液相色谱_串联质谱法测定牛奶中非类固醇激素残留量

玉米赤霉醇包括α-玉米赤霉醇(Zeranol)、β-玉米赤霉醇（Taleranol），简称ZER。玉米赤霉酮（Zear－alanone，ZEAR）为玉米赤霉醇代谢物。二苯乙烯类激素（Stilbenes）主要包括己烯雌酚（Diethylstilbestrol，DES）、己烷雌酚（Hexestrol，HEX）、双烯雌酚（Dienoe－strol，DEN）。玉米赤霉醇和二苯乙烯类激素均属人工合成非类固醇同化性激素，曾被官方批准用于畜牧业生产中的促生长剂[1]。大量资料表明，这些激素在被最终产品带进人体，不仅可以导致与内分泌相关的肿瘤、出生缺陷和生育缺陷，还会对婴儿和青少年的生长发育造成严重影响，因此各国陆续公布法令禁止在畜牧业饲养过程中使用这类激素[2-3]。牛奶作为人们消费食品的重要品种，检测牛奶中此类激素残留量对于食品安全性评估是非常必要的。目前有文献报道采用酶联免疫(ELISA)法、放射免疫法(RIA)、气相色谱-质谱(GC-MS)法和液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法对动物组织中玉米赤霉醇及代谢物和二苯乙烯类激素分别检测[4-8]，但鲜见到牛奶中此类激素残留量同时检测的报道。本文采用LC-MS/MS法同时对牛奶中玉米赤霉醇及代谢物和二苯乙烯类激素残留进行检测，方法灵敏度高、干扰少，结果准确。

1材料与方法

1.1仪器设备

1100-API4000液相色谱-串联质谱仪(美国Agilent-AB公司)，配有电喷雾电离源；自动固相萃取

液相色谱-串联质谱法测定牛奶中

非类固醇激素残留量

吴延晖1，许泓1，何佳1，庞国芳2，张骏1，林安清1，张曼1

（1.天津出入境检验检疫局，天津300201；2.秦皇岛出入境检验检疫局，河北秦皇岛066002）

摘要：用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)同时测定牛奶中玉米赤霉醇(ZER)、玉米赤霉酮(ZEAR)、己烯雌酚(DES)、己烷雌酚(HEX)、双烯雌酚(DEN)的残留量。样品经乙腈处理沉淀蛋白质后取上清液，浓缩后经阴离子交换固相萃取柱净化，应用LC-MS/MS电喷雾电离方式（ESI-），以多反应离子监测(MRM)方式进行检测。选用ZER、DES的同位素标记物作内标，采用内标法定量。DES、DEN、ZER、ZEAR、HEX在1.0μg/L~10μg/L含量范围内回收率为64.13%～106.6%。

关键词：液相色谱-串联质谱；非类固醇激素；残留量

Simultaneous Determination of Residue Nonsteroid Anabolic Hormones in Milk by Liquid Chromatography-

Tandem Mass Spectrometry

WU Yan-hui1,XU Hong1,HE Jia1,PANG Guo-fang2,ZHANG Jun1,LIN An-qing1,ZHANG Man1

（1.Tianjin Inspection and Quarantine Bureau，Tianjin300201，China;2.Qinhuangdao Inspection and Quarantine

Bureau，Qinhuangdao066002，Hebei,China）

Abstract:A liquid chromatographic（LC）-tandem mass spectrometry（MS/MS）method was developed for simultaneous determination of zeranol（ZER）,zearalanone（ZEAR）,diethylstilbestrol（DES）,hexestrol（HEX）, and dienoestrol（DEN）in milk.The analytes were extracted with acetonitrile for elimination of protein,and concentrated after centrifugalization and cleaned up with a anion-exchange solid phase extraction column and were achieved using electronic spray ionization（ESI）in negative scan mode and multiple reaction monitoring （MRM）determination mode.ZER-d4and DES-d8were used as internal standard in this method.The recovery level of the method was64.13%-106.6%for DES，DEN，ZER,ZEAR and HEX between1.0μg/L and10μg/L.

Key words:Liquid chromatography-tandem mass spectrometry;Non-steroid hormone;Residues

作者简介：吴延晖（1969—），女（汉），高级工程师，硕士，研究方向：食

品残留分析。

仪：ASPEC XLi(美国Gilson公司)；氮气吹干仪：美国O.

I.公司。

1.2化学试剂与材料

化学试剂和溶剂未特殊标明均为分析纯，水为去离子水。玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、己烯雌酚、己烷雌酚、双烯雌酚(≥98%，美国Sigma公司)。己烯雌酚同位素标记物(≥98%，DES-d8，美国Cambridge Isotope Laboratories公司)，玉米赤霉烯醇同位素标记物(≥99%，ZER-d4，荷兰rivm)。乙腈、甲醇为色谱纯(德国Merck 公司)。氨水、甲酸、5mol/L氢氧化钠溶液。Oasis MAX 固相萃取柱：60mg,3mL(美国Waters公司)。

1.3方法

1.3.1LC-MS/MS分析条件

色谱柱：ZORBAX SB C8，150mm×4.6mm,3.5μm (美国Agilent公司)；流动相：乙腈-水(70+30，体积分数)，流速0.5mL/min；进样量50μL。MS/MS条件：电离方式ESI+，离子源温度350℃；气帘气压力0.1240MPa；雾化气压力0.083MPa；辅助气1压力0.2756MPa；辅助气2压力0.2412MPa；喷雾器电流-5μA；电喷雾电压-4500V，碰撞气高纯氮。检测以多反应监测(MRM)方式扫描，测定ZER、ZEAR、DES、HEX、DEN的负离子。监测离子及相应参数见表1。

1.3.2标准溶液的配制

分别准确称取各标准品，用甲醇配成浓度为100mg/L的标准储备液。取空白样品，不加ZER-d4和DES-d8内标工作溶液，其它按1.4.1，1.4.2操作后得到基质提取液。准确移取不同体积的混合标准储备液，分别加入ZER-d4和DES-d8内标工作溶液10ng，利用氮吹仪中吹干后，以基质提取液配成浓度为2.5、5.0、10、25、50μg/L的标准溶液，供液相色谱-串联质谱测定。

1.4样品预处理

1.4.1试样的制备

取50mL新鲜或解冻的牛奶混合均匀，3500r/min 离心5min,取下层。

1.4.2提取

取试样5mL，加入ZER-d4和DES-d8内标工作溶液(200ng/mL)50μL，加乙腈10mL，涡旋混合3min，3500r/min离心10min,取上清液于另一离心管中，再向样品中加入5mL乙腈，同前操作，合并提取液，50℃下氮吹至体积小于0.1mL。加水10mL，用5mol/L NaOH调节pH至11.0，9000r/min离心5min,备用。1.4.3净化

先用2mL甲醇、2mL水将柱子活化，流速均为4mL/min。将1.4.2样品上柱，流速为1mL/min，依次用1mL淋洗液（氨水∶水5∶95体积比），0.5mL甲醇以3mL/min的速度淋洗，加入50mL空气以4mL/min的速度吹过Oasis MAX柱。用4mL洗脱液（甲酸∶甲醇5∶95体积比）洗脱，流速为2mL/min，通入30mL空气以6mL/min的速度吹过Oasis MAX柱，收集洗脱液。将洗脱液在氮吹仪上于40℃水浴中吹干，加入1mL流动相(乙睛∶水80∶20体积比)，涡旋30s溶解。溶液经0.22μm有机系滤膜过滤后，供液相色谱-串联质谱测定。

2结果和讨论

2.1被测物的提取

牛奶中含有蛋白质，样品的提取是试验的前提。考察了叔丁基甲醚、乙腈作为被测物提取剂对样品处理结果的影响。研究表明，采用叔丁基甲醚作为提取溶液，提取中极易发生乳化现象，导致回收率偏低。而用乙腈蛋白沉淀效果好，使用后溶液未出现乳化现象，并且回收率明显提高。因此本标准采用乙腈作为蛋白沉淀剂和提取剂。

2.2固相萃取净化

牛奶成分复杂，含有脂肪和多种微量元素，样品的净化是试验的关键。LC-MS/MS具有较高的检测灵敏度，但复杂的基质背景会抑制目标化合物的离子化效率，大大降低被测组分的检测灵敏度，而且样品净化程度对结果重现性也有很大的影响。目前多数文献报道采用固相萃取（SPE）法进行样品净化[4-8]。本方法曾选用硅胶柱、OasisHLB柱进行净化，但回收率较低。玉米赤霉醇及代谢物和二苯乙烯类激素的化学结构中

表1在多反应监测方式下被测物的监测离子及其相应参数Table1Diagnostic ions of hormones and parameters in MRM

被测物名称

玉米赤霉醇

玉米赤霉酮

玉米赤霉烯醇-4氘代

己烯雌酚

双烯雌酚

己烷雌酚

己烯雌酚-8氘代检测离子对/(m/z)

320.6/277.2*

321.1/161.0

318.7/160.8*

318.7/107.0

322.9/159.9

322.9/130.1

266.9/251.0*

266.9/237.1

264.7/249.1*

264.7/235.0

269.0/134.0*

269.0/118.9

275.0/258.9

275.0/245.0

碰撞气能量/V

-42

-40

-40

-45

-50

-43

-35

-40

-36

-36

-23

-52

-37

-42

去簇电压/V

-110

-100

-110

-110

-90

-90

-90

-90

-80

-80

-70

-70

-90

-90

注：带有*为定量离子对。

图3试样中双烯雌酚的定量离子流图

Fig.3Diagnostic ion chromatogram of DEN in sample

均带有2个以上羟基，属弱酸性物质，因此采用Oasis MAX 弱阴离子交换柱进行净化处理后，净化效果较好，回收率提高很多，因此检测信噪比提高。应用自动固相萃取仪(ASPE)可减少人为因素误差，提高重现性。2.3

内标物的选择

检测牛奶中的玉米赤霉醇和二苯乙烯类激素的残留量，由于基质复杂而对定量分析存在较严重的干扰，使定量的重现性难以满足要求[9]。对于残留痕量分析，近年欧、美等国更提倡采用被测物的同位素标记物做内标[10]

，

定量准确且重现性好。为此试验选择ZER-d4作为ZER 和ZEAR 的内标物，DES-d8作为二苯乙烯类激素的内标物，从试验第一步将其添加到试验样品中，校正了整个试验，提高了回收率和重现性，使方法更具操作性。2.4

线性范围和最低检测量

以本试验的测试条件，进样50μL 进行测定，重复进样6次取平均值，用峰面积对标准溶液中各被测组分的浓度做图，其各目标物在检测范围内均呈线性关系，线性方程和相关系数见表2。

以信噪比S/N>5计算，本方法最低检测量为0.5μg/L 。在试样中添加0.5μg/L 的被测物回收见图1~图5。

表2被测物线性方程和相关系数

Table 2Liner eqution and correlation

激素名称玉米赤霉醇玉米赤霉酮己烯雌酚己烷雌酚双烯雌酚

检测范围/（

μg/L ）2.5~502.5~502.5~502.5~502.5~50

线性方程Y =-2.08e4x +2.66e 4Y =-7.32e2x +1.01e 5

Y =-4.01e3x +2.58e 3

Y =2.34e3x +3.79e 3Y =1.29e3x +1.19e

3相关系数0.99680.99880.99790.99860.9997

图1试样中玉米赤酶酮的定量离子流图

Fig.1Diagnostic ion chromatogram of ZEAR in sample

图2试样中玉米赤酶醇的定量离子流图

Fig.2Diagnostic ion chromatogram of ZER in

sample

时间/min

时间/min

时间/min

图5试样中己烯烷雌酚的定量离子流图

Fig.5Diagnostic ion chromatogram of DES in sample

图4试样中己烷雌酚的定量离子流图

Fig.4Diagnostic ion chromatogram of HEX in sample

表3回收率试验（n=10）

Table 3Test of recovery (n=10)

玉米赤霉醇玉米赤霉酮己烯雌酚己烷雌酚双烯雌酚

5.074.3164.138

6.9091.7574.13

1095.0280.90102.568.6075.10

25106.684.9097.6475.14105.5

5087.4379.0877.9683.1175.45

回收率/%标准品添加水平/(μg/L)

2.5方法的回收率和精密度

取空白牛奶样品做添加回收和精密度试验，样品添加不同浓度标准后，按本方法进行样品制备、净化和测定，分析结果见表3、表4。

由表可见，在5μg/L~50μg/L 含量范围内，回收率为64.13%～106.6%，精密度为3.36%~14.73%。3结论

本研究建立了对牛奶中玉米赤霉醇及代谢物和

二苯乙烯类激素残留量准确定性和定量检测方法。在5μg/L~50μg/L 含量范围内，回收率为64.13%～106.6%，精密度为3.36%~14.73%，方法检出限为0.5μg/L 。因此该方法为严格控制滥用激素的现象以确保动物食品的食用安全提供了可靠的技术手段。参考文献：

[1]

朱蓓蕾.动物性食品药物残留[M].上海：上海科学技术出版社,1994:72-98

[2]The council of the european union.Council directive 81/602/EEC[S].

The council of the european union ，

1981：1-4[3]农业部第193号公告.食品动物禁用的兽药及其它化合物清单

[S].农业部，2002：1-3

[4]Glenn Kennedy D,Armstrong Hewitt S,John D G McEvoy,et al.

Zeranol is formed from spp .Toxins in cattle in vivo[J].Food Additives and Contaminants,1998,15(4):393-400

[5]Thomas R Covey,Dominque Silvestre,Michael K Hoffman,et al.A

Gas Chromatographic/Mass Spectrometric Screening,Confirmation,and Quantification Method for Estrogenic Compounds[J].Biomedical and environmental mass spectrometry,1988,15：45-56

[6]Marchand P,Bizec B L,Gade C,et al.Ultra trace detection of a wide

range of anabolic steroids in meat by gas chromatography coupled to mass spectrometry[J].Journal of Chromatography,2000,867:219-233[7]许泓,庞国芳，林安清,等.动物组织中多种残留非类固醇同化激

素的液相色谱-串联质谱法同时测定[J].分析测试学报,2007,26(6)：837-840[8]

Reuverx T H,Perogordo E,Jimenez R.Rapid screening method for

表4精密度试验（n=10）

Table 4Test of precision

玉米赤霉醇玉米赤霉酮己烯雌酚己烷雌酚双烯雌酚

5.05.727.309.579.4913.09

105.493.365.358.0315.15

255.886.513.985.1410.37

5010.9214.7313.048.0214.55

回收率/%标准品添加水平/(μg/

L)

时间/min

时间/min

the determination of diethylstilbestrol in edible animal tissue by column liqiud chromatography with electrochemical detection[J].

Journal of Chromatography,1991,564：477-484

[9]富恩承,钱毅,庄无忌,等.出口商品中农药、兽药残留量及生物毒

素检验方法标准编写的基本规定.SN/T0001-1995[S][10]国家质量监督检验检疫总局食品安全局,动植物检疫监管司,

国际合作(科技)司,等.动物和动物源食品中兽药残留物分析方法[M].北京:中国轻工业出版社，2003:140-150

收稿日期：2009-09-08

随着食品工业的发展，食品添加剂已成为不可缺少的物质，亚硫酸盐（SO

2

）就是众多添加剂中的一种，在葡萄酒的酿制工艺中必不可少，具体作用如下：1.二氧化硫是一种杀菌剂[1]，能杀死葡萄皮表面的杂菌；2.二氧化硫可以推迟发酵开始的时间[2]，从而有利于发酵基质中悬浮物的沉淀，起到净化葡萄醪的作用，尤其是酿造干（甜）白葡萄酒，澄清净化处理尤为重要；3.抗氧化作用[3]，二氧化硫可以防止葡萄酒氧化，防止葡萄酒酒质败坏。二氧化硫的正确使用是葡萄酒陈酿过程中一项基本技术，是酒品保证的关键[4]。但是亚硫酸盐有一定的毒性，人体若过多摄入，对胃肠、肝脏有损害作用，引发呼吸困难、腹泻、呕吐等症状，引起红血球、血红蛋白的减少，因此严格控制食品中的亚硫酸盐，是保障消费者健康权益的重要工作[5-7]。我国《食品添加剂使用卫生标准》（GB2760-1996）对二氧化硫作为食品添加剂的安全限量有明确的规定≤0.25g/kg[8]。

国家标准GB/T5009.34-2003《食品中亚硫酸盐的测定》中“5.1.3”有规定葡萄酒中二氧化硫的测定方法，

盐酸副玫瑰苯胺法测定

进口葡萄酒中二氧化硫的方法补充

安文佳，李伟明，赵涛，何翠霞

（番禺出入境检验检疫局，广东番禺511400）

摘要：对GB/T5009.34-2003《食品中亚硫酸盐的测定》中盐酸副玫瑰苯胺比色法检验进口葡萄酒中二氧化硫含量的方法进行补充。通过加入不同质量的活性碳于中速滤纸过滤的方法消除葡萄酒中假阳性物质对二氧化硫测定干扰，并测定样品的不同浓度点的加标回收率情况，多次试验结果表明，回收率在90.4%~101.2%，相对偏差均小于2％，可以用此方法于进口葡萄酒的批量检验中。

关键词：盐酸副玫瑰苯胺法;进口葡萄酒;亚硫酸盐;活性碳

The Method Complementarity of Sulfite in Imported Wines by Hydrochloric Para-Roanilin Method

AN Wen-jia,LI Wei-ming,ZHAO Tao,HE Cui-xia

（Panyu Entry－Exit Inspection and Quarantine Bureau，Panyu511400，Guangdong,China）Abstract:This paper reinforced the GB/T5009.34-2003〈The Determination of Sulphite in Foods〉,to exploring the inspection method of sulfite dioxide content in imported wines by hydrochloric para-soanilin colormetry method.The different amount activated carbon on the middle speed filter paper was used to eliminating the interference of the fake positive substance in imported wines.The relia-bility of this method was testified by labeling the rate of recovery and RSD(%).The method is accurate and sensitive with recovery rate of90.4%-101.2%,RSD（％）<2%.It can be used to the inspection batch-bulk imported wines.

Key words:hydrochloric para-roanilin method;imported wines;sulfite;activiated carbon

作者简介：安文佳（1977—），女（汉），工程师，硕士，主要从事食品安

全理化检验工作。

777777777777777777777777777777777777777777777777

液相色谱-串联质谱法

消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星测定?液相色谱-串联质谱法 Determination of clobetasol propionate and levofloxacin hydrochloride in disinfection product - LC-MS-MS method 1 范围 本方法规定了膏霜类消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星残留量液相色谱-串联质谱测定方法。 本方法适用于膏霜类消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星残留量的测定。 取样量为0.1g时，本方法对丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星的检出限见表1。 表1 丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星的检出限、保留时间和特征离子 中文名称英文名称 检出限 （μg/g） 保留时 间（min） 特征离子(m/z) 丙酸氯倍他索Clobetasol propionate 0.009 7.83 467.0/355.2/373.4 盐酸左氧氟沙星Levofloxacin hydrochloride 0.06 1.11 362.0/260.9/318.2 2 规范性引用文件 3 原理 试样中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星用甲醇提取，提取液经0.45μm滤膜过滤，用C18柱分离后，用液相色谱-串联质谱仪测定，正离子扫描，离子对定性，峰面积定量。 4 试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为不含有机物的纯水，纯水中干扰物的浓度需低于方法中待测物的检出限。 4.1甲醇：农药残留级。 4.2乙腈：农药残留级。 4.3甲酸：分析纯。

4.4标准品：丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星均购自中国药品生物制品检定所，纯度≥99.8%。 4.5标准溶液：准确称取丙酸氯倍他索适量，用乙腈－水（1：1）配制成100μg/mL 的标准贮备液。准确称取盐酸左氧氟沙星适量，用纯水配制成100μg/mL的标准贮备液。准确量取上述标准贮备溶液适量，用乙腈稀释配制成浓度为10.0μg/mL 的混合标准中间溶液，将标准中间溶液转移到安瓿瓶中于4 C保存。临用前，再根据需要用甲醇配制成不同浓度的标准使用溶液。 4.6甲酸溶液(0.2%，v/v)：量取2mL甲酸，用纯水定容至1000mL。 4.7 0.45μm滤膜。 5 仪器 5.1 液相色谱-串联质谱联用仪：HP1100高效液相色谱仪(Agilent) - API 4000质谱仪(Applied Biosystems) ，电喷雾离子化源(ESIMS，NI/PI模式)。 5.2 分析天平：感量0.1mg和0.001g。 5.3实验室纯水机：Barnstead纯水机。 5.4涡旋振荡器：Scientific Industries 涡旋振荡器。 5.5 具塞试管：10mL。 6 试样的制备与保存 6.1 试样的制备 取有代表性样品5g，搅拌均匀，制成实验室样品。 6.2 试样保存 制备好的试样置于室温保存。 7 测定步骤 7.1样品前处理 称取0.1g~0.2g样品(精确到0.001 g) ，置于10mL试管中，加入3.00mL甲醇溶液，涡旋振摇使样品分散后，超声振荡10min。静置，吸取上清液经滤膜（4.7）过滤后，供液相色谱-串联质谱测定。

血清中类固醇激素的检测-Cleanert SLE(20161102)

血清中类固醇激素的检测-Cleanert SLE 一背景 类固醇激素又称为甾体激素，是内分泌细胞分泌的高效能生物化学物质。它们在维持生命、调节机体物质代谢、促进性器官发育和维持生育等方面起着重要作用。 类固醇激素在体内的含量较低，对其准确定量具有重要意义。本实验采用Cleanert SLE 对血清样品进行净化，建立了血清中类固醇激素的检测方法，可为临床研究提供参考。 二目标物信息 表1 目标物结构信息 三材料 Cleanert SLE (200mg/3mL)；Cleanert M96 生物样品前处理仪；Cleanert V96 氮吹浓缩仪；V enusil ASB C18（2.1*50mm，3μm,150 ?）；API 4000+。 四样品处理方法 （1）移取200μL血清样品至样品管中，并加入一定体积的甲醇，使溶液中甲醇的含量为5%，摇匀待净化。 （2）将经过预处理的血清样品上样至Cleanert SLE中，可开启负压装置(真空度＜-0.04MPa)将样品抽过上筛板或使用Cleanert M96生物样品前处理仪将样品压下筛板，待样品全部流至填料中后，静止10min。 （3）在每孔中加入600μL甲基叔丁基醚(MTBE)用于目标物的洗脱，控制洗脱速度为1~2mL/min，在第一次洗脱完成之后，间隔1min再进行第二次洗脱，合并洗脱液。（4）将合并的洗脱液用96位氮吹仪进行氮吹浓缩，温度设定为40℃，氮吹至近干。

（5）使用200μL乙腈/水（3/7，v/v）将样品进行重溶，摇匀，进样检测。 五仪器检测条件 5.1 正模式方法（针对黄体酮、睾酮、勃地酮） 5.1.1 HPLC条件 色谱柱：Venusil ASB C18（2.1*50mm，3μm,150 ?） 流速：200μL/min 柱温：30℃ 进样量：5μL 流动相：水/乙腈（45/55，v/v） 5.1.2 质谱条件 扫描模式：电喷雾电离正模式 采集模式：多反应监测（MRM） 5.2 负模式方法（针对可的松） 5.2.1 HPLC条件 色谱柱：Venusil ASB C18（2.1*50mm，3μm,150 ?） 流速：200μL/min 柱温：30℃ 进样量：5μL 流动相：水/乙腈（70/30，v/v） 5.2.2 质谱条件 扫描模式：电喷雾电离负模式 采集模式：多反应监测（MRM） 表3 质谱参数

生理学第八章 内分泌生理

第八章内分泌生理 【习题】 一、名词解释 1.激素 2.应激反应 3.垂体门脉系统 4.生长素介质 5.靶细胞 6.促垂体区 7.允许作用8.第二信使9.月经周期 二、填空题 1.激素按其化学本质可分为_____和_____两大类。作为药物应用时_____激素可被消化酶分解，故不易口服；_____激素不被消化酶分解，故可口服。 2.激素的传递方式有_____、_____和_____。大多数激素的传递方式是 _____。 3.甲状旁腺激素是由_____分泌的激素，它主要调节血中_____和_____的浓度。 4.甲状腺激素主要以_____的形式贮存于_____中。 5.幼年时期缺乏甲状腺激素导致_____，而成年人缺乏甲状腺激素将导致_____。 6.甲状腺分泌的激素，以_____为主，而活性以_____为高。 7.血钙增高，甲状旁腺素分泌_____；血磷升高，甲状旁腺素分泌_____。 8.胰岛素由胰岛_____分泌，其主要生理作用是_____、_____和_____。 9.胰岛素缺乏，组织对糖的利用_____，血糖_____。 10.腺垂体分泌四种促激素，它们是_____、_____、_____、_____。

11.盐皮质激素由肾上腺皮质_____分泌，糖皮质激素由肾腺皮质_____分泌，性激素可由肾上腺皮质_____和_____分泌。 12.糖皮质激素分泌受腺垂体分泌的_____控制。肾上腺髓质分泌活动受 _____控制。 13.糖皮质激素使血糖_____，肝外组织蛋白质_____，脂肪_____。 14.下丘脑分泌的各种调节性多肽，通过_____运送到_____，调节_____的分泌。 15.神经垂体释放的激素是_____和_____。 16.肾上腺髓质受交感神经_____支配，并受ACTH和_____的调节。 17.生长素对代谢的作用是促进蛋白质的_____，加速脂肪的_____，_____葡萄糖的利用，使血糖_____。 18.人绒毛膜促性腺激素是由_____分泌的，其主要生理作用是_____。 19.卵巢在卵胞期主要分泌_____，而黄体期还分泌_____。 20.生理剂量的甲状腺激素使蛋白质合成_____，而甲亢时蛋白质_____，呈负氮平衡。 21.卵巢的主要生理功能是产生_____，并分泌_____、_____和少量_____。 22.可以作为激素第二信使的物质是_____和_____等。 23.刺激和维持男性副性征的激素是_____；刺激女性副性征的激素是 _____。 24.LH作用于睾丸_____细胞，引起_____分泌。 25.月经周期中，由于血中_____和_____浓度下降，导致子宫内膜脱落、出血，形成月经。

类固醇激素

类固醇激素，又称甾体激素。具有极重要的医药价值。在维持生命、调节性功能，对机体发展、免疫调节、皮肤疾病治疗及生育控制方面有明确的作用。类固醇激素药物的发现与发展是药物化学学科发展的重要阶段。 类固醇激素是一类脂溶性激素，它们在结构上都是环戊烷多氢菲衍生物。脊椎动物的肾上腺激素可分为肾类固醇激素上腺皮质激素和性激素两类。(1)肾上腺皮质激素。肾上腺皮质激素由肾上腺髓质分泌产生。目前从肾上腺皮质提取液中分离的类固醇化合物有30余种，已知生理作用的主要有以下几种。 肾上腺皮质激素的生理功能主要表现在两个方面: ①调节糖代谢:抑制糖的氧化，使血糖升高;促进蛋白质转化为糖。具有这种功能的包括皮质酮、11-脱氢皮质酮、17-羟基皮质酮(氢化可的松)和17-羟基-11-脱氢皮质酮(可的松)。这类激素还具有良好的抗炎、抗过敏作用，是常用的激素药物。 ②调节水盐代谢:促使体内保留钠离子及排出过多的钾离子，调节水盐代谢。这类激素包括11-脱氧皮质酮、17-羟基-11-脱氧皮质酮和醛皮质酮。其中醛皮质酮对水盐代谢的调节作用比脱氧皮质酮大30-120倍。 肾上腺皮质激素分泌失常，将引起糖代谢及无机盐代谢紊乱而出现病症。 (2)性激素。性激素属于类固醇类激素，可分为雄性激素和雌性激素两类。它们与动物的性别及第二性征的发育有关。性激素的分泌受脑垂体的促性腺激素调节。 ①雄性激素:雄性激素中重要的有睾酮、雄酮、雄二酮和脱氢异雄酮。睾酮由睾丸的间质细胞分泌，是体内最重要的雄性激素。雄酮、雄二酮和脱氢异雄酮是睾酮的代谢产物(睾酮→雄酮→雄二酮→脱氢异雄酮)。 肾上腺皮质也能分泌一种雄性激素，即肾上腺雄酮。 雄性激素主要是促进雄性的性器官和第二性征的发育和维持，以及促进蛋白质合成，使身体肌肉发达。雄性激素中睾酮的活性最高，分别是雄酮的6倍和脱氢异雄酮的18倍。各种雄性激素可分为两类。 ②雌性激素:雌性激素可分为两类。 卵泡素:由卵巢分泌，包括雌酮、雌二醇和雌三醇。具有促进性性器官发育、排卵，以及促进第二性征发育等功能。其中以雌二醇的活性最高，约为雌酮的6倍，雌三醇的200倍。这三种激素在体内可以相互转化。 黄体激素:由卵巢的黄体分泌的产生，主要是黄体酮(又称为孕酮)。具有促进子宫及乳腺发育，防止流产等作用。 雄性激素和雌性激素的功能虽然很不相同，但它们在结构上却很相似。两类性激素都可以从胆固醇衍生而来，而且二者在体内可以相互转变。已经证明，不论雄性和雌性动物体内部都存在一定比例的两类性激素，它们之间存在着一种平衡，雄性动物体中含有更多的雄性激素，而雌性动物体内则含有更多的雌性激素。 折叠作用机制 类固醇激素的作用机制--基因表达学说。类固醇激素类固醇激素的分子质量较小，且是脂溶性的，可通过扩散或载体转运进入靶细胞，激素进入细胞后先与胞浆内的受体结合，形成激素-受体复合物，此复合物在适宜的温度和Ca2+参与下，发生变构获得透过核膜的能力。激素进入核内后，与核内受体结合形成复合物。此复合物结合在染色质的非组蛋白的特异位点上，启动或抑制该部位的DNA转录过程，进而促进或抑制mRNA?的形成，结果诱导或减少某些蛋白质(主要是酶)的合成，实现其生物效应。一个激素分子可生成几千个蛋白质分子，从而实现激素的放大功能。 肌肉活动时的激素反应肌肉活动时，各种激素，特别是动员能量供应的激素水平发生不同程

液相色谱串联质谱的小知识

一、开机 water 2695/micromass zq4000: 开机步骤 1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源，此时质谱主机内置的CPU会通过网线与计算机主机建立通讯联系，这个时间大约需要1至2分钟。 2. 等液相色谱通过自检后，进入Idle状态，依照液相色谱操作程序，依次进行操作。（具体根据液相色谱不同型号来执行，下面以2695为例）。 a.打开脱气机 (Degasser On)。 b.湿灌注(Wet Prime)。 c.Purge Injector。 d.平衡色谱柱。 3.双击桌面上的 MassLynx 4.0图标进入质谱软件。 4.检查机械泵的油的状态（每星期），如果发现浑浊、缺油等状况，或者已经累积运行超过3000小时，请及时更换机械泵油。 5.点击质谱调谐图标（MS Tune）进入质谱调谐窗口。 6.选择菜单“Options –Pump”，这时机械泵将开始工作，同时分子涡轮泵会开始抽真空。几分钟后，ZQ就会达到真空要求，ZQ前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。 7.点击真空状态图标，检查真空规的状态，以确认真空达到要求。 8. 确认氮气气源输出已经打开，气体输出压力为90 psi。 9.设置源温度（Source Temp）到目标温度。 关机 1．点击质谱调谐图标进入调谐窗口。 2.点击Standby 让MS 进入待机状态时，这时状态灯会由绿变红，这一过程是关质谱高电压的过程。 3．停止液相色谱流速，如果还需要冲洗色谱柱，可以将液相色谱管路从质谱移开到废液瓶。4．等脱溶剂气温度（ESI）或APCI探头温度降到常温，点击气体图标关闭氮气。 5．逆时针方向拧开机械泵上的Gas Ballast 阀，运行20分钟后关闭（镇气）。 a) 对于ESI源，至少每星期做一次。 b) 对于APCI源，每天做一次。 6．再次确认机械泵的Ballast阀是否已经关闭。 7．选择Option / Vent，这时质谱开始泄真空，ZQ 前面板的状态灯“Vacuum”开始闪烁，几分钟后机械泵会停止运行，这时可以关闭质谱电源。 FINNIGEN DECA 开关机及校正流程—— 1开机前准备事项 （1）确保质谱总电源开关（白色开关）及主板电源开关（黑色开关）处于关闭状态（O）； （2）检查真空泵油液面，确保泵内油页面处于标定的上下两线之间； （3）查看离子源洁净程度，ESI源查看喷口是否有固体析出，毛细管口是否完好；APCI喷口是否有积液； （4）气体压力，打开高纯氮气钢瓶总阀，调节出口压力调至0.65MPa，打开高纯氦气钢瓶总阀,调节出口压力调至0.25Mpa; （5）检查壳气及辅助气接口连接紧固，松开液相管路与离子源的接口； （6）开启动力电源，电压稳定，正常；

护理学院生理学第11章内分泌(同步练习题)

第九章内分泌 【习题】 一、名词解释 1.激素 2.应激反应 3.垂体门脉系统 4.生长素介质 5.靶细胞 6.促垂体区 7.允许作用 8.第二信使 9.月经周期 二、填空题 1.激素按其化学本质可分为_____和_____两大类。作为药物应用时_____激素可被消化酶分解，故不易口服；_____激素不被消化酶分解，故可口服。 2.激素的传递方式有_____、_____和_____。大多数激素的传递方式是_____。 3.甲状旁腺激素是由_____分泌的激素，它主要调节血中_____和_____的浓度。 4.甲状腺激素主要以_____的形式贮存于_____中。 5.幼年时期缺乏甲状腺激素导致_____，而成年人缺乏甲状腺激素将导致_____。 6.甲状腺分泌的激素，以_____为主，而活性以_____为高。 7.血钙增高，甲状旁腺素分泌_____；血磷升高，甲状旁腺素分泌_____。 8.胰岛素由胰岛_____分泌，其主要生理作用是_____、_____和_____。 9.胰岛素缺乏，组织对糖的利用_____，血糖_____。 10.腺垂体分泌四种促激素，它们是_____、_____、_____、_____。 11.盐皮质激素由肾上腺皮质_____分泌，糖皮质激素由肾腺皮质_____分泌，性激素可由肾上腺皮质_____和_____分泌。 12.糖皮质激素分泌受腺垂体分泌的_____控制。肾上腺髓质分泌活动受_____控制。 13.糖皮质激素使血糖_____，肝外组织蛋白质_____，脂肪_____。 14.下丘脑分泌的各种调节性多肽，通过_____运送到_____，调节_____的分泌。 15.神经垂体释放的激素是_____和_____。 16.肾上腺髓质受交感神经_____支配，并受ACTH和_____的调节。 17.生长素对代谢的作用是促进蛋白质的_____，加速脂肪的_____，_____葡萄糖的利用，使血糖_____。 18.人绒毛膜促性腺激素是由_____分泌的，其主要生理作用是_____。 19.卵巢在卵胞期主要分泌_____，而黄体期还分泌_____。 0.生理剂量的甲状腺激素使蛋白质合成_____，而甲亢时蛋白质_____，呈负氮平衡。 21.卵巢的主要生理功能是产生_____，并分泌_____、_____和少量_____。 22.可以作为激素第二信使的物质是_____和_____等。 23.刺激和维持男性副性征的激素是_____；刺激女性副性征的激素是_____。 24.LH作用于睾丸_____细胞，引起_____分泌。 25.月经周期中，由于血中_____和_____浓度下降，导致子宫内膜脱落、出血，形成月经。

液相色谱串联质谱联用专业技术实验指导(许煊炜)

液相色谱串联质谱联用仪检测技术 实验指导 （2014、2015级） 课程内容（一个实验8学时）： （1）AB Sciex Qtrap 4500 三重四级杆/离子阱液相色谱串联质谱联用仪的结构原理、操作及定性定量应用。 （2）利用液相色谱串联质谱联用仪快速测定水果中7种农药的残留量。 吉林农业大学农业部参茸质检中心 2017.03

实验一AB Sciex Qtrap 4500 三重四级杆/离子阱液相色谱串联质谱联用仪的结构原理、操作及定性定量应用 一.实验目的和意义 通过学习液质联用仪的构成和使用方法，及其在定性、定量分析中的应用，培养学生使用液质联用仪进行仪器分析的能力，并培养学生严谨的科学态度、细致的工作作风、实事求是的数据报告和良好的实验习惯（准备充分、操作规范，记录简明，台面整洁、实验有序，良好的环保和公德意识）。培养培养学生的动手能力、理论联系实际的能力、统筹思维能力、创新能力、独立分析解决实际问题的能力、查阅手册资料并运用其数据资料的能力以及归纳总结的能力等。 （一）检测仪器 1、仪器名称高效液相色谱串联质谱联用仪（简称LC-MS-MS）。型号：4500 QTRAP（美国Applied Biosystems公司）。 2、仪器组成液相色谱部分：岛津LC-30A，配有在线脱气机、超高压二元泵、自动进样器；串联质谱部分：QTRAP4500，配有ESI离子源、串联四级杆/线性离子阱。 3、主要性能指标离子化方式：ESI电离质量范围：（5 ~ 1700）amu 分辨率：> 6900 质量稳定性：0.1 amu/12h 灵敏度：1pg reserpine, ESI+, MRM扫描（m/z : 609/195），信噪比S/N > 120:1 扫描速度：4000 amu/sec 质量准确度：< 0.01%（全质量数范围） 4、方法原理高效液相色谱二元泵将流动相泵人系统并混合，自动进样器将待测样品注入流动相中，随流动相进入色谱柱，由于样品不同组分在色谱柱中保留时间不同，各组分被分开，依次进入离子源。在离子源中，各组分以ESI或APCI方式电离，被加速后进入质量分析器。4500QTRAP 的质量分析器主要由Q1、Q2、Q3三组四级杆串联组成。Q1可将分子离子按质荷比（m/z）大小分开；Q2是碰撞室，可将母离子进一步破碎为碎片离子；Q3具有四级杆和线性离子阱两种功能，作为四级杆时可将分子离子或碎片离子按质荷比大小分开，作为离子阱还可富集离子从而提高检测灵敏度。各组分的不同离子在质量分析器中被破碎、分离，并按质荷比大小依次抵达监测器，经记录即得到按不同质荷比排列的离子质谱图。4500QTRAP通过串联四级杆/线性离子阱两种不同质谱技术的结合，可以在单次分析中对复杂样本中的单个成分同时进行定性和定量，也可以对多个化合物进行定量分析。整台仪器的控制、数据采集、数据处理、结果输出均由PC计算机Windows操作系统支持下的Analyst软件控制完成。

肽类激素与类固醇的区别

肽类激素和类固醇的区别 简单说来，健美所使用的药物无外乎两大类，即类固醇和肽类激素，他们对于健美来说的共同的作用就是提高身体的合成代谢机能，加速身体训练后的恢复。而在对健美以外的运动来说，药物的使用虽然类别也是这两大类，但目的是不同的，例如针对举重运动员来说，通常是要更好的力量的同时不增长体重，即药物要起到提高力量提高训练后恢复的作用的同时不具有合成代谢作用，因为举重是按照体重来划分级别的，体重越小，举起的重量越大那么就越有优势；而对于田径运动员来说，爆发力和耐力就意味着一切，例如短跑和一些田赛项目爆发力决定了成绩，而对于中长跑和长跑运动员来说耐力是至关重要的。 我们这期健美使命的药物杂谈还是围绕在健美药物的使用方面展开，针对大家通常来说会对药物的一些误区而展开，普及一些基础的药物知识。 为了说明白肽类激素和类固醇的区别，我们先来简单说明一下什么是肽类激素和类固醇。肽类激素全部是由氨基酸组成的，例如我们常见的生长激素HGH，它就是由191个氨基酸组成的，而胰岛素也是一种常见的肽类激素广泛用于糖尿病人中，胰岛素是由51个氨基酸按照特定结构组成的。很简单，不同数量的氨基酸按照不同方式组合在一起，他们的功能就不同，而组成后的激素的实质就是一种蛋白质多肽分子。肽类激素不能口服的原因就是如此，因为口服这种蛋白质多肽分子，身体会把它认为成一种蛋白质营养从而消化和吸收，而不会让它的功能得到体现。肽类激素最常见的使用方式就是皮下注射，皮下注射听起来有些可怕，简单的说来就是在把肽类激素注射到身体的脂肪层中，而不是注射到肌肉中，让肽类激素在脂肪层中缓慢的扩散给人体。目前在体育领域以及健美领域最常见的肽类激素就要属生长激素HGH了，生长激素是由人体的下丘脑分泌的一种让身体具有生长功能的激素，我们人类在青少年时期和青春期之间会分泌大量的生长激素用与长身体，而在成年后生长激素的分泌量就会减少，在36岁到38岁之间，人体下丘脑的松果体就会退化然后生长激素就会停止分泌。健美中使用生长激素的功能其实并不是为了肌肉的生长，更多的健美运动员以及药物使用者使用生长激素的目的是——减脂。是的，没错，生长激素具有很好的脂解作用，当它进入到人体中发挥作用的时候，可以让人体中更多的脂肪氧化分解代谢掉，而同时保护肌肉中的糖原，很简单的理解，就是让本来能量机制是来源于储备的糖原转化为来源于身体的脂肪，让更多的热量来自脂肪。生长激素在健美之外的另一个很大的用途就是抗衰老，它具有非常显著的抗衰老功能，能够让皮肤具有光泽让人看起来身心都显得年轻。生长激素的合成代谢功能（通俗来说就是长肌肉的功能）其实并不是十分的强大，只有在很大剂量的时候才会有所体现。 但是，前面我们说到是生长激素的好的作用，但我们不要忘记了，既然是激素对人体就会产生不良的影响，生长激素也是一样，对于很多青年健美运动员来说，使用生长激素的同时会抑制自身生长激素的分泌，而大剂量的使用生长激素更会让身体全方位的生长，包括软组织的生长，所以就有了传说中的生长素副作用——肢端肥大。此外有一部分对生长素比较敏感，当大剂量使用的时候还会引起内脏特别是肠道的生长，外在的表现就是肚子向外鼓，甚至顶开了腹肌，这不由的让我们想起来已经退役的伟大健美运动员罗尼?库尔曼。他的体型在块头大的健美运动员中是很美的，他也为健美运动做了贡献，但是我们不得不承认他的腰腹在他成为职业健美运动员之后确实鼓了不少，如果看罗尼早期的照片你会发现他并不存在这样

合成代谢类固醇种类汇总简介

合成代谢类固醇种类汇总简介 合成代谢类固醇类似于合成雄性性激素。它们是一类在结构及活性上与人体雄性激素睾酮相似的化学合成衍生物。合成代谢的作用可以提高骨骼肌的增长，而雄性性激素的作用可以使男性性特征更加明显。

所有的合成雄性激素类固醇都有与睾酮相似的化学结构。这类药物除具有增加肌肉块头和力量，并在主动或被动减体重时保持肌肉体积的作用外，还具有雄激素的作用。此外，还可加快训练后的恢复，有助于增加训练强度和时间。但是，如果不同时进行系统的力量训练，服用这类药物就没有增长肌肉的作用。 比较常见的口服类类固醇 Anadrol 康复龙-Oxymetholone羟甲烯龙制剂 Oxandrin 奥沙得林-Oxandrolone 氧雄龙制剂 Dianabol 大力补-Methandrostenolone 美雄酮制剂 Winstrol 康力龙-Stanozolol 司坦睉醇制剂 比较常见的注射类类固醇 Deca-durabolin 代卡-多乐宝灵-Nandrolone decanoate 葵酸诺龙制剂 Durabolin 多瑞宝林-Nandrolone phenpropionate 苯丙酸诺龙制剂Depo-testosterone 能普-得特龙-Testosterone cypionate 环戊丙酸睾酮制剂 什么是类固醇类补剂 在美国，人们在药店和健康食品店可以合法地购买到类似于脱氢表雄酮（DHEA）和雄甾烯二酮（Andro）。尽管他们不是食物，但经常被人用作营养补剂，因为有很多人认为他们有类固醇的功效。

厌倦了小男人，想成为女性心里渴望的肌肉猛男吗？想了解更多相关知识，安全有节制的剂量下使用类固醇，一周期轻松增加10公斤纯肌肉，详情请咨询类固醇行家 QQ： 2375799209 Anadrol 一种最强烈的口服类固醇，用于增长肌肉纬度 Anadrol是一种50mg一片的片剂，是市场上最强烈的口服药。他有很高的睾酮水准和很高的合成代谢的效果。力量和体重能很有效的增长。但是它对肝脏的毒性非常高，可能引起的雌性回应，处水，脱发，血压高的副作用，但它仍然在健美届被推崇为最有效的口服药之一，建议作过几个cycle以后的运动员可以尝试使用，50—150mg一天的用量。 Anavar 很温和的口服类固醇用于力量增长和使肌肉结实,也适合女性使 用.Anavar不用来长肌肉纬度，用于力量增长和使肌肉结实，睾丸水准很低并且不处水，是非常安全的口服药。它被广泛用于力量举，和女性运动员使用，虽然它是17－aa类但是非常安全，没有雌性反映，有效地增长力量。每天40—— 80mg的量，通常被健美运动员用于赛前背战，和primobolan-depot, winstrol ，deca-durabolin搭配。Arimidex 最有效地抗雌药，用于抵消可能有雌性反映的现象，防止处水，是抗

医学分子生物学习题

第八章细胞信号转导 自测题 （一）选择题 A型题 1.通过胞内受体发挥作用的信息物质为 A．乙酰胆碱 B．γ-氨基丁酸 C．胰岛素 D．甲状腺素 E．表皮生长因子 2.绝大多数膜受体的化学本质为 A．糖脂 B．磷脂 C．脂蛋白 D．糖蛋白 E．类固醇

3.细胞内传递信息的第二信使是 A．受体 B．载体 C．无机物 D．有机物 E．小分子物质 4.下列哪项不是受体与配体结合的特点 A．高度专一性 B．高度亲和力 C．可饱和性 D．不可逆性 E．非共价键结合 5.通过膜受体起调节作用的激素是A．性激素 B．糖皮质激素 C．甲状腺素

D．肾上腺素 E．活性维生素D 3 6．下列哪项是旁分泌信息物质的特点A．维持时间长 B．作用距离短 C．效率低 D．不需要第二信使 E．以上均不是 7．胞内受体的化学本质为 A．DNA结合蛋白 B．G蛋白 C．糖蛋白 D．脂蛋白 E．糖脂 8．下列哪种受体是催化型受体 A．胰岛素受体

B．生长激素受体 C．干扰素受体 D．甲状腺素受体 受体 E．活性维生素D 3 9．IP 与相应受体结合后，可使胞浆内哪种离子浓度升高 3 A．K+ B．Na+ - C．HCO 3 D．Ca2+ E．Mg2+ 10．在细胞内传递激素信息的小分子物质称为 A．递质 B．载体 C．第一信使 D．第二信使 E．第三信使

11．影响离子通道开放的配体主要是A．神经递质 B．类固醇激素 C．生长因子 D．无机离子 E．甲状腺素 12．cGMP能激活 A．磷脂酶C B．蛋白激酶A C．蛋白激酶G D．酪氨酸蛋白激酶 E．蛋白激酶C 13．cAMP能别构激活 A．磷脂酶A B．蛋白激酶A C．蛋白激酶C

高效液相色谱-串联质谱法

附件 面膜类化妆品中氟轻松检测方法 （高效液相色谱-串联质谱法） 1范围 本方法规定了面膜类化妆品中氟轻松的高效液相色谱-串联质谱测定方法。 本方法适用于面膜类化妆品中氟轻松的定性定量测定。 2方法提要 面膜类化妆品用饱和氯化钠溶液分散，用乙腈从分散液中提取氟轻松，用亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀提取液中大分子基质，经固相萃取小柱净化，用高效液相色谱仪分离，质谱检测器检测，采用保留时间和特征离子对丰度比定性，以待测物质相对应离子峰面积定量，以标准曲线法计算含量。 本方法的检出限为0.03 μg/g，定量限为0.05 μg/g。 3试剂和材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为纯化水。 3.1甲醇：色谱纯。 3.2乙腈：色谱纯。 3.3冰醋酸：优级纯。 3.4饱和氯化钠溶液。 3.5 10%亚铁氰化钾溶液：称取115 g亚铁氰化钾K4Fe(CN)6·3H2O固体，

用水溶解定容至1000 mL。 3.6 20%乙酸锌溶液：称取239 g乙酸锌C4H6O4Zn·2H2O固体，用水溶解定容至1000 mL。 3.7Oasis HLB固相萃取小柱或相当者：60 mg，3 mL。 3.8 标准物质：氟轻松，纯度不小于99.0%；标准物质的分子式、相对分子质量、CAS登录号、化学结构图参见附录A。 3.9 标准储备液（ρ=1g/L）：准确称取氟轻松标准物质（3.8）10mg，精确到0.01 mg，置于10 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，于－18℃下冷冻保存。 3.10 标准工作溶液：临用时，取标准储备液（3.9）适量，用乙腈稀释成0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.40μg/mL、0.80μg/mL系列浓度的标准工作溶液。 4仪器和设备 4.1 高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪（ESI源）。 4.2 分析天平：感量0.0001g；0.00001g。 4.3 涡旋混合器。 4.4离心机：转速5000r/min，容量10mL；50mL。 4.5 固相萃取装置。 5分析步骤 5.1样品处理 5.1.1提取 称取样品（带有载体的面膜，去除载体后取样）0.2 g，精确至0.0001 g，置15 mL具塞离心管中，加入3 mL饱和氯化钠溶液（3.4），于涡旋混合器上混合使样品分散，准确加入2 mL乙腈，充分涡旋提取2 min，以

类固醇

目录 1．类固醇 2．甲硝锉 3．布洛芬 4．X光检查副作用 1．同化类固醇类药物 同化类固醇类药物是一种提取自睾丸酮的物质。它可以促进肌肉生长、提高无脂肪体重。尽管同化类固醇被证明有许多医用价值但他们却被一些运动员用来提高自己

的运动成绩。这种非医学的用药是非法的，而且会带来许多健康方面的风险。 同化类固醇类药物可以口服也可以注射。类固醇滥用者用药量一般是常规用药量的数百倍。他们经常用一种称之为“堆集”（即多种类固醇同时使用）的用药方法以提高其效用。另一种用药方法称之为“循环用药”，用药者服用类固醇6至12周，停用数周，然后在服用。 通过美国国家药物滥用管理局的调查，在1994年有1084000美国人，或0。5%的成年人使用过类固醇。在 18至34岁人群中，大约1%使用过类固醇；在35岁以 上人群该数值则降到0.2%。男性用药人数比女性偏多，0。9%的男性及0。2%的女性承认他们服用过类固醇。 国家药物滥用管理局从1989年开始对中学生使用类固 醇的监测显示，从1989年到1996使用类固醇的人数略有下降。 在非医用人群中拥有或传播同化类固醇类药物是非法的，巨大的市场需求促进了黑市的形成，每年约有4亿美元的同化类固醇类药物在黑市上被销售。大部分同化类固醇类药物是在美国以外生产后，通过走私、邮寄等进入美国黑市的。 同化类固醇类药物滥用的主要副作用是“发抖”，严重的痤疮，记忆缺失，关节痛，高血压，高密度脂蛋白降低（血液胆固醇的最佳状态），黄疸，肝脏肿瘤。另外，

注射药物的人群经常共用针头，这使艾滋病和肝炎更易传播。 对于男性，会产生睾丸萎缩，精子计数降低，性无能，不孕，谢顶，乳房发育、排尿困难或尿痛，前列腺肥大。对于女性，会产生毛发浓重，月经周期不规则或停经，阴蒂肿大，音调低沉，乳房缩小； 对于青春期少年，会导致性早熟并导致骨骼系统早熟、阻碍其正常生长发育。 美国国家药物滥用管理局支持的研究还显示，类固醇的滥用会导致情绪的波动，包括无法控制的愤怒和进攻性行为，会促使暴力事件的发生。用药者一旦停止用药，常会发生临床抑郁-- 一种撤药综合征，会导致药物依赖。用药者还会出现偏执狂，嫉妒，极度兴奋，错觉，夸大妄想。 美国国家药物滥用管理局1991年的调查显示，运动员、教练、医生均明确报告通过长期使用类固醇可以明显提高肌肉密度、力量。由于认识到这些药物的效用，国际奥林匹克委员会把20种同化类固醇类药物列为违禁药品。但是，没有研究显示该类药物对柔韧性、技巧、心血管能力等有明显影响。 类固醇激素 科技名词定义 中文名称：

液相色谱串联质谱的小知识知识讲解

液相色谱串联质谱的 小知识

一、开机 water 2695/micromass zq4000: 开机步骤 1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源，此时质谱主机内置的CPU会通过网线与计算机主机建立通讯联系，这个时间大约需要1至2分钟。 2. 等液相色谱通过自检后，进入Idle状态，依照液相色谱操作程序，依次进行操作。（具体根据液相色谱不同型号来执行，下面以2695为例）。 a.打开脱气机 (Degasser On)。 b.湿灌注(Wet Prime)。 c.Purge Injector。 d.平衡色谱柱。 3.双击桌面上的 MassLynx 4.0图标进入质谱软件。 4.检查机械泵的油的状态（每星期），如果发现浑浊、缺油等状况，或者已经累积运行超过3000小时，请及时更换机械泵油。 5.点击质谱调谐图标（MS Tune）进入质谱调谐窗口。 6.选择菜单“Options –Pump”，这时机械泵将开始工作，同时分子涡轮泵会开始抽真空。几分钟后，ZQ就会达到真空要求，ZQ前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。 7.点击真空状态图标，检查真空规的状态，以确认真空达到要求。 8. 确认氮气气源输出已经打开，气体输出压力为90 psi。 9.设置源温度（Source Temp）到目标温度。 关机 1．点击质谱调谐图标进入调谐窗口。 2.点击Standby 让MS 进入待机状态时，这时状态灯会由绿变红，这一过程是关质谱高电压的过程。 3．停止液相色谱流速，如果还需要冲洗色谱柱，可以将液相色谱管路从质谱移开到废液瓶。 4．等脱溶剂气温度（ESI）或APCI探头温度降到常温，点击气体图标关闭氮气。 5．逆时针方向拧开机械泵上的Gas Ballast 阀，运行20分钟后关闭（镇气）。 a) 对于ESI源，至少每星期做一次。 b) 对于APCI源，每天做一次。 6．再次确认机械泵的Ballast阀是否已经关闭。 7．选择Option / Vent，这时质谱开始泄真空，ZQ 前面板的状态灯“Vacuum”开始闪烁，几分钟后机械泵会停止运行，这时可以关闭质谱电源。 FINNIGEN DECA 开关机及校正流程—— 1开机前准备事项 （1）确保质谱总电源开关（白色开关）及主板电源开关（黑色开关）处于关闭状态（O）； （2）检查真空泵油液面，确保泵内油页面处于标定的上下两线之间； （3）查看离子源洁净程度，ESI源查看喷口是否有固体析出，毛细管口是否完好；APCI喷口是否有积液； （4）气体压力，打开高纯氮气钢瓶总阀，调节出口压力调至0.65MPa，打开高纯氦气钢瓶总阀,调节出口压力调至0.25Mpa;

液相色谱-串联质谱(LCMSMS)方法 - 岛津中国

液相色谱-串联质谱（LC/MS/MS）法测定癫痫患者血清中 卡马西平的浓度 谢 华ì，王 荣，贾正平?， 徐丽婷 （兰州军区兰州总医院临床药理基地，兰州 730050） 摘要目的：本文建立了液相色谱-串联质谱（LC/MS/MS）法测定患者血清中的卡马西平浓度的方法。方法：色谱柱：Zorbax Extend-C18柱（150×4.6 mm I.D，5μm）；流动相：甲醇-0.01mmol·L-1乙酸 胺溶液（80:20，v/v）；流速：0.3 mL·min-1。结果：卡马西平浓度在2～40 ng·mL-1范围内，峰面积与浓度线性关系良好，平均回收率为101.1%，日内精密度、日间精密度的RSD分别为3.39%和4.11%。并测定了10名患者血清中卡马西平的浓度。结论：本方法具有良好的灵敏度、准确度、精确度及专属性，结果准确，重现性好，易于操作，可用于患者血清中卡马西平浓度的测定。 关键词卡马西平；LC/MS/MS；血清 Content Determination of Carbamazepine in epileptic patient serum by Liquid Chromatographic Tandem Mass Spectrometry XIE Hua, JIA Zheng-ping*, WANG Rong, XU Li-ting (Base of Clinic Pharmacology, Lanzhou General Hospital, Lanzhou Command, Lanzhou 730050, China) ABSTRACT OBJECTIVE:An analytical method based on Liquid Chromatography with tandem Mass Spectrometry (LC-MS/MS) detection was developed for the content determination of carbamazepine in epileptic patient serum. METHODS: The method included that the column was Zorbax Extend-C18(150×4.6 mm I.D.，5μm ); mobile phase was methanol-0.01mmol·L-1amine acetic acid (80:20，v/v) at a flow rate of 0.3 mL·min-1. RESULTS: The method was proved to be linear in the range of 2~40ng·mL-1 with a regression confficient of 0.9976. The average recovery rate was 101.1%(n=5). The RSD of average contents of intra-day and inter-day was 3.39% and 4.11% respectively. The carbamazepine concentrations of ten epileptic patient’s serums were detected. CONCLUSION: This method is accurate, precise, sensitive and specific to be used in the content determination of carbamazepine serum. KEY WORDS Carbamazepine; LC/MS/MS; Serum ?基金项目：国家科技部重大项目（2008ZXJ09014-010） ì主管药师。研究方向：临床治疗药物监测。电话：(0931)8994675; E-mial: xiehua-72@https://www.wendangku.net/doc/f610246158.html, ?通讯作者：教授，主任药师，博士。研究方向：临床药学。电话：(0931)8994652。

浅谈液相色谱串联质谱

浅谈液相色谱质谱联用技术 刘谦 保定出入境检验检疫局，保定 071000 摘要：液相色谱-质谱联用技术以液相色谱作为分离系统，质谱作为检测系统，经纯化后的样品在液相色谱和质谱部分经过分离和离子化，经由检测器得到质谱图。液质联用体现了色谱和质谱优势的互补，结合了色谱对复杂样品的高分离能力和质谱的高选择性，高灵敏度及能够提供相对分子量和结构信息的优点，在药物分析，食品检测等领域有广泛的应用。 关键词：液相色谱质谱食品检测 高效液相色谱是一种准确度高，分离范围广的快速分离方法，它对化合物的结构破坏性小，适合有机分子和生物分子的分离。质谱具有其他分析方法无可比拟的灵敏度，对于未知化合物的结构分析定性十分准确，对相应的标准样品要求也比较低。质谱可以和气相联用如GC/MS,也可以和高效液相色谱联用如HPLC/MS。由于色谱和质谱灵敏度相当，再加上分离效果很好的色谱可以作为质谱的进样系统，质谱作为色谱的鉴定仪速度快，分离好，应用广。色谱-质谱联用成为最好的用于分析微量有机混合物的仪器。 在1970年后，质谱-质谱法（mass separetion-mass spectra Characterization）迅猛发展起来。这种方法让母离子进一步裂解，从而获得裂解过程和分子结构的信息，通常我们称为串联质谱，二维质谱法，序贯质谱等。 我们知道，质谱的分析建立在物质离子化的基础上，按照荷质比分离离子，通过测量离子谱峰的强度实现分析目的。通过色谱纯化后的样品气化离子化形成的离子在电场和磁场的综合作用下，按照质量数和电荷数的比值大小依次排列成谱被记录下来。常见的质谱图的纵坐标是离子信号强度，横坐标就是离子核质比。在液相色谱质谱中通常所用的离子源有ESI 和APCI，我们常用的是ESI。ESI 是比APCI软电离程度较小的电离方式，应用范围较APCI 的大，只有少部分有机分子ESI 做不出，可以用APCI 辅助解决问题。一般用ESI 和 APCI 搭配使用比 ESI 和APCI 的应用范围更广一些。 下面说一说ESI和API源的异同点。 ESI 和APCI通常产生(M+H)+或(M-H)-等准分子离子，源参数调整简单，容易使用，仪器灵敏度高。对APCI源来说，不足就是给出的结构信息有限，样品易发生热裂解，低质量时基线噪声大。ESI通常只产生分子离子峰，可以直接测定混合物，并可以测定热不稳定的极性

细胞生物学复习资料复习过程

细胞生物学复习资料 第一章绪论 1.什么叫细胞生物学 细胞生物学是研究细胞基本生命活动规律的科学，它是在不同层次（显微、亚显微与分子水平）上以研究细胞结构与功能、细胞增殖、分化、衰老与凋亡、细胞信号传递、真核细胞基因表达与调控、细胞起源与进化等为主要内容。核心问题是将遗传与发育在细胞水平上结合起来。 第二章细胞基本知识概要 一、名词解释 1.古核细胞：也称古细菌，是一类很特殊的细菌，多生活在极端的生态环境中。具有原核生物的某些特征，如无核膜及内膜系统；也有真核生物的特征。 2.内含子：是基因内不编码蛋白质的核苷酸序列，不出现在成熟的RNA分子中，在转录后通过加工被切除。大多数真核生物的基因都有内含子。在古细菌中也有内含子。 3.外显子：指真核细胞的基因在表达过程中能编码蛋白质的核苷酸序列。 二、简答 1.真核细胞的三大基本结构体系 （1）以脂质及蛋白质成分为基础的生物膜结构系统； （2）以核酸（DNA或RNA）与蛋白质为主要成分的遗传信息表达系统 （3）由特异蛋白分子装配构成的细胞骨架系统。 2.细胞的基本共性 （1）所有的细胞都有相似的化学组成 （2）所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质构成的生物膜，即细胞膜。 （3）所有的细胞都含有两种核酸：即DNA与RNA作为遗传信息复制与转录的载体。 （4）作为蛋白质合成的机器─核糖体，毫无例外地存在于一切细胞内。 （5）所有细胞的增殖都以一分为二的方式进行分裂。 3.病毒与细胞在起源与进化中的关系并说出证明 病毒是非细胞形态的生命体，它的主要生命活动必须要在细胞内实现。病毒与细胞在起源上的关系，目前存在3种主要观点： 生物大分子→病毒→细胞 病毒 生物大分子→ 细胞 生物大分子→细胞→病毒（最有说服力） 认为病毒是细胞的演化产物的观点，其主要依据和论点如下: （1）由于病毒的彻底寄生性，必须在细胞内复制和增殖，因此有细胞才能有病毒 （2）有些病毒（eg腺病毒）的核酸和哺乳动物细胞DNA某些片段的碱基序列十分相似。病毒癌基因起源于细胞癌基因