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有关基因工程的几个问题

有关基因工程的几个问题
有关基因工程的几个问题

有关基因工程的几个问题

1、DNA分子复制与PCR为什么需要引物?

无论体内复制还是体外复制,都需要引物。这是由DNA聚合酶的催化特点所决定的。聚合酶只能催化脱氧核糖核苷酸加到已有核酸链的游离3'-羟基上,而不能使脱氧核糖核苷酸自身发生聚合,也就是说,它需要引物链(primer strand)的存在。

体内复制时,初始的一段无法聚合形成DNA引物,只能由另一种酶引物合成酶合成RNA引物。RNA引物形成后,由DNA聚合酶Ⅲ催化将第一个脱氧核苷酸按碱基互补原则加在RNA引物3'-OH端而进入DNA链的延伸阶段。引物长度通常只有几个~10多个核苷酸。RNA引物的消除和缺口填补是由DNA聚合酶Ⅰ完成的,最后由DNA连接酶连接。为什么需要有RNA引物来引发DNA 复制呢?这可能与尽量减少DNA复制起始处的突变有关。DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错,因此,用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA 聚合酶Ⅰ切除,提高了DNA复制的准确性。

而体外复制时,引物是人为设计合成加入反应体系的。自然可以简化成直接加入短DNA链,无需再消除填补。一般引物长度在15-30bp。

2、引物的作用是什么?PCR技术是否需准确知道基因的碱基序列?还是只知道引物结合的序列就可以了?

正因为有了人为设计合成的引物,PCR技术才实现了对目的基因的特异性扩增(或称选择性扩增)。真实的实验操作中,加入反应体系的模板决不仅仅是目的基因那一段序列。它往往是一定量还有目的基因的质粒,或是从细胞中提取出的全部基因组DNA。如何保证只针对我们要的那一段序列进行大量扩增呢?需要两段引物特异性的与目的区段的两端结合(通俗地讲就是卡住两头,延伸中间的一段)。我们根据目的基因两端的序列,设计与其碱基互补配对的引物,特异性的结合就实现了。因此,引物的作用,一方面为DNA聚合酶提供已有核酸

链的游离3'-羟基,另一方面更重要的是实现在众多序列中找到需要扩增的那段序列。由此可见,PCR技术扩增目的基因只要已知引物结合的两端序列就可以。

另外,为了保证引物在相应的退火温度下和退火反应时间内能顺利与两端序列结合,且特异性较高。在设计引物时有一些注意事项:15-30bp,过短特异性差,过长效率太低GC含量一般45-55%,GC含量太低导致引物Tm值较低,使用较低的退火温度不利于提高PCR的特异性,GC含量太高也易于引发非特异扩增(G≡C 结合形成H键,亲和力大)引物内部不应形成二级结构,彼此之间不能形成二聚体。实际上,有一些引物设计软件如OLIGO,可以帮助判断设计的引物是否合适。此外,提高退火温度或变短退火时间,也可以提高特异性。

3.什么是dNTP?

dNTP(脱氧核苷三磷酸)。学生会有这样的疑问:DNA的体内体外复制所需的原料为何不同?事实上在DNA体内复制时直接参与合成DNA的是四种脱氧核苷酸三磷酸(dATP、dGTP、dCTP、dTTP)。在DNA聚合酶催化作用下,引物链的3’—羟基对进入的脱氧核苷酸三磷酸α—磷原子发生亲核攻击,从而形成3’,5’—磷酸二酯键并脱下焦磷酸(PPi)。形成磷酸二酯键所需要的能量来自α—与β—磷酸基之间高能磷酸键的裂解。(摘于沈同、镜岩主编的第二版《生物化学》下册P328)。

高中所讲的原料脱氧核苷酸其实需要逐步转化为脱氧核苷三磷酸后再参与DNA的合成。这一反应中要接受ATP提供的磷酸基,在磷酸激酶的催化下完成。具体过程为:生物体可以利用氨基酸,C02,NH3和PRPP(磷酸核糖焦磷酸,phosphoribosylpyrophos-phate)合成核糖核苷单磷酸。然后,核糖核苷单磷酸(NMP)。在各自的具有碱基特异性的核苷单磷酸激酶的作用下转变成NDP (NMP+A TP→NDP+ADP),接着,在一种没有碱基特异性的核糖核苷酸还原酶的催化下,脱掉核糖2'位上的氧(NDP→dNDP);然后,由一种既无碱基特异性又无糖环特异性的核苷二磷酸激酶将dNDP转变成dNTP(dNDP+ATP→dNTP+ADP)。

所以,用dNTP作原料在体外利用PCR技术扩增目基因简化了反应过程。

这里同时想到体内复制和体外复制的另一个比较,体外复制为什么不需要提供ATP?

体内复制的A TP主要有两个用处:可以为解旋酶催化的反应提供能量;在生成dNTP的反应中作为原料。PCR技术对这两处进行了改变或简化,所以,PCR 反应体系中没有再加入ATP。

4.如何从基因文库中获取到目的基因?具体操作如何?

对已知序列目的基因的筛选

DNA探针筛选:利用原位DNA探针筛选目的基因。

PCR法筛选

未知序列目的基因的筛选

(1)从蛋白质寻找基因

早期寻找基因的方法,对特异表达的蛋白质进行序列分析,并推测一段核苷酸序列,合成DNA探针,筛选分离相应的基因。

(2)同源性序列搜索

在Genebank等网站中收录了大量DNA序列的数据,用同源性比较工具Blastn 软件,搜索基因之间存在着的一些保守序列,可以判断某些新基因的存在。(3)差示筛选组织特异的cDNA

是利用一对组织基因表达的差异,筛选出其中一种组织中受某种因素调控表达的一种或一组基因。制备两种细胞群体,目的基因在其中一种细胞中表达或高表达,在另一种细胞中不表达或低表达,然后通过杂交对比找到目的基因。

(4)DNA微列阵技术筛选基因

把某一生物体内全部已知基因分别点到DNA芯片上,再用不同发育阶段的cDNA与之杂交,就能了解某些基因对特定生长发育阶段的表达情况。建立正常人特定组织、器官的基因芯片,给出标准杂交信号图。用可疑病人的cDNA做

探针与之杂交,检查哪些基因的表达受抑制或激活----基因诊断。

(5)用抗体筛选目的基因

cDNA应克隆在表达载体中。表达载体有使外源基因表达的必要调控部分。如启动子、SD序列等。通过表达产物与抗体特定的结合来识别和分离目的cDNA克隆。

5.酶切质粒和目的基因时,一般用几种限制性酶?

用同一种限制性内切酶切割目的基因和载体后,目的基因两端粘性末端相同,可能会反接。因此,实验室的酶切实验一般都选择双酶切。

基因工程思考题答案--删减后

第二章 1. 名词解释 (1)顺反子(cistron):基因所对应的一段核苷酸序列被称为顺反子(cistron),一个顺反子编码一种完整的多肽链。它是遗传的功能单位。 (3)转位因子(transposable elements):是指可以从染色体基因组上的位置转移到另一个位置,甚至在不同的染色体之间跃迁的基因成分。 (4)基因组(genome):细胞中,一套完整单倍体的遗传物质的总合。 (5)启动子(promoter):是DNA链上一段能与RNA聚合酶结合并能起始转录的序列,其大小不等,具有转录目标基因的mRNA的功能。启动子是基因表达不可缺少的重要元件。(6)基因(gene),基因是DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,是遗传物质的最小功能单位。 (7)顺反子(cistron):基因所对应的一段核苷酸序列被称为顺反子(cistron),一个顺反子编码一种完整的多肽链。它是遗传的功能单位。 (8)终止子(terminator),在基因3 端下游外侧与终止密码子相邻的一段非编码的核苷酸短序列,具有终止转录的功能,叫做终止子(terminator)。 (9)断裂基因(split gene),真核生物的结构基因是不连续的,编码氨基酸的序列被非编码序列所打断,因而被称为断裂基因(split gene)。在编码序列之间的序列称为内含子(intron),被分隔开的编码序列称为外显子(exon)。 (10)顺式作用元件(cis-acting elements),指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。 (11)反式作用因子(trans-acting elements),可结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子称为反式作用因子(trans-acting elements)。 (13)反应元件(response elements),是一类能介导基因对细胞外的某种信号产生反应的DNA序列,被称为反应元件(response elements)。 (14)增强子(enhancer),是一段DNA序列,其中含有多个能被反式作用因子识别与结合的顺式作用元件,反应作用因子与这些元件结合后能够调控(通常为增强)邻近基因的转录。(15)转位因子(transposable elements):是指可以从染色体基因组上的位置转移到另一个位置,甚至在不同的染色体之间跃迁的基因成分。 (16)转座子(transposon,Tn),是一类较大的可移动成分,它是由几个基因组成的特定的DNA片段,除有关转座的基因外,至少带有一个与转座作用无关并决定宿主性状的基因(如抗药性基因)。 (17)假基因(pseudogene),假基因是多基因家族中的成员,因其碱基顺序发生某些突变而失去功能,不能表达或表达异常,生成无生物活性的多肽。 (18)重叠基因(overlapping genes),或嵌套基因(nested genes),是指基因的核苷酸序列(或阅读框)是彼此重叠的基因,称为重叠基因或嵌套基因。 (19)基因家族(gene family),就是指核苷酸序列或编码产物的结构具有一定程度同源性的一组基因。 (20)反向重复序列,是指两个顺序相同的拷贝在DNA链上呈反向排列。有两种形式,一种形式是两个反向排列的拷贝之间隔着一段间隔序列;另一种形式是两个拷贝反向串联在一起,中间没有间隔序列,这种结构亦称回文结构(palindrome)。 (21)看家基因(housekeeping gene),在几乎所有细胞中或发育过程中持续表达的基因,被称为看家基因。 (22)锌指(zinc fingers)结构,由约30个氨基酸残基组成的一段多肽序列,其中4个氨

高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)

高中生物《基因工程》练习题 题号一二总分 得分 一、单选题(本大题共20小题,共20.0分) 1.如图为DNA分子的某一片段,其中①②③分别表示某种酶的作用部位,则相应的酶依次为() A. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶 B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶 D. DNA连接酶、限制酶、解旋酶 2.下列有关基因工程技术的叙述,正确的是() A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B. 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C. 选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快 D. 只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达 3.如图为基因表达载体的模式图。下列有关基因工程的说法错误的 是() A. 基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建 B. 任何基因表达载体的构建都是一样的,没有差别 C. 图中启动子和终止子不同与起始密码子和终止密码子 D. 抗生素抗性基因的作用是作为标记基因,用于鉴别受体细胞中是否导入了载体 4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者,而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避 限制酶的降解。下列在动物体内发生的过程中,与上述细菌行为相似的是() A. 巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体 B. T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子

C. 组织液中抗体与抗原的特异性结合 D. 疫苗诱导机体产生对病原体的免疫 5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示,最好应选用下列哪种质粒 作为载体() A. B. C. D. 6.下图是研究人员利用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。下列相关 叙述正确的是() A. 酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键 B. Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞 C. 筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测 D. 上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术 7.下列关于基因工程技术的说法,正确的是() A. 切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列 B. PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合 C. 载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因 D. 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制 8.在其他条件具备的情况下,在试管中进入物质X和物质Z,可得到相应产物Y.下列叙述正确 的是()

基因工程的应用和蛋白质工程

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【课 题】专题一——基因工程——第 1.3 基因工程的应用第 1。4 蛋白质工程的崛起
【教学目标】1.举例说出基因工程应用及取得的丰硕成果。 2.关注基因工程的进展。 3.认
同基因工程的应用促进生产力的提高。 4.举例说出蛋白质工程崛起的缘由。 5.简述蛋白质
工程的原理。 6.尝试运用逆向思维分析和解决问题。
【教学流程】
一、知识预习:
1、植物基因工程技术主要用于提高农作物的
(如




等),以及

利用植物生产
等方面。
2、目前防治作物虫害的发展趋势是从某些生物中分离出
,将其导

中,使其具有
。用于杀虫的基因主要是



等。
3、引起植物生病的微生物称为
,主要有


等。抗病转基因植物所采用的基因,使用最多的是

;抗真菌转基因植物中可使用的基因有


4、目前科学家利用一些可以调节
的基因,来提高农作物的抗盐碱和
能力;将鱼的
导入烟草和番茄,提高其耐寒能力;将
导入
作物,使作物抗除草剂。
5、利用转基因技术可以提高生物中的
的含量、延长贮存时间、改变花色等,
从而提高作物品质。
6、动物基因工程可用于




7、基因工程药物包括




等。
8、治疗遗传病的最有效手段是
,这种方法是把
导入病人体
内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到
的目的,可分为

两条途径。
9、基因工程的实质是将一种生物的
转移到另一种生物体内,使后者产生本不能
产生的
,进而表现出
。其缺点是在原则上只能生产
,而天然蛋白质的
符合
的需要,
却不一定完全符合
的需要。
10、蛋白质工程是指以蛋白质分子的
及其与
的关系作为基
础,通过

,对
进行改造,或制造
,以满足
的需求。
11、蛋白质工程的途径是:预测蛋白质功能→设计预期的
→推测应有的
→找到相对应的

12、蛋白质工程具有
的前景,但

-1

基因工程思考题

《基因工程》思考题 第一章绪论 1. 简述基因操作、基因重组和基因工程的关系。 2. 为什么说基因工程是生物学和遗传学发展的必然产物? 3. 简述基因的结构组成对基因操作的影响。 4. 谈谈你对gene的认识,并简要说说gene概念的演变过程. 5. 如何理解gene及其产物的共线性和非共线性? 6. 试从理论和技术两个方面谈Gene Engineering诞生的基础. 第二章基因工程的基本原理与支撑技术 1. 试比较原核基因组与真核基因组的结构和功能特点 2. 试比较原核基因和真核基因表达调控的主要方式和特点 3. 分析比较琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳的异同点? 4. 琼脂糖凝胶电泳中,简述影响DNA在凝胶中迁移速率的因素. 5. 小量制备质粒DNA,用质粒中特定的酶切发现切割不动,试分析可能原因及克服方法? 6. 在基因操作实践中有哪些检测核酸和蛋白质分子量的常规方法? 7. 印迹分子杂交有哪些种类,并说明在什么情况下需要使用这些方法。 8. 核酸分子的标记有哪些方法,各有何特点? 9. 由mRNA反转录成cDNA和DNA的PCR扩增是两个完全不同的酶催化反应过程,如何将两个过程联系在一起,实现由mRNA起始扩增出DNA? 10. Primer是PCR反应体系的四大要素之一,PCR的许多应用都是通过primer设计来实现的,请问primer设计的一般原则是什么? 11. 在PCR反应的后期,或者循环次数过多时,反应体系中就会出现一种所谓的平台效应(Plateau effect),请问什么叫Plateau effect?产生Plateau effect的原因有哪些? 12. 在对PCR产物进行电泳检测时,有时会出现拖带或非特异性扩增条带,请分析其原因?如果检测结果是看不到DNA带或DNA带很弱,那又是为什么? 13. 通过双向蛋白质电泳发现某蛋白质与某植物的一种表型密切相关,若要利用编码该蛋白质的基因来转基因植物,试问如何分离得到该基因? 14. 现有一序列已知的DNA片段和一序列未知的DNA片段,你分别如何设计测序策略? 15. 设想一下在什么情况下你希望知道一个基因或一段DNA的序列? 16. 什么叫有性PCR?有性PCR导致DNA重组的分子机制跟体内重组有何异同? 17. Explain the PCR. List the steps in carrying it out; include all the components and special conditions, explaining why each one is used. Illustrate the process with appropriate labels. Use the correct scientific terminology in your explanation. 第三章基因工程操作的基本条件 1. 试指出影响限制性内切核酸酶(Restriction endonuclease)切割效率的因素. 2. 在酶切缓冲液中,一般需加入BSA,请问加入BSA的作用是什么?并简述其原理? 3. 何谓Star activity?简述Star activity的影响因素及克服方法. 4. 某DNA序列中存在DpnI酶切位点,以此DNA为模板,在体外合成DNA序列,当用该酶进行酶切时,发现切割不动,试分析可能原因?

基因工程练习题(附答案)

基因工程练习题 1、在基因工程中使用的限制性核酸内切酶,其作用是( ) A、将目的基因从染色体上切割出来 B、识别并切割特定的DNA核苷酸序列 C、将目的基因与运载体结合 D、将目的基因导入受体细胞 2、基因工程中常用细菌等原核生物作受体细胞的原因不包括( ) A、繁殖速度快 B、遗传物质相对较少 C、多为单细胞,操作简便 D、DNA为单链,变异少 3、基因工程是DNA分子水平的操作,下列有关基因工程的叙述中,错误的是( ) A、限制酶只用于切割获取目的基因 B、载体与目的基因可以用同一种限制酶处理 C、基因工程所用的工具酶是限制酶,DNA连接酶 D、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测 4、运用现代生物技术,将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中,为检测实验是否成功,最方便的方法是检测棉花植株是否有( ) A、抗虫基因 B、抗虫基因产物 C、新的细胞核 D、相应性状 5、转基因动物转基因时的受体细胞是( ) A、受精卵 B、精细胞 C、卵细胞 D、体细胞 6、基因工程中常见的载体是( ) A、质体 B、染色体 C、质粒 D、线粒体 7、水母发光蛋白由236个氨基酸构成,其中Asp、Gly、Ser构成发光环,现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记,在转基因技术中,这种蛋白质的作用是( ) A、促使目的基因导入宿主细胞中B、促使目的基因在宿主细胞中复制 C、使目的基因容易被检测出来 D、使目的基因容易成功表达 8、运用现代生物技术的育种方法,将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中,培育出转基因抗虫的油菜品种,这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白质,对菜青虫有显著抗性,能大大减轻菜青虫对油菜的危害,提高油菜产量,减少农药使用,据以上信息,下列叙述正确的是( ) A、Bt基因的化学成分是蛋白质 B、Bt基因中有菜青虫的遗传物质 C、转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt基因 D、转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物 9、人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成,通过转基因技术,可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( ) A、大肠杆菌 B、酵母菌 C、T 噬菌体 D、质粒DNA 4 10、不属于质粒被选为基因运载体的理由是() A.能复制 B.有多个限制酶切点C.具有标记基因D.它是环状DNA

基因工程原理与技术思考题

Chapter I Introduction 1)什么是基因?基因有哪些主要特点? 基因是一段可以编码具有某种生物学功能物质的核苷酸序列。 ①不同基因具有相同的物质基础.②基因是可以切割的。③基因是可以转移的。④多肽与基因之间存在 对应关系。⑤遗传密码是通用的。⑥基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代。 2)翻译并解释下列名词 genetic engineering遗传工程 gene engineering基因工程:通过基因操作,将目的基因或DNA片段与合适的载体连接转入目标生物获得新的遗传性状的操作。 gene manipulation基因操作:对基因进行分离、分析、改造、检测、表达、重组和转移等操作的总称。 recombinant DNA technique重组DNA技术 gene cloning基因克隆:是指对基因进行分离和扩大繁殖等操作过程,其目的在于获得大量的基因拷贝,在技术上主要包括载体构建、大肠杆菌遗传转化、重组子筛选和扩大繁殖等环节。 molecular cloning分子克隆 3)什么是基因工程?简述基因工程的基本过程?p2 p4 4)简述基因工程研究的主要内容?p5 5)简述基因工程诞生理论基础p2和技术准备有哪些p3? 6)基因表达的产物中,氨基酸序列相同时,基因密码子是否一定相同?为什么? 否,密码子简并性 7)举例说明基因工程技术在医学、农业、工业等领域的应用。 医学:人胰岛素和疫苗 农业:抗虫BT农药 工业:工程酿酒酵母

Chapter ⅡThe tools of trade 1)什么是限制性核酸内切酶?简述其主要类型和特点? 是一种核酸水解酶,主要从细菌中分离得到。类型特点p11 2)II型核酸内切酶的基本特点有哪些p12-14?简述影响核酸内切酶活性的因素有哪些 p14? 3)解释限制酶的信号活性?抑制星号活性的方法有哪些? 4)什么是DNA连接酶p15?有哪几类p16?有何不同p16? 5)什么叫同尾酶、同裂酶p12?在基因工程中有何应用价值? 同裂酶:识别位点、切割位点均相同,来源不同。在载体构建方面往往可以取得巧妙的应用。应用较多的同裂酶比如Sma1和Xma1,它们均识别CCCGGG,但前者切后产生钝末 同尾酶:来源各异,识别序列各不相同,但切割后产生相同的粘性末端。由同尾酶(isocaudomer)产生的DNA片段,是能够通过其粘性末端之间的互补作用彼此连接起来的。 6)什么是DNA聚合酶?根据DNA聚合酶使用的模板不同,可将其分为哪两类?各有什么活 性?p17-18 聚合酶:在引物和模板的存在下,把脱氧核苷酸连续地加到双链DNA分子引物链的3‘-OH 末端,催化核苷酸的聚合作用。 ①依赖于DNA的DNA聚合酶 ②依赖于RNA的DNA聚合酶 7)Taq DNA聚合酶:是一种从水生嗜热菌中分离得到的一种耐热的dna聚合酶,具有5-3聚 合酶活性和3-5外切酶活性,在分子中主要用于PCR。 逆转录酶:RNA指导的DNA聚合酶, 8)Klenow片段的特性和用途有哪些?举例说明。p17 9)名词解释:S1核酸酶、核酸外切酶、磷酸化酶激酶、 甲基化酶

基因工程原理练习题及答案

基因工程原理练习题及其答案 一、填空题 1.基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。 2.基因工程的两个基本特点是:(1)____________,(2)___________。 3.基因克隆中三个基本要点是:___________;_________和__________。 4.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段,可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的___________。 5.限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的,第一个大写字母取自_______,第二、三两个字母取自_________,第四个字母则用___________表示。 6.部分酶切可采取的措施有:(1)____________(2)___________ (3)___________等。 7.第一个分离的限制性内切核酸酶是___________;而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。8.限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同,但识别的序列都是_________,它们属于_____________。 9.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段,具有两种酶活性:(1)____________;(2)________________的活性。 10.为了防止DNA的自身环化,可用_____________去双链DNA__________________。 11.EDTA是____________离子螯合剂。 12.测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶,它只有_____________酶的活性,而没有_______酶的活性。 13.切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。 14.欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式,通常可采用_________或_______________。15.反转录酶除了催化DNA的合成外,还具有____________的作用,可以将DNA- RNA杂种双链中的___________水解掉。 16.基因工程中有3种主要类型的载体:_______________、_____________、______________。 17.就克隆一个基因(DNA片段)来说,最简单的质粒载体也必需包括三个部分:_______________、_____________、______________。另外,一个理想的质粒载体必须具有低分子量。 18.一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后,一部分细胞中已测 不出质粒,这种现象叫。 19.pBR322是一种改造型的质粒,它的复制子来源于,它的四环素抗性基因来自于,它的氨苄青霉素抗性基因来自于。 20.Y AC的最大容载能力是,BAC载体的最大容载能力是。 21.pSCl01是一种复制的质粒。 22.pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC系列的载体是通过 和两种质粒改造而来。它的复制子来自,Amp 抗性基因则是来自。 23.噬菌体之所以被选为基因工程载体,主要有两方面的原因:一是;二是。 24.野生型的M13不适合用作基因工程载体,主要原因是 和。 25.黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体,它的复制子来自、COS位点序列来自,最大的克隆片段达到kb。 26.野生型的λ噬菌体DNA不宜作为基因工程载体,原因是:(1) (2) (3) 。 27.噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的,其中来自质粒的主要结构是,而来自噬菌体的主要结构是。 28.λ噬菌体载体由于受到包装的限制,插入外源DNA片段后,总的长度应在噬菌体基 因组的的范围内。 29.在分离DNA时要使用金属离子螯合剂,如EDTA和柠檬酸钠等,其目的是 。 30.用乙醇沉淀DNA时,通常要在DNA溶液中加人单价的阳离子,如NaCl和NaAc, 其目的是。 31.引物在基因工程中至少有4个方面的用途:(1) (2) (3) (4) 。 32.Clark发现用Taq DNA聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端,而是有一个突出 碱基末端的双链DNA分子。根据这一发现设计了克隆PCR产物的。 33.在cDNA的合成中要用到S1核酸酶,其作用是切除在 。 34.乙醇沉淀DNA的原理是。 35.假定克隆一个编码某种蛋白质的基因,必须考虑其表达的三个基本条件:

高中生物技术与生物工程基因工程和蛋白质工程第3节蛋白质工程学案3

第三节蛋白质工程 1.简述蛋白质工程。 2.蛋白质的分子设计。(难点) 3.蛋白质工程的应用。(重点) 1.蛋白质工程 (1)依据:蛋白质的精细结构和生物活性之间的关系。 (2)改造对象:利用生物技术手段对蛋白质的DNA编码序列或直接对蛋白质进行有目的的改造。 (3)产物:创造出自然界本不存在的、具有优良特性的蛋白质分子,也就是产生新的蛋白质。 (4)本质:改造控制该蛋白质合成的基因结构。 2.蛋白质的分子设计 (1)小范围改造 对已知结构的蛋白质进行少数氨基酸的替换。 (2)蛋白质拼接组装 对不同来源的蛋白质进行拼接组装。 (3)蛋白质从头设计 从氨基酸的排列顺序出发,设计制造出自然界不存在的全新蛋白质。 3.蛋白质工程的基础 蛋白质工程的基础是基因工程。所以蛋白质工程又叫第二代基因工程。 [合作探讨] 蛋白质分子的设计是一项复杂而艰巨的工程,其基本流程可以用下图表示:

探讨1:构建新的蛋白质模型是分子设计的关键环节,你认为构建蛋白质模型的依据是什么? 提示:构建蛋白质模型的依据是控制这种蛋白质合成的基因以及蛋白质的空间结构。 探讨2:通过DNA合成形成的新基因怎样才能得到准确的表达? 提示:通过基因工程技术,将新基因导入大肠杆菌等受体细胞中,新基因在受体细胞中指导合成新的蛋白质。 探讨3:有的学者认为,蛋白质工程本身也是研究蛋白质结构和功能的一种有力工具。你是怎么看待的? 提示:这些学者认识恰当,蛋白质结构直接影响其功能活性,要想研究蛋白质结构与功能的关系,蛋白质工程就是有力工具,利用这种工具可以改变蛋白质的空间结构,探究功能的改变而做出相应的科学结论。 [思维升华] 1.蛋白质工程的概念 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。 2.蛋白质工程的目标 是根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行分子设计。由于基因决定蛋白质,因此要对蛋白质的结构进行设计改造,最终还必须通过改造基因来完成。 3.蛋白质工程的基本途径 从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)。 1.下列关于蛋白质工程的基本流程中正确的是( ) ①蛋白质分子结构设计②DNA合成③预期蛋白质功能④根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列 A.①→②→③→④B.④→②→①→③

(完整版)基因工程思考题答案--删减后学习

1. 名词解释 ( 1)顺反子 (cistron) :基因所对应的一段核苷酸序列被称为顺反子( cistron ),一个顺反子 编码一种完整的多肽链。它是遗传的功能单位。 (3) 转位因子(transposable elements ):是指可以从染色体基因组上的位置转移到另一个 位置,甚至在不同的染色体之间跃迁的基因成分。 (4) 基因组(genome ):细胞中,一套完整单倍体的遗传物质的总合。 (5) 启动子(promoter ):是DNA 链上一段能与 RNA 聚合酶结合并能起始转录的序列,其 大小不等,具有转录目标基因的 mRNA 的功能。启动子是基因表达不可缺少的重要元件。 (6) 基因(gene ),基因是DNA 分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,是遗传物质 的最小功能单位。 (7) 顺反子(cistron):基因所对应的一段核苷酸序列被称为顺反子( cistron ),一个顺反子 编码一种完整的多肽链。它是遗传的功能单位。 (8) 终止子(terminator ),在基因3端下游外侧与终止密码子相邻的一段非编码的核苷酸 短序列,具有终止转录的功能,叫做终止子( terminator )。 (9) 断裂基因( split gene ) ,真核生物的结构基因是不连续的,编码氨基酸的序列被非编码 序列所打断, 因而被称为断裂基因 (split gene ) 。在编码序列之间的序列称为内含子 (intron ), 被分隔开的编码序列称为外显子( exon )。 (10) 顺式作用元件(cis-acting elements ),指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因 调控蛋白特异性识别和结合的 DNA 序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信 号和一些反应元件等。 (11) 反式作用因子(trans-acting elements ),可结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋 白质因子称为反式作用因子( trans-acting elements )。 (13) 反应元件(response elements ),是一类能介导基因对细胞外的某种信号产生反应的 DNA 序列,被称为反应元件( response elements )。 (14) 增强子(enhancer ),是一段DNA 序列,其中含有多个能被反式作用因子识别与结合 的顺式作用元件, 反应作用因子与这些元件结合后能够调控 (通常为增强) 邻近基因的转录。 (15) 转位因子(transposable elements ):是指可以从染色体基因组上的位置转移到另一 个位置,甚至在不同的染色体之间跃迁的基因成分。 (16) 转座子(transposon ,Tn ),是一类较大的可移动成分,它是由几个基因组成的特定的 DNA 片段,除有关转座的基因外, 至少带有一个与转座作用无关并决定宿主性状的基因 (如 抗药性基因) 。 (17) 假基因(pseudogene ),假基因是多基因家族中的成员,因其碱基顺序发生某些突变 而失去功能,不能表达或表达异常,生成无生物活性的多肽。 (18) 重叠基因(overlapping genes ),或嵌套基因(nested genes ),是指基因的核苷酸序列 (或阅读框)是彼此重叠的基因,称为重叠基因或嵌套基因。 (19) 基因家族( gene family ),就是指核苷酸序列或编码产物的结构具有一定程度同源性 的一组基因。 ( 20 )反向重复序列,是指两个顺序相同的拷贝在 种形式是两个反向排列的拷贝之间隔着一段间隔序列; 起,中间没有间隔序列,这种结构亦称回文结构( (21)看家基因(housekeeping gene ),在几乎所有细胞中或发育过程中持续表达的基因, 被称为看家基因。 22)锌指( zinc fingers )结构,由约 30个氨基酸残基组成的一段多肽序列,其中 4个氨 基酸残基(两个是半脱氨酸两个是组氨酸,或 4个都是半脱氨酸)以配位键与 Zn 2+相互结 合,形成指状结构,常存在于真核转录因子的 DNA 结合结构域中。 (23) 亮氨酸拉链(leucine zippers ),是 DNA 链上呈反向排列。有两种形式,一 另一种形式是两个拷贝反向串联在一 palindrome )。

基因工程原理练习题及其答案

基因工程复习题 题型:名词解释(10个)30分;填空(每空1分) 20分;选择题(每题1分)10分;简答题(4个)20分;论述题(2个)20分。 第一章绪论 1.名词解释: 基因工程:按照预先设计好的蓝图,利用现代分子生物学技术,特别是酶学技术,对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造,将一种生物(供体)的基因转移到另外一种生物(受体)中去,从而实现受体生物的定向改造与改良。 遗传工程广义:指以改变生物有机体性状为目标,采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作,以改良品质或创造新品种。包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。狭义:基因工程。 克隆:无性(繁殖)系或纯系。指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DNA分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。 2.什么是基因克隆及基本要点? 3.举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件。 A) 限制性内切酶和DNA连接酶的发现(标志着DNA重组时代的开始);B) 载体的使用;C) 1970年,逆转录酶及抗性标记的发现。 4.基因工程研究的主要内容是什么? 基础研究: 基因工程克隆载体的研究 基因工程受体系统的研究 目的基因的研究 基因工程工具酶的研究 基因工程新技术的研究 应用研究: 基因工程药物研究 转基因动植物的研究 在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究 第二章基因克隆的工具酶 1.名词解释: 限制性核酸内切酶:一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列,并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。 回文结构:双链DNA中的一段倒置重复序列,当该序列的双链被打开后,可形成发夹结构。 同尾酶:来源不同、识别序列不同,但产生相同粘性末端的酶。 同裂酶:不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列 黏性末端:DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合,这样的DNA末端,称为粘性末端。 平末端:DNA片段的末端是平齐的。 限制性核酸内切酶的酶活性单位(U):在酶的最适反应条件下,在50μl容积中,60分钟内完全切割1μg λDNA所需的酶量为1个酶活性单位(unit 或U) 限制性核酸内切酶的星活性:指限制性内切酶在非标准条件下,对与识别序列相似的其它序列也进行切割反应,导致出现非特异性的DNA片段的现象。

“基因工程与蛋白质工程”知识归纳及试题例析讲解学习

“基因工程与蛋白质工程”知识归纳及试题例析一、知识归纳 名称作用参与的生理过程应用 限制性核酸内切酶切割某种特定的脱氧核苷酸序列基因工程 DNA连接酶连接两个DNA片段基因工程 DNA聚合酶在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧酸DNA复制 RNA聚合酶在核苷酸链上添加单个核糖核苷酸转录 解旋酶使碱基间氢键断裂DNA复制及转录 逆转录酶以RNA为模板合成DNA 逆转录及基因工程特别注意: (1)限制性核酸内切酶的来源:多数来自原核生物;作用特点:主要切割外源DNA,对自身的DNA不起作用从而达到保护自身的目的;作用结果:形成DNA片断末端。 (2)各种酶都具有专一性,特别是限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列,并在特定的碱基之间切开。 2.基因工程的基本操作程序 (1)获取目的基因 ①基因文库:是将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中通过克 隆而储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。 ②基因组文库:基因文库中含有一种生物所有的基因就叫做基因组文库。 ③部分基因文库:含有一种生物的部分基因,就叫做部分基因文库,如cDNA文库。 比较项目PCR技术DNA复制 相 同 点 原理DNA双链复制((碱基互补配对) 原料四种游离的脱氧核苷酸 条件模板、ATP、酶等 不 同 点 解旋方式DNA在高温下变性解旋解旋酶催化 场所体外复制主要在细胞核内 酶热稳定的DNA聚合酶(Taq酶)细胞内含有的DNA聚合酶 结果在短时间内形成大量的DNA片段形成整个DNA分子 (2)基因表达载体的构建(基因工程的核心) ①构建目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目 的基因能够表达和发挥作用。 ②一个基因表达载体的组成:目的基因、启动子、终止子、标记基因等。 ③构建方法

“基因工程与蛋白质工程”知识归纳及试题例析

“基因工程与蛋白质工程”知识归纳及试题例析 一、知识归纳 1.与DNA分子相关的酶 名称作用参与的生理过程应用限制性核酸内切 酶 切割某种特定的脱氧核苷酸序列基因工程DNA连接酶连接两个DNA片段基因工程 DNA聚合酶在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧 酸 DNA复制 RNA聚合酶在核苷酸链上添加单个核糖核苷 酸 转录 解旋酶使碱基间氢键断裂DNA复制及转录 逆转录酶以RNA为模板合成DNA逆转录及基因工程 特别注意: (1)限制性核酸内切酶的来源:多数来自原核生物;作用特点:主要切割外源DNA,对自身的DNA不起作用从而达到保护自身的目的;作用结果:形成DNA片断末端。 (2)各种酶都具有专一性,特别是限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列,并在特定的碱基之间切开。 2.基因工程的基本操作程序 (1)获取目的基因 ①基因文库:是将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中通过 克隆而储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。 ②基因组文库:基因文库中含有一种生物所有的基因就叫做基因组文库。 ③部分基因文库:含有一种生物的部分基因,就叫做部分基因文库,如cDNA文库。 PCR技术与DNA复制的比较 比较项目PCR技术DNA复制 相 同 点 原理DNA双链复制((碱基互补配对) 原料四种游离的脱氧核苷酸 条件模板、ATP、酶等 不 同 解旋方式DNA在高温下变性解旋解旋酶催化 场所体外复制主要在细胞核内

点 酶 热稳定的DNA聚合酶(Taq 酶) 细胞内含有的DNA聚合酶结果 在短时间内形成大量的DNA 片段 形成整个DNA分子 (2)基因表达载体的构建(基因工程的核心) ①构建目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目 的基因能够表达和发挥作用。 ②一个基因表达载体的组成:目的基因、启动子、终止子、标记基因等。 ③构建方法 生物 种类 植物细胞动物细胞微生物细胞常用 方法 农杆菌转化法显微注射技术Ca2+处理法受体 细胞 体细胞受精卵原核细胞 转化 过程 将目的基因插入Ti质粒 的TDNA上→农杆菌→导 入植物细胞→整合到受体细 胞的DNA→表达 将含有目的基因的表达 载体提纯→取卵(受精卵) →显微注射→受精卵发育→ 获得具有新性状的动物 Ca2+处理细胞→感受态 细胞→重组表达载体与感受 态细胞混合→感受态细胞吸 收DNA分子特别注意:受体细胞中常用植物受精卵或体细胞(经组织培养)、动物受精卵(一般不用体细胞)、微生物──大肠杆菌、酵母菌等,但要合成糖蛋白、有生物活性的胰岛素则必 需用真核生物酵母菌──需内质网、高尔基体的加工、分泌。一般不用支原体,原因是它营 寄生生活;一定不能用哺乳动物成熟红细胞,原因是它无细胞核和众多的细胞器,不能合成 蛋白质。

(完整版)基因工程练习题

2007-2008学年度东城中学高三生物第十二单元 基因工程练习题 1、基因工程又叫基因拼接技术。 (1)在该技术中,切割DNA 的工具是限制酶,它能识别某一特定核苷酸序列,使两个核苷酸之间的 断开。限制酶切割产生的DNA 片段末端有两种形式,分别是 、 。 (2)基因工程中常用“分子缝合针”是连接酶,根据酶的来源不同可分为 、 两类,其中前者只可以连接 ,后者既可以连接 也可以连接 。 2.(10分)生物学家通过基因工程培育出了能够通过乳房生物反应器生产人的血清蛋白。 (1) “分子手术刀” _ _ , (2) “分子缝合针” , (3) “分子运输车” 基因进入受体细胞的载体 。 (4)操作步骤:从人的___基因组文库_________获取目的基因;目的基因与 ____________结合构建基因表达载体;在基因表达载体中还应插入___________和 终止子。然后把基因表达载体导入牛的__受精卵__________,通过发育形成的牛 体细胞含人的_________________,成熟的牛产的的奶中含有 ___________________,证明基因操作成功。 (5)人的基因在牛体内能表达,说明人和牛___________ 3、限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G ↓GATCC —,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点 是—↓GATC —。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有一个酶Ⅱ的切点。 (1)请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。 (2)请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。 (3)在DNA 连接酶作用下,上述两种不同限制酶切割 后形成的黏性末端能否连接?为什么? 4、聚合酶链反应(PCR )是生物学家在实验室以少量 样品制备大量DNA 的生化技术,反应中新合成的DNA 又可以作为下一轮循环反应的模板。其过程如右图所示: (1)反应系统中应加入哪些物质?__少量样品基因、A TP 、DNA 解旋酶等酶4种游 —↓GATC —……—↓GATC — — CTAG ↑—……— CTAG ↑— 用酶Ⅱ切割 目的基因 — GATC —……— GATC — —CTAG —……—CTAG — 目的基因

基因工程与蛋白质工程知识归纳及试题例析

. 知识归纳及试题例析”“基因工程与蛋白质工程一、知识归纳分子相关的酶1.与DNA作用参与的生理过程应用名称基因工程限制性核酸内切酶切割某种特定的脱氧核苷酸序列 基因工程DNA连接酶DNA片段连接两个DNA复制在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧酸DNA聚合酶转录RNA聚合酶在核苷酸链上添加单个核糖核苷酸 DNA 解旋酶复制及转录使碱基间氢键断裂 逆转录及基因工程逆转录酶以RNA为模板合成DNA 特别注意:,DNA(1)限制性核酸内切酶的来源:多数来自原核生物;作用特点:主要切割外源不起作用从而达到保护自身的目的;作用结果:形成DNA片断末端。对自身的DNA)各种酶都具有专一性,特别是限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列,并在特定(2 的碱基之间切开。.基因工程的基本操作程序2 (1)获取目的基因 ①基因文库:是将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中通过克隆而储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。 ②基因组文库:基因文库中含有一种生物所有的基因就叫做基因组文库。 ③部分基因文库:含有一种生物的部分基因,就叫做部分基因文库,如cDNA文库。 PCR技术与DNA复制的比较 比较项目PCR技术DNA复制 原理DNA双链复制((碱基互补配对)相原料同四种游离的脱氧核苷酸 点条件模板、ATP、酶等 解旋方式解旋酶催化DNA在高温下变性解旋不主要在细胞核内场所体外复制同热稳定的DNA聚合酶(Taq酶)细胞内含有的酶DNA聚合酶点在短时间内形成大量的DNA片段形成整个DNA分子结果 (2)基因表达载体的构建(基因工程的核心) ①构建目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。 ②一个基因表达载体的组成:目的基因、启动子、终止子、标记基因等。 ③构建方法 资料Word .

基因工程复习题答案

基因工程原理复习题思考题 基因工程绪论 1、基因工程的定义与特征。 定义:在体外把核酸分子(DNA的分离、合成)插入载体分子,构成遗传物质的新组合(重组DNA),引入原先没有这类分子的受体细胞内,稳定地复制表达繁殖,培育符合人们需要的新品种(品系),生产人类急需的药品、食品、工业品等。 特征:1、具跨越天然物种屏障的能力。 2、强调了确定的DNA片段在新寄主细胞中的扩增。 2、试述基因工程的主要研究内容。 1)、目的基因的分离 2)、DNA的体外重组(载体、受体系统等) 3)、重组DNA分子转移到受体细胞及其筛选 4)、基因在受体细胞内的扩增、表达、检测及其分析。 3、基因工程在食品工业上有何应用发展? 主要是通过基因重组,使各种转基因生物提高生产谷氨酸、调味剂、酒类和油类等有机物的产率;或者改良这些有机物组成成分,提高利用价值。 4、转基因是一把双刃剑,请客观谈谈对转基因及转基因食品安全性的认识。 转基因技术所带来的好处是显而易见的,在人类历史进步和发展中起到了积极作用。 首先,通过该项技术可以提供人们所需要的特性,改良培育新品种; 第二,延长食品保存时间或增加营养成分; 第三,将抗虫防菌基因转入到作物中,使作物本身产生抵抗病虫害侵袭的能力,减少了农药的使用量,有利于环境保护; 第四,转基因技术及基因食物在医学方面得到广泛研究和应用。 人们对转基因技术的主要担忧在于环境方面。外源基因的导入可能会造就某种强势生物,产生新物种或超级杂草、损害非目标生物、破坏原有生物种群的动态平衡和生物多样性,也即转基因生物存在潜在的环境安全问题。 转基因作物的大面积种植已有数年,食用转基因食品的人群至少有10亿之多,但至今仍未有转基因食品对生命造成危害的实例;更何况目前每一种基因工程食品在上市前,都要经过国家法律认可,食品卫生部门和环境部门的严格检测。只有测试合格了,才能投放市场。因此公众完全可以安全地消费、大胆地食用转基因食品。 第一章 DNA的分子特性与利用 1、原核生物和真核生物的基因表达调控有何差别? 1)原核基因表达调控的三个水平:转录水平调控、翻译水平调控、蛋白质加工水平的调控原核基因表达调控主要是在转录水平上的调控。 2)真核生物基因表达的特点: ● 1.基因组DNA存在的形式与原核生物不同; ● 2.真核生物中转录和翻译分开进行; ● 3.基因表达具有细胞特异性或组织特异性; ● 4.真核基因表达的调控在多个水平上进行:DNA水平的调控、转录水平调控、转 录后水平调控、翻译水平调控、蛋白质加工水平的调控; 2、什么是基因?根据基因的产物,基因可分为哪三类? 基因是具有生物学功能的、在染色体上占据一定位置的一段核苷酸序列,是分子遗传的功能

高中生物选修3基因工程的应用和蛋白质工程知识点

高中生物选修3基因工程的应用和蛋白质工程知识点 1.基因工程培育转基因生物的优点: (1)打破了常规育种难以突破的物种之间的界限(生殖隔离) (2)定向改变了生物的遗传性状。 2.基因工程的应用: (1)用于提高动植物生长速度。 (2)用于改善畜产品的品质。 (3)用转基因动物生产药物。 (4)用转基因动物作器官移植的供体。 3.膀胱生物反应器:将外源基因导入到受精卵膀胱上皮细胞进行表达。优点: 雌雄个体都能生产。 4.乳腺生物反应器或乳房生物反应器缺点:只有雌性个体才能生产药物。 5.干扰素:干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白,干扰 素几乎能够抵抗所有病毒引起的感染。 6.基因治疗:是把正常基因导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从 而达到治疗疾病的目的,这是治疗遗传病的最有效的手段。 7.基因治疗不能替代原有基因,它替代的是缺陷基因的功能。 8.大肠杆菌是原核生物,生产出来的干扰素没有活性,原核细胞内没有内质网 和高尔基体,只有核糖体,只能合成相应的蛋白质,无法添加糖基,要使干扰素具有活性,还必须经过人工处理,加上糖基。 9.基因诊断:也称DNA诊断或基因探针技术,即在DNA水平分析检测某一基 因,从而对特定的疾病进行诊断。 10.基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。 11.蛋白质工程的目标:根据人们对蛋白质的特定需求,对蛋白质进行分子设计。 12.天然蛋白质的合成过程:按照中心法则进行的,基因→表达(转录和翻译) →形成氨基酸序列的多肽链→形成具有高级结构的蛋白质→行使生物功能。 13.蛋白质工程合成蛋白质的过程:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白 质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。 14.蛋白质工程中进行基因操作的原因: (1)改造过的蛋白质可以遗传。 (2)对基因的改造比对蛋白质直接改造容易操作,难度少的多。 15.蛋白质工程:蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关 系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有的蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。原理是改造基因,实质是对编码蛋白质的基因进行改造。

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