellulose﹣decomposing Bacteria Synthetic Medium (纤维细菌合成培养基)
NaCl 6g MgSO4.7H2O 0.1g
KH2PO4 0.5g CaCl2 0.1g
K2HPO4 2.0g Yeast extract (酵母膏) 1.0g
(NH4)2SO4 2.0g Distilled water (蒸馏水) 1000ml
Filter paper strip: one strip (滤纸条：一片) pH 7.0-7.4
[Note]: So;id medium for cellulose-decomposing bacteria: Carboxymethyl Cellulose 2% Agar 2%. （斜面培养基去滤纸条用2%琼脂及2%羧甲基纤维素钠CMCNa ）
37. Clostridium Pasreurianum Synthetic Medium （巴氏梭状芽孢杆菌合成培养基）
Glucose （葡萄糖）1% MnSO4 0.001%
KH2PO4 0.05% FeSO4 0.001%
K2HPO4 0.05% Yeast extract（酵母膏）0.1%
NaCl 0.001% CaCO3 0.5%
Distille water (蒸馏水) 100% pH 7.0
38. Yeast Extract-Medium Extract Agar Ⅱ(酵母膏、麦芽膏琼脂Ⅱ)
Yeast extract （酵母膏）4g Mall extract （麦芽膏）10g
Glucose （葡萄糖）4g Agar （琼脂）17g
Distilled water （蒸馏）1000ml pH 7.3
39. Oatemeal Agar （燕麦粉琼脂）
Oatemeal（infusion）[燕麦粉浸液] 20g Agar （琼脂）18%
Trace element solution （迹量盐溶液）1ml
Distilled water up to （用蒸馏水补充至1000毫升）1000ml pH 7.2
[Note]：Trace element solution (迹量盐溶液)：
FeSO4.7H2O 0.1g MnCl2.4H2O 0.1g
ZnSO4.7H2O 0.1g Distilled water (蒸馏水) 100ml
40. Calcium Malate Agar (苹果酸钙琼脂)
Calium malate (苹果酸钙) 10g K2HPO4 0.5g
NH4Cl 0.5g Glycerol (甘油) 10g
Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml
41. Thiobacillus Ferrooxidans Medium (氧化亚铁硫杆菌培养基)
(NH4)2SO4 0.15g KH2PO4 0.05g
KCl 0.05g MgSO4.7H2O 0.5g
Ca(NO3)2.4H2O 0.01g FeSO4.7H2O 50g
Distilled water (蒸馏水) 1000ml pH 2.0
42. Thiobacillus Thiooxidans Medium (氧化硫硫杆菌培养基)
(NH4)2SO4 0.3g KH2PO4 3-4g
CaCl2 (anhydrous) [无水] 0.25g MgSO4.7H2O 0.5g
FeSO4.7H2O 0.001g Distilled water (蒸馏水) 1000ml
pH 3.5-4
43. Plasma Substitute Medium (代血浆培养基)
Sucrose (蔗糖) 12.5-15% Peptone (蛋白胨) 0.5%
KH2PO4 0.03% Na2HPO4.12H2O 0.14%
pH 7.0-7.2
44. Skim Milk Medium (脱脂牛奶培养基) ATCC 183
脱脂牛奶100g 去离子水1000ml
适用范围：保加利亚乳杆菌、嗜热乳酸链球菌
45. Pea Agar (豌豆琼脂)
Glucose (葡萄糖) 1% Peptone (蛋白胨) 0.5%
NaCl 0.5% Agar (琼脂) 2.0%
Pea infusion (counted by NH2) [豌豆浸汁(以NH2计)] 12-14 mg∕100
pH (before sterilization) [消前] 7.2-7.5
[Note]: Preparetion of pea infusion (豌豆浸汁的制法) :
Preparetion 900g of pea. Put them into a 5L bottle, and add 3L of tap water. Adjust pH to 4.3-4.5 by using of sulphuric acid. Add 30ml of chloroform for antisepsis. Plug with rubber stopper and bind up the bottle mouth with gauge in order to avoid that the stopper fall off due to gas pressure. Place the bottle at 37℃for 7-10 days. Filter the infusion, then boil the filtrate to escape the chloroform. Filter again Distribution and autoclave at 120℃for 30 minutes. Store at cool contition . (称取白豌豆900克，置于5公升广口瓶中，加自来水3公升，用硫酸调pH至4.3-4.5，再加氯仿30毫升（防腐），加胶塞并用纱布扎口（防止冲脱），放
装，于120℃30分钟灭菌。后冷藏备用。)
The standard quality of pea infusion as following (豌豆浸汁质量标准)：Aminonitrogen（氨基酸）: 160-200 mg∕100ml
Soluble phosphoruse（溶磷）: 400-600 μg∕ml
Color（色泽）: auratus,transparent （金黄、透明）
46. Wheat Bran Medium (麦麸琼脂)
Wheat bran (麦麸) 3.6% (NH4)2HPO4 0.3%
K2HPO4 0.02% MgSO4.7H2O 0.01%
Agar (琼脂) 2% pH 7.0
适用范围：金霉素链霉菌、红霉素链霉菌
47. Glucose Yeast Extract Agar (葡萄糖、酵母膏琼脂)
Glucose (葡萄糖) 10g Yeast extract (酵母膏) 10g
Water (水) 1000ml Agar (琼脂) 15g
pH 7.2
48. MMN Medium (MMN培养基)
CaCl2 0.05g MgSO4 0.15g
NaCl 0.025g FeCl3 (1%) 1.2ml
KH2PO4 0.5g Vitamib B1 (硫胺素) 100μg
(NH4)2HPO4 0.25g Wort (12 Be′) 100ml
Glucose (葡萄糖) 10-15g Citric acid (柠檬酸) 0.2g
Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 5.5 (左右)
适用范围：蜜环菌
49. Starch Agar (淀粉琼脂)
Soluble starch (可溶性淀粉) 10g NaNO3 1g
MgCO3 1g K2HPO4 0.3g
NaCl 0.5g Agar (琼脂) 20g
Distilled water (蒸馏水) 1000ml
50. 5 Be′Wort Agar (5 Be′麦芽汁琼脂)
适用范围：园弧青霉、少根根霉、日本根霉、爪哇根霉
51. 5 Be′Koji Extract Agar (5 Be′米曲汁琼脂)
适用范围：华根霉、三宝垄根霉
52. 发根农杆菌培养基（YEB）
Beef extract (牛肉浸膏) 5g/L Yeast extract (酵母膏) 1g/L
Peptone (蛋白胨) 5g/L Sucrose (蔗糖) 5g/L
MgSO4.7H2O 0.4g/100ml Agar (琼脂) 1.5g/100ml
pH 7.4
适用范围:青枯假单胞菌
53. 青枯菌培养基(Tm)
Peptone (蛋白胨) 10g Casein (干酪素水解物产) 1g
Glucose (葡萄糖) 5g Ddhro (纯水) 1000ml
Agar(琼脂) 15g pH 7.0
54. YM (Yeast Malt Agar)
酵母膏 3.0g 麦芽汁 3.0g
蛋白胨 5.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml
55. ISP 4
MgSO4.7H2O 1.0g NaCl 1.0g
(NH4)2SO4 2.0g CaCO3 2.0g
FeSO4.7H2O 0.001g MnCl2.7H2O 0.001g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
56. Trypton Soy Agar
胰蛋白胨17.0g 大豆胨 3.0g
葡萄糖 2.5g 琼脂20.0g
NaCl 5.0g K2HPO4 2.5g
蒸馏水1000ml
57. NA (Nutrient Agar)
牛肉膏 3.0g 蛋白胨 5.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
pH 6.6-7.0
58. 甘露(糖)醇琼脂(ATCC 1)
酵母膏 5.0g 蛋白胨 3.0g
甘露(糖)醇25.0g 琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
59. Marine琼脂2216 (ATCC 2)
蛋白胨 5.0g 酵母膏 1.0g
柠檬酸铁0.1g 溴化钾0.08g
NaCl 19.45g MgCl2 8.8g
Na2SO4 3.24g CaCl2 1.8g
KCl 0.55g NaHCO3 0.16g
NH4NO3 0.0016g Na2HPO4 0.008g
氯化锶0.034g 硼酸0.022g
硅酸钠0.004g 氟化钠0.0024g
琼脂15.0g 蒸馏水1000ml
pH 7.4-7.8
60. 兔血琼脂(ATCC 4)
牛心(取其浸液) 500.0g 胰蛋白胨(Tryptose) 10.0g NaCl 5.0g 琼脂15.0g
蒸馏水1000ml pH 6.6-7.0
61. 孢子形成培养基(ATCC 5)
酵母膏 1.0g 牛肉膏 1.0g
胰蛋白胨 2.0g 葡萄糖10.0g
FeSO4 微量琼脂15.0g
蒸馏水1000ml pH 7.2
62. Trypticase Soy Agar (ATCC 18) Trypticase Soy Broth 30.0g 琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
63. YPAD (ATCC 109)
酵母膏10.0g 蛋白胨20.0g
葡萄糖20.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml pH 7.0
64. SP (ATCC 432)
棉子糖 1.0g 蔗糖 1.0g
水解酪蛋白 2.5g 琼脂20.0g
MgSO4.7H2O 0.5g K2HPO4 0.25g
蒸馏水1000ml pH 自然
65. 胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂(TSA-YE)
胰蛋白胨15.5g 大豆蛋白胨 5.0g
NaCl 5.0g 酵母膏6.5g
琼脂15.0g 蒸馏水1000ml
pH 7.3
66. ATCC 20
蛋白胨 5.0g 酵母膏15.0g
K2HPO4 3.0g 葡萄糖2.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
pH 7.3-7.5
67. TY (Yeast Tryptone Agar)
蛋白胨10.0g 酵母膏 5.0g
葡萄糖 1.0g NaCl 5.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
pH 7.0
68. 硫醇(Thiol)培养基(ATCC 49)
示蛋白胨(Proteose Peptone No.3,Difco) 10.0g 酵母膏 5.0g 葡萄糖 1.0g NaCl 5.0g
硫醇复合物8.0g 琼脂 1.0g
p-氨基苯甲酸0.05g pH 6.9-7.3
69. Czapek＇Dox 琼脂培养基(ATCC 134)
Czapek＇Dox Broth 35.0g 琼脂15.0g
蒸馏水1000ml
70. MG/L
蛋白胨 5.0g 甘露醇 5.0g
谷氨酸钠 1.15g 生物素0.0001g
K2HPO4 0.25g NaCl 0.1g
MgSO4.7H2O 0.1g 酵母膏2.5g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
氯霉素(终浓度) 50μg/ml
pH 7.0
71. Eclb Broth
蛋白胨10.0g 酵母膏 5.0g
NaCl 5.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml 氨苄青霉素(终浓度) 300μg/ml
pH 7.0
72. Bennetts Agar (IFO 228)
酵母膏 1.0g 牛肉膏 1.0g
NZ Amine,type A 2.0g 葡萄糖10.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
pH 7.3
73. Harroldˊs M40Y (ATCC 319)
蔗糖400.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml
74. PSA (Potato Sucrose Agar)
土豆200g 蔗糖20g
蒸馏水1000ml 琼脂20g
pH 6.0-6.5
75. 培养基
牛肉膏300g 水解酪蛋白17.5g
可溶性淀粉 1.5g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml 磺胺嘧啶(终浓度) 100μg/ml
氨苄青霉素(终浓度) 100μg/ml pH 7.3-7.4
76. 马铃薯牛肉汁培养基
麦芽糖20.0g 牛肉膏 5.0g
蛋白胨 3.0g 马铃薯200.0g
pH 7.0-7.2
77. ISP 2
酵母膏 4.0g 麦芽汁10.0g
葡萄糖 4.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml pH 7.0
78. BHI (Brain Heart Infusion)
牛脑200.0g 牛心浸出汁250.0g
蛋白胨10.0g 葡萄糖 2.0g
NaCl 5.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml pH 6.8-7.2
79. YPG （Yeast Peptone Glucose）
酵母膏10.0g 蛋白胨20.0g
葡萄糖20.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml pH 7.0
80. 兔食琼脂培养基（ATCC 340）
兔食（商店出售）25.0g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml
*煮沸兔食，并浸泡1/2小时，用多层纱布过滤，加琼脂于滤液中。
81. 土豆琼脂(ATCC 423)
200克去皮土豆切成小块于1000ml自来水中煮沸1小时,用细棉布过滤.加进5.0mgMnSO4,pH调至6.8,用自来水定容至1000ml。加进15.0g琼脂，溶化，分装并灭菌。
82. 土豆浸汁加无机盐培养基(ATCC 470)
土豆2000g MnSO4.5H2O 0.02g
MgSO4.7H2O 0.4g ZnSO4.7H2O 0.01g
CuSO4. 5H2O 0.01g FeSO4.7H2O 0.1g
CaCl2.2H2O 0.1g K2HPO4 0.5g
* 称取200g去皮块状土豆,加入1000ml蒸馏水煮沸30分钟,多层纱布过滤,滤液中加入以上成分,溶解后定容至1000ml。
83. 无机盐淀粉琼脂培养基（ATCC 527）
可溶性淀粉10.0g K2HPO4 1.0g
MgSO4 1.0g NaCl 1.0g
（NH4）2SO4 2.0g CaCO3 2.0g
ZnSO4.7H2O 0.001g 琼脂20.0g
pH 7.0-7.4
84. (AS125)
新鲜鸡蛋15-16 蒸馏水375ml
2%孔雀(石)绿10.0g K4HPO4 1.5g
MgSO4.7H2O 0.375g 天冬酰胺2.25g
甘油7.5ml 土豆粉18.8g
85. 燕麦片(Oatmeal)琼脂培养基
燕麦片60.0g 琼脂12.5g
蒸馏水1000ml
* 将燕麦片加600ml水中，制成匀浆，加热至45-50oC，然后加入已溶化琼脂的另400ml水，121oC灭菌90分钟。
86. 细菌培养基（ATCC 573）
（NH4）2SO4 1.3g K2HPO4 0.37g
MgSO4.7H2O 0.25g CaCl2.2H2O 0.07g
FeCl3 0.02g 葡萄糖1.0g
酵母膏 1.0g 蒸馏水1000ml
用10N H2SO4 调pH至4.0。若配制固体培养基，为增强上述溶液的强度，pH需调至3.5，琼脂水溶液浓度为40g/L。两者分别高压灭菌，冷却至约50oC，无菌操作将两种溶液等体积混合，这一过程可避免琼脂被酸水解。
87. 碎肉培养基（ATCC 593）
牛肉（去脂肪）500.0g 蒸馏水1000ml
NaOH 25.0ml
* 所用瘦牛肉或马肉（碾）磨碎前需去脂肪和周围的组织。将肉、水、NaOH混合后边搅拌边加热，冷至室温，去掉表面油脂，过滤，留下肉末和滤液。滤液加蒸馏水至1000ml。滤液中加下列成分：
蛋白胨30.0g 酵母膏 5.0g
K2HPO4 5.0g 0.025%刃天青（Resazurin）溶液4.0ml
然后煮沸，冷却，加0.5g L-半胱氨酸HCl。H2O，pH调至7.0。在氧气、氮气（O2-freenitrogen）和3%氢气条件下，按1份碎肉加4-5份以上溶液的比例分装于每支试管。在氮气和氢气条件下，使用橡皮塞，快排气，高压灭菌15分钟。
88. YMPG
酵母膏 3.0g 麦芽汁 3.0g
蛋白胨 5.0g 葡萄糖10.0g
FeSO4.7H2O 0.1g 琼脂20.0g
蒸馏水1000ml pH 6.8
灭菌：110oC，35分钟
89. TGYM培养基(ATCC 679)
胰蛋白胨 5.0g 葡萄糖 1.0g
酵母膏 3.0g 蒸馏水1000ml
DL-蛋氨酸(DL-Meth 0.5g
90. TYG培养基(ATCC 741)
胰蛋白胨 3.0g 酵母膏 3.0g
葡萄糖 3.0g K2HPO4 1.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
pH 7.4
NaCl 0.5g NH4Cl 0.5g
葡萄糖(单独灭菌) 10.0g 维生素B1(单独灭菌) 1μg/ml pH 自然
92. ISP3 (IFO 245)
燕麦粉20.0g 微量元素溶液1ml
pH 7.2
微量元素：
FeSO4.7H2O 0.1g MnCl2.4H2O 0.1g
ZnSO4.7H2O 0.1g
93. Oatmeal Agar
琼脂 5.0g 蒸馏水500ml
加热溶化速溶燕麦粉40.0g 蒸馏水250ml
加热溶化后与琼脂液混合加水至1000ml pH 5.8
94. V8-Juice Agar (AYCC 343)
V-8 果汁200g CaCO3 3.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
pH 5.8
95. Czapek-Dox Agar (ATCC 312)
NaNO3 3.0g K2HPO4 1.0g
MgSO4.7H2O 0.5g KCl 0.5g
FeSO4.7H2O 0.01g 蔗糖(单独灭菌) 30.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
pH 5.6
96. GC培养基(ATCC 814)
A 液
琼脂 5.0g GC琼脂培养基(BBL 11275) 36.0g
蒸馏水500.0ml
B 液
干燥色牛血红蛋白(BBL 11871) 10.0g 蒸馏水500.0ml Iso Vitale X (BBL 11876) 10.0ml
97. 固氮螺菌培养基(ATCC 838)
K2HPO4 0.1g KH2PO4 0.4g
MgSO4.7H2O 0.2g NaCl 0.1g
CaCl2 0.02g FeCl3 0.01g
NaMoO4.2H2O 0.002g 苹果酸钠(Na malate) 5.0g
酵母膏0.05g 蒸馏水1000ml
pH 7.2-7.4
98. BG-11
NaNO3 1.5g K2HPO4 0.04g
MgSO4.7H2O 0.075g CaCl2.7H2O 0.036g
Na2CO3 0.02g 柠檬酸0.006g
柠檬酸铁0.006g *微量元素溶液A5 1ml
氨苄青霉素(终浓度) 50μg/ml 蒸馏水1000ml
琼脂20.0g
* 微量元素溶液A5
CuSO4.5H2O 0.079g Co(NO3)2.6H2O 49.4g 99. (Marine Agar)
蛋白胨 5.0g 酵母膏 1.0g
柠檬酸铁0.1g NaCl 19.45g
MgSO4.7H2O 5.9g KCl 0.55g
Na2SO4 3.24g CaCl2 1.8g
NaHCO3 0.16g KI 0.08g
微量元素10ml pH 7.0-7.6
* 微量元素溶液：
氯化锶0.034g 硅酸钠0.004g
蒸馏水1000ml H3BO4 0.022g
NaCl 0.0024g NaNO3 0.0016g
NaHPO4 0.008g 蒸馏水1000ml
100.(Yeast Starch Agar)
酵母膏 2.0g 可溶性淀粉10.0g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
pH 7.2-7.4
101.GYMC
葡萄糖 4.0g 酵母膏 2.0g
麦芽汁20.0g 琼脂20.0g
CaCO3 1.5g 蒸馏水1000ml
pH 6.8-7.0
102. LCSB
乳糖15.0g 玉米浆 5.0g
蛋白胨 5.0g NaCl 4.0g
MgSO4.7H2O 0.5g KH2PO4 0.6g
FeCl3.6H2O 0.005g CuSO4.5H2O 0.002g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
相对湿度65% pH 4.8
103.高氏1号(G)
可溶性淀粉20.0g KNO3 1.0g
K2HPO4 0.5g MgSO4.7H2O 0.5g
NaCl 0.5g FeSO4.7H2O 0.01g
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
pH 7.0-7.2
104.葡萄糖-酵母膏琼脂(ATCC 846)
酵母膏 5.0g 蛋白胨 1.0g
KH2SO4 1.0g NaCl 1.0g
琼脂20.0g 蒸馏水950.0ml
pH 6.8
补加50ml10%葡萄糖(葡萄糖溶液单独过滤灭菌)。105.Tep尿液(Uric Acid)琼脂(ATCC 894)
Na2HPO4.12H2O 9.0g KH2PO4 1.5g
MgSO4.7H2O 0.2g 柠檬酸铁铵(绿色) 1.2g
CaCl2 20.0mg MnCl2.4H2O 1.0mg
琼脂20.0 蒸馏水1000ml
pH 7.2
106.增强梭菌生长的培养基(ATCC 1053)
胰蛋白胨10.0g 牛肉膏10.0g
酵母膏 3.0g 葡萄糖 5.0g
NaCl 5.0g 可溶性淀粉1.0g
半胱氨酸盐酸盐0.5g 醋酸钠 3.0g
琼脂15.0g 蒸馏水1000ml
pH 6.6-7.0
107.酵母膏-甘露(糖)醇琼脂(ATCC 1205)
K2HPO4 0.5g MgSO4.7H2O 0.2g
NaCl 0.1g 甘露(糖)醇10.0g
酵母膏0.4g 蒸馏水加至1000ml
108.Tomato Dextrin Agar (ATCC 965)
番茄汁20.0g 糊精20.0g
酵母膏10.0g CoCl2.6H2O 5.0mg
琼脂20.0g 蒸馏水1000ml
pH 7.2-7.4
109.嗜热菌无机盐溶液(ATCC 1554)
FeSO4 1.0mg MgSO4.7H2O 200.0mg
Na2HPO4 210.0mg NaH2PO4 90.0mg
KCl 40.0mg CaCl2 15.0mg
NaNO3 0.25g NH4Cl 0.25g
微量元素溶液(见下面) 10.0ml
n-Heptadecane(C17) 0.1%(v/v) 蒸馏水1000ml 微量元素溶液：
CuSO4.5H2O 500mcg H3BO4 1.0mg
MnSO4.5H2O 7.0mcg ZnSO4.7H2O 7.0mg MoO3 1.0mg CoSO4.7H2O 18.0mcg
蒸馏水1000ml
110.醋杆菌培养基(AS 1)
葡萄糖100.0g 酵母膏10.0g
CaCO3 20.0g 琼脂15.0g
蒸馏水1000ml pH 6.8
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法 Ampicillin (100 mg/ml) IPTG (24 mg/ml) X-Gal (20 mg/ml) LB培养基■组份浓度 100 mg/ml Ampicillin ■配制量 50 ml ■配制方法 1. 称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中。 2. 加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。 3. 用0.22 μm滤器过滤除菌。 4. 小份分装（1 ml/份）后，-20℃保存。 ■组份浓度 24 mg/ml IPTG ■配制量 50 ml ■配制方法 1. 称量1.2 g IPTG置于50 ml离心管中。 2. 加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。 3. 用0.22 μm滤器过滤除菌。 4. 小份分装（1 ml/份）后，-20℃保存。 ■组份浓度 20 mg/ml X-Gal ■配制量 50 ml ■配制方法 1. 称量1 g X-Gal置于50 ml离心管中。 2. 加入40 ml DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解后， 定容至50 ml。 3. 小份分装（1 ml/份）后，-20℃避光保存。 ■组份浓度 1%（W/V）Tryptone，0.5%（W/V）Yeast Extract， 1%（W/V）NaCl ■配制量 1 L ■配制方法 1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。 Tryptone 10 g Yeast Extract 5 g NaCl 10 g 2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 滴加5 N NaOH（约0.2 ml），调节pH值至7.0。 4. 加去离子水将培养基定容至1 L。 5. 高温高压灭菌后，4℃保存。
实验常用培养基和基本特性
常用培养基及基本特性 1、RPMI-1640 Medium RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。 2、Minimum Essential Medium（MEM） 也称最低必需培养基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。成分简单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型，而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。 3、DMEM-高糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。 4、DMEM-低糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养。低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。 5、DMEM/F12 DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂，含有多种微量元素，和DMEM以1：1结合，称为DMEM/F12培养基（DME/F12medium），作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mMHEPES缓冲液。 6、McCoy’s 5A McCoy’s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种（如骨髓、皮肤、肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。
培养基的配置和灭菌
培养基的制备与灭菌 一、目的要求 1.掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。 2.掌握培养基的配置原则和方法。 3.掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。 二、基本原理 牛肉膏蛋白胨培养基：是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供细菌生长繁殖之用。 高压蒸汽灭菌：主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气阀继续加热。此时蒸汽不溢出，压力增大，沸点升高，获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性，而达到灭菌的目的。 三、实验材料 1.药品：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol/L的NaOH和HCl溶液。 2.仪器及玻璃器皿：天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。 3.其他物品：药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花等。 四、操作步骤 （一）玻璃器皿的洗涤和包装 1．玻璃器皿的洗涤 玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中．用毛刷刷洗，然后用自来水及蒸馏水冲净。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡，再用自来水及蒸馏水冲洗。洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。 2．灭菌前玻璃器皿的包装 （1）培养皿的包扎：培养皿由一盖一底组成一套，可用报纸将几套培养皿包成一包，或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内，加盖灭菌。包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。 （2）移液管的包扎：在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉)，它的作用是避免外界及口中杂菌进入管内，并防止菌液等吸入口中。塞入此小段棉花应距管口约0.5cm左右，棉花自身长度约1~1.5cm。塞棉花时．可用一外围拉直的曲别针、将少许棉花塞入管口内。棉花要塞得松紧适宜，吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。 先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条，然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端，约成45℃角，折叠纸条包住尖端，用左手握住移液管身，有手将移液管压紧．在桌面上向前搓转，以螺旋式包扎起来。上端剩余纸条，折叠打结，准备灭菌。 （二）液体及固体培养基的配制过程1．液体培养基配制 （1）称量（假定配制1000ml培养基） 按培养基配方比例依次准确地称取3.0g牛肉膏、10.0 g蛋白胨、5.0gNaCl放入烧杯（或1000ml刻度搪瓷杯）中．牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。 （2）溶化 在上述烧杯中先加入少于所需要的水量（如约700ml），用玻棒搅匀，然后，在石棉网上
细胞培养基种类
细胞培养基的选择及常用数据库 日期：2012-04-13来源：未知作者：网友点击：次细胞实验技术 经典的培养基有很多种，Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用最广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。 ◆MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的，其中增加了组分的范围及 浓度。 ◆ Dulbecco改良的BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的，现在常用于 贴壁细胞的培养。DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍，维生素浓度是MEM的4倍，采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L，后来为了某些细胞的生长需要，将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L，这就是大家常说的低糖和高糖了。 ◆ aMEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸，它可广泛应用于各种细 胞类型，包括对营养成分要求苛刻的细胞。 ◆ Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的，现在也广泛应用于 克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用，得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物，这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。 ◆ RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的，现在已广泛应用于悬浮细胞 的培养。 以前经常听到有人问，这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单，也可以好复杂。此话怎讲?如果这种细胞是购自ATCC或其他的细胞库，那很简单，问供应商就行了。或者找到相关的文献，作为参考。Invitrogen网站上有一个Cell Line Database的工具，也很好用。选择你感兴趣的细胞类型，它就会弹出推荐的培养基、血清和转染试剂等，有时还有优化好的转染步骤，很方便。Sigma网站上也有一个Media Expert，包括了培养基所有成分的功能描述、使用推介和参考文献等，它还
常用细菌培养基配方
常用抗生素 氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml） 溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml） 溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 甲氧西林（methicillin）（100mg/ml） 溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。 卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml） 溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml） 溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 链霉素（streptomycin）（50mg/ml） 溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml） 溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 四环素（tetracyyline）（10mg/ml） 溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 常用培养基 LB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨10g 酵母提取物5g 氯化钠10g 如果需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。(实验室一般都不调PH) SOB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨20g 酵母提取物5g 氯化钠0.5g 1 mol/L 氯化钾2.5ml
实验室常用培养基大全
表皮葡萄球菌 产气肠杆菌 鼠伤寒沙门氏菌 单核增生李斯特氏菌 大肠埃希氏菌 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 表面接触碟/表面接触皿 https://www.wendangku.net/doc/f717590482.html, 金黄色葡萄球菌 酿酒酵母菌 脑心浸出液肉汤(BHI) 品红亚硫酸钠液体培养基 MFC肉汤 CFU培养基基础 4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基蛋白胨 胰蛋白胨 胰酪蛋白胨 酵母浸粉 大豆蛋白胨 酸水解酪蛋白 明胶蛋白胨 马铃薯浸粉 琼脂粉 琼脂粉 动物组织胃蛋白酶消化物 肉胃酶消化物 牛肉浸粉 牛肝浸粉 牛肝浸粉 牛心浸粉 多价蛋白胨(多聚蛋白胨) 月示蛋白胨 玉米浸出粉 一次性培养皿 表面接触碟 一次性培养皿（密理博浮游菌采样）表面接触碟/表面接触皿 https://www.wendangku.net/doc/f717590482.html, 金属玻璃培养皿（可重复使用） 金属玻璃表面接触碟
嗜热脂肪肝菌芽孢菌片（ATCC7953 枯草杆菌黑色变种芽孢菌片（ATCC9372）121度高压灭菌化学指示卡 132℃压力蒸汽灭菌指示卡 葡萄糖 氯化钠 L-半胱氨酸盐酸盐 氧化酶试剂 三磷酸腺苷二钠盐（ATP） 费尔休林（无吡啶） SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 SDS-PAGE电泳液 SDS-PAGE上样缓冲液5倍 考马斯亮蓝R-250染色套装 铜绿假单胞菌 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 大肠埃希氏菌 大肠埃希氏菌 产气肠杆菌 乙型副伤寒沙门氏菌 枯草芽孢杆菌 白色念珠菌 表面接触碟/表面接触皿 https://www.wendangku.net/doc/f717590482.html, 黑曲霉 生孢梭菌 大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉汤) 大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉汤) 无菌大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉? 大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉汤) 大豆酪蛋白消化液培养基 大豆酪蛋白琼脂培养基 大豆酪蛋白琼脂培养基 无菌大豆酪蛋白琼脂培养基 卵磷脂-吐温80营养琼脂培养基基础 胰化大豆坚固绿琼脂(TSFA) 营养肉汤(NB) 营养琼脂(NA) 0.5%葡萄糖肉汤培养基 pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液 三糖铁琼脂培养基(TSI) 三糖铁琼脂培养基 R2A琼脂
实验室常用培养基的配制方法
五、实验室常用培养基的配制方法 Ampicillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml) 组份浓度100 mg/ml Ampicillin 配制量50 ml 配制方法 1.称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中。 2.加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。 3.用0.22 μm过滤膜过滤除菌。 4.小份分装(1 ml/份)后，-20℃保存。 IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml) 组份浓度24 mg/mL IPTG 配制量50 mL 配制方法 1.称1.2 g IPTG置于50 ml离心管中。 2.加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。 3.用0 22 μm过滤膜过滤除菌。 4小份分装(1 ml，份)后，-20℃保存。 X-Gal (20 mg/ml) 组份浓度20 mg/ml X-Gal 配制量50 ml 配制方法 1.称量l g X-Gal置于50 ml离心管中。 2.加入40 ml DMF(二甲基甲酰胺)，充分混合溶解后，定容至50 ml。 3.小份分装(1 ml/份)后，-20℃避光保存。 LB培养基 组份浓度1%(W/V)Tryptone(胰蛋白胨)，0.5%(W/V)Yeast Extract(酵母提取物)，1%(W/V)NaCl 配制量 1 L 配制方法 1.称取下列试剂，置于l L烧杯中。 Tryptone 10 g Yeast Extract 5 g NaCl 10 g 2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3.滴加5 N NaOH(约0.2 m1)，调节pH值至7.0。 4.加去离子水将培养基定容至1 L。 5高温高压灭菌后，4。C保存。 LB/Amp培养基 组份浓度 1%(W/V) Tryptone 0.5%(W/V) Yeast Extract 1%(W/V) NaCl 0.1 mg/ml Ampicillin
第五章 微生物的营养和培养基习题整理
第五章微生物的营养和培养基 一、选择题 1. 大多数微生物的营养类型属于：（） A. 光能自养 B. 光能异养 C. 化能自养 D. 化能异养 2. 蓝细菌的营养类型属于：（） A．光能自养 B. 光能异养C．化能自养 D. 化能异养 3. 碳素营养物质的主要功能是：（） A. 构成细胞物质 B. 提供能量 C. A，B 两者 4. 占微生物细胞总重量70%-90% 以上的细胞组分是：（） A. 碳素物质 B. 氮素物质 C. 水 5. 能用分子氮作氮源的微生物有：（） A. 酵母菌 B. 蓝细菌 C. 苏云金杆菌 6. 大肠杆菌属于（）型的微生物。 A. 光能无机自养 B. 光能有机异养 C. 化能无机自养 D. 化能有机异养 7. 自养型微生物和异养型微生物的主要差别是：（） A. 所需能源物质不同 B. 所需碳源不同 C. 所需氮源不同 8. 基团转位和主动运输的主要差别是：（） A. 运输中需要各种载体参与 B. 需要消耗能量 C. 改变了被运输物质的化学结构 9. 单纯扩散和促进扩散的主要区别是：（） A. 物质运输的浓度梯度不同 B. 前者不需能量，后者需要能量 C. 前者不需要载体，后者需要载体 10. 微生物生长所需要的生长因子（生长因素）是：（） A. 微量元素 B. 氨基酸和碱基 C. 维生素 D. B，C二者 11. 培养基中使用酵母膏主要为微生物提供：（） A. 生长因素 B. C 源 C. N 源 12. 细菌中存在的一种主要运输方式为：（） A. 单纯扩散 B. 促进扩散 C. 主动运输 D. 基团转位 13. 微生物细胞中的C素含量大约占细胞干重的：（） A. 10% B. 30% C. 50% D.70%
实验一常用器皿包扎与培养基的配制和灭菌
实验一常用器皿包扎与培养基的配制和灭菌 一、实验目的 1学会常用器皿包扎方法 2学习和掌握配制培养基的一般方法和步骤 3学会实验室灭菌锅的使用方法 二、常用器具和仪器 试管(testtube)，德汉氏小管(Durhamtube)，玻璃吸管 (glasspipette)，吸器，微量加样器(micropipette)，吸嘴(tip)，培养皿(petri dish)，三角瓶(erlenmeyer flask)，接种铲(inoculatingshovel),玻璃涂布器(glassspreade)，接种环(inoculatingloop)，接种钩(inoculating hook)，接种针(inoculating needle)，小塑料离心管(Eppendorf tube)，滴瓶(dropper bottle )，双层瓶(double bottle)，酒精灯⑻ cohol burner)，煤气喷头(coal gas sprinklerhead，试剂瓶，量筒，烧杯，温度计，石棉网，漏斗，烘箱，卧式灭菌锅，手提式灭菌锅，无菌操作台/ 室，过滤除菌设备，厌氧操作设备，小型发酵罐，离心机，培养箱/摇床，冷冻干燥机，蒸馏水器，超声波清洗仪，磁力搅拌器。 三、玻璃器皿的包装 1、培养皿的包装方法一：用旧报纸密密包紧，一般以5-8 套培养皿作一包。包好后用干热或湿热灭菌(见无菌操作技术)。 方法二：将培养皿放入金属(不锈钢)筒内，干热灭菌。金属筒配有盖子，内部还有一个可以放培养皿的带底框架。框架可以从筒内提出，以便装取培养皿。 包好的培养皿 金属筒和内部的框架 塑料培养皿架 2、吸管的包装
实验室常用培养基
实验用培养基配制 > 1 ．牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）7.6 ～1000mL ，pH7.4 10g ，NaCl 5g ，水牛肉膏3g ，蛋白胨) 用于放线菌培养号培养基 ( 2. 高氏 1 可溶性淀粉20g ，KNO 3 1g ，NaCl 0.5g ，K 2 HPO 4-·3H 2 O 0.5g ，MgSO 。～7.6 ，水1000mL ，pH7.4 7H 2 O 0.5g, 4 ·，FeSO4 ·7H 2 O 0.01g 配制时注意，可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。）培养基（用于从土壤中分离真菌）．马丁氏（ Martin 3 K 2 HPO 4 1g ，MgSO 4 ·7H 2 O 0.5g ，蛋白胨5g ，葡萄糖10g ，1/3000 孟。30min 121 ℃湿热灭菌100mL, 水900mL ，自然pH ，加拉红水溶液 30 μg/mL). 链霉素含量为时加入链霉素( 待培养基融化后冷却55 ～60 ℃) 用于霉菌或酵母菌培养马铃薯培养基(PDA)( 4. 1000mL ) 20g, 水去皮)200g, 蔗糖( 或葡萄糖马铃薯( 配制方法如下: 将马铃署去皮, 切成约2cm 2 的小块, 放入1500mL 的烧杯中煮沸30min, 注意用玻棒搅拌以防糊底, 然后用双层纱布过滤, 取其滤液. 酵母菌用葡萄糖霉菌用蔗糖, 1000mL, 加糖, 再补足至自然pH. ) )( 用于霉菌培养 5. 察氏培养基 ( 蔗糖硝酸钠培养基蔗糖30g, NaNO 3 2g, K 2 HPO 4 1g, MgSO 4 ·7H 2 O 0.5g, KCl 0.5g, FeSO4 ·7H 7.2 ～2 O 0.1g, 水1000mL, pH7.0 ) ( 用于支原体培养培养基6. Hayflik ～15g, pH7.8 琼脂10g, NaCl 5g, 蛋白胨)1000mL, 或浸出液( 牛心消化液． 8.0, 分装每瓶70mL, 121 ℃湿热灭菌15min, 待冷却至80 ℃左右, 每70mL 中加入马血清 20mL,25% 鲜酵母浸出液10mL, 15 醋酸铊水溶液2.5mL, 青霉素 G 钾盐水溶液(20 万单位以上)0.5mL, 以上混合后倾注平板. 注意: 醋酸铊. , 需特别注意安全操作是极毒的药品 ) 醋酸钠培养基培养基 (McCLary) ( 7 ．麦氏葡萄糖0.1g, KCl 0.18g ，酵母膏0.25g ，醋酸钠0.82g, 琼脂l.5g ，蒸馏水 15min 。℃湿热灭菌l00mL 。溶解后分装试管，1l5 ) ．反应和甲基红试验用于 V.P 8 ．葡萄糖蛋白胨水培养基 ( 蛋白胨0.5g ，葡萄糖0.5g ，K 2 HPO 4 0.2g ，水100mL, pH7.2, 1l5 ℃湿热20min 。灭菌 ) ( 用于吲哚试验9 ．蛋白胨水培养基。湿热灭菌20min ～7.4, 121 ℃蛋白胨10g, NaCl 5g, 水1000mL ，pH7.2 ) ( 用于细菌糖发酵试验10 ．糖发酵培养基蛋白胨0.2g, NaCl 0.5g, K 2 HPO 4 0.02g ，水100mL ，溴麝香草酚蓝( 质量分数1% 水溶液) 0.3mL ，糖类lg 。分别称取蛋白胨和NaCl 溶于热水中，调pH 至7.4 ，再加入溴麝香草酚蓝( 先用少量质量分数95% 乙醇溶解后，再加水配成质量分数1% 水溶液) ，加入糖类，分装试管，装量 4 ～5cm 高，并倒放入一杜氏
各种培养基配置
培养基 培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素。 按所用原料不同，可分为两类：应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的，称为天然培养基；应用化学药品配成并标明成分的，称为合成培养基或综合培养基。化学试剂中的培养基，大多为合成培养基。由于液体培养基不易长期保管，现在均改制成粉末。培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在2~6。C的冰箱内。 常见培养基有： 1、细菌培养基 配方一牛肉膏琼脂培养基 牛肉膏0.3克，蛋白胨1.0克，氯化钠0.5克，琼脂 1.5克， 水100毫升 在烧杯内加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水，用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2～7.6,分装在各个试管里，加棉花塞，用高压蒸汽灭菌30分钟。 配方二马铃薯培养基 取新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀细细剁成肉末后，加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好记号，煮沸，转用文火炖2小时。过滤，滤出的肉末干燥处理，滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心，灭菌，备用。 配方三根瘤菌培养基 葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克 碳酸钙3克硫酸镁0.2克 酵母粉0.4克琼脂20克 水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升
实验室常用培养基配方
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031*-2./4,+ 5 9678 :UWPWTW JOSULKNRSQSMV KIUIQSM SRQORL;Y``^HGGaaaF`WZW_WFX][FX\ i x if ]wZjnOFp>hfio y wv j |{l @hfoj y w j v|{l ?ihh 21< aU jfki /wv j |{l M ijfml /w j v|{l r qh 21I_Xyix@TAaUN@R_Xy iJbu ihh 21@LkLm[V 实验用培养基配制> 1 ．牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养） 牛肉膏3g，蛋白胨10g , NaCI 5g，水1000mL , pH7.4 ?7.6 2. 高氏1 号培养基（用于放线菌培养） 可溶性淀粉20g , KNO 3 1g , NaCI 0.5g , K 2 HPO 4- 3H 2 O 0.5g , MgSO 4 7H 2 O 0.5g, , FeSO4 -7H 2 O 0.01g，水1000mL , pH7.4 ?7.6。 配制时注意，可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。 3 ．马丁氏（Martin ）培养基（用于从土壤中分离真菌） K 2 HPO 4 1g , MgSO 4 -7H 2 O 0.5g，蛋白胨5g，葡萄糖10g , 1/3000 孟加拉红水 溶液100mL,水900mL，自然pH , 121 C 湿热灭菌30min 。 待培养基融化后冷却55?60 C时加入链霉素（链霉素含量为30卩g/mL）. 4. 马铃薯培养基（PDA）（用于霉菌或酵母菌培养） 马铃薯（去皮）200g, 蔗糖（或葡萄糖） 20g, 水1000mL 配制方法如下: 将马铃署去皮, 切成约2cm 2 的小块, 放入1500mL 的烧杯中煮沸 30min, 注意用玻棒搅拌以防糊底, 然后用双层纱布过滤, 取其滤液加糖, 再补足至 1000mL, 自然pH. 霉菌用蔗糖, 酵母菌用葡萄糖. 5. 察氏培养基（蔗糖硝酸钠培养基）（用于霉菌培养） 蔗糖30g, NaNO 3 2g, K 2 HPO 4 1g, MgSO 4 7H 2 O 0.5g, KCI 0.5g, FeSO4 7H 2 O 0.1g, 水1000mL, pH7.0 ?7.2 6. HayfIik 培养基（用于支原体培养） 微生物实验室常用仪器设备清单 微生物学实验室是生物学领域的一个基本实验室，对于一个完备的微生物学实验室，我们需要配置哪些仪器呢? 1、超净工作台 微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养，那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境。 2、培养箱? 培养箱有多种类型，它的作用在于为微生物的生长提供一个适宜的环境。生化培养箱只能控制温度，可作为一般细菌的平板培养;霉菌培养箱可以控制温度和湿度，可作为霉菌的培养;CO2培养箱适用于厌氧微生物的培养。 ES5000-6S型智能配平仪 3、天平 天平用于精确称量各类试剂。实验室常用的是电子天平，电子天平按照精度不同有不同的级别。 4、微生物均质器 用于从固体样品中提取细菌。用微生物均质器制备微生物检测样本具有样品无污染、无损伤、不升温、不需要灭菌处理，不需洗刷器皿等特点，是微生物实验中使用较为方便的仪器。 5、菌落计数器 菌落计数仪可协助操作者计数菌落数量。通过放大，拍照，计数等方式准确的获取菌落的数量。有些高性能的菌落计数器还可连接电脑完成自动计数的操作。 6、微波炉/电炉? 用于溶液的快速加热，微生物固体培养基的加热溶化。 7、高压灭菌锅? 微生物学所用到的大部分实验物品、试剂、培养基都应严格消毒灭菌。灭菌锅也有不同大小型号，有些是手动的，有些是全自动的。用户需要根据自己的需要选购。 8、移液器? 液体量器用于精密量取各类液体。常见的液体量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯。? 9、低温冰箱? 冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器。微生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存，有些要求是负20度保存，实验人员一定要看清试剂的保存条件，放置在恰当的温度下保存。? 10、生物安全柜? 微生物实验中涉及的试剂和样品微生物有些是有毒的，对于操作人员来说伤害较大。为了防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散，可以利用生物安全柜对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全保护。? 11、摇床? 摇床是实验室常用的一种仪器，在微生物实验操作过程中，液体培养基培养细菌时需要在特定温度下振荡使用。 12、纯水装置? 超纯水器，制造出各精密检测无杂质、无污染的纯水， 一、实验目的 1了解并掌握培养基的配制、分装方法； 2掌握各种实验室灭菌方法及技术。 二、实验原理 培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外，培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。 琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。加琼脂制成的培养基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固。但多次反复融化，其凝固性降低。 任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌，以备纯培养用。一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。 三、实验材料 1、器皿及材料 天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、分装架、移液管及移液管筒、培养皿及培养皿盒、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、酒精灯、棉花、线绳、牛皮纸或报纸、纱布、乳胶管、电炉、灭菌锅、干燥箱。 2、药品试剂 蛋白胨、牛肉膏、NaCl、K2HPO4、琼脂、NaNO3、KCl、MgSO4、FeSO4、蔗糖、麦芽糖、木糖、葡萄糖、半乳糖、乳糖、土豆汁、豆芽计、磷酸铵、5%NaOH溶液、5%HCl溶液。 3、流程 称药品→溶解→调pH值→融化琼脂→过滤分装→包扎标记→灭菌→摆斜面或倒平板。 四、实验步骤 1 培养基的制备 1.1 称量药品 根据培养基配方依次准确称取各种药品，放入适当大小的烧杯中，琼脂不要加入。蛋白胨极易吸潮，故称量时要迅速。 1.2 溶解 用量筒取一定量(约占总量的1/2)蒸馏水倒入烧杯中，在放有石棉网的电炉上小火加热，并用玻棒搅拌，以防液体溢出。待各种药品完全溶解后，停止加热，补足水分。如果配方中有淀粉，则先将淀粉用少量冷水调成糊状，并在火上加热搅拌，然后加足水分及其它原料，待完全溶化后，补足水分。 1.3 调节pH 根据培养基对pH的要求，用5%NaOH或5%HC1溶液调至所需pH。测定pH可用pH试纸或酸度计等。 1.4 溶化琼脂 固体或半固体培养基须加入一定量琼脂。琼脂加入后，置电炉上一面搅拌一面加热，直至琼脂完全融化后才能停止搅拌，并补足水分(水需预热)。注意控制火力不要使培养基溢出或烧焦。 1.5 过滤分装 分装时注意不要使培养基沾染在管口或瓶口，以免浸湿棉塞，引起污染。液体分装高度以试管高度的1/4左右为宜。固体分装装量为管高的1/5，半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜；分装三角瓶，其装量以不超过三角瓶容积的一半为宜。 微生物实验室培养基配方大全 一、糖发酵管 成分： 牛肉膏 5g 蛋白胨 10g 氯化钠 3g 磷酸氢二钠2g 0.2％滇麝香草酚蓝溶液 12mL 蒸馏水 1000mL PH 7.4 制法 1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5％加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min。 2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶1000 mL，121℃高压灭菌15min。另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内，以无菌操作分装小试管。 注： 蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。 试验方法： 从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36℃±1℃培养，一般观察2～3d。迟缓反应需观察14~30d。 二、乳糖胆盐发酵管 成分： 蛋白胨 20g 猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g 乳糖 10g 0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL 蒸馏水 1000mL 制法：将蛋白胨，胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10 mL，并放入一个小倒管，115℃高压灭菌15min。 注： 双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。 三、5％乳糖发酵管 成分： 蛋白胨 0.2g 氯化钠 0.5g 乳糖 5g 2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL 蒸馏水 100mL pH 7.4 制法：除乳糖以外的各成分：溶解于50mL蒸馏水内，校正pH。将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内，分别灭菌121 ℃ 15min，将两液混合，以无菌操作分装于灭菌小试管内。 注： 在此培养基内，大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。 四、缓冲葡萄糖蛋白胨水（MR和VP试验用） 成分： 磷酸氢二钾 5g 多胨 7g 葡萄糖 5g 蒸馏水 1000mL 制法：溶化后校正pH，分装试管，每管1mL ，121℃高压灭菌15min。 甲基红（MR）试验：自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～5d，哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。鲜红色为阳性， 小结：常用10种培养基的配置和质控标准 （1）基础肉汤 成分和配制方法： 蛋白胨10g NaCl5g 牛肉膏5g 酵母膏3g DW1L pH～ 15磅30min高压灭菌，倾注无菌试管备用。 每次新配制时做质控 阳性质控：ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种基础肉汤中，35℃温箱24h肉汤混浊。 无菌试验：<100管抽检5%,>100管随机抽取10管未接种的基础肉汤35℃温箱24h培养，无细菌生长。 平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做 用途：供培养对营养要求不高的细菌增菌用；作其他选择培养基的基础液。 储存 干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存一个月 （2）普通营养琼脂 成分和配制方法： 基础肉汤100ml 琼脂2g 15磅30min高压灭菌，倾注平板备用。 注：可购买国内生产的瓶装营养琼脂粉，按上面的说明配制。 质量控制： 质控频度每次新配制时做质控 质控方法 阳性质控：ATCC 25923金黄色葡萄球菌或ATCC25922大肠埃希菌接种营养琼脂上，35℃温箱24h细菌生长良好。 无菌试验：<100块抽检5%,>100块随机抽取10管未接种的营养琼脂35℃温箱24h培养，无细菌生长。 平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做 用途： 供培养对营养要求不高的细菌。 作无糖基础培养基。 加血成血平板。 加血加热75℃以上，再加上生长添加剂就成巧克力平板。 储存 干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存半个月 （3）葡萄糖肉汤 成分和配制方法： 蛋白胨10g 朊胨10g NaCl5g 牛肉膏5g 酵母粉3g 葡萄糖4g 枸橼酸钠3g 硫酸镁3g DW1L pH～ %酚红5ml 15磅30min高压灭菌，备用 质量控制： 质控频度每次新配制时做质控 质控方法 阳性质控：ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种葡萄糖肉汤中，35℃温箱24h肉汤混浊。 无菌试验：<100管抽检5%,>100管随机抽取10管未接种的葡萄糖肉汤35℃温箱24h培养，无细菌生长。 平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做 用途：供培养对营养要求不高的细菌增菌用。 6 储存 干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。 培养基：2-8℃保存一个月 （4）血液琼脂平板 成分和配制方法：（法国生物梅里埃成品培养基） 4g琼脂基础+100mL蒸馏水 高压灭菌（15磅、121℃）20min 冷却至50℃加入5%-10%无菌羊（兔）血 倾注于无菌平皿内（φ9mm）每一个平皿分装13~15ml。 质量控制： 质控频度每次新配制时做质控 质控方法 阳性质控：ATCC 6303肺炎链球菌（或质控菌株）和ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种于血液琼脂，35℃温箱24h细菌生长良好。ATCC 6303肺炎链球菌为α溶血。ATCC 25923金黄色葡萄球菌为β溶血。 常用微生物培养基配方 大全 Pleasure Group Office【T985AB-B866SYT-B182C-BS682T-STT18】 （1）分离细菌时，在培养基中加入浓度为50U/ml制霉菌素，可以抑制霉菌和菌的生长。 （2）（2）分离放线菌时，在样品中加入%十二烷基磺酸钠（SDS）不仅可以抑制细菌的生长，还能 激活放线菌孢子的萌发。加入氟哌酸（5mg/L）+制霉菌素（50mg/L）+青霉素（L）也可以有效地抑 制细菌和真菌，而不影响放线菌的生长。 （3）（3）分离霉菌和菌时，在培养基中加入青霉素、链霉素和四环素各30U/ml，可以抑制细菌和 放线菌生长。 （4）（4）分离根霉和毛霉时，由于这些微生物的菌丝易蔓延成片，难以得到纯化的菌落，通常在 培养基中添加%去氧胆酸钠或山梨醇防止菌丝蔓延，使菌落长得小而紧密。 （5）一般用于分离单一目的微生物的培养基中均含有抑制其他微生物的抑制剂，这些专用的抑制剂 在小型实验室配制较麻烦，现已有成品供应，只要直接加入基础培养基即可。如氨苄西林，主要用 于分离亲水气单孢菌。 （6） 1、细菌培养基 配方一牛肉膏琼脂培养基 牛肉膏克，蛋白胨克，氯化钠克，琼脂克， 水 1000毫升 在烧杯内加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水，用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到～,分装在各个试管里，加棉花塞，用高压蒸汽灭菌30分钟。 配方二马铃薯培养基 取新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀细细剁成肉末后，加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好记号，煮沸，转用文火炖2小时。过滤，滤出的肉末干燥处理，滤液pH值调到左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心，灭菌，备用。 芽孢杆菌常用培养基配方 （按理说，该实验的所有培养基都在这了，后红字更为清楚些。。。摘自百度） 一、肉汤琼脂培养基：蛋白胨10g ，牛肉膏15g ，NACL15g ，蒸 馏水1000ml ，琼脂18g 。调节PH7.2,0.1MPA20min 灭菌。如果用液体做培养基，则去掉琼脂即可。100 mL/组，其中20 mL 液体培养基/250 mL△中（内装玻璃珠10颗）；50 mL固体斜面培养基分装在试管中：5mL/支，10支。 2、或是（J-琼脂培养基：胰蛋白胨5g,酵母膏15g, 磷酸 氢二钾3g,葡萄糖2g, 琼脂20g, 蒸馏水1000ml。调节 PH7.3—7.5Mpa 30min灭菌。） 二、过氧化氢酶测定 1、试剂：3-10%过氧化氢 2、接种与培养：一般将测试菌种接种于肉汤琼脂斜面上，30度下 培养1-2天。 3、试验方法：取一干净载玻片，在上面加一滴3-10%的双氧水， 挑取1环1-2天的的菌苔，在双氧水溶液中涂抹，如有气泡出 现（O2），作为过氧化氢酶阳性，无泡为阴性。也可以将过氧 化氢液直接加入斜面上，观察气泡的产生。 三、需氧性测定 1、培养基：酪素水解物20g,葡萄糖 10g, ,NACL5g,HOCH2SO3Na1g,HSCH2COONa2g,琼脂15g,蒸馏水1L。调节PH7.2，分装试管，0.06Mpa，30min灭菌，培养基不摆斜面。 2、接种与观察：用一小环的肉汤菌液，穿刺接种到上述培养基中 （穿刺管底），一般与30 度培养3-7天观察结果。若芽孢杆菌在琼脂柱表面生长为好氧菌，沿穿刺线生长则为厌氧菌。四、酪素水解（用于检测不同种类的芽孢杆菌是否具有分解酪素的 特点） 1、培养基 （1）脱脂牛奶制备取新鲜牛奶，煮沸后去掉上层油脂，再经离心脱脂（3000r/min,10min）,除去上层油脂，即为脱脂牛奶。（2）牛奶平板的制备取50ml的脱脂牛奶放入一只三角瓶中，另外称1.5g琼脂置于含有50ml蒸馏水的另外3只三角瓶中，然后将两液分开灭菌，0.06Mpa-20min，带冷至45-50摄氏度时， 速将两液混匀倒平板，即为牛奶平板。将平板倒置过夜，使表面水分干燥。 2、接种与观察 1、营养琼脂（普通琼脂） 成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤） 100毫升 琼脂（视天气，琼脂质量而定） 制法：将上物加热溶解，补足水，调ph至7．6，过滤分装121℃，高压灭菌15分钟。 用途：作普通琼脂平皿。 2、血琼脂平板（BA） 制法：取营养琼脂（PH7．6），加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管，制成斜面备用。 用途：1． 一般棉拭子均接种此培养基。 2．尿液，脓液 3．分离细菌标本用。 3、基础培养基 （肉膏汤BB） 成份：蛋白胨 10克 牛肉膏 5克 氯化钠 5克 水 1000毫升 制法：将以上各物称好，加水煮沸溶解，用1NNOH校正PH至7．6，过滤分瓶， 1 121℃高压灭菌，20分钟备用。 用途：1 作耐药试验，增菌用分装小管。 2 作普通琼脂斜面。 4、血液培养基（大管肉汤培养基） 成份：1 新鲜牛肉浸液 1000毫升 2 PABA（对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕） 1g% 1毫升 3 MgSO 4 [相当于0．493/100毫升] 49．3% 1毫升 4 枸椽酸钠 0．3g 制法：1 将1号，4号混合液，2号，3号液分装高压灭菌。 2 取灭菌1，4号混合液用无菌法加入PABA，MgSO4，再分管，行无菌试验三天方可使用。 用途：作血，骨髓培养用。 5、肠道杆菌培养基（伊红美兰琼脂） 成份： 蛋白胨 10克 乳糖 10克 氯化钠 5克 琼脂 25（22）克 水 1000毫升 2%伊红溶液20毫升 0．5%美兰溶液 20毫升 2实验室常用培养基
微生物实验室常用仪器设备清单 (1)
培养基配制、分装和灭菌
微生物实验室常见20种培养基配方大全
常用10种培养基的配置和质控标准
常用微生物培养基配方大全
芽孢杆菌常用培养基配方
常用微生物培养基手册大全