简答题:
1、简述克隆载体和表达载体的异同点。
答:克隆载体的定义:可携带插入的外源DNA片段并可转入受体细胞中大量扩增的DNA分子。该分子中含有能够在受体细胞中自主复制的序列和筛选标记,常用于外源基因的克隆,如噬菌体或质粒。
通常采用从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体,在载体上插入合适大小的外源DNA片段,并注意不能破坏载体的自我复制性质。将重组后的载体引入到宿主细胞中,并在宿主细胞中大量繁殖。
表达载体的定义:在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),使目的基因能够表达的载体。
包括原核表达载体和真核表达载体,可以是质粒、噬菌体或病毒等。典型的表达载体带有能使基因表达的调控序列,并在适当位置有可插入外源基因的限制性内切位点。
表达载体四部分:目的基因、启动子、终止子、标记基因。
克隆载体必须具备的条件:
具有使外源DNA片段插入的限制性酶识别位点(外源性DNA能组入);能将外源DNA导入到受体细胞并进行自我复制(能繁殖);必须具有选择标记(能筛选出来)。
表达载体必须具备的条件:
载体能够独立的复制;应具有灵活的克隆位点和方便的筛选标记,以利于外源基因的克隆、鉴定和筛选;应具有很强的启动子,能被RNA聚合酶所识别;应具有阻遏子,使启动子受到控制,只有当诱导时才能进行转录;应具有很强的终止子,以使RNA聚合酶集中力量转录克隆的外源基因,同时使很强的终止子所产生的mRNA较为稳定;所产生的mRNA必须具有翻译起始信号,以便转录后能顺利翻译。2、简述原核表达系统的缺点,以及真核表达系统的必要性及优势?
答:原核表达体系的缺点是:缺乏合适的转录后加工机制,因此不宜表达真核生物基因组基因;缺乏合适的翻译后加工机制,因此表达产物不能适当折叠和修饰;很难在大肠杆菌表达体系中表达大量的可溶性蛋白。
真核表达体系的优点:既能表达cDNA,也能表达真核基因组DNA;表达产物适当修饰并区域化分布。
3、什么是α-互补?如何利用α-互补来筛选插入外源DNA的重组质粒?
α-互补是指lacZ 基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酶(β-galactosidase ,由1024 个氨基酸组成)阴性的突变体之间实现互补。α-互补是基于在两个不同的缺陷β-半乳糖苷酶之间可实现功能互补而建立的。
实现α-互补主要有两部分组成:LacZ△M15,放在F质粒或染色体上,随宿主传代;LacZ',放在载体上,作为筛选标记,当在LacZ'中插入一个片段后,将不可避免地导致产生无α-互补能力的?-半乳糖苷酶片段。在诱导物IPTG和底物X-gal(同时可作为生色剂)的作用下,含重组质粒的菌落不能产生有活性的?-半乳糖苷酶,不能分解x-gal,呈现白色,而含非重组质粒的菌落则呈现兰色。以此达到筛选的目的。
4、癌基因和肿瘤抑制基因如何相互配合来维持细胞的正常生命活动?
答:肿瘤的发生可能是癌基因的激活与肿瘤抑制基因的失活共同作用的结果。目前了解的最多的两种肿瘤抑制基因是Rb基因和P53基因。它们的产物都是以转录调节因子的方式控制细胞生长的核蛋白。其他肿瘤抑制基因还有神经纤维瘤—1基因、结肠腺瘤性息肉基因、结肠癌丢失基因和Wilms 瘤-1等。
Rb基因随着对一种少见的儿童肿瘤—视网膜母细胞瘤的研究而最早发现的一种肿瘤抑制基因。Rb基因的纯合子性的丢失见于所有的视网膜母细胞瘤及部分骨肉瘤、乳腺瘤和小细胞肺癌等。Rb基因定位于染色体13q14,编码一种核结合蛋白质(P105-Rb)。它在细胞核中以活化的脱磷酸化和失活的磷酸化的形式存在。活化的Rb蛋白对于细胞从G0∕G1期进入S期有抑制作用。当细胞受到刺激开始分裂时,Rb蛋白被磷酸化失活,使细胞进入S期。当细胞分裂成两个子细胞时,失活的(磷酸化的)Rb蛋白通过脱磷酸化再生使子细胞处于G1期或G0期的静止状态。如果由于点突变或13q14的丢失而使Rb基因失活,则Rb蛋白的表达就会出现异常,细胞就可能持续地处于增殖期,并可能由此恶变。
P53基因定位于17号染色体。正常的P53蛋白(野生型)存在于核内,在脱磷酸化时活化,有阻碍细胞进入细胞周期的作用。在部分结肠癌、肺癌、乳腺癌和胰腺癌等均发现有P53基因的点突变或丢失,从而引起异常的P53蛋白表达,而丧失其细胞生长抑制功能,从而导致细胞增生和恶变。近来还发现某些DNA病毒,例如HPV和SV-40,其致癌作用是通过它们的癌蛋白与活化的Rb蛋白或P53蛋白结合并中和其生长抑制功能而实现的。
5、什么叫RNAi技术?简述目前其常见的研究路线。
答:RNA干涉(RNAi):将这种由双链RNA(ds-RNA)引起的特异性基因抑制现象,称作RNA干涉(RNAi)。RNAi 技术的两种常用策略:A. 在体外获得siRNA(确定目的基因,设计SiRNA序列——化学合成或体外转录——在体外,获得SiRNA ——转染细胞——RNAi 效果检测);B. 采用shRNA表达载体(确定目的基因,设计SiRNA序列——构
建shRNA表达载体——转染细胞——在细胞内产生SiRNA——RNAi 效果检测)
综合论述题:
1、请对下列分子生物学技术原理进行归类,哪些技术是根据分子结构特征发明的,哪些是根据核酸序列特征发明的,哪些是综合几种分子特性发明的。
如:基因克隆技术、核酸分子杂交技术、基因敲除技术、RNA 干扰技术、DNA测序技术、定量PCR技术、核酸电泳技术、酶切片段长度多态性分析技术、逆转录合成cDNA技术。答:(1)根据分子结构特征发明:
核酸电泳技术:原理是带电荷的物质在电场中的趋向运动。(2)根据核酸序列特征发明:
基因克隆技术:一般来说,基因克隆技术包括把来自不同生物的基因同有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接,构建成新的重组DNA,然后送入受体生物中去表达,从而产生遗传物质和状态的转移和重新组合。
核酸分子杂交技术:具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补原成双链。
基因敲除技术:基因敲除主要是应用DNA同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。RNA干扰技术:是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA (double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。
定量PCR技术:PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA 聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
逆转录合成cDNA技术:是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。
(3)综合几种分子特性发明:
DNA测序技术:根据核苷酸在某一固定的点开始,随机在某一个特定的碱基处终止,产生A,T,C,G四组不同长度的一系列核苷酸,然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测,从而获得DNA序列。
酶切片段长度多态性分析技术:限制性片段长度多态性(RFLP) 技术的原理是检测DNA在限制性内切酶酶切后形成的特定DNA片段的大小。因此凡是可以引起酶切位点变异的突变如点突变(新产生和去除酶切位点)和一段DNA的重新组织(如插入和缺失造成酶切位点间的长度发生变化)等均可导致RFLP的产生。
2、利用所学的理论知识及所掌握的实验技术,谈谈你将如何从人的染色体中获取某一个基因并研究该基因的功能?(写出详细的实验设计方案)
从人的染色体中获取某一个基因并研究该基因的功能:文献检索分析,确定待筛选的目的基因;设计合成引物;收集活检标本;提取RNA;用设计合成的引物和抽提的RNA 采用差异RT—PCR筛选目的基因mRNA表达情况;分析基因表达异常与临床病理特征的关系获取目的基因的ORF框;获得线性化真核表达载体;通过目的基因ORF框和线性化真核表达载体构建包含有目的基因ORF框的真核表达载体;转化细菌质粒DNA抽提,酶切及测序鉴定;转染正常的人的细胞系;MTT分析、流式分析、平板集落形成实验等分析目标基因对细胞增长、细胞周期的影响。Western Blotting 检测稳定转染后细胞中的蛋白的表达;根据所得出的结果综合分析基因表达异常与临床病理特征关系。
人的DNA的提取:
1、采集口腔黏膜脱落细胞,用舌头舔颊黏膜上颚、用牙刮颊部,嘬咀,用分泌出的唾液反复漱口;将唾液吐到杯中。用生理盐水洗涤,2000rpm 离心10min,倒掉上清,重复一次。
2、沉淀中加入1ml * 细胞核裂解液(STE),混匀,再加350ml STE 和150ml 10% SDS,摇匀,至出现黏膜透明状,加10ml 20m g/ml 蛋白酶K,摇匀。37℃温箱过夜或50℃ 3-4 小时。
3、加入等体积饱和酚,轻摇混匀10分钟,室温2000rpm 离心 10分钟,去除蛋白和SDS的沉淀。
4、小心移上清至另一离心管,加等体积氯仿混匀5分钟,室温2000rpm 离心5分钟。
5、小心移上请,若上清不清亮透明,则用等体积氯仿再抽提一次。
6、将上清移入另一离心管中、沿离心管壁向DNA溶液中加入2.5 倍体积的无水乙醇,轻轻摇动离心管混合至体系完全均一,见白色絮状DNA。用移液器吸头挑出DNA沉淀,在新配制的70%乙醇洗二次,室温干燥5分钟,再将DNA溶于20—100mlTE中,测OD值。
7、TE溶解的DNA在4℃下可以保存一年,如要求长期保存,则需加2倍体积无水乙醇置 -70℃保存。
中国疾控中心2005年分子生物学(博士) 一、名词解释 1.EST 2.YAC 3.Sense DNA 4.RNAi 5.Race 二、问答题 1、乳糖操纵子的结构。IPTG如何诱导结构基因表达? 2、正向突变、抑制突变及回复突变的定义及与突变的关系。 3、PUC18克隆载体的结构特征。 4、在做PCR过程中,常遇到的问题及解决方法。 5、已知蛋白A、B之间相互作用,C、D分别与A、B 相似,如何签定C、D之间的相互作用,两种方法说明之。 6、试用分子生物学相关知识建立动物模型的方法,如何建立病原生物学的动物模型。 军事医学科学院1995年分子生物学试题(博士) 1. Apoptosis的生物学意义及其调控基因。 2.基因转移的概念及基因转移载体应具备的条件。 3.原癌基因的功能及其转化为癌基因的机理。 4.人主要组织相容性抗原在细胞识别中的作用及原理。 5.染色体重排对生物体的影响及其主要类型。 6.噬菌体显示技术原理及其在生物学研究中的意义。 军事医学科学院1996年分子生物学试题(博士) 1.什么是原癌基因?它们怎样被反转录病毒激活? 2.什么是tumor supperssor gene?举例说明它的调控功能。 3.细胞染色体的异常如何导致癌基因的激活? 4 解释以下名词:(1) gene knock-out (2) molecular hybridization (3) restriction fragment length polymorphism (4) human genome project 5.G蛋白的结构特点信其功能. 6 .apoptosis的特征与其生理及病理意义,已知它的调控基因有哪些? 2006 协和生物化学与分子生物学专业博士试题 一、填空(24空24分) 1.---------年,由-------和-------(英文姓)首次提出了DNA的双螺旋模型,其结果发表在----杂志,他们提出的实验依据是-------和--------。 2.蛋白质浓度测定在--------nm, 原因是---------但有时候也在220nm处测量,原因是--------。 3.表皮生长因子受体具有-------酶的活性。 4.嗅觉、视觉、味觉和细胞膜上的------蛋白结合,这种受体具有-------的结构特点,产生的第二信使是。 二、名词解释(4题16分) 1. CpG island 2.CTD of RNA Pol II 3. SiRNA 三、问答题(4题40分) 1. 基因组DNA有时会产生G:T错配,DNA复制时有时会发生A:C错配,他们产
分子生物学复习提纲 一.名词解释 (1)Ori :原核生物基因质粒的复制起始位点,是四个高度保守的19bp组成的正向重复序列,只有ori能被宿主细胞复制蛋白质识别的质粒才能在该种细胞中复制。 ARS:自主复制序列,是真核生物DNA复制的起点,包括数个复制起始必须的保守区。不同的ARS序列的共同特征是一个被称为A区的11bp的保守序列。(2)Promoter:启动子,与基因表达启动有关的顺式作用元件,是结构基因的重要成分,它是位于转录起始位点5’端上游区大约100~200bp以内的具有独立功能的DNA序列,能活化RNA 聚合酶,使之与模板DNA准确地相结合并具有转录起始的特异性。 (3)ρ-independent termination不依赖ρ因子的终止,指在不依赖ρ因子的终止反应中,没有任何其他因子的参与,核心酶也能在某些位点终止转录。(强终止子)(4)SD sequence:SD序列(核糖体小亚基识别位点),存在于原核生物起始密码AUG上游7~12个核苷酸处的一种4~7个核苷酸的保守片段,它与16SrRNA3’端反向互补,所以可以将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。 Kozak sequence:存在于真核生物mRNA的一段序列,核糖体能够识别mRNA 上的这段序列,并把它作为翻译起始位点。 (5)Operator:操纵基因,与一个或者一组结构基因相邻近,并且能够与一些特异的阻遏蛋白相互作用,从而控制邻近的结构基因表达的基因。 Operon:操纵子,是指原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控元件组成的基因表达单元。包括操纵基因、结构基因、启动基因。 (6)Enhancer:增强子,能强化转录起始的序列的为增强子或强化子Silencer:沉默子,可降低基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件。与增强子作用相反。 (7)cis-acting element :顺式作用元件,存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列,包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件,本身不编码任何蛋白质,仅仅提供一个作用位点,与反式作用因子相互作用参与基因表达调控。 trans-acting factor:反式作用因子,是指直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。具有三个功能结构域,即DNA结合域、转录结合域、结合其他结合蛋白的结构域。 (8)Open reading frame (ORF):开放式阅读框架,是指一组连续的含有三联密码子的能够被翻译成为多肽链的DNA序列。它由起始密码子开始,到终止密码子结束。 (9)Gene:基因,产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。(能转录且具有生物学功能的DNA/RNA的序列。) (10)DNA denaturation:DNA变性,DNA双链的氢键断裂,最后完全变成单链
现代分子生物学复习题
现代分子生物学 一.填空题 1.DNA的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。 2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。 4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导,蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。 5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种:核心启动子元件和上游启动子元件。 6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染 小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两个实验中主要的论点证据是:生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点: hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、 mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子,在mRNA3′ 东隅已逝 2 桑榆非晚!
末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。 9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一 种经济的方法、可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。 10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是: SC构型、 oc 构型、 L构型。在电泳中最前面的是SC构型。 11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、 CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。 12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用,转 录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。 13.转基因动物常用的方法有:逆转录病毒感染法、DNA 显微注射法、胚胎干细胞法。 14.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、 TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是: D、A、B、E 。 其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。 15.酵母DNA按摩尔计含有32.8%的T,则A为_32.8%_,G 为_17.2%_和C为_17.2%__。 16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 17.DNA合成仪合成DNA片段时,用的原料是模板DNA 东隅已逝 3 桑榆非晚!
分子生学(2)——专业基础 -------------------------------------------------------------------------------- 一、解释下列名词(每题5分,共40分) 1. 蛋白激酶(protein kinase) 2. 增强子(enhancer) 3. SH2结构域(SH2 domain) 4. 聚合酶链反应(PCR) 5. 基因治疗(gene therapy) 6. 变性蛋白质(denatrued protein) 7. 信号肽(signal peptide) 8. cDNA文库 二、问答题(选答四道题,共计60分) 1. 什么是蛋白质的一级、二级、三级、四级结构?它们依靠什么样的链和力建立起这些结构?它们之间的关系是 什么?(15分) 2. 简述重组DNA技术的定义、原理和主要过程,结合你的专业举出一个应用该技术的实例并说明其意义。(15分) 3. 简述癌基因与抑癌基因的定义,各举一例说明其在肿瘤发生中的作用。(15分) 4. 以乳糖操纵子(或称为乳糖操纵元)和色氨酸操纵子为例简述原核细胞基因表达调控原理。(15分) 5. 简述真核细胞基因表达调控的基本环节、主要的调控分子和调控方式。(15分) 注意:请选答四道题,多答者扣去得分最多的答题!!
一九九五年攻读博士研究生入学试题 分子生物学(2) 一、解释(30分) 1.单链构象多态性(SSCP) 2.Alu家庭(Alu family) 3.受体型酪氨酸激酶(RTK) 4.GTP酶激活蛋白(GAP) 5.亮氨酸拉链(Leucine zipper) 6.杂合性丢失(LOH) 二、简要说明怎样进行构建cDNA文库(10分) 三、举例说明细胞癌基因激活有哪几种方式(10分) 四、真核细胞内存在哪些第二信使?它们是怎样产生的?各有何作用?(10分) 五、已知抹香鲸和猪的胰岛素具有相同的氨基酸序列,然而某些抗血清却能将它们区别开来,这岂不与“蛋白质的一级结构决定其高级结构”的理论相矛盾吗?你如何解释?(10分) 六、小测验(30分) 1.圈出下列结构中处于同一肽键平面的原子(5分) 2.已知UMP在体内可循UMP-----dUMP------dTMP途径转变,那么为什么用氚标记的尿苷进行掺入实验时,只有RNA才被标记呢?(5分) 3.将完全用放射性同位素标记的双链DNA置于不含同位素的反应液中进行复制,那么经过两轮复制后DNA分子的放射分布状态如何?(5分) 4.将某种纯蛋白1mg进行氨基酸分析,得19.5ug的异亮氨酸(分子量=131.2),那么该蛋白质的最小分子量是多少?(5分) 5.设有一双链环状DNA,全部长度为100%(如下图),已知内切酶E1的切点在O,E2的切点
华中科技大学同济医学院考博分子生物学(专业基础)简答题历年试题汇总 1.顺式作用元件有哪些,并加以解释。2015,2012考 2.人类基因组计划的4张图,各自的意义是什么? 3.癌基因激活的主要途径? 问答:1.什么是基因治疗,基因治疗的主要策略是什么?基因治疗的技术及主要内容,2015,2014,2013考 问答2.蛋白质组学的主要技术有哪些并解释?2015,2012考 2014简问答题 1.PCR原理,步骤,写出6种PCR衍生技术 2013,2014,2009考 2.何谓基因克隆?简述其基本过程。09年 3.重组DNA技术,问答题20分,14年考 4.举例说明基因表达的调控机制。题目太大,原核调控,真核调控?13年 问答5.人类基因定位的常用方法及原理。12年,09年考 简问6.简述反式作用因子的结构特点及作用方式 09年 简问7.简述逆转录病毒的结构特点 09年考 问答:真核细胞中基因表达的特异性转录调控因子是指什么?根据他们的结构特征可以分为哪些类型?它们和DNA相互识别的原理是什么?2013年考 问答:试述大肠杆菌中表达蛋白质产物的步骤。 2013年考 试比较克隆载体、原核载体和真核载体的特点 2012年考 2016年真题 英译中名词解释(20分) 反义RNA;操纵子;限制性核酸内切酶;选择性剪切;抑癌基因;基因诊断; RNA干扰;质粒; gene maping;管家基因 简答题。 真核基因组的结构和功能特点20分 分15人类基因组的结构特征. 原癌基因的特点15分 蛋白质组研究常用技术有那些,简介其作用。15分 当前基因治疗技术面临的技术问题有哪些?15分 以下为2001-2004年试题及网上答案 一、若要获得IL-2的基因工程产品,你应该怎么做? 基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术,是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作,又叫分子克隆,DNA重组技术。 1. 在GENBANK中检索IL-2的mRNA序列;在genecard里检索IL-2高表达的组织;同时检索一下有关文献; 2. 如果考虑使用原核表达系统(通常是大肠杆菌表达系统),将IL-2的成熟肽的基因序列找出(呵呵,我没有检索,不清楚是否有信号肽)进行分析;
选择题 1.证明DNA 是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2 噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是(C )。 A.从被感染的生物体内重新分离得到DNA 作为疾病的致病剂 B.DNA 突变导致毒性丧失 C.生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能 D.DNA 是不能在生物体间转移的,因此它一定是一种非常保守的分子 E.真核心生物、原核生物、病毒的DNA 能相互混合并彼此替代 2.1953 年Watson 和Crick 提出(A )。 A.多核苷酸DNA 链通过氢键连接成一个双螺旋 B.DNA 的复制是半保留的,常常形成亲本-子代双螺旋杂合链 C.三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D.遗传物质通常是DNA 而非RNA E.分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 3.DNA 双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键,并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA 的解链温度的正确描述?(C,D ) A.哺乳动物DNA 约为45℃,因此发烧时体温高于42℃是十分危险的 B.依赖于A-T 含量,因为A-T 含量越高则双链分开所需要的能量越少 C.是双链DNA 中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值 D.可通过碱基在260nm 的特征吸收峰的改变来确定 E.就是单链发生断裂(磷酸二酯键断裂)时的温度 4.Watson和Crick提出的经典DNA双螺旋结构属于(B) A.A型B.B型C.Z型 5.多种密码子编码一个氨基酸的现象,称为密码子的(B) A.连续性B.简并性C.通用性D.摆动性 6.真核基因经常被断开(B,D,E )。 A.反映了真核生物的mRNA 是多顺反子 B.因为编码序列外显子被非编码序列内含子所分隔 C.因为真核生物的DNA 为线性而且被分开在各个染色体上,所以同一个基因的不同部分可能分布于不同的染色体上 D. 表明初始转录产物必须被加工后才可被翻译 E.表明真核基因可能有多种表达产物,因为它有可能在mRNA 加工的过程中采用不同的外显子重组方式 7.选出下列所有正确的叙述。(A,C ) A.外显子以相同顺序存在于基因组和cDNA 中 B.内含子经常可以被翻译 C.人体内所有的细胞具有相同的一套基因 D.人体内所有的细胞表达相同的一套基因 E.人体内所有的细胞以相同的方式剪接每个基因的mRNA 8.下列哪些基因以典型的串联形式存在于真核生物 基因组?(B,C ) A.珠蛋白基因B.组蛋白基因 C.rRNA 基因D.肌动蛋白基因 9.细胞器基因组( A )。
2009年山东大学考博–分子生物学试题 by admin on 2010年01月25日· 2 comments in 专业真题 一、名词解释: 1、顺式作用元件; 2、模序与结构域; 3、岗崎片段; 4、Southern Blotting; 5、遗传密码的简并性和摇摆性 二、简答: 1、基因治疗中常用病毒载体类型及特点? 2、IP3-PKB介导的受体信号转导途径? 3、蛋白质(酶)活性的快速调节方法有哪些?举三例说明磷酸/脱磷酸化是酶活性快速调节的重要方式。 4、细胞死亡受体蛋白的分类,组成成员的作用? 5、细胞周期Cdk的调控作用。 6、原核生物DNA复制后随链合成中参与的酶和蛋白质及作用? 7、举出5种类型RNA并简述其作用。 三、论述: 1、原核生物和真核生物表达调控的层次有哪些?调控机制。 2、原核生物和真核生物DNA复制的起始、延长和终止有哪些不同点?复制过程参与的因子及功能? 08中科院分子生物学试题 1、表观遗传,及调控方式,还有蛋白质通过哪些共价修饰调控其功能? 2、蛋白质与DNA结合的方法和比较,EMSA和DNase1足迹法? 3、密码子改造研究新蛋白药物,原理,关键和方法 4、设计研究未知基因(预测两个跨膜区域)功能的实验方案(不低于4个) 5、质粒改造原则 6、诱导全能干细胞的方法,实验方案等。(去年的nature上发表的) 个人认为除了第二和五题之外,其它的题目都属于一骑绝尘的,要么会,要么不会,想蒙是绝对没门的。 这门专业课能及格,我想都不错了,特别是1,3,6题。 不知道大家做的如何,反正第一题,我是意思都没看懂,不知道连续的3问是不是指1个东西。还是最后1问是单独的,与前面的2问无关
2012浙江大学医学分子生物学(乙)回忆版: 一.名词解释(3分*5) 1.The Central Dogma 2.Telomere 3.nuclear localization signal, NLS 4.Protein Motif 5.Splicesome 二.简答题:(5分*9) 1.一个基因有哪些结构组成? 2.基因、染色体、基因组的关系? 3.表观遗传机制改变染色质结果的机制? 4.内含子的生物学意义? 5.什么是蛋白质泛素化?其生物学意义是什么? 6.蛋白质纯化的方法? 7.MicroRNA是什么?它如何发挥作用? 8.什么是全基因组关联研究(Genome Wide Association Studies,GWAS)?其研究目的是什么? 9.分子生物学研究为什么需要模式生物? 三.问答题:(10分*4) 1.人体不同部位的细胞其基因组相同,为什么表达蛋白质的种类和数量不同? 2.用分子生物学知识,谈谈疾病发生机制? 3.有一块肿瘤组织及癌旁组织,设计一个实验证明细胞内蛋白质在肿瘤发生发展中的作用? 4.目前,基因靶点研究已成为新药开发的用药部分,结合目前药物靶点在新药开发中的应用,谈谈你的建议和观点?
2011浙江大学博士入学考试医学分子生物学试题回忆 一、英文名解 1、冈崎片段: 2、反式作用因子: 3、多克隆位点: 4、micro RNA: 5、分子伴侣: 二、简答 1、蛋白质四级结构。 2、真核转录调控点。 3、表观遗传学调控染色质。 4、真核RNA聚合酶类型及作用。 5、基因突变。 6、组学概念及举例。 7、简述兔源多克隆抗体的制备。
绪论 思考题:(P9) 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义? 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究,以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念,即将分子生物学的范畴偏重于核酸(基因)的分子生物学,主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面?什么是反向生物学?什么是 后基因组时代? 研究内容: DNA的复制、转录和翻译;基因表达调控的研究;DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学:是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能,在体外使基因突变,再导入体内,检测突变的遗传效应,即以表型来探索基因结构。 后基因组时代:研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式,人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件(年代、发明者、简要内容) 1953年Watson和Click发表了?脱氧核糖核苷酸的结构?的著名论文,提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年,重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术,并完成了第一个细菌基因的克隆,开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的? 随着基因组计划的完成,人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代,人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生,如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题:(P130) 1、基因的概念如何?基因的研究分为几个发展阶段? 概念:基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列,是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段:○120世纪50年代以前,主要从细胞的染色体水平上进行研究,属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后,主要从DNA大分子水平上进行研究,属于分
2009 年山东大学考博–分子生物学试题by admin on 2010年01月25日·2 comments in专业真题 一、名词解释: 1、顺式作用元件; 2、模序与结构域; 3、岗崎片段; 4、Southern Blotting; 5、遗传密码的简并性和摇摆性 二、简答: 1、基因治疗中常用病毒载体类型及特点? 2、IP3-PKB 介导的受体信号转导途径? 3、蛋白质(酶)活性的快速调节方法有哪些?举三例说明磷酸 / 脱磷酸化是酶活性快速调节的重要方式。 4、细胞死亡受体蛋白的分类,组成成员的作用? 5、细胞周期 Cdk 的调控作用。 6、原核生物 DNA复制后随链合成中参与的酶和蛋白质及作用? 7、举出 5 种类型 RNA并简述其作用。 三、论述: 1、原核生物和真核生物表达调控的层次有哪些?调控机制。 2、原核生物和真核生物 DNA复制的起始、延长和终止有哪些不同点?复制过程 参与的因子及功能? 08 中科院分子生物学试题 1、表观遗传,及调控方式,还有蛋白质通过哪些共价修饰调控其功能? 2、蛋白质与DNA结合的方法和比较,EMSA和 DNase1足迹法? 3、密码子改造研究新蛋白药物,原理,关键和方法 4、设计研究未知基因(预测两个跨膜区域)功能的实验方案(不低于 4 个) 5、质粒改造原则 6、诱导全能干细胞的方法,实验方案等。(去年的nature上发表的) 个人认为除了第二和五题之外,其它的题目都属于一骑绝尘的,要么会,要么不会,想蒙是 绝对没门的。 这门专业课能及格,我想都不错了,特别是1, 3, 6 题。 不知道大家做的如何,反正第一题,我是意思都没看懂,不知道连续的 3 问是不是指 1 个东西。还是最后 1 问是单独的,与前面的 2 问无关
一、名词解释 1、广义分子生物学:在分子水平上研究生命本质的科学,其研究对象是生物大分子的结构和功能。2 2、狭义分子生物学:即核酸(基因)的分子生物学,研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程,以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和酶的结构与功能 3、基因:遗传信息的基本单位。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位,是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的RNA病毒而言则是RNA序列)。 4、基因:基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,包含产生一条多肽链或功能RNA 所必需的全部核苷酸序列。 5、功能基因组学:是依附于对DNA序列的了解,应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。 6、蛋白质组学:是以蛋白质组为研究对象,研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。 7、生物信息学:对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输 8、蛋白质组:指的是由一个基因组表达的全部蛋白质 9、功能蛋白质组学:是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。 10、单细胞蛋白:也叫微生物蛋白,它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而,单细胞蛋白不是一种纯蛋白质,而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。 11、基因组:指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。 12、C值:指生物单倍体基因组的全部DNA的含量,单位以pg或Mb表示。 13、C值矛盾:C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。 14、重叠基因:共有同一段DNA序列的两个或多个基因。 15、基因重叠:同一段核酸序列参与了不同基因编码的现象。 16、单拷贝序列:单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次,因而复性速度很慢。单拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息,编码各种不同功能的蛋白质。 17、低度重复序列:低度重复序列是指在基因组中含有2~10个拷贝的序列 18、中度重复序列:中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万(<105)次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序,但慢于高度重复顺序。 19、高度重复序列:基因组中有数千个到几百万个拷贝的DNA序列。这些重复序列的长度为6~200碱基对。 20、基因家族:真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因,可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。 21、基因簇:基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位,定位于染色体的特殊区域。 22、超基因家族:由基因家族和单基因组成的大基因家族,各成员序列同源性低,但编码的产物功能相似。如免疫球蛋白家族。 23、假基因:一种类似于基因序列,其核苷酸序列同其相应的正常功能基因基本相同、但却不能合成功能蛋白的失活基因。 24、复制:是指以原来DNA(母链)为模板合成新DNA(子链)的过程。或生物体以DNA/RNA
2012 生化分子 一、名词解释 1.氧化磷酸化 【答案】伴随电子从底物到氧的传递,ADP被磷酸化形成ATP的酶促过程即是氧化磷酸化作用(oxidative phosphorylation)。 氧化磷酸化的全过程可用方程式表示如下: NADH+H++3ADP+3Pi+1/2 O2 NAD+ + 4H2O + 3ATP 2.操纵子 【答案】操纵子即基因表达的协调单位(coordination unit), 它们有共同的控制区(control region) 和调节系统(regulation system)。 操纵子包括在功能上彼此有关的结构基因和控制部位,后者由启动子(promoter, P) 和操纵基因(operator, O)所组成。 一个操纵子的全部基因都排列在一起,其中虽然包括若干个结构基因,可是通过转录形成的确是一条多顺反子mRNA (polycistronic mRNA)。 操纵子中的控制部位可接受调节基因产物的调节。 3.非编码RNA 【答案】非编码RNA(Non-coding RNA)是指不编码蛋白质的RNA。 其中包括rRNA,tRNA,snRNA,snoRNA 和microRNA 等多种已知功能的 RNA,还包括未知功能的RNA。 这些RNA的共同特点是都能从基因组上转录而来,但是不翻译成蛋白,在RNA 水平上就能行使各自的生物学功能了。 非编码RNA 从长度上来划分可以分为3类:小于50 nt,包括microRNA,siRNA,piRNA;50 nt到500 nt,包括rRNA,tRNA,snRNA,snoRNA,SLRNA,SRPRNA 等等;大于500 nt,包括长的mRNA-like 的非编码RNA,长的不带polyA 尾巴的非编码RNA等等。 4.表观遗传调控 【答案】表观遗传学(epigenetics)则是指在基因的DNA序列没有发生改变的情况下,基因功能发生了可遗传的变化,并最终导致了表型的变化。 调节机制包括: DNA修饰指DNA共价结合一个修饰基团,使具有相同序列的等位基因处于不同修饰状态 非编码RNA调控非编码RNA调控是通过某些机制实现对基因转录的调控,如RNA干扰 组蛋白修饰真核生物DNA被组蛋白组成的核小体紧密包绕,组蛋白上的许多位点都可以被修饰,尤其是赖氨酸。组蛋白修饰可影响组蛋白与DNA双链的亲和性,从而改变染色质的疏松和凝集状态,进而影响转录因子等调节蛋白与染色质的结合,影响基因表达 染色质重塑染色质重塑是由染色质重塑复合物介导的一系列以染色质上核小体变化为基本特征的生物学过程 核小体定位核小体是基因转录的障碍,被组蛋白紧密缠绕的DNA是无法与众多转录因子以及活化因子结合的。因此,核小体在基因组位置的改变对于调控基因表达有着重要影响。 5.代组 【答案】代组是指生物体源性代物质的动态整体。 而传统的代概念既包括生物合成,也包括生物分解,因此理论上代物应包括核酸、蛋白质、脂类生物大分子以及其他小分子代物质。 代组学(metabonomics/metabolomics)是效仿基因组学和蛋白质组学的研究思想,对生物体所有代物进行定量分析,并寻找代物与生理病理变化的相对关系的研究方式,是系统生物学的组成部分。其研究对象大都是相对分子质量1000以的小分子物质。 二、单选 1.蛋白质的二级结构包括:α螺旋β折叠β转角和β凸起无规卷曲 2.鉴别精氨酸常用坂口反应 精氨酸与α-萘酚在碱性次溴酸钠(或次溴酸钾)中发生反应,得到红色产物 3.G+C 含量越高,Tm值越高的原因是: G与C配对,形成3个氢键。 4.仅一个手性碳原子的构型不同的非对映异构体成为差向异构体(epimer),如葡萄糖和甘露糖,葡萄糖和半乳糖 5.多糖根据是由一种还是多种单糖单位组成可分为同多糖和杂多糖。同多糖包括淀粉,糖原,右旋糖酐,菊粉,纤维素,
2008年中科院动物所生物化学与分子生物学博士题 一名词解释 密码子的变偶性程序性死亡冈崎片断单克隆抗体基因治疗SD序列 移码突变Z型DNA蛋白质组学反向PCR 二大题 简述真核生物宁帽子结构和功能。 简述No作为信号分子的调节作用。 运用你所学的知识和可能的实验经验,研究一个新基因的生理功能。 已知A和B蛋白质作用于同一生理功能,至少用三种方法证明A和B之间有无相互作用,并给出所用原理。 结合当前科学前沿,阐述真核生物基因表达调控。 2008年浙江大学分子生物学考博试题问答题:双向电泳的原理及应用 三种分子标记方法 描述两种大规模研究DNA的方法 2 0 0 7年诺贝尔生理与医学奖授予什么技术,该技术的应用 人类基因组中有一基因为2Kb,提到的基因组为10微克,计算该基因的含量名词解释: 免疫沉淀,RNA剪切,核糖开矢,分子伴侣, 浙江大学2006秋博分子生物学考题 分子生物学(甲) 名词解释(每个4分) 原位杂交、顺式作用元件、信号肽、选择性剪接、C?值矛盾(C-ValUe ParadOX ) 问答题(每个20分) 1、RNAi的优缺点,如何避免改正 2、何为正向遗传学、反向遗传学,阐述一条反向遗传学研究功能基因的方法 3、真核生物基因表达调控的途径 4、近年分子生物学中诺贝尔奖有哪些,请举二例,说明内容和意义 2008年华中科技大学生化与分子考试试题生化与分子共七道题: 1.蛋白质的结构原则 2.进化中为什么选择蛋白和RNA作为酶 3.矢于盐浓度对蛋白与DNA结合能力的影响(具体的题太长,叙述难免出错,所有把考点给出来大家斟酌)
4.基因功能的研究方法,简述3类及原理 5.真核与原核细胞的启动子的结构和功能及翻译起始的差异与共同点 6.矢于基因CDNA克隆和蛋白表达的方法的实验设计题!有一植物中共有的基因与某重要功 能有矢。请设计试验并叙述相矢试验技术和方法' 在烟叶中克隆该基因的CDNA全长,并获得用于获取抗体的蛋白! 7. 基因靶向技术的原理和意义!(这个话题这两年很火,情理之中,呵呵!) 2008年最新协和医科大学博士生入学专业分子生物学考试试题 第一部分:填空 疯牛病的致病原因 什么是原病毒 SD序列 信号肽识别序列的组成部分和-…部分 乳糖操纵子的调控序列 ................................................... 第二部分:大题,2道 1.给了一段序列要求涉及合适的引物,扩增岀改序列,(考点为引物设计原则) 2.给了一个质粒序列,和一段待插入的基因组DNA片段,然后酶切后电泳,酶切后电泳,三个泳道有三种不同的条带,分析其产生情况(考点为克隆部分) 第三部分: 1.紫外线过度照射后容易引发皮肤癌,正常机体通过何种机制修复 2.介绍酵母双杂交的原理和应用 3.举例说明小RNA在发育中的作用和意义 4.目前一种观点认为”转录后调控”这种说法不妥,你认为呢 5.(1)转座子和内含子序列是不是“垃圾序列” (2)随着表观遗传学和小分子RNA的研究进展,许多人认为“中心法则”已经过时, 请谈一下你对此观点的看法 中科院微生物所分子生物学(专业) 一、英文缩写,要求写岀英文全称,共15个, RT-PCR MHC EST AUS 二、解释并比较,共5个,全是英文名词。 1 。antigenic shift 禾口antigenic drift 其他的记不得了 三、简答题6个
浙江大学医学博士考试分子生物学(乙)2005-2015年真题2015年分子生物学(乙) 1.什么是基因转录?什么是基因表达?两者区别?(10分) 2.染色质状态改变的机制,基因选择性开关的可能临床应用。(10分) 3.什么是RNA剪接?什么是RNA编辑?什么是选择性剪接?(10分) 4.如果组织中某种蛋白表达量很低,如何获得高浓度的这种蛋白?(10分) 5.什么是非编码RNA?有哪些?长链非编码RNA的功能。(10分) 6.什么是遗传?什么是表观遗传?表观遗传的分子机制。(10分) 7.核酸测序的发展史,当代最主流的测序技术在分子生物学中的应用。(10分) 8.如何确定P53蛋白和蛋白X有相互作用。(10分) 9.什么是超分辨率荧光显微镜(2014年诺贝尔化学奖)?在分子生物学中的应用?你想拥有怎样的显微镜?(10分) 10.从分子水平上设计试验证明镉对血管有损伤作用。(10分) 2014年分子生物学(乙) 1.图示基因表达过程并指出调控关键点。10分 2.蛋白质现实中以三级以上结构存在,为什么教科书中从蛋白质一、二级结构写起?10分 3.什么是siRNA、miRNA,其作用的异同点?10分 4.什么是γH2AX,为什么可用于DNA损伤的检测?8分 5.解释细胞自噬过程。7分 6.DNA、RNA、蛋白质相互作用的方式及涉及的分子生物学现象。10分 7.设计试验使得人源性基因在大肠杆菌中高表达。10分 8.什么是PM2.5?设计试验从细胞水平研究其特点及作用机制。10分 9.曹操家族基因研究发现,曹操非汉相曹参后代,同时推翻了曹操为夏侯氏抱养而来的说法。 请你写一篇科普小论文介绍其中的一些分子生物学知识并证明你的结论。10分10.2013诺贝尔奖,囊泡运输的知识。15分 2013年分子生物学(乙) 浙大考博分子生物学 名词解释(全中文,9题,36分): 细胞骨架、细胞增殖、干细胞、细胞分化、 细胞膜的跨膜转运、信号肽、自噬小体、蛋白激酶、呼吸链。 1.细胞连接的概念,分类及特点。 2.线粒体在细胞死亡中的作用:
1、名词解释 基因:基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,包含产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。 基因组:指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。 C值:指生物单倍体基因组的全部DNA的含量,单位以pg(10-12克) 或Mb表示。 C值矛盾:C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。 主要表现为: ☆ C值不随生物的进化程度和复杂性而增加 ☆亲缘关系密切的生物C值相差很大 ☆高等真核生物具有比用于遗传高得多的C值。 基因家族:真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因,可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。 基因簇:基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位,定位于染色体的特殊区域。 超基因家族:由基因家族和单基因组成的大基因家族,各成员序列同源性低,但编码的产物功能相似。如免疫球蛋白家族。 半保留复制:DNA复制过程中,新合成的子代DNA分子中,一条链是新合成的,另外一条链来自亲代,这种复制方式称为半保留复制。 回环模型:DNA polII以异二聚体形式催化DNA双螺旋两条链同时进行复制,在复制叉处滞后链模板以一个催化中心形成一个环,使滞后链方向颠倒,但催化方向不变,以适应双链同步进行复制。 SOS反应:许多能造成DNA损伤或抑制DNA复制的过程能引起一系列复杂的诱导效应,这种效应称为应急反应。 同义突变(synonymous mutation ):指突变改变了密码子的组成,但由于密码子的简并性没有改变所编码的氨基酸序列的突变。 错义突变( missense mutation ):指基因突变改变了所编码氨基酸的序列,不同程度地影响蛋白质和酶的活性。 无义突变( nonsense mutation ):指基因改变使代表某种氨基酸的密码子变为终止密码子,导致肽链合成过早终止。 同源重组(homologous recombination):又称一般性重组,指发生在两条同源DNA分子之间,通过配对、链断裂和再连接,而产生片段交换过程。重组产物称为重组体。 Holliday中间体:同源重组中,两条同源的DNA分子经过配对、断裂和再连接,形成的连接分子,称为Holliday中间体。 转座子:转座元件(transposon or transposable element):基因组上中可以
1比较基因组学(comparative genomics):是基于基因组图谱和测序的基础上对已知的基因和基因组进行比较,用来了解基因的功能、表达机理和物种进化的科学。 2等位排斥:淋巴细胞中产生免疫球蛋白的基因位于两条同源染色体上,而免疫球蛋白的基因的表达只发生在一条染色体上,这样因为一条染色体上的基因表达而抑制另一条染色体上相同基因的表达的现象。 3同型排斥:指B淋巴细胞的轻链表达时,只生成一种链k链或入链,不会同时表达k链和入链的现象。 4组织相容性复合体(MHC):能引起强而迅速的排斥反应的抗原,其编码的基因是一组紧密连锁的基因群。 5癌(can cer):是一种无限向外周扩散、浸润的现象,不受机体控而繁殖的细胞,也称恶性肿瘤。 6操纵子(operon):是指原核生物中数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子。 7顺式作用元件(cis-acting element):是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。 8反式作用因子(trans-acting fator):是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子。9基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。10,信息分子:调节细胞生命活动的化学物质。其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息分子;而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子。11受体:是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别
一、判断题 1、原核细胞和真核细胞的差别之一是前者无染色体结构,后者有染色体结构。(√) 2、基因组是指某一种生物所具有的全部基因的总称。(×) 3、真核生物基因的大小通常是外显子的数目和长度决定的。(×) 4、在所有的真核生物中,内含子的长度和序列是高度保守的。(×) 5、酵母的基因普遍要比人的基因小,因此,酵母基因组编码的蛋白质普遍要比人基因组编码的蛋白质要小。(×) 6、在自由的四种核苷酸混合溶液中,任何碱基之间都可以形成氢键而发生配对。× 7、PCR只能扩增双链DNA,不能扩增单链DNA。(×) 8、富含GC的DNA双螺旋比富含AT的DNA双螺旋稳定的主要原因是GC碱基对比AT碱基对多一个氢键。(√) 9、用氯化铯梯度超离心纯化质粒DNA时,蛋白质在离心管的最上部,RNA悬浮在中间,而DNA沉在底部。(×) 10、mRNA的剪接总是产生套索结构。(×) 11、冈崎片段只由DNA组成。(×) 12、端粒酶带有自己的DNA模板。(×) 13、细胞内的DNA复制既需要DNA聚合酶,也需要RNA聚合酶。(×) 14、同源重组和位点特异性重组都形成Holliday中间体结构。(√) 15、与tRNA相连的氨基酸本身在决定何种氨基酸参入到正在延伸的肽链上不起任何作用。(√) 16、转座重组既可以导致基因的失活,也可以导致基因的激活。(√) 17、只有用相同的限制性酶获得的DNA片段末端才能用DNA连接酶连接起来。× 18、在一个基因的编码区内发生的核苷酸的插入或缺失总是导致移码突变。× 19、PCR和末端终止法测序都需要RNA引物。(×) 20、只有用相同的限制性酶获得的DNA片段末端才能用DNA连接酶连接起来。×
分子生物学考研参考 习题
分子生物学考研习题 一、名词解释 1.中心法则(Central Dogma) 2.反向重复序列(IR) 3.DNA链的呼吸作用 4.Cot曲线(Cot1/2) 5.DNA变性,复性 6.DNA的熔解温度(Tm) 7.基因组 8.C-值矛盾 9.基因家族 10.基因簇 11.割裂基因,Intron 内元,Exon 外元 12.卫星DNA 13.半保留复制 14.岗崎片段 15.复制单位replicon 16.复制体replisome 17.先导链,后随链 18.突变(mutation) 19.移码突变(frame-shift mutation) 20.无义突变(nonsense mutation),错义突变(missense mutation),同义突变(samesense mutation) 21.组成型突变(constitutive mutation) 22.突变热点(Mutation Hotpoint) 23.增变基因(mutator gene ) 24.限制-修饰系统(restriction and modificaion) 25.光裂合酶修复(photo reactivation Repair) 26.切除修复(Excision Repair) 27.重组修复(Recombinative—Repair) 28.SOS修复(SOS Repair) 29.转录(transcription) 30.有义链(sense strand) ,反义链(antisense strand) 31.启动子(promoter) 32.终止子(terminator) 33.核酶(ribozyme); 34.核内不均一RNA(hnRNA) 35.反式拼接(trans-splicing)