SOD_测定方法

SOD

氮蓝四唑（NBT）法测定超氧物歧化酶（SOD）活力

一、原理

超氧物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）普遍存在于动、植物体内，是一种清除超氧阴离子自由基（O2-）的酶。实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2，可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙，后者在560nm处有最大吸收。而SOD可清除O2，从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后，反应液蓝色愈深，说明酶活性愈低，反之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。

二、材料、仪器设备及试剂

（一）材料；水稻或小麦叶片

（二）仪器设备：1.高速台式离心机；2.分光光度计；3.微量进样器；4.荧光灯（反应试管处照度为4000Lx）；5.试管或指形管数支。

（三）试剂 1. 0.05mol/L 磷酸缓冲液（pH7.8）；2. 130mmol/L 甲硫氨酸（Met）溶液：称1.9399gMet用磷酸缓冲液定容至100ml；3.750μmol/L 氮蓝四唑溶液：称取0.06133gNBT 用磷酸缓冲液定容至100ml，避光保存；4. 100μmol/L EDTA－Na2溶液：称取0.03721gEDTA －Na2用磷酸缓冲液定容至1000ml；5. 20μmol/L 核黄素溶液：称取0.0753g核黄素用蒸馏水定容至1000ml避光保存。

三、实验步骤

1. 酶液提取

取一定部位的植物叶片（视需要定，去叶脉）0.5g于预冷的研钵中，1ml预冷的磷酸缓冲液在冰浴上研磨成浆，加缓冲液使终体积为5ml。取1.5～2ml于1000rpm下离心20min，上清液即为SOD粗提液。

2. 显色反应

取5ml指形管（要求透明度好）4支，2支为测定管，另2支为对照管，按下列加入各溶液：试剂（酶）用量（ml）终浓度（比色时）0.05mol/L 磷酸缓冲液 1.5130mmol/L Met溶液0.313mmol/L 750μmol/L NBT溶液0.375μmol/L 100μmol/L EDTA－Na2液0.310μmol/L 20μmol/L 核黄素0.320μmol/L 酶液0.052支对照管以缓冲液代替酶液蒸馏水0.25总体积3.0混匀后将1支对照管置暗处，其它各管于4000Lx日光下反应20min（要求各管受光情况一致，温度高时间缩短，低时延长）。

3. SOD活性测定与计算

至反应结束后，以不照光的对照管做空白，分别测定其它各管的吸光度。

四、结果计算

已知SOD活性单位以抑制NBT光化还原的50％为一个酶活性单位表示，按下式计算SOD 活性。SOD总活性＝(Ack－AE)×V/(Ack×0.5×W×Vt)

上式中，SOD比活力＝SOD总活性蛋白质含量式中SOD总活性以每克鲜重酶单位表示；比活力单位以酶单位／mg蛋白表示Ack照光对照管的吸光度AE样品管的吸光度V样品液总体积（ml）Vt测定时样品用量（ml）W样鲜重（g）蛋白质含量单位为：mg蛋白／g鲜重。

超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定

【实验原理】

SOD是含金属辅基的酶，它催化以下反应：

02-+02-+ 2H+ H202+02

由于超氧阴离子自由基02-寿命短，不稳定，不易直接测定SOD活性,而采用

间接的方法。目前常用的方法有3种, 包括氮蓝四唑(NBT)光化还原法，邻苯三酚自氧化法，化学发光法。本实验主要介绍光化还原法，其原理是：氮蓝四唑在蛋氨酸和核黄素存在条件下，照光后发生光化还原反应而生成蓝色甲腙，蓝色甲腙在560nm处有最大光吸收.

。SOD能抑制NBT的光化还原，其抑制强度与酶活性在一定范围内成正比。

试剂:

1.50m mol/l pH7.8的磷酸缓冲液(PBS) 。含0.1m mol/l EDTA

2.220m mol/l甲硫氨酸：称

3.2824g甲硫氨酸\,用50m mol/l pH7.8的磷酸缓冲液定溶至100ml （现配现用）。

3.1.25m mol/l氯化硝基四氮唑蓝（NBT）溶液（现配）：称NBT 0.102g,用

50m mol/l pH7.8的磷酸缓冲液(PBS)溶解定容至100ml.

4.0.033m mol/l核黄素：称2.52mg 用PBS溶解定容至200ml（遮光保存）。

【实验步骤】

1．酶液制备

称取植物组织0.5g先加入2.5ml PBS，研磨匀浆后，再加入2.5ml PBS混匀，

4℃下10000r/min离心15min 上清液即为粗酶液。取部分上清液经适当稀释后用于酶活性测定。

2.酶活性测定

取10ml小烧杯7只, 3只测定样品,4只作为对照，

按下表加入试计:

将上述试剂混匀后，1只对照烧杯至于暗处，另3只对照烧杯和样品一起置于

4000lx日光灯下反应20min（要求各管受光一致，温度高时时间缩短，温度低时可适当延长）。最后在560nm处测定反应液的光密度。以不照光的对照烧杯作参比，分别测定其

他各管的光密度。

3.蛋白含量的测定

步骤1的上清液经适当稀释后用考马斯亮蓝G-250法测定蛋白含量.

【实验结果及计算】

SOD活性单位是以抑制NBT光化还原的50%为一个酶活性单位表示。可按下式计

算SOD活性：

SOD总活性=

SOD比活力=SOD总活性/蛋白质总浓度

式中: SOD总活性以U/gFW,比活力单位以U/mg蛋白表示ACK为对照杯(光照)的光吸收值;AE为样品的光吸收值;V为样液总体积,V1为测定时样品用量,W为样重g.

缩写：SOD：超氧化物歧化酶；CAT：过氧化氢酶；POD：过氧化物酶；MDA：丙二醛；PVP：聚乙烯吡咯烷铜K-30；L-Met：甲硫氨酸；

NBT：氮蓝四唑；TBA：硫代巴比妥酸；TCA：三氯乙酸；PBS: 磷酸缓冲液

SOD的测定方法

加样顺序：（V=3ml）磷酸缓冲液：1.5ml L-Met: 0.3ml NBT: 0.3ml

EDTA-Na2: 0.3ml 核黄素：0.3ml 酶液：0.05ml 蒸馏水：0.25ml

试剂配制：

(1) 0.05mol/L PBS：pH7.8

(2) 130mmol/L L-Met: 1.9399g Met用PBS定容至100ml

(3) 750mmol/L NBT: 0.06133g用PBS定容至100ml(避光保存)

(4) 100umol/L EDTA-Na2: 0.03721g用PBS定容至1000ml

(5) 20umol/L核黄素: 0.0753g用蒸馏水定容至1000ml(避光保存)

注：（1）对照：以加缓冲液、不照光为空白；照光的为最大还原管

(2) 照光后至显蓝色要立即避光放置、迅速测定A560值

SOD活性的测定方法

[ 2005-10-31 12:51:00 | By: abingxu ]

推荐pH7.8最适，按邵从本等（1993）方法。

1.试剂：

反应液：含13×10-3M 甲硫氨酸（MW=149.21292），75×10-6MNBT（MW=817.7），2×10-6M 核黄素（MW=376.36），100×10-9MEDTA，50×10-3M磷酸缓冲液，pH7.8。

4.096225g Na2HPO4.12H2O，0.16576075g NaH2PO4.2H2O 用蒸馏水溶解，加入0.484942g 甲硫氨酸、0.01533g NBT、0.00075272g 核黄素（扩大10倍，溶于10ml蒸馏水，取0.25ml，此2种药剂现用现加）及0.000037224g EDTANa2（配时扩大100倍，用蒸馏水定容100ml 后，取0.75ml），定容至250ml，4℃避光保存。

2．操作：

取30支粗细、厚薄一致的洁净试管，分别加入3.98反应液，29支加20ul( )酶液，另一支不加酶液加同样体积的提取缓冲液，以1支加酶的不作光照处理的为空白对照，余4000Lux 照光20-25分钟后测OD560，每提取液重复3次，取平均值。

3.计算：在上述条件下，抑制50％NBT光化还原的酶量定为一个酶单位，按Constantine N. et al 1977(Pl. Physiol. 59:309-314)方法计算酶比活力。

SOD units/mg protein = {[ OD560 (不加酶)/ OD560（加酶）-1]×稀释倍数×4（反应液体积）}/ [0.02（所加酶液ml数）×每ml酶粗提液含蛋白mg]

超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD，EC 1.15.1.1）参照Donahue等(1997)，Schickler 和Caspi (1999) 的方法。不同人工老化大豆种子的胚轴在液氮种迅速研磨程均匀粉末。约0.1 g材料于3 mL提取缓冲溶液（50mmol L－1 Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液，pH 7.0，含1.0 mmol L-1 EDTA，0.05％（V/V）Triton X-100，2％（W/V）不溶性聚乙烯吡咯烷酮）中研磨成匀浆。经过10000×g，5min和16000×g，20min，4℃下两次离心后，取上清液进行SOD 活性测定。或液氮冷却后存于－80℃。

SOD酶活性测定利用SOD抑制氮蓝四唑（NBT）在光下被·O2－还原的反应。反应液为含13 mmol·L-1甲硫氨酸（核黄素电子供体），75 μmol L-1氯化硝基四氮唑蓝, 16.7 μmol·L-1核黄素（产生·O2－），0.1 mmol L-1 EDTA 的50 mmol L-1磷酸缓冲液(pH 7.8)。在波长560nm处，检测吸光光度值。SOD活性以每mg蛋白抑制NBT光化还原的50%为一个酶活性单位U。

关于用户权限的数据库设计

1 设计思路 为了设计一套具有较强可扩展性的用户认证管理，需要建立用户、角色和权限等数据库表，并且建立之间的关系，具体实现如下。 1.1 用户 用户仅仅是纯粹的用户，用来记录用户相关信息，如用户名、密码等，权限是被分离出去了的。用户（User）要拥有对某种资源的权限，必须通过角色（Role）去关联。 用户通常具有以下属性： 编号，在系统中唯一。 ü名称，在系统中唯一。 ü用户口令。 ü注释，描述用户或角色的信息。 1.2 角色 角色是使用权限的基本单位，拥有一定数量的权限，通过角色赋予用户权限，通常具有以下属性： ü编号，在系统中唯一。 ü名称，在系统中唯一。 ü注释，描述角色信息 1.3 权限 权限指用户根据角色获得对程序某些功能的操作，例如对文件的读、写、 修改和删除功能，通常具有以下属性： ü编号，在系统中唯一。 ü名称，在系统中唯一。 ü注释，描述权限信息 1.4 用户与角色的关系 一个用户（User）可以隶属于多个角色（Role），一个角色组也可拥有多个用户，用户角色就是用来描述他们之间隶属关系的对象。用户（User）通过角色（Role）关联所拥有对某种资源的权限，例如 l 用户（User）： UserID UserName UserPwd 1 张三 xxxxxx 2 李四 xxxxxx …… l 角色（Role）： RoleID RoleName RoleNote 01 系统管理员监控系统维护管理员 02 监控人员在线监控人员 03 调度人员调度工作人员 04 一般工作人员工作人员…… 从该关系表可以看出，用户所拥有的特定资源可以通过用户角色来关联。 1.5 权限与角色的关系 一个角色（Role）可以拥有多个权限（Permission），同样一个权限可分配给多个角色。例如： l 角色（Role）： RoleID RoleName RoleNote 01 系统管理员监控系统维护管理员 02 监控人员在线监控人员

SOD酶活性测定方法

SOD酶活性测定 所需药品： （1）0.1mol/l pH7.8的磷酸钠缓冲液： A液：0.1mol/l磷酸氢二钠液 B液：0.1mol/l磷酸二氢钠液 1毫升B+10.76毫升A （2）0.026mol/l蛋氨酸液（Met）：现用现配 称取0.3879克蛋氨酸，用1号液定容至100毫升。 （3）75*10-5mol/l氯化硝基四氮唑蓝（NBT）液：现用现配 称取0.1533克NBT，先用少量蒸馏水溶解，然后定容至250毫升。 （4）1umol/lEDTA-2钠和2*10-5mol/l核黄素混合液 （5）0.05mol/l pH7.8的磷酸钠缓冲液 （6）石英砂 实验步骤： 1.酶液制备：称取0.5克鲜叶，放入研钵中，加入3毫升5号液和少量石英砂，于冰浴中研成匀浆。然后用5号液定容至8毫升，于0～4℃、13000g时离心15分钟，上清液即为酶提取液。酶液可在低于0℃下的环境中保存。 2.按下表加入试剂： 试剂摇匀后，迅速遮光处理1号杯，其余杯在25℃、光强为4000勒克司的条件下照光处理15分钟，然后立即遮光。接着在560nm下，以1号杯作为空白测定其余杯中溶液的光密度。假定2、3号杯中溶液抑制NBT光还原的相对百分率为100%，然后按下式分别计算其余杯中溶液抑制NBT光还原的相对百分率。 M/N=100/X M——2、3号杯中溶液的光密度的平均值 N——其余杯中溶液的光密度值 X——其余杯中溶液抑制NBT光还原的相对百分率 然后以酶液量为横坐标，以其余杯中溶液抑制NBT光还原的相对百分率（X）为纵坐标制作曲线，根据线性好的曲线所得出的函数关系计算抑制NBT光还原的相对百分率为50%时所加入的酶液量，以该酶液量作为1个酶活单位。 结果计算：SOD活力按下式计算： A=V*1000*60/（B*W*T）

SOD(超氧化物歧化酶)活性测定

SOD(超氧化物歧化酶)活性测定 氮蓝四唑法 一、原理 超氧化物歧化酶(superoxide dismutase ，SOD)普遍存在动、植物的体内，是一种清除超氧阴离子自由基的酶，它催化下面的反应： o 2.-+H O 2 22+O H ＋ 反应产物H 2O 2可由过氧化氢酶进一步分解或被过氧化物酶利用。超氧化物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性的大小。在有氧化物质存在下，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易被氧化而产生超氧阴离子，超氧阴离子可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙，后者在560nm 处有最大吸收。而SOD 可清除超氧阴离子，从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后，反应液蓝色愈深，说明酶的活性愈低，反之酶的活性俞高。据此可计算出酶活性的大小。 二、材料、仪器设备及试剂 (一)材料 植物器官(花瓣、叶片等) (二)仪器设备 冰箱、低温高速离心机、微量加样器 (1mL 、20μL 、100μL)、移液管、精密电子天平、UV-752型紫外分光光度计、试管、研钵、剪刀、镊子、荧光灯(反应试管处照度为4000Lux 或Lx) (三)试剂 (1) 0.05mol/L 磷酸缓冲液(PH7.8)。 (2) 130mmol/L 甲硫氨酸(Met)溶液：称1.9399gMet 用磷酸缓冲液定溶至100mL 。 (3)750μmol/L 氮蓝四唑溶液：称取0.06133gNBT 用磷酸缓冲液定溶至100mL ，避光保存。 (4)100μmol/LEDTA -Na 2溶液：称取0.03721g EDTA-Na 2，用磷酸缓冲液定溶1000mL 。 (5)20μmol/L 核黄素溶液：称取0.0753g 核黄素用蒸馏水定溶到1000mL ，避光保存。 三、试验步骤 (一)酶液的提取 (1)称取植物材料(去叶脉)0.2g ，加1ml 预冷的磷酸缓冲液在冰浴上研磨成浆，加缓冲

数据库用户管理(用户管理,权限分配)

学习资料：数据库用户管理 SQL Server的安全包括服务器安全和数据安全两部分。服务器安全是指可以SQL Server数据库服务器的登录管理、数据库数据的访问安全等，数据安全则包括数据的完整性、数据库文件的安全性。因此，如果你准备访问SQL Server数据库的数据，你应该具有SQL Server登录帐户和访问数据库的权限。 下面逐一讲解如何创建登录帐户、如何创建数据库用户和如何给用户授权。 一、SQL Server身份验证 在登录SQL Server时，需要选择身份验证的方式，SQL Server支持以下两种身份验证。 Windows身份验证。 SQL Server身份验证。 简单地说，Windows身份验证是使用当前登录到操作系统的用户去登录，而SQL Server身份验证是使用SQL Server中建立的用户去登录。 登录验证通过以后，就可以像管理本机SQL Server一样来管理远程机上的SQL Server 服务。 二、建立登录帐户并赋予权限 与创建数据库一样，建立SQL Server数据库的登录名、用户名，为其赋予权限也有两种方式。 1）使用SQL Server Management Studio建立登录账户并赋予权限 2）使用T-SQL建立登录账户并赋予权限 1．在SQL Server Management Studio中建立登录账户并赋予权限在SQL Server Management Studio中，通常需要进行三步操作。 1）建立SQL Server登录名 在SQL Server Management Studio中，建立登录的步骤如下。 （1）在“安全性”节点下，右击“登录名”，在右键菜单中选择“新建登录名”选项。

邻苯三酚自氧化法简易操作图解-测量SOD活性方法

连苯三酚自氧化法测定·O2-自由基的清除能力简介（适用于：SOD及各种抗氧化剂） 文献来源 [1] Xican Li. Improved Pyrogallol Autoxidation Method: A Reliable and Cheap Superoxide-scavenging Assay Suitable for All Antioxidants. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2012, 60:6418-6424. 操作图解 具体方法 1 溶液配制 1.1 Tris溶液（0.1mol/L）：1.21 gTris（三羟甲基氨基甲烷，M.W. 121.1）+100 mL蒸馏水。 1.2 HCl溶液（0.1mol/L）：取0.1 mL浓盐酸，加蒸馏水稀释到6 mL。 1.3 Tris-HCl缓冲液（0.05mol/L，pH7.4，含1mmol/L Na2EDTA） 40 mL0.1 mol/L Tris溶液+ x mL0.1 mol/L HCl溶液+15.2 mg Na2EDTA，混合，稀释到80 mL。用pH 计测量，pH应为7.4。用棕色瓶保存在冰箱内(最多保存三天) 。（以上为一个样品的用量）用前稍热至室温，再测pH值，符合要求即可。 1.4 60 mmol/L连苯三酚溶液（溶于1 mmol/L盐酸中） 取0.1mol/L HCl溶液（见1.2项）20μL，用蒸馏水稀释到2 mL，得1 mmol/L盐酸溶液（用pH计测量，pH＝2.5-3.0）。再往里加连苯三酚14.6 mg (M。W.126.1 )，即得。（当天有效,以上为1个样品的用量）。 2 测试液 2.1连苯三酚溶液：取2950μL Tris-HCl缓冲液加入到石英比色皿中，再加约50μL连苯三酚溶液，迅速混合(颠覆式)，开始计时,每隔30秒读数一次A值（325nm），至300秒（5min）时为止。（空白参比：Tris-HCl 缓冲液） ΔA＝A325nm,300s - A325nm,30s。由于ΔA值反映了生成·O2的初始浓度，所以，对于同一批实验而言，此时的ΔA值必须相等。此时的ΔA为ΔA0。 3.2 样品溶液：取xμL样品溶液加入到大石英比色皿中，再加（2950-x）μL Tris-HCl缓冲液，再加50μL 连苯三酚溶液，迅速混合(颠覆式)，开始计时,每隔30秒读数一次（A值，325nm），至300秒时为止。（空白参比：Tris-HCl缓冲液） ΔA＝A325nm,300s - A325nm,30s。此时的ΔA为ΔA样。 3 计算公式

最经典用户权限管理模块设计

实现业务系统中的用户权限管理--设计篇 B/S系统中的权限比C/S中的更显的重要，C/S系统因为具有特殊的客户端，所以访问用户的权限检测可以通过客户端实现或通过客户端+服务器检测实现，而B/S中，浏览器是每一台计算机都已具备的，如果不建立一个完整的权限检测，那么一个“非法用户”很可能就能通过浏览器轻易访问到B/S系统中的所有功能。因此B/S业务系统都需要有一个或多个权限系统来实现访问权限检测，让经过授权的用户可以正常合法的使用已授权功能，而对那些未经授权的“非法用户”将会将他们彻底的“拒之门外”。下面就让我们一起了解一下如何设计可以满足大部分B/S系统中对用户功能权限控制的权限系统。 需求陈述 ?不同职责的人员，对于系统操作的权限应该是不同的。优秀的业务系统，这是最基本的功能。 ?可以对“组”进行权限分配。对于一个大企业的业务系统来说，如果要求管理员为其下员工逐一分配系统操作权限的话，是件耗时且不够方便 的事情。所以，系统中就提出了对“组”进行操作的概念，将权限一致 的人员编入同一组，然后对该组进行权限分配。 ?权限管理系统应该是可扩展的。它应该可以加入到任何带有权限管理功能的系统中。就像是组件一样的可以被不断的重用，而不是每开发一套 管理系统，就要针对权限管理部分进行重新开发。 ?满足业务系统中的功能权限。传统业务系统中，存在着两种权限管理，其一是功能权限的管理，而另外一种则是资源权限的管理，在不同系统 之间，功能权限是可以重用的，而资源权限则不能。 关于设计 借助NoahWeb的动作编程理念，在设计阶段，系统设计人员无须考虑程序结构的设计，而是从程序流程以及数据库结构开始入手。为了实现需求，数据库的设计可谓及其重要，无论是“组”操作的概念，还是整套权限管理系统的重用性，都在于数据库的设计。 我们先来分析一下数据库结构： 首先，action表（以下简称为“权限表”），gorupmanager表（以下简称为“管理组表”），以及master表（以下简称为“人员表”），是三张实体表，它们依次记录着“权限”的信息，“管理组”的信息和“人员”的信息。如下图：

SOD测定方法

酶液提取:称取鲜叶样品。0.5g于预冷的研钵中，加lml0.05mol/1 pH7.0磷酸缓冲液在冰浴上研磨成浆，加缓冲液使终体积为5ml。将提取液于10000转/分冷冻离心20分钟，上清液用于测定SOD, POD, CAT活力测定及丙二醛含量测定。 SOD： 测定SOD活性的试剂配制及用量: ①磷酸缓冲液(PH7.8) 0.05moI/L 3.1m1，空白为3.2m1; ②EDTA-Na 2 1mg/m1 0.2mL; ③L一甲硫氨酸20mg/mL 0.2m1; ④核黄素0.1 mg/ml，吸取上清液0.2m1; ⑤NBT lmg/ml 0.2m1; ⑥提取酶液0.1ml，空白不加酶液。 反应总体积为4m1, 第1组、4000Lx光照30min，遮黑布终止反应(用光照培养箱，灯管全部打开即可)。 第2组、黑暗处理30 min。 置560nm处测定光密度。SOD活性单位以抑制NBT光化还原50%作为一个酶活性单位(u)，按以下公式计算SOD活性: 式中，Ack为照光管的吸光度值;AE为遮光管的吸光度值:V为样品液总体积((ml);Vt为测定时样品用量(ml); W为样品鲜重。 POD： 在试管中依次加入 4m1 0.3%愈创木酚(0.02mo1/1 pH6磷酸缓冲液配置)、 50ul酶液、 50 ul0.3%H 20 2， 摇匀，立即计时，1分钟后在470nm波长下比色，每1分钟记录一次吸光度值，连续记录5分钟。以每分钟内A470变化0.01为1个过氧化物酶活性单位(U)，按下式计算过氧化物酶活性:

式中:d A470为反应时间内吸光度的变化:Vt为提取液总体积(ml); W为样品鲜重(g); Vs为测定时取用酶液体积(ml); t为反应时间(min) 。 CAT 取酶提取液50 u 1， 加入3m1 0.05 mol/1 pH7.0磷酸缓冲液， 再加入0.3%H 2O 2 200 u1， 迅速摇匀，立即计时，1分钟后在UV-754分光光度计的240nm波长下比色，每1分钟记录一次吸光度值，连续记录5分钟。以每分钟内A240下降0.01为1个酶活性单位(U)，按下式计算过氧化氢酶活性: 式中:△A 240 为反应时间内吸光度的变化;Vt为提取液总体积(ml):w为样品鲜重(g); Vs为测定时取用酶液体积(ml); t为反应时间(min) MDA 取上清液1.5m1， 加入2.5m10.5%的硫代巴比妥酸(TBA)(用10%三氯乙酸配制)。 混合物于100℃沸水浴中加热20min，迅速冷却，于10000转/分离心20分钟，分别测定上清液在450, 532nm及600nm处的吸光度值。按以下公式计MDA浓度C( u mol/1)和含量(nmollgFW): C(u mol/1)=6.45 X (A532-A600)-0.56 X A450

实验五、用户管理与权限管理

实验五、用户管理和权限管理 一、实验目的 1、掌握对系统用户和组的建立与管理。 2、掌握linux的文件访问权限和访问权限类型。 3、掌握如何设置文件访问权限。 二、实验重点与难点 1、学会使用useradd、usermod和userdel命令 2、学会使用chmod设置文件权限 三、实验内容及步骤 1)查看/etc/passwd文件和/etc/shadow文件内容，识别该文件中记录的信 息内容。 2)使用YaST创建新用户user1和用户组group1，将用户user1加入到组 group1。 3)用useradd命令建立2个用户admin和geeko（注意要求创建用户主目 录），设定好对应的用户密码，再用groupadd命令建立一个用户组school。 4)使用命令将admin用户改名为administrator。 5)使用命令将administrator账户锁定，然后再使用该账户登录系统，观 察会发生什么？然后再将账号解除锁定。 6)将linux系统注销使用geeko账号登录，在geeko的主目录下创建两个 新的文件K1,K2。在/tmp目录下创建两个文件W1,W2。 7)删除geeko账号及其主目录。并尝试删除所有属于geeko用户的文件。 8)在/tmp目录中创建两个新文件newfile，test，将newfile文件访问权限 设置为rwxrw-rw-，test文件访问权限设置为rwxr--r-- 。 9)使用su命令将用户身份切换至administrator，将“I can read and write”写入newfile文件中，并保存。是否可以对test文件进行编辑？ 10)如果要实现其他用户对test文件的编辑权限，应该如何设置该文件的 权限？写出操作的命令。 11)创建一个目录directory，将目录访问权限设置为rwxrwxrw-。

数据库管理员常工作权限和流程

目录 1数据库操作规范： 1.1数据库关键参数配置： ·新项目或系统、数据库填写系统上线更新记录表； ·mysql数据库应用服务端口设定，默认实例服务端口是3306，其它实例需注意服务端口值； ·数据库内存使用是实际物理内存三分之二，如果是双机系统建议不要超过二分 之一； ·严禁按照Internet上查找的资料中只言片语，对数据库进行调整； 1.2数据库数据提取流程： 1业务部门相关人员填写“数据申请单”； 2部门负责人签字； 3DBA依情况操作； 4需求申请部门验收。 1.3数据库操作管理制度： ①业务部门要求的数据库操作需要有书面审批流程，DBA应保留原始文件一份； ②业务部门所填写的数据申请表单，一定需要相关负责人签字后方可执行。 ③在做数据库更改操作前，必须和业务人员核对业务逻辑，在完全清楚业务逻辑后进 行数据库操作； ④所有数据库更改操作，必须先进行测试，并将操作放在事物中，分步执行； ⑤保留重要操作的脚本、操作前数据、操作过程结果，以便日后查对； ⑥在完成操作后，要给操作需求方最终结果报告，使需求方可以及时核对； ⑦对于一些核心机密数据，需要遵守公司相关的保密协议，不能向外泄露；

⑧注意维护数据库服务器的硬盘空间，及盘阵上磁盘状态； ⑨按流水记录数据操作日志，作为以后查对凭证； ⑩以后有关数据库手工操作之前，一定通知所有应用程序开发人员，以便评估、保存操作结果； ⑾DBA个人使用的计算机应严格管理，尽可能不要在办公区外上网，更不要浏览和工作无关的网站，一定要安装防毒套装软件，避免感染病毒和木马， 严禁安装与工作无关的应用软件； ⑿当数据库需要调整时，严禁按照网上查找的资料操作数据库，一定是先查看官方完整文档或权威文档，通过严格测试，书写完整报告，经评估后，填写 数据库维护申请表，获审批方可操作； ⒀严禁在其它地方使用工具连接生产数据库，进行操作； ⒁操作流程：填写数据申请单 ·业务部门业务人员提出申请； ·业务部门负责人审核； ·运营DBA执行，操作完成后，需在“DBA操作结果”中写明操作语 句和影响记录条数； ·运营核查； ·业务部门任务申请人员检验操作结果，并签字确认； ·单据由运营部门保留。 1.4操作系统帐号管理制度： ①在数据库服务器、关键应用服务器上，只能有数据库DBA人员的帐号，开发人 员需要介入时，填写开发人员使用数据库申请单； ②在操作系统中需要启动本地安全策略中有关帐户管理的安全策略，策略如下： ·启动密码必须符合复杂性要求； ·密码长度最小值6个字符； ·帐户锁定时间10分钟； ·帐户锁定阀值5次； ③每两个星期检查一次操作系统日志； 1.5数据库帐号管理制度： ①应用程序帐号权限需要做严格限制，对不同应用需求使用不同权限和操作范围帐号， 要有部门负责人确认； ②在不同应用服务器上相同应用程序应使用不同数据库访问帐号； ③帐号密码需要有复杂性要求(字母、数字14位以上)； ⑤所有帐号名称、访问权限、应用程序名称必须记录在案(如：表格形式)； ⑥在防火墙上严格限制数据库端口访问的IP地址，只有正常对外服务的应用服务器 IP可以访问相关数据库； ⑦数据库超级用户权限使用严格限制；

土壤酶活性测定方法综合

土壤酶活性测定方法 1、土壤脲酶的测定方法（苯酚钠—次氯酸钠比色法） 一、原理 脲酶存在于大多数细菌、真菌和高等植物里。它是一种酰胺酶作用是极为专性的，它仅能水解尿素，水解的最终产物是氨和二氧化碳、水。土壤脲酶活性，与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效磷含量呈正相关。根际土壤脲酶活性较高，中性土壤脲酶活性大于碱性土壤。人们常用土壤脲酶活性表征土壤的氮素状况。 土壤中脲酶活性的测定是以脲素为基质经酶促反应后测定生成的氨量，也可以通过测定未水解的尿素量来求得。本方法以尿素为基质，根据酶促产物氨与苯酚—次氯酸钠作用生成蓝色的靛酚，来分析脲酶活性。 二、试剂 1）甲苯 2）10%尿素：称取10g尿素，用水溶至100ml。 3）柠檬酸盐缓冲液（）：184g柠檬酸和氢氧化钾（KOH）溶于蒸馏水。将两溶液合并，用1mol/LNaOH将PH调至，用水稀释定容至1000ml。 4）苯酚钠溶液（L）：苯酚溶于少量乙醇，加2ml甲醇和丙酮，用乙醇稀释至100ml （A液），存于冰箱中；27gNaOH溶于100ml水（B液）。将A、B溶液保存在冰箱中。使用前将A液、B液各20ml混合，用蒸馏水稀释至100ml。

5）次氯酸钠溶液：用水稀释试剂，至活性氯的浓度为%，溶液稳定。 6）氮的标准溶液：精确称取硫酸铵溶于水并稀释至1000ml，得到1ml含有氮的标准液；再将此液稀释10倍（吸取10ml标准液定容至100ml）制成氮的工作液（ml）。 三、操作步骤 称取5g土样于50ml三角瓶中，加1ml甲苯，振荡均匀，15min后加10ml10% 尿素溶液和20ml PH 柠檬酸盐缓冲溶液，摇匀后在37℃恒温箱培养24小时。培养结束后过滤，过滤后取1ml滤液加入50ml容量瓶中，再加4ml苯酚钠溶液和3ml次氯酸钠溶液，随加随摇匀。20min后显色，定容。1h内在分光光度计与578nm波长处比色。（靛酚的蓝色在1h内保持稳定）。 标准曲线制作：在测定样品吸光值之前，分别取0、1、3、5、7、9、11、13ml 氮工作液，移于50ml容量瓶中，然后补加蒸馏水至20ml。再加入4ml苯酚钠溶液和3ml次氯酸钠溶液，随加随摇匀。20min后显色，定容。1h内在分光光度计上于578nm波长处比色。然后以氮工作液浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。 注意事项: 1、每一个样品应该做一个无基质对照，以等体积的蒸馏水代替基质，其他操作 与样品实验相同，以排除土样中原有的氨对实验结果的影响。 2、整个实验设置一个无土对照，不加土样，其他操作与样品实验相同，以检验 试剂纯度和基质自身分解。

抗氧化酶SODPODCAT活性测定方法

抗氧化酶 S O D P O D C A T活性测 定方法 集团文件版本号：（M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988）

抗氧化酶（SOD、POD、CAT）活性测定方法 酶液制备：取0.2g（可视情况调整）样品（新鲜叶片或根系）洗净后置于预冷的研钵中，加入1.6ml 50mmol/L预冷的磷酸缓冲液 （pH7.8）在冰浴上研磨成匀浆，转入离心管中在4℃、12000g下离心20min，上清液即为酶液。 一、超氧化物歧化酶（SOD）活性测定（氮蓝四唑光化还原法） 1、试剂的配制 （1）0.05mol/L磷酸缓冲液(PBS，pH7.8)： A母液：0.2mol/L磷酸氢二钠溶液: 取Na 2HPO 4 ·12H 2 O（分子量 358.14）71.7g； B母液：0.2mol/L磷酸二氢钠溶液：取NaH 2PO 4 ·2H 2 O（分子量 156.01）31.2g。 分别用蒸馏水定容到1000ml。 0.05mol/L PBS（pH7.8）的配制：分别取A母液(Na 2HPO 4 ) 228.75ml，B母液(NaH 2PO 4 ) 21.25ml，用蒸馏水定容至1000ml。 参考文献：李合生主编：植物生理生化实验原理和技术.高等教育出版社，2000：267～268。 （2）130mM甲硫氨酸溶液：取1.9399g Met用磷酸缓冲液（pH7.8）定容至100ml。 （3）100μM EDTA-Na 2溶液：取0.03721gEDTA-Na 2 用磷酸缓冲液定 容至1000ml。 （4）20μM核黄素溶液：取0.0753g核黄素用蒸馏水液定容至1000ml，避光保存。 （5）750uM 氮蓝四唑(NBT)溶液：取0.06133g NBT用PBS定容至100ml，避光保存。 2、酶活性测定 （1）取10ml试管（要求透明度好）

用户与权限管理文档

用户与权限管理文档 一、安装SAP客户端 (2) 二、配置SAP客户端 (4) 三、用户管理 (6) 3.1登录SAP服务器 (6) 3.2从无到有建立用户 (9) 3.3从其它用户复制用户 (13) 3.4删除用户 (14) 3.5锁定/解锁用户 (15) 3.6初始用户密码 (15) 3.7给用户分配角色 (16) 四、用户的批量维护 (17) 五、PFCG (22) 六、ST01&SU53使用手册 (38) 七、BW权限管理 (50) 八、SUIM (64) 九、SU20 (97) 十、SU21 (102) 十一、SU22&SU24 (110)

一、安装SAP客户端 当你第一次通过SAP客户端使用SAP产品时，首先你需要安装SAP的客户端，即我们通常所说的SAP Gui。 1.1 安装SAP客户端 (1) 找到SAPGui安装目录，双击SapGuiSetup.exe文件。 (2)在弹出的安装界面选择按钮。

(3)在选择要安装的组件画面只选择SAP GUI、SAP Logon pad和SAP Logon这三个组件， 其它组件都不用选。 (4)选择完成后单击按钮开始安装。 (5)安装完毕后单击"Finish"按钮结束安装过程。 1.2 给SAP客户端打补丁 (1) 双击SAP Gui安装目录下的SAP客户端补丁安装文件，根据提示安装最新的补丁。 至此，SAP客户端安装完成，我们就可以进行下一步的设定了。

二、配置SAP客户端 当安装好SAP Gui之后，你必须对SAP Gui进行配置，以连接到特定的SAP服务器。 2.1 手工配置SAP客户端 (1) 双击桌面的的"SAP Logon"快捷方式图标或单击"开始"->"SAP Front End"->"SAP Logon"，运行SAP客户端，进入如下界面： (2)单击按钮，进入服务器参数设置画面。

MySQL数据库管理之权限管理

MYSQL数据库管理之权限管理 小编做客服有一阵子了，总是有人在QQ群或者论坛上问关于mysql权限的问题,今天就总结一下关于MYSQL数据库的权限管理的经验。希望大家看完有所收获啦~ 一、MYSQL权限简介 关于mysql的权限简单的理解就是mysql允许你做你权利以内的事情,不可以越界。比如只允许你执行select操作，那么你就不能执行update操作。只允许你从某台机器上连接mysql，那么你就不能从除那台机器以外的其他机器连接mysql。 那么MYSQL的权限是如何实现的呢?这就要说到mysql的两阶段的验证，下面详细来介绍： 第一阶段：服务器首先会检查你是否允许连接。因为创建用户的时候会加上主机限制，可以限制成本地、某个IP、某个IP段、以及任何地方等，只允许你从配置的指定地方登录。后面在实战的时候会详细说关于主机的限制。 第二阶段：如果你能连接，MYSQL会检查你发出的每个请求，看你是否有足够的权限实施它。比如你要更新某个表、或者查询某个表，MYSQL会检查你对哪个表或者某个列是否有权限。再比如，你要运行某个存储过程，MYSQL会检查你对存储过程是否有执行权限等。 MYSQL到底都有哪些权限呢?从官网复制一个表来看看： 权限权限级别权限说明 CREATE数据库、表或索引创建数据库、表或索引权限DROP数据库或表删除数据库或表权限 GRANT OPTION数据库、表或保存的程序赋予权限选项 REFERENCES数据库或表 ALTER表更改表，比如添加字段、索引等DELETE表删除数据权限 INDEX表索引权限 INSERT表插入权限 SELECT表查询权限 UPDATE表更新权限 CREATE VIEW视图创建视图权限 SHOW VIEW视图查看视图权限 ALTER ROUTINE存储过程更改存储过程权限 CREATE ROUTINE存储过程创建存储过程权限 EXECUTE存储过程执行存储过程权限

纤维素酶活力测定方法_张瑞萍

测试与标准 纤维素酶活力测定方法 张瑞萍 南通工学院(226007) 摘　要　用DN S 为显色剂,分别以滤纸和CM C 为底物,以滤纸糖酶活性(FP A )和羧甲基纤维素酶活性(CM C a se )表征纤维素酶活力。确定酶活测定用波长为530nm,参比溶液应为失活酶、底物和DN S 等共热的反应物;比较了两种底物的酶活力测定方法。结果表明,CM C a se 比FP A 高,说明酶对水溶性底物有较高的活力,也表明吸附对酶的活性部位与纤维素分子链段的结合及催化均有很大影响;对于不同牌号的纤维素酶,织物的酶减量率与CM C 酶活力关系密切。 叙　词:　测试　纤维素酶　活度中图分类号:　TS197 纤维素酶是多组分复合物,各组分的底物专一性不同。纤维素酶作用的底物比较复杂,反应产物不同,致使纤维素酶活力测定方法很多,各国的方法亦不统一。我们选择滤纸、CM C 为底物,原理系利用纤维素酶催化水解纤维素,产生纤维多糖、二糖及葡萄糖等还原糖,与显色剂反应,求出还原糖的浓度,间接求出酶的活力。由不同底物测得的酶活力分别称作FPA (滤纸糖酶活力)和CM C ase (羧甲基纤维素酶酶活力)。本文分析确定酶活力测定的主要条件,比较两种底物的酶活力测定方法的结果,探讨纤维素酶活力与织物减量率的关系,为酶在生产中的利用提供依据。 1　实验方法 1.1　化学药品、材料 纤维素酶(工业品),DNS 试剂(自配),冰醋酸,醋酸钠,葡萄糖(均为分析纯),滤纸(定性),羧甲基纤维素酶CM C (试剂级),纯棉针织物半制品(南通针织厂)。 1.2　FPA 滤纸酶活力和CMC 酶活力的测定 取适当稀释的酶液,分别以滤纸或1%的CM C 溶液为底物,于50℃恒温水解反应1h ;然后加入显色剂DNS,沸水浴中煮沸5min;再加入蒸馏水,于530nm 测定吸光度OD 值。 酶活可定义为:每毫升酶液1min 产生1mg 葡萄糖为一个单位( )。 1.3　针织物酶减量率的测定 将酶处理前后的试样在烘箱中105℃烘至恒重。减量率= 处理前织物干重-处理后织物干重 处理前织物干重 ×100% 2　结果与讨论 2.1　显色剂的选择 选用DNS ,在碱性条件下与还原糖反应,生成有色化合物,用分光光度计比色,确定低分子糖含量。 碱性条件下DNS 与还原糖共热反应如下: O 2N OH O 2N CO OH +还原糖 　H 2N OH CO OH O 2N DN S(黄色) 3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色) 生成的棕红色氨基化合物系比色法测定基础。2.2　最大吸收波长的确定 选取490～580nm 波长对显色液进行比色。由图1可知,不同浓度的葡萄糖溶液在490～500nm 处有最大吸收,DNS 在此波长下也有较明显的吸收。为了排除DNS 的干扰,选择在波长 530nm 处进行测定,此波长下的葡萄糖吸收虽有所降低,然而符合“吸收最大、干扰最小”的原则。 图1　D NS 与葡萄糖的吸收曲线 2.3　底物及酶本身含糖量的影响 在实验过程中发现,底物特别是滤纸,也含有一定的还原糖,在碱性的DNS 试剂中也会发色。而且,试验所用的纤维素酶是一种工业级的复合酶,品种不同,其本身含糖量也不同。为了排除这类还原糖的干扰,参比溶液取失活后的酶、底物、DNS 等共热的反应物。2.4　葡萄糖标准曲线 用不同浓度的葡萄糖溶液作为标准溶液,与DNS 共热反应显色后,测出其吸光度OD 值(见图2)。标准曲线的线性相关系数R 2为0.9991(见图2),线性相当好,可以用于酶活力的测定。 38 印　染(2002No .8) www .cdfn .com .cn

统一用户及权限管理

文件编号： 统一用户及权限管理平台 解决方案及设计报告 版本号0.9

拟制人王应喜日期2006年6月审核人__________ 日期___________ 批准人__________ 日期___________

目录 第一章引言 (1) 1.1编写目的 (1) 1.2背景 (1) 1.3定义 (1) 1.4参考资料 (1) 第二章统一权限管理解决方案 (2) 2.1需求分析 (2) 2.2系统架构 (3) 2.3系统技术路线 (7) 第三章统一用户及授权管理系统设计 (7) 3.1组织机构管理 (8) 3.2用户管理.......................................................................................................... 错误！未定义书签。 3.3应用系统管理、应用系统权限配置管理 (9) 3.4角色管理 (8) 3.5角色权限分配 (9) 3.6用户权限(角色)分配 (9) 3.7用户登录日志管理功 (9) 第四章对外接口设计 (10) 4.1概述 (10) 4.2接口详细描述 (10) 4.2.1获取用户完整信息 (14) 4.2.2获取用户拥有的功能模块的完整信息 (15) 4.2.3获取用户拥有的一级功能模块 (16) 4.2.4获取用户拥有的某一一级功能模块下的所有子功能模块 (17) 4.2.5获取用户拥有的某一末级功能模块的操作列表 (19) 4.2.6判断用户是否拥有的某一末级功能模块的某一操作权限 (20) 4.2.7获取某一功能模块的ACL—尚需进一步研究 (21)

JAVA用户角色权限数据库设计

实现业务系统中的用户权限管理 B/S系统中的权限比C/S中的更显的重要，C/S系统因为具有特殊的客户端，所以访问用户的权限检测可以通过客户端实现或通过客户端+服务器检测实现，而B/S中，浏览器是每一台计算机都已具备的，如果不建立一个完整的权限检测，那么一个“非法用户”很可能就能通过浏览器轻易访问到B/S系统中的所有功能。因此B/S业务系统都需要有一个或多个权限系统来实现访问权限检测，让经过授权的用户可以正常合法的使用已授权功能，而对那些未经授权的“非法用户”将会将他们彻底的“拒之门外”。下面就让我们一起了解一下如何设计可以满足大部分B/S系统中对用户功能权限控制的权限系统。 需求陈述 ?不同职责的人员，对于系统操作的权限应该是不同的。优秀的业务系统，这是最基本的功能。 ?可以对“组”进行权限分配。对于一个大企业的业务系统来说，如果要求管理员为其下员工逐一分配系统操作权限的话，是件耗时且不够方便的事情。所以，系统中就提出了对“组”进行操作的概念，将权限一致的人员编入同一组，然后对该组进行权限分配。 ?权限管理系统应该是可扩展的。它应该可以加入到任何带有权限管理功能的系统中。 就像是组件一样的可以被不断的重用，而不是每开发一套管理系统，就要针对权限管理部分进行重新开发。 ?满足业务系统中的功能权限。传统业务系统中，存在着两种权限管理，其一是功能权限的管理，而另外一种则是资源权限的管理，在不同系统之间，功能权限是可以重用的，而资源权限则不能。 关于设计 借助NoahWeb的动作编程理念，在设计阶段，系统设计人员无须考虑程序结构的设计，而是从程序流程以及数据库结构开始入手。为了实现需求，数据库的设计可谓及其重要，无论是“组”操作的概念，还是整套权限管理系统的重用性，都在于数据库的设计。 我们先来分析一下数据库结构： 首先，action表（以下简称为“权限表”），gorupmanager表（以下简称为“管理组表”），以及master表（以下简称为“人员表”），是三张实体表，它们依次记录着“权限”的信息，“管理组”的信息和“人员”的信息。如下图：

酶活性测定方法

酶活性测定 1、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase) 试剂：0.1% p-nitrophenylphosphate disodium salt（P-硝基苯磷酸二钠） 0.2mol/L 碳酸盐/碳酸氢盐缓冲溶液(pH: 9.6)——buffer 0.2mol/L NaOH 测定步骤：(1) 加入样品之前，0.1% P-硝基苯磷酸二钠及buffer 37°C孵化30 min； (2) 1mL污泥样品+1mL0.1% P-硝基苯磷酸二钠+2mL buffer 37°C孵化30 min； (3) 加入2mL 0.2mol/L NaOH终止反应； (4) 2500g 离心，上清液在410nm测定吸光度。 计算： 每个污泥样品酶活性的测定均包含两个平行样S+一个空白样品S0。 [(S1- S0)+(S2- S0)]/2*0.704 (Eu) 2、酸性磷酸酶(Acid phosphatase) 试剂：0.1% p-nitrophenylphosphate disodium salt（P-硝基苯磷酸二钠） 0.2mol/L HAc/Ac缓冲溶液(pH: 4.8)——buffer 0.2mol/L NaOH 测定步骤：(1) 加入样品之前，0.1% P-硝基苯磷酸二钠及buffer 37°C孵化30 min； (2) 1mL污泥样品+1mL0.1% P-硝基苯磷酸二钠+2mL buffer 37°C孵化30 min； (3) 加入2mL 0.2mol/L NaOH终止反应； (4) 2500g 离心，上清液在410nm测定吸光度。 计算： 每个污泥样品酶活性的测定均包含两个平行样S+一个空白样品S0。 [(S1- S0)+(S2- S0)]/2*0.719 (Eu) 3、a-葡萄糖甘酶(a-glucosidase) 试剂：0.1% p-nitrophenyl a-D glucopyranoside（p-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷） 0.2mol/L Tris-HCl (pH: 7.6) 测定步骤：(1) 加入样品之前，0.1% p-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷及Tris-HCl 37°C 孵化30 min； (2) 1mL污泥样品+1mL 0.1% p-硝基苯-Α-D-葡吡喃糖苷+2mL Tris-HCl 37°C孵化

酶活性测定方法

一、过氧化物酶（POD）活性的测定 POD测定参照李合生等（2003）的愈创木酚法方法进行测定，略加改动。 测定：称取样品0.5g，加入5mL 1／15mol／L PH=7.0的磷酸缓冲溶液，冰浴研磨成匀浆，4℃条件下12000r/min离心15min，上清液为粗酶液。然后在试管中加pH 7.0的磷酸缓冲液2 ml，愈创木酚（0.2%）0.5ml，浓度为0.15%的H2O2 0.5ml，取0.3ml的酶提取液加入到试管中，空白以缓冲液代替。在470nm下测定其吸光度，加入酶液时开始计时，每隔30s读数一次，连续记录5分钟。以每分钟每克鲜重增加0.1的酶量作为一个酶活性单位。 △470 ×V T POD活性= 0.01×t×Vs×W 式中：△470----反应时间内吸光度值的变化； V T ----提取酶液的总体积（ml） t----反应的时间（min） Vs ----测定时取用酶液体积（ml） W----样品鲜重（g） 二、多酚氧化酶（PPO）活性的测定 多酚氧化酶活性测定参照朱广廉等(1990)的方法，略加改动。 酶液制备：称取样品0.5g，加入5mL 0.1mol／L PH=6.0的磷酸缓冲溶液，冰浴研磨成浆，4℃条件下12000r/min离心15min后上清液即为粗酶液。 PPO活性测定：反应试管中分别加入0.1 mL酶液+3.9 mL磷酸缓冲液+ 1 mL 1m mol／L的邻苯二酚。混匀后于30℃保温10 min，迅速加入2 mL质量分数为20％的三氯乙酸终止反应，立即于525nm下测定其吸光度值，计算酶活。 PPO活性= O D×V T 0.01×t×0.5g×V s = O D×V T 0.005 OD——反应时间内吸光值的变化； V T ----提取酶液的总体积（ml） Vs ----测定时取用酶液体积（ml） T———反应时间(min)；

数据库用户管理(用户管理,权限分配)

数据库用户管理 SQL Server的安全包括服务器安全和数据安全两部分。服务器安全是指可以SQL Server数据库服务器的登录管理、数据库数据的访问安全等，数据安全则包括数据的完整性、数据库文件的安全性。因此，如果你准备访问SQL Server数据库的数据，你应该具有SQL Server登录帐户和访问数据库的权限。 下面逐一讲解如何创建登录帐户、如何创建数据库用户和如何给用户授权。 一、SQL Server身份验证 在登录SQL Server时，需要选择身份验证的方式，SQL Server支持以下两种身份验证。 Windows身份验证。 SQL Server身份验证。 简单地说，Windows身份验证是使用当前登录到操作系统的用户去登录，而SQL Server 身份验证是使用SQL Server中建立的用户去登录。 登录验证通过以后，就可以像管理本机SQL Server一样来管理远程机上的SQL Server 服务。 二、建立登录帐户并赋予权限 与创建数据库一样，建立SQL Server数据库的登录名、用户名，为其赋予权限也有两种方式。 1）使用SQL Server Management Studio建立登录账户并赋予权限 2）使用T-SQL建立登录账户并赋予权限 1．在SQL Server Management Studio中建立登录账户并赋予权限 在SQL Server Management Studio中，通常需要进行三步操作。 1）建立SQL Server登录名 在SQL Server Management Studio中，建立登录的步骤如下。

首先要用widows模式登陆，在windows模式下在数据库中进行建立。 点击 （1）在“安全性”节点下，右击“登录名”，在右键菜单中选择“新建登录名”选项。

抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性测定方法79498

抗氧化酶（SOD、POD、CAT）活性测定方法 一、超氧化物歧化酶（SOD）活性测定（氮蓝四唑光化还原法） 1、试剂的配制 （1）0.05mol/L磷酸缓冲液(PBS，pH7.8)： A母液：0.2mol/L磷酸氢二钠溶液: 取Na2HPO4·12H2O（分子量358.14）71.7g； B母液：0.2mol/L磷酸二氢钠溶液：取NaH2PO4·2H2O（分子量156.01）31.2g。 分别用蒸馏水定容到1000ml。 0.05mol/L PBS（pH7.8）的配制：分别取A母液(Na2HPO4) 228.75ml，B母液(NaH2PO4) 21.25ml，用蒸馏水定容至1000ml。 参考文献：李合生主编：植物生理生化实验原理和技术.高等教育出版社，2000：267～268。 （2）14.5mM甲硫氨酸溶液：取 2.1637g Met用磷酸缓冲液（pH7.8）定容至1000ml。 （3）30μM EDTA-Na2溶液：取0.001gEDTA-Na2用磷酸缓冲液定容至100ml。 （4）60μＭ核黄素溶液：取0.0023g核黄素用磷酸缓冲液定容至100ml，避光保存。 （5）2.25mM 氮蓝四唑(NBT)溶液：取0.1840g NBT用PBS定容至100ml，避光保存。 酶液制备：取0.2g（可视情况调整）样品（新鲜叶片或根系）洗净后置于预冷的研钵中， 加入1.6ml 50mmol/L预冷的磷酸缓冲液（pH7.8）在冰浴上研磨成匀浆，转入离心管中在4℃、12000g下离心20min，上清液即为酶液。 2、酶活性测定 （1）反应混合液配制(以60个样为准)：分别取Met溶液162ml，EDTA-Na2溶液0.6ml，磷酸缓冲液 5.4ml，NBT溶液6ml，核黄素溶液6ml,混合后摇匀； （2）分别取3ml反应混合液和30μl酶液于试管中 （3）将试管置于光照培养箱中在4000 lux光照下反应20min； 同时做两支对照管，其中1支试管取3ml反应混合液加入30μl PBS（不加酶液）照光 后测定作为最大光还原管，另1支只加缓冲液置于暗中测定时用于调零。 （4）以不照光的对照管（只有缓冲液并置于暗处）调零后，避光测OD560(出现颜色即可测定)。