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鲫鱼血液部分生化指标的测定

鲫鱼血液部分生化指标的测定

姓名:许柳晨

学号:060960055

摘要:本次实验通过对鲫鱼部分生化指标的测定,旨在熟悉和掌握鲫鱼血液生化指标的测定方法,了解这些生化指标在鱼类生产实践和科研的应用。

关键字:鲫鱼;血液;生化指标

1 前言

血液是动物体内循环系统的重要组成部分,起着物质运输、生理调节及生理防御等重要功能.鱼类的血液学指标值不仅与鱼的种类、生活环境和营养有关,还与性别和健康状况有关。正常血液指标值能反映物种的属性和动物的正常生理状态。另外,鱼类血液与机体的代谢及疾病有着密切的关系,当鱼体受到外界因子的影响而发生生理或病理变化时,必定会在血液指标中反映出来。因而,对鱼类血液学进行研究,不仅在鱼类血液生理的基础理论方面是重要的,而且在鱼类的人工养殖、鱼病防治方面也是重要的。如今,血液指标被广泛地用来评价鱼类的健康状况、营养状况及对环境的适应状况,是重要的生理、病理和毒理学指标。依据血液指标的改变,所指示的生物机体的功能变化,不仅可以发现环境有毒物质作用的靶器官系统,也可为阐明环境有毒物质作用机理提供有力依据。因此,鱼类的血液学指标可应用于鱼病诊断和环境检测领域。另外,鱼类的血清指标在遗传育种方面也具有重要的研究意义。

2 材料与方法

2.1 动物来源

实验用鱼为鲫鱼[Carassius auratus,属鲤形目,鲤科,鲫属],雌性。

2.2 试剂盒及仪器

GLU(葡萄糖)试剂盒、ALT(丙氨酸氨基转移酶)试剂盒、AST(天门冬氨酸氨基转移酶)试剂盒、CHO(总胆固醇)试剂盒、TRIG(甘油三酯)试剂盒、CRE(肌酐)试剂盒及ACTOⅡ全自动生化分析仪。

2.3 血液的采集及样品的制备

将鲫鱼放入含有MS-22(50-200mg/L)的水中,待其麻醉后,用5ml注射器在鱼尾柄动脉取血4ml以上,除下针头将将一半血液移入采血管中静置析出上清液,即血清。另一半血液用肝素钠抗凝制成血浆。

2.4 生化指标的测定

分别按各试剂盒的说明书将试剂和样品混合。每孔加500μl混合液,置ACTOⅡ全自动生化分析仪中分别测定GLU、ALT、AST、CHO、TRIG及CRE的含量。

3 结果

将所得数据整理成表(表1),分别计算出其平均值( )测定结果以“ ±S”表示,结果见表2。

表1 各组原始数据汇总

鲫鱼血液部分生化指标的测定

TG (mmol/L)CRE

(μmol/L)

本组(第1组)

CRE(μmol/L)

AST

(U/L)

ATL

(U/L)

CHO

(mmol/L)

GLU

(mmol/L)

1 3.04

2 2.13

3 1.98

4 3.02

5 2.95

6 2.7

7 2.34

8 2.18

9 2.35

107.02

11 1.8727.40

12 1.6428.00

13 1.7426.60

14 1.6725.20

15 4.3327.40

16 6.3326.10

17 3.52

18 2.93

19 2.73

20 2.9159.1601.717 3.5433.17

21 2.2525.3694.117 3.39 2.22

22 3.244109585 3.5326.23

23 2.2550.2769.68410.6432.85

24 2.5960.1977.8108 4.9148.68

25 1.2428.7922.634 2.38 5.03

268.7554771.866 3.5925.69 27460039.4653.42 6.88200

28 6.4649.1595.4000

29 2.35018.32264000

30110044.6 3.34100

31 1.8447.5113257 3.730

32 2.1126.6746.326 2.49 3.93

33 2.3825.560721 2.15 3.52

平均值( )175.5043.1526.78 684.8838.8631.9527.24

标准偏差(S)804.4011.770.87 322.9133.75102.1150.40

表2 鲫鱼生化指标(n=13; ±S)

葡萄糖丙氨酸氨基转移酶天门冬氨酸氨基转移酶总胆固醇甘油三酯肌酐

GLU(mmol/L) ALT(U/L) AST(U/L) CHO(mmol/L) TG(mmol/L) CRE(μmol/L)

27.24±50.40 38.86±33.75 684.88±322.91 31.95±102.11 2.89±1.82 43.15±11.77

4 讨论

动物血液的生化参数是动物机体健康状况的主要指标,也是其疾病诊断和测定的依据之一,鱼类血液生化指标虽然受诸多因素的影响,但仍然能够反映该鱼类的健康状况和生理状况。如AST和ALT是广泛存在于动物组织细胞线粒体内的重要氨基转移酶,正常情况下血清中的AST和ALT只有微量,但当心肝等内脏器官发生损伤时,组织内AST、ALT的活性将降低而血清内这两种酶的活性将升高。

从上述各组总数据的(n=13;±S)结果中标准差均很大,可以看出实验误差极大。而本组测的CRE值(11-13号为血清;14-16号为血浆,未溶血)的标准差(S)为0.87,较小,说明本组实验操作得不错。

实验出现误差主要是在样血有不同程度的溶血,致使测得数值严重偏离了鱼类正常的生理生化指标范围。另外,实验混样和加样的操作也可能使实验结果超出误差范围。今后应勤加练习,努力掌握好这方面的操作技巧,以期能在实践娴熟地应用。