大鼠胰岛素(Insulin)ELISA试剂盒说明书

大鼠胰岛素(Insulin)酶联免疫分析（ELISA）

试剂盒使用说明书

厦门慧嘉生物科技有限公司

本试剂盒仅供研究使用。

药品名称：

通用名：大鼠胰岛素(Insulin)酶联免疫分析试剂盒

使用目的：

本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中胰岛素(Insulin)含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠胰岛素(Insulin)水平。用纯化的大鼠抗-胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(Insulin)与HRP标记的胰岛素（INS）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠胰岛素(Insulin)浓度。

试剂盒组成

1 20倍浓缩洗涤液30ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶

2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品（18mU/L）0.5ml×1瓶

3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶

4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份

5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张

6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标

准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为12 mU/L，8mU/L ，4 mU/L，2 mU/L， 1 mU/L）。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样

品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样

品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此

重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色

15分钟.

10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止

液后15分钟以内进行。

计算

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

检测范围：

15.6 nIU/ml-1000 nIU/ml

灵敏度：

3.9 nIU/ml

规格：

96人份/盒

保存条件及有效期

1．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月

小鼠胰岛素(Insulin)说明书

小鼠胰岛素(Insulin)酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中胰岛素(Insulin)含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(Insulin)水平。用纯化的小鼠胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(Insulin)，再与HRP标记的胰岛素(Insulin)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素(Insulin)含量。 试剂盒组成： 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后， 离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞

胰岛素(INS)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求yuande

胰岛素（INS）测定试剂盒（化学发光免疫分析法） 适用范围：本产品用于体外定量测定人血清或血浆中的Ins的含量。 1.1 产品规格 试剂盒规格为48人份/盒、96人份/盒。 1.2 主要组成成分 表1 胰岛素（INS）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）主要组成成分 a) 酶结合物 以含牛血清白蛋白的缓冲液配制的联接HRP的INS单克隆抗体，其中含 ProClin300做为防腐剂。 b) 校准品 校准品主要以牛血清白蛋白的缓冲液为稀释液，其中含ProClin300做为防腐剂，校准品A～F中含有INS的目标浓度分别为0、3.0 mIU/L、10 mIU/L、 32 mIU/L、120 mIU/L、310 mIU/L。 校准品具体浓度详见标签及试剂盒参数IC卡。

c) 发光液 发光液A主要成份为鲁米诺，发光液B主要成份为过氧化脲，两者均以pH8.6 的Tris-HCl缓冲液配制。 d) 包被微孔板 包被有INS单克隆抗体白色聚苯乙烯微孔板，用铝箔袋真空包装。 e) 质控品（备选） 以正常人血清为基质制备的冻干品，其中含ProClin300做为防腐剂，其靶值浓度范围QCⅠ（3.74 mIU/L～15.15 mIU/L）QCⅡ（94.26 mIU/L～233.41 mIU/L）。质控品具体浓度详见质控品参数卡。 不同批号试剂盒中的相同组分不能互换。 2.1 外观 a）液体组分应澄清，无沉淀或絮状物，实际装量应不小于标示装量； b）冻干组分呈白色或淡黄色疏松体，加水后应在3分钟内完全溶解； c）所有组分均无包装破损，标示清楚。 2.2 准确度 试剂盒内校准品与相应浓度的国家标准品（编号：150519）同时进行分析测定，用双对数数学模型拟合，要求两条剂量-反应曲线不显著偏离平行（t检验）；以国家标准品为对照品，试剂盒内校准品的实测值与标示值的效价比应在 0.900～1.100之间。 2.3剂量-反应曲线的线性 用双对数数学模型拟合，在[3.0，300] mIU/L范围内，剂量-反应曲线相关系数（r）的绝对值应不低于0.9900。

甘精胰岛素说明书

甘精胰岛素注射液 【药品名称】 药品名（中）：甘精胰岛素注射液 汉语拼音：Ganjingyidaosu Zhusheye 商品名（中）： 英文名：Insulin Glargine Injection 剂型：注射剂 【主要成份】 【性状】 本品为无色澄清溶液。 【药理毒性】 药物治疗分类：治疗糖尿病药。长效胰岛素及其类似物。ATC代号：A10AE。甘精胰岛素是一种在中性pH 液中溶解度低的人胰岛素类似物。在本品酸性pH（pH=4）注射液中，完全溶解。注入皮下组织后，因酸性溶液被中和而形成的微细沉积物可持续释放少量甘精胰岛素，从而产生可预见的、有长效作用的、平稳、无峰值的血药浓度/时间特性。胰岛素受体结合：在胰岛素与其受体结合的动力学方面，甘精胰岛素同人胰岛素极为相似。因此可以认为它与经由胰岛素受体而介导胰岛素的作用相同。胰岛素，包括甘精胰岛素，其主要作用是调节糖代谢。胰岛素及其类似物是通过促进骨骼肌和脂肪等周围组织摄取葡萄糖、抑制肝葡萄糖的产生而降低血糖的。胰岛素抑制脂肪细胞内的脂解、抑制蛋白水解和促进蛋白质合成。临床药理学的研究表明，静脉注射等剂量的甘精胰岛素和人胰岛素，其效价是相同的。像所有的胰岛素一样，甘精胰岛素的作用时程可能受体力活动及其他因素的影响。对健康人及1型糖尿病患者的正常血糖钳夹研究表明。皮下注射甘精胰岛素的起效时间比中性低精蛋白锌人胰岛素（NPH）慢，但甘精胰岛素的作用特性为平稳、无峰值、作用时间长。甘精胰岛素作用时间较长与其吸收率较慢有直接关系，这支持每天1次的给药方案。胰岛素以及像甘精胰岛素等胰岛素类似物的作用时程，在不同个体及同一个体内可能差别很大。对健康志愿者及1型糖尿病患者的临床研究结果表明，静脉注射甘精胰岛素或人胰岛素，其低血糖的症状或对抗调节激素的反应类似。根据常规的药理学安全性研究，包括重复剂量毒性、生殖毒性、基因毒性和致癌性等临床前资料均未发现对患者有特殊危害。 【药代动力学】 健康人及糖尿病患者的血清胰岛素浓度均表明，皮下注射甘精胰岛素后，其吸收远比人NPH（中效低精蛋白胰岛素）胰岛素慢而长，而且无峰值。因此，血清胰岛素浓度是同甘精胰岛素的药效学作用时间特性一致的。每日1次注射甘精胰岛素，在第1次注射后2-4天血清胰岛素浓度达到稳态。当静脉注射时，甘精胰岛素的半衰期和人胰岛素近似。在人体中，甘精胰岛素部分在皮下组织中降解，在β链的羧酸端，形成21A－甘氨酸胰岛素和

精蛋白重组人胰岛素说明书

精蛋白人胰岛素 【药物名称】 中文通用名称：精蛋白人胰岛素 英文通用名称：Isophane Protamine Human Insulin 其他名称：甘舒霖N、精蛋白重组人胰岛素、苏泌啉恩、万邦林N、重和林N、Isophane Protamine Recombinant Human Insulin、SciLin N。 【组成成分】 本药主要成分为人胰岛素、硫酸鱼精蛋白、氯化锌。 【临床应用】 用于糖尿病治疗。 【药理】 1.药效学本药为利用重组DNA技术生产的人胰岛素，与天然胰岛素有相同的结构和功能。可调节糖代谢，促进肝脏、骨骼和脂肪组织对葡萄糖的摄取和利用，促进葡萄糖转变为糖原贮存于肌肉和肝脏内，并抑制糖原异生，从而降低血糖。 2.药动学本药皮下注射因个体差异，药物的起效和持续时间差异较大，一般注射后起效缓慢，6-9小时达高峰，持续约24小时。 【注意事项】 1.禁忌症 (1)对人胰岛素过敏者。(2)低血糖患者。 2.慎用 (1)孕妇。(2)哺乳期妇女。 3.药物对儿童的影响儿童用药应注意运动量、饮食，便于控制血糖。 4.药物对老人的影响老年患者用药应避免低血糖反应(肾上腺、垂体、甲状腺等疾病患者或肝、肾疾病恶化者及忘记或推迟进餐者等，使用本药可造成低血糖)。 5.药物对妊娠的影响本药不通过胎盘屏障，但怀孕可使糖尿病不易控制，且胰岛素需要量在妊娠前早期通常降低，妊娠后中晚期增加，故孕妇慎用。 6.药物对哺乳的影响哺乳期妇女使用本药对婴儿无危险，但胰岛素需要量可能降低，故慎用。 7.用药前后及用药时应当检查或监测应定期检查血糖或尿糖。 【不良反应】 1.脂质营养不良：少见脂质萎缩或脂质增生。 2.胰岛素过敏：(1)局部过敏反应：偶有注射部位红肿、瘙痒，可在几日或几周内消失。也可能由其他原因引起而与注射胰岛素无关(如皮肤消毒剂的刺激等)。

胰岛素

1.名称：ARCHITECT ? 胰岛素 2.用途 ARCHITECT胰岛素项目是一种化学发光微粒免疫检测法(CMIA)，用于定量检测人体血浆或血清中的人类胰岛素。 3.检测步骤的生物学原理 ARCHITECT胰岛素项目采用一步法免疫检测，运用了Chemfilex技术，即化学发光微粒子免疫检测法与灵活的检测模式相结合，对人血清或血浆中的胰岛素进行定量检测。将样本、胰岛素抗体包被的顺磁性微粒子和吖啶酯标记的胰岛素抗体结合物混合。样本中的胰岛素与胰岛素抗体包被的微粒子以及吖啶酯标记的胰岛素抗体结合物相结合。冲洗之后，向反应混合物加入预激发液和激发液；测量产生的化学发光反应，以相对发光单位(RLUs)表示。样本中的胰岛素含量与ARCHITECTA i* 光学系统检测到的RLUs成正比。 4.操作注意事项 4.1不能使用过期产品。 4.2不能混合相同试剂盒或不同试剂盒中的试剂。 4.3第一次将ARCHITECT胰岛素试剂盒装载到系统上之前，需要混合微粒子试剂，使运输过程中沉淀下来的微粒子重新悬浮。有关混合微粒子的说明，参见本说明书中程序，项目程序一节。 4.4必须使用软盖，以避免试剂蒸发和污染并确保试剂的完整性。如果没有按照说明书的要求使用软盖，则不能检测结果的可靠性。 4.5为避免污染，给打开的试剂瓶加盖软盖时，应当佩戴干净的手套。 4.6给打开的试剂瓶加盖软盖前，对折挤压软盖，确认加样口已经张开。 4.7如果尚未张开，需继续轻轻挤压软盖，直到加样口张开为止。给打开的试剂瓶加盖软盖后，请勿翻转试剂瓶，否则会造成试剂泄漏并影响检测结果。 4.8一段时间后，软盖表面的残留液体将会风干。这是盐分的正常风干现象，不会影响检测结果。 5.储存说明 5.1 ARCHITECT胰岛素试剂盒必须竖直向上储存于2-8°C下，离开此环境后可以立即使用。 5.2 按要求储存和操作时，试剂盒在校期内保持稳定。? 5.3 ARCHITECT胰岛素试剂盒在ARCHITECT i 系统上最多可以储存30天。30天后必须

临床常用胰岛素表

临床常用胰岛素 注：胰岛素的保存： 已开封胰岛素：室温2℃--25℃阴凉避光的环境下保存1个月。 已开封动物胰岛素：冰箱2℃--8℃保鲜层保存1个月。 未开封胰岛素：冰箱2℃--8℃保鲜层保存至有效期。 作用特点 （注射时间） 胰岛素类型 商品名 通 用 名 公 司 超短效 （餐前5分钟） 胰岛素类似物 诺和锐 门冬胰岛素注射液 诺和诺德 优泌乐 赖脯胰岛素 礼 来 速秀霖 赖脯胰岛素 甘李药业 短 效 （餐前30分钟） 动物源胰岛素 / 中性胰岛素注射液 万邦医药 人胰岛素 诺和灵R 生物合成人胰岛素 诺和诺德 优思灵R 重组人胰岛素注射液 联邦制药 优泌林R 基因重组人胰岛素 礼 来 重和林R 重组人胰岛素注射液 拜 耳 甘舒霖R 常规重组人胰岛素注射液 通化东宝 中 效 （晚上22点） 动物源胰岛素 万苏林 低精蛋白锌胰岛素注射液 万邦医药 人胰岛素 诺和灵N 低精蛋白生物合成(重组)人胰岛素 诺和诺德 优泌林N 精蛋白锌重组人胰岛素 礼 来 重和林N 精蛋白重组人胰岛素注射液 拜 耳 甘舒霖N 低精蛋白重组人胰岛素注射液 通化东宝 优思灵N 精蛋白重组人胰岛素注射液 联邦制药 长 效 （晚上19点） 动物源胰岛素 / 精蛋白锌胰岛素注射液 万邦医药 动物胰岛素 精蛋白锌胰岛素 精蛋白锌胰岛素 第一生化 胰岛素类似物 来得时 甘精胰岛素 赛诺菲-安万特 长秀霖 甘李药业 诺和平 地特胰岛素 诺和诺德 预 混 （餐前30分钟） 预 混 （餐前5分钟） 动物源胰岛素 / 精蛋白锌胰岛素注射液(30R) 万邦医药 人胰岛素 诺和灵30R 低精蛋白生物合成(重组)人胰岛素预混 诺和诺德 诺和灵50R 诺和诺德 优泌林70/30 预混精蛋白锌重组人胰岛素 礼 来 重和林M30 精蛋白重组人胰岛素注射液(预混30/70) 拜 耳 甘舒霖30R 30/70混合重组人胰岛素注射液 通化东宝 甘舒霖50R 50/50混合重组人胰岛素注射液 通化东宝 优思灵30R 精蛋白重组人胰岛素混合注射液30/70 联邦制药 优思灵50R 精蛋白重组人胰岛素混合注射液50/50 联邦制药 胰岛素类似物 诺和锐 30 门冬胰岛素30 诺和诺德 优泌乐25 预混精蛋白锌重组赖脯胰岛素(25) 礼 来 优泌乐50 预混精蛋白锌重组赖脯胰岛素(50) 礼 来

【精品】常见胰岛素的使用

【关键字】精品 内分泌与代谢系统：胰岛素制剂 1、药品名称: 通用名称：门冬胰岛素30注射液商品名称：诺和锐30 成分：本品含30%可溶性门冬胰岛素和70%精蛋白门冬胰岛素 适应症:用于治疗糖尿病。 规格:100单位/毫升，3毫升/支（笔芯） 用法用量:本品比双时相（预混）人胰岛素起效更快，所以一般须紧邻餐前注射。必要时，可在餐后立即给药。本品经皮下注射，部位可选择大腿或腹壁。如方便，也可选择臀部或三角肌区域。注射点应在同一注射区域内轮换。像所有胰岛素一样，剂量、注射部位、血流、温度及运动量均会影响其作用时间。单独使用二甲双胍不足以控制血糖的2型糖尿病患者，本品也可以作为单一疗法。本品绝不能经静脉给药。应向患者强调本品在使用前应立刻重新混匀的重要性。重新混匀后的药液必须呈现均匀的白色雾状。 不良反应:与其他胰岛素制剂相同，低血糖是本品治疗中最常见的不良反应。及一系列过敏反应。 禁忌:以下患者禁用：·低血糖发作时。·对门冬胰岛素或本品中任何其他成分过敏者。注意事项:本品注射剂量不足或治疗中断时，特别是在胰岛素依赖的糖尿病患者中，可能导致高血糖和糖尿病酮症酸中毒，这可能是致命的。运动员慎用。对驾驶和机械操作能力的影响，低血糖可能会降低患者的注意力和反应能力

孕妇及哺乳期妇女用药:胰岛素的需要量在妊娠早期通常减少；而在妊娠中、晚期逐渐增加需要量迅速恢复到妊娠前的水平。不限制哺乳期妇女使用本品治疗。哺乳母亲使用胰岛素不会对婴儿产生危害。但是本品的剂量可能需要做相应的调整。 儿童用药:本品还没有在18岁以下的儿童和青少年中进行研究。 药物相互作用:可能会减少胰岛素需要量的药物：口服降糖药、单胺氧化酶抑制剂、非选择性β-肾上腺素能阻滞剂，血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂，水杨酸盐，酒精，合成代谢类固醇和硫胺类制剂；可能会增加胰岛素需要量的药物：口服避孕药，噻嗪类利尿剂，糖皮质激素，甲状腺激素，交感神经兴奋剂 药物过量:对于轻度低血糖可采取口服葡萄糖或含糖食物的治疗方式。所以，建议糖尿病患者随身携带含糖的食品。 ·对于严重的低血糖，在患者已丧失意识的情况之下，可由受过专业训练的人员给患者肌肉或皮下注射高血糖素(0.5-1.0mg)或由医务人员给予葡萄糖静脉注射。如果患者在10-15分钟之内对高血糖素无反应，则必须立即给予葡萄糖静脉注射。患者神志恢复之后，建议口服碳水化合物以免复发。 贮藏:避免儿童触及。本品应冷藏于2-8℃的冰箱中，不可冷冻。 有效期:24个月 2、药品名称:通用名称：甘精胰岛素注射液商品名称：来得时 成分:主要成分：甘精胰岛素 适应症:需用胰岛素治疗的糖尿病

中性胰岛素说明书

正规胰岛素 【药物名称】 中文通用名称：正规胰岛素 英文通用名称：Regular Insulin 其他名称：中性胰岛素、中性正规胰岛素、猪胰岛素、Cp Pork Insulin、 Iletin Ⅱ Pork、Neutral Insulin、Neutral Regular Insulin。 【临床应用】 1.用于1型糖尿病或继发于严重胰腺疾病的糖尿病。 2.用于以下情况的糖尿病：(1)合并严重应激情况(如感染、创伤、手术、急性心肌梗死、脑血管意外等)或消耗性疾病(如肺结核)的患者。(2)糖尿病急性并发症(如酮症酸中毒、高渗性昏迷等)或慢性并发症(如心脑血管并发症、肾脏或视网膜病变等)进展迅速、病情恶化。(3)病程长的2型糖尿病，经合理饮食、体力活动和口服降糖药治疗不满意或失效者，以及具有口服降糖药禁忌者(如妊娠、哺乳等)。(4)成年或老年糖尿病起病急、体重显著减轻且伴明显消瘦者。(5)肝、肾功能不全的糖尿病患者。 3.可用于严重营养不良、顽固性妊娠呕吐、肝硬化初期的患者(可同时静脉滴注葡萄糖和小剂量胰岛素，以促进组织对葡萄糖的利用)。 4.尚可用于纠正细胞内缺钾。此外，胰岛素休克疗法(现已少用)曾用于精神病治疗。 【药理】 1.药效学胰岛素按作用时间可分为速效、短效、中效和长效胰岛素，按种属来源可分为猪、牛、人胰岛素，其中以牛胰岛素的抗原性最强，人胰岛素的抗原性最弱。 本药为短效的猪或牛胰岛素制剂，不含任何可延缓胰岛素吸收的物质。 胰岛素对碳水化合物、蛋白质、脂肪的代谢和贮存等多方面起作用，具体为：(1)促进肌肉、脂肪组织对葡萄糖的主动转运，吸收的葡萄糖进而代谢、产生能量，或以糖原、甘油二酯的形式贮存。(2)促进肝摄取葡萄糖并转变为糖原。(3)抑制肝糖原分解及糖原异生，减少肝输出葡萄糖。(4)促进多种组织对碳水化合物、蛋白质、脂肪的摄取，同时促进蛋白质的合成、抑制脂肪细胞中游离脂肪酸的释放、抑制酮体生成，从而调节物质代谢。通过上述作用，胰岛素可使糖尿病患者血中葡萄糖来源减少、消耗增加，并在一定程度上纠正各种代谢紊乱，从而降低血糖、延缓(或防止)糖尿病慢性并发症的发生。 胰岛素作用机制：与相应的敏感组织细胞膜上的特异性受体相结合，引发葡萄糖等物质经细胞膜的转运、多种酶的激活或抑制、细胞的生长等一系列生理效应。 2.药动学本药口服易被胃肠道消化酶破坏，故不宜口服给药。 皮下注射吸收迅速，但吸收很不规则，不同患者或同一患者的不同注射部位吸收量均有差别，以腹壁吸收最快，上臂外侧吸收较股前外侧快。皮下注射0.5-1 小时后开始生效，2.5-4小时作用达高峰，持续时间为5-7小时，半衰期为2小时。

胰岛素ELISA试剂盒

胰岛素ELISA试剂盒 （德国DRG：EIA2935） 1、前言说明 DRG公司的胰岛素酶免试剂盒可用于人血清和血浆中（加入了肝素或柠檬酸的血浆）胰岛素的定量检测。此检测试剂盒仅供体外诊断用。 胰岛素是调节葡萄糖代谢的主要激素，它由朗格汉氏小岛的β细胞合成分泌，并以前胰岛素的前体形式存在，前胰岛素可加工形成C肽和胰岛素。这两种激素都以等量形式分泌到门脉循环中。成熟的胰岛素分子由两条多肽链组成，A链和B链（分别21个和30个氨基酸）。这两条链通过键内二硫键而连接到一起。胰岛素的分泌主要受血浆葡萄糖浓度的影响，这种激素有一系列重要的代谢功能。它的主要功能是通过葡萄糖的运送来控制外周组织中葡萄糖的摄取和利用。胰岛素和其它低血糖激素的作用（如抑制肝糖原的异生和糖原分解）可被高血糖激素（胰高血糖素，肾上腺素，生长激素和皮质醇）的作用中和掉。在胰岛素依赖性的糖尿病（IDDM）和其它疾病例如垂体机能减退疾病中,胰岛素的浓度会明显降低。在非胰岛素依赖性的糖尿病患者、肥胖患者、胰岛素瘤患者和一些内分泌功能紊乱（如库欣综合症和支端肥大症）患者的体内，其胰岛素的水平会上升。 2、实验原理 DRG公司的胰岛素酶免实验是一种基于夹心法原理的固相酶联免吸附实验(ELISA),反应板上的微检测孔包被有能结合胰岛素分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性胰岛素的病人样本在包被孔中与酶联物进行孵育，该酶联物是一种生物素标记的抗胰岛素抗体。孵育后，用洗涤液洗去未结合的酶联物。在第二次温育时，链亲和素过氧酶复合物结合到生物素化抗胰岛素抗体上，过氧酶复合物的结合量与样品中胰岛素的浓度成正比。加入底物液后，所显示的颜色强度与病人样品中胰岛素的浓度成正比。3、试剂盒成分 1) 微孔板：12×8，96孔，包被抗胰岛素的单克隆抗体。 2) 零标准品：1支，3ml，即用，0μIU/ml。 3) 标准品1－5：5支，1ml，即用，;;25;50;100μlU/ml。 4) 酶联物：1支，5ml，即用，生物素化的鼠单克隆抗体。 5) 酶复合物：1支，7ml，即用，辣根过氧化物-链亲和素复合物。 6) TMB底物液：1支14ml 即用。 7) 终止液：1支14ml 即用包含硫酸,请勿接触终止液，以免刺激或着烧皮肤。 8) 洗涤液：1瓶，30ml，40倍浓缩，见试剂准备。 注意：用样品稀释的零标准品视需要而定。 4、实验所需材料（但试剂盒不提供） 1）酶标仪 2）标准移液器 3）吸水纸 4）蒸馏水 5、试剂的储存与稳定性 所有的未开启的试剂在2－8℃下储存至保质期，不要使用过期的试剂。所有开启的试剂应在2－8℃下储存。一旦打开微孔板的包装，需将其重新密封。 6、样品的准备 将所有的试剂和所需要的板条在使用前平衡至室温。

地特胰岛素注射液说明书

地特胰岛素注射液说明书 以下内容仅供参考，请以药品包装盒中的说明书为准。 【药品名称】 通用名称：地特胰岛素注射液 【成份】 活性成份：地特胰岛素（通过基因重组技术,利用酵母生产的)。1 ml 溶液含有 1D0 单位（U），相当于 14.2 mg 的地特胰岛素。1 支含有 3 ml 溶液（相当于 300U 的地特胰岛素）。1 单位（U）地特胰岛素相当于 1 国际单位（IU）人胰岛素。 【适应症】 用于治疗糖尿病。 【规格】 3 ml：300 单位（笔芯） 【用法用量】 . 本品是可溶性的基础胰岛素类似物，其作用持续时间长达 24 小时。

. . 与其他胰岛素制剂相比，地特胰岛素用于基础-餐时治疔方案时不引起体重增加。 . . 与中性精蛋白锌胰岛素（NPH 胰岛素）相比较，本品引起夜间低血糖的风险较低，因而用于基础-餐时方案治疔时，可以进行更为积极的剂 M 调整以实现血糖达标。 . . 以空腹血糖作为评价指标，地特胰岛素较人 NPH 胰岛素可以更好地控制血糖。 . . 地特胰岛素可以作为基础胰岛素单独使用或者与餐时胰岛素联合使用。还可以与口服抗糖尿病药物联合使用。 . . 与口服抗糖尿病药物联合治疗时，推荐采用地特胰岛素毎日一次给药，起姶剂量为 10U 或 0.1-0.2U/kg。地特胰岛素

的剂量应根据患者的个体化需要进行调整。根据临床研究结果，可使用以下剂量调整指南。 . 成人 1 型和 2 型糖尿病患者的剂量调整指南： 【如何注射本品】 . 本品皮下注射。注射技巧请参照注射系统使用说明。 . . 在从皮下拔出针头之前，应始终按住注射推键。注射后针头应在皮下停留至少 6 秒。以确保胰岛素完全注射入体内。 . . 每次注射后必须卸下并丢开针头，否则药液可能会漏出，导致剂量不准确。 . 【不良反应】 安全性概况摘要 .

人胰岛素定量检测试剂盒(酶联免疫法)说明书V9.0

人胰岛素定量检测试剂盒（酶联免疫法）说明书V9.0 10-1113-01 96人份试剂 10-1113-10 96×10人份试剂 由瑞典Mercodia AB制造

用于标签上的标识的说明

预期用途 人胰岛素定量检测试剂盒（酶联免疫法）提供了一种人血清或血浆样本中胰岛素的定量检测方法。 本试验综述和说明 在胰岛β细胞内合成的胰岛素是调控糖代谢的主要激素。胰岛素前体—胰岛素原生成C 肽和胰岛素。等摩尔质量分泌到门静脉循环。成熟的胰岛素分子由2条多肽链组成（A链、B链，分别由21个和30个氨基酸组成），A、B链间由2个二硫键连接，并且A链内存在1个二硫键。 胰岛素的分泌主要由血糖浓度控制，该激素还参与许多重要的代谢活动。它的机制功能是在外周组织中通过运糖载体来控制糖的吸收和利用。和其它降血糖代谢活动抑制肝糖异生和通过升血糖素（胰高血糖素、肾上腺素、生成激素和皮质醇）抵消肝糖分解。 胰岛素依赖型糖尿病或垂体机能减退症的患者体内胰岛素浓度严重降低。胰岛素升高的情况出现在非胰岛素依赖型糖尿病、肥胖症、胰岛瘤、内分泌功能失调（库兴氏综合症、肢端胖大症）的患者。 检测程序的原理 人胰岛素检测试剂盒（酶联免疫法）是一种固相双表位酶联免疫试剂。它基于双夹心技术，两单克隆抗体分别结合在胰岛素分子的抗原决定簇上。在孵育过程中，样本中的胰岛素与结合在微孔(板)中的抗胰岛素抗体和酶标抗胰岛素抗体反应。洗涤移去非结合的酶标抗体。结合的偶联物(标记物)通过与3,3’,5,5’-四甲基联苯胺（TMB）反应而被检测到。加入酸后反应终止，然后通过分光光度计（酶标仪）读取反应的终点。 警告与注意事项 ●用于体外诊断。 ●不能让反刍动物或猪接触到本试剂盒的内容物及其残余物。 ●本试剂盒的终止溶液含有0.5M的硫酸。按常规预防措施处理危险化学品。 ●所有的患者样本都应按潜在传染物处理。 要求但未提供的材料 ●25μL、50μL、100μL、200μL、1000μL移液管（重复移取加入酶结合物溶液、TMB底物 和终止溶液） ●用于试剂制备的烧杯和量筒

胰岛素种类和剂型

胰岛素种类和剂型 一.超短效（速效）人胰岛素类似物餐前即刻注射 诺和锐门冬胰岛素注射液 优泌乐赖脯胰岛素注射液 速秀霖赖脯胰岛素注射液 餐前即刻注射皮下注射起效时间10?20分钟，最大作用时间为注射后1?3小时，作用持续3 5小时，和正规胰岛素相比，它更符合胰岛素的生理分泌模式，餐前注射吸收迅速，达峰时间短，能更有效地控制餐后血糖。 .短效（常规）胰岛素Rl（简写R）代表短效胰岛素黄色 普通胰岛素（正规胰岛素短效胰岛素胰岛素）诺和灵R 生物合成人胰岛素注射液 优泌林R 重组人胰岛素注射液 重和林R 重组人胰岛素注射液 甘舒霖R 常规重组人胰岛素注射液 餐前30min注射是唯一可以静脉注射的胰岛素。皮下注射30分钟起效，2?4小时达峰，作用 持续6?8小时。短效胰岛素由于在皮下存在一个吸收过程，不如超短效胰岛素峰型尖锐，与人生理性胰岛素分泌模式有一定的差异，进餐时间提前易导致血糖控制不佳，若延后则易发生低血糖。 三.中效胰岛素NPH（简写N）代表中效胰岛素绿色 诺和灵N精蛋白生物合成人胰岛素注射液 中效优泌林NPH重组人胰岛素注射液 甘舒霖N低精蛋白重组人胰岛素注射液 重和林N精蛋白重组人胰岛素注射液| 缓慢吸收，平均1.5小时起效，4?12小时达峰，作用持续时间18?24小时，中效胰岛素常用于胰岛素强化治疗方案中睡前给药，以控制夜间和清晨空腹血糖。 三.长效胰岛素精蛋白锌胰岛素（动物来源）蓝色精蛋白锌胰岛素 是在低精蛋白锌胰岛素的基础上加大鱼精蛋白的比例，使吸收更缓慢，作用持续时间更长，皮下注射3?4小时起效，12?20小时达峰，作用维持24?26小时。其缺点是吸收不稳定，导致药效亦不稳定，目前已很少应用。 四.超长效人胰岛素类似物 诺和平地特胰岛素注射液 来得时甘精胰岛素注射液 长秀霖重组甘精胰岛素注射液 德谷胰岛素 皮下注射后可24小时保持相对恒定浓度，无明显峰值岀现。可在一天当中任何时间注射，起效时间为1.5小时，作用可平稳保持24小时左右，更适合于基础胰岛素治疗，不易发生夜间低血糖, 五.预混胰岛素类

小鼠胰岛素(Insulin) Elisa试剂盒使用说明

小鼠胰岛素(Insulin)Elisa试剂盒使用说明 货号：BC1710 保存：试剂盒保存：2-8℃，有效期6个月。 产品内容： 序号名称96孔配置 1酶标包被板96孔*1可拆卸板 2酶标试剂6ml*1瓶 3标准品(浓度16mIU/L)0.6ml*1瓶 4标准品稀释液2ml*1瓶 5生物素标记的抗Insulin抗体 1.5ml*1瓶 6显色剂A液6ml*1瓶 7显色剂B液6ml*1瓶 8终止液6ml*1瓶 9浓缩洗涤液（*30）20ml*1瓶 10封板膜1张 11使用说明书1份 产品说明： 小鼠胰岛素(Insulin)Elisa试剂盒仅供科研使用，定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本中小鼠胰岛素(Insulin)的含量。 采用双抗体夹心法测定小鼠胰岛素(Insulin)水平。用纯化的小鼠胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板，制成固相载体，实验时依次在微孔板中加入样本及标准品，并加入HRP标记的胰岛素(Insulin)抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，反复洗涤后加底物TMB显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，再用硫酸终止反应，转变成黄色。颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)含量呈正相关。采用酶标仪在450nm波长测定吸光度（OD值），根据标准曲线，计算测试样品中胰岛素(Insulin)浓度。 实验材料与试剂配制：

1.仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水， 滤纸。 2.洗液的配制：按1:30的比例配制洗液备用。 样品收集、处理及保存： 1.细胞培养上清：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以 1000×g离心15分钟，收集上清。 2.细胞：用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104-106/ml左右，通过反复冻融，使 细胞破坏并放出细胞内成份，或者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。 3.血清：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。 4.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20分钟后， 以1000×g离心15分钟，收集上清。 5.体液：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000 ×g离心15分钟，收集上清。 6.组织标本：切取组织标本，称取重量0.05g，加入500ul的PBS，用手工或匀浆器，或超 声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000rmp离心20分钟，收集上清进行检测。 7.样品中不能含有NaN3，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 8.保存：如果样品不能立即检测，应将其分装，-70℃保存，避免反复冷冻。保存过程中 如出现沉淀，应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 操作步骤： 1.取出试剂盒，室温（20-25℃）放置30分钟。 2.分组：取出96孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余 的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6个浓度）、空白孔、待测样品组。标准品的

诺和锐(门冬胰岛素注射液)

诺和锐(门冬胰岛素注射液) 【药品名称】 商品名称：诺和锐 通用名称：门冬胰岛素注射液 英文名称：Insulin Aspart Injection 【成份】 本品主要成份及其化学名称为门冬胰岛素(用生物技术将人胰岛素氨基酸链B28位的脯氨酸由天门冬氨酸替代)。其它成份为甘油、苯酚、间甲酚、氯化锌、氯化钠、二水磷酸二钠、氢氧化钠、盐酸。 【适应症】 用于治疗糖尿病。 【用法用量】 本品比可溶性人胰岛素起效更快，作用持续时间更短。由于快速起效，所以一般须紧邻餐前注射。必要时，可在餐后立即给药。由于作用持续时间较短，所以本品导致夜间低血糖发生的风险较低。本品的用量因人而异，应由医生根据患者的病情决定。一般应与至少每日一次的中效胰岛素或长效胰岛素联合使用。成人和儿童：胰岛素需要量因人而异，通常为每日每公斤体重0.5-1.OU。在针对餐时的治疗中，50%-70%的胰岛素需要量由本品提供，其他部分由中效胰岛素或长效胰岛素提供。本品经皮下注射，部位可选择腹壁、大腿、上臂三角肌或臀部。应在同一注射区域内轮换注射点。腹壁皮下注射后，10-20分钟内起效。最大作用时间为注射后1-3小时，作用持续时间为3-5小时。像所有胰岛素一样，剂量、注射部位、血流、温度和运动量均会影响其作用时间。所有胰岛素从腹壁皮下给药均比从其他注射部位给药吸收更快。但是，无论从任何部位进行注射，本品均比可溶性人胰岛素起效快。如有必

要，本品可由专业医务人员经静脉给药。本品可经胰岛素泵给药，进行连续皮下胰岛素输注治疗(CSII)。连续皮下胰岛素输注治疗应选择腹壁作为注射部位，并轮换输注点。在使用胰岛素泵输注本品时，不能与其他胰岛素混合使用。当本品用于胰岛素泵输注时，患者应得到全面的相关指导，包括如何使用胰岛素泵以及使用合适的储药器和管路。输注装置(管路和皮下软管)必须根据输注装置说明中的相关要求进行更换。接受连续皮下胰岛素输注治疗的患者必须随身配备可替换的胰岛素，以防因胰岛素泵系统损坏而影响用药。肾功能或肝功能不全时，通常患者对胰岛素的需要量会减少。建议对这些患者，进行严密的血糖监测，并对本品剂量进行相应的调整。使用、操作和处理说明诺和锐笔芯仅能和配套的产品同时使用并且允许本品安全有效的运行。本品仅供一人使用。本品不可重新灌装使用。本品应与诺和诺德胰岛素注射系统和诺和针配合使用。本品经胰岛素泵给药用于连续皮下胰岛素输注治疗。胰岛素泵给药：管路内表面由聚乙烯或聚烯烃制成，经鉴定符合胰岛素泵的使用。静脉给药：输注系统中本品浓度为0.05U/毫升至1.0U/毫升，输注液为0.9%氯化钠、5%葡萄糖或含40mmoUL氯化钾的10%葡萄糖。上述输注液置于聚丙烯输液袋中，在室温下24小时内是稳定的。尽管胰岛素总量在长时间段里保持稳定，但随着时间的延长，会有一定量的胰岛素吸附于输液袋上。在输注期间必须监测血糖值。如果诺和锐不呈无色澄明液体，则不能使用。任何未使用的产品或废料应根据当地要求进行处置。 【不良反应】 患者使用本品时发生的不良反应主要与剂量相关，且与胰岛素药理学作用有关。与其他胰岛素制剂相同，低血糖是本品治疗中最常见的不良反应。如果胰岛素使用剂量远高于需要量，就可能发生低血糖。重度的低血糖可能导致意识丧失和/或惊厥以及暂时性或永久性脑功能损害甚至死亡。临床试验和上市后的经验表明，低血糖发生的频率随患者的人群和用法用量的不同而变化，因此无法呈现低血糖发生的确切频率。

胰岛素的分类和药代动力学

胰岛素种类和剂型 一.超短效(速效)人胰岛素类似物餐前即刻注射 诺和锐门冬胰岛素注射液 优泌乐赖脯胰岛素注射液 速秀霖赖脯胰岛素注射液 餐前即刻注射皮下注射起效时间10～20分钟，最大作用时间为注射后1～3小时，作用持续3～5小时，和正规胰岛素相比，它更符合胰岛素的生理分泌模式，餐前注射吸收迅速，达峰时间短，能更有效地控制餐后血糖。 二.短效(常规)胰岛素RI(简写R)代表短效胰岛素黄色 普通胰岛素(正规胰岛素短效胰岛素胰岛素) 诺和灵R 生物合成人胰岛素注射液 优泌林R 重组人胰岛素注射液 重和林R 重组人胰岛素注射液 甘舒霖R 常规重组人胰岛素注射液 餐前30min注射是唯一可以静脉注射的胰岛素。皮下注射30分钟起效，2～4小时达峰，作用持续6～8小时。短效胰岛素由于在皮下存在一个吸收过程，不如超短效胰岛素峰型尖锐，与人生理性胰岛素分泌模式有一定的差异，进餐时间提前易导致血糖控制不佳，若延后则易发生低血糖。 三.中效胰岛素NPH(简写N)代表中效胰岛素绿色 诺和灵N 精蛋白生物合成人胰岛素注射液 中效优泌林NPH重组人胰岛素注射液 甘舒霖N 低精蛋白重组人胰岛素注射液 重和林N 精蛋白重组人胰岛素注射液 缓慢吸收，平均1.5小时起效，4～12小时达峰，作用持续时间18～24小时，中效胰岛素常用于胰岛素强化治疗方案中睡前给药，以控制夜间和清晨空腹血糖。 三.长效胰岛素精蛋白锌胰岛素（动物来源）蓝色 精蛋白锌胰岛素 是在低精蛋白锌胰岛素的基础上加大鱼精蛋白的比例，使吸收更缓慢，作用持续时间更长，皮下注射3～4小时起效，12～20小时达峰，作用维持24～26小时。其缺点是吸收不稳定，导致药效亦不稳定，目前已很少应用。 四. 超长效人胰岛素类似物 诺和平地特胰岛素注射液 来得时甘精胰岛素注射液 长秀霖重组甘精胰岛素注射液 德谷胰岛素

人胰岛素样生长因子-1 IGF-1试剂盒使用说明书 北京驰明瑞生物

人胰岛素样生长因子-1 IGF-1 使用说明书 产品编号：HEI010 本试剂盒仅供科研使用，不得用于临床及诊断使用！ 试剂组成 名称规格数量保存 包被平底微孔板96孔1可拆卸板2-8℃密封冷藏 酶结合物6毫升1瓶2-8℃冷藏 标准品1毫升6瓶2-8℃冷藏 显色剂A 6毫升1瓶2-8℃冷藏 显色剂B 6毫升1瓶2-8℃避光冷藏 终止液6毫升1瓶2-8℃冷藏 浓缩洗涤液（100倍 10毫升1瓶2-8℃冷藏 稀释） 使用说明书1份 自备物品 1.酶标仪（尽量提前预热） 2.微量加液器、吸头 3.蒸馏水或去离子水以及滤纸 操作步骤 1.取出试剂盒，于室温（20-25℃）放置15-30分钟。实验过程应在室温（20-25℃）内进行。 2.取出酶标板，按照标准品的次序分别加入100μl的标准品溶液于空白微孔中。 3.空白微孔中加入100μl的样品，空白对照加入100μl的蒸馏水； 4.在各孔中加入50μl的酶标记溶液；（不含空白对照孔） 5.将酶标板用封口胶密封后，37℃孵育反应1小时；（在孵育箱中保持稳定的温度与湿度） 6.充分清洗酶标板3-5次，保持各孔有充足的水压；（浓缩洗涤液以1：100的比例与蒸馏水稀释） 7.酶标板洗涤后用吸水纸彻底拍干； 8.各孔加入显色剂A、B液各50μl；（不含空白对照孔） 9.20-25℃下避光反应15分钟； 10.各孔加入50μl终止液，终止反应； 结果判断 1.30分钟内在波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值； 2.百分结合率计算：设S0管计数为B0，各标准管或样品管计数为B，非特异管计数为NSB，则百分结 合率计算公式如下：B/ B0=(B－NSB)/( B0－NSB)×100% 3.logit计算:各标准点或样品管的logit值计算公式如下:logit=ln(B/ B0)/(1－B/ B0) 4.将标准品的OD均值与标准品0点的OD均相除，为标准点的百分结合率，在log-logit坐标纸上绘图。 5.Log-logit双对数标准曲线：坐标纸上横轴从左至右第一个1-9表示为第一个10进位，第二个1-9表示 为第二个10进位。第三个1-9表示为第三个10进位。坐标纸纵轴为百分比（1-99），即各标准吸光值的百分结合率。取一条通过各点的直线。要求尽可能多的点在线上，同时剩余的点均匀分布在直线的两边。样品也同样由吸光值计算百分结合率，再从纵轴上的相应结合率找到直线上的点，此点对应的横坐标浓度即为样品的浓度，无须换算。 6.人工处理：以标准浓度取log值为横坐标，对应的logit值为纵坐标在普通坐标纸上或以标准浓度为横

Wistar大鼠EAE模型的制备

Wistar大鼠EAE模型的制备 作者：刘颖刘华辛晋敏马太花梁丽云马存根摘要目的:检测EAE中起关键趋化作用的MCP-1的表达，探讨山西医科大学动物室的Wistar大鼠诱导实验性变态反应脑脊髓炎动物模型。方法:采用免疫诱导方法制备EAE模型并HE染色，同时用原位杂交法检测EAE 大鼠MCP-1的表达。结果:免疫后12d～17d，发病鼠出现EAE临床症状，HE染色，光镜下可见血管周炎性浸润，MCP-1的表达明显增加。结论:山西医科大学Wistar大鼠成功的诱导实验性变态反应脑脊髓模型是可信、可用的。 关键词完全抗原;Wistar大鼠;EAE;MCP-1 多发性硬化（Multiple Sclerosis，MS）是中枢神经系统（CentralNervous System，CNS）的炎性脱髓鞘疾病，多发于20岁～40岁女性，大多数患者的病程为复发和缓解交替，在复发期常出现视力受损、肢体无力、平衡失调、麻木、感觉异常、口齿不清、眩晕、大小便机能失调等症状。MS病因和发病机制复杂，一般认为与免疫、病毒感染、遗传等因素有关。实验性变态反应性脑脊髓炎（ExperimentalAu-toimmune Encephalomyelitis，EAE）的病理变化及发病机制与急性MS极其相似，因此，成功的建立EAE模型对MS的研究有很重要的意义。本实验的研究可为后期的研究工作提供基础。 1 材料与方法 1.1 试验材料Wistar大鼠:购自山西医科大学动物实验室。原位杂交试剂盒:购于武汉博士德生物制品公司。

1.2 方法 1.2.1 完全抗原的制备:取液体石蜡40mL，羊毛脂20g混合、加热并融化制得不完全弗氏佐剂（In-complete Freund'sAdjuvant，IFA），分装入10mL小瓶，高压灭菌后4℃冰箱保存。健康350g～450g左右雌性豚鼠用3%戊巴比妥45mg/kg腹腔注射至四肢瘫软。无菌状态下，剪开胸腔、剥离心包，0.01mol/L PBS左心室灌注直至肝脏变白;迅速取其脑脊髓，小心剥离脑脊膜后称重，加入等量生理盐水，制成50%（W/V）匀浆。同时融化IFA，1mL IFA加入约10mg的M.bovisBCG即制得CFA。将CFA与GPSCH等体积混合，用注射器反复抽推，制成油包水乳液，制成完全抗原，放置冰上备用。 1.2.2 模型制备:将健康、雌性Wistar大鼠30只，随机分成正常对照组、佐剂组和EAE组，三组大鼠左后肢足垫皮下分别注射完全抗原0.4mL/只，百日咳原液0.05mL/只（含5.0×10 9 个菌体）。记免疫当日为零天，每天称重，采用双盲法两人进行临床症状评分，取平均值，临床评分2分为发病动物，临床评分采用通用的五分评分法，即:0分无症状，1分动物尾部肌张力降低，2分动物尾部麻痹+后肢肌张力低，3分尾麻痹+后肢肌张力重度低，4分尾麻痹+四肢麻痹，5分频死状态。发病动物只数/实验动物只数为发病率。免疫后12d～17d，3%戊巴比妥钠45mg/kg腹腔注射，至四肢瘫软，无菌状态下，剪开胸腔剥离心包，0.01mol/L PBS左心室灌注至肝脏变白;4%多聚甲醛灌流至尾部僵直，解剖迅速取其大脑视交叉前后2mm组织、小脑和脑桥部、脊髓颈腰膨大处，再用4%多聚甲醛固定半小时，做常规石蜡包埋、切

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胰岛素（INS）测定试剂盒（胶乳免疫比浊法） 适用范围：该产品用于体外定量测定人血清或血浆中的胰岛素的浓度。 1.1 产品规格 试剂1:60mL×2，试剂2:60mL×1； 试剂1:60mL×1，试剂2:30mL×1； 试剂1:40mL×2，试剂2:20mL×2； 试剂1:40mL×1，试剂2:20mL×1； 试剂1:20mL×2，试剂2:20mL×1； 试剂1:20mL×1，试剂2:10mL×1； 试剂1:45mL×2，试剂2:15mL×2 ； 试剂1:60mL×1，试剂2:12mL×1； 试剂1:60mL×1，试剂2:15mL×1； 试剂1:40mL×2，试剂2:10mL×2 ； 试剂1:200mL×1，试剂2:100mL×1； 试剂1:15mL×1，试剂2:5mL×1； 试剂1:10mL×1，试剂2:5mL×1； 试剂1:2000mL×1，试剂2:1000mL×1 20人份（试剂1: 4mL×1，试剂2: 2mL×1）； 50人份（试剂1: 10mL×1，试剂2: 5mL×1）； 100人份（试剂1: 20mL×1，试剂2: 10mL×1）； 200人份（试剂1: 40mL×1，试剂2: 20mL×1）； 288人份（试剂1:60 mL，试剂2:30 mL）；

1.2组成成分 1.2.1试剂组成:液体双试剂。 试剂组成 1.2.2校准品的组成 六个水平的液体校准品，在磷酸盐缓冲液(50mM)中添加胰岛素纯品。定值范围：0μU/mL；(2-8) μU/mL；（8-15）μU/mL；（15-40）μU/mL；（30-60）μU/mL；（80-110）μU/mL。 1.2.3质控品的组成 两个水平的液体质控品，在牛血清(20g/L)基质中添加胰岛素纯品。定值范围：（5-25）μU/mL；（20-40）μU/mL。 2.1 外观 液体双试剂：试剂1：无色至淡黄色澄清液体，试剂2：乳白色液体。 校准品：无色至淡黄色澄清液体。 质控品：无色至淡黄色澄清液体。