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Liquid Chromatography–Tandem Mass Spectrometry Analysis of Folate and Folate Catabolites

Liquid Chromatography–Tandem Mass Spectrometry Analysis of Folate and Folate Catabolites
Liquid Chromatography–Tandem Mass Spectrometry Analysis of Folate and Folate Catabolites

Liquid Chromatography–Tandem Mass Spectrometry Analysis of Folate and Folate Catabolites in Human Serum Rita Hannisdal,1,2*Per Magne Ueland,1,2,3and Asbj?rn Svardal1,2

BACKGROUND:Folate status is associated with several chronic diseases;thus accurate assessment of folate sta-tus has become important in the clinical setting and in epidemiological studies.The diversity of folate forms complicates the task of assaying endogenous folate.We developed and validated an assay that measures various forms of folate in addition to folate catabolites in human serum.

METHODS:We added ascorbic acid to serum samples from168healthy blood donors and39patients with renal failure,and precipitated the proteins with aceto-nitrile containing13C-labeled folate forms as internal standards.The supernatant was evaporated and the analytes redissolved in water.We then used liquid chromatography–tandem mass spectrometry to quan-tify5-methyltetrahydrofolate(5mTHF),4-?-hydroxy-5-methyltetrahydrofolate(hmTHF),folic acid(FA), 5-formyltrahydrofolate(5fTHF),p-aminobenzoylglu-tamate(pABG),and p-acetamidobenzoylglutamate (apABG).

RESULTS:Detection limits were0.07–0.52nmol/L,and the assay was linear to140nmol/L for all analytes.The mean serum folate concentration from168blood do-nors was22.7nmol/L,of which85.8%was5mTHF, 12.1%hmTHF,2.1%FA,and0.0%5fTHF.In the same individuals,the mean concentrations of pABG and apABG were0.07nmol/L and0.47nmol/L,respec-tively.The concentrations of folate catabolites were 22–30times higher in39patients with renal failure. This folate assay correlated well with the microbiologic assay(r2?0.92)and with measurement of serum fo-late as pABG equivalents(r2?0.93).

CONCLUSIONS:This method based on liquid chroma-tography–tandem mass spectrometry measures the most abundant folate species and2folate catabolites in human serum.

?2008American Association for Clinical Chemistry

Folate plays important roles in one-carbon metabo-lism,including maintenance and repair of DNA and remethylation of homocysteine to methionine.Im-paired folate status can cause megaloblastic anemia(1) and is a risk factor for neural-tube defects(2).Folate deficiency has also been associated with cardiovascular disease(3),dementia(4),cognitive impairment(5), and various forms of cancer,including colorectal and breast cancer(6).

The chemical structure of folate consists of a pterin moiety coupled through a methylene group to p-aminobenzoylglutamate(pABG).4Folate species differ with respect to the oxidation state of the pterin moiety,the number of glutamate residues connected, and the presence of different one-carbon substituents at the N-5and/or N-10position(7).

Folate in serum is present in the monoglutamate form,and the prevailing species is5-methyltetra-hydrofolate(5mTHF)(8,9).Formyltetrahydrofolate (8,9)and folic acid(FA)can also be present in serum (9),with the latter found only after ingestion of sup-plements or fortified food containing FA(9,10).

5mTHF can be oxidized to5-methyl-5,6-dihy-drofolate under mild oxidation conditions(oxygen). Under more severe conditions(hydrogen peroxide) 5mTHF is oxidized further to a compound originally identified as4-?-hydroxy-5-methyltetrahydrofolate (hmTHF)(11).Reexamination of the identity of this compound suggested that it has a pyrazino-s-triazine structure(12).

Folate catabolism is a major route of folate turn-over in humans and involves cleavage of the C9-N10 bond,producing a pterin and pABG(13).The majority of pABG is N-acetylated to p-acetamidobenzoyl-

1LOCUS for Homocysteine and Related Vitamins and2Section for Pharmacology, Institute of Medicine,University of Bergen,Bergen,Norway;3Haukeland University Hospital,Bergen,Norway.

*Address correspondence to this author at:Section for Pharmacology,Institute of Medicine,University of Bergen,N-5021Bergen,Norway.Fax?47-55-97-46-05;e-mail rita.hannisdal@farm.uib.no.Received August7,2008;accepted December16,2008.

Previously published online at DOI:10.1373/clinchem.2008.114389

4Nonstandard abbreviations:pABG,p-aminobenzoylglutamate;5mTHF,5-methyltetrahydrofolate;FA,folic acid;hmTHF,4-?-hydroxy-5-methyltetrahydro-folate;apABG,p-acetamidobenzoylglutamate;5fTHF,5-formyltrahydrofolate; LOQ,limit of quantification LOD,limit of detection;S/N,signal to noise.

Clinical Chemistry55:6

1147–1154(2009)

Automation and Analytical Techniques

1147

glutamate(apABG)before excretion(13).Several studies have suggested that folate catabolism plays an important role in regulating intracellular folate con-centrations,and increased folate catabolism is believed to take place in individuals taking oral contraceptives or anticonvulsant drugs(14).

Serum folate has been measured by various meth-ods(15),including chromatographic methods based on HPLC(16,17),LC-MS(18–21),and liquid chro-matography–tandem mass spectrometry(LC-MS/MS) (9,22).Despite efforts to establish reliable methods for determining folate status,large interassay and inter-laboratory differences have been reported(23–25),and each laboratory must establish its own reference intervals.

pABG and apABG in human urine were first iso-lated and quantified by McPartlin et al.(13),whose method involved ion exchange and sorbent extraction before HPLC analysis.Recently,pABG and apABG in serum were also measured by use of LC-MS/MS(26).

We describe a selective LC-MS/MS method for si-multaneous determination of5mTHF,hmTHF,FA, 5fTHF,pABG,and apABG in60?L of human serum. Sample processing is carried out by a robotic worksta-tion,and sample throughput is192samples per day. Materials and Methods

CHEMICALS

5mTHF,FA,5fTHF,pABG,and ascorbic acid were purchased from Sigma Chemical;13C55mTHF,13C5 FA,and13C55fTHF were obtained from Merck Eprova AG;and13C2pABG was from Larodane Fine Chemi-cals AB.hmTHF and13C5hmTHF were prepared from 5mTHF and13C55mTHF,respectively,as previously described(11),and apABG and13C2apABG were pre-pared from pABG and13C2pABG,respectively,as pre-viously described(13).Charcoal,mercaptoethanol, phosphoric acid,sodium phosphate,and acetic acid were purchased from Merck,and acetonitrile was from LabScan.

SOLUTIONS AND SAMPLES

Folate species and catabolites were prepared in20 mmol/L phosphate buffer,pH7.2.Solutions con-taining5mTHF,5fTHF,and pABG were supple-mented with56.8mmol/L ascorbic acid,8.25mmol/L mercaptoethanol,and1.9mol/L acetonitrile.Solu-tions containing hmTHF and FA were supplemented with56.8mmol/L ascorbic acid,and solutions con-taining apABG supplemented with8.25mmol/L mercaptoethanol.

Whole blood from168healthy Norwegian blood donors(70%males)with a mean age of45years(range 21–69years)was collected into Vacutainer tubes with no additive.The whole blood samples were kept for30 min at room temperature before centrifugation and separation of the serum fraction.We obtained39se-rum samples with increased serum creatinine in the range130–957?mol/L from the routine clinical chem-istry laboratory at Haukeland University Hospital.All samples were anonymized and could not be linked back to personal identity.Written consent was ob-tained from all blood donors.The study was examined by the institutional review board(REK Vest)and found to be of the quality control category,which under the Norwegian regulations in force is exempt from full re-view by the board.Thus the board has no objection to publication of the results.

We prepared folate-free serum by treating serum with activated charcoal(8mg/mL serum).The char-coal was kept in suspension by continuous mixing for 15min at room temperature,and then centrifuged at 23500g for15min.The treated serum contained no detectable folate(?0.1nmol/L)as measured by a mi-crobiologic assay(27).

All samples and stock solutions were stored at –80°C.

SAMPLE PROCESSING

Serum samples(60?L)were mixed with7?L of200 mmol/L ascorbic acid.The samples were deproteinized by adding120?L acetonitrile containing internal stan-dards;13C55mTHF(20.0nmol/L),13C5hmTHF(14.0 nmol/L),13C5FA(5.0nmol/L),13C55fTHF(5.0nmol/ L),13C2pABG(5.0nmol/L),and13C2apABG(5.0 nmol/L).The internal standards were kept at–80°C and added to the acetonitrile immediately before sam-ple preparation to avoid any oxidation.After centrifu-gation,70?L of the supernatant was transferred to an empty plate and evaporated with a vacuum centrifuge (Heto vacuum centrifuge)at30°C.The analytes were redissolved in50?L water,and the solutions were stirred for90s.All pipetting was carried out in96-well microtiter plates by a robotic workstation(ATplus2, Hamilton).The samples were placed at4°C in the sam-ple tray for?24h until analyses by LC-MS/MS. INSTRUMENTATION

We used an Agilent series HPLC system(Agilent Tech-nologies)equipped with a degasser,a column oven that included a column switcher,a quaternary pump for solvent delivery,and a thermostated autosampler for sample introduction.The HPLC system was coupled to an API4000Q Trap(Applied Biosystems/MDS SCIEX)tandem mass spectrometer outfitted with an electrospray ion source(Turbo Ion Spray TM).Analyst software(Applied Biosystems/MDS SCIEX)was used for HPLC system control and data acquisition and processing.

1148Clinical Chemistry55:6(2009)

LC-MS/MS

Samples were placed in a cooled(4°C)sample tray and injected into a Zorbax stable bond C8reversed-phase column[50?4.6mm(i.d.);particle size3.5?m]from Agilent Technologies.The column was mounted in the thermostated column compartment set at20°C.The flow rate was1.0mL/min.The mobile phase consisted of3solutions,A?650mmol/L acetic acid,B?water, and C?methanol,and was developed according to the following timetable:0–0.2min(70.0%A and30.0%

B),1.5–2.7min(3.5%A,26.5%B,and70.0%C),2.8–

3.5min(3.5%A,1.5%B,and95.0%C),and3.6–

4.8 min(70.0%A and30.0%B).All gradient steps were linear.The column effluent was directed into the mass spectrometer in the time interval of1.8–3.0min,oth-erwise to waste.

We optimized acquisition settings by infusion of a 10?mol/L solution of each analyte at a rate of1?L/ min using a Harvard Model11syringe pump con-nected directly to the ion source by PEEK(polyether ether ketone)tubing.Before entering the mass spec-trometer,this solution was mixed at a T-junction with mobile phase delivered at a rate of1.0mL/min and with a composition corresponding to the time of elution of the actual analyte.

The ion source temperature(500°C),the ion spray voltage(5500V),the collision gas(4psig),the ion source gas1(80psig),the ion source gas2(75psig), the cell exit potential(10V),and the activated interface heater were identical for all analytes.Other instrument parameters,mass transitions,and retention times for each compound are detailed in Table1.The analytes were detected in the positive ion mode by multiple-reaction monitoring.

Matrix effects were assessed by a postcolumn infu-sion procedure(28).The analytes(100?mol/L at a constant flow of20?L/min)were directed via a tee to the column effluent,and a prepared serum sample was injected.

LINEARITY AND ASSAY CALIBRATION

We assessed the linear range and limit of quantification (LOQ)by adding the analytes at concentrations of0.1–140nmol/L to folate-free serum.Limits of detection (LOD)were defined as the lowest concentrations that gave peaks with signal-to-noise(S/N)ratios of5,and LOQ were defined as the lowest concentrations that gave peaks with S/N ratios of10.The S/N ratio was determined as S/N?(peak height–baseline)/SD (baseline),using the S/N script supplied by Applied Biosystems(Analyst Ver.1.4.1).

For assay calibration we divided pooled serum into3portions and added5mTHF(0,17,and62nmol/ L),hmTHF(3,9,and54nmol/L),and FA,5fTHF, pABG,and apABG(1,5,and50nmol/L).We estimated the concentration of endogenous5mTHF to be8 nmol/L by adding known amounts of5mTHF to the serum samples and assuming equal recoveries of en-dogenous and added5mTHF and linearity of peak ar-eas vs total concentrations.The other analytes were not present above their LOD.

RECOVERY AND ANALYTICAL VARIATION

Folate-free serum and PBS were spiked with5mTHF, hmTHF,FA,5fTHF,pABG,or apABG at3different concentrations(5,15and45nmol/L).Twenty repli-cates were analyzed at each concentration in1analyti-cal run.Recovery(%)was calculated by comparing the peak area,corrected by internal standard,in folate-free serum to that in PBS.

For imprecision studies of the assay we used folate-free serum spiked with3different concentrations(low, medium,and high)of all the analytes.Intrarun impre-cision was determined by measuring20replicates of each concentration in1day.For interrun imprecision, 10replicates of each concentration were measured for a 2-week period.

Results and Discussion

SAMPLE PREPARATION

For sample preparation,we added ascorbic acid to the serum sample to avoid oxidation of folate.If any5mTHF had been oxidized to5-methyl-5,6-dihydrofolate before sample preparation,it would be reduced back to5mTHF after the addition of ascorbic acid(29).The samples were deproteinized by acetoni-

Folate and Folate Catabolites by LC-MS/MS

Clinical Chemistry55:6(2009)1149

trile.Because acetonitrile causes peak broadening on a C8-column,the supernatant was evaporated,and the analytes were redissolved in water.

LC-MS/MS

The folate assay was based on LC-MS/MS and was optimized to determine folate species and folate ca-tabolites in serum.The method measures 5mTHF,hmTHF,FA,5fTHF,pABG,and apABG and the corre-sponding 13C-labeled internal standards for all the analytes (Fig.1).The analytes were identified by their parent and product ions and by their retention times.All the analytes had the same mass difference between parent and product ion,147amu,which corresponds to the loss of the glutamate group.Two analytes,hmTHF and 5fTHF,shared the same ion pair,but use of the other product ions led to a substantial loss of signal.We therefore separated the 2analytes chromatographically.

We used a mobile phase containing high concen-tration of acetic acid (650mmol/L).There has been a report emphasizing that high signal response in the positive ion mode and efficient separation for a variety of compounds are obtained with a mobile phase con-taining a high acetic acid concentration (30).The total run time,which included column equilibration,was 4.8min.Data acquisition was divided into 2scan seg-ments (0–2.5min and 2.5–4.0min)to obtain opti-mized conditions for each analyte.

When stable isotope-labeled analogs are used as internal standards,matrix effects should not affect the

ratios between efficiencies of ionization of the analyte vs its internal standard (28,31).However,ion suppres-sion may reduce the signal intensity and thereby cause higher imprecision.We therefore assessed the matrix effect by a postcolumn infusion procedure.For all ana-lytes,the signal intensities showed a trough from 0.4–0.7min,which corresponded to the elution of the sol-vent front.Folates and folate catabolites eluted at longer retention times and in regions with essentially no ion suppression (see Figure S1in the Data Supple-ment that accompanies the online version of this article at https://www.wendangku.net/doc/f211650535.html,/content/vol55/issue6).

PERFORMANCE OF THE ASSAY

We assessed the LOD,LOQ,and linearity of the assay by analyzing a folate-free serum to which 5mTHF,hmTHF,FA,5fTHF,pABG,and apABG were added at concentrations of 0.1–140nmol/L.LOD,LOQ,and linearity data are presented in Table 2.LOD were in the range of 0.07–0.52nmol/L,and the assay was linear for all analytes up to 140nmol/L.Such assay performance allowed the quantification of folate species in serum from patients with folate deficiency (?7.5nmol/L)as well as adequate folate status.

Recovery was 103%–108%for 5mTHF,82%–94%for hmTHF,86%–90%for FA,91%–98%for 5fTHF,93%–96%for pABG,and 87%–91%for apABG.Re-coveries were independent of analyte concentration,which ranged from 5–45nmol/L.

The imprecision of the assay was investigated at low,medium,and high concentrations for all 6analytes

2.42.2

2.0

1.8

a p 5f T H F

F A

h m T

H F

5m T H

F

p A B G

2

.6

R e

t e n t i o n t i m e (m i n )

LC-MS/MS chromatogram of human serum.

the molecular transitions of pABG,5mTHF,hmTHF,FA,5fTHF,and apABG stable isotope-labeled internal standards in blue.

1150Clinical Chemistry 55:6(2009)

(Table3).The intra-run CVs ranged from5.0%–9.9%, and the inter-run CVs from3.3%–9.5%,and assay im-precision was comparable to that reported for other folate methods based on LC-MS/MS(9,32). DISTRIBUTION OF FOLATE SPECIES

The median(range)of total folate concentration in168 fresh serum samples from healthy Norwegian blood donors was19.8(7.0–174.0)nmol/L.The median (range)for5mTHF was16.4(5.8–71.3)nmol/L,for

hmTHF2.3(0.0–12.7)nmol/L,and for FA0.0(0.0–

74.8)nmol/L;5fTHF was not detected.This corre-

sponds to85.8%,12.1%,2.1%,and0%of the total

folate,respectively.

The high concentration of hmTHF in human se-

rum was unexpected and has not previously been re-

ported.hmTHF has been described as an oxidation

product of5mTHF(11),and we have detected sub-

stantial amounts in sera stored at room temperature

for weeks or at?20°C for years.But the samples used

for assay validation were stored in the dark on ice for

30–150min before centrifugation and separation of

the serum fraction,which was then stored at?80°C

for?2years.The possible existence of hmTHF in vivo

should be investigated in future studies,taking partic-

ular measures to avoid folate oxidation in vitro.

The observation that5mTHF is the most abun-

dant folate species in human serum confirms consis-

tent reports by others(9,33).The concentration of FA

was lower than that detected in US population(in

which FA accounted for8%of total folate)(9),and

only1of168sample donors had FA above2.0nmol/L,

i.e.,74.8nmol/L FA.This finding could be explained by

the fact that there is no dietary FA fortification in

Norway.

MATERIALS AND METHOD COMPARISON

We compared the total concentration of folate in168

serum samples measured by this LC-MS/MS method

with the concentrations measured by a microbiologic

method and a newly developed pABG assay(34).These

comparisons gave a correlation of r2?0.92and r2?0.93,respectively(Fig.2).The median(range)folate

concentration measured with the LC-MS/MS assay

[19.8(7.0–174.0)nmol/L]was higher than that ob-

tained with the microbiological method[12.5(4.6–

141.6)nmol/L]and the pABG assay[17.9(6.8–141.0)

nmol/L].The presence of hmTHF in the samples[2.3

Folate and Folate Catabolites by LC-MS/MS

Clinical Chemistry55:6(2009)1151

1152Clinical Chemistry55:6(2009)

the folate catabolites in serum.The method also measures hmTHF in serum,which is a folate form previously believed to occur only after strong oxida-tion of5mTHF(29).A fast and automated sample preparation combined with short retention time of the analytes ensures a high sample throughput of192 samples per24h.

Author Contributions:All authors confirmed they have contributed to the intellectual content of this paper and have met the following3 requirements:(a)significant contributions to the conception and design, acquisition of data,or analysis and interpretation of data;(b)drafting or revising the article for intellectual content;and(c)final approval of the published article.Authors’Disclosures of Potential Conflicts of Interest:Upon manuscript submission,all authors completed the Disclosures of Poten-tial Conflict of Interest form.Potential conflicts of interest: Employment or Leadership:P.M.Ueland,Foundation to Promote Research into Functional and Bevital.

Consultant or Advisory Role:None declared.

Stock Ownership:None declared.

Honoraria:None declared.

Research Funding:The Norwegian Cancer Society and Foundation. Expert Testimony:None declared.

Role of Sponsor:The funding organizations played no role in the design of study,choice of enrolled patients,review and interpretation of data,or preparation or approval of manuscript. Acknowledgment:We thank Torunn Eide for excellent technical assistance.

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33.Fazili Z,Pfeiffer CM,Zhang https://www.wendangku.net/doc/f211650535.html,parison

of serum folate species analyzed by LC-MS/MS with total folate measured by microbiologic assay and Bio-Rad radioassay.Clin Chem2007;53: 781–4.

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ment of folate in fresh and archival serum sam-

ples as p-aminobenzoylglutamate equivalents.

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(second trimester)and nonpregnant controls dur-

ing folic acid supplementation:stable-isotopic la-

beling of plasma folate,urinary folate and folate

catabolites shows subtle effects of pregnancy

on turnover of folate pools.J Nutr2001;131:

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tive cleavage of folates:a critical study.Anal

Biochem1978;84:277–95.

1154Clinical Chemistry55:6(2009)

金黄色葡萄球菌

金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌革兰氏染色显微照片 金黄色葡萄球菌 (Staphyloccocus aureus Rosenbach) 是人类的一种重要病原菌,隶属于葡萄球菌属(Staphylococcus),有“嗜肉菌"的别称,是革兰氏阳性菌的代表,可引起许多严重感染。而对于金黄色葡萄球菌在速冻食品中的存在量,卫生部于2011年11月24日公布食品安全国家标准《速冻面米制品》,允许金葡菌限量存在。 目录 简介 流行病学 引发病症 球菌检验 球菌控制 感染处理 限量存在 简介 金黄色葡萄球菌细胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸。其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴性菌致密,染色时结晶紫附着后不被酒精脱色故而呈现紫色,相反,阴性菌没有细胞壁结构,所以紫色被酒精冲掉然后附着了沙黄的红色。金黄色葡萄球菌与青霉素的发现有很大的渊源。当年弗莱明就是在他的金黄色葡萄球菌的培养皿中发现有些球菌被杀死了,于是发现了青霉素。而研究也表明青霉素只对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳性菌作用明显。这也是由肽聚糖层的厚度和结构造成的。新出现的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,被称作超级细菌,几乎能抵抗人类现在所有的药物,但是万古霉素可以对付它。典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8μm 左右,显微镜下排列成葡萄串状。

显微图像 金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜,革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度37°C,最适生长pH7.4,干燥环境下可存活数周。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径1~2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在10~15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。甲基红反应阳性,VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝酸盐,液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对磺胺类药物敏感性低,但对青霉素、红霉素等高度敏感。对碱性染料敏感,十万分之一的龙胆紫液即可抑制其生长。 流行病学 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在,空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因而,食品受其污染的机会很多。美国疾病控制中心报告,由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位,仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题,在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒,占整个细菌性食物中毒的33%,加拿大则更多,占到45%,我国每年发生的此类中毒事件也非常多。 金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点:季节分布,多见于春夏季;中毒食品种类多,如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外,剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%,所以人畜化脓性感染部位,常成为污染源。 一般说,金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品:食品加工人员、炊事员或销售人员带菌,造成食品污染;食品在加工前本身带菌,或在加工过程中受到了污染,产生了肠毒素,引起食物中毒;熟食制品包装不密封,运输过程中受到污染;奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时,对肉体其他部位的污染。金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶:

网络骗术大揭密

1:电子商务“鱼龙混杂” 正规电子商务网站购物也遭黑 陈先生找到一家票价低于市场价近一半的电子商务网站,兴奋之余赶紧下单,并按对方要求直接汇款。 两天后还未收到票的陈先生拨打骗子电话竟是空号,查看网站竟无任何第三方的身份资质信息。 【骗术揭秘】低价骗诱法:诈骗者的商品标价往往比市场价格低将近一半,并以海关罚没、走私、朋 友赠送等借口骗取信任。 拒绝安全支付法:编造借口拒绝使用网站提供的第三方安全支付工具。 伪造网站交易法:伪造与真实网站相似的假冒网站,或者没有任何网站的身份资质信息。 【中国反钓鱼网站联盟提醒】 一、网上出售的商品价格明显低于市场售价应多加小心,网上交易务必使用第三方支付平台,若无法 使用,最好选择货到付款。 二、通过第三方网站身份诚信认证辨别网站真实性。目前不少网站已经在网站首页底部安装了第三方网站身份诚信认证(如站点卫士),可帮助网民判断网站的真实性。站点卫士通过对域名注册信息、网站信息、企业工商注册信息的三重对应验证,确定网站身份。网站在注册站点卫士、通过严格审核之后,首页底部将显示站点卫士的防伪图标,网民可通过点击图标查看该网站的全部验证信息,验证网站真假。网民在应用电子商务时应养成查看网站身份信息的使用习惯,企业也要安装第三方身份诚信标识,加强对消费 者的保护。 三、ICP备案:通过ICP备案可以查询网站的基本情况、网站拥有者的情况,对于没有合法备案的非 经营性网站或没有取得ICP许可证的经营性网站,根据网站性质,将予以罚款,严重的关闭网站。 四、目前大型的电子商务网站都应用了可信证书类产品,这类的网站网址都是“https”打头的,如果发 现不是“https”开头,应谨慎对待。 2:伪造金融网站、电子邮件守株待兔网上“垂钓” 小何到公司后打开电子邮箱,收到“招商银行”为了加强账户安全升级系统的邮件通知,需尽快重新设置账户密码,邮件末尾给出了URL链接,小何不敢怠慢,立刻点击进入更改密码,下午下班到家,再次登 陆网上银行却发现卡内3200元现金不翼而飞。 【骗术揭秘】诈骗者一般以银行、公安局等名义诱导公众点击“钓鱼网站,”受害者通过伪造网站“更改密码”时账号和密码就发送到骗子手上,获取卡号密码等信息后,骗子便将银行账户的存款迅速转移。【中国反钓鱼网站联盟提醒】一、牢记开户银行的正确网址,直接从电脑的地址栏登陆,不要选择非正规渠道进入。二、不要在网吧或办公室等多人共用的电脑上办理网银业务。三、金融机构都为网上银行用户开通了数字证书服务,可以较好地保护银行用户的安全。四、在登录网上银行时,需将U盾插入电脑USB端口并输入U盾密码,没有U盾他人无法登录你的网上银行。 3:即时通讯工具散布中奖信息诈骗高额钱财 小周收到来自“腾讯客服”的幸运用户“中奖信息”,奖金2万元。通过对方发来的网站链接,小周进入“腾讯官方网站”的专题页面,醒目位置还链接到了“深圳市公证处”的官方网站。按照网站的操作步骤,小周输入了验证码、真实姓名、身份证号、银行卡号、联系方式等信息。一个月后小周不但没有收到“奖品”,更 是连银行卡中的钱也无了踪影。 【骗术揭秘】一、诈骗者冒充客服人员,发送大量的中奖通知,骗取网友个人身份信息,盗取银行存款。二、诈骗者通过制作各类假冒的官方网站,引诱用户并骗取用户信任。三、诈骗者通过即时通讯工具,诱使用户拨打声讯业务电话激活某项服务或听取网友留言,从而诈取用户高额通信费用。【中国反钓鱼网站联盟提醒】一、勿轻信“中奖”消息———利用“中奖”骗取汇款是最常用的网络骗术。二、如果您的网络账户中存在财产或重要的隐私信息,请在输入账号和密码前注意确认所在网站是否为官方网站。三、不轻易拨打声讯业务的电话号码。如果欺诈者留下手机号码或者电话号码,可通过搜索引擎查询该号码的相关信息,同一号码在网络上公布信息有天壤之别,就要小心,很可能是网络欺诈。

网络最常见的招聘陷阱

网络最常见的招聘陷阱 2013年,将有大量的90后踏出大学校门,他们首次成为求职的主力军。网络招聘的兴起,不仅方便了90后大学应届毕业生,也方便了一些骗子———虚假招聘信息横行,让人防不胜防。在各大论坛、微博上,自称应聘受骗的事情屡见不鲜。专业人士提醒,网上求职要选择正规求职网站,莫轻信微博、论坛上未经审核发布的招聘信息。南都联合智通人才网总结网上常见的几种招聘陷阱,让90后求职者防患于未然。 陷阱一被世界五百强企业轻松录取 在网上公开个人简历后,在没有投递简历的情况下,有人会收到某“世界五百强”的录取电话,实习期底薪1500元,转正后2000元,提成3%-5%. 点评:一般世界五百强公司的招聘要求是:先递简历,然后初试、复试、口试、笔试,还有一个辩论赛。没有投递简历就收到“世界五百强”的录取通知,这样的机会几乎等于零。 支招:通过搜索引擎对录取电话进行检索,看是否该“世界五百强”企业的电话。如果检索到该电话与多个公司招聘信息对应,说明是骗子无疑。

陷阱二虚假电子商务公司招聘 如:某某国际电子商务公司急聘兼职月薪5000元,业务项目:代理全球二十多个国家四千多种产品,数千种商品采用量贩式经营,市场大,机会好。 点评:该类信息虚假之处为:面对无工作经验的求职者,无 需限制工作时间工作地点,在家或者在任何地点兼职该司代理产 品即可轻松获得高薪。同时,对代理产品无说明,或含糊不清, 如何进展工作完全让人摸不着头脑,总之,就是能让你轻松赚大钱。 支招:无工作经验的应届生找兼职,尽量寻找知名企业的招聘,通过正规的人力资源服务发布的招聘信息应聘,直接与企业 的招聘代表联系,详细了解兼职内容及工资结算情况。最后,对 于任何无来源的网络上的号码,不拨号、不回复、不发信息。 陷阱三黑职介招聘信息 具有合法资质的职介机构为公益性质,不会向求职者收取 “求职中介费”。然而黑职介往往要你先交一笔咨询费,再帮你 推荐工作。 点评:先以各种名义要求求职者缴纳一定数额的押金、介绍 费等,事实上并不介绍工作,或直接介绍各类生产普工的工种,

炒外汇经验教训.doc

几年的外汇交易担当工作,总结了几点所谓的经验,在此与大家一起探讨。 1、敢输不敢赢 这一是因为缺乏一个科学分析汇市行情的方法仅凭感觉盲目入市;二是没遇到一个好的担当帮助顾客资金管理和指导顾客如何做外汇交易。投机交易最忌讳的二字是“贪”与“倔”,聪明人的做法是任何时候都下止损单∶该切就得切,“宁断一指不断一臂”。 2、宁愿放过不要买(或卖)错 外汇交易有很多机会,这次没抓住机会千万别急,等下次有好的机会时再入市也不迟,不要斤斤计较,患得患失。做外汇交易永远记住这条:买进(或卖出)的不是外汇价位高低多少,而是外汇的趋势方向,所以是宁愿放过,不可买(或卖)错。 4、大商之下必有转折 “有事”指的是战争,这个战争不是局部小规模战争或一边倒的战争,而是具有一定影响和规模的战争。战争消耗的是美元,战争能刺激美国经济使美元涨。另外,石油、黄金涨,美元降;反之,美元涨也是一条经验。 上升之后下跌,下跌之后上升;上升之后盘整,下跌之后盘整;盘整之后上升,盘整之后下跌。 剑胆15:06:47 市场无外乎这几种情形 横盘确实值得好好研究 我的一个经验,如果水平横盘时间很长,那突破多半会延续原趋势,而不是反转 什么是高手,把简单的招式练到极至就是高手. 一种人工干预的短线交易风险控制方法:双人协作交易监督模式 总体上看,20世纪的股市交易是人类失败的历史,因为70%以上的人在里面亏损,20%的人虽然不亏但在浪费时间,10%的人盈利,只有极少数人取得了大成功:得到了暴利。当然,

在失败中也有点进步,就是理论上提出了几个新东西,提高了人们的认识,但由于其实际应用的效果非常有限,那点理论成果就显得微不足道。 3_ N+@ {$s3[ a#| j T$s'?0人们在股市失败的最大原因有二点:客观原因是股市多变,主观原因是人性贪婪的弱点。表观上看是风险控制失败。人们已经在技术上研究了很多控制风险的方法,包括交易平台提供的止损工具,但仍然难以避免偶然性的大亏损。对职业交易高手,已经不是技术方法的问题,就像一个熟练的司机技术已经过关,但仍然可能因为烦恼的情绪,失眠,喝酒等因素不能集中精力和情绪失控而发生车祸一样,交易者可能偶然偏离自己的正确方法和风险控制原则而导致大亏损。所以,只从交易的技术上采取风险控制措施是不够的,至少对90%以上的交易者是不够的。我认为尤其对短线交易(Day Trading)人为干预是避免毁灭性的灾难的最有效措施。风险投资家寻找金融市场每一个获利的机会t {"B x D.e9W { W e8M G O a B { G;v0有一个很大的失败原因一直为人们忽视,就是有史以来一直采取单人交易模式,即是一种无监管状态的个体化交易,这使得一些毁灭性的灾难在交易中普遍发生。对短线交易(Day Trading),我提出这样一种模式:交易员和监督员搭配的双人模式。交易员负责交易,监督员在风险范围内不作任何干预,一旦达到规定的风险临界状态就采取强制措施止损。为了不影响交易员,监督员最好使用另一台计算机监控且与交易员分隔在不同房间甚至不同地点,对交易员就好象不存在一样。无论对于机构还是个体散户,对于短线交易,这种双人的交易监督模式是非常必要的,它基本上可以避免交易中的毁灭性灾难。对于许多高手,只要不发生毁灭性灾难即使有失误也可以总体上在市场中盈利,多一个人工是绝对划算的。风险投资家寻找金融市场每一个获利的机会.m#I \8R+C ?-a&dE c g+A 风险投资家寻找金融市场每一个获利的机会[ h l!M0z4j2t P o"V 我相信,如果这种双人协作模式能够推广,人们在股市短线交易的亏损率将获得大面积改观,它将根本改变散户个体作业 期货是应该这样做的(转之期货人的博客) 引言 期货不该天天赌, 看错止损要服输. 轻仓顺势做波段, 探囊取物贵知足. 突破篇 横盘突破要紧跟, 突破价位做停损. 一旦转势风向变, 反手坚决假后真. 趋势篇 长期要看周月线, 拐点介入最关键.

金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌

金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。它在自然界中无处不在,空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因此,它很容易就能够污染一些食物来源,从而引发疾病。特别是金黄色葡萄球菌肠毒素,它是个世界性卫生难题,在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒,占整个细菌性食物中毒的33%,加拿大则更多,占到45%,中国金黄色葡萄球菌引起的食物中毒事件也时有发生。误食金葡菌污染的食品,可引起呕吐和腹泻等症状。因此,在本篇文献中,我们选取了关于金黄色葡萄球菌肠毒素的一部分内容进行了较为细致的思考。 文中提到,肠毒素能够引起人和哺乳动物肠胃道毒性反应。但是,金葡菌肠毒素同时也是一种典型的超级抗原。在免疫反应中,只需极微量,就能通过一种独特的机制,使之产生大量细胞因子和细胞毒性物质。从而抑制异常分裂的癌症细胞生长而可能起到治疗癌症的效果。 那么,肠毒素治疗肿瘤的机制是什么呢? 首先,肠毒素是一种超级抗原。超抗原是一类只需极低浓度就能激活大量T细胞克隆或B细胞克隆、产生极强免疫效应的物质。它远超普通抗原的多克隆激活能力,可视其为具非特异性免疫原性但无免疫反应性的抗原。它在体内能够活化CD4 + T细胞,这种细胞能分泌多种细胞因子。它们不仅能够直接或间接地杀伤肿瘤细胞,而且可以增加肿瘤细胞表达MHC 抗原分子,增强肿瘤细胞刺激宿主免疫系统的能力; 另一方面,这些细胞因子又刺激T细胞进一步增殖分化,而增殖分化的T细胞又将产生更多的细胞因子与细胞毒作用,共同导致肿瘤细胞的破坏溶解,从而形成级联效应,达到对肿瘤的治疗作用。 除了对肿瘤的治疗作用,肠毒素在一定浓度和不同途径给予时,还具备着非特异性促进人和哺乳动物细胞的有丝分裂效果。特别是对损伤部位的组织有促进分裂和生长作用,能够致使损伤组织快速愈合。故有利于对损伤组织的治疗。但这种反应作用的机制我们小组尚且还无法解释,希望在之后的课程中能够有所启发。

帮助网络赚钱新手揭秘网络骗局

网上赚钱相对来就是个比较轻松的活,机会也很多,但是更存在各种各样的骗局。今天只为和大家一起识破那些坑爹的网上赚钱骗局。 如果你是一个网络赚钱的新手菜鸟或是刚接触网赚什么都没懂,那么希望你花3分钟时间能把下面全文看完。如果你对网络赚钱有点熟悉了,但没赚到什么钱的,你可以看下前面带有★那段的话和骗局大全标题名称。听别的网友说,网络学徒吧还有最新网络骗局揭秘. 网上赚钱的工作骗局大全 1、网上兼职打字员工作 ★现在见得最多的就是网上兼职打字员了,TMD这个广告太多了,这个我都不想多说了,自己去分析下这个网上赚钱的工作,分析后还信这个的那可能要考虑下要不要选择创业了。“在样大学生,只要打打字,1万字1200元”一个普通的打字员每分我算打80字得了,1万就只要125分,想下他为什么不请个打字员每月发工资行了,125分给1200你呢? 更可恨的是这种骗局有的还往往要求给你付一定的定金,并且是要电话转账,于是乎你就慢慢的被忽悠着输入账号,密码。最后是钱没转到,你的月却没有了。回头再找人,却什么人也找不到了。

2、网上轻松日赚多不元,日赚100元、日赚200、500…. ★“新手必看,日赚200元教程免费分享”这广告好诱人哦,如果那家伙真能日赚百元,整天还用累死累活的发帖,发垃圾邮件,在QQ 群里发垃圾广告吗?更不用找Google做虚假广告啦。因为做广告也是需要成本的。大家想想;网上赚钱这么容易一天2小时就赚200元甚至更高,你还会去发垃圾广告吗?不早回家睡大觉啦。 要是都能这么容易的赚钱,我们早就是发达国家了,早就实现共产主义了。试问谁不想轻轻松松日赚200,国人好多人都有一种不劳而获的心理,这就是最后上当的原因! 3、免费培训,先培训后付费。 互联网有句经典的话“免费的才是最贵的”。先培训后付费这种典型的代表就是梅森创富学跟财富第六波。 骗子手法一:广告主声称,“日赚**元,免费的网赚培训”先学习,看效果,后付钱,呵呵,多好啊,太有诱惑力了。欺骗手段:往往是你学习一段时间,然后他们会告诉你,你需要一个网站,赚广告费,他们可以给你提供一个网站,其实网站程序一般是开源免费的了,就上淘宝买个空间、域名,做个站刚开始只一100左右,他给你一个要

金黄色葡萄球菌危害程度评估报告

金黄色葡萄球菌的危害程度评估报告 一、生物学特性 金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌,隶属于葡萄球菌属,可引起多种严重感染。金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8μm左右,显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜,革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度37°C,最适生长pH 7.4。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径1-2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在10-15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。甲基红反应阳性,VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝酸盐,液化明胶。 二、危害程度分类 根据中华人民共和国卫生部制定《人间传染的病原微生物名录》该菌危害程度为第三类。 三、致病性和感染剂量 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶,有报道目前出现越来越多的耐药菌株,MRSA即耐甲氧西林金黄色葡萄球,菌致病性也随着变强。 四、暴露的潜在后果 暴露后可能引起感染,菌量大时可使实验人员出现皮肤软组织感染、全身性感染、呼吸道感染、中毒、肠炎等。被感染后,成为传染源,可能对周围及环境造成污染,应及时得到治疗和控制。 五、感染途径 通过污染食品和水源经口传播,也可通过呼吸道和接触传播。 六、微生物在环境中的稳定性 葡萄球菌是无芽胞菌中抵抗力最强者,而干燥可达数月,加热80℃30min才被杀死。5%石炭酸,0.1%升汞10~15min死亡。1:100000~1:200000龙胆紫溶液能抑制其生长。对磺胺增效剂、青霉素、红霉素等较敏感,但耐药株逐年增多,MRSA即为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。 七、浓度和浓缩标本的容量

揭秘网上兼职所有骗局

揭秘网上兼职所有骗局 我从去年开端做网络职业至今,各种骗子基本上都遇到过,也看到了身边的兄弟上当的阅历!今日想起来写这篇文章,也是为了提示各位新人兄弟,防止上圈套;一起,期望各位新人兄弟真实晓得网赚这个职业,话不多说,切入正题。 众所周知!如今翻开任何一个网赚论坛或许网站,您会看到满屏幕的教你挣钱的广告? 真有这样大慈大悲的活菩萨?仍是另有所谋?教他人挣钱自身就是个悖论,网上99%的教他人挣钱 的项目都是骗得训练费的,剩余的0.9%是和传销有关。 我觉得搞网赚网上挣钱,图的就是挣钱。可是网络也和实际是相同的,有人使用咱们挣钱的心思,来骗得金钱。所以成果致使许多人在网上不光没有挣钱,反而上圈套了许多辛苦钱。这是我最不期望发作的工作。所以,今日给咱们总结一下当前的干流的哄人网赚项目。下面的这些我整理出来的几类网赚项目是坚决不能做的。 1、网上不时彩,不时彩署理坚决不碰。这是网上挣钱大骗子毒瘤之首,以兼职名义行赌博之实。许多人从前深陷其间。并且也买了所谓的算号软件,本以为会大赚个几十万,成果没一天赔了5千。通常赔钱之前的一个多星期,也会每天让你也赚点。但骗子就是使用咱们的这个心思来行骗,先是让你尝到甜头,然后让你血本无回。 2、自动充值软件坚决不署理。光秃秃的传销,中心都是价值亏空。怎样淘宝网还答应其出售呢?个人真实想不通!所谓的充值发生的价值可以忽略不计,朴实拉人头的阴谋! 3、所谓的网上兼职打字员,这也是毒瘤中的毒瘤。可能在某些赚友看来这个骗术很弱智。可是据不完全统计,就广东省因而上当报案的就有上千件,博傻理论的成功创作! 4、SP引诱短信,影视联盟教程:远景很夸姣,这类就是那些引诱短信,不漏点,无色情,也没有关联的法令束缚。前几年也的确有许多人因而赚大钱。如今基本是赚不了几个钱,可是仍是有人拿着这些教程处处哄人! 5、广告联盟互刷:给你一个废物站,再随意给你一个互点软件,说一个月能赚多少多少之类的,要你教多少押金。 6、先给你一个很大的馅饼:先教用软件刷他个人建的一个广告联盟,然后账户里边就多出了N多的钱。然后这时再和你说要交多少手续费才能取那些

索罗斯炒外汇技巧:外汇交易24条秘诀

索罗斯二十四条投资秘诀 秘诀一、人对真实的看法有所扭曲揭露生命神秘面纱的任务几乎不可能完成。理由很简单:要开始研究我们是谁或什么,以及我们怎么晓得存在着的任何事情,前提是我们必须能够用客观的态度看自己。麻烦的地方在于我们没有办法客观。唯一切合实际的行为,是集中精力了解这些遭到扭曲或有缺陷的认知,在塑造所有事件时所具有的意义,这个推论正是他投资理财策略的核心。 秘诀二、把市场预期纳入考虑索罗斯说真实生活中看不到均衡状态,在价格波动很大的金融市场,当然也看不到。现代的经济理论说,经济学的主要任务是研究供需间的关系,而不是研究供给和需求本身。索罗斯质疑这样的看法。索罗斯说,供给和需求曲线的形状不能假定已知,因为两者都含有参与者的期望在里面;参与者会对自己的期望所塑造的事件,抱着某种期望。索罗斯相信供给和需求会受市场的影响,这会导致价格波动,而非均衡。价格上涨时,固然会吸引买者进入,买进这个动作也有助于价格上涨,而使得趋势自我强化。 秘诀三、市场欠缺效率古典经济学假设金融市场会走向均衡状况。由于市场达成的均衡,所以可以假设完全的知识和完全的竞争能够得到。支持高效率市场理论的人真的相信,给了正确的分析工具和取得正确的信息,他们有可能预测市场未来的走向。这些理性主义者声称,由于投资人能针对一家公司取得完全的知识,所以每支股票的价格都恰好定在正确的价位上。也就是,每支股票的价格都是一组计算的理性结果;这种高效率市场的假设很简单,对乔治索罗斯来说,

它不是太过简单,更是大谬不然。索罗斯从不同的观点,看金融市场的运作方式,证明这个市场不是合乎理性的,不可能完全了解任何事情,包括金融市场在内。 秘诀四、注意认知和事实事件间的巨大差异在现实世界中,决定买进或卖出一支股票,不是取决于金融市场的均衡理念,而是根据市场处于不均衡状态的见解。索罗斯问:如果有均衡存在,为什么在看不出任何逻辑的情况下,市场价格会波动?因为金融市场的参与者有偏见,所以不可能有均衡状态。依索罗斯之见,我们不能主张均衡状态存在。因为在迈向那个均衡状态的行动过程,人的偏见总是掺杂在其内。金融市场是在不均衡的状态中运作。而且参与者的认知和实际的事件间,总有差距存在。如果差距微乎其微,就不值得担心害怕,因为那不会改变参与者的认知。如果差距很大,这样的差距就必须纳入考虑,因为他会改变那些参与者的认知。 秘诀五、看出人和事间的关联认为经济生活合乎理性和逻辑的人表示,金融市场中没有差距、矛盾存在。大部分投资人相信他们能预判将来市场怎么做,预先把未来的发展纳入考虑。依索罗斯之见,这是不可能做到的。根据定义,关于将来市场会是什么样子的任何想法,都是有偏见和不完整的。我在解释反射理论时主张:信念会改变事实。不只市场参与者带着偏见操作,他们的偏见也能影响事件的推展。这可能产生一种印象,让人觉得市场准确地预测了未来的发展,但事实上,不是目前的期望吻合未来的事件,而是未来的事件被目前的期望所塑造。索罗斯相信,高效率市场的假设,不能解释金融市场

网络骗术大全

1、巧立名目收取各报名费、培训费用。 若招聘单位巧立名目,收取求职者各种形式的报名费、培训费、押金等费用,这些都是违法行为,求职者应提高警惕,坚决拒绝交纳各种费用。 一旦上当受骗,求职者可向当地劳动保障监察部门或公安部门报警,寻求法律保护!用人单位招聘时,如果收取求职者任何形式的报名费、培训费、押金等,均为骗子公司。 2、不要盲目签字交钱。 用人单位先发给求职者一些产品资料并收取几百元的资料费要求过一周后考试,考试合格就录用,不合格则不退资料费。结果绝大部分的求职者考试都不合格,资料费也就被单位“笑纳”了。 根据相关法律规定,招聘单位录用人时与劳动者订立的是劳动合同,不是产品推销协议。劳动者一定要提高警惕,不要去签订以推广、促销为名的民事协议,更不要头脑发热盲目签字,随意交钱。 3、警惕卷入任何形式的传销活动。 传销是国家明令禁止的非法行为,千万不要偏信能使你一夜暴富的鬼话,以免误入歧途!请记住:天上不会凭空掉馅饼,若有,也可能是个陷阱!任何人的成功都是经过千辛万苦、勤奋努力得来的。 4、面试地点是临时租借来的宾馆等地。 正规的单位一般都有固定的办公场所,若招聘单位面视地点选择宾馆等临时租借来的地方,要高度注意,谨防上当受骗。 5、招聘单位只有手机单一联系方式。

在查看招聘单位的招聘简介时,用人单位要求先QQ联系,这就存在着很大的问题,正规公司会直接电话联系或者以邮件的形式通知您去面试,不会在QQ里面面谈。接到面试通知时,要问清对方的办公地址和固定联系电话,若招聘单位只有手机单一联系方式,要高度警惕,谨防上当受骗。 6、晚上预约面试。 若接到安排在晚上的面试通知,要高度警惕,要找理由改到白天上班时间,晚上就不要出去了,特别是女孩子,切记! 7、招聘面试在偏远的地方。 若用人单位招聘面试在很偏远的地方,即使在白天,也要注意警惕,若出了事,连报警的地方和机会都很难找,你还愿意去吗?在接到面试通知的时候,一定要问清楚公司的具体地址,先在网上查询具体的位置,也可以顺便查查公司的详细情况。 8、谨慎到外地工作。 若需要到外地面试、工作,外地对您来说,人生地不熟,在对单位没详细了解的情况下,要特别小心谨慎,不要冒然行动,谨防上当受骗。 提醒小贴士:个人在求职过程,多方面、多渠道详细了解公司情况及背景,看看公司是否正规,业务是否合法,单位是否拥有合法的营业执照和经营许可证,是否有投诉、不良记录等。 兼职篇: 1、伪兼职(以招兼职为名做培训): 警惕“招学生兼职(非中介)”,“招大学生发传单”,“招兼职发传单(学生优先)”…….。等招聘信息。 例子:小王是学生,想找一个兼职,打电话确认了地址,过去后,招聘公司先面试,

网络炒外汇小心骗局

网络炒外汇小心骗局 “网络炒汇”,就是通过互联网进行外汇保证金交易。外汇保证金交易业务跟实盘炒汇不一样,它具有杠杆交易的性质,投资者交纳一定数量的资金作为交易保证金后,便可按一定的杠杆倍数将保证金金额放大,从而使交易的合同金额超出投资的金额。 目前,国内网络炒汇经营机构均属非法经营。由于外汇保证金涉及外汇业务及境内居民对外投资,在我国目前的金融管制政策的框架下,未经许可擅自经营、参与此项业务均属违法。网络炒汇公司营业执照登记的经营范围一般是投资顾问服务、投资策划服务、商务信息服务等,对外则宣称受境外经营外汇保证金交易的公司委托,在国内吸纳客户,其实际经营行为已经是超范围经营,属违法行为。 据了解,网络炒汇公司以不当手法和采取类似非法传销方式诱骗投资者参加交易。网络炒汇公司为迎合一部分人以小博大、一夜暴富的投机心理,通常以“高收益低风险”为诱饵,片面宣传保证金交易的“杠杆效应”,刻意掩饰保证金交易在放大收益的同时也存在亏损的风险,并编造各种谎言,吸引参与者并诱使其反复追加投资。参加“网络炒汇”,群众大多损失惨重。由于用保证金进行交易,保证金只需0.25%-10%,再加上网络炒汇公司的虚假宣传,很多群众参与其中,但是因为参与群体对金融常识的认知匮乏、风险意识薄弱,导致他们在短时间内血本无归。而且,“网络炒汇”不受国家法律保护。 国家外汇管理局的工作人员提醒广大市民,要树立自我保护意识,远离“网络炒汇”,通过正常渠道到正规的金融机构进行投资理财。 国家外汇管理局发布《关于境内企业境外放款外汇管理有关问题的通知》(以下简称《通知》)。《通知》中规定,扩大境外放款主体,由现行的只允许符合条件的中外合资跨国公司对外放款扩大到符合条件的各类所有制企业。扩大了境外放款的资金来源,允许境内企业在一定限额内使用自由外汇和人民币等多种资金进行境外放款。简化了境外放款的核准和汇兑手续。 境外放款专用外汇账户的开立、资金的境内划转以及购汇等事宜均由外汇指定银行直接办理,完善了境外放款的统计监测与风险防范机制。完善了境外放款资格和额度的管理制度,明确了境外放款有效期限,构建了比较完善的境外放款外汇资金流出入统计监测机制。 国家外汇管理局的工作人员介绍:“《通知》的实施有利于境内企业充分利用‘两个市场、两种资源’,扩大国际经济技术合作,有助于缓解境外直接投资企业资源融资难和流动性资金不足的问题,支持各类所有制企业‘走出去’以带动出口,进一步促进境外直接投资企业的发展和壮大。”

金黄色葡萄球菌的概况

金黄色葡萄球菌的概况 摘要:本文旨在讲述金黄色葡萄球菌的目前现状,以及其主要检测方法,代谢物肠毒素检测方法,耐药检测和幼儿园发病原因,这些对金葡菌的检测、治疗和预防起到了很好的帮助。关键词:金黄色葡萄球菌;检测;肠毒素;耐药;发病 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)是食品卫生标准中规定不得检出的常见食物中毒致病菌,是食品卫生微生物常规检测项目之一[1]。SA是葡萄球菌属,革兰染色阳性,呈葡萄状排列。当衰老、死亡、被吞噬后常转为阴性。无鞭毛、无芽胞、体外培养一般不形成荚膜。在浓汁及液体培养基中常单个、成对、或短链状排列。在普通培养基上即可生长,当加入血液或其他营养物质生长的更好。需氧或兼性厌氧。最适pH7.4,最适温度28-38℃,致病菌在37℃生长最好。某些菌株耐盐性特强,在100-150g/L氯化钠培养基中都能生长。在某些影响细胞壁形成物质的作用下可形成L型。触酶试验阳性。多数菌株分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖,产酸不产气,致病菌株可分解甘露醇。SA能产生大量核酸酶,该酶可耐受100℃30min不破坏,降解DNA和RNA的能力较强。此酶对检测葡萄球菌的致病性与血浆凝固酶具有同等价值。 由于致病金黄葡萄球菌能分泌肠毒素,因此一旦细菌污染食品,并在合适的温度环境下,细菌可以大量繁殖并产生肠毒素,从而引起消费者食物中毒[2]。金黄色葡萄球菌是一种能引起食物中毒的重要细菌。根据美国疾病控制中心的一些报告,由SA引起的食物中毒居第二位,仅次于大肠杆菌,在细菌性食物中毒中的比例为33%。加拿大的发生率更高,占细菌性食物中毒的45%[3]。中国每年发生SA中毒事件也屡见不鲜,因此造成每年的经济损失相当惨重,目前世界各国都把SA定为重要的食品卫生法定检测项目。在1960年,人们将一种半合成的青霉素-甲氧西林第一次应用于临床,而且仅仅一年之后,在英国就发现了首例耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistance Staphylococcus aureus,MRSA),再后来,在世界范围内MRSA便以惊人的速度蔓延开去,继而发展成为医院内最最常见的微生物病原菌,与乙型肝炎、艾滋病同为当今世界三大感染顽疾[4]。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是医院内重要感染的致病菌,其发病率和病死率在世界各地均很高,美国疾病控制中心在2003年做了大量工作,根据统计了解,每年因为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染,大约有数十万人住院接受治疗,在医院内由SA引起耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染,其分离程度已经高达80%以上,而且呈向社区扩散的趋势[5]。1996年,日本报告了第一例对万古霉素敏感性下降的金葡菌[6] ,人们把万古霉素认为是治疗SA的最后防线,最为经济有效的药物,不过在20世纪90年代后期又出现了耐万古霉素的SA,开始表现为万古霉素中介金黄色葡萄球菌(vancomycin intermediate-susceptible staphylococcus aureus ,VISA),美国、英国、德国、意大利、韩国等相继报道检出了VISA[7],;1997年美国分离了2例VISA[8]同期,在欧洲与亚洲多个国家均有类似报到[9]。 国内外对SA的检测方法,主要有传统分离培养及生化鉴定、显色培养基鉴定、酶联免疫(ELISA)、PCR、美国3M公司的petrifilm培养片等方法。现行国标检测食品中的SA主要是采用传统的分离培养之后进行生化鉴定,整个检测过程获得最终结果需时5天左右。而且免疫学的ELISA法所用的抗体基本上全部依赖国外进口,试剂也相对昂贵;但传统的PCR法却需要提取DNA,加大了人力、物力的消耗,成本提高。对于SA的检测,很多研究者都来检测致使其食物中毒的肠毒素基因[10],尤其是用于食物中毒事故的调查,所以对于研发一种快速、便捷的检测方法是目前食品安全检测的当务之急。 SA的常规检验检验程序:检样处理→增菌→分离→分纯→溶血试验→革兰染色镜检→血浆凝固酶试验→肠毒素检验[11]。常规检验具有操作简便,所需设备简单,成本相对较低的优点,但其操作繁琐,检测时间较长,且灵敏度较低[12]。

网上存在十三种陷阱

网上存在十三种陷阱 互联网带给我们的不仅仅是缤纷的虚拟世界,形形色色的骗子也在网络上策划着更高明的骗局。他们在网上“热情地”向你发出了信号:要么是你的红颜知己,要么可以帮助你敛财百万,助你事业有成,网络的虚拟和改造现实的力量往往使你逐渐丧失警惕,不知不觉,你已滑入了“网络陷阱”,热闹网络空间之外,现实中你将人财两空。陷阱一:电脑刷卡 “电脑刷卡陷阱”是指利用电脑手段窃取他人卡号实施犯罪。希腊的一位金融家在一家电脑商店购物时,在用信用卡付款时,发现年轻的女收银员故意拖延时间,并趁他不注意,迅速在另外一台手提电脑上将他的卡刷了一遍。头脑敏锐的金融家立刻感觉出有问题。他很快将此事告诉了管理人员。经现场验查,另外一台手提电脑系小型刷卡机,可以存储上千个信用卡号码,而希腊金融家的卡号刚刚被存储进电脑里。经审问,女收银员就是卡号盗窃者,她将盗来的卡号出售给黑道上的人,以供那些人实施盗窃与欺诈。 中国目前也正在推广信用卡制度,这种事也可能发生。使用时您可要注意,递上信用卡后不要什么都不管了。还有一种骗取信用卡资料的手段是在网上发布一条诱人的购买信息,然后让打算购买的人填写表单,提供自己的账号及信用卡资料。没有经验的人一般容易上当。因为凡是让人提供信用卡资料的要求大多是陷阱。 陷阱二:网上炒股 网上“股票陷阱”是指在网上发布虚假信息,哄抬股价使人上当,自己借机赚钱的一种网上陷阱。美国的三名男性用低价购入某公司的股票十三万股,然后在加州大学的电脑上用50多个化名,通过雅虎、狂牛、自由即时等网站大量发布有关该公司的内部利好消息,说这家公司即将被收购。第二天,这家公司的股票开始攀升,两天后股价暴涨,三人迅速将所购股票全部抛出,两个交易日获暴利近四十美元。当天下午,这家公司宣布市面上传的所谓被收购消息纯属谣言时,该股价暴跌,不少该股票跟风者遭到被套牢之苦。 陷阱三:网上交友 27岁的英国人达斯在网上与美国一名叫舒米迪的年轻美貌女子相识,女孩儿还传给他一幅性感十足的全身照。四个月后,达斯迫不急待地乘上飞往美国南卡罗莱纳州的飞机,去与网上情人相见。敲开舒米迪的房门后,达斯惊得险些昏过去,原来自称舒米迪的人竞是一个年近七旬满面深布皱纹的老妇。更可怕的是老妇还把达斯拉进屋内,让他看了藏在冰箱内的一具被肢解的尸体。原来老妇真叫舒米迪,而发给达斯的美女照是她年轻时的照片。她老来独身一人,一男性老房客寄居在她家时突然死亡,她害怕被警方怀疑,竟将其肢解冻进冰箱。她为了解闷才骗诱达斯与她相会。达斯终将真相告发于警方。 陷阱四:网上求职 网上征职之便进行色骗是网上许多骗子常用的惯招。台北有一位叫“小芳(化名)”的女生到网上求职,在人力银行网站她发现有一位姓王的先生征求“研究助理”,月薪是台币二万元。“小芳”见职位和待遇均不错,便在网上应聘。后到王先生的住处做事时,不经意喝下王给的饮料,昏迷后被奸,工钱也没有拿到。类似的事在王先生处连发多起,后被警方侦破。陷阱五:网上链接 “网上链接陷阱”是国内的上网者在网上常常遇到的一种“网上陷阱”。国内上网的朋友在浏览国外某一站点时,不留神触按了网页上的下载链接,结果下载了一个国外的免费软件。在执行该软件时,那位朋友忽然听到他的“猫”发出了与以往不同的“叫声”,好似有多个拨号声同时进行。这位朋友还算是个行家,他一想不好,立马扯

7种网络骗局手法全揭秘

眼下,随着互联网的深入普及,在给人们带来海量信息的同时,也为网络骗子提供了一个舞台。纵观这些骗局,骗子们的骗术花样翻新层出不穷,那么,普通市民如何练就火眼金睛,认清这些网络骗局呢?请教了市公安局、市消委的专家,让他们来支支招。 网上找到工作:实为传销陷阱 十堰市今年毕业的大学生小王,因女友家在宜昌,于是决定毕业之后去宜昌工作。10月中旬,小王在网上向宜昌一家大型公司递交了一份简历,晚上就接到该公司的回复。对方表示,他已被录用,分公司在河南XX地方,让小王直接过去工作。 求职心切的小王22日就赶到了洛阳,电话联系后,对方让小王先找个地方住一晚,第二天派人接他。第二天中午,果然来了2名学生模样的男子,由于交谈甚欢,小王很快放松了警惕。两名男子称小王人生地不熟,热情地带他买生活用品。买完东西后两名男子把小王带到郊区的一间民房内。此时,小王意识到自己可能是进了传销窝。随后,就有人没收了他的手机和其他物品。并要让小王向家里要4000元,加入一种xx保健品传销。迫于无奈,小王向家里要了钱。交了钱,相对有了一定的人身自由。10月31日,小王拿到手机后,借口出门买东西,乘人不备打的逃走。 支招:不要轻易相信网上的招聘信息,对网上投递的简历有回复的,可以查看对方回复的信息是否真实。如本案中涉及的宜昌这家大型公司,可以通过查找该公司或分公司所在地工商部门的电话,咨询该公司的地址和经营范围等登记信息。如果骗子假借他人公司的名义招聘,也可以通过这种方式查到公司的真实地址和电话,向这家公司询问招聘事宜进而揭穿骗局。网络上还有一种通过QQ交友的方式骗人搞传销,骗子先跟受害人建立恋爱关系,然后再找借口,把受害人骗到指定的地方,进而控制其人身自由。民警也提醒市民,勿急于与网友见面,见面前应收集更多对方的信息,可以先尝试电话聊天。聊天时要有所保留,切勿把自己的情况全盘托出。不要碍于情面勉强见面。在平时的交流中,也应处处留心,若有不妥,及时终止交往。如果与陌生网友见面,可以选择公共场所,如咖啡厅、酒吧、公园等。约会前,记得要告诉家人或朋友,约会时不要轻易喝网友递来的饮料等。 QQ视频“移花接木” “眼见为实”差点中招 家住车城西路的刘女士每晚八九点钟,都要和远在上海的儿子小斌QQ视频聊天。11月8日晚,刘女士刚打开QQ,就看到儿子发的一条消息:“在吗?汇10000元到我朋友的账

警方揭露五类网络电话骗局

最近,各地公安局微博纷纷提示,小心一款名为“神奇”的网络电话,这款网络电话是一款可模拟电话号码的软件,可自定义呼叫对方手机上所显示的电话号码。据悉,这款软件是根据网上现有的网络电话软件修改而成,修改后随意设置号码,如亲朋好友,政府机构,电信运营商,通过改好之后来骗取受害人的信任,从而达到诈骗的目的。 以下是公安机关总结的五类网络电话电话诈骗情况,遇到类似情况时,请大家保持警觉: 1、接到“领取法院传票”或“涉嫌违法犯罪”等内容的短信及电话时,千万不要信,不要透露自己及家人身份、存款、银行卡信息,更不要相信骗子所说的“安全账户”。检察机关及法院不会要求这样做的,更不会提供“安全账户”。 2、如果电话自称是公安局的某某、检察院某某、法院某某,说您涉嫌洗钱、贩毒、经济犯罪等违法犯罪犯罪活动的,警惕这是骗局,因为,公安局、检察院、法院办案时会与您面对面谈话,不会在电话中跟您谈案件。 3、如果电话中有人说您在外地办理了银行卡并透支,请挂掉电话后立即拨打银联总部的电话021-95516,报上姓名和身份证进行核实,银联总部会告知您所有信用卡的详细情况。 4、如果在打给您的电话或发给您的短信中,发现对方报出您的真实信息,在确认自己的信息已经泄露后,请迅速拨打110报警。 5、如果您突然接到电话或短信,告诉您意想不到的事情,而对方一直向您发号施令,您却始终都没有见过对方的庐山真面目,请相信,这只是一场骗局。 以上是最新最常见的五类通过网络电话诈骗的情况,骗子多多,我们只能提高警惕,谨防上当受骗,同时发现后立马向公安机关报道,以减少财产损失。 文章来源:https://www.wendangku.net/doc/f211650535.html,/

炒外汇的最经典骗局,识别平台骗局方法

炒外汇的最经典骗局,识别平台骗局方法 在过去的一年多时间里,由于缺乏有效的法律监管,外汇行业出现许多令行业蒙羞及令投资者受损的骗局,外汇平台卷款跑路事件时有发生。为了避免上当受骗,我们又该如何避免陷入到这些骗局中呢?下面皇马外汇平台小编教你十招拆炒外汇骗局,避免“上当受骗”,一眼拆穿外汇骗局: 1.如果看起来太好,可能是假的:一些自动应答,并承诺立刻盈利的网站,完全应当引起投资者的怀疑。想在外汇市场盈利可没那么轻松。此类网站通常只有一个简单的页面,上面都是盈利的宣传和诱人的美金,却没有详细的解说。这些图像让人感觉浮夸,一点也不实际。 2.宣传公司即将上市:近日在微信后台收到投资者的问询,一家名为“XX金融”的平台,号称即将上市,要求投资者认购股份,目前已经无法出金。当前,全球上市的外汇经纪商屈指可数,这种把戏也只能骗骗大叔大妈之类的外行投资者,之前携巨款跑路的GSM聚宝金融已经用过这种骗术。投资者在遇到这种情况,可以立即将其列入自己的投资黑名单。 3.多与其他人交谈:建议大家与你意向公司的员工进行交谈,同时也找到其他使用这家公司产品的人咨询,以获得客观印象。还有些时候,他们看起来一本正经,所以你就需要自己去发现,了解他们是否真正觉得自己的产品好,并支持这些产品。 4.网络搜索,查看平台口碑,发现问题:现在很容易在网络上搜索到某家公司或某个产品。建议在搜索栏输入需要搜索名字后,会看到很多平台信息。那么就需要仔细的辨别对照平台的信息,这些消息有的来自竞争者,还有的来自平台的真实用户。 5.在LinkedIn上查找公司和员工:LinkedIn是全球最大的职业社交网络,拥有相当广泛的用户。通常在搜索一家公司及其员工时,LinkedIn页面经常出现在搜索结果前列。如果这家公司及员工在LinkedIn上都没有履历,那肯定有问题。如果他们有,那么看看都有谁在推荐他们。可靠的推荐人会增加你对这家公司的信心。

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