DuRed-核酸电泳用染料,水溶液
DuRed 核酸染料（10,000×水溶液）
DuRed核酸染料特点
● 无毒性：DuRed 独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内，艾姆斯氏试验结果也表明，该染料的诱变性远远小于EB。
● 灵敏度高：适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。
● 稳定性高：适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶；室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定，耐光性强。
● 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。
● 操作简单：与 EB 一样，在预制胶和电泳过程中染料不降解；而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗，即可直接用紫外凝胶透射仪观察。
● 适用范围广：可选择电泳前染色（胶染法）或电泳后染色（泡染法）；适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳；可用于 dsDNA、ssDNA或 RNA染色。
●与EB有相同的光谱特性，无需改变滤光片及观察装置：标准的EB 滤光片或SYBR 滤光片都适用，使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可，在300nm 紫外光附近可得到最佳激发。但是DuRed不能被488 nm氩离子激光器或相似波长的可见光完全激发，因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。对于此类装置，我们推荐您使用DuGreen（Cat# 011或012），它和SYBR Green I的光谱相似，灵敏度相当，但更加稳定。
DuRed使用方法简介
1．胶染法（用法同EB）（推荐方法）
（1）制胶时加入DuRed 核酸染料（例如：每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL DuRed 10,000×储液，以此比例类推）。
（2）按照常规方法进行电泳。
注意事项：
◆此方法染色染料用量相对较少。500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。
◆由于DuRed具有良好的热稳定性，可以在热的琼脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷
却。摇晃，振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将DuRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中，然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。DuRed兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
◆如果总是看到条带弥散或分离不理想，建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果
染色后问题依旧存在，则说明问题与染料无关，请尝试：降低琼脂糖浓度；选用更长的凝胶；
延长凝胶时间以保证边缘清晰；改进上样技巧或选择泡染法染色。
◆此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶，对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
2．泡染法
（1）按照常规方法进行电泳。
（2）用H2O将DuRed 10,000×储液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中，制成3×染色液。（例如将15μL DuRed 10,000×储液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中）。
（3）将凝胶小心地放入合适的容器中，如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶。
室温振荡染色30min左右，最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5～10％丙烯酰胺的凝胶，染色时间通常介于30min到1h，并随丙烯酰胺含量增加而延长。
注意事项：
◆用泡染法染色时，染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
◆3× DuRed染色液可以大量制备，在室温下避光保存直至用完。
几种核酸染料比较
名称灵
敏
度
稳
定
性
对DNA
迁移的
影响
安全性适用性
DuRed 高高条带不
弯曲，
DNA片
段不迁
移
①是一种独特的油性大分子，不易
挥发升华，不易吸入人体，不能
穿透细胞膜进入活体细胞内，安
全无毒。
②艾姆斯氏测试结果表明，DuRed
在凝胶染色浓度下完全没有诱变
性，因此完全没有致癌毒性。
通用大小片段电泳染
色，与EB有相同的光
谱特性，无需改变滤光
片及观察装置。标准的
EB滤光片或SYBR滤光
片都适用，使用普通紫
外凝胶透射仪观察即
可，在300nm紫外光附
近可得到最佳激发。
DuGreen 高高条带不
弯曲，
DNA片
段不迁
移
①是一种独特的油性大分子，不易挥
发升华，不易吸入人体，不能穿透
细胞膜进入活体细胞内，安全无
毒。
②艾姆斯氏测试结果表明，DuGreen
在凝胶染色浓度下完全没有诱变
性，因此完全没有致癌毒性。
通用大小片段电泳染
色，适用于使用254nm
激发的紫外凝胶透射仪
或可见光凝胶透射仪观
察。
SYBR Green I 高低
染料浓
度较高
时，条
带容易
弯曲，
DNA片
段迁移
的现象
明显
属花箐染料，能透过细胞膜进入活体
细胞内，但容易生物降解，不会在体
内残留，安全无毒。
100bp以上电泳染色，
适用于使用254nm激发
的紫外凝胶透射仪或可
见光凝胶透射仪观察。
EB 低高条带不
弯曲，
DNA片
段不迁
移
①分子量小，易挥发升华，易吸入人
体，不易生物降解，在体内长期残
留。
②艾姆斯氏测试结果表明，EB容易
引起有机体突变，是一种强诱变
剂，具有高致癌性。
100bp以上电泳染色，
背景荧光信号高；使用
普通紫外凝胶透射仪观
察。
Goldview 低高条带不
弯曲，
DNA片
段不迁
移
①主要成分为吖啶橙，是一种煤焦油
提取物，具有高毒，致癌，高诱变
性。
②易挥发升华，易吸入人体，能穿透
细胞膜进入活体细胞内，不易生物
降解，在体内长期残留。
100bp以上电泳染色，
背景荧光信号高；适用
于使用254nm激发的紫
外凝胶透射仪或可见光
凝胶透射仪观察。
特别提醒：
◆如果您使用的是紫外成像仪，请选择DuRed ；如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测，
请选择 DuGreen。
◆在极少数情况下，质粒经某些酶切后的DNA样品会出现拖尾和分辨率降低，此时建议同时尝
试两种染色方法以决定哪种方法更加合适。
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中国古代香的知识
中国古代香的知识 香在古代人们的生活中有着广泛的使用。从熏燃、悬佩到涂傅、饮用、乃至到奇思妙想地用来计时，都反映了古人对"香"这种海外来物的认识以及古人精致的生活情趣。本文对古代人们的用香风俗作了细致的考察，希望对我们了解古代人们的社会生活有所助益。 说到香，我们首先想到的多是宗庙祠堂和寺院道观里的香烟缭绕，于是香在我们眼里就成了一种祭祀和宗教的用物，其实香在古代人们的生活中也有着广泛的用途。 真正的香料并不产于中国，而远在西域诸国，正如范晔在为《和香方》所写的短序中说的："甘松、苏合、安息、郁金、多、和罗之属，并被珍于外国，无取于中土" （《宋书·范晔传附孔熙先传》），所以宋代以前，除了朝贡以外，香料来源比较有限，香料种类也较少，除了祭祀和宗教用香外，香的使用并不广泛，是作为奢侈品而存在的。汉代时即便贵为皇后的明德马皇后都说 "吾为天下母，而身服大练，食不求甘，左右但着帛布，无香薰之饰者，欲身率下也。" （《后汉书·皇后纪上·明德马皇后纪》） 魏晋南北朝以降，香多为宫中贵族之家焚熏涂傅，平民百姓是无福享用的。据史料记载东晋巨富石崇家的厕所"常有十余婢侍列，皆有容色，置甲煎粉，沉香汁，有如厕者，皆易新衣而出，客多羞脱衣。"（《晋书·王敦传》）一次平素崇尚节俭朴素的尚书郎刘寔去石崇家"如厕，见有绛纹帐，茵褥甚丽，两婢持香囊，寔便退，笑谓崇曰’误入卿内耳’崇曰’是厕耳’。寔曰：’贫士不能若此’" （《晋书·刘寔传》）像刘寔这样显贵人家尚用不起，更不用说布衣之家了。 宋明以来，在朝贡的基础上，海外贸易极大地扩大，各种香料通过海上之舟大量运入中国，民间各种修合之香也颇为盛行，香在人们生活中起了越来越重要的作用，香的使用也更为广泛和多样化，极大地丰富着人们的生活。不过纵观中国古代生活中的用香，大体有这么几个方面： 一.熏燃之香 中国古代的达官贵人很早就注意到了香的妙用，通过熏燃香料来驱逐异味。石崇家的厕所因为焚香曾经声名显著，成为一时笑谈。在石崇以前熏香多出现于宫中。那时香大多产于西域诸国，西域离中原路途遥远，同时中原的海外贸易还没有发展起来，宫中仅有的香料都是通过西域诸国的朝贡得来的，熏香也最早成为宫中的习俗，大多用来熏炙衣被。《后汉书·钟离意传》记载，"蔡质《汉官仪》曰’尚书郎入直台中，官供新青缣白绫被，或锦被，昼夜更宿，帷帐画，通中枕，卧旃蓐，冬夏随时改易。太官供食，五日一美食，下天子一等。尚书郎伯使一人，女侍史二人，皆选端正者。伯使从至止车门还，女侍史絜被服，执香炉烧熏，从入台中，给使护衣服’也。"可见当时用香熏烤衣被是宫中的定制，并且有专门用来用香熏烤衣被的曝衣楼，有古宫词写到"西风太液月如钩，不住添香摺翠裘。烧尽两行红蜡烛，一宵人在曝衣楼"。当时熏香的器具很多，主要有熏炉和熏笼。在河北满城中靖王刘胜墓中，发掘的"铜薰炉"和"提笼"就是用来薰衣的器具；湖南长沙的马王堆一号墓出土的文物中，也有为了薰香衣而特制的薰笼。汉代更有博山香炉响誉于世。 唐代熏笼更为盛行，覆盖于火炉上供熏香、烘物或取暖。《东宫旧事》记载"太子纳妃，有漆画熏笼二，大被熏笼三，衣熏笼三"。 反映此时宫中生活的宫体词也有很多都提到这种用来熏香的熏笼，如 "熏笼玉枕无颜色，卧
琼脂糖凝胶电泳的制备及核酸检测
实验二琼脂糖凝胶电泳的制备及核酸检测 一. 实验目的 1、掌握琼脂糖凝胶电泳的原理; 2、学习琼脂糖凝胶电泳的操作。 二、实验原理 溴化乙锭（EB）为扁平状分子，在紫外照射下发射荧光。EB可与DNA分子形成EB-DNA复合物，其发射的荧光强度较游离状态EB发射的荧光强度大10倍以上，且荧光强度与DNA的含量成正比。用肉眼观察，可检测到5 ng以上的DNA。 1．影响DNA在琼脂糖凝胶中迁移速率的因素： 1)DNA分子大小 迁移速率U与logN成反比（N为碱基对数目）。分子大小相等，电荷基本相等（DNA结构重复性）。分子越大，迁移越慢。等量的空间结构紧密的电泳快（超螺旋>线性DNA） 2) 琼脂糖浓度：不同的凝胶浓度，分辨不同范围的DNA Agarose：0.5%：1-30 kb； 0.7%： 0.8-12 kb 1.2%：0.4-7 kb； 1.5%： 0.2-3 kb. 3)DNA构象：一般迁移速率超螺旋环状>线状DNA>单链开环 4)所加电压：低电压时，线状DNA片段的迁移速率与所加电压成正比。使分辨效果好，凝胶上所加电压不应超过5V/cm
5)碱基组成与温度：一般影响不大4 -30 ℃ 6)嵌入染料的存在：降低线性DNA迁移率，(不提倡加在电泳液中) 7)电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的迁移率，无离子存在时，核酸基本不泳动，离子强度过大产热厉害，熔化凝胶并导致DNA变性，一般采用1×TAE，1×TBE，1×TPE（均含EDTA pH8.0）。 2．溴化乙锭（EB）为致癌剂，操作时应戴手套，尽量减少台面污染。 3．电泳指示剂：核酸电泳常用的指示剂有两种，溴酚蓝呈蓝紫色；二甲苯晴呈蓝色，它携带的电荷量比溴酚蓝少，在凝胶中的的迁移率比溴酚蓝慢。 4、电泳缓冲液：TAE TBE TAE 与 TBE不同之处在于TBE用硼酸代替了TAE中的冰醋酸。 三、仪器和试剂 仪器 微量移液器，电泳仪，电泳槽，微波炉 试剂 琼脂糖：1.0%； 电泳缓冲液（50 × TAE 电泳缓冲液取Tris24.2g ，冰醋酸5.7ml ， 0.25mol/L EDTA (pH8.0)20ml ，加蒸馏水至100ml ） EB：5 μl / 100 ml TBE 电泳材料：标准分子量核酸（DL2000） 四、操作步骤 （1）制胶（以20 mL为例） a. 称取0.2 g 琼脂糖，加入20 ml 的TAE缓冲液（pH 8.0），摇匀；
第三章50种推荐精油
第三章50种推荐精油 经过长期的开发，到目前为止，芳香疗法所运用的有用植物精油众目何止百种，在这里只常见、常用以及容易买到的50种精油。 而单一精油的介绍与知识，也可以让运用者更能自由地调配复方精油。 佛手柑 学名：柑橘属Citrus bergamia 科名：芸香科Rutaceae 概说：它是柑橘属，但是不能食用；也是柑橘属中最矮小的一种，约5米高，黄绿色的果实很小、呈梨形，且表皮凹凸不平，是萃取精油的来源，叶子狭长、开白色的小花。 它是意大利的物产，因为土壤跟气候的关系，在其他地方很少见、也不易生长，所以纯精油价格并不便宜。除非是以未成熟就掉落的佛手柑果皮蒸馏的精油来替代，但精油效果并不好，最好的精油还是要以成熟的果皮压榨取得。 精油档案 萃取：压榨果皮而得精油，最高等的佛手柑精油是以手工的方法压榨。 特质：清新淡雅，类似橙和柠檬，略带花香，是香水中最常使用的精油之一。它融合了果香与花蚝的丰富气味，是香水制造者的最爱。 挥发性：快板 主要成分：芫荽酯、香柑油脂、柠檬烯、松油醇、芫荽醇 属性：阳 主产地：意大利、摩洛哥 历史 相传Christopher Columbus把佛手柑植物从Canary岛引进到西班牙和意大利。它的名字来自意大利佛罗伦萨北方的一个小城Bergemo，在意大利传统疗法中，经常以佛手柑果皮入药。 相配精油：黑胡椒、安息香、雪松、肉桂、芫荽、丝柏、茉莉、薰衣草、柠檬、欧薄荷、回青橙、花梨木、檀香 使用与配方 1、神经系统：有强化作用，像神经疲劳、神经性失眠、心力交瘁时可以舒缓压力。 ●舒缓/熏香：罗勒3滴＋薰衣草3滴＋罗马洋甘菊2滴 2、消化系统：它是优良的肠胃抗菌剂，对一般消化问题像打嗝、消化不良都有效，最重要的是它调整食欲的功能，不论对厌食、贪食症都有效。 ●消化/按摩：葡萄籽油16ml＋小麦胚芽油4ml＋佛手柑5滴＋茴香3滴＋姜2滴 3、泌尿系统：它最大的功能就是对膀胱以及尿道的作用，它对这两个地方的发炎症状都有不错的功效。 ●发炎/盆浴：佛手柑3滴＋薰衣草2滴＋茶树3滴 4、生殖系统：有抑制病毒的功能，可以治疗经性行为传染的疱疹，以及淋病、阴部瘙痒、白带。 ●盆浴：佛手柑3滴＋没药2滴＋德国洋甘菊3滴 5、皮肤：它的光敏性是柑橘属中最强的，用来制作晒黑剂；它也是对皮肤作用中最佳选择
琼脂糖凝胶电泳操作标准流程
琼脂糖凝胶电泳操作标准流程 一、实验目的 琼脂糖凝胶电泳是常用的检测核酸的方法，具有操作方便、经济快速等优点。本铜人阵学习DNA琼脂糖凝胶电泳的使用技术，此关为能力考核，通关成功后，代表具备操作琼脂糖电泳的能力。 二、实验原理 琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA分子混合物的方法，这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物，利用DNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应，达到分离混合物的目的。DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电，在电场中向阳极移动。在一定的电场强度下，DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应，即分子本身的大小和构型是主要的影响因素。DNA分子的迁移速度与其相对分子量成反比。不同构型的DNA分子的迁移速度不同。如环形DNA分子样品，其中有三种构型的分子：共价闭合环状的超螺旋分子（cccDNA）、开环分子(ocDNA)、和线形DNA分子(IDNA)。这三种不同构型分子进行电泳时的迁移速度大小顺序为:cccDNA＞IDNA＞ocDNA 影响核酸分子泳动率的因素主要还是：1、DNA分子大小；2、琼脂糖浓度；3、DNA构想； 4、所用的电压； 5、琼脂糖种类； 6、电泳缓冲液 核酸电泳中常用的染色剂是溴化乙锭（ethidium bromide EB）。溴化乙锭是一种扁平分子，可以嵌入核酸双链的配对碱基之间。在紫外线照射BE-DNA复合物时，出现不同的效应。254nm的紫外线照射时，灵敏度最高，但对DNA损伤严重；360nm紫外线照射时，虽然灵敏度较低，但对DNA损伤小，所以适合对DNA样品的观察和回收等操作。300nm紫外线照射的灵敏度较高，且对DNA损伤不是很大，所以也比较适用。
核酸凝胶染色剂-GelRed
环境安全、极其灵敏的核酸凝胶染色试剂GelRed&GelGreen-真正的EB替代者 水溶性包装产品通过美国环保标准的安全测试，废弃物可直接倒入下水道，而不会造成环境污染。 G elRedTM和GelGreenTM是由美国 BIOTIUM 公司开发的两种集高灵敏度、低毒性和超稳定性于一身的，极佳的核酸凝胶荧光染色试剂。 目前，大多数商业化的核酸凝胶染色试剂总是在安全性、稳定性和灵敏性等方面不能完全令人满意。例如，EB 作为使用最广泛的核酸凝胶染色试剂，能够在多数应用中提供可以接受的灵敏度，但它是一种高诱变性的化学物质，且染色后背景荧光信号较高（图1）。SYBR Green I 和 SYBR Gold 也被宣传为最灵敏的凝胶染色试剂。但 SYBR Green I尤其是 SYBR Gold 在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解，稳定性差导致染色效果极不可靠。SYBRsafe 被认为是市场上较为安全的核酸染料，但它的染色效果还远不及 SYBR Green I，且毒性依然较高(图3）。GelRed和GelGreen无论用于预制凝胶染色还是凝胶电泳后染色，都表现出了极高的灵敏度。为配合312nm-UV凝胶成像系统而设计的GelRed，在使用了我们新开发的具有专利的试验步骤后（该试验步骤中使用稀释的NaCl溶液替代传统的TBE缓冲溶液），在凝胶电泳后染色中优于或者至少相当于 SYBR Gold。但与SYBR Gold 不同，GelRed在预制凝胶中使用时仍然有极高的灵敏度。我们新开发的GelGreen可以满足使用 488 nm 激光凝胶扫描仪或者可见光激发的 Dark Reader 的研究人员的使用要求。GelGreen 无论是在预制凝 胶还是凝胶电泳后染色中都与 SYBR Green I 灵敏度相当，但不存在后者的稳定性问题。实际上，GelRed 和 GelGreen ，特别是GelRed非常稳定，可以长期在室温下保存。当这两种染料稀释在TBE或者类似的电泳缓冲溶液中时甚至可以使用微波炉加热，便于采用常规方法制备预制凝胶。含有染料的预制凝胶可以成批制备，长期保存。同样重要的是，GelRed 和 GelGreen 相比 EB 或 SYBR Green 提高了安全性。独立的测试服务公司（Litron Laboratories, Inc.）进行的标准艾姆斯氏测试结果表明，在18.5μg/mL(该浓度远高于推荐用于电泳后染色的约 4μg/mL 的 3X 染色液)浓度下，GelGreen没有诱变性，而 GelRed 也仅在 S9 代谢活化时有微弱的诱变性。GelRed 和 GelGreen 的特殊化学结构使其难以穿透细胞膜进入细胞，正是这一特性降低了染料的细胞毒性。见图3。相反，SYBR Green I 广泛地用于活细胞线粒体和核 DNA 染色，这正是由于它能快速的被细胞吞入。由于已知 SYBR Green I 对紫外线导致的突变有强烈的增强作用（Ohta et al. Mutat. Res. 492 , 91(2001)），因此它的高细胞膜透性使它在紫外环境观察时成为凝胶染色的主要有害物质。
熏香炉的功效
古代的熏香炉是金属或陶瓷做的外表有着精美图案的火炉，在里面点燃碳火，时时撒上香料散香。现代的“熏香炉”则是使用加热方法（一般是煮水）使香精的气味散发在空气中以调节环境气氛的一种器皿，它结合了陶瓷艺术、蜡烛火焰和芳香养生于一体，兼具实用、收藏、欣赏价值之功能。其构成由“炉体”、加热用蜡烛和香精（通常加入水中与水蒸汽一起挥发）。使用时，将选择好的适当香型的香精滴入适量于开敞或封闭的容器上，同时加入少许的水，再将蜡烛放入炉膛中点燃即可。本节主要介绍这种“煮水型”熏香炉。 “现代”熏香炉的使用，在发达国家如美国、法国、瑞士和德国等，已有很长的历史，仅美国每年从中国进口的熏香炉数量就达数千万套，在其国内已基本普及使用。在发展中国家如非洲各国、印度及中国等，随着人们生活水平的提高，熏香炉也正在悄然走俏，越来越受到人们的喜爱。我国最大的熏香炉批发市场在浙江，其销售量每年以大约20%左右的速度在增长，市场前景极为可观。我国主要的熏香炉制造产地在广东省潮州和福建省的德化县，产品已远销全球各地 熏香炉的炉体一般用陶瓷或玻璃制成，可设计成各种不同的造型，如：茶壶、酒盅、各种动物和人物造型等，配以款式多样的精美的装饰图案，也可作为点缀家居及办公等室内环境的艺术品。其基本构成由加热炉膛和盛装香精的容器两部分组成，常见的有以下几种造 1、茶壶造型：将容器设计成茶壶的形状，在壶身或壶盖上开设若干小孔，加上壶嘴与外部环境相通，以便容器内香精气味的散发；炉膛形状与其上方的茶壶形容器相匹配，用于置放加热用的蜡烛，其上部应开设若干小孔，以利于炉膛内空气的流通，确保蜡烛能够充分燃烧。使用时，就如用火焰加热茶水，更增添趣味性和浪漫情调。 2、动物造型：将整个炉体设计成兔子、小猫、小鸭等各种可爱的动物形状，在其背脊或其它适当的位置巧妙地设置成开敞或封闭式的容器，用于盛装香精和水，容器之下是放置蜡烛、并能保证其充分燃烧的炉膛。使用时，感觉就象是从动物身上散发出香味。 3、吊篮造型：这种形式的熏香炉一般由玻璃制成，吊架与炉膛底座铸造成一体，用链索（精制的金属链条或用其他耐火材料做成的链索）将盛放香精的器皿悬吊起来。 熏香炉可以说是陶瓷制造业在现代生活中的又一创新，它使传统的陶瓷艺术和香精结合在一起，使人们在视觉和嗅觉上同时得到了满足。中国的陶瓷以其精致实用等优良品质，深受海内外人士的青睐。自宋朝以来，中国瓷器在外销商品中占据上风，成为中世纪中国最大宗的出口商品，当时欧洲人称瓷器为china，以致于把中国也称为China。在古代，中国陶瓷曾影响或改变了有些国家人民原有的生活习俗，改善了这些国家人民的生活质量，如当时东南亚一些国家，使用陶瓷代替了早期的植物叶子作为食用器具；在东非，由于中国瓷器耐酸碱无渗透性又结实耐用，远比东非传统的陶质、木质和金属质食具优越，故中国瓷碗、盘、瓶、罐等器皿成为当地民众的理想食具，间接地引起了当地人民饮食方式的变革。现在，随着瓷土原料精炼技术和烧窑技术的提高和成熟及研究开发人员的不断开发创新，陶瓷在生活、艺术等诸多领域中得到了更为广泛的应用。 蜡烛柔和和火焰能够营造出浪漫、温馨的氛围，对眼睛的刺激作用也较少，给人以舒适的感觉，为情侣约会、家庭生活、生日Party等所采用。随着生产技术的不断发展和研究人员的不断开发创新，蜡烛已从原先的单纯作为照明物，演变为现在的多种用途和功能。首先是其艺术造型，可以制成各种立体几何形状如圆柱体、棱锥体、立方体等；还可以制成花朵、蔬菜、水果、，贝壳和卡通人物造型等，琳琅满目，兼具实用性和趣味性；再则，蜡烛的颜色五彩缤纷、多姿多彩，加上各种装饰图案，使其更具艺术感；另外，蜡烛的支架形式也种类繁多、精美绝伦，与各种造型的蜡烛相互辉映，极具艺术情调。如今，蜡烛又不断地被赋予了许多新的功能，如在制造蜡烛时可加入各种香型的香精，当其点燃时，就会散发出宜人的香味，调节环境氛围。熏香炉使用的蜡烛一般为无烟蜡烛，以避免燃烧时的烟气对环境造
GelRed-核酸电泳用染料
GelRed核酸染料（10,000×水溶液） GelRed核酸染料特点 ● 无毒性：GelRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内，艾姆斯氏试验结果也表明，该染料的诱变性远远小于EB。 ● 灵敏度高：适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。 ● 稳定性高：适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶；室温下在酸或碱缓冲液中极其稳 定，耐光性强。 ● 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。 ● 操作简单：与 EB 一样，在预制胶和电泳过程中染料不降解；而电泳后染色过程也只需30 分钟 且无需脱色或冲洗，即可直接用紫外凝胶透射仪观察。 ● 适用范围广：可选择电泳前染色（胶染法）或电泳后染色（泡染法）；适用于琼脂糖凝胶或聚丙 烯酰胺凝胶电泳；可用于 dsDNA 或 ssDNA 或 RNA 染色。 ●无需改变滤光片及观察装置：标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用，使用与观察EB相同的 普通紫外凝胶透射仪观察即可，在 300nm 紫外光附近可得到最佳激发。 GelRed使用方法简介 1．胶染法（用法同EB）（推荐方法） （1）制胶时加入GelRed核酸染料。每50mL胶中加入5μL GelRed 核酸染料。 （2）按照常规方法进行电泳即可。 ◆注：此方法染色染料用量相对较少。500 μL染料大约可以做100块50mL的胶。当染料稀释 在 TBE 或者类似的电泳缓冲溶液中时可以使用微波炉加热，从而与通常制备预制凝胶的方法相同。含有染料的预制凝胶可以成批制备，并可以长期保存直到使用。 2．泡染法 （1）按照常规方法进行电泳。 （2）用0.1M的NaCl水溶液按照3300﹕1的比例稀释GelRed浓缩液，混匀，制成3×GelRed染色溶液。（例如：在45mL水溶液中加入5mL 1M的NaCl溶液及15μL10,000× GelRed水溶液。） （3）将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色30分钟左右，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色，将配好的稀释溶液轻轻地倒在胶板上，让稀释液均匀地覆盖整个胶板，并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理（避免染料吸附在玻璃表面上）。 ◆注：用泡染法染色时，染料用量较多。单次制备的染色溶液可重复使用3次左右。
DNA电泳常见问题分析
DNA电泳常见问题 凝胶电泳操作注意事项 1、琼脂糖：不同厂家、不同批号的琼脂糖，其杂质含量不同，影响DNA的迁移及荧光背景的强度，应有选择地使用。 2、凝胶的制备：凝胶中所加缓冲液应与电泳槽中的相一致，溶化的凝胶应及时倒入板中，避免倒入前凝固结块。倒入板中的凝胶应避免出现气泡，以免影响电泳结果。 3、电泳缓冲液：为保持电泳所需的离子强度和pH，应经常更新电泳缓冲液。 4、样品加入量：一般情况下，0.5cm宽的梳子可加0.5μg的DNA量,加样量的多少依据加样孔的大小及DNA 中片段的数量和大小而定.当加样孔大时,样品上样量应相应加大,否则会造成条带浅甚至辨认不清;反之则应适当减少加样量，但是上样量过多会造成加样孔超载，从而导致拖尾或弥散，对于较大的DNA此现象更明显。 5、 DNA样品中盐浓度会影响DNA的迁移率，平行对照样品应使用同样的缓冲条件以消除这种影响。 6、 DNA迁移率取决于琼脂糖凝胶的浓度，迁移分子的形状及大小。采用不同浓度的凝胶有可能分辩范围广泛的DNA分子，制备琼脂糖凝胶可根据DNA分子的范围来决定凝胶的浓度。小片段DNA的检测应采用聚丙烯酰胺凝胶电泳，以提高分辨率。 7.选择的实验材料要新鲜，处理时间不易过长。 8.在加入细胞裂解缓冲液前，细胞必须均匀分散，以减少DNA团块形成。 9. 提取的DNA不易溶解：不纯，含杂质较多；加溶解液太少使浓度过大。沉淀物太干燥，也将使溶解变得很困难。 10. 电泳检测时DNA成涂布状：操作不慎；污染核酸酶等。 11.分光光度分析DNA的A280/A260小于1.8；不纯，含有蛋白质等杂质。在这种情况下，应加入SDS至终浓度为0.5%，并重复步骤2～8。 12.酚/氯仿/异戊醇抽提后，其上清液太黏不易吸取：含高浓度的DNA，可加大抽提前缓冲液的量或减少所取组织的量 DNA电泳常见问题分析之一 1 请问配制聚丙烯酰胺凝胶电泳胶时，促凝的是TEMED还是过硫酸铵？胶聚时间很长如何解决？ 过硫酸铵提供驱动丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚合所需的自由基，而TEMED通过催化过硫酸铵形成自由基而加速它俩的聚合。胶聚合时间长可能是TEMED失效了，过硫酸铵固体时间过久也会失效的。 一个让PAGE胶很快聚合的方法： 不要先配AP（过硫酸铵）溶液，因为AP很容易变质。在保证TEMED和AP质量的情况下，每次配胶时，直接称一定量的AP粉剂溶入液体状态的PAGE中，这样可以保证AP的催化能力，而且可以多加一点。配25ml的PAGE胶，加0.03克AP粉剂，最后加入25ulTEMED，20分钟左右就可以凝固（当然这个时候拔梳子，会有少量未凝固的PAGE在孔里形成丝状干扰，使加的样品看起来不太漂亮，但一般不影响跑胶效果和条带的形状和位置）。 2 DNA电泳的MARKER怎么是扭曲的？ 1、配制胶时的缓冲液需要和电泳缓冲液不是同时配制的.最好是同时配制.电泳时缓冲液高过液面1－2mm
分子生物学常用荧光核酸染料
由于只需简单温和的物理方法（光照）激发和检测，荧光染料是研究生物学微观世界特别是核酸时最常用的示踪工具之一。这里的荧光核酸染料主要指能特异结合核酸并改变发光特性的化合物，DNA电泳后检测凝胶的EB大概是最为人熟知的荧光核酸染料吧。除了染胶，荧光核酸染料还可用于荧光原位杂交中作为常见的复染剂，它们能以非共价键的方式与DNA/RNA结合从而显示原位杂交中的细胞背景信息。根据它们能否穿透细胞膜进入活细胞体内，还可分为两大类：通透性核酸染料和非通透性核酸染料。生物通在此简单比较一下在分子生物学实验和细胞学实验中常用的荧光染料。 分子生物学常用荧光核酸染料 荧光核酸染料在分子生物学最常见的应用无疑是电泳凝胶染色，以及定量PCR。 EB EB（溴化乙锭）本身在紫外下不发光，能与单链、双链甚至三链DNA高效结合并发出明亮的橙色荧光。因其廉价且灵敏度高，一直是琼脂糖核酸电泳最常用的荧光染料。EB的使用非常简单方便，电泳结束后染色可获得最佳效果，也可以在制胶时加入进行前染。前染有利于节约时间，但是易出现条带变形拖尾等问题。EB-DNA结合物会导致染料的光漂白和DNA单链断裂，且具有潜在的诱变作用。虽说以前的实验室里总会有个别做起实验来“精神可嘉，行为可怕”的家伙，一时找不到手套他们敢徒手拿EB胶，但大多数人对EB还是“敬而远之”的，没事谁都不愿靠近实验室里跑胶、看胶那一块地方。偏偏对于搞分子生物学的人来说，跑胶就像吃饭一样平常，于是大家只能硬着头皮天天和EB打交道，盼望EB的替代品早点出现在实验室。生物通在此简单回顾一下这几年纷纷登场的EB替代品。 SYBR系列染料 说到EB的替代物，首先想到的是Invitrogen旗下Molecular Probes专利持有的SYBR系列。自1993年SYBR核酸染料推出以来，就因其灵敏度和易用性而迅速大受欢迎，成为明星产品之一。这一系列包括4种染料：SYBR Safe、SYBR Gold、SYBR Green I和SYBR Green II。
空熏品香(隔火熏香)的方法与步骤
空熏品香（隔火熏香）的方法与步骤 当前位置:酉圆香堂主页> 香道文化> 品香方法> 空熏品香（隔火熏香）的方法与步骤 时间:2012-01-12 01:39来源:酉圆香堂作者:酉圆香堂点击: 3344次 需要的器具: 1.香筷(铜):夹碳与香材 2.灰拍(铜):拍实香灰用具 3.香镊(铜):夹云母上香灰 4.龙泉冰裂品香炉 5.日本香道碳 6.日本硅藻土煅烧专用品香香灰 7.国产云母片 隔火熏香的方法
宋代之后,“隔火熏香”而不是直接“烧香”的方法就广为流行了,并深得文人雅士的青睐。虽然“熏”香不如“烧”香来得简单,但其香气更为醇和宜人,而且也能增添更多情趣,所以很多人也一直乐此不疲。 在此做个介绍,有兴趣的香友可以参考尝试一下,以下的图片和注解是为了让大家能更好的了解香道品香的步骤。 制备香品:熏烧的香应选择天然香料制作的优质香品,可以是合香,也可以是原态香材。其体积不宜过大,应将香品分割为薄片、小块、粉末等形状。 在香炉内放入充足的香灰,先用香筷旋转捣松香灰疏松(很重要哦,空气进入不到香灰里面不利于香碳的燃烧且容易熄灭)。 然后在炉灰中心慢慢开出一个深2cm的空洞作为炭孔。点燃香炭(火枪或防风打火机),待其燃烧。没有明火并变至红色,这样品香时就没有炭味的干扰了。 用香筷将烧透的炭夹入炭孔中,再用香灰盖上。隆起成30度左右山形,切记压得太紧,太紧空气就不够香碳的燃烧了。用香筷压出5个区域,在每个区域打上香筋,顺时针打。香炉被分割六了很大的三角的部分,有五个是打上香筋的区域,其中
一个就是开口(火窗)部分,鼻子闻香的方位。 用单根香筷在香灰中“扎”出一个气孔,通达香炭,以利于香炭的燃烧。可以借助香灰控制香炭的燃烧速度,香炭埋入香灰的程度视香品的特点而定,需要木炭的温度较高就可以埋得浅一些,反之则可以深一些,一般香碳跟灰表面一般是1厘米左右。在气孔开口处放上云母片。用香镊将香品置于垫片之上。若出烟,可以稍等,待其无烟时再开始品香;或将香灰加厚一点,即可减少烟气。 品香,一手持炉底托起香炉,一手轻罩以聚集香气,靠近香炉缓缓吸气品香。注意呼气时不宜正对香炉,可将头转向一侧换气。 慢慢的品闻,观其颜色、形式、香味,根据时间流逝的变化,按自己的感受写下香笺。空熏品香步骤比较多,适合时间比较充裕,对香品味较高的香友,如果是工作比较繁忙,但又想在闲时品一清香,在这里我们推荐你使用电子香炉,最简单,最方便的品香香炉.
实验五--核酸琼脂糖凝胶电泳
实验五核酸琼脂糖凝胶电泳 一、实验目的 琼脂糖凝胶电泳是常用的检测核酸的方法，具有操作方便、经济快速等优点。本实验学习DNA琼脂糖凝胶电泳的使用技术，掌握有关的技术和识读电泳图谱的方法。 二、实验原理 琼脂糖凝胶电泳是用于分离、鉴定和提纯DNA片段的标准方法。琼脂糖是从琼脂中提取的一种多糖，具亲水性，但不带电荷，是一种很好的电泳支持物。DNA在碱性条件下（pH8.0的缓冲液）带负电荷，在电场中通过凝胶介质向正极移动，不同DNA分子片段由于分子和构型不同，在电场中的泳动速率也不同。溴化乙锭（EB）可嵌入DNA分子碱基对间形成荧光络合物，经紫外线照射后，可分出不同的区带，达到分离、鉴定分子量，筛选重组子的目的。但是EB具有致癌性，所以我们选用无毒，高灵敏度是Ex Green染料，。此核酸染料在紫外透照仪及可见光透射仪上均可使用。ExGreen外观呈红色，与核酸结合后，可用300 nm （紫外透射仪）激发。
三、材料、仪器和试剂 1、材料大肠杆菌中提取的质粒DNA 2、仪器电泳仪；台式离心机；恒温水浴锅；微波炉；紫外透射仪；照相机或者凝胶成像系统 3、试剂 （1）50×TAE电泳缓冲液：称取Tris 242g，EDTA 37.2g，加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解，加入57.1ml的醋酸，充分搅拌，加去离子水定容至1L，室温保存。 （2）6×电泳上样缓冲液：0.25%溴酚蓝、40%（W/V）蔗糖水溶液，贮存于4℃。 （3）溴化乙锭（EB）溶液母液：将EB配制成10mg/mL。用铝箔或黑纸包裹容器，贮存于室温即可。 （4）分子量标准DNA：DNA Marker 四、操作步骤 1、制备1%琼脂糖凝胶(大胶用40ml，小胶用30ml)：称取0.7 g(0.5 g) 琼脂糖置于锥形瓶中，加入70 ml(50ml) 1×TAE，瓶口倒扣小烧杯。微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化，摇匀，即成1.0%琼脂糖凝胶液。 注意：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的 2、胶板制备：取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净，晾干，放入制胶玻璃板.取透明胶带将玻璃板与内槽两端边缘封好，形成模子。将内槽置于水平位置，并在固定位置放好梳子。在冷却到65℃左右的琼脂糖凝胶液中加入Ex Green染料（10ml:1ul），混匀后小
琼脂糖凝胶电泳注意事项及操作流程1
琼脂糖凝胶电泳注意事项及操作流程 凝胶电泳操作注意事项： 1.缓冲系统：在没有离子存在时，电导率最小，DNA不迁移，或迁移极慢，在高离子强度的缓冲液中，电导很高并产热，可能导致DNA变性，因此应注意缓冲液的使用是否正确。长时间高压电泳时，常更新缓冲液或在两槽间进行缓冲液的循环是可取的。 2.琼脂糖：不同厂家、不同批号的琼脂糖，其杂质含量不同，影响DNA的迁移及荧光背景的强度，应有选择地使用。 3.凝胶的制备：凝胶中所加缓冲液应与电泳槽中的相一致，溶解的凝胶应及时倒入板中，避免倒入前凝固结块。倒入板中的凝胶应避免出现气泡，影响电泳结果。 4.样品加入量：一般情况下，0.5cm宽的梳子可加0.5ug的DNA量，加样量的多少依据加样孔的大小及DNA中片段的数量和大小而定，过多的量会造成加样孔超载，从而导致拖尾和弥散，对于较大的DNA此现象更明显。 5.电泳系统的变化会影响DNA的迁移，加入DNA标准参照物进行判定是必要的。 6.DNA样品中盐浓度会影响DNA的迁移率，平行对照样品应使用同样的缓冲条件以消除这种影响。 7.DNA迁移率取决于琼脂糖凝胶的浓度，迁移分子的形状及大小。采用不同浓度的凝胶有可能分辨范围广泛的DNA分子，制备琼脂糖凝胶可根据DNA分子的范围来决定凝胶的浓度。小片段的DNA电泳应采用聚丙烯酰胺凝胶电泳以提高分辨率。
琼脂糖加样时候注意事项： 1、用移液抢将样品加至点样孔。每孔点样的体积一般少于25ul，因此吸取每一个样品时，操作要稳当且细心。 2、常加一定量的蔗糖来增加样品的浓度，以使每个样品停留在各自的点样孔中。 3、在样品中加入水溶性的阴离子追踪染料（如溴酚蓝），用以看出样品移动的距离。 4、在一个或几个孔中加入标准分子质量样品，电泳结束后，根据已知分子质量的带的相应位置可用来做出标准曲线。 5、电泳一般是在追踪染料泳动到胶的80%部位时停止。注意电泳期间，电泳槽盖要安全盖好，以防止液体蒸发，又可以降低电击的可能性。 6、电泳结束后，将胶浸没在1mg/L的溴化乙锭（EB）中，5min后即可看到DNA 带，EB通过插入在双螺旋的配对核苷酸之间同NDA结合。另一种方法是电泳时，在胶中加入EB。 7、在紫外灯下，由于EB发出强烈的橘红色的荧光，所以可以看到DNA带。利用这种方法检测的界限是每条带约10ng DNA。带上塑料安全眼镜可防止紫外光对眼睛的伤害。可用尺子来测量每条带至点样孔的距离。同样，利用特制的照相机和调焦器，也可以对凝胶拍照。 8、如果要对某一条带（如质粒）进一步分析，可用小刀将含该带的凝胶切割下来，从带中回收DNA。
DNAGREEN核酸染料使用说明
DNAGREEN核酸染料使用说明 货号：G7140 规格：0.5ml(10000×) 保存：常温运输，4℃保存，有效期一年。 注意：DNAGREEN核酸染料属于微量核酸检测试剂，使用时请按照说明书操作。 产品简介： 目前最常见的替代EB的核酸染料SYBR Green I（属于花氰类染料）虽然毒性比EB低、灵敏度比EB高，但由于其化学稳定性差；此外，SYBR Green I在电泳过程中能在DNA分子间移位，很容易使DNA条带模糊和扭曲，电泳清晰度和分辨率下降。所以在实际应用中依然不能有效替代EB。本产品是同时具有EB稳定性和SYBR Green I低毒性的新性核酸染料，其特点如下： 1.低毒。其主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品，有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。 2.灵敏。检测灵敏度跟EB相当，能满足常规核酸电泳实验要求。 3.稳定。对光、水和热的稳定性跟EB相当，可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。 4.无分子间位移现象。不会出现SYBR染料常见的条带模糊和扭曲现象。 5.使用方法多样。既可以加入熔化的胶中，也可以电泳后染色，还可用于PAGE。 6.跟各种常用的核酸电泳缓冲液（如SuperBuffer-2、TBE、TAE）兼容，但在SuperBuffer-2和TBE中背景最低。 7.观察时不需要任何额外的仪器设备或UV光源，可以使用现成的观察EB的300nm UV。 8.可用于RNA染色(也呈绿色)。 9.DNA或RNA浓度较高时还可以直接在日光下观察（需要将胶放在黑色背景下）。由于避
免了UV对DNA的伤害，尤其适用于胶回收实验。 使用方法: 电泳中染色： 本方法是将DNAGREEN直接加入溶化的凝胶中使用，只适用于琼脂糖凝胶电泳，不适用于PAGE。 1.将DNAGREEN直接加入到融化的琼脂糖凝胶中，每100mL凝胶加3-10uL DNAGREEN，混合均匀后倒胶。琼脂糖凝胶中不能含任何其他染料（如EB和SYBR Green I，否则会相互干扰）。在100mL琼脂糖凝胶中加入DNAGREEN的量不要超过10uL，否则背景增强。注意：一定要保证琼脂糖彻底熔化，尤其是在第一次熔化胶的时候，否则未熔化的小颗粒将产生跟染料相同的荧光。 2.将DNA样品与DNA上样液按比例混合后上样。注意：一定要使用不含SDS等去污剂的上样液，否则SDS会跟染料结合，极大地降低灵敏度。 3.上样后电泳，电泳参数同常规的电泳。 4.电泳结束后在300nm左右的UV下观察。注意：不要使用波长为260nm或360nm的UV，否则检测灵敏度会降低。如果DNA或RNA浓度较高，还可以直接在日光下直接观察（需要将胶放在黑色背景下），避免UV对DNA的伤害，尤其适用于胶回收实验。 5.用配置了520-550nm滤光片（一般呈黄色或深黄色）的相机拍照。注意：不要使用与EB兼容的红色滤光片（它能阻挡520-550nm的光）。如果能再加上能滤去UV的滤光片，效果会更好。 6.后续Southern、转膜或DNA胶回收实验按常规操作进行。 电泳后染色： 本方法是在电泳后对DNA进行染色，适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE。但该方法需要单独的 染色处理，染料用量较大，不推荐用于琼脂糖凝胶的染色。
琼脂糖凝胶电泳步骤
琼脂糖凝胶电泳步骤 实验前准备及注意事项： 将所要用到的制胶锥形瓶、胶槽、梳齿等物品清理干净，如有残胶，需将残胶尽量去除。 注意：所有用来跑核酸胶的物品，只要接触过核酸染料，一定要专门放置，专物专用，不要再将污染过的物品随意放置，以免污染其他物品。接触过核酸染料的手套不要再碰非污染区的物品。制胶和拿取核酸胶时佩戴一次性PE手套，再操作其他地方时将一次性手套丢弃。 实验步骤： 1.按每100ml 1×TAE/TBE缓冲液中加入1g琼脂糖（1%的胶，根据核酸大小选择制胶的浓度，一般情况用1%-2%的胶）的比例，称取琼脂糖，加入专门制琼脂糖凝胶的250ml-500ml的锥形瓶中。 2.按比例量取适量的1×TAE/TBE缓冲液，加入到锥形瓶中的琼脂糖一起，适当摇晃锥形瓶初步混匀。 3.将混合液放入微波炉中，用中高火加热，加热总时间可根据制胶总量调整，一般40ml左右的胶量加热90s左右。如果制胶量大，记得每加热1min左右将瓶从微波炉中取出，轻轻晃匀后，再继续加热，以免局部过热导致胶溢出。 注意：取出加热后的瓶时，记得垫上纸，防止烫手！ 4.待胶加热好，完全溶解后，稍晾凉至45-55℃左右（以基本不太烫手为宜）按照1:10000的比例加入核酸染料（如100ml胶加10ul染料），迅速摇匀。 5.将胶槽和梳齿准备好，梳齿可以预先插好，将上一步摇匀的胶倒入胶槽中，一般厚度以60mm左右为宜，具体要根据梳齿的厚度以及样品量来定。 6.待胶变白，基本表示胶已凝好，此时可以将梳齿拔出，一定要竖着往上拔梳齿，不要摇晃，以免样品孔被破坏。 7.在电泳槽中倒入1×TAE/TBE缓冲液，将制好的胶放入缓冲液，以缓冲液没过样品孔为宜。 8.点样：根据样品孔的大小决定上样量，每一排样品孔至少有一个孔用来点DNA Marker。（上样前确定每个样品和Marker里都已经加了Loading buffer，Loading buffer 的终浓度为1×） 9.确定样品孔的方向，核酸带负电，样品孔要在负极，通电后在胶孔中向正极移动。 10.接通电泳槽电源，一般设置电压为100-130V之间，具体可根据样品核酸的分子量以及凝胶的浓度调整，电泳时间一般以Loading buffer中最小的带不跑出凝胶为宜，具体时间要依据具体实验用途及样品大小决定。 分子量大的样品跑的速度相对慢，时间相对长。凝胶浓度高的，跑的速度相对慢，时间相对长。 11.扫胶，拍照。 注意：要先开白光，将胶放正，调整好位置和焦距等参数后，再开紫外适度曝光，最后拍照保存。 操作扫胶仪时注意佩戴一次性PE手套，操作电脑时注意不要佩戴核酸染料污染过的手套。
琼脂糖凝胶电泳的操作步骤
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。 琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA片段，其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低，但它制备容易，分离范围广，尤其适于分离大片段DNA。普通琼脂糖凝胶分离DNA的范围为 0."2-20kb，利用脉冲电泳，可分离高达10A7bp的DNA片段。 操作流程 准备干净的配胶板和电泳槽 注意DNA酶污染的仪器可能会降解DNA，造成条带信号弱、模糊甚至缺失的现象。 选择电泳方法 一般的核酸检测只需要琼脂糖凝胶电泳就可以；如果需要分辨率高的电泳，特别是只有几个bp 的差别应该选择聚丙烯酰胺凝胶电泳；用普通电泳不合适的巨大DNA 链应该使用脉冲凝胶电泳。注意巨大的DNA链用普通电泳可能跑不出胶孔导致缺带。 正确选择凝胶浓度 对于琼脂糖凝胶电泳，浓度通常在 0."5?2%之间，低浓度的用来进行大片段核酸的电泳，高浓度的用来进行小片段分析。低浓度胶易碎，小心操作和使用质量好的琼脂糖是解决办法。注意高浓度的胶可能使分子大小相近的DNA带不易分辨，造成条带缺失现象。 适合的电泳缓冲液 常用的缓冲液有TAE和TBE而TBE比TAE有着更好的缓冲能力。电泳时使用新制的缓冲液可以明显提高电泳效果。注意电泳缓冲液多次使用后，离子 强度降低，PH值上升，缓冲性能下降，可能使DNA电泳产生条带模糊和不规则的DNA 带迁移的现象。
电泳的合适电压和温度 电泳时电压不应该超过20V/cm，电泳温度应该低于30C，对于巨大的DNA 电泳，温度应该低于15C。注意如果电泳时电压和温度过高，可能导致出现条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。特别是电压太大可能导致小片段跑出胶而出现缺带现象 DNA样品的纯度和状态 是电压太大可能导致小片段跑出胶而出现缺带现象DNA样品的纯度和状态 注意样品中含盐量太高和含杂质蛋白均可以产生条带模糊和条带缺失的现象。乙醇沉淀可以去除多余的盐，用酚可以去除蛋白。注意变性的DNA样品可能导 致条带模糊和缺失，也可能出现不规则的DNA条带迁移。在上样前不要对DNA 样品加热，用20mM NaCI缓冲液稀释可以防止DNA变性。 DNA的上样 正确的DNA上样量是条带清晰的保证。注意太多的DNA上样量可能导致DNA带型模糊，而太小的DNA上样量则导致带信号弱甚至缺失。TIANGEN公司DNA分子量标准每次上样6ul即可得到清晰均匀的条带。 Marker 的选择 DNA电泳一定要使用DNAMarker或已知大小的正对照DNA来估计DNA片段大小。Marker 应该选择在目标片段大小附近ladder 较密的，这样对目标片段大小的估计才比较准确。TIANGEN公司的DNA Marker条带清晰，亮度均匀，质量稳定，是您实验的首选。需要注意的是Marker的电泳同样也要符合DNA电泳的操作标准。如果选择QNA/HindHI或者QNA/EcoRI的酶切Marker，需要预先65C加热5min，冰上冷却后使用。从而避免HindHI或EcoRI酶切造成的粘性接头导致的片段连接不规则或条带信号弱等现象。 凝胶的染色和观察 实验室常用的核酸染色剂是溴化乙啶（EB）,染色效果好，操作方便，但是稳定性差，具有毒性。而其他系列例如SYBR Green GelRed虽然毒性小， 但价格昂贵。TIANGEN公司的GeneGreen相比则是性价比高的低毒替代染料，其灵敏度比传统EB染料高10倍以上。注意观察凝胶时应根据染料不同使用合适的光源和激
中国传统香的制做方法
中国传统香的制做方法 袅袅香烟,灵动飘逸,上通苍穹,下怡性情,净化环境,传统香竟能悠然于书斋琴房，又可飘渺于庙宇神坛，竟能在静室闭关默照, 又能于席间怡情助性，竟能空理安神开窍，又可十处化病疗疾。 在现在社会里，传统香越来越受到人们的欢迎，它不仅是寺院、茶社、宾馆、写字楼等公共场所，也很适合在家庭中使用，读书、会客、写字作画时点一柱清香，可以养心意志，使人神清气爽，身心放松。 对于香的制作，中国古代就已经形成了一整套与中医学说一脉相传的理论，有一个成熟的十分完善的工艺体系，这也是中国传统文化一个密不可分的部分，我国的传统香与中药的制作很相似，它也是以中药材和天然香料为原料，有各种各样的配方，不仅芬芳富裕，还有清新安神开窍等很多的养生功能，人们把传统香的制作概括为毒之于药，制之于法，行之以文，诚之于心，就是说制作传统香要以天然香药材为原料，按照特定的程序和法度来完成，制香的人还要正心诚意保持良好的心态，正是由于秉承了这一理念，才使传统香品不仅成为芳香之物更成为开晦养生之药。 传统香的外型丰富多彩，我们经常使用的有，线香，盘香等等，下面我们就以两种香为例，了解传统香的制作方法。 我国传统香的制作，一共要分六个步骤，包括制备原料、和料、成型、晾晒、
包装窖藏等几部分。制作传统香之前，首先要制备好所需的原料。 一、制备原料 传统香的原料：香药木粉粘结料附加性材料四部分组成，首先香药是传统香最核心的部分，他决定了香气的特征、香的功效，以及香的品级和档次，与中药里的配方有异曲同工之处，都是由制香人通过实践总结出来的，香药包括天然香药和一些中药材，由于天然香料基本都收于中药材，所以历史上香和药是不分的，统称为香药，这也是现代香和传统香不同的工艺之处，制作传统香首先是要综合考虑香的用途，香型，品味等因素，再根据这些基本要求，选择香料或药材，采购来的香药即使品质优良，也仍然是生香药，若直接用来制香，未必能制出好的功效，甚至适得其反，这就需要对香药进行泡制，香药泡制是制作传统香制作中十分重要的一道环节，对技术的要求也比较高，甚至对泡制的时间，容器的质地，都有很多讲究。 下面我们以最常用的檀香为原料给大家介绍一下檀香的泡制方法。 像檀香就是要去火，因为檀香生长在南方炽热的地区，他的火性比较大，那么这种香单独做香以后使人们容易气浮上燥，所以要先用茶叶、清茶或者用团茶把他的火去掉，这是一种最常用的最基本的方法： 首先将大块的檀木劈成长2-3厘米，粗3-5毫米的尺寸，这样有利于后面研磨工序的进行，然后将劈好的檀木全部倒入盆中，准备一套砂器茶具一壶开水和上等的乌龙茶，和云南团茶，以茶道一样，先用开水冲洗一遍茶具，再放入茶叶，茶叶也需要先冲洗一遍之后，才能使用，等到第二遍茶浸泡好以后，就可以把茶水均匀