马原理1105考

2011年5月年《马克思主义基本原理概论》考试

课程论文写作要求

一、论文题目一：

用否定之否定规律阐明“前途光明、道路曲折”是对待新生事物的科学态度二、论文写作所需参考资料

1．马克思、恩格斯：《共产党宣言》，《马克思恩格斯选集》第1卷，人民出版社1995年版。

2．恩格斯：《在马克思目前的讲话》，《马克思恩格斯选集》第3卷，人民出版社1995年版。

3．列宁：《马克思主义的三个来源和三个组成部分》《列宁选集》第2卷，人民出版社1995年版。

4、毛泽东：《马克思主义基本原理至今未变，个别结论可以改变》，《毛泽东文集》第8卷，人民出版社1999年版。

5．邓小平：《在武昌、深圳、珠海、上海等地的谈话要点》，《邓小平文选》第3卷，人民出版社1993年版。

6. 江泽民：《在庆祝中国共产党成立八十周年大会上的讲话》，《江泽民文选》第3卷，人民出版社2006年版。

7．江泽民：《科学对待马克思主义》，《江泽民文选》第3卷，人民出版社2006年版。

9.胡锦涛：《树立和落实科学发展观》，《十六大以来重要文献选编》（上），中央文献出版社2005年版。

10.胡锦涛：《在纪念毛泽东同志诞辰一百一十周年座谈会上的讲话》，《十六大以来重要文献选编》（上），中央文献出版社2005年版。

11.胡锦涛：《在邓小平同志诞辰一百周年纪念大会上的讲话》，《十六大以来重要文献选编》（中），中央文献出版社2006年版。

12.中共中央宣传部理论局：《科学发展观学习读本》，学习出版社2006年版。

13.胡锦涛：《在全党大力弘扬求真务实精神，大兴求真务实之风》，《十六大以来重要文献选编》（上），中央文献出版社2005年版。

三、论述写作要考虑的要点

肯定是事物维持其存在的方面，否定是事物促使其灭亡的方面。否定之否定规律表明，事物发展一个周期要经历两次否定、三个阶段，即：肯定、否定、否定之否定，如此循环往复，不断发展。事物发展总方向、总趋势是前进和上升的，具体道路是曲折的。发展是新事物代替旧事物，新生事物是合乎客观必然性、规律性的事物，由于发展的本性和新生事物的特点，新生事物必然战胜旧事物，但新生事物战胜旧事物是一个过程。“前途光明、道路曲折”就是对待新生事物具有革命乐观主义精神。实践证明，“前途光明、道路曲折”是我们对待新生事物的科学态度。在对待新生事物上，既要反对盲目乐观主义，又要反对悲观主义。

四、课程论文写作具体要求

（一）写作格式要求

1、标题:黑体二号居中,上下各空一行；

2、正文：小四号宋体，每段起首空两格，回行顶格，行距为多倍,1.25；

3、一级标题：序号为“一、”，小三号黑体字，独占行，起首空两格；

4、二标题序号为“（一）”，四号宋体，加粗，独占行，起首空两格。

（二）论文字数要求

论文字数要求在3000字以上,一律不得多于4500字，如果发现论文属于抄袭，按不合格处理。

（三）论文写作注意事项

1、题目符合要求、参考文献齐全；

2、论点突出明确、论据详实充分；

3、结构完整合理、语言流畅通顺；

4、特色鲜明独到、结合本人思考；

5、引证资料广泛、杜绝整段抄袭。

《马克思主义基本原理概论》任课教师刘丽

2011年5月

2011年5月年《马克思主义基本原理概论》考试

课程论文写作要求

一、论文题目二：

试述“马克思主义具有与时俱进的理论品质”

二、论文写作所需参考资料

1．马克思、恩格斯：《共产党宣言》，《马克思恩格斯选集》第1卷，人民出版社1995年版。

2．恩格斯：《在马克思目前的讲话》，《马克思恩格斯选集》第3卷，人民出版社1995年版。

3．列宁：《马克思主义的三个来源和三个组成部分》《列宁选集》第2卷，人民出版社1995年版。

4、毛泽东：《马克思主义基本原理至今未变，个别结论可以改变》，《毛泽东文集》第8卷，人民出版社1999年版。

5．邓小平：《在武昌、深圳、珠海、上海等地的谈话要点》，《邓小平文选》第3卷，人民出版社1993年版。

6. 江泽民：《在庆祝中国共产党成立八十周年大会上的讲话》，《江泽民文选》第3卷，人民出版社2006年版。

7．江泽民：《科学对待马克思主义》，《江泽民文选》第3卷，人民出版社2006年版。

9.胡锦涛：《树立和落实科学发展观》，《十六大以来重要文献选编》（上），中央文献出版社2005年版。

10.胡锦涛：《在纪念毛泽东同志诞辰一百一十周年座谈会上的讲话》，《十六大以来重要文献选编》（上），中央文献出版社2005年版。

11.胡锦涛：《在邓小平同志诞辰一百周年纪念大会上的讲话》，《十六大以来重要文献选编》（中），中央文献出版社2006年版。

12.中共中央宣传部理论局：《科学发展观学习读本》，学习出版社2006年版。

13.胡锦涛：《在全党大力弘扬求真务实精神，大兴求真务实之风》，《十六大以来重要文献选编》（上），中央文献出版社2005年版。

三、论述写作要考虑的要点

2001年，江泽民《在庆祝中国共产党成立八十周年大会上的讲话》（“七一”讲话）指出：“马克思主义具有与时俱进的理论品质。”这是一个精辟论断。对于认识马克思主义的理论品质，进一步解放思想、实事求是，与时俱进、开拓创新，具有重要意义。马克思主义是关于自然、人类社会和人类思维的最一般本质和最一般规律的科学理论，特别是关于人类社会本质以及历史发展规律的科学理论，是人们认识世界和改造世界，特别是人们认识社会和改造社会的革命学说。也就是说，马克思主义是真理和价值的统一。真理是主体符合客体本质和规律的认识，价值是客体满足主体需要和能力的属性。真理和价值都是具体的和历史的。马克

思主义作为真理和价值体系，是随着时代的发展而发展的。马克思主义是反映社会存在的社会意识，在资本主义社会，是不占统治地位的非意识形态的社会意识形式；在社会主义社会，是占统治地位的意识形态的社会意识形式。社会存在是社会生活的物质方面，社会意识是社会生活的精神方面。社会存在第一性，社会意识第二性，社会意识是社会存在的反映。社会意识对于社会存在既具有依赖性，又具有相对独立性。社会存在决定社会意识，社会意识反作用于社会存在。马克思主义作为社会意识形式和社会意识形态，同样是随着时代的发展而发展的。四、课程论文写作具体要求

（一）写作格式要求

1、标题:黑体二号居中,上下各空一行；

2、正文：小四号宋体，每段起首空两格，回行顶格，行距为多倍,1.25；

3、一级标题：序号为“一、”，小三号黑体字，独占行，起首空两格；

4、二标题序号为“（一）”，四号宋体，加粗，独占行，起首空两格。

（二）论文字数标准

论文字数要求在3000字以上,一律不得多于4500字，如果发现论文属于抄袭，一律按不合格处理。

（三）论文写作注意事项

1、题目符合要求、参考文献齐全；

2、论点突出明确、论据详实充分；

3、结构完整合理、语言流畅通顺；

4、特色鲜明独到、结合本人思考；

5、引证资料广泛、杜绝整段抄袭。

《马克思主义基本原理概论》任课教师刘丽

2011年5月

2011年5月年《马克思主义基本原理概论》考试

课程论文写作要求

一、阅读材料

“只有在共同体中，个人才能获得全面发展其才能的手段，也就是说，只有在共同体中才可能有个人自由。在过去的种种冒充的共同体中，如在国家等等中，个人自由只是对那些在统治阶级范围内发展的个人来说是存在的，他们之所以有个人自由，只是因为他们是这一阶级的个人。从前各个人联合而成的虚假的共同体，总是相对于各个人而独立的；由于这种共同体是一个阶级反对另一个阶级的联合，因此对于被统治的阶级来说，它不仅是完全虚幻的共同体，而且是新的桎梏。在真正的共同体的条件下，各个人在自己的联合中并通过这种联合获得自己的自由。”（马克思恩格斯《德意志意识形态》）“代替那存在着阶级和阶级对立的资产阶级旧社会的，将是这样一个联合体，在那里，每个人的自由发展是一切人的自由发展的条件。”（马克思恩格斯《共产党宣言》）

二、论文题目三：

为什么说共产主义社会是人类最崇高的理想？

三、论文写作所需参考资料

1．马克思、恩格斯：《共产党宣言》，《马克思恩格斯选集》第1卷，人民出版社1995年版。

2．恩格斯：《在马克思目前的讲话》，《马克思恩格斯选集》第3卷，人民出版社1995年版。

3．列宁：《马克思主义的三个来源和三个组成部分》《列宁选集》第2卷，人民出版社1995年版。

4、毛泽东：《马克思主义基本原理至今未变，个别结论可以改变》，《毛泽东文集》第8卷，人民出版社1999年版。

5．邓小平：《在武昌、深圳、珠海、上海等地的谈话要点》，《邓小平文选》第3卷，人民出版社1993年版。

6. 江泽民：《在庆祝中国共产党成立八十周年大会上的讲话》，《江泽民文选》第3卷，人民出版社2006年版。

7．江泽民：《科学对待马克思主义》，《江泽民文选》第3卷，人民出版社2006年版。

9.胡锦涛：《树立和落实科学发展观》，《十六大以来重要文献选编》（上），中央文献出版社2005年版。

10.胡锦涛：《在纪念毛泽东同志诞辰一百一十周年座谈会上的讲话》，《十六大以来重要文献选编》（上），中央文献出版社2005年版。

11.胡锦涛：《在邓小平同志诞辰一百周年纪念大会上的讲话》，《十六大以来重要文献选编》（中），中央文献出版社2006年版。

12.中共中央宣传部理论局：《科学发展观学习读本》，学习出版社2006年版。

13.胡锦涛：《在全党大力弘扬求真务实精神，大兴求真务实之风》，《十六大以来重要文献选编》（上），中央文献出版社2005年版。

四、论述写作要考虑的要点

个人和共同体（集体）的辩证关系：个人在共同体中获得自由，但共同体在历史上却存在着两种基本形式：一种是阶级社会中“冒充的（虚假的、虚幻的）共同体”，另一种是无阶级共产主义社会中“真正的共同体”——“自由人联合体”。在前者，只有极个别人、极少数人的自由，在后者，才有绝大多数人、全体人的自由。

在阶级社会中，存在着个人和共同体（集体）之间的矛盾：极个别人、极少数人的自由发展以牺牲绝大多数人的自由发展为代价。在无阶级共产主义社会——“自由人联合体”中，个人和共同体（集体）之间的矛盾得到解决，在这种情况下，“每个人的自由发展是一切人的自由发展的条件。”个人和共同体（集体）的辩证关系不是抽象的，而是具体的和历史的。

马克思主义不应抽象地要求个人利益在任何情况下均应服从集体利益，而应具体地和历史地处理个人和集体的辩证关系：把个人利益区分为正当的和不正当的，把集体利益区分为真正的和冒充的，既反对不正当的个人利益，又反对冒充的集体利益，坚持正当的个人利益和真正的集体利益的统一。当然，当正当的个人利益和真正的集体利益发生矛盾时，仍应要求正当的个人利益服从真正的集体利益。个人的自由发展和集体的自由发展互为前提和条件，只讲个人的存在和发展，或者只讲集体的存在和发展，都是片面的和错误的。（运用有关哲学观点、方法结合个人学习体会论述）

五、课程论文写作具体要求

（一）写作格式要求

1、标题:黑体二号居中,上下各空一行；

2、正文：小四号宋体，每段起首空两格，回行顶格，行距为多倍,1.25；

3、一级标题：序号为“一、”，小三号黑体字，独占行，起首空两格；

4、二标题序号为“（一）”，四号宋体，加粗，独占行，起首空两格。

（二）论文字数标准

论文字数要求在3000字以上,一律不得多于4500字，如果发现论文属于抄袭，一律按不合格处理。

（三）论文写作注意事项

1、题目符合要求、参考文献齐全；

2、论点突出明确、论据详实充分；

3、结构完整合理、语言流畅通顺；

4、特色鲜明独到、结合本人思考；

5、引证资料广泛、杜绝整段抄袭。

《马克思主义基本原理概论》任课教师刘丽 2011年5月

考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度Word版

实验报告 学院：第二临床医学院专业：临床医学年级：2013级班级：1班姓名：学号：日期：2014,3,8 得分：实验课程：生物化学实验 实验名称：蛋白质的定量测定（五）——考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 【实验目的】 掌握考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量的原理和方法。 【实验原理】 考马斯亮蓝G-250（Coomassie G-250）是一种甲基取代的三苯基甲烷，分子中磺酸基的蓝色染料，在465nm处有最大吸收值。考马斯亮蓝G-250能与蛋白质通过范得华相互作用形成蛋白质—考马斯亮蓝复合物蓝色溶液，引起该染料的最大吸收λmax的位置发生红移，在595nm处有最大吸收值。由于蛋白质—考马斯亮蓝复合物在595n处的光吸收远高于考马斯亮蓝在465nm处的光吸收，因此可大大地提高蛋白质的测定灵敏度。蛋白质—考马斯亮蓝复合物溶液颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。利用溶液颜色的差异进行比色测定，适合于蛋白质类的定量分析尤其适合于稀有蛋白质的微量分析。考马斯亮蓝G-250试剂呈色反应颜色稳定、灵敏度高，最低测试蛋白质量在1ug左右。 【试剂与器材】 试剂： 考马斯亮蓝试剂：考马斯亮蓝G-250溶于50ml95%乙醇，加入100ml质量浓度为0.85g/ml 的磷酸，用蒸馏水稀释到1000ml。 标准蛋白质溶液：结晶牛血清清蛋白，预先经微量凯氏定氮法标定该蛋白质的百分含量，然后根据该蛋白的纯度用0.15mol/LNacl配制成1.0mg/ml蛋白溶液。

器材： 试管和试管架 722型分光光度计 吸量管 移液枪 【实验步骤】 一、制作标准曲线 各管混匀后，静置3min，以0号管为空白管调零，在595nm波长下分别测定各管溶液的吸光度值（A595）. 以A595值为纵坐标，蛋白质浓度为横坐标，绘制标准曲线。 二、待测蛋白质浓度测定 测定方法同上，1ml待测蛋白质家5ml考马斯亮蓝试剂，。用上述0号管调零，测出血清的A595值。 【实验结果】

扫描仪的基本原理及基础知识

扫描仪的基本原理及基础知识 扫描仪是一种光机电一体化的高科技产品。它是将各种形式的图像信息输入计算机的重要工具。是继键盘和鼠标之后的第三代计算机输入设备。也是功能极强的一种输入设备。人们通常将扫描仪用于计算机图像的输入，从最直接的图片、照片、胶片到各类图纸图形以及各类文稿资料都可以用扫描仪输入到计算机中进而实现对这些图像形式的信息的处理、管理、使用、存贮、输出等。目前扫描仪已广泛应用于各类图形图像处理、出版、印刷、广告制作、办公自动化、多媒体、图文数据库、图文通讯、工程图纸输入等许多领域。 2.扫描仪由哪些部分组成?是如何工作的? 扫描仪主要由光学成像部分、机械传动部分和转换电路部分组成。这几部分相互配合将反映图像特征的光信号转换为计算机可接受的电信号。扫描仪的核心是完成光电转换的光电转换部件。目前大多数扫描仪采用的光电转换部件是所谓的电荷耦合器件(CCD)。它可以将照射在其上的光信号转换为对应的电信号。其它主要部分的组成有：光学成像部分的光源、光路和镜头；转换电路部分的A/D转换处理电路及控制机械部分运动的控制电路和机械传动机构的步进电机、扫描头及导轨等。扫描仪工作时首先由光源将光线照在欲输入的图稿上产生表示图像特征的反射光(反射稿)或透射光(透射稿)。光学系统采集这些光线将其聚焦在CCD上，由CCD将光信号转换为电信号，然后由电路部分对这些信号进行A/D转换及处理产生对应的数字信号输送给计算机。当机械传动机构在控制电路的控制下带动装有光学系统和CCD的扫描头与图稿进行相对运动将图稿全部扫描一遍，一幅完整的图像就输入到计算机中去了。 3.扫描仪是如何分类的? 目前市场上扫描仪种类很多，按不同的标准可分成不同的类型。按扫描原理可将扫描仪分为以CCD 为核心的平板式扫描仪、手持式扫描仪和以光电倍增管为核心的滚筒式扫描仪。按扫描图像幅面的大小可分为小幅面的手持式扫描仪、中等幅面的台式扫描仪和大幅面的工程图扫描仪，按扫描图稿的介质可分为反射式(纸材料)扫描仪和透射式(胶片)扫描仪以及既可扫反射稿又可扫透射稿的多用途扫描仪。按用途可将扫描仪分为可用于各种图稿输入的通用型扫描仪和专门用于特殊图像输入的专用型扫描仪如条码读入器、卡片阅读机等。 4.扫描仪的主要性能指标有哪些? 扫描仪的性能指标主要有表示扫描仪精度的分辨率；表示扫描图像灰度层次范围的灰度级；表示扫描图像彩色范围的色彩数，以及扫描速度和扫描幅面等。分辨率表示了扫描仪对图像细节的表面能力，通常用每英寸长度上扫描图像所含有的象素点的个数表示，记做DPI(Dot Per Inch)。目前，多数扫描仪的分辨率在300DPI-2400DPI之间。灰度级表示灰度图像的亮度层次范围。级数越多扫描图像的亮度范围越大、层次越丰富。目前多数扫描仪的灰度为256级。色彩数表示彩色扫描仪所能产生的颜色范围。通常用表示每个象素点上颜色的数据位数(bit)表示。比如常说的真彩色图像指的是每个象素点的颜色用24位二进制数表示，共可表示224=16.8M种颜色，通常称这种扫描仪为24bit真彩色扫描仪。色彩数越多扫描图像越鲜艳真实。扫描速度有多种表示方法，通常用在指定的分辨率和图像尺寸下的扫描时间表示。扫描幅面表示可扫描图稿的最大尺寸，常见的有A4、A3、A0幅面等。 5.手持扫描仪的主要特点及用途是什么? 手持扫描仪的主要优点是体积小、携带方便、价格低廉。其扫描图像的最大宽度是105mm，长度方向不限。使用时由人手推动扫描仪从图稿上移过，扫描图像质量与人的操作有关。扫大图时可用软件实现拼接，手持扫描仪的性能指标一般较低，分辨率通常为400DPI左右，以黑白和灰度的类型居多，彩色类型近来发展较快，此类扫描仪主要用于名片制作、桌面排版、图文数据库、电脑刻字、字符识别(OCR)等方面。由于手持扫描仪的幅面小、精度低、应用范围有限，通常适合于初学者、家庭和资金有限且对幅面和精度要求不高的用户。目前世界市场上70%以上的手持扫描仪是台湾生产的，代表性产品有Mustek系列、Primax 系列、Qtronix系列等。

矩阵键盘的工作原理和扫描确认方式

9.3.1 矩阵键盘的工作原理和扫描确认方式 来源：《AVR单片机嵌入式系统原理与应用实践》M16华东师范大学电子系马潮 当键盘中按键数量较多时，为了减少对I/O 口的占用，通常将按键排列成矩阵形式，也称为行列键盘，这是一种常见的连接方式。矩阵式键盘接口见图9-7 所示，它由行线和列线组成，按键位于行、列的交叉点上。当键被按下时，其交点的行线和列线接通，相应的行线或列线上的电平发生变化，MCU 通过检测行或列线上的电平变化可以确定哪个按键被按下。 图9-7 为一个 4 x 3 的行列结构，可以构成12 个键的键盘。如果使用 4 x 4 的行列结构，就能组成一个16 键的键盘。很明显，在按键数量多的场合，矩阵键盘与独立式按键键盘相比可以节省很多的I/O 口线。 矩阵键盘不仅在连接上比单独式按键复杂，它的按键识别方法也比单独式按键复杂。在矩阵键盘的软件接口程序中，常使用的按键识别方法有行扫描法和线反转法。这两种方法的基本思路是采用循环查循的方法，反复查询按键的状态，因此会大量占用MCU 的时间，所以较好的方式也是采用状态机的方法来设计，尽量减少键盘查询过程对MCU 的占用时间。 下面以图9-7 为例，介绍采用行扫描法对矩阵键盘进行判别的思路。图9-7 中，PD0、PD1、PD2 为3 根列线，作为键盘的输入口（工作于输入方式）。PD3、PD4、PD5、PD6 为4根行线，工作于输出方式，由MCU（扫描）控制其输出的电平值。行扫描法也称为逐行扫描查询法，其按键识别的过程如下。 √将全部行线PD3－PD6 置低电平输出，然后读PD0－PD2 三根输入列线中有无低电平出现。只要有低电平出现，则说明有键按下（实际编程时，还要考虑按键的消抖）。如读到的都是高电平，则表示无键按下。 √在确认有键按下后，需要进入确定具体哪一个键闭合的过程。其思路是：依

考马斯亮蓝法测定可溶性蛋白

考马斯亮蓝法测定可溶性蛋白质含量 原理： 考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色，在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在465nm，后者在595nm在一定蛋白质浓度范围内（1-1000μg），蛋白质与色素结合物在595nm波长下的吸光度与蛋白质含量成正比，故可用于蛋白质的定量测定。 考马斯亮蓝G-250于蛋白质结合反应十分迅速，2min左右即达到平衡。其结合物在室温下1h内保持稳定。此法灵敏度高，易于操作，干扰物质少，是一种比较好的定量法。其缺点是在蛋白质含量很高时线性偏低，且不同来源蛋白质与色素结合状况有一定差异。 材料、仪器设备及试剂 1、材料 小麦叶片、马铃薯块茎、或其他植物材料 2、仪器设备 分光光度计、研钵、烧杯、移液管 3、试剂 （1）标准蛋白质溶液：100μg·Ml-1牛血清白蛋白：称取牛血清白蛋白25mg，加水溶解并定容至100ml,吸取上述溶液40ml，用蒸馏水稀释至100ml即可。（2）考马斯亮蓝G-250溶液：称取100mg考马斯亮蓝G-250，溶于50ml90%乙醇中，加入100ml85%（W/V）的磷酸，再用蒸馏水定容到1L，贮于棕色瓶中，常温下可保存一个月。 方法： 1、标准曲线的绘制 取6支具塞试管，按表加入试剂。混合均匀后，向各管中加入5ml考马斯亮蓝 G-250溶液，摇匀，并放置5min左右，在595nm下比色测定吸光度。以蛋白质浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。 管号 1 2 3 4 5 6 标准蛋白质（ml） 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 蒸馏水量（ml） 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0 蛋白质含量（μg） 0 20 40 60 80 100 2、样品测定 （1）样品提取：取鲜样0.5g，加入2ml蒸馏水研磨，磨成匀浆后用6ml蒸馏水冲洗研钵，洗涤液收集在同一离心管中，在4000r/min下离心10min，弃去沉淀，上清液转入容量瓶，以蒸馏水定容至10ml，摇匀后待测。 （2）吸取样品提取液0.1ml，放入具塞试管中（每个样品重复2次），加入5ml 考马斯亮蓝G-250溶液，充分混合，放置2min后在595nm下比色，测定吸光度，并通过标准曲线查得蛋白质含量。 （3）结果计算（单位mg/g）样品中蛋白质含量=（C·VT）/(1000 VS·WF) 式中：C—查的标准曲线值（μg）

考马斯亮蓝法测蛋白质含量(原理

考马斯亮蓝法测蛋白质含量 一、原理 考马斯亮蓝G-250（Coomassie G-250）是一种甲基取代的三苯基甲烷，分子中磺酸基的蓝色染料，在465nm处有最大吸收值。考马斯亮蓝G-250能与蛋白质通过范得华相互作用形成蛋白质—考马斯亮蓝复合物蓝色溶液，引起该染料的最大吸收λmax的位置发生红移，在595nm处有最大吸收值。由于蛋白质—考马斯亮蓝复合物在595nm处的光吸收远高于考马斯亮蓝在465nm处的光吸收，因此，可大大地提高蛋白质的测定灵敏度。蛋白质—考马斯亮蓝复合物溶液颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。利用溶液颜色的差异进行比色测定，适合于蛋白质类的定量分析，尤其适合于稀有蛋白质的微量分析。考马斯亮蓝G-250试剂呈色反应颜色稳定、灵敏度高，最低测试蛋白质量在1ug左右。 二、操作步骤 1. 标准曲线测定法 分别取六只试管，其中一只加入 1.0ml蒸馏水做空白，5只分别加入不同体积的浓度为100ug/ml牛血清清蛋白标准液，补充水到1.0ml。然后每只试管加入5.0ml考马斯亮蓝G-250试剂，摇匀放置5min，在紫外-可见分光光度计595nm处测定吸光值。以A595吸光值为纵坐标，牛血清清蛋白的ug数量为横坐标绘制标准曲线。具体操作见下表。 蛋白质标准曲线测定加样 试剂空白1 2 3 4 5 100ug/ml牛血清清蛋白/ml 1.0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 牛血清清蛋白/ug 0 10 20 40 60 80 去离子水/ml 0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 考马斯亮蓝G-250试剂/ml 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 吸光值A595 2. 蛋白样品 配制浓度约100ug/ml的待测蛋白质溶液。取一只试管加入1.0ml蒸馏水做空白，一支加入0.5ml待测蛋白质溶液，补充水到1.0ml。然后每支试管加入5.0ml考马斯亮蓝G-250试剂，摇匀放置5min后，在紫外-可见分光光度计595nm处测定吸光值。用测得的吸光值从标准曲线上查得相当于牛血清清蛋白的ug数量，计算出待测蛋白质的含量。 在标准蛋白质和蛋白质样品的测定时，为了减小误差，每一个浓度的蛋白质做3支平行管。 3.试剂配置 a.牛血清清蛋白标准液结晶牛血清清蛋白或酪蛋白，预先经微量凯氏定氮法标定该蛋白质的百分含量或者根据牛血清清蛋白的消光系数是6.6来计算其百分含量。然后根据该蛋白的纯度配置成浓度为100 ug/ml的蛋白溶液。 b.考马斯亮蓝G-250溶于50ml95%乙醇，加入100ml质量浓度为0.85g/ml的磷酸，作为母液保存，使用时用水稀释到1000ml。试剂的最终浓度为0.01%考马斯亮蓝G-250、质量浓度为0.085g/ml磷酸。

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如何使用OCR 下面教你如何使用OCR: OCR是英文Optical Character Recognition的缩写，翻译成中文就是通过光学技术对文字进行识别的意思, 是自动识别技术研究和应用领域中的一个重要方面。它是一种能够将文字自动识别录入到电脑中的软件技术，是与扫描仪配套的主要软件，属于非键盘输入范畴，需要图像输入设备主要是扫描仪相配合。现在OCR主要是指文字识别软件，在1996年清华紫光开始搭配中文识别软件之前，市场上的扫描仪和OCR软件一直是分开销售的，专业的OCR 软件谠缧┦焙蚵舻帽壬 枰腔挂 蟆K孀派 枰欠直媛实奶嵘 琌CR软件也在不断升级，扫描仪厂商现在已把专业的OCR软件搭配自己生产的扫描仪出售。OCR技术的迅速发展与扫描仪的广泛使用是密不可分的，近两年随着扫描仪逐渐普及和OCR技术的日臻完善，OCR 己成为绝大多数扫描仪用户的得力助手 二、OCR的基本原理 简单地说，OCR的基本原理就是通过扫描仪将一份文稿的图像输入给计算机，然后由计算机取出每个文字的图像，并将其转换成汉字的编码。其具体工作过程是，扫描仪将汉字文稿通过电荷耦合器件CCD将文稿的光信号转换为电信号，经过模拟／数字转换器转化为数字信号传输给计算机。计算机接受的是文稿的数字图像，其图像上的汉字可能是印刷汉字，也可能是手写汉字，然后对这些图像中的汉字进行识别。对于印刷体字符，首先采用光学的方式将文档资料转换成原始黑白点阵的图像文件，再通过识别软件将图像中的文字转换成文本格式，以便文字处理软件的进一步加工。其中文字识别是OCR的重要技术。 1．OCR识别的两种方式 与其它信息数据一样，在计算机中所有扫描仪捕捉到的图文信息都是用0、1这两个数字来记录和进行识别的，所有信息都只是以0、1保存的一串串点或样本点。OCR识别程序识别页面上的字符信息，主要通过单元模式匹配法和特征提取法两种方式进行字符识别。 单元模式匹配识别法(Pattern Matching)是将每一个字符与保存有标准字体和字号位图的文件进行不严格的比较。如果应用程序中有一个已保存字符的大数据库，则应用程序会选取合适的字符进行正确的匹配。软件必须使用一些处理技术，找出最相似的匹配，通常是不断试验同一个字符的不同版本来比较。有些软件可以扫描一页文本，并鉴别出定义新字体的每一个字符。有些软件则使用自己的识别技术，尽其所能鉴别页面上的字符，然后将不可识别的字符进行人工选择或直接录入。 特征提取识别法(Feature Extraction)是将每个字符分解为很多个不同的字符特征，包括斜线、水平线和曲线等。然后，又将这些特征与理解(识别)的字符进行匹配。举个简单的例子，应用程序识别到两条水平横线，它就会“认为”该字符可能是“二”。特征提取法的优点是可以识别多种字体，例如中文书法体就是采用特征提取法实现字符识别的。 多数OCR应用软件都加入了语法智能检查功能，这种功能进一步提高了识别率。它主要通过上下文检查法实现拼写和语法的纠正，在文字识别时，OCR应用程序会做多次的上下文衔接性检查，根据程序中已经存在的词组、固定的用词顺序，对应的检查字符串的用词字。比较高级的应用软件会自动用它“认为”正确的词语替换错误词语，纠正语句意思。 2．文字识别的几个步骤 文字识别包括以下几个步骤：图文输入、预处理、单字识别和后处理等。 （1）图文输入 是指通过输入设备将文档输入到计算机中，也就是实现原稿的数字化。现在用得比较普遍的设备是扫描仪。文档图像的扫描质量是OCR软件正确识别的前提条件。恰当地选择扫描分辨率及相关参数，是保证文字清楚、特征不丢失的关键。此外，文档尽可能地放置端正，以

考马斯亮蓝法测定蛋白

考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 蛋白质浓度测定的方法有很多，考马斯亮蓝测定蛋白质是实验室最常见的 一种方式，它利用比色法和色素法混合方法、操作简便，下文介绍了考马斯亮 蓝测定蛋白质浓度的原理、优缺点、操作以及注意事项。 实验原理 考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)法测定蛋白质浓度，是利用蛋白质― 染料结合的原理，定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。这种蛋白质 测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。这一方 法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。 考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收 峰(lmax)的位置，由465nm变为 595nm，溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。通 过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。研究发现，染料主 要是与蛋白质中的碱性氨基酸(特别是精氨酸)和芳香族氨基酸残基相结合。 考马斯亮蓝染色法的突出优点是： (1)灵敏度高，据估计比Lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质-染料复合物有更高 的消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。 (2)测定快速、简便，只需加一种试剂。完成一个样品的测定，只需要5分 钟左右。由于染料与蛋白质结合的过程，大约只要2分钟即可完成，其颜色可 以在1小时内保持稳定，且在5分钟至20分钟之间，颜色的稳定性最好。因而 完全不用像Lowry法那样费时和严格地控制时间。 (3)干扰物质少。如干扰Lowry法的K+、Na+、Mg2+离子、Tris缓冲液、 糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法。 此法的缺点是： (1)由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，因此考马斯亮 蓝染色法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作标准曲线时通常选用g—球蛋白为标准蛋白质，以减少这方面的偏差。 (2)仍有一些物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污剂、 Triton X-100、十二烷基硫酸钠(SDS)等。 试剂与器材 一、试剂

ocr工作原理

ocr工作原理 汉王ocr工作原理 所谓OCR （Optical Character Recognition光学字符识别）技术，是指电子设备（例如扫描仪或数码相机）检查纸上打印的字符，通过检测暗、亮的模式确定其形状，然后用字符识别方法将形状翻译成计算机文字的过程；即，对文本资料进行扫描，然后对图像文件进行分析处理，获取文字及版面信息的过程。 由于OCR是一门与识别率拔河的技术，因此如何除错或利用辅助信息提高识别正确率，是OCR最重要的课题，ICR（Intelligent Character Recognition）的名词也因此而产生。而根据文字资料存在的媒体介质不同，及取得这些资料的方式不同，就衍生出各式各样、各种不同的应用。 一、OCR的发展 要谈OCR的发展，早在 60、70年代，世界各国就开始有OCR的研究，而研究的初期，多以文字的识别方法研究为主，且识别的文字仅为0至9的数字。以同样拥有方块文字的日本为例，1960年左右开始研究OCR的基本识别理论，初期以数字为对象，直至1965至1970年之间开始有一些简单的产品，如印刷文字的邮政编码识别系统，识别邮件上的邮政编码，帮助邮局作区域分信的作业；也因此至今邮政编码一直是各国所倡导的地址书写方式。 OCR可以说是一种不确定的技术研究，正确率就像是一个无穷趋近函数，知道其趋近值，却只能靠近而无法达到，永远在与100%作拉锯战。因为其牵扯的因素太多了，书写者的习惯或文件印刷品质、扫描仪的扫描品质、识别的方法、学习及测试的样本……等等，多少都会影响其正确率，也因此，OCR的产品除了需有一个强有力的识别核心外，产品的操作使用方便性、所提供的除错功能及方法，亦是决定产品好坏的重要因素。 一个OCR识别系统，其目的很简单，只是要把影像作一个转换，使影像内的图形继续保存、有表格则表格内资料及影像内的文字，一律变成计算机文

考马斯亮蓝法(Bradford法)

考马斯亮蓝法（Bradford法）测定蛋白质浓度 一、实验原理 双缩脲法（biuret法）和folin—酚试剂法（lowry法）的明显缺点和许多限制，促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。 1976年由bradford建立的考马斯亮兰法（bradford法），是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。 考马斯亮兰g-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置（lmax），由465nm变为595nm，溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。经研究认为，染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合。在595nm下测定的吸光度值A595，与蛋白质浓度成正比。 bradford法的突出优点是： 1. 灵敏度高，据估计比lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质－染料复合物有更高的消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比lowry法要大的多。 2. 测定快速、简便，只需加一种试剂。完成一个样品的测定，只需要5分钟左右。由于染料与蛋白质结合的过程，大约只要2分钟即可完成，其颜色可以在1小时内保持稳定，且在5分钟至20分钟之间，颜色的稳定性最好。因而完全不用像lowry法那样费时和严格地控制时间。 3. 干扰物质少。如干扰lowry法的K+、Na+、Mg2+离子、tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、edta等均不干扰此测定法 此法的缺点是： 1. 由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，因此bradford法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作标准曲线时通常选用g—球蛋白为标准蛋白质，以减少这方面的偏差。 2. 仍有一些物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污 剂、triton x-100、十二烷基硫酸钠（sds）和0.1n的naoh。（如同0.1n的酸干扰lowary法一样）。 3. 标准曲线也有轻微的非线性，因而不能用beer 定律进行计算，而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度。 1、试剂： （1）考马斯亮蓝试剂： 考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85% H3PO4，用蒸馏水稀释至1000ml, 滤纸过滤。最终试剂中含0.01%（W/V）考马斯亮蓝G—250, 4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H3PO4。 （2）标准蛋白质溶液： 纯的牛血清血蛋白，根据其纯度配制成100 ug/ml蛋白溶液 2. 器材： （1）可见光分光光度计（2）旋涡混合器 3、标准曲线的制作 试管编号0 1 2 3 4 5 6

扫描仪的工作原理、性能及应用

扫描仪的工作原理、性能及应用 扫描仪是除键盘和鼠标之外被广泛应用于计算机的输入设备。你可以利用扫描仪输入照片建立自己的电子影集；输入各种图片建立自己的网站；扫描手写信函再用E-mail发送出去以代替传真机；还可以利用扫描仪配合OCR 软件输入报纸或书籍的内容，免除键盘输入汉字的辛苦。所有这些为我们展示了扫描仪不凡功能，它使我们在办公、学习和娱乐等各个方面提高效率并增进乐趣。 在选购扫描仪时，我们常常遇到许多难懂的专业技术名词，如光学分辨率（光学解析度）、最大分辨率（最大解析度）、色彩分辨率（色彩深度）、扫描模式、接口方式（连接界面）等等。 在使用扫描仪当中，又会遇到到扫描速度慢，占用硬盘空间多，以及一些不知所云的设置等诸多困扰。然而说明书提供给我们的操作指导并不能让所有的人成为应用专家，即使照着说明书去进行某些设置，也不知道为什么要这样做，这无疑给我们用好用巧机器带来了障碍。 本文针对这些问题，从扫描仪的基本结构入手，阐述它的工作原理，使我们对每一项设置或操作都道原因，在应用水平上有一个提高。 一、扫描仪的工作原理 扫描仪是图像信号输入设备。它对原稿进行光学扫描，然后将光学图像传送到光电转换器中变为模拟电信号，又将模拟电信号变换成为数字电信号，最后通过计算机接口送至计算机中。 扫描仪扫描图像的步骤是:首先将欲扫描的原稿正面朝下铺在扫描仪的

玻璃板上，原稿可以是文字稿件或者图纸照片；然后启动扫描仪驱动程序后，安装在扫描仪内部的可移动光源开始扫描原稿。为了均匀照亮稿件，扫描仪光源为长条形，并沿y方向扫过整个原稿；照射到原稿上的光线经反射后穿过一个很窄的缝隙，形成沿x方向的光带，又经过一组反光镜，由光学透镜聚焦并进入分光镜，经过棱镜和红绿蓝三色滤色镜得到的RGB三条彩色光带分别照到各自的CCD上，CCD将RGB光带转变为模拟电子信号，此信号又被A/D变换器转变为数字电子信号。 至此，反映原稿图像的光信号转变为计算机能够接受的二进制数字电子信号，最后通过串行或者并行等接口送至计算机。扫描仪每扫一行就得到原稿x方向一行的图像信息，随着沿y方向的移动，在计算机内部逐步形成原稿的全图。 在扫描仪获取图像的过程中，有两个元件起到关键作用。一个是CCD，它将光信号转换成为电信号；另一个是A/D变换器，它将模拟电信号变为数字电信号。这两个元件的性能直接影响扫描仪的整体性能指标，同时也关系到我们选购和使用扫描仪时如何正确理解和处理某些参数及设置。 1.什么是CCD？ CCD是Charge Couple Device的缩写，称为电荷耦合器件，它是利用微电子技术制成的表面光电器件，可以实现光电转换功能。 CCD在摄像机、数码相机和扫描仪中应用广泛，只不过摄像机中使用的是点阵CCD，即包括x、y两个方向用于摄取平面图像，而扫描仪中使用的是线性CCD，它只有x一个方向，y方向扫描由扫描仪的机械装置来完成。 CCD芯片上有许多光敏单元，它们可以将不同的光线转换成不同的电荷，

发票ocr识别

发票ocr识别 早已经步入信息化时代的我们，享受着方便快捷生活的同时，也在不断地创造新的技术，工业4.0不断地升温。就连办公也要无纸化，假如你是一名会计，每天要在系统里录入很多的发票，你觉得你会崩溃吗，所以无纸化办公，使用发票ocr识别就相当重要了。 发票ocr识别的工作原理 发票ocr识别是利用ocr文字识别技术，对所选取的文字进行字符切割，与现有的字符库进行比对，比对成功率较高的就将该文字识别出来。发票ocr识别，就是在程序中设置了要识别的文字字段，只要字迹清楚，人眼可鉴，一般识别率就不会低。发票ocr识别系统，是一种票据表单自动录入系统，在系统后台设置好要识别的字段，或者选择要识别的票据表单，就已经完成了大部分的工作。 发票ocr识别使用背景 发票ocr识别是怎么样走进人们的工作中的？我们以银行票据为例来说明:银行票据是银行在处理财务过程当中产生那个的一种票据行为，该票据做为结算的凭证及流通说明，内容比较复杂，所以需要识别的种类也比较多，但是我国的发票ocr识别管理程度还不是很高，银行在处理发票过程中，工作效率差，存在以下现状： 1.票据手工建档、人工查询，劳动强度大、容易出错，效率和服务质量低； 2.票据缺乏备份，如遇水灾、火灾或虫鼠叮咬造成难以挽回的损失； 3.票据不能进行现代化的网络电子传输，满足不了日益快节奏的金融需求； 4.人工进行支票的真伪判断，存在人为的误判和干预等； 看国外金融部门，早已经将发票ocr识别的研究提上日程，致力于研究发票ocr识别多年，已经取得了初步的成效。美国、加拿大、意大利、法国等在上世纪八十年代末就开始进行这方面的研究，有些公司从事票据图像的处理，如美国AcuForm、法国A2iA支票自动处理系统等，主要应用于银行及企业的各种票据ocr处理业务流程，包括储蓄业务、会计业务、印鉴识别等；而我国的发票ocr研究始于1988年，清华大学学子在期间

考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度的具体方法及步骤

考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度的具体方法及步骤 蛋白质浓度测定的方法有很多，考马斯亮蓝测定蛋白质是实验室最常见的一种方式，它利用比色法和色素法混合方法、操作简便，下文介绍了考马斯亮蓝测定蛋白质浓度的原理、优缺点、操作以及注意事项。 实验原理 考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)法测定蛋白质浓度，是利用蛋白质―染料结合的原理，定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。 考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰(lmax)的位置，由465 nm变为595 nm，溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。通过测定595 nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。研究发现，染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸(特别是精氨酸)和芳香族氨基酸残基相结合。考马斯亮蓝染色法的突出优点是： (1)灵敏度高，据估计比Lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1 mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质-染料复合物有更高的消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。 (2)测定快速、简便，只需加一种试剂。完成一个样品的测定，只需要5分钟左右。由于染料与蛋白质结合的过程，大约只要2分钟即可完成，其颜色可以在

1小时内保持稳定，且在5分钟至20分钟之间，颜色的稳定性最好。因而完全不用像Lowry法那样费时和严格地控制时间。 (3)干扰物质少。如干扰Lowry法的K+、Na+、Mg2+离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法。 此法的缺点是： (1)由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，因此考马斯亮蓝染色法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作标准曲线时通常选用g—球蛋白为标准蛋白质，以减少这方面的偏差。 (2)仍有一些物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污剂、Triton X-100、十二烷基硫酸钠(SDS)等。 试剂与器材 一、试剂 考马斯亮蓝试剂： 考马斯亮蓝G―250 100 mg溶于50 mL 95%乙醇中，加入100 mL 85%磷酸，用蒸馏水稀释至1000 mL。 二、标准和待测蛋白质溶液 1. 标准蛋白质溶液

实验考马斯亮蓝法测定蛋白质含量

实验考马斯亮蓝法测定 蛋白质含量 集团文件发布号：（9816-UATWW-MWUB-WUNN-INNUL-DQQTY-

实验五考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 一、实验目的 1.掌握考马斯亮蓝染色法定量测定蛋白质含量的原理与方法 2.熟练分光光度计的使用和操作方法。 二、实验原理 考马斯亮蓝G250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种，它与蛋白质的疏水微区相结合，这种结合具有高敏感性。它在酸性溶液中呈棕红色，最大光吸收峰在465nm，当它与蛋白质结合形成复合物时，其最大吸收峰改变为595nm。考马斯亮蓝G-250—蛋白质复合物呈蓝色，在一定范围内，595nm下光密度与蛋白质含量呈线性关系，故可以用于蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝结合法是近年来发展起来的蛋白质定量测定法，本方法具有操作方便、快速、干扰因素少的特点。 离心机的使用说明： 1.要离心的离心管和管套要称重，重量不等时将水加在管套里。 2．离心管的放置是对角线放置，要求必须对称。 3. 先将离心机转速旋钮恢复到零刻度后，再定时间，定好时间后缓慢旋转转速旋钮，使离心机均匀的提速到预定转速。 分光光度计的使用说明： 1.接通电源开关，预热20min后，再选择须用的单色光波长。 2.放入已加入溶液的比色皿，盖上样品室盖，推动试样架拉手，使对照比色皿（溶液装入4／5高度，置第一格）置于光路上，调节100％透射比按钮，使吸光度值A=0.00。 3.推动试样架拉手，使样品比色皿置于光路上，读出吸光度值。 4.测量完毕，取出比

色皿，洗净后置于乙醇溶液中浸泡脱色。 5.电源开关置于“关”，拔下电源插头。 三、试剂与器材： 1.试剂： （1）0.9％NaCl：9g NaCl溶解在1L的容量瓶中。 （2）标准蛋白质：称取50mg结晶牛血清蛋白定溶于50ml容量瓶里。（3）染液：考马斯亮蓝G-250 0.5g，溶于250mL95%乙醇，再加入 500mL85％(W／V)磷酸，保存于棕色瓶中，称为母液。取150 mL然后加蒸馏水定容到1000mL，保存于棕色瓶中，备用。 2.器材： 试管；吸管10mL、l5mL、lmL、0.1mL；722分光光度计 四、操作方法 1.标准曲线的制备 取6支试管，按下表加入各：

ETC工作原理及技术

E T C工作原理及技术 Company Document number：WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998

摘要：电子不停车收费技术是一种先进的电子收费技术方式，文章介绍 了电子不停车收费技术的研究及发展应用情况，并针对实际实施中遇到的问题， 提出了具体的研究内容及实施方案，为电子不停车技术的应用提供 依据。 关键词：；ETC；电子；停车收费；发展应用；标准 1、介绍 ETC技术在80年代开始兴起，90年代在世界各地使用，受到各国政府和企业的广泛重视，世界许多着名公司，如Amtech、TI、Boash、Hitachi、Toyota等均竞相研制。因此ETC技术发展很快 1. 系统概念 电子不停车收费系统（Electronic Toll Collection,简称ETC）是国际上正在努力开发并推广普及的一种用于道路、大桥和隧道的电子收费系统,它的最大特点是不停车收费,即车辆可以以相当高的速度通过收费口,无须在收费站前减速和停车交费。采用不停车收费系统,可以使公路收费走向无纸化、无现金化管理,可以从根本上杜绝收费票款的流失现象,解决公路收费中的财务管理混乱问题。另外,实施不停车收费系统还可以节约基建费用和管理费用。 ETC系统是ITS领域中的一个重要方面。由于它涉及交通基础设施投资的回收，又是缓解收费站交通堵塞“瓶颈”的有效手段，减少了环境污染，所以各国都把不停车收费系统作为ITS领域最先投入应用的系统来开发。我国交通部门已经把不停车收费系统的开发和应用列为我国ITS领域首先启动的项目，并在“十五”期间列入交通科技的技术创新重点之一。

考马斯亮蓝法Bradford法

. 法）测定蛋白质浓度法（Bradford考马斯亮蓝一、实验原理的明显缺点和许多限制，和biuret法）folin—酚试剂法（lowry法）双缩脲法（促使科学家们 去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。，是根据蛋白质与染料1976年由bradford 建立的考马斯亮兰法（bradford法）因相结合的原理设计的。这种蛋白质测定 法具有超过其他几种方法的突出优点，而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。使染料的最大吸收峰的位考马斯亮兰g-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，，溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。经研究认lmax），由465nm变为595nm置（和芳香族氨基酸残基染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）为， A595，与蛋白质浓度成正比。相结合。在595nm下测定的吸光度值法的突出优点是： bradford。这1mg灵敏度高，据估计比lowry 法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1. 蛋白质－染料复合物有更高的是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比lowry法要大的多。分钟左52. 测定快速、简便，只需加一种试剂。完成一个样品的测定，只需要1右。由于染料与蛋白质结合的过程，大约只要2分钟即可完成，其颜色可以在分钟之间，颜色的稳定性最好。因而完全不5分钟至20小时内保持稳定，且在 lowry法那样费时和严格地控制时间。用像缓冲液、糖和蔗离子、tris干扰物质少。如干扰3. lowry法的K+、Na+、Mg2+ edta等均不干扰此测定法糖、甘油、巯基乙醇、此法的缺点是： 法bradford1. 由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，因此—球蛋白g用于不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作标准曲线时通常选用 为标准蛋白质，以减少这方面的偏差。仍有一些物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污2. 的）和0.1n的naoh。（如同0.1ntriton 剂、 x-100、十二烷基硫酸钠（sdsbeerlowary法一样）。3. 标准曲线也有轻微的非线性，因而不能用酸干 扰定律进行计算，而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度。 1、试剂： 试剂：（1）考马斯亮蓝，用乙醇，加入250 100mg100ml 85% H3PO4溶于50ml 95%G —蒸馏水考马斯亮蓝4.7%250, W/V）考马斯G—过滤。稀释至1000ml, 最终试剂中含0.01%（亮蓝滤纸）H3PO4。（（W/V）乙醇，8.5%W/V （2）标准蛋白质溶液：蛋白溶液 100 ug/ml纯的牛血清血蛋白，根据其纯度 配制成 2. 器材： （1）（2）旋涡混合器可见光分光光度计 3、的制作标准曲线试管编号 0 1 2 3 4 5 6 1 / 2 . 0.60.40.50.10.20.30100ug/m标准蛋白m）0.4 0.5 0.8 0.7 0.6 0.9 蒸馏水 1 5

考马斯亮蓝法测定(实验报告)

考马斯亮蓝法测定苹果组织微量可溶性蛋白含量 摘要 本实验以苹果果肉为研究对象，采取考马斯亮蓝比色法测定蛋白质的吸光度值，通过对果实可溶性蛋白提取缓冲液、缓冲液浓度、pH值、外源添加物对果肉可溶性蛋白提取效率的影响的研究，优化苹果果实可溶性蛋白含量测定方法，以期优化果实可溶性蛋白测定条件，为客观反映果实可溶性蛋白水平提供一种可行的方法。结果表明：外源添加PVP和EDTA以是苹果可溶性蛋白提取率的主要影响因素。实验最终确定的提取条件为0.1mol/L pH9.0 Tris-HCl提取缓冲液(内含1mmol/L EDTA和1% PVP)。 前言 果蔬可溶性蛋白质含量(soluble protein content)是一个重要的生理生化指标，也是果蔬品质和营养的重要评价指标之一。许多可溶性蛋白是构成果蔬中酶的重要组成部分，参与果蔬多种生理生化代谢过程的调控，与果蔬的生长发育、成熟衰老，抗病性、抗逆性密切相关。以比活力(unit/mg protein)表示酶活力大小及酶制剂纯度时，可溶性蛋白的测定也是必不可少的。 1实验部分 1.1实验原理 比活力(unit/mg protein)表示酶活力大小及酶制剂纯度，同时采用考马斯亮蓝法测定蛋白质相结合，得到标准曲线。 考马斯亮蓝G-250在酸性游离状态下呈棕红色，最大光吸收在465nm，当它与蛋白质结合后变为蓝色，最大光吸收在595nm。在一定的蛋白质浓度范围内，蛋白质-染料复合物在波长为595nm处的光吸收与蛋白质含量成正比，通过测定

595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。该方法标本用量少、灵敏度高、重复性好，是一种较为理想的方法[7]。但该方法线性范围窄，需要选择适宜的提取缓冲液及缓冲液浓度、pH值、料液比和外源添加物等，以使测定方法有较高的灵敏度，测定值与真值相近。 1.2实验准备 1.2.1实验材料 新鲜苹果、牛血清白蛋白、考马斯亮蓝G-250、乙醇、85%磷酸、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、HCl、乙二胺四乙酸（EDTA）、聚乙烯比咯烷酮(PVP)、NaCl、MgCl2 、抗坏血酸、半胱氨酸、β-巯基乙醇。 1.2.2仪器与设备 容量瓶（25mL 10个、100mL 1个、500mL 1个、棕色瓶1个、分析天平、胶头滴管、烧杯（50mL 2个）、移液管（20mL）、量筒（10mL 1个、25mL 1个）、研钵； UV-1800型紫外-可见光分光光度计日本岛津公司；旋涡混合器；PH计。 1.2.3试剂配制 1.2.3.1标准蛋白质溶液(100μg/mL牛血清白蛋白)：称取牛血清蛋白25mg，加水溶解并定容至100mL，吸取上述溶液40mL，用蒸馏水稀释至100mL； 1.2.3.2考马斯亮蓝试剂：称取50mg考马斯亮蓝G-250，溶于25mL 90%乙醇中，加入50mL 85g/100mL的磷酸，再用蒸馏水定容到500mL，摇匀，贮于棕色瓶中； 1.2.3.3提取液：pH 7.2、7.4、7.6、7.8、8.0、8.2、8.4、8.6、8.8和9.0梯度Tris-HCl 缓冲液(100mmol/L)； 1.2.3.4梯度浓度Tris-HCl缓冲液(pH 9.0)：10、30、50、80、100mmol/L；

考马斯亮蓝法

实验九蛋白质浓度的测定(四)──考马斯亮蓝染色法 目的要求 学习考马斯亮蓝（Coomassie Brilliant Blue）法测定蛋白质浓度的原理和方法。 实验原理 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度，是利用蛋白质―染料结合的原理，定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。 考马斯亮蓝G―250存在着两种不同的颜色形式，红色和蓝色。它和蛋白质通过范德华力结合，在一定蛋白质浓度范围内，蛋白质和染料结合符合比尔定律（Beer’s law）。此染料与蛋白质结合后颜色有红色形式和蓝色形式，最大光吸收由465nm变成595nm，通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。 蛋白质和染料结合是一个很快的过程，约2min即可反应完全，呈现最大光吸收，并可稳定1h，之后，蛋白质―染料复合物发生聚合并沉淀出来。蛋白质―染料复合物具有很高的消光系数，使得在测定蛋白质浓度时灵敏度很高，在测定溶液中含蛋白质5μL/ml时就有0.275光吸收值的变化，比Lowry法灵敏4倍，测定范围为10－100μg蛋白质，微量测定法测定范围是1－10μg蛋白质。此反应重复性好，精确度高，线性关系好。标准曲线在蛋白质浓度较大时稍有弯曲，这是由于染料本身的两种颜色形式光谱有重叠，试剂背景值随更多染料与蛋白质结合而不断降低，但直线弯曲程度很轻，不影响测定。 此方法干扰物少，研究表明：NaCl，KCl，MgCl2，乙醇，（NH4）2SO4无干扰。强碱缓冲液在测定中有一些颜色干扰，这可以用适当的缓冲液对照扣除其影响。Tris，乙酸，2―巯基乙醇，蔗糖，甘油，EDTA及微量的去污剂如Triton X―100，SDS，玻璃去污剂有少量颜色干扰，用适当的缓冲液对照很容易除掉。但是，大量去污剂的存在对颜色影响太大而不易消除。 试剂与器材 一、试剂 考马斯亮蓝试剂： 考马斯亮蓝G―250 100mg溶于50ml95%乙醇中，加入100ml85%磷酸，用蒸馏水稀释至1000ml，滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G―250，4.7%(W/V)乙醇。 二、标准和待测蛋白质溶液 1．标准蛋白质溶液 结晶牛血清蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯度用0.15mol/LNaCl 配制成1mg/ml，0.1mg/ml蛋白溶液。 2．未知蛋白质溶液。 三、器材 试管及试管架，移液管（0.1ml及5ml），UV－2000型分光光度计。 操作方法 一、标准法制定标准曲线 取14支试管，分两组按下表a平行操作。 绘制标准曲线：以A595nm为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标，在坐标纸上绘制标准曲线。