现代生物学实验习题

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现代生物学实验习题
（一）每个实验按"实验报告纸"的格式完成一份实验报告
（二）回答各部分实验各模块中的相关思考题

思考题汇总：
第一部分：生物化学实验
第一模块：糖实验技术
1、 如何选择生化物质实验中的实验材料？有何标准？
2、 材料的破碎方法有哪些？
3、 碱性铜试剂法测定还原糖是直接滴定还是间接滴定？两种滴定方法各有何优点？
4、 在粗纤维的测定中哪些因素是影响测定结果的主要因素？
5、 在粗纤维的测定中为什么必须严格控制实验条件

6、 用本方法测定的结果为什么称为"粗纤维"？

第二模块：酶学实验技术
1、 酶的特异性实验为什么要做试剂检查实验？省略该步骤可能有怎样的结果？
2、 酶作用的专一性有哪几种？
3、 试说明可逆抑制剂与不可逆抑制剂的作用特点

4、 三种可逆抑制剂的抑制程度与底物浓度有何关系？
5、 高温导致酶活性丧失的分子机理是什么？如何在酶的分离纯化中克服这种影响？
6、 还有哪些因素可以导致酶活性的降低？
7、 pH值导致酶活性丧失的分子机理是什么？
8、 pH值改变导致的活性丧失， pH值恢复后活性也能恢复吗？
9、 试说明米氏常数Km的物理意义和生物学意义

10、为什么说米氏常数Km是酶的一个特征常数而Vm则不是？
11、请把已做的酶定性实验改造为定量实验


第三模块：蛋白质实验技术
1、 为什么用0.145 mol/L TCA来抽提细胞色素C？
2、 抽提细胞色素C时加入硫酸铵时要注意什么？为什么？
3、 在凝胶过滤层析纯化细胞色素C实验中要注意哪些重要环节？
4、 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质为什么要在样品中加少许溴酚兰和一定浓度的蔗糖溶液？蔗糖及溴酚兰的作用分别是什么？
5、 简述聚丙烯酰胺等电聚焦电泳的基本原理

6、 进行聚丙烯酰胺等电聚焦电泳时的注意事项有哪些？
7、 在酪蛋白制备时为什么要用醋酸缓冲液调pH到4.8？
8、 在酪蛋白制备时.乙醚、乙醇作用是什么？
9、 与其它测定蛋白质浓度的方法相比，考马斯亮蓝染色法测定有何优点？
10、如何用纸层析法对氨基酸进行定性和定量的测定？
11、纸层析和柱层析、薄层层析、高效液相层析各有什么特点？

第四模块：其他生物物质的分析
1、 粗脂肪的定量测定─索氏提取法实验中得到的是粗脂肪
若要制备单一组分的脂类成分
可用什么方法进一步处理？
2、 粗脂肪的定量测定中样品制备时烘干为什么要避免过热?
3、 DNA含量测定的方法有哪些？各有何优缺点？
4、 简述

二苯胺法测DNA的基本原理


第二部分：细胞与显微技术学实验
第一模块：细胞形态结构观察与各种显微镜的使用
1、 比较真核细胞和原核细胞的形态结构及其区别
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2、 分别计算不同物镜放大倍数下测微尺的单位

3、 鸭红细胞直径为多少微米.
4、 计算每立方毫米兔血中红细胞的数量

5、 了解鸟类与哺乳类动物红细胞的形态差异
6、 简述使用油镜前后的注意事项

7、 描绘描述线粒体的形态结构
8、 描绘洋葱根尖纵切面概况

9、 描述原生动物基本形态结构及植物根尖不同分区细胞形态结构差异

10、比较动物细胞与植物细胞的异同

11、简述相差显微镜与普通光学显微镜的差别

12、描述蛙肝细胞的形态特点

13、描述在荧光显微镜下所观察到的实验现象

14、绘图比较人正常肝组织细胞和脂肪肝组织细胞

15、试述激光扫描共聚焦显微镜成像基本原理，并描述实验中所观察的现象
16、激光扫描共聚焦显微镜观察到的图象为什么比普通的荧光显微镜的清晰度、层次感要强许多？
17、 试比较电子显微镜与普通光学显微镜的异同
18、 试描述扫描电子显微镜成像的基本原理

第二模块：细胞化学技术与免疫荧光染色
1、 试述免疫荧光技术的基本原理
并描述实验中所观察的实验现象.
2、 试比较免疫荧光技术与免疫细胞化学技术的异同.
3、 试述免疫细胞化学反应的基本原理
并描述实验中所观察到的实验现象
并给予解释
4、 简述Feulgen反应和PAS反应的原理，并描述显微观察到的实验现象

5、 Schiff试剂的主要作用是什么?

第三模块：生物显微制片技术
1、 为什么切取病理材料时应加对照？
2、 为什么固定液要以新配为好？
3、 当材料周围出现白色雾状时，应退回纯酒精中重新脱水，为什么？
4、 为什么切片分离不能形成蜡带？
5、 为什么切出的蜡带弯曲？
6、 哪些原因会引起蜡带上卷，切过刀口即破裂？应如何解决？
7、 在染色、封藏过程中容易出现哪些不正常现象？应如何解决？

第四模块：显微摄影与暗房技术
1、 显微镜摄影时应掌握哪些关键步骤？
2、 你认为在放大过程中，应注意掌握哪些关键步骤？为什么？
3、 洗出的照片偏黑，为什么？

第三部分：微生物学与免疫学实验
第一模块：土壤微生物的分离
1、 在配制培养基的操作过程要注意哪些问题？
2、 高压蒸汽灭菌时，为什么要先将灭菌锅锅内的冷空气完全排尽？
3、 试拟出从土壤中分离芽孢杆菌的主要实验步骤

4、 如何检验平板上某个单菌落是不是纯培养？
5、 要测定某种液体饮料中的活细菌总数，除了采用

平板菌落计数法外，还可采用哪些方法？

第二模块：微生物的观察与鉴定
1、 造成革兰氏染色结果不正确（假阴性或假阳性）的主要原因有哪些？
2、 用简单简单染色法是否能观察到细菌的芽孢？为什么？
3、 试设计一种可用于蛋白酶产生菌株初筛的筛选模型

4、 产气肠杆菌也可发酵葡萄糖产生有机酸，但其甲基红反应却为阴性
试分析其原因
5、 采用细菌自动鉴定系统 （BBL CRYSTAL）进行细菌鉴定有何优缺点 ？
6、 青霉和曲霉的形态有哪些异同？
7、 要观察构巢曲霉的闭囊壳，制片时要注意哪些问题？

第三模块：消毒与灭菌效果的测定
1、 中和剂有什么作用？
2、 如何定量测定某种消毒剂对皮肤的消毒效果？试拟出试验步骤

3、 那些因素会影响消毒剂的杀菌效果？试列举说明


第四模块：海洋放线菌抗菌活性菌株的筛选
1、 请设计一种分离稀有放线菌的实验方案
2、 绘图描述所观察到的放线菌形态

3、 试比较三种培养和观察放线菌方法的优缺点

4、 镜检时，你如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝？
5、 双层琼脂法在抗生素的测定中有那些优缺点？

第五模块：酵母胞外多糖的发酵及其测定
1、 如何区别酵母菌的营养细胞和释放出子囊外的子囊孢子
2、 为什么在高碳氮比的液体发酵培养基中及高通气量进行发酵有利于菌株多糖的合成？
3、 用苯酚-硫酸法测定多糖有何优缺点？

第六模块：基础免疫学研究技术
1、 双向琼脂免疫扩散实验：画出个孔间的沉淀线位置、数量、形态，并予以简单的说明，对实验结果进行分析

2、 单向琼脂扩散试验：分析试验结果并探讨试验要点
3、 间接凝集反应检测血清类风湿因子实验：记录试验结果并进行分析，探讨影响实验结果的因素
4、 免疫电泳实验：画出沉淀线的形态、数量和位置，并予以简要说明

5、 与相关的免疫学试验进行比较，探讨免疫电泳的主要优点

6、 小鼠腹腔巨噬细胞收集及形态观察：绘图并描述观察到的各种细胞的形态特征，计算腹腔巨噬细胞的百分比

7、 记录个管收集样品的OD值，并绘制洗脱曲线
8、 对IgG的含量和纯度结果进行分析

9、 探讨影响IgG纯度的因素
10、 分析酶标抗体不纯对抗原检测结果的影响（双抗夹心法）
11、 比较免疫荧光法和ELISA的最适检测对象

12、 试分析比较各种免疫标记技术的优缺点

第四部分：动物生物学实验
第一模块：动物解剖及动物的形态结构观察技术
1、 绘水螅纵切或横切面（局部）图，示各部分结构

2、 与腔肠动物比较，扁形动物具有哪些进步性特征？这些特征有何进步性意义？
3、 为什么

说环节动物是高等无脊椎动物？
4、 绘制变形虫的放大图，表示出所见到的各种结构

5、 通过所观察的代表动物总结鞭毛纲与肉足纲的主要特征

6、 通过观察，总结河蚌适应于不大活动生活方式的形态结构特征

7、 根据对环毛蚓的观察及与蛔虫等的比较，说明无脊椎动物消化管结构和机能的演变，及其与真体腔形成的关联

8、 通过对棉蝗的解剖与观察，说昆虫纲的主要特征
其中哪些特征是对陆生生活的适应？
9、 通过实验观察，归纳鸟类的哪些形态结构特征表现了对飞翔生活的适应

10、 鸟类传统分类的优缺点？

第二模块：动物生理学实验技术
1、 扫描基线位于最上端或最下端，能否进行实验？如何把基线调到当中

2、 当用刺激电极刺激机体，没有反应时，有哪些原因？如何检查？
3、 当采样记录时，没有生物信号，有哪些原因？如何判断？
4、 如何在采样记录时，在刺激或注射药物时作标记？
5、 如何改变采样波形的宽窄以适应观察和打印？
6、 如何限定我们所需的波形进行打印？
7、 剥去皮肤的后肢，能用自来水冲洗吗？为什么？
8、 金属器械碰压、触及或损伤神经及腓肠肌，可能引起哪些不良后果？
9、 如何保持标本的机能正常？
10、 单收缩过程中潜伏期包括哪些生理过程？
11、 讨论肌肉发生不完全强直收缩及完全强直收缩的条件，人们日常生活中哪些动作属于强直收缩
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12、 何谓临界融合刺激频率？
13、 解释在一定范围内神经干动作电位的振幅随刺激强度而改变，是否与单个神经纤维动作电位的"全"或"无"定律相矛盾？
14、 改变神经干的方向后，动作电位的波形发生了什么变化，为什么？
15、 分析KCl溶液和普鲁卡因对动作电位影响的机理

16、 利用现有仪器和记录动作电位的方法，设计一个测定坐骨神经不应期的实验，讲清楚实验原理？
17、 实验结果说明心肌的哪些生理特性？
18、 心肌的不应期较长有何生理意义？
19、 设计一个实验证明两栖类心脏的起搏点是静脉窦？
20、 分析刺激迷走交感神经干所产生效应的机理

21、 试设计一种单纯刺激迷走神经和单纯刺激心交感神经的实验

22、 以蛙类离体心脏灌流实验为例说明心肌有哪些生理特性？
23、 以蛙类离体心脏灌流为例说明内环境相对恒定的重要意义

24、 分析增加呼吸无效腔，呼吸运动改变的原因

25、 根据实验结果分析肺牵张反射对维持正常呼吸节律的意义

26、 双侧切断迷走神经以后，呼吸运动的变化说明什么问题？
27、 分析注射乳酸后呼吸运动变化的原因

28、 分析每一实验观察项目引起血压变化的机制

第三

模块：组织胚胎学实验技术
1、 写出组织培养实验器材的清洗、包装及灭菌的要领，并阐明其原因

2、 总结培养过程中组织块贴壁能否成功的经验，写出影响组织正常贴壁的因素

3、 不同的实验材料（如两栖类、鱼类）和相同实验材料不同组织的培养所需的培养条件和培养方法是否相同，请说出原因

4、 根据镜检观察分析培养细胞的类型

5、 根据自己的实验结果（培养的组织块有无污染、组织的贴壁及生长情况），总结实验成功或失败的原因，写出对组织培养实验的体会


第四模块：基础寄生虫学研究方法
1、 寄生原虫主要形态鉴别要点和分类根据是什么？
2、 寄生原虫的运动细胞器官主要有哪些类型？
3、 分别绘制一种阿米巴或鞭毛虫、孢子虫和纤毛虫等医学原虫标本形态结构图

4、 本次实验内容检验结果报告和体会

5、 吸虫幼虫胞蚴和裂蚴的主要区别在哪里？为什么吸虫类的第一中间宿主基本上都是贝类？简述你在螺内找到的吸虫幼虫的形态

6、 吸虫病原在形态上主要分类根据是什么？其生活史发育类型有哪些？
7、 有代表性地画一种吸虫成虫结构示意图，并分别清楚地标明虫体内部各器官结构的名称

8、 绦虫幼虫的主要区别点在哪里？
9、 绦虫成虫病原在形态上主要分类根据是什么？其生活史发育类型有哪些？
10、 分别画出任一种绦虫头节和成熟体节标本结构示意简图，并分别清楚地标明体节内部器官结构名称

11、 线虫成虫标本的主要分类根据是什么？如何识别线虫卵的不同形态？
12、 粪检结果报告

13、 认真绘制一种线虫成虫、幼虫或虫卵标本图，标明虫体内部结构示意图

14、 医学节肢动物在人、畜和禽类寄生虫病的流行病学和感染途径方面有何传播意义？
15、 医学节肢动物的分类应注意哪些基本结构？
16、 绘制一种节肢动物的形态结构图谱


第五部分：植物生物学实验
模块一：植物形态解剖技术
1、 比较单、双叶植物初生根的结构
2、 比较双子叶植物初生和次生根的结构
3、 绘制有丝分裂各时期的典型结构
4、 绘制南瓜叶表皮细胞的结构
5、 绘制马铃薯茎的贮藏组织的结构

模块二：植物生理实验技术
1、 叶绿素、荧光素酶以及绿色荧光蛋白都能产生荧光，它们的原理有什么不同？能量来源有何差异？
2、 转GFP的植物在检测绿色荧光时为何没有看到叶绿素的红色荧光?若选择荧光标记绿色植物细胞
在选择荧光物质时应首先考虑什么问题?
3、 如何判断呈橙黄色的花和果实中含的是类胡萝卜素还是花色素？
4、 为什么植物在不同生长环境下其 Chl含量有差异？ Chla /Chlb有何适

应意义？
5、 通过开放实验――切花保鲜和采后生理本实验你体会最深的是什么？从中你学到了什么？对开放性实验你有何好的建议？

模块三: 植物组织培养技术
1、 植物组织培养的理论基础是什么？
2、 培养基的成分主要有那几类？
3、 与植物基因转化有关的农杆菌有几种类型？
4、 植物损伤信号主要是什么物质？
5、 什么是双元表达载体系统？
6、 GUS基因用来检测组装的嵌合基因是否导入细胞的原理是什么？

模块四: 基础植物生态学研究方法
1、 观察阴生植物和阳生植物叶片在形态结构上的差别
并比较这两类植物的光合参数

2、 根据实验结果，讨论叶片光合速率与叶片的叶绿素含量、气孔导度、蒸腾的关系（将生物统计学方法应用于结果分析）？
3、 实验二环境样品的采集、处理与分析－－以土壤为例
4、 如何提高样品分析的精度？
5、 怎样确定植物是否缺P，还需要哪些辅助指

第六部分：遗传与分子生物学实验
第一模块：经典遗传学研究方法
1、 果蝇突变体可以如何得到？请列出几种方法，并设计实验尝试

2、 请描述核型：
45，XY
der (14;21) (q21;q14)
47，XY
+21
3、计算噬菌体效价和转导频率
效价(单位/ml)=斑数x稀释倍数x取样量
转导频率=(转导子数/ml)/(噬菌体数/ml)x100%
4、 画图表示λdg转导颗粒转导gal-细菌的过程
5、 转座子引起的插入突变实验：
6、 列表记录观察结果
7、 记录A、B板上菌落数，计算每毫升数
8、 计算Tn5易位插入突变总频率

第二模块：真核生物分子生物学研究方法
1、 为了获得较为完整的基因组ＤＮＡ在实验中应注意什么问题？
2、 记录实验结果，并估测ＰＣＲ扩增产物分子量

3、 简述ＰＣＲ基本原理
4、 进行一次成功的ＰＣＲ反应顺注意哪些问题


第三模块：原核生物分子生物学研究方法
1、 简要叙述酚氯仿抽提ＤＮＡ体系后出现的现象及其成因

2、 沉淀ＤＮＡ时为什么要用无水乙醇及在高盐、低温条件下进行？
3、 在整个酶切反应过程中应注意哪些问题？
4、 如何选择ＤＮＡ和限制性内切酶的用量？
5、 反应体系中为何内切酶用量不能超过整个反应体系的１０％？
6、 计算转化率，根据转化率和阴性对照分析实验结果

7、 根据本实验认为影响转化率的因素有哪些？
8、 抗性法筛选和互补筛选原理是什么？