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5-1DNA的粗提取与鉴定导学案自用

《课题1 DNA的粗提取与鉴定》导学案

〖学习目标〗1.了解DNA的物理、化学性质;(重点)

2.理解DNA粗提取与鉴定的原理;(重点)

【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成下列问题,并初步巩固。

一、基础知识

【活动1】阅读教材P54“基础知识”,讨论并回答下列问题:

1.(记忆)提取生物大分子的基本思路是利用它们的的不同进行分离。

2.(记忆)DNA的溶解性特点:

DNA在中溶解度不同;DNA不溶于而蛋白质溶于。

【思考1】据图5-1分析:

DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点?

要使DNA溶解,需要使用什么浓度?

要使DNA析出,又需要使用什么浓度?

【思考2】利用DNA不溶于的原理,可以达到目的。3.(记忆)DNA的耐受性特点:能分解蛋白质而不能分解DNA;

在℃时蛋白质变性沉淀而DNA分子不变性。

能与蛋白质结合瓦解细胞膜而不破坏DNA分子。

4.(记忆)DNA的鉴定原理:当鉴定提取出的物质是否是DNA时,需要使用进行鉴定。

在条件下,该试剂与DNA反应,呈现。

二、实验设计:

【活动2】阅读教材P55“实验设计”,讨论并回答下列问题:

1.(记忆)实验材料的选取:选取材料时应本着、、的原则。【思考3】你认为教材提供的材料中不适合提取DNA。

2.(记忆)破碎细胞,获取含DNA的滤液:

鸡血:向鸡血细胞液中加入一定量并玻棒搅拌,用过滤后,收集。

洋葱:向研钵中加入一定量和,搅拌研磨,用过滤后,收集。【思考4】在以上实验中,蒸馏水的作用是,

洗涤剂的作用是,食盐的作用是。

3.(学会)去除滤液中的杂质:

方案一:30mL滤液→加NaCl使DNA溶解→过滤得滤液→加蒸馏水使DNA析出

→过滤得过滤物→放到2mol/LNaCl溶液中溶解→ DNA-NaCl溶解液

方案二:30mL滤液→加嫩肉粉(木瓜蛋白酶)→静置10分钟→得DNA滤液

方案三:30mL滤液→℃处理→过滤得DNA滤液

【思考5】以上三个方案的原理分别是什么?

方案一原理:;

方案二原理:;

方案三原理:。

【思考6】方案一:

“加NaCl使DNA溶解→过滤得滤液”的目的是除去 (可溶、不溶)于NaCl溶液中的细胞杂质“加蒸馏水使DNA析出→过滤得过滤物”的目的是除去 (可溶、不溶)于NaCl溶液中的细胞杂质4.(记忆)DNA的析出:DNA滤液与混合,

静置一段时间后析出的就是DNA。