嗜酸乳杆菌

嗜酸乳杆菌- 相关资料

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嗜酸乳杆菌在胃中存活率一般能达到80%，但是若不经包埋处理，口服嗜酸乳杆菌后，它们的活力仍是会受到影响的；而如果将它们全部包埋，又无法发挥其在胃中的有益作用。因此我们首先选择由菌母直接繁育出的一代活菌，再将它们的一半应用双层包埋技术，不仅胃、肠同养，还保证了活菌在肠道中的活性。

双包埋技术的优势还在于，外层的胶质在肠道内溶解后，内层的蛋白质还可帮助

活菌定植在肠壁上，让它们代代繁殖，有效调节肠道微生态。

根据卫生部公告2011年第25号，嗜酸乳杆菌是可用于婴幼儿食品的菌种。

嗜酸乳杆菌的性状:冷冻干燥粉末,嗜酸乳杆菌活菌数:≥3.0×10cfu/g,水分:≤4.0%,如菌液,则水分>80%.

增殖方式

在营养丰富的MRS培养基巾，添加低聚糖对3株乳酸菌增殖的影响，如低聚异麦芽糖对嗜酸乳杆菌、乳酸乳杆菌、乳酸链球菌均有一定的增殖作用[2]。

添加低聚糖对乳酸菌增殖的菌落对数值低聚糖是由2～10个单糖单位通过糖苷键而连接的小聚合体，介于单体单糖与高度聚合的多糖之间。国外已有报道，低聚糖可以促进肠道双歧杆菌和乳酸菌

的增殖，抑制大肠杆菌等的生长，还可以稳定肠道环境，提高肠黏膜免疫功能等。也有报道[3]低聚果糖仅可提高粪便中微生物的数量，不能促进肠道中双歧杆菌的数量。

通过本实验可以看出，低聚异麦芽糖和低糖均可一定程度的促进禽源嗜酸乳杆菌、乳酸乳杆菌和乳酸链球菌的增殖。

低聚糖作为双歧因子，不能被消化道和病原菌利用，仅能被益生菌利用，从而可使益生菌大量繁殖，作为益生菌的增殖因子，增强益生菌的竞争优势。本实验[2]进行了不同营养条件下异麦芽低聚糖对3株乳酸菌体外增殖的观察。

本实验[2]结果显示，在营养贫瘠的培养基中，低聚糖可以明显的促进乳酸菌的增殖，这对于临床上人和动物机体的肠道恢复具有积极的意义。乳酸杆菌和双歧杆菌等肠道有益菌群的生长增殖需要较高的营养水平，而大肠杆菌等条件致病菌对于营养的要求相对较低，在肠道内繁殖时，获得其生长的营养要求较容易。正常健康的机体肠道环境下，有益菌群获得足够的营养，生长增殖比较旺盛，对有害菌群亦起到了一定的抑制作用；而当机体肠道紊乱，有害菌群大量增殖消耗营养，有益菌群此时营养条件不够，生长增殖受到影响，从而更加加剧了肠道环境的恶化。而此时服用低聚糖，可有效的发挥其对于乳酸杆菌的增殖作用，加之其不被有害菌群所利用的特性，决定了它可以特异的促进双歧杆菌、乳酸杆菌生长，从而达到调节肠道菌群平衡的效果[2] .

酵母菌、枯草芽孢杆菌、乳酸菌简介

由于具有防病、治病、促进动物生长、提高饲料转化率等功效，抗生素作为饲料添加剂在畜禽养殖业生产中被普遍使用。 大量科学研究已经证明，对动物长时间地使用抗生素添加剂，会导致动物体内微生物的耐药性不断增加，动物自身对疾病的抵抗能力越来越差，治疗时使用的抗生素剂量也随着越来越大。人食用了含有抗生素的食物，相应地也会增加人体内微生物的抗药性。30年前，人注射青霉素20万单位就可以了，后来逐渐发展到80万、100万甚至更高。不但危害人民的身体健康，而且还影响养殖业的健康发展。 生物无抗生素饲料可从仔猪营养方面着手，通过添加柠檬酸、酶制剂、益生素、氧化锌、纳米蒙脱石等措施控制仔猪腹泻。 乳酸杆菌 乳酸菌在动物体内能发挥许多的生理功能。大量研究资料表明，乳酸菌能促进动物生长，调节胃畅道正常菌群、维持微生态平衡，从而改善胃肠道功能；提高食物消化率和生物效价；降低血清胆固醇，控制内毒素；抑制肠道内腐败菌生长：提高机体免疫力等。 乳酸菌通过发酵产生的有机酸、特殊酶系、细菌表向成分等物质具有生理功能，可刺激组织发育，对机体的营养状态、生理功能、免疫反应和应激反应等产生作用。 1．提供营养物质，促进机体生长 乳酸菌如果能在体内正常发挥代谢活性，就能直接为宿主提供可利用的必需氨基酸和各种维生素（维生素B族和K等)，还可提高矿物元素的生物活性，进而达到为宿主提必需营养物质、增强动物的营养代谢、直接促其生长的作用。研究报道乳酸菌可以改良水质，提高斑节对虾的存活率、生长速率和健康状况。试验证明，小麦、稻米等谷物进行乳酸发酵后，营养价值大大提高。此外，乳酸菌产生的酸性代谢产物使肠道环境偏酸性，而一般消化酶的最适PH值为偏酸性(淀粉酶6.5、糖化酶4．4)，这样就有利于营养素的消化吸收。何机酸的产生还可

枯草芽孢杆菌使用技术

枯草芽孢杆菌使用技术 制剂：1000亿活芽孢/克可湿性粉剂毒性：低毒级 枯草芽孢杆菌特点： 1、绿色环保――对人畜微毒、对环境无污染、对作物安全（本剂虽属细菌活体杀菌剂，但不会侵染作物引起病 害，亦不会对作物产生药害） 2、高效广谱――对水稻稻瘟病，西瓜、黄瓜、草莓、番茄等多种作物白粉病、灰霉病，马铃薯晚疫病，大豆、油菜菌核病，瓜类、谷物、三七等作物根腐病等多种真菌性病 害具有优良防效。 3、增产提质――枯草芽孢杆菌还能够分泌促进作物生长的活性物质，使植株叶片浓绿肥厚，提高作物免疫力，增产提质效果显著，发酵过程中产生多种氨基酸，对作物有生 长调节的作用。 枯草芽孢杆菌防治机理 １、竞争作用：通过生物间争夺氧气、营养物质及竞争

排它性，形成局部生物优势种群，防止其它菌侵入；同时争夺周围菌的营养，抑制病原菌生长―起到疫苗的作用。 ２、溶菌作用：枯草芽孢杆菌吸附于病原菌的菌丝上，随着菌丝生长而生长，从而消耗病原菌的营养，使病原菌菌丝发生断裂、解体、细胞质消解，使病原菌失去进一步侵染 能力―起到寄生作用。 3、生物拮抗作用：枯草芽孢杆菌生长过程中能产生细菌素（枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌素）、有机酸、天然脂肽类化合物等，对病原菌抑制其生长或溶解其细胞壁、使细胞穿孔、畸形，最终杀死病原菌，。 ４、杀灭作用诱导作物产生抗病性、促进作物生长，增产提质。据统计，使用枯草芽孢杆菌可有效增产 5.6-20.2%。 枯草芽孢杆菌使用方法 1、稻瘟病、纹枯病、稻曲病。施药方法：水稻孕穗破口期和齐穗期各施药一次。每亩用枯草芽孢杆菌10克均匀 喷雾，喷药药间隔7-12天，

2、枯草芽孢杆菌与咪鲜胺、三环唑、井冈霉素等混用，有明显的相互增效作用。在病害集中、急性暴发时，更能显 示出混用的效果。 枯草芽孢杆菌使用注意事项 1、本品用量少，为减少浪费，兑药时应用小容器将所需用量药剂充分溶解后再倒入喷雾器中，加水至喷雾器最佳 水平线进行喷雾； 2、早上10点前或下午4点后施药，避免阳光直射，杀死芽孢。尤其是4点后用药，夜间潮湿的环境更有利于芽孢 萌发。 3、不能与铜制剂、链霉素等杀菌剂及碱性农药混用； 4、病害初期或发病前施药效果最佳，施药时注意使药 液均匀喷至作物各部位。

食品大肠杆菌控制方法

润联环保消毒专家官网：https://www.wendangku.net/doc/fd10503620.html, 食品大肠杆菌控制方法 首先我们先了解下什么是大肠杆菌 大肠杆菌的定义 大肠埃希氏菌通常被称为大肠杆菌，是埃舍里希（德）在1885年发现的，在相当长的一段时间内，一直被当作正常肠道菌群的组成部分，认为是致病菌。直到20世纪中叶，才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性，尤其对婴儿和幼畜（禽），常引起严重腹泻和败血症，它是一种普通的原核生物。 大肠杆菌属于革兰氏阴性细菌。 下面大家看看大肠杆菌的传播途径 通过食物和水原料传播 通过物体表面传播 空气接触传播 目目食品的标准

润联环保消毒专家官网：https://www.wendangku.net/doc/fd10503620.html, 诺福的出现让大肠杆菌无出盾型杀杀杀 诺福是由过氧化氢和胶质银离子构成的全球首款真正意义上的无残留高效杀菌，消毒剂 这两种成份作用的机理是：都能穿透和破坏微生物的细胞壁和细胞膜，进入细胞内部使其关键性功能成分（例如：DNA和酶）坏死，从而导致微生物死亡 银离子作为稳定剂和催化剂，使诺福完全不同于普通的过氧化氢 高效的杀灭能力 诺福可以提供如下消毒能力相关检测报告： -中国疾病预防控制中心：水体消毒检测报告：50Ppm就能杀灭和抑制大肠杆菌-军事医学科学院消毒中心：食品厂的物表，环境消毒检测报告（包括蔬菜水果表面）- 欧盟8大类别的微生物检测报告，囊括了几乎所有有害致病菌甚至芽孢 - 欧盟食品安全准入检测 大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被国内外广泛应用于食品卫生工作中。目前国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准和原国家商检局制订的两个行业标准 食品企业都知道需要控制大肠杆菌及菌群、但是在生产中产品总有那么一两个批次的产品会检测出大肠杆菌或大肠菌群超标呢？不是企业不会做、只是食品企业无法长期、有效、及稳定的控制、其原因是消毒产品的选择及消毒的方法和规范等问题。 那么国内这么多的食品企业怎么样才能有效的控制大肠菌群及各种致病菌的困扰呢？诺福立足于食品行业已有8年、对不同的食品加工行业及生产流程熟悉到位、目前也为超过至少 2000家食品企业解决大肠菌群及各种致病菌超标等问题。 同时诺福具有如下几个特点： 1、欧盟进口产品、有欧盟食品批文及相关的检测报告、同时经过国内最权威机构检测、如

枯草芽孢杆菌简介及应用

枯草芽孢杆菌简介及应用 枯草芽孢杆菌简介 枯草芽孢杆菌（Bacillaceae）编号为Strain Number ACCC 11060，是芽孢杆菌属的一种。单个细胞0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭，需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚[1]。早在1835 年，Ehrenberg 所描述的“Vibrio subtilis”即是现在大家熟悉的“枯草芽孢杆菌”，它是由Cohn 于1872 年正式命名的，现作为芽孢杆菌科(Bacillaceae) 的模式菌株，芽孢杆菌是人类发现最早的细菌之一。 枯草芽孢杆菌应用 枯草杆菌(B acillus Subtilis) 是一种重要的α-淀粉酶生产菌。同时枯草芽孢杆菌作为一种安全、高效、多功能和极具开发潜力的微生物菌种已广泛应用于工业、农业、医药、卫生、食品、畜牧业、水产及科研诸领域。随着经济的发展、科研水平的提高，枯草芽孢杆菌与人们的日常生活将更为密切，它也必将作为一种十分重要的工业微生物菌种越来越引起人们的普遍关注和青睐。 ①枯草芽孢杆菌在工业酶生产中的应用 工业酶的生产是工业微生物发酵的重要组成部分。枯草芽孢杆菌是当今工业酶生应用最广泛的菌种之一，据不完全统计，枯草芽孢杆菌所产的酶占整个酶市场的50 %。由于其产酶量高、种类多、安全性好和环保等优点，在现代工业生产中被广泛用作生产菌种，其发酵生产的酶已在食品、饲料、洗涤、纺织、皮革、造纸和医药等领域均发挥着十分重要的作用。 ②枯草芽孢杆菌在生物防治领域中的应用 枯草芽孢杆菌作为植物病害生防细菌之一，具有较强的防病作用美国迄今已有4 株枯草芽孢杆菌生防菌株获得环保局商品化或有限商品化生产应用许可，如美国AgraQuest公司用枯草芽孢杆菌QST713 菌株开发出活菌制剂杀菌剂SerenadeTM，并于2000 年通过美国环保局(EPA) 的登记，用于防治多种作物的白粉病、霜露病、疫病、灰霉病等病害。我国利用枯草芽孢杆菌防治植物病害的应用研究也达到了世界先进水

大肠杆菌检测方法

大肠菌群及检验 一、大肠菌群介绍 大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。 大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。调查研究表明，大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。 大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在（如沙门氏菌、志贺氏菌等），因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。 大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被国内外广泛应用于食品卫生工

作中。 二、大肠菌群检验方法： 由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，即：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。因此大肠菌群的检测一般都是按照它的定义进行。 目前国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准和原国家商检局制订的行业标准。两个标准方法在检测程序上略有不同。 （一）国家标准：国家标准采用三步法，即：乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。 乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。 分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上，36±1℃培养18-24h，观察菌落形态。 证实试验：挑取平板上的可疑菌落，进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h，观察产气情况。 报告：根据证实为大肠杆菌阳性的管数，查MPN表，报告每100ml（g）大肠菌群的MPN值。

枯草芽孢杆菌的应用

学年论文（课程设计） 题目：枯草芽孢杆菌的应用 学院生命科学学院 学科门类理科 专业生物技术 学号2010445059 姓名陈家怡 指导教师郭立格 2012年7月6日 目录 枯草芽孢杆菌的应用 (3) 摘要 (3) ABSTRACT (4) 1.枯草芽孢杆菌的基本资料 (5)

1.1简介 (5) 2.枯草芽孢杆菌的研究现状及主要应用领域..................................................................................-5-. 2.1枯草芽孢杆菌的研究现状 (5) 2.2枯草芽孢杆菌的主要应用领域 (5) 2.2.1枯草芽孢杆菌在医药方面的应用 (5) 2.2.1.1纳豆激酶的发现及应用 (5) 2.2.1.2 脂肪酶 (6) 2.2.2枯草芽孢杆菌在农业中的应用 (6) 2.2.2.1枯草芽孢杆菌在饲料中的应用 (6) 2.2.3 枯草芽孢杆菌在动物养殖中的作用 (6) 2.2.4 枯草芽孢杆菌在农作物病虫防治中的作用 (6) 2.2.5枯草芽孢杆菌在现代科学研究中的应用 (7) 2.2.5.1枯草芽孢杆菌表达系统的研究 (7) 2.2.5.2枯草芽孢杆菌细胞质融合方面的研究 (7) 3.枯草芽孢杆菌应用中存在的问题 (7) 4.枯草芽孢杆菌制剂作用机理及应用效果 (7) 4.1枯草芽孢杆菌的作用机理 (7) 4.1.1生物夺氧 (7) 4.1.1.1拮抗致病微生物，改善体内外生态环境 (8) 4.1.1.2增强动物体的免疫功能 (8) 4.1.1.3产生多种消化酶 (8) 4.1.1.4产生多种营养物质 (8) 4.2枯草芽孢杆菌在动物生产上的应用效果 (9) 5.展望 (9) 参考文献 (9) 枯草芽孢杆菌的应用 摘要

出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法

出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法 食品商务网 2005-12-14 12:00:00.0 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 SN 0169-92 代替 ZB X09 002一88 Method for examination of coliform, fecal coliform and escherichia coli in food for export 1 主题内容与适用范围 本标准规定了出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌的检验方法。 本标准适用于出口食品的检验。 2 设备和材料 2.1 吸管: 1mL,具0.1mL刻度；5mL和10mL,具1mL刻度。 2.2 水浴箱：44.5±0.5℃。 2.3 培养箱：36±1℃,44.5±0.5℃。 2.4 冰箱: 0~5℃和-15~-20℃。 2.5 均质器。 2.6 乳钵和研棒。 2.7 平皿：直径90mm。 2.8 天平：感量0.1g。 2.9 显微镜。 2.10 稀释瓶：100mL、200mL和500mL三角烧瓶及广口瓶。 2.11 玻璃珠：直径约5mm。 2.12 菌落计数器。 3 培养基及试剂 3.1 月桂基硫酸盐胰蛋白(月示)(LST)肉汤。 3.2 煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤。 3.3 EC 肉汤。 3.4 伊红美蓝琼脂(EMB)。 3.5 营养琼脂斜面。 3.6 色氨酸肉汤。 3.7 MR-VP培养基。 3.8 Korser氏枸椽酸盐肉汤。 3.9 结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)。 3.10 Butterfield 氏磷酸盐缓冲稀释液。 3.11 生理盐水。 3.12 革兰氏染色液。 3.13 Kovacs氏靛基质试剂。 3.14 甲基红指示剂。 3.15 Voges-pros kauer(V-P)试剂。 4 样品制备 4.1 以无菌操作取有代表性的样品。如有包装则用75％乙醇在开口处擦拭后取样。若不

枯草芽孢杆菌在养殖上的应用及其作用效果

枯草芽孢杆菌在各种养殖动物上的应用及其作用效果 1.蛋鸡、种鸡 微生态饲料添加剂应用在产蛋鸡饲料能够提高蛋重，对输卵管和卵巢起到修复保健作用，并显著改善蛋壳质量(增加光洁度，减少脏蛋和斑纹等，增加蛋壳颜色等)，稳定蛋鸡生产性能延长产蛋高峰期。提高种鸡受精率孵化率，减少破蛋率。降低料蛋比0.05-0.10，降低死淘率10%以上，提高产蛋率5%-10%。 2.肉鸡 促进家禽健康成长，能有效改善肉禽羽毛光亮，酮体品质，冠红脚黄。提高饲料转化率，缩短饲养周期，增强抗病力，辅助药物治疗，加快肉禽病体康复。日增重提高7%-15%以上，降低料肉比0.05-0.15以上 3.雏禽 提高雏禽的成活率整齐度，增强品相。预防骨质疏松，促进排除胎毒和卵黄快速吸收，预防雏禽长途运输引起脱水症。预防因接种疫苗、转群、断喙、换料等应激反应。降低药费50%-80% 4.仔猪、母猪 提高母猪产奶量，增强免疫力，减少仔猪发病率。增强食欲，明显提高日增重。提高种公猪精子活力，增强母猪受精率，提高牲畜生产性能，增加仔猪成活率。日增重增加 7%-10%，降低料肉比0.05-0.15， 降低药费50%-80%。 5.奶牛、肉牛、羊、马 保持饲料品质，改善适口性;调制安全卫生的基础饲料，提高动物生产性能，促进动物健康;减少精料饲喂量，既降低因摄入浓缩料过多而导致的代谢疾病和繁殖障碍，又节约成本，提高养殖收益。杜绝胃酸中毒，能显著增强牛马羊反刍次数，加强瘤胃收缩，有效增强胃肠平滑肌蠕动，促进小肠的消化吸收及胃排空。 产奶量增加5%-10%以上，降低料奶比0.05-0.15 6.毛皮动物 改善毛皮动物毛、爪、表皮等组织生长色泽，毛发均匀度、整齐度。预防皮肤病的发生。 妊娠期出生重5%-8%，成活率提高10%-20%，腹泻率降低50%-90% 7.水产动物 强力分解和矿化水中残饵、粪便、生物残骸等有机物，减轻有机物自然腐败产生的黑臭，促进水草生长和维持高温季节的水草繁茂，为鱼类创造理想的生长环境。抑制病原菌弧菌等繁殖，增强养殖动物免疫力，显著促进鱼类生长发育，提高池塘整体经济效益，减少有机物厌氧腐败耗氧，促进水草光合作用产氧，改善鱼类的摄食和栖息环境。 吃食性鱼类增重30%以上，滤食性鱼类增重20%-25%，饲养密度提高30%以上，中国对虾育苗成活率提高50%-60% 长沙泰莱生物科技有限公司坐落于湖南省长沙市经济技术开发区，紧邻湖南农业大学和湖南农科院，科研条件得天独厚。公司依托国内著名微生物学家、菌种学博士及科研实验室，结合国内外先进的现代生物技术，集研发销售于一体，致力于服务绿色种植、有机肥料、生态养殖、生态环保等领域。 公司以开发各类农业有机肥发酵菌种、饲料发酵菌种、各类芽孢杆菌、微生态制剂等产品为核心，主营有生物有机肥发酵剂、微生物饲料发酵剂、芽孢杆菌、微生态制剂等系列产品。

最新整理大肠杆菌的检测(MPN计数法)教学提纲

食品微生物检验技术课程综述大肠杆菌的检测（MPN计数法） 院系：食品科学与药学学院 班级：食科114 姓名：张花 学号：114031431 组长：张军玲 成员：张花 赵晶郁 朱娟娟

大肠杆菌Petrifilm测试片计数法 摘要 食品检测是反映食品加工、贮藏、运输、等环节的卫生与安全状况的重要手段，而大肠菌群检测则是食品检测的重要指标均之一。根据定义大肠菌群是在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和碱性厌氧的革兰氏阴性芽胞杆菌。其主要检测意义在于反映食品卫生状况并推测其在肠道致病菌的可能性。Petrifilm大肠菌群测试片是由美国3M生产的一种预先制备好的VRB平板培养基系统，并添加了TTC作为菌落指示剂便于菌落判读，而上层薄膜可以起到对大肠菌群发酵产生的气体截留的作用。该方法目前已被多数权威机构认可，并在国内很多实验室开展运用。 关键词大肠杆菌Petrifilm测试法

1设备和材料 1.1恒温培养箱：36±1℃。 1.2冰箱2~5℃。 1.3恒温水浴箱:44.5±0.2℃。 1.4天平：感量0.1g。 1.5均质器 1.6振荡器。 1.7无菌吸管：lmL(具0.01 mL刻度)、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。 1.8无菌锥形瓶：容量500mL。 1.9 玻璃珠:直径约5mm。 1.10pH计或pH比色管或精密pH试纸 1.11试管架。 2. 培养基和试剂 2.1月桂基硫酸盐胰蛋白胨（ LST ）肉汤。 2.2EC肉汤。 2.3蛋白胨水。 2.4缓冲葡萄糖蛋白胨水（MP-VP实验用）。 2.5磷酸盐缓冲液。 2.6无菌生理盐水:称取8.5g氯化钠溶于1000ml蒸馏水中，121℃高 压灭菌15min。

枯草芽孢杆菌使用说明

枯草芽孢杆菌(活菌数200亿/400亿) 一、枯草杆菌概述：枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种。单个细胞 0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。在遗传学研究中应用广泛，对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研究较清楚。广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名。 二、枯草芽孢杆菌的作用机理：枯草芽孢杆菌大量应用于生物肥料。当作用于作物或土壤时．能够在作物根际或体内定殖，并起到特定肥料效应。目前，微生物肥料在培肥地力，提高化肥利用率，抑制农作物对硝态氮、重金属、农药的吸收，净化和修复土壤，降低农作物病害发生，促进农作物秸秆和城市垃圾的腐熟利用．保护环境。以及提高农作物产品品质和食品安全等方面表现出了不可替代的作用。 三、枯草芽孢杆菌的使用说明： 特点：1.肠道定殖能力强。 2.耐氧化、耐高温、耐酸碱、耐挤压和耐温度变化，满足不同的肥料生产需求。 3.绿色、安全、高效、较少抗生素药物的使用。 成分含量：枯草芽胞杆菌有效活菌数大于200亿/克 用法用量：

贮藏：阴凉、干燥处密封保存。 保质期：密封保存不少于18个月。 四、枯草芽孢杆菌的应用范围：枯草芽孢杆菌不仅在肥料中应用比较广泛，在污水处理及生物肥发酵或发酵床制作中应用也相当广泛，是一种多功能的微生物。 1、市政和工业污水处理，工业循环水处理，腐化槽、化粪池等处理，畜牧养殖动物废料、臭味处理，粪便处理系统，垃圾、粪坑、粪池等处理； 2、畜牧、家禽、特种动物及宠物养殖，水产养殖； 3、可以与多种菌种混配，在农业生产中具有重要作用。

枯草芽孢杆菌

枯草芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌拉丁学名Bacillus subtilis (Ehrenberg) Cohn 芽孢杆菌属的一种。单个细胞0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。 中文名：枯草芽孢杆菌 其他外文名：Bacillus subtilis 类型：是芽孢杆菌属的一种 即“枯草杆菌”，芽孢杆菌属的一种。单个细胞0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。有的菌株是α-淀粉酶和中性蛋白酶的重要生产菌；有的菌株具有强烈降解核苷酸的酶系，故常作选育核苷生产菌的亲株或制取5'-核苷酸酶的菌种。在遗传学研究中应用广泛，对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研究较清楚。广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名。 长沙泰莱生物科技有限公司专业分离提纯枯草芽孢杆菌菌种。 成份含量 枯草芽孢杆菌及生物酶、维生素、微量元素等辅助剂 功效特点 1、本品对特殊菌体进行促芽孢和微胶囊包被处理，在孢子状态下稳定性好，能耐氧化；耐挤压；耐高温，能长期耐60°C高温，在120°C温度下能存活20分钟；耐酸碱，在酸性胃环境中能保持活性，可以耐唾液和胆汁的攻击，是饲料微生物中可100%直达大小肠的活菌。 2、枯草芽孢杆菌以孢子状态进入消化道后，迅速由休眠状态复活，在短期内繁殖成高含菌量的优势种群，消耗掉肠道内大量氧气，并能产生过氧化氢、细菌素，建立微生态平衡，促进有益厌氧微生物的繁殖，抑制有害细菌（大肠杆菌、沙门氏杆菌）的生长，从而预防腹泻、下痢等肠胃道疾病。 3、在快速繁殖过程中，产生大量多种维生素、有机酸、氨基酸、蛋白酶（特别是碱性蛋白酶）、糖化酶、脂肪酶、淀粉酶，能降解植物性饲料中复杂的有机物，从而促进消化吸收，提高饲料利用率，防止动物消化不良，出现“饲料便”等状况发生。 4、本品安全高效，无药残，无毒副作用，能减少抗生素药物的使用。同时缓解动物不进食，生长缓慢等不良应激反应状态，恢复由于用药造成的动物体质下降，提高疫苗抗体水平等综合抗病力。 5、除臭驱蝇，减少污染，控制细菌性疾病，能减少粪便中氮、磷、钙的排泄量，减少粪便臭味及有害气体排放，表现为动物粪便臭味逐步减轻，减少饲料蛋白质分解为氨气浪费，从而减少环境污染。 6、改善肉蛋奶品质，生产“绿色肉”、“农家蛋”、“无抗奶”，本品通过增强消化吸收功能，充分吸收利用饲料中营养成份及原料的天然色素，无需添加化学色素苏丹红、加丽素红造成对人体的有害物质及影响畜禽产品天然食用风味，可媲美家养畜禽肉。能天然增加动物产品着色度和食用风味，猪只皮肤红润，毛色发亮；肉鸡肉鸭颜色加深；改善蛋壳的质量和颜色，蛋清厚稠，蛋黄鲜红；水产动物颜色更加健康，无斑点。

枯草芽孢杆菌

枯草芽孢杆菌的简介和在各领域的作用 一、枯草芽孢杆菌简介 枯草芽孢杆菌，是芽孢杆菌属的一种。单个细胞 0.7~0.8×2~3微米，着色均匀。无夹馍，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色。枯草芽抱杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用。枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间接抑制其他致病菌生长。枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用，能合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，提高动物体内干扰素和巨噬细胞的活性，在饲料中应用广泛。它还可以用来改善水质，应用在污水处理和环境保护中。和其他微生物混合使用，还可以用于生物肥料和土地改良等。 二、枯草芽孢杆菌的应用领域 枯草芽孢杆菌是一种很好的菌种，应用领域很广，可以运用在饲料公司。用作饲料添加剂。可以用在生物有机肥公司，用作生物肥料的发酵剂，可以应用在养殖场，直接添加给动物吃，可以应用在鱼塘净化水质。或者一些城市环境监测部门或环保公司，他们勇于污水或

污染物的处理。以及一些糖厂或公司用于治理污染等. 三、枯草芽孢杆菌在农业中的作用 1、提高作物抗病、抗寒、抗旱能力 2、增加土壤养分、改良土壤结构、提高化肥利用率； 3、促进土壤中的有机质分解成腐殖质，刺激作物生长。 4、促进作物生长、成熟、降低成本、增加产量、提高收入； 5、有一定的固氮、解磷、解钾作用。 四、枯草芽孢杆菌在水产种的作用 1、枯草芽孢杆菌有肥水的作用 枯草芽孢杆菌制剂种的活菌，可以在水中产生多种分解酶，将有机肥中的大分子分解成为小分子，但这一过程发生在芽孢杆菌激活扩繁殖之后。 制剂种枯草芽孢杆菌代谢产生的酶类。枯草芽孢杆菌制剂中有丰富的多种酶类，比如蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、多糖酶等等。这些酶类在进入水中之后就开始发挥分解有机肥的作用。实践证明，在水体中添加芽孢杆菌制剂可使水体变绿（肥水）的时间提前三天左右，随着水温的升高，提前的速度还会更快。 2、枯草芽孢杆菌有嫩水的作用 嫩水，水肥而不老 所谓老水，一是指浮游生物大量死亡，水色发黑；二是指水色过浓，透明度过低（<１０ｃｍ），浮游生物量过大，藻类的光合作用速

大肠菌群测定的操作细则(DOC)

大肠菌群测定的操作细则 大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。 食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。 1 设备和材料 1.1 温箱：36±1℃。 1.2 冰箱:0～4℃。 1.3 恒温水浴:44.5±0.5℃。 1.4 天平。 1.5 显微镜。 1.6 均质器或乳钵。 1.7 平皿:直径为90mm。 1.8 试管。 1.9 吸管。 1.10 广口瓶或三角烧瓶:容量为500mL。 1.11 玻璃珠:直径约5mm。 1.12 载玻片。 1.13 酒精灯。 1.14 试管架。 2 培养基和试剂 2.1 乳糖胆盐发酵管:按GB 4789.28中4.9规定。 2.2 伊红美蓝琼脂平板:按GB 4789.28中4.25规定。 2.3 乳糖发酵管:按GB 4789.28中4.10规定。 2.4 EC 肉汤:按GB 4789.28中4.11规定。 2.5 磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中 3.22规定。 2.6 生理盐水。 2.7 革兰氏染色液:按GB 4789.28中2.2规定。 3 操作步骤 3.1 检样稀释 3.1.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。固体检样最好用均质器,以8 000-10 000 r/min的速度处理1min,做成1:10的均匀稀释液。3.1.2 用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混匀,做成1:100的稀释液。 3.1.3 另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1支1mL 灭菌吸管。 3.1.4 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释度,接种3管。 3.2 乳糖发酵试验 将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发酵管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管,置36±1℃温箱内,培养24±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进行。

微生态制剂枯草芽孢杆菌的作用

枯草芽孢杆菌是一种嗜温、好氧、产芽孢的杆状细菌，该菌在自然界中广 泛存在，对人畜无毒无害，不污染环境，能产生多种抗菌素和酶，具有广谱抗 菌活性和极强的抗逆能力。 一、枯草芽孢杆菌的作用机理 1、生物耗氧 2、产酶产酸 3、产生抗菌物质 二、枯草芽孢杆的作用 1、动物饲料添加剂 （1）枯草芽孢杆菌为需氧菌，在生长过程中需要大量的氧气，进入动物肠道内，消耗大量的游离氧，降低了肠内氧浓度和氧化还原电势，改善了乳酸杆菌、双歧杆菌等厌氧菌的生长环境，有利于厌氧菌的生长，保持肠道微生态系 统的稳衡，同时使肠道中原本存在的需氧菌肠杆菌等的生长因缺氧受到抑制， 提高动物机体抗病能力，减少胃肠道疾病发生几率。 （2）枯草芽孢杆菌能提高动物生产性能是其产生多种消化酶的一个重要体现，这一点上枯草芽孢杆菌显得尤为突出。枯草芽孢杆菌具有较强的蛋白酶、 淀粉酶和脂肪酶活性，同时还具有降解饲料中复杂碳水化合物的酶，如果胶、 葡聚糖、纤维素等酶，其中很多是动物本身不具有的酶。枯草芽孢杆菌在动物 肠道内生长繁殖，能产生多种营养物质如维生素、氨基酸、有机酸、促生长因 子等，参与动物机体新陈代谢，为机体提供营养物质。 （3）枯草芽孢杆菌能促进动物肠道相关淋巴组织处于高度的“免疫准备状态”，同时使免疫器官发育加快，免疫系统成熟快而早，T、B淋巴细胞数量增多，动物体液和细胞免疫水平提高。 （4）拮抗致病微生物，改善体内外生态环境。枯草芽孢杆菌能显著降低肠道大肠杆菌、产气荚膜梭菌、沙门氏菌的数量，使机体内的有益菌增加而潜在 的致病菌减少，因而排泄物、分泌物中的有益菌数量增多，致病性微生物减少，从而净化了体内外环境，减少疾病的发生。 2、在水产养殖中的作用 （1）枯草芽孢杆菌能分泌蛋白酶等多种酶类和抗菌物质，使池底积累的大量残余饵料、排泄废物、动植物残体以及有害气体(氨、硫化氢等)，使之先分 解为小分子(多肽、高级脂肪酸等)，后分解为更小分子的有机物(氨基酸、低级脂肪酸、单糖、环烃等)，最终分解为二氧化碳、硝酸盐和硫酸盐等，有效降低了水中的COD、BOD，使水体中的氨基氮(NH3-N)、亚硝基氮(NO2-N)和硫化物浓 度降低，从而有效地改善水质。 （2）能为以单细胞藻类为主的浮游植物提供营养物质，促进繁殖。这些浮游植物的光合作用，又为池内底栖水产动物的呼吸、有机物的分解提供氧气，

枯草芽孢杆菌在肥料中的应用

枯草芽孢杆菌在肥料中的应用 一、枯草杆菌概述： 枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种。单个细胞0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多 种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。在遗传学研究中应用广泛，对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机 制研究较清楚。广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名。 二、枯草芽孢杆菌的作用机理： 枯草芽孢杆菌大量应用于生物肥料。当作用于作物或土壤时．能够在作物根际或体内定殖，并起到特定肥料 效应。目前，微生物肥料在培肥地力，提高化肥利用率，抑制农作物对硝态氮、重金属、农药的吸收，净化 和修复土壤，降低农作物病害发生，促进农作物秸秆和城市垃圾的腐熟利用。保护环境。以及提高农作物产 品品质和食品安全等方面表现出了不可替代的作用。 三、枯草芽孢杆菌的使用说明： 特点：1.肠道定殖能力强。 2.耐氧化、耐高温、耐酸碱、耐挤压和耐温度变化，满足不同的饲料生产需求。 3.绿色、安全、高效、较少抗生素药物的使用。 贮藏：阴凉、干燥处密封保存。 三、枯草芽孢杆菌的应用范围： 枯草芽孢杆菌不仅在肥料中应用比较广泛，在污水处理及生物肥发酵或发酵床制作中应用也相当广泛，是一 种多功能的微生物。 1、市政和工业污水处理，工业循环水处理，腐化槽、化粪池等处理，畜牧养殖动物废料、臭味处理，粪便处理系统，垃圾、粪坑、粪池等处理； 2、畜牧、家禽、特种动物及宠物养殖，水产养殖； 3、可以与多种菌种混配，在农业生产中具有重要作用。

大肠杆菌关键控制点

大肠杆菌关键控制点 川喜集团中央厨房文件编号：xzzj-hc-042 大肠杆菌处理办法编制审批：黄春 有效期：长期发布日期：2011.06.04 据国内外专家推荐，只要在个人卫生、食物储存、准备食材、食物烹饪等四个环节遵循以下措施，感染各种细菌（包括大肠杆菌）的机会就能够大幅度降低。这些意见对我们同样也具有很好的参考意义。 1.个人卫生 上完厕所后必须要洗手，处理食物前以及处理完生肉后也必须要洗手。 2.食物储存 检查冰箱冷藏的温度，要在0-5摄氏度之间，新鲜的食物要放在冰箱里；调料瓶、罐的盖子要弄紧，剩菜要用保鲜纸密封放在冰箱里；剩菜不要放超过两天；熟肉与生肉要分开放；生肉要放在冰箱最下层，防止肉汁滴到别的食物上。 3.准备食材 准备食材前必须洗手；洗手后手要弄干，湿手容易传播细菌；生鱼、生肉要与别的食物分开，与做好的食物也要分开；切过生鱼、生肉的刀千万不要直接再用来切别的食物；蔬菜沙拉必须要洗，即使买来之前已经洗过了；让厨房维持干净。 4.食物烹饪 如前所述，用合适的温度烹饪食物能就杀死绝大部分细菌，食物没做熟往往是食物中毒的主因。食物的所有部分都需要在70度以上加热2分钟(生活中很多的细菌在70度时就会被杀死，如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、霉菌)。肉类更是需要彻底煮熟，尤其不能残留血迹在表面上。相比起西方、日本的饮食方式，中国人更推崇熟食，这让中国人在饮食上感染细菌的机会降低不少。然而在夏天，拍黄瓜、凉拌西红柿等生拌蔬菜也往往受到喜爱，蔬菜沙拉也逐渐在城市变得十分流行。那么，在处理这些食材的时候，至少要彻底洗干净。 总的说来，“毒黄瓜”事件的危害目前距离国人尚远，大肠杆菌疫情在中国历史上也没有大规模爆发的先例，但这也不代表中国人可以高枕无忧。“毒黄瓜”事件并非孤例，其反映的，是食品安全方面更深层次的问题。一旦类似的新型病菌在中国爆发，其危害可能更加可怕。

枯草芽孢杆菌的功效特点介绍

乳酸菌　ｗｗｗ．ｙｋ１８８８．ｃｏｍ 枯草芽孢杆菌的功效特点介绍 1、枯草芽孢杆菌对特殊菌体进行促芽孢和微胶囊包被处 理，在孢子状态下稳定性好，能耐氧化；耐挤压；耐高温， 能长期耐60°C高温，在120°C温度下能存活20分钟；耐 酸碱，在酸性胃环境中能保持活性，可以耐唾液和胆汁的攻 击，是饲料微生物中可100%直达大小肠的活菌。 2、枯草芽孢杆菌以孢子状态进入消化道后，迅速由休眠状 态复活，在短期内繁殖成高含菌量的优势种群，消耗掉肠道 内大量氧气，并能产生过氧化氢、细菌素，建立微生态平衡， 促进有益厌氧微生物的繁殖，抑制有害细菌（大肠杆菌、沙 门氏杆菌）的生长，从而预防腹泻、下痢等肠胃道疾病。 3、在快速繁殖过程中，产生大量多种维生素、有机酸、氨 基酸、蛋白酶（特别是碱性蛋白酶）、糖化酶、脂肪酶、淀 粉酶，能降解植物性饲料中复杂的有机物，从而促进消化吸 收，提高饲料利用率，防止动物消化不良，出现“饲料便” 等状况发生。 4、本品安全高效，无药残，无毒副作用，能减少抗生素药 物的使用，增强免疫力。同时缓解动物不进食，生长缓慢等 不良应激反应状态，恢复由于用药造成的动物体质下降，提 高疫苗抗体水平等综合抗病力。 5、除臭驱蝇，减少污染，控制细菌性疾病，能减少粪便中

氮、磷、钙的排泄量，减少粪便臭味及有害气体排放，表现为动物粪便臭味逐步减轻，减少饲料蛋白质分解为氨气浪费，从而减少环境污染。 6、改善肉蛋奶品质，生产“绿色肉”、“农家蛋”、“无抗奶”，本品通过增强消化吸收功能，充分吸收利用饲料中营养成份及原料的天然色素，无需添加化学色素苏丹红、加丽素红造成对人体的有害物质及影响畜禽产品天然食用风味，可媲美家养畜禽肉。能天然增加动物产品着色度和食用风味，猪只皮肤红润，毛色发亮；肉鸡肉鸭颜色加深；改善蛋壳的质量和颜色，蛋清厚稠，蛋黄鲜红；水产动物颜色更加健康，无斑点。

各种菌的作用

《各种功能菌的作用》 一、枯草芽孢杆菌：增加作物抗逆性、固氮。 二、巨大芽孢杆菌：解磷（磷细菌），具有很好的降解土壤中有机磷的功效。三、胶冻样芽孢杆菌：解钾，释放出可溶磷钾元素及钙、硫、镁、铁、锌、钼、锰等中微量元素。 四、地衣芽孢杆菌：抗病、杀灭有害菌， 五、苏云金芽孢杆菌：杀虫（包括根结线虫），对鳞翅目等节肢动物有特异性的毒杀活性。 六、侧孢芽孢杆菌：促根、杀菌及降解重金属， 七、胶质芽孢杆菌：有溶磷、释钾和固氮功能，分泌多种酶，增强作物对一些病害的抵抗力。 八、泾阳链霉菌：具有增强土壤肥力、刺激作物生长的能力。 九、菌根真菌：扩大根系吸收面，增加对原根毛吸收范围外的元素（特别是磷）的吸收能力。 十、棕色固氮菌：固定空气中的游离氮，增产。 十一、光合菌群：是肥沃土壤和促进动植物生长的主力部队。 十二、凝结芽孢杆菌：可降低环境中的氨气、硫化氢等有害气体。提高果实中氨基酸的含量。十三、米曲霉：使秸秆中的有机质成为植物生长所需的营养，提高土壤有机质，改善土壤结构。 十四、淡紫拟青霉：对多种线虫都有防治效能，是防治根结线虫最有前途的生防制剂。 三种以上多种复合菌相互促进、相互补充，抗土传病害效果远远大于单一菌种 有益菌群相互协同，共同作用，能使作物达到高产丰产的效果. 1、促进快速生长：菌群中的巨大芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌等有益微生物在代谢过程中产生大量的植物内源酶，可明显提高作物对氮、磷、钾等营养元素的吸收率。 2、调节生命活动，增产增收：菌群中的胶冻样芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌等有益菌可促进作物根系生长，须根增多。有益微生物菌群代谢产生的植物内源酶和植物生长调节剂经由根系进入植物体内，促进叶片光合作用，调节营养元素往果实流动，膨果增产效果明显。与施用化肥相比，在等价投入的情况下可增产15%—30%。 3、果实品质明显提高：菌群中的侧孢芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌等可降低植物体内硝酸盐含量20%以上，能降低重金属含量，可使果实中Vc含量提高30%以上，可溶性糖提高2—4度。乳酸菌、嗜酸乳杆菌、凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等可提高果实中必需氨基酸（赖氨酸和蛋氨酸）、维生素B族和不饱和脂肪酸等的含量。果实口感好，耐储藏，卖价高。 4、分解有机物质和毒素，防止重茬：菌群中的米曲菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等有益微生物能加速有机物质的分解，为作物制造速效养分、提供动力，能分解连作有毒有害物质，防止重茬。 5、增强抗逆性：菌群中的地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌等有益微生物可增强土壤缓冲能力，保水保湿，增强作物抗旱、抗寒、抗涝能力；同时侧孢芽孢杆菌还可强化叶片保护膜，抵抗病原菌侵染，抗病，抗虫。

大肠杆菌和大肠菌群计数方法

大肠杆菌和大肠菌群计数方法 Enumeration of Escherichia coli and the coliform 章节内容： ?传统检测大肠菌群和大肠杆菌的方法 ?LST-MUG法检测冷藏和冷冻食品中的大肠杆菌 （除双壳类软体动物制品外） ?瓶装水检测方法 ?贝类和贝类肉制品检测方法 ?柑桔类水果汁中大肠杆菌检测方法 ?大肠菌群和大肠杆菌计数的其他方法 ?参考文件 大肠埃希氏菌，以前常称大肠杆菌，于1885年由德国儿科医生Theodor Escherich 发现，广泛存在于人类和温血动物的肠道中，是人类和动物肠道中需氧性共生菌的优势菌群，维持宿主健康部分生理功能必需的肠道菌。 大肠埃希氏菌属肠杆菌科，肠杆菌科包括许多种细菌，致病菌有沙门氏菌、志贺氏菌、和耶尔森氏菌。虽然大多数的大肠埃希氏菌为非致病菌，但是当宿主免疫力降低或细菌侵入肠道的外组织或器官时，可引起肠外感染。某些血清型可产生毒素，为致病性大肠埃希氏菌，可引起人类腹泻。 1892年，Shardinger建议把大肠杆菌作为粪便污染的指标。由于大肠杆菌广泛存在于人类和动物中，而在其他地方少见。再者，大肠杆菌能发酵葡萄糖（以后改为为乳糖）产生气体。与已知的非产气致病菌容易区别开来。 因此，大肠杆菌的检测已成为水和食品的近期粪便污染指标，表明可能含有致病菌。肠道中柠檬酸盐菌，克雷伯氏菌和肠杆菌能发酵乳糖，与大肠杆菌的生物型非常相似，使得把大肠杆菌作为健康威胁的指标，在实际应用中很复杂。于是，大肠菌群这个术语用来描述这类肠道菌，大肠菌群不是一个分类学上的定义，而是一个工作定义，指的是一群在35℃培养48h，产酸产气的，革兰氏阴性的芽孢杆菌。1914年，每国公共健康协会把大肠菌群作为一个重要的卫生标准。 虽然大肠菌群很容易检测到，但不一定与粪便污染有关系，因为在自然环境样品中也常存在。于是，粪大肠菌群就作为粪便污染的指标。首先由Eijkman提出，指的是在高温下发酵乳糖，是总大肠菌群的亚群，同时也称为耐热大肠菌群。粪大肠菌群的检测，除水、贝类、贝类养殖水在44.5℃进行，其他所有食品都在45.5℃进行。粪大肠菌群包含绝大部执蟪Ω司? 克雷伯氏菌也作为粪大肠菌群,但克雷伯氏菌的检出被认为与粪便污染并无关系。因此,大肠杆菌又被作为一个重要指标。快速鉴定大肠杆菌的新方法采用，使检测大肠杆菌相对容易了。

大肠杆菌的培养

大肠杆菌种子液的制备 牛肉膏蛋白胨培养基的配方： 液体培养基 牛肉膏 3.0g 蛋白胨10.0g 氯化钠 5.0g 水1000ml pH 7.4-7.6 固体培养基在液体培养基的基础上再加入1.5％－2.0％的琼脂 1 试管斜面与平板的制备 （1）称量按培养基配方比例依次准确称取蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、琼脂、水放入烧杯中。 （2）熔化在上述烧杯中先加入少于所需要量的水，用玻璃棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解，药品完全溶解后，补充水到所需的总体积。将称量好的 1.8％琼脂放入已溶的药品中，再加热熔化，最后补充所损失的水分。 （3）调PH 在未调PH前，先用精密PH试纸测量培养基的原始PH，如果偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH,边加边搅拌，并随时用PH试纸测 基PH直到PH达到7.4-7.6。反之用1mol/L HCl进行调节。 （4）分装将培养基分装入三个试管中和三角烧瓶中。其试管装量不超过管高的1/5，三角烧瓶的量不超过1/2加塞培养基分装完毕后，在试管口和三角烧瓶 口上塞上棉塞。 （5）包扎加塞后，将全部试管用麻绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、配制日期。 （6）灭菌将上述培养基以0.1Mpa,121℃,15min高压蒸气灭菌。 （7）倒平板，取三个已消毒的培养皿，在无菌操作台上用三角烧瓶中的培养基倒制三个平板培养基，冷却。 （8）搁置斜面将灭菌的试管培养基冷却至50℃左右，将试管口端搁在玻璃棒上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。 2 接种大肠杆菌斜面种子 (1) 取实验室储备的大肠杆菌BL21种子，在酒精灯附近，用接种环在已制备好 的斜面上接种上大肠杆菌。 (2) 将接种好的斜面放入37℃的恒温培养箱子中培养24h。 3 制备平板种子 (1) 在无菌条件下，取一支保存的大肠杆菌的斜面，用无菌生理盐水将菌种冲洗下 来，再用无菌生理盐水将其梯度稀释为1倍，10倍，100倍和1000倍，用移液 枪分别吸取各梯度的溶液涂布平板(每个梯度涂布三个平板，每次吸取溶液 100ul)，然后在37℃培养箱中过夜。 （12）次日，挑取生长状态好，特征明显的单个菌落，接种于新鲜灭菌的牛肉膏蛋白胨液体培养基中37℃，170r/min恒温振荡培养18h作种子培养液。 其后的实验中，每次实验前从种子培养液中吸取2ml菌液接种于新鲜灭菌的液体培养基中，37℃，170r/min恒温振荡培养